Among fungal infections, those caused by Candida spp are the most recurrent. Candidaemias are the most emergent and amphotericin B has been the mainstay of therapy in spite of its therapeutic failures. Because of these limitations, susceptibility testing of fungi against antifungal agents has been evidencing a great importance in order to confirm susceptibility to the used antifungal agents. In this study, 144 Candida spp isolates from immunocompromised patients, that either evolved into death (Group 1) or survived to candidaemia episodes (Group 2), were assessed. Tests were made according to proceedings and culture media described on M27-A2 document currently provided by Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Media such as Yeast Nitrogen Base- dextrose (YNBd) and Antibiotic Medium were also tested, being used a higher number of Amphotericin B concentrations. Susceptibility values of strains from Group 1 were significantly higher than Group 2 when Antibiotic Medium 3 (AM3) and YNBd were used. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Fungicidal Concentration (MFC) media values for strains from patients that survived to candidaemia were, respectively, 0.5 μg/dL and 0.7 μg/dL; whereas MIC and MFC media values for strains from patients that evolved into death were, respectively, 0.6 μg/dL and 0.9 μg/dL. Significant differences were not observed between the two groups of strains when using RPMI 1640 medium. / Dentre as infecções fúngicas, aquelas provocadas por Candida spp são as mais recorrentes, sendo as candidemias a forma mais emergente, cujo tratamento mais utilizado tem sido à base de anfotericina B, apesar das falhas terapêuticas a esse poliênico. Devido a tais falhas, os testes de avaliação da suscetibilidade de fungos a agentes antifúngicos passam a ter grande importância para confirmar a suscetibilidade aos agentes antifúngicos usados. Neste estudo foram avaliadas 144 isolados de Candida spp, oriundas de pacientes imunodeprimidos que evoluíram ao óbito ou que sobreviveram aos episódios de candidemia. Os testes foram realizados de acordo com os procedimentos e meios de cultura descritos no documento M27-A2 do atual Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Testou-se também os meios Yeast Nitrogen Base dextrosado (YNBd) e Antibiotic Médium 3 (AM3) sendo utilizado um número maior de concentrações de anfotericina B. Os valores de suscetibilidade das cepas provenientes dos pacientes que evoluíram ao óbito foram significativamente maiores que os valores obtidos dos pacientes que sobreviveram a candidemia quando os meios utilizados foram o Antibiotic Médium 3 (AM3) e o YNBd, nos quais encontrou-se valores médios de Concentração Inibitória Mínima (CIM) igual a 0,5 μg/dL e valores de Concentração Fungicida Mínima (CFM) igual a 0,7 μg/dL para pacientes que sobreviveram a candidemia; valores médios de CIM igual a 0,6 μg/dL e de CFM igual a 0,9 μg/dL foram encontrados nas cepas dos pacientes que evoluiram ao óbito. Com o meio de cultura RPMI 1640 não foram observadas diferenças significativas nos valores de suscetibilidade entre os dois grupos de pacientes.

This work aimed to develop nanoemulsions and polymeric nanocapsules containing tioconazole for the topical treatment of superficial mycoses. Initially, a method was validated by liquid chromatography with UV detection to quantify the tioconazole in the nanostructured formulations. The method proved to be specific, linear, precise, accurate and robust. The nanoemulsions and tioconazole-loaded PCL nanocapsules (1.0 mg/mL) were prepared by spontaneous emulsification and interfacial deposition of preformed polymer methods, respectively, and using as oily core medium chain triglycerides or green coffee oil. The physicochemical parameters evaluated were: particle size, polydispersity index, pH, zeta potential, drug content and encapsulation efficiency. Formulations presented nanometric mean size (150-200 nm), polydispersity index below 0.15, acid pH (5.5 to 6.3), negative zeta potential (-3.5 to -11.3 mV), drug content close to the theoretical and encapsulation efficiency close to 100%. With the exception of pH, all these parameters remained the same after 30 days of storage, proving the stability of systems. The study of photodegradation of tioconazole against UVC light has shown the importance of nanostructured photoprotection in the drug and the greater protection was observed for the nanocapsules containing green coffee oil. The antifungal activity of the nanostructures was evaluated by agar diffusion and the results showed that the formulations presented antifungal activity against the yeast C. albicans, C. glabrata and clinical isolate of C. albicans. The nanostructures were incorporated into Aristoflex® AVC hydrogels and those were characterized by size of particles when dispersed in water, polydispersity index, drug content, spreadability, rheological properties and stability. The hydrogels had nanometer size (196-203 nm), polydispersity index below 0.25, pH 6,3 to 6.5, tioconazole content close to theoretical (0.99 to 1.01 mg/g) plastic behavior (model Casson) and similar spreadability profiles. The formulations were stable for 30 