The aim of the present study was to evaluate the stability of the active principal ingredient of carvedilol, and the release of the drug in vitro, through studies of dissolution. In the stability study were used hydrolytic conditions of stress (in the acid, neutral and basic), oxidative (with hydrogen peroxide) and photolytic (under ultraviolet light). Later, assessed to the kinetics of degradation under different conditions by the liquid chromatography (LC) method. The liquid chromatography coupled with mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed and validated to indicate the molecular mass of formed compounds. The sample tablets containing carvedilol were subjected to accelerated study of stability under conditions of controlled temperature and relative humidity (40 °C ± 2 °C e 75% ± 5 %, respectively) for six months and then evaluated by LC-MS/MS and ultraviolet spectrophotometry methods. In order to assess the in vitro release of the drug, the conditions to be used in the dissolution test were tested during development and then optimized during validation. Physico-chemical tests such as identification, weight variation, hardness, friability, assay, content uniformity, time of disintegration and dissolution were evaluated to check the possible replacement between samples of tablets containing carvedilol available on the market. / O presente trabalho buscou avaliar a estabilidade da matéria-prima de carvedilol, bem como a liberação do fármaco in vitro, através de estudos de dissolução. No estudo de estabilidade foram utilizadas condições de estresse hidrolítico (em meio ácido, básico e neutro), oxidativo (com peróxido de hidrogênio) e fotolítico (sob luz ultravioleta), as quais foram avaliadas por cromatografia líquida (CL). Posteriormente, avaliou-se a cinética de degradação sob condições básica e oxidativa, onde se verificou maior degradação. O método por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (CL-EM/EM) foi desenvolvido e validado. As amostras de comprimidos contendo carvedilol foram submetidas a estudo de estabilidade acelerada sob condições controladas de temperatura e umidade relativa (40 °C ± 2 °C e 75% ± 5%, respectivamente) por seis meses e posteriormente avaliadas por CL-EM/EM e por espectrofotometria no ultravioleta (UV). Na avaliação da liberação do fármaco in vitro, as condições a serem utilizadas no teste de dissolução foram testadas durante o desenvolvimento e posteriormente otimizadas durante a validação. Testes físico-químicos como identificação, peso médio, dureza, friabilidade, doseamento, uniformidade de conteúdo, tempo de desintegração e dissolução foram avaliados para verificar a intercambialidade farmacêutica entre amostras de comprimidos contendo carvedilol disponíveis no mercado.

The fungal infections are becoming an important cause of morbidity and mortality in immunocompromised patients. Here we have studied the activity of new antifungal agents as ravuconazole, albaconazole, micafungin as well as fluconazole tpathogenic yeasts as Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida tropicalis, Candida lusitaniae, Candida glabrata and Candida krusei. We have also included clinical and environmental isolates of Cryptococcus neoformans. The susceptibilities tests indicated that the majority of the strains were sensible to the antifungal agents studied but Candida albicans (6.6%) and C.tropicalis (3.3%) were classified as resistant to fluconazole. These results show the importance of monitoring of the susceptibility in yeast like fungi from clinical source and emphasize that new and constant susceptibility studies deserve be applied to Candida and Cryptococcus neoformans to reduce the mortality among immunocompromised patients. / As infecções fúngicas têm-se tornado uma importante causa de morbidade e mortalidade em pacientes, principalmente os imunocomprometidos. Na tentativa de se transpor esta realidade, têm-se buscado estabelecer e avaliar novas drogas antifúngicas eficazes e com melhor tolerabilidade e segurança. O presente estudo foi objetivado a verificar a atividade dos triazólicos fluconazol, ravuconazol e albaconazol e da micafungina, frente a um banco de fungos leveduriformes incluindo as espécies C.albicans, C. dubliniensis, C. tropicalis, C. lusitaniae, C. glabrata e C. krusei, todas de origem clínica e Cryptococcus neoformans de origens clínica e ambiental. De modo geral, as espécies de Candida spp. e Cryptococcus foram sensíveis aos antifúngicos testados, com exceção da Candida albicans e Candida tropicalis frente ao fluconazol, onde 6,6% e 3,3%, respectivamente dos isolados, foram resistentes a este azólico. Estes resultados demonstram a necessidade de uma constante vigilância da suscetibilidade dos fungos e maiores pesquisas em relação às drogas antifúngicas, pois, desta forma, estaremos contribuindo para a menor morbidade e maior sobrevida dos pacientes.