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Estudo das alterações neuropatológicas e do comportamento em tarefas hipocampo-dependentes induzidas pela encefalite experimental aguda associada ao vírus piryREIS, Renata Rodrigues dos 05 October 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / FINEP - Financiadora de Estudos e Projetos / This study investigated neuropathological changes and behavior in hippocampaldependent tasks induced by encephalitis caused by Piry arbovirus. Three temporal windows (3, 7 and 10 days post infection) and two environmental conditions were assessed to measure possible effects of the environmental enrichment on infection- induced changes. Two months old female mice, maintained in impoverished (IE) or in enriched environment (EE) by six months were tested in burrowing, open field and olfactory discrimination. After this period, all animals were intranasally inoculated with 5 μl of normal (NBH) or infected brain homogenate with Piry arbovirus (PY) and then reorganized into the following groups with seven animals each: IENBH, IEPY, EENBH and EEPY. After three, seven and ten days post instillation (dpi), they were perfused with aldehyde fixative. Their brains were removed,
sectioned and the sections were processed either to imunohistochemical with anti-Piry or
anti-Iba-1 to marker viral antigens and macrophage/microglial cells, respectively.
Stereological quantifications were done in each CA3 layer using the optical fractionator method. Optical fractionator estimations revealed no changes in the number of microglial cells, indicating that this infection was not able to alter the number of cells, but microglia morphology, that revealed a higher number of pro-inflammatory morphological profiles in the IEPY than EEPY. Viral antigens were detected in the olfactory bulb, pyriform cortex, striatum and fimbria, following a sequence that mimics the anatomical olfactory pathway. In IEPY burrowing activity decreased in the first window and remained as such until the last window whereas in EEPY no changes were detected. Immobility increased in IEPY and remained altered until the last window; the number of crossing lines increased in the second and last windows; and the time on the center zone decreased in the second and last windows. In EEPY the immobility increased and correspondently the crossing lines reduced just in the second window. In olfactory discrimination, the main affected group was the IEPY, that didn‟t distinguish the two odors in the last window; in contrast EEPY group remained
unaltered. / Este trabalho investiga as alterações neuropatológicas e do comportamento em tarefas hipocampo-dependentes induzidas pela encefalite experimental aguda associada ao vírus Piry. Três janelas temporais (3, 7 e 10 dias após a inoculação) foram avaliadas e dois ambientes testados de forma a avaliar se o enriquecimento ambiental influencia as alterações associadas à infecção. Camundongos fêmeas de dois meses de idade foram mantidos em ambientes empobrecido (IE) ou enriquecido (EE) durante seis meses e foram testados para as atividades de burrowing, de campo aberto e de discriminação olfatória. Após esse período os animais foram inoculados por via intranasal com 5μl de homogenado de cérebro normal (NBH) ou homogenado de cérebro infectado pelo vírus Piry (PY) e então reorganizados nos seguintes grupos: IENBH, IEPY, EENBH e EEPY, com sete animais cada. Três, sete e dez dias após a inoculação (dpi), os animais de cada janela temporal foram perfundidos com fixador aldeídico. Os encéfalos foram removidos, seccionados e as secções foram processadas para imunohistoquímica para anti-Piry e para anti-Iba-1 para marcação dos antígenos virais e de macrófagos/micróglias, respectivamente. Quantificações estereológicas foram feitas em cada camada celular de CA3 usando o método do fracionador óptico. Estimativas do fracionador óptico mostraram que não houve alteração da estimativa do número total de micróglias em CA3 nos grupos analisados, indicando que a infecção não alterou o número de células, mas a morfologia das micróglias, que se mostraram mais ativadas no grupo IEPY do que no grupo EEPY. Os resultados revelaram a presença de antígenos virais no bulbo olfatório, córtex piriforme, estriado e fimbria, ao longo da via olfatória. A atividade de burrowing no grupo IEPY diminuiu na primeira janela temporal e permaneceu baixa até a última janela, enquanto que no grupo EEPY não houve alteração neste teste. Na atividade de campo aberto, o grupo IEPY aumentou o tempo imóvel já na primeira janela e continuou aumentando até a última; reduziu o número de linhas cruzadas na segunda janela e permaneceu reduzido na última; e diminuiu o tempo na zona central na segunda e última janela. Já o grupo EEPY, aumentou o tempo imóvel e reduziu o número de linhas cruzadas na segunda janela. No teste de discriminação olfatória, o principal grupo afetado foi o grupo IEPY, que não discriminou os dois odores na última janela, enquanto que o grupo EEPY não teve alteração na discriminação.