days at room temperature, evidencing the importance of the polymeric wall in the nanocapsules to preserve the characteristics of the formulations. The study of the in vitro release of drug from the hydrogel was carried out using diffusion Franz cell. The results demonstrated the ability of nanostructures to control the release of tioconazole, with greater control observed for hydrogels containing polymeric nanocapsules. / Este trabalho objetivou o desenvolvimento de nanoemulsões e nanocápsulas poliméricas contendo tioconazol para o tratamento tópico de micoses superficiais. Inicialmente, foi validado um método por cromatografia líquida com detecção UV para quantificação do tioconazol nas formulações nanoestruturadas. O método apresentou-se específico, linear, preciso, exato e robusto. As nanoemulsões e nanocápsulas de PCL contendo o tioconazol (1,0 mg/mL) foram preparadas pelos métodos de emulsificação espontânea e deposição interfacial do polímero pré-formado, respectivamente, utilizando como núcleo oleoso os triglicerídeos de cadeia média ou o óleo de café verde. Os parâmetros físico-químicos avaliados foram tamanho de partículas, índice de polidispersão, pH, potencial zeta, teor e eficiência de encapsulamento. As formulações apresentaram tamanho nanométrico (150 - 200 nm), índice de polidispersão abaixo de 0,15, pH ácido (5,5 a 6,3), potencial zeta negativo (-3,5 a -11,3 mV), teor de fármaco próximo ao teórico e eficiência de encapsulamento próximo a 100%. Com exceção do pH, todos esses parâmetros mantiveram-se iguais após os 30 dias de armazenamento a temperatura ambiente, comprovando a estabilidade dos sistemas. O estudo de fotodegradação do tioconazol frente à luz UVC demonstrou a importância dos sistemas nanoestruturados na fotoproteção do fármaco e uma maior proteção foi verificada para as nanocápsulas contendo óleo de café verde. A atividade antifúngica das nanoestruturas foi avaliada pelo método de difusão em ágar e os resultados demonstraram que as formulações apresentaram ação frente à C. albicans, C. glabrata e isolado clínico de C. albicans. As nanoestruturas foram incorporadas em hidrogéis de Aristoflex® AVC e estes caracterizados quanto ao tamanho de partículas após dispersão em água, índice de polidispersão, teor, espalhabilidade, propriedades reológicas e estabilidade frente ao armazenamento. Os hidrogéis apresentaram tamanho nanométrico (196 - 203 nm), índice de polidispersão abaixo de 0,25, pH de 6,3 a 6,5, teor de tioconazol próximo ao teórico (0,99 a 1,01 mg/g), comportamento plástico (modelo de Casson) e perfis de espalhabilidade semelhantes. As formulações mantiveram-se estáveis por 30 dias à temperatura ambiente, sendo evidenciada a importância da parede polimérica nas nanocápsulas em preservar as características das formulações. O estudo de liberação in vitro do fármaco a partir dos hidrogéis foi realizado empregando célula de difusão do tipo Franz. Os resultados obtidos demonstraram a capacidade das nanoestruturas em controlar a liberação do tioconazol, sendo que um maior controle foi observado para os hidrogéis contendo as nanocápsulas poliméricas.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The Triazenes are compounds with proven antibacterial and cytotoxic activity. Variations in the chemical structure such as complexation with metals like gold (I) can confer different biological activities. The antineoplastic temozolomide and dacarbazine are examples of commercially available triazenes used in the treatment of solid tumors and acute leukemias. In this study, the following compounds were synthesized triazenes complexed with novel gold (I): 1) [1,3-Bis (2-fluorophenyl) triazenido] (triphenylphosphine) gold (I); 2) [1,3-Bis (2- chlorophenyl) triazenido] (triphenylphosphine) gold (I) 3) [1,3-Bis (2-bromophenyl) triazenido] (triphenylphosphine) gold (I), 4) [1,3-Bis (2-iodophenyl) triazenido] (triphenylphosphine ) gold (I). Cytotoxicity of these compounds was evaluated by the MTT colorimetric assay of cell culture effecting bone marrow of patients with different types of leukemia, in addition to controlling patient without the disease. For the analysis of the antimicrobial activity was utilized quantitative methodology of microdilution with the determination of minimum inhibitory concentration (MIC). To determine the activity of nuclease cleavage assays were performed in double-stranded plasmid DNA using the method of electrophoresis in agarose gel. The results showed a considerable activity against different types of leukemia (acute myeloid leukemia, chronic myeloid leukemia, acute lymphoblastic leukemia, chronic lymphocytic leukemia) with a small IC50 value of 0.0057 μmol mL-1 for compound 4 in cells of acute myeloid leukemia, all the active compounds in different types of leukemia but not so selective. The antibacterial activity was higher against gram-positive bacteria mainly in different strains of Staphylococcus aureus (MIC value of equal to 16 ug/ml). Any of the four compounds analyzed in this study was able to cleave the plasmid DNA. Thus, all tested triazenes have biological potential, or may be the subject of further studies as alternatives to anticancer and antimicrobial