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INVESTIGAÇÃO DA CONTAMINAÇÃO BACTERIANA EM CONCENTRADOS PLAQUETÁRIOS E AVALIAÇÃO DE TÉCNICAS CONVENCIONAIS / INVESTIGATION OF BACTERIAL CONTAMINATION IN PLATELET CONCENTRATE AND EVALUATION OF CONVENTIONAL TECHNIQUES

Martini, Rosiéli 06 January 2012 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Blood transfusions have always been great support for monitoring the treatment of cancer, especially patients in the sectors of hematology-oncology, but still stand out as a major source of transmission of infectious diseases, today the bacteria. Platelet concentrates (PCs) are the blood components with higher frequency of bacterial contamination and are responsible for the vast majority of septic transfusion reactions. Bacterial infection is a major cause of morbidity and mortality due to platelet transfusions. Gram-positive bacteria, particularly Staphylococcus epidermidis, are mainly responsible for the contamination of PCs. Therefore, this study aimed to determine the prevalence of bacterial contamination in PCs, the isolation and identification of microorganisms found. In addition, we sought to identify septic transfusion reactions and to evaluate conventional techniques for bacterial detection. A total of 691 samples of PCs (665 whole blood-derivaded platelets and 26 apheresis platelets) was analyzed. These samples were from the Blood Center of the State of Rio Grande do Sul (HEMORGS), located in Santa Maria, Rio Grande do Sul. Were employed culture techniques qualitative, quantitative, daily growth and also metabolic markers for the detection of bacteria. Tests for identification of microorganisms were made by conventional techniques and the phenotypic and genotypic screening of septic reactions was performed by passive haemovigilance. The prevalence of bacterial contamination found in this study was 1.47% and S. epidermidis bacteria was responsible for all contamination. This prevalence is considered high when compared to recent studies conducted in other countries, in Brazil we have very few studies in this area. All samples were contaminated platelet random. The test metabolic markers were nonspecific for the detection of bacteria. There was a great difficulty in performing the daily growth of the technical methodology make it impossible to be proposed to HEMORGS. Through haemovigilance passive transfusion reactions were characterized and it was possible to confirm the occurrence of a septic transfusion reaction. Therefore, we suggest the combination of methodologies for the detection of bacterial contamination screening of PCs, since it is a health problem. The combination of culture systems can reduce the risks of transfusions contaminated CPs. We believe that the septic transfusion reactions can be minimized with early recognition by the clinical team. / As transfusões sanguíneas sempre foram o grande suporte para o seguimento do tratamento de câncer, principalmente em pacientes dos setores de hematologia-oncologia, mas ainda destacam-se como uma das principais fontes de transmissão de doenças infecciosas, atualmente as bacterianas. Os concentrados plaquetários (CPs) são os hemocomponentes com maior frequência de contaminação bacteriana e são os responsáveis pela grande maioria das reações sépticas transfusionais. A infecção bacteriana é uma das principais causas de morbidade e mortalidade decorrentes de transfusões plaquetárias. Bactérias gram-positivas, em especial Staphylococcus epidermidis, são majoritariamente os responsáveis pela contaminação de CPs. Sendo assim, este estudo objetivou determinar a prevalência da contaminação bacteriana em CPs, o isolamento e a identificação dos microrganismos encontrados. Além disso, buscou identificar reações sépticas transfusionais bem como avaliar técnicas convencionais de detecção bacteriana. Um total de 691 amostras de CPs (665 plaquetas randômicas e 26 plaquetaféreses) foi analisado. Estas amostras foram provenientes do Hemocentro do Estado do Rio Grande do Sul (HEMORGS), localizado na cidade de Santa Maria, Rio Grande do Sul. Empregaram-se técnicas de cultura qualitativa, quantitativa, de crescimento diário e também marcadores metabólicos para a detecção das bactérias. Os testes de identificação dos microrganismos isolados foram feitos por técnicas convencionais fenotípicas e genotípicas e o rastreio das reações sépticas foi realizado por hemovigilância passiva. A prevalência da contaminação bacteriana encontrada neste estudo foi de 1,47% e S. epidermidis foi a bactéria responsável por todas as contaminações. Esta prevalência é considerada alta quando comparada a estudos recentes realizados em outros países. No Brasil contamos com pouquíssimos estudos nesta área. Todas as amostras contaminadas foram de plaquetas randômicas. O ensaio de marcadores metabólicos foi inespecífico para a pesquisa de bactérias. Ocorreu uma grande dificuldade na execução da técnica do crescimento diário inviabilizando essa metodologia para ser proposta ao HEMORGS. Através da hemovigilância passiva as reações transfusionais foram caracterizadas e foi possível confirmar a ocorrência de uma reação séptica transfusional. Sendo assim, sugerimos a associação de metodologias para a detecção da contaminação bacteriana na triagem dos CPs, uma vez que, se trata de um problema de saúde. A associação de sistemas de cultura pode reduzir os riscos de transfusões de CPs contaminados. Acreditamos que as reações sépticas transfusionais podem ser minimizadas com o seu reconhecimento precoce pela equipe clínica. Palavras-chaves: Concentrados plaquetários; reação transfusional; sepse; bactérias
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CARACTERIZAÇÃO DE ANTÍGENOS IMUNODOMINANTES DE PYTHIUM INSIDIOSUM RECONHECIDOS POR ANTICORPOS DE EQÜINOS, COELHOS E BOVINOS / CHARACTERIZATION OF IMMUNODOMINANT ANTIGEN OF PYTHIUM INSIDIOSUM RECOGNIZED BY ANTIBODIES OF HORSES, RABBITS AND CATTLE

Cavalheiro, Patrícia Bernardes 26 July 2010 (has links)
