Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449038.pdf: 713092 bytes, checksum: e3191eece6ac9183d8daac5a04d333a3 (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Introduction: Metabolic syndrome (MS) is a complex disorder represented by a set of cardiovascular risk factors. The physical exercise and changing eating habits play a central role in the treatment and prevention of this syndrome. Adopting a healthy lifestyle is strongly related to improved life quality and interfere positively in the control of cardiovascular risk factors. To assist the risk of individuals suffering general cardiovascular clinical events, the Framingham Heart Study (FHS) recently published an multivariate algorithm for risk factor to assess the overall risk of cardiovascular disease (CVD). Objective: Evaluate the effect of lifestyle modification on the Framingham risk score in subjects diagnosed with metabolic syndrome. Methods: Randomized clinical trial controlled blind. The volunteers were randomly divided into four groups: dietary intervention + placebo (IN), nutritional intervention + supplementation of omega-3 (fish oil 3g/day) (INS3), nutritional intervention + placebo + physical activity (INE) nutritional intervention and physical activity + + supplementation of omega-3 (INES3). Weight, waist circumference, blood pressure, lipid profile (TC, HDL-C, TG), glucose, insulin, smoking and age were collected to calculate the risk score, General Cardiovascular Risk Profile (GCRP), and check criteria for SM. Results: The study included 70 subjects. In the evaluation scores between the pre and post intervention yielded significant value (p <0.001). There was obtained a reduction to intermediate risk in 25.7% of cases. After intervention, there was a significant reduction (p <0.01) the "cardiovascular age", this being more significant in groups IN (5.2%) and INE (5.3%). Analyzing the risk factors individually, it was observed that while the effect was significant (p <0.05) for all factors. Conclusion: The change in lifestyle showed positive results in the treatment of MS. All groups behaved similarly proposed interventions without statistical difference, obtaining a reduction in the risk score. / Introdu??o: A S?ndrome Metab?lica (SM) ? um transtorno complexo representado por um conjunto de fatores de risco cardiovascular. A pr?tica de exerc?cio f?sico e mudan?a de h?bitos alimentares desempenham um papel central no tratamento e preven??o desta s?ndrome. A ado??o de um estilo de vida saud?vel esta fortemente relacionada ? melhora da qualidade de vida e interfere de forma positiva no controle dos fatores de risco cardiovascular. Para auxiliar na avalia??o do risco de indiv?duos sofrerem eventos cl?nicos cardiovasculares em geral, o Framingham Heart Study (FHS) recentemente, publicou um algoritmo de fator de risco multivariado para avaliar o risco geral de doen?as cardiovasculares (DCV). Objetivo: Avaliar o efeito da modifica??o do estilo de vida sobre o escore de risco de Framingham em indiv?duos com o diagn?stico de s?ndrome metab?lica. M?todo: Ensaio cl?nico randomizado, controlado, cegado. Os volunt?rios foram alocados aleatoriamente em quatro grupos: interven??o nutricional + placebo (IN), interven??o nutricional + suplementa??o de ?cidos graxos ?mega-3 (3g/dia de ?leo de peixe) (INS3), interven??o nutricional + atividade f?sica + placebo (INE) e interven??o nutricional + atividade f?sica + suplementa??o de ?cidos graxos ?mega-3 (INES3). Para o c?lculo do escore de risco General Cardiovascular Risk Profile (GCRP) e verifica??o dos crit?rios de SM foram coletados peso, circunfer?ncia abdominal, press?o arterial, perfil lip?dico (CT, HDL-c,TG), glicose, insulina, tabagismo e idade. Resultados: Participaram do estudo 70 indiv?duos. Na avalia??o do escore, entre situa??o pr? e p?s interven??o obteve-se valor significativo (p<0,001). Obteve-se uma redu??o para risco intermedi?rio em 25,7% dos indiv?duos. Ap?s a interven??o, observou-se uma redu??o significativa (p<0,01) da idade cardiovascular, sendo esta mais expressiva nos grupos IN (5,2%) e INE (5,3%). Analisando os fatores de risco individualmente, observou-se que o efeito tempo foi significativo (p<0,05) para todos os fatores. Conclus?o: A mudan?a de estilo de vida apresentou resultados positivos no tratamento da SM. Todos os grupos se portaram de forma similar as interven??es propostas sem diferirem entre si, obtendo uma redu??o do escore de risco.