drugs existent. / Os triazenos são compostos com comprovada atividade citotóxica e antibacteriana. Variações na sua estrutura química, como por exemplo a complexação com metais como o ouro (I), podem lhe conferir diferenciadas atividades biológicas. Os antineoplásicos dacarbazina e temozolomida constituem exemplos de triazenos disponíveis comercialmente utilizados no tratamento de tumores sólidos e leucemias agudas. Neste estudo foram sintetizados os seguintes compostos triazenos inéditos complexados com ouro (I): 1) [1,3- Bis(2-fluorofenil)triazenido](trifenilfosfina)ouro(I); 2) [1,3-Bis(2 clorofenil)triazenido] (trifenilfosfina)ouro(I); 3) [1,3-Bis(2-bromofenil)triazenido](trifenilfosfina)ouro(I); 4) [1,3- Bis(2 iodofenil)triazenido](trifenilfosfina)ouro(I). A citotoxicidade desses compostos foi avaliada através do ensaio colorimétrico do MTT efetuando cultura de células de medula óssea de pacientes com diferentes tipos de leucemias, além de paciente controle, sem a doença. Para a análise da atividade antimicrobiana foi utilizada a metodologia quantitativa da microdiluição em caldo com a determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Para a determinação da atividade de nuclease foram efetuados ensaios de clivagem do DNA plasmidial fita dupla utilizando a metodologia de eletroforese em gel de agarose. Os resultados mostraram uma considerável atividade frente a diferentes tipos de leucemias (leucemia mielóide aguda, leucemia mielóide crônica, leucemia linfóide aguda, leucemia linfóide crônica) com um pequeno valor de IC50 de 0,0057 μmol mL-1 para o composto 4 em células de leucemia mielóide aguda, sendo todos os compostos ativos em diferentes tipos de leucemias, porém de forma não seletiva. A maior atividade antibacteriana foi frente a bactérias gram-positivas principalmente em diferentes cepas de Staphylococcus aureus (com valor de CIM igual a 16 ug/mL). Nenhum dos 4 compostos analisados nesse estudo conseguiu clivar o DNA plasmidial. Desta forma, todos os triazenos testados possuem potencial biológico, ou seja, podem ser objeto de mais estudos como alternativas aos fármacos antimicrobianos e antineoplásicos existentes.

Prostate cancer (PC) is a disease in men and became the first cause of death by cancer in Brazil. The carcinogenesis is related to the presence of local inflammatory process and to the loss of blood group in neoplasic cells. The aim of the study was to assess the involvement of inflammatory process and the expression of A and B antigens in prostate cancer. Serological measure of prostatic specific antigen (PSA), reactive C protein (CRP) and ischemia modified albumin (IMA) was made in healthy, hyperplasic (BPH) and neoplasic prostate volunteers. PSA values increased when comparing healthy (1,13 ng/ml), BPH (18,69 ng/ml) and PC (134,68 ng/ml) patients. IMA showed to be over 0,400 ABSU just in BPH patients. Medium CRP concentrations did not exceed normal values (5 mg/l) in the studied groups. There was not a meaningful difference in the evaluation of PSA, CRP and IMA in relation to the ABO blood group of the patients. The carcinogenesis of prostate seemed to abolish the expression of A and B antigens in neoplasic cells. Inflammatory feature showed to be mild in the prostatic alterations and did not reach reference values. IMA acted as a marker of oxidative stress and patients with BPH demonstrated concentration above 0,400 ABSU. The diagnosis of BPH must be considered when IMA is being used as a marker of myocardial ischemia. The ABO blood group of the volunteers did not show difference in the analysis of PSA, CRP and IMA. / O câncer de próstata (CaP) é uma doença que acomete homens e tornou-se a primeira causa de morte por câncer no Brasil. A carcinogênese vem sendo relacionada à presença de processo inflamatório local e também à perda de antígenos eritrocitários nas células neoplásicas. O objetivo do trabalho foi avaliar o envolvimento do processo inflamatório e a expressão dos antígenos A e B em pacientes com CaP. Foi realizada dosagem sorológica do antígeno prostático específico (PSA), da proteína C reativa (PCR) e da albumina modificada pela isquemia (IMA) em pacientes saudáveis e em pacientes com alterações neoplásica ou hiperplásica prostática. Os valores de PSA mostraram-se crescentes na comparação dos pacientes saudáveis (1,13 ng/ml), com HBP (18, 69 ng/ml) e com CaP (134, 68 ng/ml). A IMA apresentou valores em unidade de absorbância acima de 0,400 apenas nos pacientes com HBP, sendo que os grupos sanguíneos O e AB apresentaram as maiores médias. Os valores médios da PCR não ultrapassaram o valor de referência de 5 mg/l nos grupos estudados. Não houve diferença significativa na avaliação de cada variável (PSA, PCR e IMA) em relação à tipagem sanguínea ABO dos pacientes. O processo neoplásico prostático mostrou anular a expressão dos antígenos A e B nas células afetadas. A característica inflamatória mostrou-se branda nas alterações prostáticas estudadas, não ultrapassando o valor de referência. A IMA atuou como um marcador de estresse oxidativo, sendo que os pacientes com HBP mostraram valor médio acima de 0,400 UABS. Tal diagnóstico prostático é útil ser considerado quando a IMA está sendo usada como marcador de isquemia cardíaca. O grupo sanguíneo ABO dos pacientes não mostrou diferença significativa nas determinações de PSA, PCR e IMA.