Oomycete Pythium insisiosum is the etiologic agent of pythiosis, chronic and granulomatous disease, which affects humans and animals in tropical and subtropical areas of the world. Due to ergosterol absence in the plasmatic membrane of this microorganism, treatments based on antifungal agents have been ineffective. Immunotherapy has emerged showing promising results. In this context, the improvement of the immunotherapy was the main goal of this study, whose first purpose was to characterize the immunodominant antigens from this species (P. insidosum ATCC 58637 and P. insidiosum 210-LAPEMI) through sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel eletrophoresis (SDS-PAGE). Some proteins showing 15 kDa to 120 kDa were detected, and bands were transferred to nitrocellulose membranes in order to develop the western blot tests. The second purpose was to characterize the humoral response to pythiosis in equine, in bovine and in experimental pythiosis in rabbits, considering the no treated disease, the disease cured by immunotherapy, the disease treated with immunotherapy but not cured, and the disease cured spontaneously. To encompass all these cases we have included sera from: a) horses cured by immunotherapy; b) horses with pythiosis but not responsive to immunotherapy; c) horses with pythiosis but not treated; d) bovines with pythiosis and showing spontaneous cure; e) rabbits with experimental pythiosis but not treated; and f) rabbits with experimental pythiosis treated with immunotherapy. All specimens recognized three immunodominant proteins: 74, 33 and 32 kDa. The sera from horses cured by immunotherapy (a) and bovine sera (d) recognized another immunodominant protein, 55 kDa, which was weakly positive or negative in the other groups. Thus, the 74, 33 and 32 kDa immunodominant proteins suggest a relevant function in the humoral response to pythiosis because they were recognized by horses, rabbits and bovines. In addition, the 55 kDa antigen, which is being reported here for the first time, is likely to be involved in the cure mechanisms stimulated by immunotherapy. / O oomiceto Pythium insidiosum é o agente etiológico da pitiose, doença granulomatosa crônica que afeta animais domésticos (eqüinos, bovinos, etc) e o homem, em regiões tropicais e subtropicais de todo mundo. A ausência de ergosterol na membrana plasmática deste microorganismo torna a antifungicoterapia muito limitada, donde a imunoterapia (a base de hifas rompidas) tem emergido com resultados promissores. A identificação de antígenos imunodominantes é fundamental para a consolidação dos imunoterápicos utilizados no tratamento da pitiose. Objetivando-se o refinamento destes imunoterápicos, o presente estudo teve como proposta inicial, caracterizar os antígenos imunodominantes desta espécie (P. insidosum ATCC 58637 e P. insidiosum 210-LAPEMI) através de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Diversas proteínas de 120 a 15 kDa foram detectadas e, a seguir, eletrotransferidas para membranas de nitrocelulose para realização de western blot. O segundo objetivo foi caracterizar a resposta humoral à doença em eqüinos, bovinos e na infecção experimental em coelhos, considerando-se a doença curada pela imunoterapia, doença tratada pela imunoterapia e não curada, doença não tratada, e na doença evidenciando cura espontânea. Para tanto, utilizou-se o soro de: a) eqüinos doentes e curados pela imunoterapia; b) eqüinos doentes e sem resposta a imunoterapia; c) eqüinos doentes e não tratados; d) bovinos doentes e com cura espontânea; e) coelhos infectados e tratados pela imunoterapia; f) coelhos infectados e não tratados. Todos os soros reconheceram três proteínas imunodominantes: 74, 33 e 32 kDa. O soro dos eqüinos doentes curados pela imunoterapia (a) e o soro dos bovinos (d) reconheceram também outra proteína imunodominante de 55 kDa, a qual, foi fracamente reconhecida ou ausente nos demais grupos. Assim, comprova-se que as proteínas de 74, 33 e 32 kDa desempenham relevante papel na resposta imune à pitiose, pois foram imunogênicas nas três espécies avaliadas. Em adição, sugere-se que a proteína de 55 kDa possa estar envolvida no mecanismo de cura promovido pela imunoterapia; ressalta-se que esta proteína é aqui pela primeira vez relatada.
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AVALIAÇÃO QUÍMICA E ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DAS CASCAS E TRITERPENÓIDES OBTIDOS DE CARINIANA DOMESTICA (MART) MIERS / CHEMICAL EVALUATION AND ANTIOXIDANT ACTIVITY OF THE BARKS AND TRITERPENOIDS OBTAINED FROM CARINIANA DOMESTICA (MART) MIERS

Janovik, Vanessa 31 March 2011 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Lecythidaceae family consists of about 230 species, classified in some 10 genera. The species Cariniana domestica (Mart) Miers is one of several Jequitibá species, the oldest and millenary trees from Brazil. The present work developed studies with the aim of characterize the species when concerning to chemical aspects, in order to contribute to the knowledge improvement about Lecythidadeae family. The barks of C. domestica were collected in Tangará da Serra-MS. Exsiccate was archived as voucher specimen in the herbarium of Department of Biology at UFSM (SMDB 11818). Plant material was dried, crushed and powdered. The powder was submitted to hidroalcoolic maceration (7:3, v/v) and concentrated under reduced pressure. The remained aqueous extract was partitioned to obtain the fractions FCH2Cl2, F-AcOEt e F-BuOH. Chromatographic procedures led to the isolation of phytosterols (β-sitosterol + stigmasterol) and pentacyclic triterpenes (lupeol + β- amyrin), which were identified by means of spectroscopic (1H-NMR and 13C-NMR) and chromatographic (GC/MS and HPLC) methods. Additionally, the antioxidant capacity was evaluated by measuring its scavenging ability on DPPH and also using TBARS assay. Contents of total polyphenolic and flavonoid were measured as well as a chromatographic profile searching for phenolic substances was determined.. From F-CH2Cl2, DPPH assay revealed high scavenging ability with IC50 values that ranged from 6.5 ± 0.81 to 19.5 ± 1.32 μg/mL. IC50 values obtained with TBARS assay ranged from 