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Envelhecimento, linguagem e memória visuo-espacial: um estudo comparativo exploratório do desempenho humano em testes neuropsicológicos selecionadosSOARES, Fernanda Cabral 06 December 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012 / O reconhecimento dos limites entre o envelhecimento normal e o patológico é essencial para a adoção de políticas de saúde baseadas em evidências para o grupo etário acima de 65 anos. Este estudo é parte de um esforço sistemático que o grupo de pesquisa do Laboratório de Investigações em Neurodegeneração e Infecção da Universidade Federal do Pará tem feito para fornecer informações translacionais sobre a neurobiologia do envelhecimento normal e alterada. A meta principal em longo prazo é permitir políticas públicas para o envelhecimento saudável na Região Amazônica. No presente trabalho investigamos os efeitos do envelhecimento sobre os desempenhos em testes neuropsicológicos selecionados para avaliar aprendizagem, memória e alterações de linguagem. 29 adultos jovens (29,9 ± 1,06 anos) e 31 idosos (74,1 ± 1,15 anos) saudáveis foram submetidos aos testes e os resultados de seus desempenhos foram comparados por testes paramétricos e estatística multivariada. Uma anamnese e uma variedade de testes cognitivos, incluindo Mini Exame do Estado Mental, tarefas visuo-espaciais de aprendizagem e de memória da bateria de testes neuropsicológicos automatizados - CANTAB e testes de linguagem incluindo fluência verbal semântica e fonológica, teste de nomeação de Boston reduzido, performance narrativa utilizando a figura “o roubo dos biscoitos” e alguns testes da Bateria Montreal de Comunicação - MAC. O programa BioEstat versão 5.0 e o pacote estatístico SPSS foram utilizados para a análise. O teste paramétrico t de Student ou o não paramétrico de Mann-Whitney foram aplicados para detectar diferenças significativas (fixadas em valores de p <0,05). Os grupos foram pareados por escolaridade e incluiu homens e mulheres. A análise das subcategorias que compõem o MEEM mostrou diferença significativa apenas na recuperação da memória de evocação de lista de palavras, em que o grupo de idosos apresentou pior desempenho em comparação com o grupo de jovens. Foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre os desempenhos de idosos e jovens adultos nos seguintes testes de linguagem: 1) Nomeação de Boston, 2) Testes de Narrativa, 3) Metáforas; 4) Prosódia Emocional e Linguística. Em comparação com os adultos jovens, indivíduos idosos apresentaram pior desempenho em 10 medidas diferentes nos testes de memória visuo-espacial e de aprendizagem do CANTAB. Distâncias Euclidianas e análise discriminante obtidas a partir do CANTAB e dos testes de linguagem demonstraram que os primeiros distinguem os grupos com maior resolução. Os efeitos do envelhecimento sobre o desempenho nos testes neuropsicológicos selecionados revelam que a Bateria CANTAB, empregada para testar a memória visuo-espacial, é mais sensível e discrimina melhor a formação de subgrupos tanto no grupo de adultos jovens quanto no grupo de idosos. Por essa razão sugerimos que a aplicação em larga escala de testes selecionados da bateria CANTAB, tanto em estudos transversais como em longitudinais, vai aumentar nossa capacidade de resolução na distinção dos limites entre o envelhecimento normal e o patológico. / The recognition of the limits between normal and pathological ageing is essential for the adoption of evidence based health policies for people with 65 or more years old. This study is part of a systematic effort that the research group of the Laboratory of Investigations in Chronic Neurodegeneration and Infection at the Federal University of Pará has been doing to provide translational information on the normal and altered neurobiology of aging. The long term main goal is to enable evidence based public policies for health ageing in the Amazon Region. This report aims to investigate the effects of aging on the performances in selected neuropsychological tests to assess learning, memory and language impairments. 29 young adult (29.9 ± 1.06 years) and 31 older adults (74.1 ± 1.15 years) were selected and the results of their performances were compared using both parametric tests and multivariate statistical analysis. A general assessment and a variety of cognitive tests including Mini Mental State Examination (MMSE), selected visuo-spatial learning and memory tasks from the Cambridge Neuropsychological Test Automated Battery (CANTAB) and language tests (Phonological and Semantic Verbal Fluencies, Reduced Boston Naming, Narrative Performance on the Boston “cookies theft picture” description and in some of the Battery Montreal Evaluation of Communication - MAC tests. BioEstat version 5.0 and SPSS packages of ware were used for statistical analysis. Parametric Student's t test or nonparametric Mann-Whitney test were applied to detect significant differences (set at p values <0.05). Groups were matched for education and included both males and females. The analysis of subcategories that comprise the MMSE showed significant difference only in the word list memory recall, in which the elderly group showed worse performance compared to the young group. There were statistically significant differences between aged and young adults performances in the following language tests: 1) Reduced Boston Naming, 2) Narrative Performance on the Boston “cookies theft picture” description, 3) Metaphors; 4) Emotional and Linguistic Prosody. As compared to the young adults, aged subjects showed worse performances on ten different measurements of visuo-spatial CANTAB memory and learning tests. Euclidean distances and discriminant analysis from cluster analysis applied to CANTAB and language results demonstrated that CANTAB tests distinguished the groups with higher resolution. The effects of aging o neuropsychological tests results revealed that the visual memory selected tests from CANTAB battery, are more sensitive and better discriminates subgroups in both young adults and aged voluntaries. We concluded that the large-scale application of CANTAB selected tests, both in longitudinal and in cross-sectional studies, will increase our ability to distinguish the limits between normal and pathological aging.