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Widespread and prolonged usage of azoles in recent years has led to the rapid development of drug resistance in Candida species. In Candida albicans, resistance to fluconazole causes cross-resistance to other antifungals and an increase in virulence, making treatment still more difficult because of the limited therapeutical options. Nonetheless, other species has emerged as significant pathogens of clinical importance. Fluconazole resistance has been clinically described in Candida dubliniensis isolates and it is easily induced by in vitro exposure to the drug, but little is known about its consequences. In the present study, two groups of C. dubliniensis isolates were evaluated and compared in some points with the closely related species, C. albicans. One group was composed by fluconazole-susceptible clinical isolates and the other was composed by fluconazole-resistant laboratory derivatives from the former, in order to examine the changes on phenotypic characteristics and antifungal susceptibility accompanying the development of resistance to fluconazole. Resistant derivatives showed minimal inhibitory concentrations equal or higher than 64 μg/mL and proved to keep most of phenotypic characteristics that were tested before resistance was induced. However, some strains were not found to produce pseudomycelia and chlamydospores. Against killer toxins, C. dubliniensis did not present biotypes enough to permit its differentiation from C. albicans. On the other hand, when proteinase activity was evaluated, C. albicans activity was significantly higher than C. dubliniensis . Resistant derivatives of C. dubliniensis showed proteinase activity similar to fluconazole-susceptible isolates, suggesting that fluconazole resistance may not necessarily result on an increase of virulence in this species. Partial atmosphere of CO2, fluconazole at subinhibitory concentrations, or combination of both conditions, as well as addition of antiretrovirals on induction culture medium did not influence on proteinase activity of C. albicans and C. dubliniensis isolates. Finally, fluconazole-resistant isolates showed cross-resistance with ketoconazole, itraconazole, ravuconazole and terbinafine. In addition, associations of amphotericin B or terbinafine with azoles resulted mainly on indifferent interactions. On fluconazole-susceptible isolates, the most positive interaction came from association of amphotericin B with voriconazole. When resistance was induced, the best activity was found when terbinafine was combined with itraconazole. / O uso prolongado e indiscriminado dos azólicos nos últimos anos permitiu um rápido desenvolvimento de resistência aos fármacos nas espécies de Candida. Em Candida albicans, a resistência ao fluconazol causa resistência cruzada a outros antifúngicos e aumento na virulência, tornando o tratamento ainda mais complicado por causa das opções terapêuticas limitadas. Ainda assim, outras espécies emergiram como patógenos significantes de importância clínica. A resistência ao fluconazol tem sido clinicamente descrita em isolados de Candida dubliniensis e é facilmente induzida pela exposição in vitro ao azólico, mas pouco se conhece sobre suas conseqüências. No presente estudo, dois grupos de isolados de C. dubliniensis foram avaliados e comparados em alguns aspectos com C. albicans. Um grupo era composto de isolados clínicos sensíveis ao fluconazol, e o outro, derivado do primeiro, era composto de isolados resistentes, com o intuito de analisar as alterações nas características fenotípicas e na suscetibilidade aos antifúngicos que acompanham o desenvolvimento de resistência ao fluconazol. Os derivados resistentes obtidos evidenciaram concentrações inibitórias mínimas maiores ou iguais a 64 μg/mL e mantiveram grande parte das características fenotípicas avaliadas anteriormente à indução da resistência. Entretanto, apenas o Ágar Suco de Tomate permitiu a identificação dessas estruturas em 100% dos isolados resistentes. Diante das toxinas killer , C. albicans e C. dubliniensis exibiram biotipos incapazes de permitir a diferenciação entre as espécies. Por outro lado, quando avaliada a atividade de proteinase, a de Candida albicans foi significativamente maior do que a de C. dubliniensis. Os derivados resistentes de C. dubliniensis evidenciaram atividade de proteinase semelhante a dos isolados sensíveis ao fluconazol, sugerindo que a resistência ao antifúngico pode não necessariamente acarretar aumento de virulência na espécie. Microaerofilia, fluconazol a concentrações subinibitórias, ou a combinação dessas duas condições, bem como a adição de anti-retrovirais ao meio de indução da enzima não exerceram influência sobre a atividade de proteinase em C. albicans e C. dubliniensis. C. dubliniensis resistentes ao fluconazol evidenciaram resistência cruzada com cetoconazol, itraconazol, ravuconazol e terbinafina. Em adição, as associações de anfotericina B ou terbinafina com azólicos resultaram principalmente em interações indiferentes. Em isolados sensíveis, a interação mais positiva resultou da associação de anfotericina B com voriconazol. Quando a resistência foi induzida, a melhor atividade foi encontrada quando a terbinafina foi combinada com itraconazol.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cetirizine is an antihistamine of second-generation used to relieve physical symptoms of allergic rhinitis. The benefits of possessing initial fast action, delayed effect and less cholinergic and sedative activity, comparing with other compounds of the same class are highlighted. The drug is commercially available as tablets, oral solution and compounded capsules. There are no official monographs, up to this moment, to control the quality of this drug in its pharmaceutical forms. In the present work, methods for the quantification and dissolution evaluation of the drug in tablets and capsules were developed and validated. Comparative studies among some commercially formulations and a preliminary stability study of tablets were also conducted. UV spectrophotometry, liquid chromatography, and capillary electrophoresis methods were developed and validated for quantitative determination, and showed linearity, precision and accuracy. The selected conditions for the dissolution test were 900 mL of 0.1 N HCl as medium, using paddles for tablets and basket for capsules, with rotation speed of 50 rpm. The comparative study presented that some products showed quality deviations. Moreover, we observed that important characteristics for solid oral pharmaceutical formulations