11.11 ± 0.85 to 44.5 ± 2.31 μg/mL. Polyphenolic contents varied from 54.6 ± 0.33 to 309.3 ± 2.73 mg/g. Total flavonoid and condensed tannin contents varied from 12.0 ± 0.12 to 14.18 ± 0.1 and 131 ± 0.03 to 149.7 ± 0.22, respectively. HPLC analysis revealed the presence of gallic, caffeic and chlorogenic acids, as well as the flavonoids rutin, quercetin and kaempferol. The carotenoids lycopene and β- carotene were identified in dichloromethane fraction. The results revealed that the species C. domestica achieves antioxidant properties and the compounds identified for the first time for this species can be related to its popular uses. / A família Lecythidaceae consiste em cerca de 230 espécies, classificada em 10 gêneros. A espécie Cariniana domestica (Mart) Miers é uma das diversas espécies de Jequitibá, as árvores milenares mais antigas do Brasil. O presente estudo teve o objetivo de caracterizar quimicamente a espécie, visando contribuir para um maior conhecimento sobre a família Lecythidaceae. As cascas de C. domestica foram coletadas no município de Tangará da Serra-MS e o material foi catalogado sob o registro SMDB 11818 no departamento de Biologia da UFSM. O material vegetal foi seco, triturado e moído. O pó obtido foi submetido à maceração hidroalcóolica (7:3, v/v), seguindo-se de concentração em evaporador rotatório. A partição do extrato aquoso remanescente originou as frações F-CH2Cl2, F-AcOEt e F-BuOH. Os procedimentos cromatográficos de isolamento levaram à obtenção do fitoesteróis (β-sitosterol + estigmasterol) e triterpenos pentacíclicos (lupeol + β-amirina), os quais foram identificados por métodos espectroscópicos (1H-RMN e 13C-RMN) e cromatográficos (CG/EM e CLAE). Adicionalmente, foi avaliada a capacidade antioxidante frente ao radical DPPH, bem como utilizando o método do TBARS. Foram ainda realizadas dosagens investigativas quanto ao teor de polifenóis totais e flavonóides e um perfil cromatográfico para identificação de alguns compostos fenólicos também foi traçado. Os ensaios com o radical DPPH revelaram elevada capacidade seqüestradora de radicais livres, sendo que os valores de IC50 obtidos variaram de 6,5 ± 0,81 a 19,5 ± 1,32 μg/mL. No ensaio do TBARS, os valores de IC50 obtidos variaram de 11,11 ± 0,85 a 44,5 ± 2,31. A determinação de polifenóis totais revelou um teor variável de 54,6 ± 0,33 a 309,3 ± 2,73 mg/g. As determinações de flavonóides totais e taninos condensados variaram de 12,0 ± 0,12 a 14,18 ± 0,1 mg/g e 131 ± 0,03 a 149,7 ± 0,22, respectivamente. A análise por CLAE revelou a presença dos ácidos gálico, caféico e clorogênico, além dos flavonóides rutina, quercetina e campferol. Na fração diclorometano foram identificados os carotenóides licopeno e β-caroteno. Os resultados obtidos demonstram que a espécie C. domestica apresenta propriedades antioxidantes e os compostos identificados pela primeira vez para esta espécie podem estar relacionados com seus usos populares.
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PREVALÊNCIA DE ANEMIA E HIPOTIREOIDISMO EM GESTANTES ATENDIDAS NO PRÉ-NATAL DO HOSPITAL UNIVERSITÁRIO DE SANTA MARIA - RS (HUSM) / PREVALENCE OF ANEMIA IN PREGNANT WOMEN AND HYPOTHYROIDISM ATTENDED IN PRENATAL THE UNIVERSITY HOSPITAL SANTA MARIA - RS (HUSM)

Marion, Mariana 17 January 2013 (has links)
A normal pregnancy is associated with anatomical and physiological adjustments that cause marked changes in the mother, including the composition of humoral and formed elements of the blood circulating. Probably at no other stage of the life cycle exists biggest change in the functioning of the human body and form in such a short space of time. Thus, the objective of this study was to evaluate the prevalence of anemia and hypothyroidism in pregnant women who attended antenatal care at the hospital of Santa Maria University (HUSM) in the period from July to December 2011. Were performed by the Laboratory of Clinical Analyses of HUSM, the TSH and T4L serum of pregnant women, along with analysis of test results of blood count blood. The results of hematological parameters revealed that the rate of hemoglobin, among 124 pregnant women evaluated, was altered in 16.2%. Another variable was significant hematologic evaluation of the Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC), which showed changes in 16.4% of 122 pregnant women tested. Hematocrit a total of 61 patients, we observed that 34.4% of them were changed. These results, when assessed on a whole, showed a strong correlation with the presence of anemia. As to possible malfunctions thyroid gland, TSH levels ranged between 0.6 and 1.13 ng / dL, while the fluctuations of FT4 were 0.377 to 6.36 mIU / L. When framed in the classification of clinical hypothyroidism (declared) and subclinical analysis revealed 4 cases of subclinical hypothyroidism, with a prevalence of about 3%, and no cases of clinical hypothyroidism in 116 pregnant women analyzed. The age of the patients ranged from 16 to 44 years and gestational age between 7-38 weeks. Based on finding of a 4% prevalence of elevated TSH during pregnancy, the authors consider important the inclusion of thyroid function laboratory evaluation in the routine prenatal examination. Further studies appear necessary to establish at what gestational age thyroid function evaluation should be started in pregnant women and how frequently it should be repeated during the course of gestation. / A gestação normal está associada a ajustes fisiológicos e anatômicos que acarretam acentuadas mudanças no organismo materno, incluindo a composição dos elementos figurados e humorais do sangue circulante. Provavelmente, em nenhuma outra fase do ciclo vital exista maior mudança no funcionamento e forma do corpo humano em tão curto espaço de tempo. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a prevalência de anemia e hipotireoidismo em gestantes atendidas no pré-natal do hospital Universitário de santa Maria - RS (HUSM), no período de julho a dezembro de 2011. Foram realizadas, pelo Laboratório de Análises Clínicas do HUSM, as dosagens de TSH e T4L no soro das gestantes, juntamente com análise de resultados de exames de hemograma sanguíneos. Os resultados dos parâmetros hematológicos revelaram que o índice de hemoglobina, dentre 124 gestantes avaliadas, estava alterado em 16,2%. Outra variável hematológica significativa foi na avaliação da Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média (CHCM), que revelou alteração em 16,4%, das 122 gestantes analisadas. No hematócrito de um total de 61 gestantes, observou-se que 34,4% delas encontravam-se alteradas. Esses resultados, quando avaliados em um todo, mostraram forte correlação com a presença de anemia. Quanto às possíveis disfunções glandulares tireoidianas, os níveis de TSH variaram entre 0,6 e 1,13 ng/dL, enquanto que as flutuações de T4L foram de 0,377 a 6,36 mUI/L. Quando enquadradas na classificação de hipotireoidismo clínico (declarado) e subclínico, foram observados 4 casos de hipotireoidismo subclínico, com prevalência em torno de 3%, e nenhum caso de hipotireoidismo clínico em 116 gestantes analisadas. A idade das gestantes variou entre 16 a 44 anos e o tempo gestacional entre 7 a 38 semanas. Com base nos resultados obtidos, considera-se de grande importância o contínuo monitoramento da presença de anemia em gestantes e torna-se cada vez mais imprescindível a inclusão da avaliação tireoidiana na rotina no exame pré-natal. Estudos ulteriores se fazem necessários para estabelecer em que momento a avaliação tireoidiana de mulheres grávidas deve ser iniciada e com que frequência deve ser repetida durante o curso da gestação.
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AVALIAÇÃO FITOQUÍMICA, CAPACIDADE ANTIOXIDANTE E FOTOPROTETORA DO EXTRATO E FORMULAÇÕES DE Calendula officinalis L. / EVALUATION PHYTOCHEMISTRY, ANTIOXIDANT AND PHOTOPROTECTIVE CAPACITY EXTRACT AND FORMULATIONS Calendula officinalis L.

Deuschle, Viviane Cecilia Kessler Nunes 16 December 2013 (has links)
There are many factors related to oxidative stress, one of which is exposure to ultraviolet (UV) radiation, which generates reactive oxygen species (ROS). Calendula officinalis L. presents phenolic compounds, saponins, carotenoids, triterpene alcohols, steroids, terpenoids and triterpenoids. Thus, this work aims to perform a phytochemical evaluation of hydroethanolic extract of calendula, and determine its antioxidant capacity and photoprotection in vitro and in cosmetic formulations developed with this extract. Hydroethanolic extract was obtained by maceration, concentrated in a rotary evaporator and then lyophilized. Phenolics, total flavonoids and condensed tannins were determined spectrophotometrically and the identification and quantification of polyphenols was determined by high performance liquid chromatography (HPLC ). The antioxidant capacity was determined by the DPPH method and SPF determined spectrophotometrically. The antiradical activity was assessed by the hydroxyl radical and superoxide method. Extract was embedded in gel and cream formulations and evaluated for physical and chemical stability during 90 days, where the parameters were the organoleptic characteristics, viscosity and pH. During this period, it was also evaluated the spreadability according with the area obtained in relation to the weight applied. Antioxidant capacity and in vitro SPF determinations were also performed on formulations by the methods previously mentioned. The results show that the plant had good antioxidant activity , which can be related to the presence of flavonoids (24.67 mg/g) , polyphenols (33.90 mg/g) and condensed tannins (27.30 mg/g) and the amount of rutin (37.25 mg/g) and quercetin (6.09 mg/g) found in this study, but SPF was low in the extract (1.89), and in the formulations (around 1.7). Gel samples showed a higher spreadability than the cream. All samples remained stable during the storage period, thus maintaining its physical and chemical characteristics. / Existem muitos fatores relacionados com o estresse oxidativo, sendo um deles a exposição à radiação ultravioleta (UV), que gera espécies reativas de oxigênio (ERO). A Calendula officinalis L. apresenta compostos fenólicos, saponinas, carotenoides, alcoóis triterpênicos, esteroides, terpenóides e triterpenóides. Desta forma, este trabalho objetiva realizar uma avaliação fitoquímica do extrato hidroetanólico da calendula, e determinar a sua capacidade antioxidante e fotoprotetora in vitro e também em formulações cosméticas desenvolvidas com este extrato. O extrato hidroetanólico foi obtido por maceração, concentrado em evaporador rotatório e posteriormente liofilizado. Os compostos fenólicos, flavonoides totais e taninos condensados foram determinados espectrofotometricamente e a identificação e quantificação de polifenois foi determinada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A capacidade antioxidante foi determinada pelo método do DPPH e o FPS determinado espectrofotometricamente. A atividade antirradicalar foi avaliada pelo método do radical hidroxila e superóxido. Após a avaliação do extrato, o mesmo foi incorporado em formulações de creme e gel e avaliados em relação à estabilidade físico-química, durante 90 dias, onde os parâmetros utilizados foram as características organolépticas, viscosidade e pH. Durante este período foi ainda avaliada a espalhabilidade de acordo com a área obtida em relação ao peso aplicado. Nas formulações também foram realizadas as determinações da capacidade antioxidante e FPS in vitro pelos métodos citados anteriormente. Os resultados obtidos mostram que o extrato e as formulações apresentaram uma boa capacidade antioxidante, o que pode estar relacionado com a presença de flavonoides (24,67 mg/g), polifenois (33,90 mg/g) e taninos condensados (27,30 mg/g), bem como a quantidade de rutina (37,25 mg/g) e quercetina (6,09 mg/g) encontradas neste estudo, porém o FPS foi baixo no extrato (1,89) e nas formulações (em torno de 1,75). As amostras de gel apresentaram uma espalhabilidade superior à do creme. Todas as amostras mantiveram-se estáveis durante o período de armazenamento, conservando desta maneira as suas características físico-químicas.