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Paclitaxel use in cancer is limited by a painful syndrome characterized by acute and chronic phases and by the lack of efficacious therapies. Thus, we assessed the efficacy of analgesics used in the World Health Organization (WHO) ladder for a cancer pain relief in a model of paclitaxel-induced pain syndrome (P-IPS). Hyperalgesia was measured with von Frey filaments. P-IPS was induced in rats by four injections of paclitaxel on alternate days. The acute and chronic phases were assessed 24 h and 15 days after the first injection, respectively. Rats were treated orally with vehicle, acetaminophen (step 1 of the ladder), codeine alone or plus acetaminophen (step 2) and morphine (step 3) after acute or chronic phases assessment. Acetaminophen, codeine and morphine were equi-efficacious in reversing the acute phase of the P-IPS, but opioids were more potent than acetaminophen. Codeine plus acetaminophen had similar efficacy and potency when administered together, but produced longer-lasting effect. The repeated treatment with paclitaxel also led to a marked hyperalgesia in the chronic phase of the painful syndrome. Acetaminophen, codeine and morphine partially reversed chronic phase of P-IPS, losing their efficacy and, in the case of codeine, potency when compared to acute phase. However, the administration acetaminophen with codeine increased the potency and the efficacy of the opioid, producing a long-lasting anti-hyperalgesic effect. Together, analgesics of WHO ladder are capable of reverting both acute and chronic phases of P-IPS, with codeine plus acetaminophen presenting more potent, efficacious and long-lasting effect. Thus, WHO analgesics ladder could also be useful to treat P-IPS. / O uso do paclitaxel no câncer é limitado por uma síndrome dolorosa caracterizada por uma fase aguda e crônica, e também, pela falta de terapias eficazes para o seu tratamento. Assim, avaliou-se a eficácia dos analgésicos usados na escada da organização mundial da saúde (OMS), utilizada para o alívio da dor do câncer, em um modelo de síndrome dolorosa induzida por paclitaxel (SDIP). A hiperalgesia foi avaliada através de filamentos de von Frey. A síndrome dolorosa foi induzida por quatro injeções de paclitaxel em dias alternados. As fases agudas e crônicas foram avaliadas 24 h e 15 dias após a primeira administração, respectivamente. Os ratos foram tratados por via oral com veículo, paracetamol (degrau 1 da escada), codeína sozinha ou em combinação com paracetamol (degrau 2) e morfina (degrau 3), após a avaliação das fases aguda ou crônica. Paracetamol, codeína e morfina foram equi-eficazes na reversão da fase aguda da SDIP, mas os opióides, foram mais potentes quando comparados ao paracetamol. Codeína mais paracetamol teve eficácia e potência semelhante, quando administrados em conjunto, mas produziu um efeito mais duradouro. A repetição do tratamento com paclitaxel também levou a uma marcada hiperalgesia na fase crônica da síndrome dolorosa. O paracetamol, a codeína e a morfina reverteream parcialmente a hiperalgesia induzida por paclitaxel, perdendo a sua eficácia e, no caso de codeína, a potência quando comparados à fase aguda. No entanto, a administração de codeína com paracetamol aumentou a potência e a eficácia do opióide, produzindo um efeito anti-hiperalgésico mais prolongado.Juntos, os analgésicos da escada são capazes de reverter ambas as fases aguda e crônica da SDIP, sendo que a codeína mais paracetamol apresentou-se mais potente, eficaz promovendo um efeito de longa duração. Assim, os analgésicos escada da OMS podem ser úteis para o tratamento da SDIP.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Silver catfish, Rhamdia quelen, is one of the most cultivated fish species in southern Brazil. Products destined for improving rearing and production of this species are required due to its importance for aquaculture. Oxidative stress (OS) is one of the main challenges in fish culture, so the use of compounds with antioxidant capacity may be valuable. The flavonoid rutin has several beneficial effects and represents an important alternative to reduce the physiological changes that arise from rearing-related stress. This study evaluated the influence of three diets containing rutin (0, 0.15 and 0.30 % rutin) on blood parameters and the antioxidant response of silver catfish. After a 21-day feeding period, blood was withdrawn for biochemical analysis and determination of plasma cortisol levels. The fish were then euthanized for sampling of the brain, gills, liver, kidney and muscle. Biomarkers of OS, thiobarbituric reactive substances (TBARS), lipid hydroperoxides (LOOH), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glutathione S-transferase (GST), content of non-protein thiol groups (NPSH), content of ascorbic acid (AA) and total antioxidant capacity (TRAP) were determined. Fish fed the diet having 0.15 % rutin had lower cortisol levels compared to control. Nonetheless, the diet with rutin did not