were modified after three months storage at 40ºC ± 2ºC and 75% ± 5% relative humidity. / A cetirizina é um anti-histamínico de segunda geração utilizado no alívio dos sintomas físicos da rinite alérgica, apresentando a vantagem de possuir rápido início de ação, efeito prolongado e menor atividade colinérgica e sedativa, quando comparada com os demais compostos da mesma classe. Encontra-se comercialmente disponível na forma de comprimidos, solução oral e cápsulas manipuladas. Não existem, até o momento, monografias em códigos oficiais para controlar a qualidade desse fármaco em suas formas farmacêuticas. Neste trabalho foram desenvolvidos e validados métodos de quantificação e de avaliação da dissolução do fármaco em comprimidos e cápsulas. Estudo comparativo entre algumas formulações disponíveis comercialmente, bem como estudo preliminar da estabilidade dos comprimidos, foram também realizados. Os métodos desenvolvidos e validados para determinação quantitativa foram: espectrofotometria na região do ultravioleta, cromatografia líquida e eletroforese capilar, os quais apresentaram linearidade, precisão e exatidão. As condições selecionadas para o teste de dissolução foram 900 mL de HCl 0,1N como meio, utilizando pá para comprimidos e cesta para cápsulas, com velocidade de rotação de 50 rpm. O estudo comparativo realizado demonstrou que alguns produtos apresentaram desvios da qualidade. Verificou-se, também, que características importantes para formas farmacêuticas sólidas de uso oral foram alteradas após três meses de armazenamento a 40ºC ± 2ºC e 75% ± 5% de umidade relativa.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of the present study was to examine the role of oxytocin (OT) on the control of oocyte meiotic resumption in the events that involves progesterone (P4) and prostaglandins (PGs). Oocytes were co-cultured with follicular hemisections for 15 h to determine the effect of different doses of OT or atosiban (ATO; oxytocin receptor antagonist) on the oocyte meiotic resumption. In another experiment, we examine the effect of P4, OT and PGs interaction on the regulatory cascade of the induction of oocyte meiotic resumption. Oxytocin in the concentration of 1 μM was effective in inducing the resumption of meiosis of oocytes co-cultured with follicular cells (84.0%), not differing statistically from the positive control group (74.4%). Similarly, atosiban inhibited the positive effect of OT on meiotic resumption in a dose-dependent manner, in which the metaphase I (MI) rate was only 27.6% in the presence of 10 μM ATO, not differing from the negative control group (25.5%). The possible toxic effect of ATO was tested in a 15 or 24 h-cumulus-oocyte complex culture system. In the third experiment, we demonstrated that P4 was able to induce the oocyte meiotic resumption, which was inhibited by ATO. However, the positive effect of OT was not blocked by mifepristone (P4 antagonist) but was inhibited by indometacine (a non-selective PTGS2 inhibitor). Collectively, these results evidenced that P4 is upstream to OT and PGs are required for the positive effect of OT to induce oocyte meiotic resumption. In conclusion, our results evince that together with Ang II, already proved by our group as involved in oocyte meiotic resumption, P4, OT and PGs are sequential steps in the hormonal cascade that culminates with resumption of meiosis in cattle. / O objetivo do presente estudo foi examinar o papel da ocitocina (OT) no controle da retomada meiótica de oócitos bovinos, além da interação desse peptídeo com a progesterona (P4) e prostaglandinas (PGs) neste evento fisiológico. Nesse estudo, verificamos a interação da P4, OT e PGs na cascata de indução de retomada meiótica do oócito. Oócitos foram co-cultivados com metades foliculares por 15 h para determinar o efeito de diferentes doses de OT ou atosiban (ATO; antagonista do receptor de ocitocina) no reinício da maturação meiótica A OT na concentração de 1 μM foi eficaz em induzir a retomada da meiose de oócitos co-cultivados com células foliculares (84,0%), não diferindo estatisticamente do grupo controle positivo (74,4%). O ATO inibiu o efeito positivo da OT sobre o reinício da meiose de uma forma dose-dependente onde a porcentagem de oócitos que atingiu o estádio de metáfase I (MI), foi apenas 27,6% na presença de 10 μM de ATO, não diferindo do grupo controle negativo (25,5%). Para confirmar que este efeito não era resultante de toxicidade ocasionada pelo ATO, foi realizado um experimento onde o efeito tóxico do ATO foi testado em um cultivo durante 15 e 24 horas, e foi possível observar que ele não apresenta efeitos tóxicos aos oócitos em cultivo, permitindo a retomada da meiose. Foi demonstrado também que a P4 foi capaz de induzir a retomada da meiose do oócito bovino ao qual foi inibida pelo ATO. No entanto, o efeito positivo da OT não foi bloqueado pela mifepristona (antagonista P4), mas foi inibida por indometacina (inibidor não-seletivo de PTGS2). Coletivamente, estes resultados evidenciam que P4 requer OT e esta requer PGs para que oócitos bovinos reiniciem a meiose. Em conclusão, nossos resultados demonstram que, P4, OT e PGs são passos seqüenciais da cascata hormonal que culmina com a retomada da meiose em bovinos.