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Acuidade visual e matriz extracelular no córtex visual primário: alterações associadas à privação monocular precoce e ao enriquecimento ambientalSILVA, Nonata Lucia Trévia da 08 November 2012 (has links)
Submitted by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2013-01-25T14:29:10Z
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Previous issue date: 2012 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo do presente trabalho e analisar a influencia do enriquecimento ambiental sobre a acuidade visual e a distribuição das redes perineuronais (RPNs) no córtex visual primário de camundongos submetidos a privação monocular durante o período critico pos-natal. Camundongos suíços albinos fêmeas foram submetidos a sutura da pálpebra direita no 10o dia pos-natal (M, n=16), enquanto que os animais do grupo binocular não foram submetidos a nenhum procedimento cirúrgico (B, n=16). Ao completarem 21 dias, os animais foram subdivididos em: ambiente padrão e ambiente enriquecido, constituindo os grupos M.AP, M.AE, B.AP e B.AE. Após três meses, os animais foram submetidos ao teste de acuidade visual, perfundidos e secções coronais de seus cérebros processadas para histoquímica da lectina Wisteria floribunda e posterior quantificação através do método estereologico do fracionador óptico. Os animais do grupo B.AP apresentaram acuidade visual de 0.48 ciclos/grau, enquanto que aqueles alojados em ambiente enriquecido (B.AE) apresentaram um melhor desempenho do teste, atingindo 0.996 ciclos/grau. A acuidade visual foi significantemente menor nos animais submetidos a privação monocular (M.AP 0.18 ciclos/grau; M.AE 0.4 ciclos/grau). Os resultados estereologicos revelaram que o ambiente enriquecido aumenta o numero de RPNs tipo 1 e de RPNs total nas camadas supragranular e granular em ambos os hemisférios nos camundongos submetidos a privação monocular (ANOVA dois critérios, p<0.05), sendo que essa diferença na camada granular e decorrente principalmente do aumento das redes perineuronais da matriz extracelular no hemisfério direito. Na camada infragranular, os animais do grupo M.AE apresentaram um aumento apenas no numero de RPNs tipo 1. / The aim of the present study is to analyze the influence of enriched environment on the visual acuity and on the distribution of perineuronal nets (PNNs) in the primary visual cortex of albino mice that underwent monocular deprivation during the critical period of postnatal development. Mice at 10th postnatal day, were monocular deprived through right eye-lid sutured (M, n = 16) and the control group animals were not submitted to any cirurgical procedures (B, n = 16). After weaning, on postnatal day 21, animals were subdivided in: standard environment (AP) and enriched environment (AE), constituting the following groups: M.AP, M.AE, B.AP and B.AE. After 3 months, animals were submitted to grating visual acuity tests, perfused and coronal sections of their brains processed for Wisteria floribunda agglutinin to posterior stereological quantification through optical fractionator method. B.AP animals present visual acuity of 0.48 cycles/degree, while those raised in enriched environment (B.AE) present a better performance at visual test, reaching 0.996 cycles/degree. Animals with monocular deprivation had significantly lower visual acuity (M.AP 0.18 cycles/degree; M.AE 0.4 cycles/degree). Stereological quantifications revealed that enriched environment increases type 1 and the total number of perineuronal nets at supragranular and granular layers in both hemispheres of deprived animals (ANOVA, two-ways, p < 0.05) and this difference at granular layer is due to an increase of perineuronal nets mainly at the right hemisphere (ipsilateral to the monocular deprivation). At infragranular layer, M.AE animals presented an increase only at the
number of type 1 PNNs in both hemispheres.
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Efeitos protetores da prolactina em cultivo glial de córtex de ratos expostos ao metilmercúrioSANTOS, Andréa Cristina Monteiro dos 04 April 2008 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-03-04T19:38:48Z
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Previous issue date: 2008 / IEC - Instituto Evandro Chagas / O metilmercúrio (MeHg) é um composto comprovadamente neurotóxico cujos mecanismos degenerativos ainda não estão bem esclarecidos. No sistema nervoso central o MeHg é seqüestrado do interstício preferencialmente por astrócitos diminuindo a carga de exposição neuronal. Estudos in vitro demonstraram que a prolactina (PRL) possui efeitos mitogênicos sobre astrócitos, além de regular a expressão de citocinas pró-inflamatórias. Este estudo teve por objetivo investigar efeitos protetores da prolactina sobre distúrbios provocados por MeHg na viabilidade, morfologia, expressão de GFAP (glial fibrillary acidic protein), mitogênese e liberação de interleucina-1β (IL-1 β) em cultivo glial de córtex cerebral de ratos neonatos focalizando as células astrogliais. A exposição a diferentes concentrações de MeHg (0,1, 1, 5 e 10 μM) a diferentes intervalos de tempo (2, 4, 6, 18 e 24 h) ocorreu em cultivos com 10% de soro fetal bovino (SFB). Os resultados obtidos demonstraram diminuição progressiva de 20% e 62% da viabilidade celular após exposição às concentrações de 5 e 10 μM MeHg no tempo de 24 h, respectivamente, pelo método do 3-4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difenil tetrazólio bromide (MTT) e distúrbios na expressão e distribuição de GFAP. Diferentes concentrações de prolactina (0.1, 1 e 10 nM) foram adicionadas em meio sem soro fetal bovino (FBS) para avaliar sua ação proliferativa isoladamente. Esta ação foi confirmada com indução de mitogênese em cerca de 4.5x em 18 h de observação na maior concentração (10 nM PRL). Nestas condições (sem SFB) foram analisados os efeitos da associação de 1 nM PRL + 5μM MeHg em teste de viabilidade, expressão de GFAP, morfologia celular, índice mitótico e liberação de IL-1β com o objetivo de estudar possíveis efeitos citoprotetores deste hormônio. A PRL atenuou os distúrbios provocados pelo MeHg, aumentando a viabilidade em 33%, a expressão de GFAP, proliferação celular (4x) e atenuando os distúrbios morfológicos, incluindo picnose nuclear e lise. Adicionalmente, a PRL induziu amplificação da liberação de IL1β quando associada ao MeHg. Estes achados confirmam a hipótese de que a PRL possa atuar como um agente citoprotetor em cultura primária de glia e particulamente em astrócitos, ação esta aditiva aos seus efeitos mitogênicos. / Methylmercury (MeHg) is a compound highly neurotoxic and its degenerative mechanisms are not very clear yet. In Central Nervous System, MeHg is mostly uptake by astrocytes, decreasing neuronal exposition. Studies demonstrated that prolactin (PRL) has mitogenic effects on astrocytes and it can regulate pro-inflammatories cytokines expression. The aim of this work was to verify the protective effects of PRL on disturbs provoked by MeHg on cellular viability, morphology, GFAP (glial fibrillary acidic protein) expression, mitogenesis and release of interleukin-1β in glia primary culture of cerebral cortex of newborn rats, with astrocytes in focus. Glia primary culture were exposed to differents concentrations of MeHg (0,1, 1, 5 e 10 μM) in differents time intervals (2, 4, 6, 18 e 24 h) in medium with fetal bovine serum 10%. Results demonstrated progressive decreasing of 20% e 62% on cellular viability after exposed to 5 e 10 μM MeHg for 24 h, respectively, by MTT [3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] assay and disturbs in the GFAP expression and distribution. Differents concentrations of PRL (0.1, 1 e 10 nM) were added in free serum medium to evaluate it proliferative action. This was confirmed by mitogenesis induction around 4.5x in 18h at 10 mM PRL. In this conditions (free serum) were evaluated the effects of co-treatment of 1 nM PRL + 5 μM MeHg on cellular viability, morphology, GFAP expression, mitotic index and release of IL-1β. PRL attenuated disturbs caused by MeHg, increasing viability in 33%, GFAP expression, cellular proliferation (4x), and attenuating morphologic alterations like nuclear picnosis and lisis. These findings prove that PRL can act like a cytoprotective agent in primary culture of glia, particularly in astrocytes, in addition to its mitogenic effects.