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449053.pdf: 899279 bytes, checksum: 3e7a9e237041f1a7387612396632404c (MD5) Previous issue date: 2013-03-22 / Introduction: The prevalence of obesity in the population is signaling a change in the landscape of health in Brazil. One of the consequences of this pathology is the musculoskeletal pain - and its influence in people s social, personal and professional life - which is a big challenge for the multidisciplinary treatment of obesity. The objective of this study was to evaluate musculoskeletal pain in labor activities in obese individuals. Methods: Non-controlled cross-sectional study. During 8 months all obese individuals in preoperative following in a Tertiary Care Centre of Reference for the treatment of obesity and metabolic syndrome were invited to participate. 95 people filled the Nordic Musculoskeletal Questionnaire (QNSO) after signing Term of Consent and met the inclusion criteria for the study. Results: The study showed that 66.31% of the subjects experienced musculoskeletal pain at some region of the body in the last 12 months and 44.21% did not work, in the same period, because of musculoskeletal pain. There was a statistical association between Body Mass Index and the three aspects evaluated by the Nordic Musculoskeletal Questionnaire. Conclusion: The musculoskeletal pain was often reported by obese individuals who participated in this study and in most cases prevented the execution of work activities of these people. It s important to continue the studies about this subject to better serve the health of this population. / Introdu??o: A preval?ncia de obesidade na popula??o est? sinalizando a mudan?a no panorama da sa?de no Brasil. Dentre as consequ?ncias que esta patologia traz para os indiv?duos, est? a dor osteomuscular - e sua influ?ncia nos ?mbitos social, pessoal e profissional das pessoas - que ? um grande desafio para a equipe multidisciplinar de tratamento da obesidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a dor osteomuscular nas atividades laborais de indiv?duos obesos. M?todos: Estudo transversal n?o-controlado. Durante 8 meses todos os indiv?duos obesos em acompanhamento de pr?-operat?rio em um Centro de Atendimento Terci?rio de Refer?ncia para o tratamento de Obesidade e S?ndrome Metab?lica foram convidados a participar da pesquisa. 95 pessoas preencheram o Question?rio N?rdico de Sintomas Osteomusculares (QNSO) ap?s assinarem Termo de Consentimento Livre e Esclarecido e terem preenchido os crit?rios de inclus?o para o estudo. Resultados: O estudo evidenciou que 66,31% dos indiv?duos sentiram dor osteomuscular em alguma regi?o do corpo nos ?ltimos 12 meses e que 44,21% deixaram de exercer atividade laboral alguma vez, no mesmo per?odo, em fun??o de dor osteomuscular. Houve associa??o estat?stica entre IMC e os tr?s aspectos avaliados pelo QNSO. Conclus?o: A dor osteomuscular foi muito relatada pelos indiv?duos obesos que participaram deste estudo e na maioria dos casos impediu a execu??o de atividades laborais destas pessoas. Percebe-se a necessidade de continuar os estudos que abordem esta tem?tica para melhor atender e intervir na sa?de desta popula??o.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449287.pdf: 1220722 bytes, checksum: 847130381b149aae03742c54c7df7199 (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Background : Kidney transplantation is recognized as the best form of treatment for patients needing renal replacement therapy, significantly improving the quality of life of patients and reducing mortality rates. It is known that the HLA compatibility improves the outcome of transplantations. In Rio Grande do Sul until 2001 transplant based on HLA compatibility between donor and recipient, but the results of this policy change are not yet known in the researched. Objective : Knowing the results in the researched of kidney transplants from deceased donors performed with HLA compatibility distribution as well as the association of these findings with other risk factors for graft loss and patient death. Method : A historical cohort study in a single center, involving 315 patients transplanted with kidneys from deceased donors. We evaluated the results of transplants occurred from May 2001 to May 2011 through the curves and overall survival by HLA compatibility and graft patient in 5 years, as well as analyzed the risk factors for graft loss and patient death . For survival curves, we used the Kaplan-Meier method and comparisons between them were made with the log rank test. For univariate and multivariate analysis of risk factors associated with the outcomes we used the method of Cox