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DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE METODOLOGIA ANALÍTICA PARA AVALIAÇÃO DE ALISQUIRENO EM FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA / DEVELOPMENT AND VALIDATION OF ANALYTICAL METHODOLOGY FOR THE EVALUATION OF ALISKIREN IN PHARMACEUTICAL FORMULATION

Sangoi, Micheli Wrasse 13 August 2010 (has links)
Aliskiren is the first representative of a new class of drugs, the low molecular weight renin inhibitors, orally active and clinically used in a new effective treatment for hypertension. In the present study, the methods were developed and validaded for assessment of aliskiren in pharmaceutical products. Aliskiren samples were also submitted to the physicochemical tests, meeting the specifications. The analysis by reversed-phase liquid chromatography were performed using Waters XBridge (150 mm x 4.6 mm i. d.), maintained at 25 °C. The mobile phase was consisted of acetonitrile/ water (95:5, v/v)/ 25 mM phosphoric acid pH 3.0 (40:60, v/v), run at flow rate of 1 mL/min and using UV detection at 229 nm. The chromatographic separation was obtained within 3.68 minutes. The spectrophotometric method was also developed and validaded, and the aliskiren can be quantified at 279 nm, using water as diluent. The procedures were validated evaluating parameters such as the specificity, linearity, precision, accuracy, limits of detection and quantitation, and robustness, giving results within the acceptable range. The proposed methods were applied for the analysis of pharmaceutical products, showing significant correlation (P > 0.05) of the results. The dissolution test was developed using 900 mL of 0.1 M of chloridric acid 37 ± 0.5 °C as dissolution medium, apparatus paddle at a stirring rate of 50 rpm and quantitation by spectrophotometric method. Therefore, the procedures can be applied to improve the quality control of pharmaceutical products and to assure the safety and therapeutic efficacy of the drug. / O alisquireno é o primeiro representante de uma nova classe de inibidores da renina, de baixo peso molecular e ativo por via oral, sendo utilizado clinicamente em um novo e eficaz tratamento para a hipertensão arterial (HA). No presente trabalho, foram desenvolvidos e validados métodos para avaliação de alisquireno em produtos farmacêuticos. Submeteram-se os produtos aos testes físico-químicos, mostrando que cumprem as especificações. As análises por cromatografia líquida em fase reversa foram realizadas utilizando coluna Waters XBridge (150 mm x 4,6 mm d. i.), mantida à 25 ºC. A fase móvel foi composta de acetonitrila/ água (95:5, v/v)/ ácido fosfórico 25 mM pH 3,0 (40:60, v/v), eluída na vazão de 1 mL/min e detecção no ultravioleta a 229 nm. A separação cromatográfica foi obtida no tempo de 3,68 minutos. Paralelamente, desenvolveu-se e validou-se método por espectrofotometria no ultravioleta (UV) em 279 nm, utilizando água como diluente. Os procedimentos foram validados, avaliando-se os parâmetros de especificidade, linearidade, precisão, exatidão, robustez e limite de detecção e quantificação, cujos resultados cumpriram os requisitos preconizados. Os métodos propostos foram aplicados na análise de produtos farmacêuticos, demonstrando correlação significativa dos resultados (P > 0,05). Desenvolveu-se método de dissolução do fármaco, utilizando como meio 900 mL de ácido clorídrico 0,1 M mantido a 37 ± 0,5 °C, aparato pá, rotação de 50 rpm e quantificação por espectrofotometria no UV. Desse modo, estabeleceram-se procedimentos que podem ser aplicados para aprimorar o controle da qualidade de medicamentos, bem como contribuir para garantir a segurança e eficácia no uso terapêutico.
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ANÁLISE FITOQUÍMICA DAS RAIZES E FOLHAS, E MORFO-ANATÔMICA DOS CAULES E FOLHAS DE Urera baccifera GAUDICH / PHYTOCHEMICAL ANALYSIS OF ROOTS AND LEAVES AND MORPHO-ANATOMICAL ANALYSIS OF LEAVES AND STEAMS OF Urera baccifera GAUDICH

Gindri, Amanda Leitao 05 July 2012 (has links)
The plant Urera baccifera Gaudich, known as stinging nettle, had its leaves and roots used to urinary infections and arthritis. Studies about its anti-inflammatory activities already exist, but are few the studies about their chemical constituents. Due the shortage of dates, this study aim to realize an qualitative and quantitative photochemistry analysis, and antioxidant activity of the plant roots and leaves, beyond realize a morphoanatomic and hystochemical study its leaves and stems. In the qualitative analysis were obtained positive results to aminogroups, anthocyanins, anthocyanidins and flavonoids, steroids, phenols with free para positions, coumarins, saponins and organic acids in the leaves and the roots. In the qualitative analysis the plant showed significant values of phenolic compounds, flavonoids, alkaloids and condensed tannins, mainly in the chloroform fraction of leaves and roots. The crude extract of both part of the plant presented a moderated antioxidant activity. An expressive concentration of oxalic acid was quantified in the roots, indicating toxicity. The morphological analysis of steams and leaves showed stinging, simple tectores and glandular trichomes, cistolits in the epidermis and abundant presence of drusen-type crystals of calcium oxalate besides that elucidate the inner structure of the plant tissues. In the hystochemical tests were presented in the different vegetative organs, substances which form cell walls, reserve substances and secondary metabolites, like phenolic compounds, lipids, terpenoids and cetosteroids, tannins and serotonin. More studies will be realized with Urera baccifera roots, stems and leaves, to elucidate its chemical composition and toxic potential. / A