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Análise de mutações no gene GJB2 em indivíduos com deficiência auditiva neurossensorial não sindrômicaPAULA, Danilo Monteiro de 11 1900 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-03-04T20:40:21Z
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Previous issue date: 2012 / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / A surdez é o defeito sensorial mais frequente nos seres humanos, podendo ter diferentes
causas ambientais ou hereditárias. Em países desenvolvidos, estimativas sugerem que em cada
1000 nascidos dois manifestam algum tipo de surdez e mais de 60% desses casos são de
origem genética. No Brasil, muito pouco ainda é conhecido sobre surdez hereditária, acreditasse
que quatro em cada mil recém-nascidos manifestem algum tipo de deficiência auditiva e
que a frequência da surdez causada por fatores genéticos seja da ordem de 16%, enquanto os
84% restantes dos casos sejam causado por fatores ambientais e de etiologia desconhecida. As
várias formas de surdez hereditária já identificada são muito raras, com exceção de uma
causada por mutações no gene GJB2 que codifica a conexina 26. As conexinas representam
uma classe de família de proteínas responsáveis pela formação de canais de comunicação
entre células adjacentes (Gap Junctions), esta comunicação entre células adjacentes é
fundamental para o crescimento e para a diferenciação de tecidos. Até o presente foram
descritas 102 mutações do GJB2 que estão associadas com surdez hereditária. Três mutações
se destacam por apresentarem frequência elevada em grupos populacionais específicos:
35delG entre europeus e brasileiros; 167delT entre Judeus askenazitas; e 235delG entre
asiáticos. Neste trabalho, foi realizada a análise molecular de toda a sequência codificadora
do gene GJB2 (Conexina 26) em uma amostra populacional constituída de 30 indivíduos não
aparentados com surdez esporádica pré-lingual não sindrômica provenientes da população de
Belém do Pará. O DNA foi obtido através de amostras de sangue periférico e analisado por
meio da técnica convencional de PCR seguida do sequenciamento automático. Mutações no
gene da Conexina 26 foram observadas em 20% da amostra (6/30). As mutações 35delG e
R143W foram observadas em um único paciente (1/30), as duas no estado heterozigoto e
relacionadas com a surdez do paciente. Duas outras mutações foram observadas em diferentes
indivíduos: G160S em 1 paciente correspondendo a 3,3% (1/30); e V27I foi observado em
4 indivíduos com frequência alélica de 0.08; contudo as mutações G160S e V27I não estão
relacionadas com a surdez. Neste trabalho as frequências observadas de mutações são
equivalentes a frequências observadas em outras populações anteriormente estudadas. Esses
resultados indicam que mutações no gene GJB2 são importantes causas de surdez em nossa
região e não se pode excluir que a possibilidade da surdez apresentada por alguns indivíduos
possa ser decorrente, principalmente, por fatores ambientais como processos infecciosos
ocorridos durante a gestação, ou nos primeiros meses de vida. / Deafness is the most frequent sensorial defect in human beings and it may have different
causes since environmental to hereditary. In developed countries the estimates suggest that in
each 1000 births some kind of deafness is expressed and more than 60% of the cases have a
genetic origin. In Brazil, the hereditary deafness is not well-known. It is believed that four in
each thousand newborns express some kind of hearing defect and that the frequency of
deafness caused by genetic factors is estimated in 16%, while the 84% remaining cases are
caused by environmental factors and have an unknown etiology. The many forms of
hereditary deafness already identified are very rare, except for the one which is caused by
mutations in the GJB2 gene which codifies the connexin 26. The connexins represent a class
of a protein family which is responsible for the formation of communications channels
between adjacent cells (Gap Junctions), this communication is fundamental for the growth
and differentiation of the tissues. Until now there have been described 102 mutations of GJB2
gene which are associated to the hereditary deafness. Three mutations stand out because they
have high frequency in specific population groups: 35delG among Europeans and Brazilians,
167delT among Ashkenazi Jews, and 235delG among Asians. In this study, we performed a
molecular analysis of the entire coding sequence of the GJB2 gene (Connexin 26) in a
population sample consisted of 30 unrelated individuals with prelingual nonsyndromic
sporadic deafness from the population of Belém do Pará. DNA was obtained by peripheral
blood samples and analyzed by the conventional PCR followed by automatic sequencing.
Mutations in the Connexin 26 gene were found in 20% of the sample (6/30). The mutations
35delG and R143W were observed in one patient (1/30), both in the heterozygous and related
to the patient’s deafness. Two additional mutations were observed in different individuals:
G160S in a patient corresponding to 3.3% (1/30), and V27I was observed in 4 patients with
allele frequency of 0.08; however mutations G160S and V27I are not related deafness. In this
work the observed frequencies of mutations are equivalent to the frequencies observed in
other populations previously studied. These results indicate that mutations in the GJB2 gene
are important causes of deafness in our region and it cannot be excluded that the possibility of
deafness presented by some individuals may be caused, mainly, by environmental factors
such as infectious processes occurring during pregnancy or the first months of life.