affect the hematological parameters. The levels of lipid peroxidation measured by determination of TBARS and LOOH in the brain, gills, liver and muscle decreased in the fish fed the diet containing rutin; in the kidney, however, only the levels of LOOH were reduced in these fish. When compared to control, the rutin-enriched diet increased the activity of SOD, CAT, NPSH content, AA and TRAP in the brain, GST and TRAP in the gills, SOD, CAT, GST, NPSH content, AA and TRAP in the liver, CAT, GST and TRAP in the kidney, and GPx, NPSH content, AA and TRAP in the muscle. In conclusion, these results suggest that rutin supplementation in silver catfish diet is recommended because it increases the tissue antioxidant response, thus preventing oxidative damage. / O jundiá, Rhamdia quelen, é uma das espécies mais cultivadas no sul do Brasil. Produtos destinados a melhorar o cultivo e produção do jundiá são necessários devido à importância desta espécie para a aquicultura. O estresse oxidativo (OS, do inglês oxidative stress) é um dos principais desafios no domínio da piscicultura, portanto a utilização de compostos com capacidade antioxidante pode ser útil. O flavonoide rutina tem vários efeitos benéficos e torna-se uma alternativa importante a fim de reduzir as alterações fisiológicas resultantes do estresse atrelado ao cultivo. Este estudo avaliou a influência de três dietas contendo a rutina (0, 0,15 e 0,30 % rutina) sobre os parâmetros sanguíneos e resposta antioxidante em jundiás. Após um período de 21 dias de alimentação, o sangue foi coletado para a análise sanguínea. Os peixes foram então eutanasiados para amostragem do encéfalo, brânquias, fígado, rim e músculo. Uma alíquota de sangue foi amostrada para a análise bioquímica e do cortisol plasmático. Os biomarcadores de OS, substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), hidroperóxidos lipídicos (LOOH), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa S-transferase (GST), o conteúdo dos grupos tióis não proteicos (NPSH), conteúdo de ácido ascórbico (AA) e a capacidade antioxidante total (TRAP) foram determinados. Os peixes que receberam a dieta contendo 0,15 % rutina apresentaram níveis de cortisol mais baixos do que o controle. No entanto, a dieta contendo rutina não influenciou os parâmetros hematológicos. Os níveis de lipoperoxidação medidos por determinação de TBARS e LOOH no encéfalo, brânquias, fígado e músculo diminuíram nos peixes que receberam a dieta contendo rutina; exceto no rim onde houve apenas a redução dos níveis de LOOH em todas as dietas. Quando comparado ao controle, a dieta enriquecida com rutina aumentou a atividade da SOD, CAT, o conteúdo de NPSH, AA e TRAP no encéfalo, GST e TRAP nas brânquias, SOD, CAT e GST, o conteúdo de NPSH, AA e TRAP no fígado, CAT, GST e TRAP no rim, GPx, conteúdo de NPSH, AA e TRAP no músculo. Em conclusão, estes resultados sugerem que a suplementação contendo rutina na dieta do jundiá é recomendada pois aumenta a resposta antioxidante no tecido, evitando o dano oxidativo.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In recent years, the isolation of bacteria producing β-lactamases has caused concern around the world, due to the fact these enzymes hydrolysis the ring β-lactam antimicrobials used in the main clinic. This aim of this study was asses the prevalence metallo-β-lactamases (MbL) in isolates of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii obtained from patients admitted at the University Hospital of Santa Maria (HUSM). The profile of susceptibility for all isolates was evaluated by the disk diffusion method standardized by CLSI. The antimicrobial disks were distributed in a way that allows the identification of strains producers of AmpC and ESBL. For the identification of the producers of MbL the test of disk approximation with EDTA 0.1 M, EDTA 0,5M and acid 2-mercaptopropionic were performed. Isolates that did not have any of the mechanisms of resistance search were classified as multiresistant (MDR). The minimum inhibitory concentration (MIC) for ceftazidima, imipenem and polymyxin B was assessed by broth method microdilution for all isolated, according to CLSI. From January to June 2006, were obtained 32 isolates the P.aeruginosa and 41 the A. baumannii, the those 17 (23.29%) were β-lactamase AmpC-type producers, 11 (15.07%) were MbL producers, and 45 (61,64%) were classified as MDR. All strains producing MbL were Pseudomonas aeruginosa. The sensitivity of the isolates according to the CIM for antimicrobial evaluated were: 90,28% for polymyxin B, 36,11% for imipenem and 18% for ceftazidima. There was a high prevalence of MDR isolates and producers of β-lactamase-type AmpC and MbL in HUSM, this is extremely worrying once there is limiting therapy available. This situation becomes even more worrying with the find of isolates resistant the polymyxin B, witch is one of the last options of treatment for MDR isolates and producers of MbL. The detection of microorganisms is extremely important for the committees of infection hospital with the goal of preventing outbreaks, as well as guide the medical team on the conduct therapy, since there are few effective antimicrobial clinically