planta Urera baccifera Gaudich, conhecida como Urtiga-Brava, tem suas folhas e raízes utilizadas para infecção urinária e artrite. Já existem estudos sobre sua atividade antiinflamatória, mas poucos são os estudos a respeito de sua composição química. Devido à escassez de dados, este estudo visa realizar uma análise fitoquímica qualitativa e quantitativa, e avaliar a atividade antioxidante das raízes e folhas da planta, além de realizar um estudo morfo-anatomico e histoquímico das folhas e caules. Na análise qualitativa foram obtidos resultados positivos para aminogrupos, antocianinas, antocianidinas e flavonóides, esteróides, fenóis com posição para livres, cumarinas, saponinas e ácidos orgânicos nas folhas e raízes. Na analise qualitativa a planta mostrou valores significantes de compostos fenólicos, flavonoides, flavonóis, alcaloides e taninos condensados principalmente na fração clorofórmio das folhas e raízes. O extrato bruto das duas partes da planta demonstraram uma moderada atividade antioxidante. Foi quantificado numa concentração expressiva, ácido oxálico nas raízes, indicando toxicidade. A análise da morfologia dos caules e folhas evidenciou tricomas urticantes, tectores simples e glandulares, cistólitos na epiderme e presença abundante de cristais do tipo drusas de oxalato de cálcio, além de elucidar a estrutura interna dos tecidos da planta. Nos testes histoquímicos foram evidenciados nos diferentes órgãos vegetativos, substâncias que formam as paredes celulares, substâncias de reserva e metabólitos secundários, como compostos fenólicos, lipídios, terpenóides e cetoesteróides, taninos e serotonina. Mais estudos serão realizados com raízes, caules e folhas de Urera baccifera, a fim de elucidar sua composição química e analisar seu potencial tóxico.
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RETINOL E CAROTENÓIDES EM PACIENTES HEMODIALISADOS E SEUS REFLEXOS FISIOPATOLÓGICOS / RETINOL E CAROTENOIDS IN HEMODIALYSIS PATIENTS AND THEIRS FISIOPATHOLOGICS REFLEXES

Roehrs, Miguel 20 January 2009 (has links)
Chronic renal failure (CRF) is a slow and gradual decline of renal function and it constitutes a major public health problem in our country. The haemodialysis treatment is the standard to which these patients are submitted. Despite increasing the survival of the patient, it is unable to fully correct the metabolic disorders. This procedure has amplified oxidative stress, which is very common among patients with CRF. These disorders added to the oxidative stress are the main factors that can trigger the development of vascular diseases. And these are the main cause of morbidity and mortality in these patients. It is also important to study the nutrition condition in these patients, related to vitamins and carotenoids, since exogenous antioxidants could potentially have a protective role against vascular diseases. In this study it was quantified the blood levels of vitamin A (retinol), vitamin E (α-and γ-tocopherol), carotenoids (lycopene, lutein, zeaxanthin, β -cryptoxanthin, α-and β -carotene),biomarkers of oxidative stress, as reduced glutathione (GSH), malondialdehyde (MDA), δ-aminolevulinate dehydratase (ALA-D), glutathione peroxidase (GPx), catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD), and some biochemical parameters (urea, creatinine, lipid profile : total cholesterol, LDL cholesterol, HDL cholesterol and triglycerides and their relation) in patients with CRF submitted to the treatment of haemodialysis (HD) (n = 29) and a group of healthy subjects (control group, n = 20). The levels of retinol were significantly increased in haemodialysis patients. Among carotenoids, only the α- carotene and lycopene showed a significant decrease in patients. The plasma MDA and erythrocyte GSH levels and the activities of enzymes SOD and CAT were increased in HD, unlike the GPx and ALA-D that were reduced. The biochemical parameters urea and creatinine levels were increased, as observed in the parameters of the lipid profile (total cholesterol, LDL and triglycerides), already the HDL cholesterol was decreased. The total cholesterol / cholesterol HDL and LDL cholesterol / HDL cholesterol also known as coronary risk index were increased about three times in haemodialysis patients. Besides, the retinol showed negative correlation with the enzyme ALA-D and positive correlations with the MDA, SOD and CAT. The levels of lycopene had negative correlations with the MDA, LDL cholesterol and with LDL cholesterol / HDL cholesterol. The results obtained suggest that HD patients have some disorders for some vitamins, carotenoids and endogenous enzymes. Among the vitamins, the retinol appears in high concentrations and act as an oxidant agent / pro-oxidant. Among the carotenoids, the low concentrations of lycopene may represent an additional factor in atherogenesis, since it has antioxidant and hypocholesterolemic activity. / A insuficiência renal crônica (IRC) é uma lenta e progressiva diminuição da função renal sendo um dos principais problemas de saúde pública do nosso país. A hemodiálise é o tratamento padrão aos quais estes pacientes são submetidos. Apesar de aumentar a sobrevida do paciente, ele é incapaz de corrigir totalmente os distúrbios metabólicos. Esse procedimento acaba amplificando o estresse oxidativo muito comum em pacientes com IRC. Esses distúrbios somados ao estresse oxidativo são os principais fatores que podem desencadear o desenvolvimento de doenças vasculares e, sabe-se que estas são as principais causadoras de morbidade e mortalidade nestes pacientes. Por outro lado, é importante estudar a condição micronutricional nestes pacientes, relacionada a vitaminas e carotenóides, uma vez que, substâncias exógenas potencialmente antioxidantes poderiam exercer um