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Neurodegeneração crônica em modelo murino: ensaios comportamentais e neuropatológicos na doença prion em fêmeas adultas de camundongos albinos suíçosOLIVEIRA, Roseane Borner de 30 April 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / No presente trabalho implantou-se como modelo experimental para estudos de neurodegeneração crônica a doença prion induzida pelo agente ME7 em fêmea adulta no camundongo Suíço albino. As alterações comportamentais e neuropatológicas seguem de perto as previamente descritas para o camundongo C57BL/6j com duas exceções: 1) o septum ao invés do hipocampo é a região onde se detectou mais precocemente o maior número de microglias ativadas e astrócitos reativos e onde houve a maior redução de redes perineuronais nos estágios iniciais da doença; 2) Em relação ao C57BL/6j o curso temporal da doença é em média 4 semanas mais longo (26 semanas) e os sintomas iniciais começam a aparecer 4 semanas mais tarde (16 semanas) na variedade Suíça albina. Semelhante ao encontrado no C57BL/6j não se encontrou diferença nas estimativas do número de neurônios nos animais inoculados com o agente ME7 em relação aos inoculados com homogenado cerebral normal 15 e 1 8 semanas após a inoculação. A análise comparada do número de microglias ativadas astrócitos reativos e redes perineuronais empregando o fracionador óptico revelou diferenças significativas nos animais sacrificados na 15ª em relação aos sacrificados na 18ª semana pós-inoculação, com aumento do número das primeiras e redução do número das últimas na 18ª semana (teste T, bi-caudal p<0.05). A análise de cluster seguida da análise discriminante dos resultados dos testes comportamentais da variedade Suíça albina aplicada a cada quinzena ao longo do curso temporal da doença, revelou que a remoção de comida é a única variável discriminante para detecção de dois grupos distintos: um grupo menor (em torno de 40%, n=4), mais sensível, onde a doença cursa mais rápido e os animais atingem a fase terminal em 22 semanas, e outro maior (em torno de 60%, n=6), menos sensível, onde os animais atingem a fase terminal em 26 semanas. Os resultados são importantes para estudos comparativos de imunopatologia dentro da mesma e entre variedades de modelos murinos de neurodegeneração crônica na doença prion induzida pelo agente ME7. / In the present report we described behavioral and neuropathological changes induced by ME7 prion agent inoculated into CA1 of the albino Swiss mice and confirmed previous descriptions in the murine model of prion disease C57Bl6J with two exceptions: 1) septal region present higher level of microglial activation and reactive astrocytosis 2) disease progression (from inoculation to death) is 4 weeks longer and on average, early behavioral changes start correspondently 4 weeks later in albino Swiss mice. Neuronal counts did not reveal any significant changes between the experimental groups. Comparative analysis of activated microglia and perineuronal nets by optical fractionators revealed significant differences between 15 and 18 weeks: the microglial total number increased in this period of time whereas perineuronal nets decreased (t test, two-tailed analysis p<0.05) Cluster and discriminant subsequent analysis applied to behavioral studies revealed that burrowing activity distinguished the occurrence of two subgroups with differential sensitivity to the ME7 agent: one group (40% of the subjects) where the disease progression is faster and the terminal stage is reached in 22 weeks and another one (60%) with slower progression and terminal stage at 26 weeks post-inoculation. The results are important for comparative studies of the immunoneuropathology of chronic neurodegenerative disorders in general and for prion disease itself.
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Influência de parâmetros espaciais sobre potenciais corticais provocados visuais gerados por estimulação pseudoaleatóriaARAÚJO, Carolina dos Santos 08 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As contribuições dos mecanismos de detecção de contraste ao potencial cortical provocado visual (VECP) têm sido investigadas com o estudo das funções de resposta ao contraste e de resposta à frequência espacial. Anteriormente, o uso de sequências-m para o controle da estimulação era restrito à estimulação eletrofisiológica multifocal que, em alguns aspectos, se diferencia substancialmente do VECP convencional. Estimulações únicas com contraste espacial controlado por sequências-m não foram extensivamente estudadas ou comparadas às respostas obtidas com as técnicas multifocais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da frequência espacial e do contraste de redes senoidais no VECP gerado por estimulação pseudoaleatória. Nove sujeitos normais foram estimulados por redes senoidais acromáticas controladas por uma sequência-m binária pseudoaleatória em 7 frequências espaciais (0,4 a 10 cpg) em 3 tamanhos diferentes (4º, 8º e 16º de ângulo visual). Em 8º, foram testados adicionalmente seis níveis de contraste (3,12% a 99%). O kernel de primeira ordem não forneceu respostas consistentes com sinais mensuráveis através das frequências espaciais e dos contrastes testados – o sinal foi muito pequeno ou ausente – enquanto o primeiro e o segundo slice do kernel de segunda ordem exibiram respostas bastante confiáveis para as faixas de estímulo testadas. As principais diferenças entre os resultados obtidos com o primeiro e o segundo slice do kernel de segunda ordem foram o perfil das funções de amplitude versus contraste e de amplitude versus frequência espacial. Os resultados indicaram que o primeiro slice do kernel de segunda ordem foi dominado pela via M, porém para algumas condições de estímulo, pôde ser percebida a contribuição da via P. Já o segundo slice do kernel de segunda ordem refletiu contribuição apenas da via P. O presente trabalho estende achados anteriores sobre a contribuição das vias visuais ao VECP gerado por estimulação pseudoaleatória para uma grande faixa de frequências espaciais. / The contributions of contrast detection mechanisms to the visual cortical evoked potential (VECP) have been investigated studying the contrast-response and spatial frequency-response functions. Previously, the use of m-sequences for stimulus control has been almost restricted to multifocal electrophysiology stimulation and, in some aspects, it substantially differs from conventional VECP. Single stimulation with spatial contrast temporally controlled by msequences was not extensively tested or compared to multifocal techniques. Our purpose was to evaluate the influence of spatial frequency and contrast of sinusoidal gratings on the VECP elicited by pseudo-random stimulation. Nine normal subjects were stimulated by achromatic sinusoidal gratings driven by a pseudo-random binary m-sequence at seven spatial frequencies (0.4-10 cpd) and three stimulus sizes (4º, 8º, and 16º of visual angle). At 8º of visual angle, it was also used six contrasts levels (3.12-99%). First order kernel had not provided a consistent measurable signal across spatial frequencies and contrasts that were tested – signal was very small or absent – while the second order kernel first and second slices exhibited reliable responses for the stimulus range. The main differences between results
obtained with the first and second slices of the second order kernel were the shape of the amplitude versus contrast and amplitude versus spatial frequency functions. The results indicated that the second order kernel first slice was dominated by M pathway, but for some stimulus condition some P pathway contribution could be found, while the second order kernel second slice reflected the P pathway contribution. The present work extended previous findings of the visual pathways contribution to VECP elicited by pseudo-random stimulation for a wider range of spatial frequencies.