for these pathogens and no prospects for development the new antimicrobial in the near future. / Nos últimos anos, o isolamento de bactérias produtoras de β-lactamases tem causado preocupação em todo o mundo, devido ao fato dessas enzimas hidrolisarem o anel β- lactâmico dos principais antimicrobianos utilizados na clínica. Este trabalho teve por objetivo avaliar a prevalência de metalo-β-lactamases (MbL) em isolados de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii obtidos de pacientes atendidos no Hospital Universitário de Santa Maria (HUSM). O perfil de sensibilidade para todos os isolados foi avaliado pelo método de disco difusão padronizado pelo CLSI. Os discos de antimicrobianos utilizados foram distribuídos de forma que permitisse a identificação dos isolados produtores de AmpC e ESBL. Para a identificação dos produtores de MbL utilizou-se o teste de disco aproximação com os seguintes agentes quelantes: EDTA 0,1M, EDTA 0,5 M e ácido 2-mercaptopropiônico. Os isolados que não possuíam nenhum dos mecanismos de resistência pesquisados foram classificados como multirresistentes (MDR). A concentração inibitória mínima (CIM) para ceftazidima, imipenem e polimixina B foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo para todos os isolados, de acordo com o CLSI. Durante o período de janeiro a junho de 2006 foram obtidos 32 isolados de P.aeruginosa e 41 de A. baumannii, destes 17 (23,29%) foram produtores de β-lactamase do tipo AmpC, 11 (15,07%) foram produtores de MbL e 45 (61,64%) foram classificados como MDR. Todas as cepas produtoras de MbL foram de Pseudomonas aeruginosa. A sensibilidade dos isolados de acordo com a CIM para os antimicrobianos avaliados foram as seguintes: 90,28% para polimixina B, 36,11% imipenem e 18% ceftazidima. Observou-se uma alta prevalência de isolados MDR no HUSM, além de isolados produtores de β-lactamase do tipo AmpC e MbL, o que é extremamente preocupante devido limitar a terapia a poucos antimicrobianos. Esta situação torna-se ainda mais preocupante com a detecção de isolados resistentes a polimixina B, a qual é uma das últimas opções de tratamento para infecções causadas por isolados de P. aeruginosa e Acinetobacter baumannii MDR e produtores de MbL. A detecção desses microrganismos é de grande importância para as comissões de controle de infecção hospitalar com o objetivo de prevenir surtos, bem como orientar a equipe médica sobre a conduta terapêutica, uma vez que há poucos antimicrobianos efetivos clinicamente para esses patógenos e as perspectivas para o desenvolvimento de novos antimicrobianos em um futuro próximo são mínimas.

Ebastine is a second generation antihistaminic drug used to treat allergic rhinitis and urticaria. It is available in the Brazilian market as tablets and syrup. There are no official methods for ebastine analysis in pharmaceutical formulations. In the present work, methods for quantification and dissolution evaluation of the drug in tablets were developed and validated. Spectrophotometric and liquid chromatographic (LC) methods were used for drug determination. In the spectrophotometric method ebastine can be quantified at 258 nm, using acetonitrile and 0.01M HCl as diluents. The LC analysis were performed on a C18 column maintained at ambient temperature. The mobile phase composed of acetonitrile:phosphoric acid 0.1% pH 3.0 (55:45, v/v), was run at a flow rate of 1.2 mL/min with UV detection at 254 nm. The methods showed good linearity (r>0.999), precision (RSD<2%), and accuracy. The proposed methods were applied for the analysis of pharmaceutical products, showing significant correlation (P>0.05) of the results. The optimization of dissolution test conditions for in vitro quality control of ebastine in tablets was evaluated. The use of 900 mL of 0.01M HCl at 37.0 ± 0.5°C, paddle as apparatus at 75 rpm and 60 minutes of test provided satisfactory results for tested product. The LC method was validated to evaluate dissolution testing and showed to be specific, linear, precise and accurate. The sample tablets containing ebastine were subjected to accelerated stability study under conditions of controlled temperature and relative humidity (40 °C ± 2 °C e 75% ± 5 %, respectively) for six months and then evaluated by LC and mass spectrometry. / A ebastina é um fármaco anti-histamínico de segunda geração utilizado para tratamento de rinite alérgica e urticária. No mercado brasileiro encontra-se disponível na forma de comprimidos e solução oral. Não há monografias descritas em farmacopéias para análise de ebastina em formulações farmacêuticas. No presente trabalho, métodos para quantificação e avaliação da dissolução do fármaco em comprimidos foram desenvolvidos e validados. Os métodos usados para a quantificação do fármaco foram a espectrofotometria no ultravioleta e a cromatografia líquida de alta eficiência (CL). No método espectrofotométrico a ebastina pode ser quantificada em 258 nm, utilizando acetonitrila e HCl 0,01M como diluentes. As análises por CL foram realizadas em coluna C18 mantida a temperatura ambiente. A fase móvel, composta de acetonitrila: ácido fosfórico 0,1% pH 3,0 (55:45, v/v), foi eluída isocraticamente com vazão de 1,2 