papel protetor contra as doenças vasculares. Por isto, a avaliação conjunta dos níveis de algumas vitaminas, carotenóides, parâmetros do estresse oxidativo e ainda parâmetros bioquímicos em pacientes com IRC submetidos ao tratamento de hemodiálise são relevantes. Neste estudo foram quantificados os níveis sangüíneos de vitamina A (retinol), vitamina E (α-e γ- tocoferol), carotenóides (licopeno, luteína, zeaxantina, β-criptoxantina, α- e β-caroteno); biomarcadores do estresse oxidativo, como glutationa reduzida (GSH),malondialdeído (MDA), atividade das enzimas δ-aminolevulinato desidratase (ALA-D), glutationa peroxidase (GPx), catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD), e alguns parâmetros bioquímicos (uréia, creatinina; perfil lipídico: colesterol total, colesterol LDL, colesterol HDL e triglicerídeos e suas relações) em pacientes com IRC submetidos ao tratamento de hemodiálise (HD) (n=29) e em um grupo de indivíduos saudáveis (grupo controle; n=20). Os níveis de retinol foram significativamente aumentados nos pacientes HD. Dos carotenóides, apenas o licopeno e o α- caroteno apresentaram diminuição significativa nos pacientes. Os níveis de MDA plasmático e GSH eritrocitária e as atividades das enzimas SOD e CAT estavam aumentados nos HD; diferentemente da GPx e da ALA-D que estavam diminuídas. Em relação aos parâmetros bioquímicos, os níveis de uréia e creatinina estavam aumentados, assim como os parâmetros do perfil lipídico (colesterol total, LDL e triglicerídeos), o colesterol HDL estava diminuído. A relação colesterol total/colesterol HDL e colesterol LDL/colesterol HDL também conhecidos como índice de risco coronariano estavam aumentados cerca de três vezes nos pacientes hemodialisados. Ainda, o retinol apresentou correlação negativa com a enzima ALA-D e correlações positivas com o MDA, SOD e CAT. Os níveis de licopeno apresentaram correlações negativas com o MDA, colesterol LDL e com a relação colesterol LDL/ colesterol HDL. Através dos resultados obtidos os pacientes HD apresentam algumas desordens em relação a algumas vitaminas, carotenóides e enzimas endógenas. Dentre as vitaminas, o retinol em concentrações elevadas pode ser sugerido como um agente oxidante/pro-oxidante. Dentre os carotenóides, baixas concentrações de licopeno podem representar um fator adicional na aterogênese, pois possui tanto ação antioxidante quanto hipocolesterolêmica.
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PARTICIPAÇÃO DO SISTEMA GABAérgico NO MECANISMO DE AÇÃO ANESTÉSICA DOS ÓLEOS ESSENCIAIS DE Aloysia triphylla E Cymbopogon flexuosus EM JUNDIÁS (Rhamdia quelen) / PARTICIPATION OF THE GABAergic SYSTEM IN THE ANESTHETIC ACTION MECHANISM OF Aloysia triphylla AND Cymbopogon flexuosus ESSENTIAL OILS IN SILVER CATFISH (Rhamdia quelen)

Santos, Alessandro Casale dos 21 March 2016 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study demonstrated the sedative and anesthetic activity of the essential oil (EO) of Cymbopogon flexuosus in the silver catfish (Rhamdia quelen). The time for induction and recovery of this EO was compared with the EO of Aloysia triphylla, due to the similarity between their major components: α-citral (geranial) and β-citral (neral). Both EOs induced anesthesia at concentrations from 150 to 300 μL L-1 and sedation at 25 μL L-1. The EO of C. flexuosus was faster in inducing the initial stages of anesthesia, but there was no significant difference to reach deep anesthesia, and there was a significantly longer recovery time. Cooperative relations and the modulation of the benzodiazepine (BDZ) site of GABAa as a mechanism of action of both EOs was verified from the addition of diazepam and flumazenil to experiments (BDZ site of GABAa agonist and antagonist, respectively). The addition of diazepam (150 μM) induced potentiation in concentrations of 25, 150 and 300 μL L-1 both EOs without significant change in anesthesia recovery time. Flumazenil (10 μM) reversed the diazepam-induced anesthesia, but not the anesthesia induced by EOs at concentrations of 150 and 300 μL L-1, thus the EO of C. flexuosus induced effective sedation and anesthesia without short-term mortality and the modulation of the BDZ site of the GABAa in the anesthetic action mechanism of both EOs in this study was not demonstrated. / Este estudo demonstrou as atividades sedativa e anestésica do óleo essencial (OE) de Cymbopogon flexuosus em jundiás (Rhamdia quelen). Os tempos de indução e recuperação relatados para esse OE foram comparados com o OE de Aloysia triphylla devido à semelhança entre os seus principais componentes: α-citral (geranial) e β-citral (neral). Ambos os OEs induziram anestesia nas concentrações de 150 a 300 μL L-1 e sedação a partir de 25 μL L-1. O OE de C. flexuosus induziu mais rapidamente fases iniciais da anestesia, mas não houve diferença significativa para alcançar o estágio de anestesia profunda, além de induzir um tempo de recuperação significativamente mais longo. As relações cooperativas e a modulação do site benzodiazepínico (BDZ) do receptor GABAa como mecanismo de ação de ambos OEs foram testados a partir da adição de diazepam e flumazenil aos experimentos (agonista e antagonista do site BDZ do GABAa, respectivamente). A adição de diazepam (150 μM) potencializou o efeito de ambos os OEs nas concentrações de 25, 150 e 300 μL L-1, sem induzir alteração significativa nos tempos de recuperação anestésica. O flumazenil (10 μM) reverteu a anestesia induzida pelo diazepam, mas não a anestesia induzida pelos OEs nas concentrações de 150 e 300 μL L-1, portanto o OE de C. flexuosus induziu sedação e anestesia efetivas sem mortalidade a curto prazo e a modulação do site BDZ do GABAa como mecanismo de ação anestésica de ambos OEs não ficou demonstrada neste estudo.