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1203751 bytes, checksum: aa735a67a46b6e6bf78ec4314df6b87b (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Introduction: Garlic (Allium sativum L) has been used for thousands of years for various therapeutic purposes, including the anti-parasite activity. Aims: The aim of this work is, to analyze the possible anti-parasite effects of Allium sativum through in vitro studies by electron scanning microscopy using Schistosoma mansoni and investigates the Allium sativum L activities in patients with ascariasis, ancylostomiasis, amebiasis and giardiasis, as well to determine the profile of a coproparasitologic community in Cabedelo-PB, location of patient selection. Methodology: To perform in vitro tests, adult male worms of Schistosoma mansoni obtained from infected Swiss Webster mice were treated with Allium sativum L oil at concentrations of 0, 5, 10, 15, 20 mg /ml. Then, they were analyzed by scanning electron microscopy. For tests in vivo, studies were conducted with the selection of infected volunteers, and the PSF III of Renascer in Cabedelo, a suitable place to the project. The first step towards to the achievement consisted of educational speeches and, after signing the free consent form, were distributed fecal-test cups. The fecal examinations were performed at the Laboratory of Clinical Parasitology at the Federal University of Paraíba. In the next step we selected women with ascariasis, ancylostomiasis, giardiasis and amebiasis without anti-parasite treatment. Later, physical examinations and medical tests were performed to determine the biochemical and hematological parameters in order to select individuals able to participate in our research. After selection, the volunteer subjects were treated daily in the morning during 15 days with Allium sativum L oil capsules (Soybean Oil 247.4 mg and 2.6 mg of Allium sativum L essential oil) and were followed and monitored for ingestion. In previously scheduled dates, the feces were collected at the 8th and 16th days after the initial intake for the examinations using the methods of Hoffman, Kato-Katz and Ritchie. Results: In vitro tests, treatment with Allium sativum L oil caused damage to the integument of the worm at all concentrations. A concentration of 5 mg/mL caused wrinkling in the tegument; a concentration of 10 mg/mL resulted in changes to tubercles and loss or modification of spines. With 15 and 20 mg/mL increasing damage to the tegument could be seen, such as vesicle formation and the presence of ulcers. The profile of the coproparasitology community of Renascer III revealed the following results: Of 130 samples analyzed, 104 (80%) were female and 26 (20%) were male. There were 64 (49,2%) negative end 66 (50,8%) positive. The frequency of intestinal parasites were: A. lumbricoides 13,1%; T. trichiura 3,8%; Ancylostomidae 2,3%; S. stercoralis 0,7%; S. mansoni 0,7%; E. nana 30,8%; E. histolytica/E. dispar 13,8%; E. coli 10,0%; G. intestinalis 3,1%; I. bustchlii 1,5%. For treatment with Allium sativum L oil capsules during 15 days, was selected a sample of 23 infected patients, of whom 11 with amebiasis, 9 with ascariasis, 2 with giardiasis and with 1 ancylostomiasis. In vivo tests on the 8th day of treatment, all patients had positive results. On the 16th day, 2 patients had negative results, being parasitized by E. histolytica / E. dispar. Conclusions: Allium sativum acts on the adult worms of Schistosoma mansoni without inducing their death, but being able to promote major skin disorders. Oral administration of Allium sativum L oil capsules, showed no anti-parasite action in the experimental conditions of this study. / Introdução: O alho (Allium sativum L.) tem sido utilizado há milhares de anos para diversas finalidades terapêuticas, entre elas a atividade antiparasitária. Objetivos:Pretende-se com este trabalho, analisar os possíveis efeitos antiparasitários do Allium sativum através de estudos in vitro por microscopia eletrônica de varredura utilizando o Schistosoma mansoni e investigar as atividades do Allium sativum L. em portadores de ascaridíase, ancilostomíase, giardíase e amebíase, bem como determinar o perfil coproparasitológico de uma comunidade em Cabedelo-PB, local de seleção dos pacientes. Metodologia: Para a realização dos ensaios in vitro, vermes adultos machos de Schistosoma mansoni obtidos de camundongos Swiss Webster infectados foram tratados com óleo de Allium sativum L. nas concentrações de 0, 5, 10, 15, 20 mg/mL. Em seguida, foram analisados por microscopia eletrônica de varredura. Para os testes in vivo, os estudos foram conduzidos com a seleção de voluntários parasitados, sendo o PSF do Renascer III em Cabedelo-PB, o local apto a execução do projeto. Na primeira etapa do trabalho foram feitas palestras educativas e após a assinatura do consentimento livre e esclarecido foram distribuídos coletores de fezes. Os exames coproparasitológicos foram realizados no Laboratório de Parasitologia Clínica/CCS da Universidade Federal da Paraíba. Na etapa seguinte, selecionaram-se mulheres portadoras de ascaridíase, ancilostomíase, giardíase e amebíase sem tratamento antiparasitário. Posteriormente, realizaram-se exames físicos e exames de análises clínicas para determinação de parâmetros bioquímicos e hematológicos com a finalidade de selecionar indivíduos aptos a participar da nossa investigação. Após a seleção, as voluntárias foram submetidas ao tratamento diário, pela manhã, durante 15 dias, com as cápsulas de óleo de Allium sativum L. (Óleo de Soja -247,4mg e óleo essencial de Allium sativum L.2,6mg) e foram acompanhadas e monitoradas quanto a ingestão. Em datas previamente agendadas, as fezes foram coletadas no 8º e 16º dia após o início da ingestão das mesmas para a realização de exames pelos métodos de Hoffman, Kato-katz e Ritchie. Resultados: Nos testes in vitro, O tratamento com óleo de Allium sativum L. promoveu danos no tegumento do verme em todas as concentrações. O produto na concentração de 5 mg/mL causou formação de projeções no tegumento; na concentração de 10 mg/mL resultou em danos no tubérculos e os espinhos tornaram-se menores em tamanho além de haver redução na quantidade e nas concentrações de 15 e 20 mg/mL permitiram