Regression. Results : 5-year overall survival of the graft was 69.8% and the patient was 82.1%. In this study could not demonstrate that HLA compatibility was a risk factor for graft loss or patient death. In multivariate analysis only recipient age was associated with death (HR 1.033 / p = 0.023) and graft loss was related to vascular and endocrine complicactions (HR 2.388 / p = 0.001 and HR 0.283 / p = 0.014, respectively). Conclusion : The results showed a graft survival and patient satisfaction in five years is comparable to that observed internationally. To demonstrate that the HLA can be related to graft survival and patient will need a larger sample. Vascular and endocrine complications have shown association with graft survival and recipient age was related to patient survival. / Introdu??o : Sabe-se que a compatibilidade HLA melhora de forma geral os resultados dos transplantes. No Rio Grande do Sul a partir de 2001 iniciou-se a transplantar baseado em compatibilidade HLA entre doador e receptor, mas os resultados desta mudan?a de pol?tica ainda n?o s?o conhecidos no meio pesquisado. Objetivo : Conhecer os resultados, no meio pesquisado, dos transplantes de rins provenientes de doadores falecidos feitos com distribui??o conforme compatibilidade HLA, bem como a associa??o destes resultados com os outros fatores de risco para perda do enxerto e ?bito do paciente. M?todo : Estudo de coorte hist?rica, em um ?nico centro, envolvendo 315 pacientes transplantados com rins provenientes de doadores falecidos. Foram avaliados os resultados dos transplantes ocorridos de maio de 2001 a maio de 2011 atrav?s das curvas das sobrevidas global e por compatibilidade HLA do enxerto e do paciente em 5 anos, assim como foram analisados os fatores de risco para perda de enxerto e ?bito do paciente. Para as curvas de sobrevida foi utilizado o m?todo de Kaplan-Meier e as compara??es entre elas foram realizadas com o teste Log Rank. Para as an?lises uni e multivariadas dos fatores de risco associados aos desfechos foi utilizado o m?todo de Regress?o de Cox. Resultados : Em 5 anos a sobrevida global do enxerto foi de 69,8% e do paciente foi de 82,1%. No meio estudado n?o foi poss?vel demonstrar que a compatibilidade HLA foi um fator de risco para perda do enxerto ou ?bito do paciente. Nas an?lises multivariadas apenas a idade do receptor mostrou-se associada ao ?bito (HR 1,033/p=0,023) e a perda de enxerto foi relacionada ?s complica??es vasculares e end?crinas (HR 2,388/p=0,001 e HR 0,283/p=0,014, respectivamente). Conclus?o : Os resultados demonstraram uma sobrevida do enxerto e do paciente em 5 anos satisfat?ria sendo compar?vel ao observado internacionalmente. Para demonstrar que a compatibilidade HLA possa ter rela??o com a sobrevida do enxerto e do paciente ser? necess?rio uma amostra maior. As complica??es vasculares e end?crinas mostraram ter associa??o com a sobrevida do enxerto e a idade do receptor mostrou-se relacionada ? sobrevida do paciente.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 450248.pdf: 2656251 bytes, checksum: 51f7ffe69064387ee0981dc9230e07fc (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Introduction: Ultrasonography (US) has a recent use in Rheumatology, and the reliability of the method in rheumatoid arthritis (RA) patients has yet to be clarified. Objective: To test, in a RA survey, the reproducibility of musculoskeletal US performed by Rheumatologists with one-year training through re- analysis by a Rheumatologist expert in the method. Patients and Methods: This cross-sectional study included consecutive RA patients from our tertiary center. US exam was performed in metacarpophalangeal joints, proximal interphalangeal joints, and wrists. Presence of synovitis, power Doppler (PD) signal, bone erosions, and cartilage changes comprised the US parameters evaluated. A kappa value in-between 0.20 and 0.40 was considered fair; in-between 0.41 and 0.60 was moderate; in-between 0.61 and 0.80 was good; and above 0.81 was excellent. Results: We analyzed 1380 joints of 60 RA patients (78% females, 78% caucasoids). Mean age was 58?11.56 years, mean disease duration was 9.98?7.79 years, mean DAS28 was 3.82?1.53, and mean HAQ was 0.91?0.67. Kappa agreement for synovitis ranged from 0.30 to 0.70; for PD signal, from 0.53 to absolute agreement; for erosions, from 0.70 to 0.97; for cartilage changes, from 0.28 to 0.63. Conclusion: While good, moderate and excellent interobserver agreement were obtained for erosions and PD, concordance for synovitis and cartilage changes were less