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Indução de plasticidade cerebral por remoção da matriz extracelular após lesão isquêmica no córtex sensório-motor de ratosSOARES, Soanne Chyara da Silva 14 December 2012 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-08-02T16:04:45Z
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Previous issue date: 2012 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O acidente vascular cerebral (AVC) é a terceira maior causa de mortalidade e incapacidade no mundo e a principal causa de mortes no Brasil. Após a lesão isquêmica, pela capacidade limitada do Sistema Nervoso Central (SNC) se regenerar, os déficits funcionais geralmente são incapacitantes e permanentes. A incapacidade de regeneração decorre, dentre outros fatores, do acúmulo de proteoglicanos de sulfato de condroitina (PGSC) no local da lesão, inibindo a plasticidade no microambiente extracelular. A enzima condroitinase ABC (ChABC) tem se mostrado eficiente para degradar os PGSC, proporcionando plasticidade. Esta pesquisa se propõe a avaliar o efeito da remoção de PGSC após uma lesão isquêmica no córtex sensório-motor primário de ratos. Para tal, utilizou-se 20 ratos Wistar, em 4 grupos experimentais, controle e tratado, com tempo de sobrevida de 7 e 14 dias. Induziu-se uma lesão isquêmica através de microinjeções do vasoconstritor ET-1 (Endotelina-1) no córtex sensório-motor, implantou-se um polímero de Etileno vinil acetato saturado com ChABC (tratado) ou BSA (controle). Morfologicamente, avaliamos a área de lesão, que se mostrou sem diferença estatística entre grupo controle 7 dias (média de 1653,8 ± 162,57mm²), tratado 7 dias (média de 2067,3 ± 235,42mm²), controle 14 dias (média de 1267,16 ± 280,6mm²), tratado 14 dias (média de 1323,8 ± 297,05mm²) após lesão; a quantidade de astrócitos, que também se mostrou sem diferença estatística entre grupo controle 7 dias (média de 16,6±4,67 células/campo), tratado 7 (média de 21,07±1,87 células/campo) e controle 14 (média de 17,46±0,80 células/campo), tratado 14 (média de 18,51±2,60 células/campo) dias após lesão; e a expressão de controitin degradado, que qualitativamente foi mais expresso nos ratos tratados 7 e 14 dias após lesão. Comportamentalmente, no teste do cilindro, animais tratados tiveram índice de assimetria menor já em 7 dias após lesão, com diferença significativa entre os grupos. No teste da escada horizontal, os animais tratados tiveram menor diferença intragrupo que os controles. Em 7 dias após lesão, já estavam com o mesmo desempenho funcional que seu pré-cirúrgico. Os dados comportamentais demonstram que a ChABC foi eficaz na melhora do desempenho funcional de maneira precoce, o que significa que a degradação das PGSC abre uma janela plástica na lesão isquêmica cortical, sem influenciar no tamanho da lesão e quantidade de astrócitos na cicatriz glial, porém com melhora do desempenho funcional de maneira precoce. Novos estudos devem ser realizados, associando a ChABC a terapêuticas adjuvantes no tratamento de lesões isquêmicas experimentais. / Stroke is the third major cause of mortality and disability in whole word and the major cause of death in Brazil. After ischemic injury, functional deficits are generally severe and permanent, because Central Nervous System has a limitated capacity of regeneration. This limitated regeneration is caused, among other factors, by chondroitin sulfate proteoglycans (CSPG) accumulation in injury site, what causes inhibition of plasticity in extracellular microenvironment. Chondroitinase-ABC enzyme (ChABC) has been studied to remove CSPG, showing good results in increasing plasticity. This research aimed to evaluate effects of CSPG removing in rats submitted to ischemic injury in sensory-motor cerebral cortex. To achieve the aim, there were used 20 Wistar rats, divided in 4 experimental groups (control and treated) of 7 and 14 days of surviving times. There was induced ischemic injury in sensorymotor cortex by microinjections of endothelin-1 (ET-1), a vasoconstrictor peptide. Treatment was done with an implantation of an ethyl-vinyl-acetate polymer saturated with ChABC (treated-group) or BSA (control group). In morphological analysis, we evaluated injury area. There was no significant difference between treated and control groups, as can be seen in means of each group: control 7 days (1653,8 ± 162,57mm²), treated 7 days (2067,3 ±
235,42mm²), control 14 days (1267,16 ± 280,6mm²), treated 14 days ( 1323,8 ± 297,05mm²). Number of astrocytes was evaluated too, but there was no significant difference between treated and control groups, as we can see in means: control 7 days (16,6±4,67 cells/field), treated 7 days (21,07±1,87 cells/field) control 14 days (17,46±0,80 cells/field), treated 14 days (18,51±2,60 cells/field). The expression of degraded chondroitin was evaluated in qualitative analysis, showing major expression in treated-groups, 7 and 14 days after injury. In behavioral analysis, we have done two functional tests. In cylinder test, treated animals had less asymmetry in 7 days after injury, with significant difference in relation to control group. In horizontal ladder test, treated animals had less difference between surviving groups than control animals. In 7 days after injury, treated animals had the same performance of preoperated baseline. Behavioral performances showed that ChABC was efficient in to increase performances in earlier times of surviving. This means that CSPG removing opens plastic window in ischemic injuries, without influence in injury size or number of astrocytes in glial scar, but with functional increment. New studies have to be done, associated ChABC to supporting therapies in ischemic injuries treatment.