verificar um aumento no dano ao tubérculo com formação de úlceras, expondo a musculatura do verme. O perfil coproparasitológico da comunidade do Renascer III revelou os seguintes resultados: das 130 amostras analisadas, 104 (80%) foram do sexo feminino e 26 (20%) do sexo masculino. Houve 64 (49,2%) amostras negativas e 66 (50,8%) positivas. A freqüência dos enteroparasitas foi: A. lumbricoides 13,1%; T. trichiura 3,8%; Ancylostomidae 2,3%; S. stercoralis 0,7%; S. mansoni 0,7%; E. nana 30,8%; E. histolytica/E. dispar 13,8%; E. coli 10,0%; G. intestinalis 3,1%; I. bustchlii 1,5%. Para o tratamento com as cápsulas de óleo de Allium sativum L., durante 15 dias, foi selecionada uma amostra de 23 pacientes parasitadas, das quais, 11 com amebíase, 9 com ascaridíase, 2 com giardíase e 1 com ancilostomíase. Nos testes in vivo, no 8º dia de tratamento, todas as pacientes apresentaram exames positivos. No 16º dia, 2 pacientes apresentaram exames negativos, estando parasitadas por E. histolytica/E. dispar.Conclusões: O Allium sativum age sobre os vermes adultos de Schistosoma mansoni sem induzir a morte dos mesmos, mas sendo capaz de promover alterações tegumentares importantes. A administração das cápsulas de óleo de Allium sativum L., por via oral, não apresentou ação antiparasitária nas condições experimentais deste estudo.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4346673 bytes, checksum: fd998db4f71e5b25e2e51345d6f03360 (MD5) Previous issue date: 2011-08-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Linalool oxide (OXL) is a monoterpene, monocyclic alcohol, which has pleasant odor and can be found in essential oils of some aromatic plants. It can also be obtained from linalool by natural oxidation or synthetic processes. The lack of research on possible pharmacological activities of OXL encouraged this work that had as main objective the assessment of anxiolytic-like and antinociceptive-like activities of OXL on male Swiss mice. Initially was investigated the 50% lethal dose (LD50) of OXL in order to establish safe doses and concentrations for subsequent tests. The OXL was used in the experiments at doses of 50, 100 and 150 mg/kg, intraperitoneally (i.p.) and at concentrations of 0.65%, 1.25%, 2.5% and 5.0% by inhalation (INH). In order to investigate the profile of action of this monoterpene on central nervous system, general tests such as behavior pharmacological screening and rotarod test were performed. During the screening, analgesia was the main effect observed in animals treated with OXL i.p. or by INH route. Inhaled OXL also increases rearing and climbing behavior in animals. In rotarod test OXL i.p. or INH caused no motor impairments in mice. In specific tests, inhaled OXL presented a profile of anxiolytic drug by increasing the time spent in open arms of elevated plus maze and increasing the time spent in the brightly-lit chamber of the light/dark box. The standard drug used in these animal models of anxiety was diazepam. OXL i.p. showed a profile of antinociceptive drug, decreasing the number of abdominal writhing induced by acetic acid and decreasing the time spent by the animals licking the injected paw in both observation phases of the formalin test. In these tests, morphine was used as standard drug. Pharmacological tools such as naloxone, atropine, sulpiride and caffeine were used to attempt elucidate the mechanism involved in the antinociceptive effect of OXL. Sulpiride and naloxone reversed this antinociceptive effect in the first phase of the formalin test, and caffeine in both phases, suggesting the involvement of opioid, dopaminergic and adenosinic transmissions in the antinociceptive action. The development of this thesis has presented preliminary findings of OXL psychopharmacological activity. Further investigations with this monoterpene can lead to the future development of a new drug or molecule with greater potency and selectivity. / O óxido de linalol (OXL) é um monoterpeno, álcool monocíclico, de odor agradável, que pode ser encontrado em óleos essenciais de algumas plantas aromáticas. Pode também ser obtido, a partir do linalol, por oxidação natural ou processos sintéticos. A ausência de pesquisas sobre as possíveis atividades farmacológicas do OXL incentivou à realização deste traballho, que teve como objetivo avaliar a atividade ansiolítica e antinociceptiva do OXL em camundongos Swiss machos. Inicialmente, foi realizada a pesquisa da dose letal 50 (DL50) do OXL, no intuito de estabelecer doses e concentrações relativamente seguras para os testes subsequentes. O OXL foi utilizado nos experimentos nas doses de 50, 100 e 150 mg/kg, pela via intraperitoneal (i.p.) e nas concentrações de 0,65%, 1,25%, 2,5% e 5,0%, pela via inalatória (v.i.). Para investigar o perfil de ação deste monoterpeno no sistema nervoso central foram realizados testes gerais como triagem farmacológica comportamental e teste da barra giratória. Durante a triagem, a analgesia foi o principal efeito observado nos animais tratados com OXL i.p. e v.i. Houve também aumento nos comportamentos de levantar e escalar nos animais que inalaram OXL. No teste da barra giratória foi observado que o OXL i.p. e v.i. não causou prejuízos à coordenação motora dos animais. Durante a realização de testes específicos, o OXL v.i., apresentou um perfil de droga ansiolítica, aumentando o tempo de permanência dos animais nos braços abertos do labirinto em cruz elevado e no compartimento iluminado do aparelho de claro-escuro. A droga padrão utilizada nesses modelos animais de ansiedade foi o diazepam. O OXL i.p. apresentou um perfil de droga antinociceptiva, diminuindo o número de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético e o tempo de lambida da pata dos animais, nas duas fases de observação do teste da formalina. Nestes testes, a morfina foi usada como droga padrão. Para tentar elucidar o mecanismo envolvido no efeito antinociceptivo do OXL foram usadas ferramentas farmacológicas como naloxona, atropina, sulpirida e cafeína. O efeito antinociceptivo do OXL foi revertido pela naloxona e sulpirida na primeira fase do teste da formalina, e pela cafeína, em ambas as fases, sugerido o envolvimento de transmissão opióde, dopaminérgica e adenosínica na ação antinociceptiva. O desenvolvimento deste trabalho apresentou descobertas preliminares de atividades psicofarmacológicas do OXL. Outras investigações com este monoterpeno podem levar, no futuro, ao desenvolvimento de um novo medicamento ou nova molécula com maior potência e seletividade.