impressive in our patients with active RA. Further studies on standardization of scanning technique is necessary to improve musculoskeletal US reproducibility / Introdu??o: a ultrassonografia (US) ? de uso recente no cen?rio da Reumatologia, e a reprodutibilidade do m?todo em pacientes com artrite reumat?ide (AR) ainda deve ser estabelecida. Objetivo: Avaliar, em uma popula??o com AR, a concord?ncia da US musculoesquel?tica quando efetuada por Reumatologistas com um ano de treinamento seguida de re-an?lise por Reumatologista experiente. Pacientes e M?todos: O estudo, transversal, incluiu pacientes consecutivos com AR de nosso centro terci?rio. O exame ultrassonogr?fico foi realizado nas segundas e terceiras articula??es metacarpofalangeanas, interfalangeanas proximais e punhos do lado dominante dorsal e volar. Presen?a de sinovite, sinal de power Doppler (PD), eros?es ?sseas e altera??es na cartilagem compuseram os par?metros ultrassonogr?ficos avaliados. A concord?ncia interobservador foi avaliada atrav?s de coeficientes kappa (0,21-0,40 razo?vel; 0,41-0,60 moderada; 0,61-0,80 boa; e 0,81-1 excelente). Resultados: Avaliamos 1380 articula??es de 60 pacientes com AR (78% mulheres, 78% caucas?ides). A m?dia de idade foi 58 ? 11,56 anos, enquanto a dura??o m?dia da doen?a foi 9,98?7,79 anos. A m?dia do DAS28 foi 3,82 ? 1,53, e a m?dia do HAQ foi 0,91 ? 0,67. Os valores kappa para avalia??o da sinovite variaram de 0,30 a 0,70; para sinal de PD, de 0.53 at? concord?ncia absoluta; para eros?es, de 0,70 a 0,97 e para avalia??o de cartilagem, de 0,28 a 0,63. Conclus?o: Apesar de boas, moderadas e excelentes concord?ncias terem sido obtidas para eros?es e PD, a reprodutibilidade para sinovite e altera??es de cartilagem foi menos expressiva em nossos pacientes com AR ativa. Novos estudos se fazem necess?rios para estabelecer a reprodutibilidade da US musculoesquel?tica em pacientes com AR

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 450257.pdf: 1851494 bytes, checksum: 45b94fe1b9cb73399670961f3d6d6798 (MD5) Previous issue date: 2013-03-25 / Human tuberculosis (TB), an illness that results from Mycobacterium tuberculosis infection, remains a major health problem worldwide, accounting for an estimated 8.7 million new cases globally in 2011. Problems related to treatment of M. tuberculosis infection are related to its ability to persist latently in host tissues, getting protection against drug treatment and creating a reservoir of disease. Addictionaly, the emergence of multi, extensively and totally drug-resistant strains, TB-HIV co-infection and the complexity of the treatment currently used, underline the need of new antitubercular drugs, with novel mechanisms of action. The enzyme adenylosuccinate lyase (ASL) is involved in both de novo and salvage pathways of purine biosynthesis. Here we describe M. tuberculosis ASL (MtASL) cloning and expression in Escherichia coli. N-terminal amino acid sequencing and electrospray ionization mass spectrometry analyses confirmed the identity of homogeneous MtASL. Size exclusion chromatography showed that the protein is a homotetramer in solution. Steady-state kinetics revealed that MtASL exhibits hyperbolic kinetics and confirmed that the recombinant enzyme indeed catalyses the cleavage of S-AMP in AMP and fumarate. The pH-rate profile showed that MtASL follows an overall acid-basic mechanism of catalysis and these studies, combined with multiple sequence alignment analysis led us to propose what amino acid residues are involved in the MtASL chemical reaction. In addition, product inhibition studies and isothermal titration calorimetry of binding products allowed us to propose the MtASL kinetic mechanism. The results here reported could lead to the identification of nucleoside analogs that potently inhibit M. tuberculosis viability, with minor damages to the human host. / A tuberculose humana (TB) ? uma doen?a infectocontagiosa provocada principalmente pelo Mycobacterium tuberculosis e permanece sendo um importante problema mundial de sa?de. Estima-se que 8,7 milh?es de novos casos tenham ocorrido em 2011. Problemas relacionados ao tratamento da infec??o ocorrem devido ? sua habilidade de persistir de forma latente no hospedeiro criando um reservat?rio da doen?a. Adicionalmente, a emerg?ncia de cepas multi, extensivamente e totalmente resistentes, a coinfec??o TB-HIV e a complexidade do tratamento utilizado atualmente, alertam para a necessidade de novos medicamentos, que possuam novos mecanismos de a??o. A enzima adenilossuccinato liase (ASL) est? envolvida em