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Padrões neuropatológicos nas substâncias branca e cinzenta revelados por tomografia computadorizada ou ressonância magnética e déficits neurológicos correspondentes em crianças e com encefalopatia crônica não progressiva da infânciaTEIXEIRA, Madacilina de Melo 17 January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2012 / A Encefalopatia Crônica Não Progressiva da Infância (ECNP) é a sequela neurológica com maior comprometimento motor para a criança, e continua sendo na atualidade a hipóxicoisquemia perinatal a maior causa de lesão cerebral. É conhecida como Paralisia Cerebral, sendo definida por uma sequela de agressão encefálica, caracterizada, principalmente, por um transtorno persistente, mas não invariável do tônus, da postura e do movimento, que aparece na primeira infância. A caracterização da ECNP se faz considerando as condições anatômicas, etiológicas, semiológicas e não evolutiva. Neste estudo adotou-se a classificação baseada em aspectos anatômicos e clínicos, que enfatizam o sintoma motor, enquanto elemento principal do quadro clínico. A neuroimagem tem fundamental importância para o diagnóstico e prognóstico de lesões cerebrais, exercendo a importante função de descartar ou confirmar a presença de lesões em recém-nascidos e nas crianças com alterações no desenvolvimento. A Tomografia Cerebral (TAC) e a Ressonância Magnética do Crânio (RM) vêm desempenhando enorme papel para o estudo dos vários tecidos que constituem o sistema nervoso. Assim este estudo teve o objetivo geral de avaliar os padrões neuropatológicos nas substâncias branca e cinzenta, obtidos por TAC ou RM de Crânio, de pacientes com história clínica de ECNP hipóxico-isquêmica perinatal, correlacionando os dados obtidos por neuroimagem com os padrões motores obtidos por exame clínico-neurológico. Foram obedecidas as normas vigentes para estudo em seres humanos impostas pela Resolução CNS 196/96, submetida ao Comitê de Ética e Pesquisa da Plataforma Brasil sob o Nº 112168. A população foi constituída por pacientes com idade de zero a sete anos, de ambos os sexos, atendidos no Ambulatório de Paralisia Cerebral do Projeto Caminhar do Hospital Universitário Bettina Ferro de Souza (HUBFS), com diagnóstico de ECNP. A amostra do estudo foi composta por 15 crianças com diagnóstico de ECNP por Hipóxia neonatal. Para o diagnóstico radiológico em neuroimagem foram utilizados os dados dos laudos da TAC e da RM de Crânio. A avaliação clínico-neurológica utilizou para a avaliação do movimento o modelo da escala Gross Motor Function Classification System (GMFCS E&R), elaborada por Palisano, que gradua a criança em cinco níveis no qual o Nível I corresponde à normalidade e o Nível V a maior gravidade de limitação. Das 15 crianças avaliadas quanto ao movimento e a relação do Nível de Motricidade pela GMFCS E&R 05 crianças apresentavam nível V, 04 crianças nível IV, 05 crianças nível III e 01 criança nível II. Quanto ao imageamento cerebral 46% realizaram TAC e 54% RM do Crânio. A RM de Crânio apresentou-se neste estudo como a imagem de eleição, pois das 8 crianças que realizaram o exame, 6 apresentavam alterações. Ficou evidente que o exame por imagem de eleição para a criança que apresenta Encefalopatia Crônica não Progressiva é a RM de Crânio, podendo se adotar como protocolo para a conclusão diagnóstica, evitando expor a criança a uma carga elevada de RX como ocorre na TAC, e ainda, evitando gastos desnecessários para a saúde pública. / The Chronic non-progressive encephalopathy of the childhood (CNEC) the sequel is more neurological motor impairment for the child, and remains today a perinatal hypoxic-ischemia a major cause of brain injury. It is popularly known as Cerebral Palsy, being defined by a sequel of aggression brain, mainly characterized by a persistent disorder, but not invariable tone, posture and movement, which appears in early childhood. The characterization of this syndrome is done considering the anatomical, etiological, semiological and not evolutionary. In this study we adopted the classification based on anatomical and clinical aspects, emphasizing the symptom engine as the main component of the clinical picture. Neuroimaging has fundamental importance for the diagnosis and prognosis of brain lesions, performing the important function to discard or confirm the presence of lesions in newborns and children with developmental disabilities. Cerebral tomography (CT) and Magnetic Resonance Imaging (MRI), has played a huge role in the study of various tissues that make up the nervous system. Thus this study aimed to assess the neuropathological patterns in white
and gray matter, obtained by CT or MRI Skull, in patients with a history of perinatal hypoxicischemic CNEC, correlating the data obtained by neuroimaging with motor patterns obtained by clinical-neurological examination. Current regulations were obeyed to study in humans imposed by Resolution 196/96, submitted to the Ethics Committee and Research of Brazil Platform under Nº 112168. The study population consisted of patients aged zero to seven years, of both sexes, in the Cerebral Palsy ambulatory of Projeto Caminhar of Hospital Universitário Bettina Ferro de Souza (HUBFS), diagnosed with CNEC. The study sample consisted of 15 children diagnosed with CNEC by neonatal hypoxia. For the radiological diagnosis were used in neuroimaging data from reports of CT and MRI of skull. The clinical and neurological evaluation used to assess the movement's model range Gross Motor Function Classification System (GMFCS E & R), developed by Palisano, which grades the child on five levels in which the Level I represents normality and Level V the largest severity of limitation. Of the 15 children assessed for movement and the relationship of the level by motricity GMFCS E & R, 05 children had level V, 04 children level IV, 05 children level III and 01 child level II. As for brain imaging performed 46% TAC and 54% RM Skull. MRI of skull presented in this study as the image of choice because of the 8 children who were examined, 6 had abnormal. It was evident that the imaging study of choice for the child who has Chronic non-progressive encephalopathy of the childhood is the RM of Skull and may be adopted as the protocol for the diagnostic conclusion, avoiding exposing the child to a high load of RX as in TAC, and also avoiding unnecessary spending on public health.