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2682296 bytes, checksum: 2cc0edf88a79217347be3a89391a4dc6 (MD5) Previous issue date: 2011-11-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Praxelis clematidea (Griseb.) R. M. King & H. Robinson (Asteraceae) is a native herb to South America. The chloroformic phase from aerial parts of P. clematidea (CHCl3P-Pc) has hydroxylated and methoxylated flavones and it has shown gastroprotective activity. The ethyl acetate phase (AcOEtP-Pc) has hydroxylated flavonoids. So the gastroprotective activity of AcOEtP-Pc, the antiulcer mechanisms of CHCl3P-Pc and AcOEtP-Pc and the effects on duodenal ulcer, inflammation and gastrointestinal motility were investigated. The AcOEtP-Pc (62.5, 125 and 250 mg/kg, p.o.) protected gastric mucosa injuries by ethanol, stress and non steroidal anti-inflammatory in Wistar rats and male Swiss mice. The best dose of AcOEtP-Pc (62.5 mg/kg) did not alter biochemistry parameters of gastric juice by pylorus ligation model. The CHCl3P-Pc (125 mg/kg) and AcOEtP-Pc (62.5 mg/kg) prevented duodenal ulcer induced by hydrochloride cysteamine. The AcOEtP-Pc increased the amount of sticky mucus and depended of sulfhydryl compounds to gastric protection, while did not depend of NO. The CHCl3P-Pc and AcOEtP-Pc maintained the level of PGE2. These phases prevented gastric injuries induced by ischemia-reperfusion by decreasing LPO and activity of MPO, while they failed to maintain the activity of antioxidant enzymes such as SOD, GPx and GR, and GSH level. The CHCl3P-Pc and AcOEtP-Pc did not prevent the plasma extravasation when it evaluated by acetic acid induced vascular permeability model and paw edema induced by carrageenan, but they decreased the total number of peritoneal leukocytes after peritonitis induced by carrageenan. In this model, the AcOEtP-Pc reduced levels of cytokines TNF-α and IL-1β, while CHCl3P-Pc reduced TNF-α and increased IL-1β. The phases healed the chronic gastric ulcer induced by acetic acid after 15 days of treatment. In this model, there were re-structuring of the mucosa in ulcerated area (HE), increase of mucus secretion (PAS) and vasculature, as well as maintenance of cell proliferation after morphological and immunohistochemistry analysis. They have maintained expression of EGF and COX-2 after performing the technique of Western blot. The CHCl3P-Pc and AcOEtP-Pc did not also alter body weight, consumption of water and food, weight of vital organs, and hematological and biochemical parameters. The AcOEtP-Pc (62.5, 125 and 250 mg/kg) did not alter gastrointestinal motility when it was evaluated by gastric emptying, motility of small intestine and motility of colon by castor oil induced diarrhea, while the CHCl3P-Pc (125, 250 and 500 mg/kg) delayed the gastrointestinal motility. Therefore, the CHCl3P-Pc and AcOEtP-Pc are gastroduodenal protective and healing to develop cytoprotective, antioxidant and anti-inflammatory mechanisms and regulate the gastrointestinal motility. / Praxelis clematidea (Griseb.) R. M. King & H. Robinson (Asteraceae) é uma erva nativa da América do sul. A fase clorofórmica obtida das partes aéreas de P. clematidea (FCHCl3-Pc) possue flavonas metoxiladas e hidroxiladas e foi estudada quanto a atividade gastroprotetora, enquanto a fase acetato de etila (FAcOEt-Pc) contém flavonóides hidroxilados. Com essas considerações, o objetivo deste trabalho foi investigar a atividade gastroprotetora da FAcOEt-Pc, os mecanismos antiulcerogênicos das FCHCl3-Pc e FAcOEt-Pc, bem como seus efeitos na úlcera duodenal, em processos inflamatórios e na motilidade gastrintestinal. A FAcOEt-Pc nas doses 62,5, 125 e 250 mg/kg protegeu a mucosa gástrica da ação dos agentes lesivos etanol, estresse e antiinflamatório não esteroidal quando administrada por via oral em ratos Wistar e camundongos Swiss machos. A FAcOEt-Pc na melhor dose (62,5 mg/kg) não alterou os parâmetros bioquímicos do suco gástrico em modelo de ligadura do piloro. As FCHCl3-Pc (125 mg/kg) e FAcOEt-Pc (62,5 mg/kg) preveniram a úlcera duodenal induzida com cisteamina hidroclorídrica. A FAcOEt-Pc aumentou a quantidade de muco aderido e mostrou depender de compostos sulfidrílicos para a proteção gástrica, ao mesmo tempo que independe de NO. As FCHCl3-Pc e FAcOEt-Pc mantiveram o nível de PGE2. Estas partições preveniram as lesões gástrica induzidas por isquemia-reperfusão, reduzindo a LPO e a atividade de MPO, ao mesmo tempo que não mantiveram a atividade das enzimas antioxidantes SOD, GPx e GR, bem como o nível de GSH. As FCHCl3-Pc e FAcOEt-Pc não evitaram o extravazamento plasmático avaliado pelo modelo de permeabilidade vascular induzida com ácido acético e pelo edema induzido com carragenina, mas diminuíram o número de leucócitos totais no lavado peritoneal após indução de peritonite com carragenina. Neste modelo, a FAcOEt-Pc reduziu os níveis das citocinas TNF-α e IL-1β, enquanto FCHCl3-Pc reduziu TNF-α e aumentou IL-1β. Ambas as partições cicatrizaram