mL/min com detecção no ultravioleta em 254 nm. Os métodos mostraram boa linearidade (r>0,999), precisão (DPR<2%) e exatidão. Os métodos propostos foram aplicados na análise de produtos farmacêuticos, demonstrando correlação significativa dos resultados (p>0,05). A otimização das condições para o teste de dissolução in vitro para ebastina comprimidos foi avaliada. As condições que forneceram resultados satisfatórios para os produtos testados foram 900 mL de ácido clorídrico 0,01M a 37,0 ± 0,5 ºC, aparato pá, 75 rpm e 60 minutos de teste. O método por CL foi validado para quantificação das amostras do teste de dissolução e mostrou ser específico, linear, preciso e exato. Amostras de comprimidos contendo ebastina foram submetidas a estudo de estabilidade acelerada sob condições controladas de temperatura e umidade relativa (40 °C ± 2 °C e 75% ± 5%, respectivamente) por seis meses e posteriormente avaliadas por cromatografia líquida e espectrometria de massa.

Cancer represents one of the leading causes of death worldwide and efforts to discover more effective anticancer therapies have led to the synthesis of a wide diversity of molecular species. Another major challenge is the anti-infective treatment, because despite the large arsenal of active substances available, many show inefficiency due to the rapid emergence of resistant bacterial strains. As a result, arises the necessity of finding new active substances, more effective and targeted properties in both treatments of neoplasms as microbial resistance. Notably, the Triazenes compounds (TZCs) have been asserting itself as a promising class of metallodrugs with relevant antimicrobial and antiproliferative activity. Moreover, the association of pharmacophoric radical TZC with metal ions, such as gold, leads to a significant increase in biological activity. Because of this wide pharmacological versatility, this study aimed the evaluating in vitro of the biological activity of a compound TZC complexed with ion gold (I). The antibacterial activity was carried out by the conventional method of broth microdilution, through the technique of the minimum inhibitory concentration (MIC), against bacterial strains reference standard American Type Culture Collection (ATCC), clinical isolates with multidrug resistance (MDR) and clinical isolates biofilm producers. Cytotoxicity was evaluated by colorimetric assay based on the reduction of bromide of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) (MTT) against the standard cell line K562 (Chronic Myeloid Leukemia). The results obtained demonstrate that the compound in study present a narrow spectrum of action, being active only against microorganisms classified as Gram positive, moreover, proved to be active against all isolates producing biofilm when compared to non-producing strains of biofilm. Also showed remarkable cytotoxic activity, with IC50 4.96 μM. Thus, these results demonstrate an alternative to the design of a new class of antibacterial and antitumor metallodrugs with activity. / O câncer representa uma das principais causas de óbito no mundo e esforços para descobrir terapias antineoplásicas mais eficazes têm conduzido à síntese de inúmeras moléculas. Outro grande desafio é o tratamento anti-infeccioso, pois apesar do grande arsenal de substâncias ativas disponíveis, muitas mostram-se ineficazes devido ao rápido aparecimento de estirpes bacterianas resistentes. Em razão disso, surge a necessidade da descoberta de novas substâncias ativas, com propriedades mais eficazes e direcionadas, tanto nos tratamentos de neoplasias como de resistência microbiana. Notoriamente, os compostos Triazenos (TZCs) vêm afirmando-se como uma classe promissora de metalofármacos com relevante atividade antimicrobiana e antiproliferativa. Além disso, a associação do radical farmacofórico TZC com íons metálicos, como o ouro, leva a um aumento significativo na atividade biológica. Em virtude dessa ampla versatilidade farmacológica, este estudo teve como objetivo a avaliação in vitro da atividade biológica de um composto TZC complexados com íon ouro (I). A atividade antibacteriana foi realizada pelo método convencional da microdiluição em caldo, através da técnica da concentração inibitória mínima (CIM), frente às cepas bacterianas padrão de referência American Type Culture Collection (ATCC), isolados clínicos com resistência a múltiplas drogas (RMD) e isolados clínicos produtores de biofilme. A citotoxicidade foi analisada através do ensaio colorimétrico baseado na redução do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazólio) (MTT), frente às células da linhagem padrão K562 (Leucemia Mieloide Crônica). Os resultados obtidos demonstram que o composto em estudo apresentou estreito espectro de ação, sendo ativo somente frente aos microrganismos classificados como Gram positivos, além disso, mostrou-se ativo frente a todos os isolados produtores de biofilme, quando comparado às cepas não produtoras de biofilme. Também demonstrou notável atividade citotóxica, tendo a IC50 4.96 μM. Sendo assim, esses resultados demonstram uma alternativa para a concepção de uma nova classe de metalofármacos com atividade antibacteriana e antitumoral.