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Parâmetros vocais acústicos de sujeitos do sexo masculino antes, durante e após o processo de muda vocalGUIMARÃES, Michelle Ferreira 12 April 2013 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-12-02T21:40:20Z
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Previous issue date: 2013 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A voz e a habilidade vocal são diferentes em cada indivíduo e em cada fase da vida. Devido aos escassos estudos sobre a qualidade vocal de meninos e adolescentes durante a puberdade,
o presente estudo teve como objetivo quantificar os seguintes parâmetros da análise acústica
da voz: frequência fundamental, jitter, shimmer, relação harmônico-ruído e intensidade. Para
entender como se dá a variação da voz com o desenvolvimento de meninos e adolescentes,
esses parâmetros foram correlacionados entre si e também com o grau do desenvolvimento
puberal de sujeitos do sexo masculino. Métodos: Foram sujeitos desse estudo 110 indivíduos
do sexo masculino, com idade entre 11 e 20 anos, estudantes de três escolas estaduais de
Macapá, onde foi feita a coleta dos dados. Os sujeitos foram divididos em 4 grupos, 32
sujeitos com idade entre 11 e 12 anos compuseram o Grupo I, 29 sujeitos com idade entre 13
e 15 anos o Grupo II, o Grupo III foi composto por 30 sujeitos com idade entre 16 e 18 anos, e
o Grupo IV por sujeitos com idade entre 19 e 20 anos. Todos os sujeitos foram submetidos à
gravação da voz diretamente no computador com auxilio de microfone unidirecional.
Solicitou-se emissão sustentada da vogal /é/ e fala encadeada: contagem de 1 a 10 e leitura de
um parágrafo pré-estabelecido. Em seguida os sujeitos foram avaliados por um médico clínico
geral para caracterização do desenvolvimento puberal de acordo com os estágios descritos por
Tanner. A análise vocal foi realizada com o programa acústico Voz Metria®. Resultados: Os
sujeitos apresentaram F0 média durante a vogal sustentada de 223,28 Hz, 249,86 Hz, 122,63
Hz e 127,61 Hz para os Grupos I, II, III e IV respectivamente. A F0 durante a fala encadeada
foi de 217,09 Hz, 246,18 Hz, 117,27 Hz e 123,42 para os Grupos I, II, III e IV
respectivamente. Shimmer apresentou valores aumentados nos quatro grupos. Jitter,
intensidade e a relação harmônico-ruído mantiveram-se dentro dos padrões de normalidade
estabelecidos pelo programa acústico utilizado. Quanto ao desenvolvimento puberal, a
maioria dos sujeitos está em G3 (n=38; 34,5%) e G4 (n=42; 38,2%) e P3 (n=34; 31%) e P4
(n=36; 32,7%). O grau de desenvolvimento puberal está correlacionado com aF0 durante a
fala encadeada (p<0,001) e com a F0 durante a emissão da vogal sustentada (p<0,001) e essa
correlação foi estatisticamente significante entre G2 e G5, e G3 e G5. Conclusão: Até os 15
anos os parâmetros vocais acústicos são típicos da voz infantil. Dos 16 aos 20 anos há
decréscimo significativo da F0, porém a voz ainda está em processo de estabilização, com
valores aumentados de shimmer. F0 é o único parâmetro correlacionado com o grau de
desenvolvimento puberal. A finalização do processo de muda vocal se apresentou, na
população estudada, como um evento tardio em relação ao desenvolvimento puberal. / The voice and the vocal ability are different in every individual and in every stage of life.
There is a limited number of studies on the vocal quality of children and adolescents during
puberty. The aim of this study was to quantify the following parameters of acoustic analysis
of voice: fundamental frequency, jitter, shimmer, harmonic-to-noise ratio and intensity. To
understand the relationship between the voice and the development of children and
adolescents, these parameters were correlated with each other and with the degree of pubertal
development in male subjects. Methods: The subjects of the study were 110 males, aged
between 11 and 20 years, students from three Macapá schools, where the data collection was
carried out. The subjects were divided into 4 groups, 32 subjects aged between 11 and 12
years composed the Group I, 29 subjects aged between 13 and 15 the Group II, the Group III
consisted of 30 subjects aged between 16 and 18 years and Group IV by subjects aged
between 19 and 20 years. All subjects underwent computer-based voice recording using a
unidirectional microphone. The following phonation tasks were requested: saying sustained
vowel /é/, counting from 1 to 10 and reading a pre-established paragraph. Then, the subjects
were assessed by a physician for characterization of pubertal development according to the
stages described by Tanner. The voice analysis was performed using the voice acoustic
program Vox Metria ®. Results: The subjects showed the following F0 average during
sustained vowel: 223.28 Hz, 249.86 Hz, 122.63 Hz and 127.61 Hz for Groups I, II, III and IV
respectively. The mean of F0 during the sequential speech was 217.09 Hz, 246.18 Hz, 117.27
Hz and 123.42 for Groups I, II, III and IV respectively. Shimmer showed increased values for
the four groups. Jitter, intensity and harmonic noise ratio remained within normal limits
established by the acoustic voice program used. Most subjects were in G3 (n = 38, 34.5%)
and G4 (n = 42, 38.2%) and P3 (n = 34, 31%) and P4 (n = 36 , 32.7%) stages of pubertal
development. The degree of pubertal development was correlated with F0 during speech (p
<0.001) and with F0 during sustained vowel (p <0.001) and this correlation was statistically
significant between G2 and G5, and G3 and G5. Conclusion: Subjects aging up to 15 years
showed acoustic vocal parameters typical of the childish voice. The decrease of F0 occurs
between 16 and 20 years old, but the voice is still in process of stabilization, with increased
values of shimmer. F0 is the only parameter correlated with the degree of pubertal
development. The last stage of voice change, in the studied population, is a late event in
relation to pubertal development.
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