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AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE DE TRÊS COMPOSTOS DO ÓLEO DE MELALEUCA SOBRE O Trypanosoma evansi / EVALUATION OF THE ACTIVITY OF THREE COMPOUNDS OF MELALEUCA OIL AGAINST Trypanosoma evansi

Baldissera, Matheus Dellaméa 15 February 2016 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed the evaluation of the trypanocidal activity of terpinen-4-ol, γ-terpinene and α-terpinene against Trypanosoma evansi in vivo and in vitro. The in vitro assay was performed in culture medium of T. evansi, using three different concentrations of each compound (0.5, 1.0 and 2.0%), individually and in synergism. Motile (live) trypomastigotes were counted using a Neubauer chamber after 1, 3, 6 and 9 hours of incubation. Death of parasites occurred in a concentration-dependent manner, except for α-terpinene that was able to eliminate all parasites after 1 hour of incubation at all concentrations tested. Seventy mice were equally assigned into 10 groups (A to J) for the in vivo tests. Group A served as a negative control (healthy animals); groups B - J were infected with 0.1 mL of blood containing 105 T. evansi trypomastigotes. Group B served as a positive control; groups C, D and E received oral doses of 1.0 mL kg-1 of terpinen-4-ol, γ-terpinene and α-terpinene, respectively. Associations of the three compounds were orally administered to groups F I: terpinen-4-ol + γ-terpinene to group F, terpinen-4-ol + α-terpinene to group G, α-terpinene + γ-terpinene at 1.0 mL kg-1 (0.5 mL kg-1 for each compound) to group H, terpinen-4-ol + γ-terpinene + α-terpinene at 1.0 mL kg-1 (0.335 mL kg-1 of each compound) to group I. A therapeutic dose of diminazene aceturate (single dose of 3.5 mg kg-1, intraperitoneally) was administered to Group J aiming test validation. Animals in group E (treated with α-terpinene) showed an increase of longevity when compared to animals in group B. However, no curative effectiveness was observed, since all animals in this group died during the observation period. In order to evaluate the association between α-terpinene and diminazene aceturate, twenty-eight mice were assigned into 4 groups (A, B, C and D, n = 7). Group A included animals uninfected (negative control); group B was composed by infected animals (positive control); group C consisted of infected animals treated with diminazene aceturate (single dose of 3.5 mg kg-1, im); and group D consisted of infected animals treated with an association of diminazene aceturate (single dose of 3.5 mg kg-1, im) and α-terpinene (1.0 ml kg-1, orally administered for 10 days). It was observed, as a result of this experiment, an increase in the curative effectiveness (57.14%) in group D when compared to group C, which showed only 14.28% of curative effectiveness. Based on these results, α-terpinene was the compound present in M. alternifolia essential oil that showed trypanocidal activity. / O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade tripanocida do terpinen-4-ol, gama-(γ)-terpinen e alfa-(α)-terpinen contra o Trypanosoma evansi in vitro e in vivo. Os testes in vitro foram realizados em meio de cultura contendo T. evansi, utilizando-se três concentrações de cada composto (0.5, 1.0 e 2.0%) de forma individual e em associação. A contagem de tripomastigotas vivas foi realizada em câmara de Neubauer após 1, 3, 6 e 9 horas pós-incubação. A partir dos testes in vitro, foi possível observar a morte dos parasitos de forma concentração-dependente, exceto o composto α-terpinen que foi capaz de eliminar todos os parasitos 1 h pós-incubação em todas as concentrações testadas. Para realização dos ensaios in vivo, primeiramente foram utilizados 70 camundongos divididos em 10 grupos (A ao J), com sete animais cada grupo. O grupo A serviu como controle negativo (animais sadios); grupos de B a J foram infectados com 0,1 mL de sangue contendo 105 tripomastigotas com T. evansi. O grupo B serviu como controle positivo; grupos C, D e E receberam terpinen-4-ol, γ-terpinen e α-terpinen via oral na dose de 1.0 mL kg-1, respectivamente. O grupo F recebeu a associação dos compostos terpinen-4-ol + γ-terpinen, grupo G recebeu a associação dos compostos terpinen-4-ol + α-terpinen; grupo H recebeu a associação do γ-terpinen + α-terpinen via oral na dose de 1.0 mL kg-1 (0.5 mL kg-1 de cada composto). O grupo I recebeu a associação dos compostos terpinen-4-ol + γ-terpinen + α-terpinen via oral na dose de 1.0 mL kg-1 (0.335 mL kg-1 de cada composto). O grupo J foi tratado com aceturato de diminazeno na dose terapêutica (dose única de 3.5 mg kg-1, via intramuscular) para validação do teste. Foi possível verificar que os animais do grupo E (tratados com α-terpinen) apresentaram um aumento da longevidade quando comparados ao grupo B, porém sem eficácia curativa, pois todos os animais deste grupo morreram durante o período de observação da parasitemia. A partir disto, um segundo experimento foi realizado testando a associação entre o α-terpinen e o aceturato de diminazeno. Foram utilizados 28 camundongos divididos em 4 grupos (A, B, C e D; n=7). O grupo A foi formado por animais não infectados (controle negativo), o grupo B foi formado por animais infectados (controle positivo), o grupo C foi formado por animais infectados e tratados com aceturato de diminazeno (dose única de 3.5 mg kg-1, via intramuscular), e o grupo D foi formado por animais infectados e tratados com associação de aceturato de diminazeno (dose única de 3.5 mg kg-1, via intramuscular) mais α-terpinen (1.0 mL kg-1 via oral durante 10 dias). A partir deste resultado, foi possível observar um aumento da eficácia curativa (57.14 %) no grupo D quando comparado ao grupo C, que obteve apenas 14.28 % de eficácia curativa. Baseado nestes resultados, o α-terpinen foi o composto presente no óleo essencial de M. alternifolia que apresentou atividade tripanocida.

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