Within the ABO system there are several blood subgroups: subgroup A, subgroup B and subgroup H, and the most frequently encountered in practice are the subgroups A1, A2, A1B and A2B. The cells of, approximately, 80% of adults in group A are A1. The remaining 20% are A2 or weaker subgroups. However, in newborns is very little literature about the frequency of the subgroups of A. At birth most of the blood group A infants seems to present itself as belonging to subgroup A2, since all the ABO antigens are not fully developed in this period. Since iron deficiency, widespread in this age group, often discussed by the scientific community is related to the disproportion between the expansion of erythroid mass and iron obtained from the diet. Around four months of age, iron stores are reduced by half, and the exogenous iron is required to maintain hemoglobin concentration during this phase of rapid growth, between four and 12 months. Our objectives were to determine the frequency of newborns belonging to subgroups A1 and A2, to identify the frequency of antigen expression A1, between six and 12 months of age, infants initially typed as belonging to subgroup A2 and check the hemoglobin levels for the detection of anemia in these children. The results showed that the frequency of newborn belonging to the A1 blood subgroup was 67% (319) and the A2 subgroup was 33% (152), from a total of 471 newborns belonging to blood group A. We found a great predominance of the A1 subgroup, contradicting the literature that reports the prevalence of subgroup A2 in newborn infants. Regarding the identification of the frequency of A1antigen expression, between six and 12 months of age (n = 40), the percentage of children who express the A1 antigen, after being with six months to one year of age was 67.5% (27), the rest remained as A2 (13). The verification of hemoglobin levels in these children (n = 71), by the method of cianometa-hemoglobin, resulting in 34% of anemic children, pointing to the presence of anemia in this age group. The rates found ranged from 6.56 g/dl to 10.8 g/dl. Thus, in relation to A1 antigen expression between six and 12 months of age further studies are needed, and for the prevalence of anemia is necessary to emphasize in public health programs, intervention measures and more effective control of this nutritional disorder. / Dentro do sistema ABO existem diversos subgrupos sanguíneos: subgrupos A, subgrupos B e subgrupo H, sendo que os mais frequentemente encontrados na prática são os subgrupos A1, A2, A1B e A2B. As células de, aproximadamente, 80% da população adulta do grupo A são A1. Os 20% restantes são A2 ou subgrupos mais fracos. Porém, em recém-nascidos é muito escassa a literatura a respeito de dados quanto à frequência dos subgrupos de A . A maioria dos lactentes do grupo sanguíneo A parece apresentar-se como pertencente ao subgrupo A2, no nascimento, já que todos os antígenos ABO não estão completamente desenvolvidos neste período. Já a carência de ferro, generalizada nesse grupo etário, muitas vezes discutida pela comunidade científica, é relacionada à desproporção entre a expansão da massa eritróide e o ferro obtido da dieta. Por volta dos quatro meses de idade, os estoques de ferro estão reduzidos pela metade, e o ferro exógeno é necessário para manter a concentração de hemoglobina durante esta fase de rápido crescimento, entre quatro e 12 meses. Os objetivos deste trabalho foram determinar a frequência de recém-nascidos pertencentes aos subgrupos A1 e A2; identificar a frequência da expressão do antígeno A1, no período entre seis e 12 meses de idade, em lactentes inicialmente tipados como pertencentes ao subgrupo A2 e verificar os níveis de hemoglobina para a detecção de anemia nestas crianças. Os resultados mostraram que a frequência de recém-nascidos pertencentes ao subgrupo sanguíneo A1 foi de 67% (319) e para o subgrupo A2 foi de 33% (152), de um total de 471 recém-nascidos pertencentes ao grupo sanguíneo A. Constatou-se uma grande predominância do subgrupo A1, contrariando a literatura que relata a prevalência de subgrupo A2 em recém-nascidos. Em relação à identificação da frequência da expressão do antígeno A1, no período entre seis e 12 meses de idade (n=40), a porcentagem de crianças que passaram a expressar o antígeno A1, depois de estarem com seis meses a um ano de idade foi de 67,5% (27), o restante permaneceu como A2 (13). A verificação dos níveis de hemoglobina nestas crianças (n=71), através do método da cianometa-hemoglobina, resultou em 34% de crianças anêmicas, apontando a presença de anemia para essa faixa etária. Os índices encontrados variaram de 6,56g/dl a 10,8g/dl. Assim, em relação à expressão do antígeno A1 entre seis e 12 meses de idade são necessários mais estudos; e, para a prevalência da anemia é necessário enfatizar, nos programas de saúde pública, medidas de intervenção mais eficazes e controle desse distúrbio nutricional.