a úlcera gástrica crônica induzida com ácido acético após 15 dias de tratamento. Neste modelo, houve re-estruturação da mucosa na área ulcerada (HE), aumento da secreção de muco (PAS) e vascularização, bem como manutenção da proliferação celular após análise morfológica e imunohistoquímica. Foi observado que as partições mantiveram a expressão de EGF e COX-2 após realização da técnica de Western blot. As FCHCl3-Pc e FAcOEt-Pc também não alteraram o peso corporal, o consumo de água e ração, o peso dos órgãos vitais e os parâmetros hematológicos e bioquímicos. A FAcOEt-Pc (62,5, 125 e 250 mg/kg) não alterou a motilidade gastrintestinal quando avaliada pelos modelos de esvaziamento gástrico, motilidade do intestino delgado e do cólon pelo modelo de diarréia induzida com óleo de rícino, enquanto a FCHCl3-Pc (125, 250 e 500 mg/kg) retardou a motilidade gastrintestinal. Portanto, as FCHCl3-Pc e FAcOEt-Pc são protetores e cicatrizantes gastroduodenal por envolver mecanismos de citoproteção, antioxidante, antiinflamatório e regular a motilidade gastrintestinal.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5708410 bytes, checksum: 3dc640049b48eb903bd5551d6508eb48 (MD5) Previous issue date: 2011-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Piperaceae Family is made up of 14 genus and 1950 species, distributed in the tropical regions of the globe being common in Brazil, especially in the Atlantic Forest. Piper auboreum, popularly known as fruto de morcego , alecrim-de-Angola , pau-de-Angola or beto-preto , is used in popular medicine in the form of tea in order to treat rheumatisms, bronchitis, cold and other illnesses of the urinary apparatus as well as venereal diseases. Under a chemical and pharmacological point of view, only a few reports are related to this species. Among the substances isolated are N-[10-(13,14-Metylenodioxyphenyl)-7(E),9(Z)-pentadienoyl]-pyrrolidine; arboreumine; N-[10-(13,14-Metylenodioxyphenyl)-7(E)-pentaenoyl]-pyrrolidine; N-[10-(13,14-Metylenodioxyphenil)-7(E),9(E)-pentadienoyl]-pyrrolidine e o metyl-3-geranyl-4-hydroxybenzoate. In this work, the literature relates pharmacological activities such as parasite and antibiotic. Consulting the chemical data in the literature, was possible to isolate and identify, through phytochemical analysis, four compounds of Piper arboreum: four amides e two aristolactams. Through chromatography and spectroscopic experiments using infrared and 1D and 2D NMR and comparison with the literature data, the following compounds were isolated: Piplaroxide; Sintenpiridone; 3,4-Epoxy-8,9-dihydropiplartine; 8,9-Dihydropiplartine; 10-Metilamina-4-hidroxy-2,3-dimetoxyphenantrene-1-carboxylic acid-lactam e 10-Metilamina-4-hidroxy-3-metoxyphenantrene-1-carboxylic acid-lactam. All these compounds are reported for the first time in this species displaying considerable value to the chemical taxonomy of the plant. / A família Piperaceae compreende cerca de 14 gêneros e 1950 espécies, amplamente distribuídas nas regiões tropicais e subtropicais do globo e muito comum nas formações florestais brasileiras, principalmente na Mata Atlântica. Piper arboreum, popularmente conhecida como fruto de morcego, alecrim-de-Angola, pau-de-Angola ou beto-preto, é utilizada na medicina popular, na forma de decocto para o tratamento de reumatismo, bronquite, gripe e resfriado, além de também ser empregada contra doenças venéreas e do trato urinário. Do ponto de vista químico-farmacológico poucos relatos têm sido evidenciados com esta espécie, dentre estes tem-se o estudo das folhas de Piper arboreum dos quais foram isoladas: N-[10-(13,14-Metilenodioxifenil)-7(E),9 (Z)-pentadienoil]-pirrolidina; arboreumine; N-[10-(13,14-Metilenodioxifenil)-7(E)-pentaenoil]-pirrolidina; N-[10-(13,14-Metilenodioxifenil)-7(E),9(E)-pentadienoil]-pirrolidina) e o 3-geranil-4-hidroxibenzoato de metila. Farmacologicamente têm-se relatos de atividades: antifúngica, tripanomicida, leishmanicida, e antimicrobiana. Este trabalho reporta o isolamento e identificação estrutural de quatro amidas e duas aristolactamas, através do estudo fitoquímico da espécie Piper arboreum. Utilizando-se métodos cromatográficos usuais e técnicas espectroscópicas de IV e RMN de 1H e 13C uni e bidimensionais e a comparação dos dados com a literatura foi possível isolar e identificar os constituintes Piplaroxido; Sintenpiridona; 3,4-Epoxi-8,9-dihidropiplartina; 8,9-Dihidropiplartina; 10-Metilamina-4-hidroxi-2,3-dimetoxifenantreno-1-ácido carboxílico-lactama e 10-Metilamina-4-hidroxi-3-metoxifenantreno-1-ácido carboxilico-lactama todos isolados pela primeira vez na espécie, apresentando, portanto, relevante importância quimiotaxonômica para a mesma.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3977582 bytes, checksum: 6a5b8750e2be83e492617d4f9954fa26 (MD5) Previous issue date: 2011-02-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Introduction: The Transient Receptor Potential (TRP) superfamily of cation channels is remarkable since it displays greater diversity in activation mechanisms, and are targets for plant-derived compounds. Aim: To investigate the role of TRP channels in the vasorelaxant response of rotundifolone in the superior mesenteric artery from Lyon Normotensive (LN) rats. Methods and Results: Endothelium-denuded artery rings were suspended by platinum hooks for isometric tension recordings. In nominally free-Ca2+ medium, the rings were submitted to successive phenylephrine (Phe) contractions to deplete Ca2+- stores and contracted to CaCl2 (10-2 M). The maximum response (MR) of CaCl2-contractions in presence of nifedipine (10-6 M) (MR = 31.66 ± 2.27 %) were significantly attenuated in the presence of nifedipine plus rotundifolone (3 x 10-4 and 3 x 10-3 M) (MR = 9.30 ± 2.38 and 1.12 ± 0.31 %) or nifedipine plus menthol (10-4 and 10-3 M) (MR = 10.96 ± 1.34 and 1.52 ± 0.82 %). Rotundifolone caused relaxation of vessels pre-contracted with Phe (MR = 100.32 ± 3.88 %; pD2 = 3.59 ± 0.04, n = 6). The vasorelaxant effect induced by rotundifolone was significantly atenuated in the presence of Gd3+ (10-4 M) (MR = 83.74 ± 5.71 %; pD2 = 3.15 ± 0.06); Gd3+ (2.25 x 10-5 or 2 x 10- 6 M) (pD2 = 3.18 ± 0.06 and 3.32 ± 0.03 %) or BCTC (MR = 76.30 ± 2.15 %; pD2 = 3.46 ± 0.04), but no in the presence of ruthenium red, La3+ or Mg2+, nor after TRPV1 desensitization with capsaicin. Menthol caused relaxation of vessels pre-contracted with Phe (MR = 105.07 ± 3.07 %; pD2 = 3.72 ± 0.02). The vasorelaxant effect induced by menthol was significantly potentiated in the presence of ruthenium red (10-5 M), a non-selective TRP channels blocker (pD2 = 4.12 ± 0,04, n = 6). Also, the vasorelaxant response of menthol was significantly attenuated in the presence of La3+ (8 x 10-5 M), non-selective TRP channels blocker (MR = 89.05 ± 1.61 %); Mg2+ (2.25 x 10-3 M), TRPM3, 6 and 7 selective blocker (MR = 90.76 ± 2.94 %); Gd3+ (10-4 M), TRPV4, TRPC1, 3 and 6, TRPM3 and 4 channels blocker (MR = 73.82 ± 5.44 %); Gd3+ (2.25 x 10-5 M), TRPC3 and 6, TRPV4 channels blocker (MR = 88.04 ± 2.33 %); Gd3+ (2 x 10- 6 M), TRPC6 selective blocker (MR = 89,30 ± 3,61 %) or BCTC (2 x 10-6 M), TRPM8 and TRPV1 channels blocker (MR = 66.77 ± 6.05 %), and after TRPV1 desensitization with capsaicin (10-5 M) (RM = 88.96 ± 4.50). The basal tension was reduced by change in the thermostat temperature from 37 ºC to 25ºC and 18ºC (MR = 21.15 ± 0.78 and 28.84 ± 1.03 %). This response was significantly potentiated by rotundifolone (3 x 10-3 M) (MR = 28.01 ± 1.81 and 38.45 ± 1.98 %) or menthol (10-3 M) (MR = 29.87 ± 1.25 and 43.03 ± 2.22 %). In the way similar to menthol, the effects induced by rotundifolone were attenuated in free-Ca2+ medium plus EGTA (MR = 20.42 ± 1.97 and 30.90 ± 2.58 %) or in the presence of BCTC (MR = 17.05 ± 1.94 and 26.48 ± 3.39 %), but not when the vessels were pre-treated with ruthenium red or capsaicin. The RNAm and the protein of the TRPM8 channel are expressed in the superior mesenteric artery from LN rats. Conclusions: These data suggest that rotundifolone induces concentration-dependent relaxation in the mesenteric artery due to inhibition of ROC and SOC channels (probably TRPC1 and TRPC6) and activation of TRPM8 channels. / Introdução: A superfamília Potencial Receptor Transiente (TRP) de canais catiônicos se destaca por exibir uma grande diversidade de mecanismos de ativação, e são alvos de compostos derivados de plantas. Objetivo: Investigar o papel de canais TRP na resposta vasorrelaxante de rotundifolona em artéria mesentérica superior de ratos Normotenso de Lyon (LN). Métodos e Resultados: Anéis de artéria sem endotélio foram suspensos em hastes metálicas para registro de tensão isométrica. Em meio nominalmente sem Ca2+, os anéis foram submetidos a contrações sucessivas com FEN para depleção dos estoques de Ca2+ e contraídos com CaCl2 (10-2 M). O efeito máximo (Emáx) das contrações com CaCl2 na presença de nifedipino (10-6 M) (Emáx = 31,66 ± 2,27 %) foi significativamente atenuado na presença de nifedipino mais rotundifolona (3 x 10-4 e 3 x 10-3 M) (Emáx = 9,30 ± 2,38 e 1,12 ± 0,31 %) e nifedipino mais mentol (10-4 e 10-3 M) (Emáx = 10,96 ± 1,34 and 1,52 ± 0,82 %). Rotundifolona causou relaxamento de vasos pré-contraídos com FEN (Emáx = 100,32 ± 3,88 %; pD2 = 3,59 ± 0,04, n = 6). O efeito vasorrelaxante induzido por rotundifolona foi signigficativamente atenuado na presença de Gd3+ (10-4M) (Emáx = 83,74 ± 5,71 %; pD2 = 3,15 ± 0,06); Gd3+ (2,25 x 10-5 ou 2 x 10-6 M) (pD2 = 3,18 ± 0,06 e 3,32 ± 0,03 %) ou BCTC (Emáx = 76,30 ± 2,15 %; pD2 = 3,46 ± 0,04), mas não na presença de vermeho de rutênio, La3+ or Mg2+, nem após dessensibilização do TRPV1 com capsaicina. Mentol também causou o relaxamento de vasos pré-contraídos com FEN (Emáx = 105,07 ± 3,07 %; pD2 = 3,72 ± 0,02). O efeito vasorrelaxante induzido por mentol foi significativamente potencializado na presença de vermelho de rutênio (10-5 M), um bloqueador não seletivo de canais TRP (pD2 = 4,12 ± 0,04, n = 6) e significativamente atenuada na presença de La3+ (8 x 10-5 M), bloqueador não seletivo de canais TRP (Emáx = 89,05 ± 1,61 %); Mg2+ (2,25 x 10-3 M), bloqueador seletivo dos canais TRPM3, 6 e 7 (Emáx = 90,76 ± 2,94 %); Gd3+ (10-4 M), bloqueador de canais TRPV4, TRPC1, 3 and 6, TRPM3 and 4 (Emáx = 73,82 ± 5,44 %); Gd3+ (2,25 x 10-5 M), bloqueador de canais TRPC3 and 6, TRPV4 (Emáx = 88,04 ± 2,33 %); Gd3+ (2 x 10-6 M), bloqueador seletivo do TRPC6 (Emáx = 89,30 ± 3,61 %) ou BCTC (2 x 10-6 M), bloqueador dos TRPM8 e TRPV1 (Emáx = 66,77 ± 6,05 %), e após a dessensibilização do TRPV1 com capsaicina (10-5 M) (Emáx = 88,96 ± 4,50). A tensão basal foi reduzida por mudança na temperature do banho de 37 ºC para 25ºC e 18ºC (Emáx = 21,15 ± 0,78 e 28,84 ± 1,03 %). Essa resposta foi significativamente potencializada por rotundifolona (3 x 10-3 M) (Emáx = 28,01 ± 1,81 e 38,45 ± 1,98 %) ou mentol (10-3 M) (Emáx = 29,87 ± 1,25 e 43,03 ± 2,22 %). Semelhante ao mentol, os efeitos induzidos por rotundifolona foram atenuados em meio sem Ca2+ mais EGTA (Emáx = 20,42 ± 1,97 e 30,90 ± 2,58 %) ou na presença de BCTC (Emáx = 17,05 ± 1,94 e 26,48 ± 3,39 %), mas não quando os vasos foram pré-tratados com vermelho de rutênio ou capsaicina. O RNAm e a proteína do canal TRPM8 são expressos em artéria mesentérica de ratos LN. Conclusões: Esses dados sugerem que rotundifolona induz relaxamento dependente de concentração em artéria mesentérica devido à inibição de canais ROC e SOC (provavelmente TRPC1 e TRPC6) e ativação de canais TRPM8.