ambas as vias de bioss?ntese de purinas. Neste trabalho, n?s descrevemos a amplifica??o, clonagem da ASL de M. tuberculosis (MtASL) e express?o em Escherichia coli. O sequenciamento N-terminal juntamente com an?lises por espectrometria de massas confirmaram a identidade da MtASL homog?nea. Foi demonstrado atrav?s de cromatografia de exclus?o por tamanho que a prote?na ? um homotetr?mero em solu??o. Ensaios de cin?tica no estado estacion?rio revelaram que a MtASL exibe um modelo de cin?tica hiperb?lica e que catalisa a clivagem de S-AMP a AMP e fumarato. Estudos de perfil de pH demonstraram que a MtASL realiza um mecanismo catal?tico ?cido-b?sico e, tais estudos, combinados ao alinhamento m?ltiplo de sequ?ncias, permitiram propor os res?duos de amino?cidos envolvidos na rea??o. Adicionalmente, estudos de inibi??o pelos produtos somados a estudos de calorimetria de titula??o isot?rmica da liga??o dos mesmos, permitiram propor o mecanismo cin?tico da MtASL. Os resultados deste trabalho podem auxiliar na posterior identifica??o de an?logos de nucleot?deos que sejam capazes de inibir a viabilidade do M. tuberculosis, com poucos danos ao hospedeiro humano.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 452946.pdf: 4295769 bytes, checksum: 7a8634a037c064cad84539c03a441c4a (MD5) Previous issue date: 2013-11-26 / Human thymidine phosphorylase (hTP) also known as platelet-derived endothelial cell growth factor (PD-ECGF) or gliostatin, has an important role in nucleotide metabolism. hTP is a molecular target for anticancer drug development since it is overexpressed in certain solid tumours, and its catalityc activity has been shown to be essencial to promote angiogenesis. This work describes amplification, cloning, and recombinant expression in E. coli, purification to homogeinity of both precursor and mature protein hTP. Mass spectrometry analysis confirmed the identity of homogeneous hTP and size exclusion chromatography showed that hTP proteins are a dimer in solution. Kinetic studies allowed the determination of apparent and true kinetic constants for forward reaction, and showed that enzymes displayed substrate inhibition for thymidine. Initial velocity and isothermal titration calorimetry (ITC) studies suggested that hTP catalysis follows a rapid-equilibrium random bi-bi kinetic mechanism. Thermodynamics constants and discrimination profile allowed natural enzyme s substrates/products binding patterns identification. Additionally, these studies showed differences in the kinetic constants and the thermodynamic parameters between the precursor and the mature protein and these differences were revealed by structural analysis using molecular modeling. The pH-rate profiles suggested that maximal enzyme activity was achieved at low pH values, and functional groups with a pK values of 5.1 5.2 and 9.0 9.2 are involved in thymidine binding, and groups with pK value of 6.1 6.2 and 7.8 8.6 are involved in phosphate binding. The enzyme characterization provides additional data that may be useful for the rational design of novel inhibitors hTP. Chemical compounds designed and synthesized as potential inhibitors against hTP activity were active in both forms of the enzyme, whereas the compound 5g showed the best inhibitory potential. The compound 5g was characterized as noncompetitive inhibitor towards hTP substrates thymidine and phosphate. The noncompetitive inhibiton mechanism points to the existence of an allosteric binding site at hTP, different from the substrate binding sites. This allosteric site could be considered an important molecular target for the development of potent and selective hTP inhibitors. / A Timidina fosforilase humana (hTP), tamb?m conhecida como PD-ECGF e gliostatina, ? uma enzima importante no metabolismo de nucleot?deos. A hTP ? um alvo molecular para o desenho de inibidores enzim?ticos com poss?vel uso na terapia do c?ncer, visto que essa enzima encontra-se superexpressa em alguns tipos de tumores s?lidos e sua atividade catal?tica ? essencial para promo??o da angiog?nse. Esta tese descreve a amplifica??o, clonagem, express?o heter?loga em E. coli, purifica??o e caracteriza??o bioqu?mica do precursor e da prote?na madura hTP. An?lises de espectrometria de massa confirmaram a identidade das prote?nas recombinantes e ensaios de cromatografia de exclus?o por tamanho revelaram que ambas as enzimas encontram-se como d?meros em solu??o. Estudos cin?ticos permitiram a determina??o das constantes cin?ticas aparentes e verdadeiras para a rea??o direta e mostraram que as enzimas apresentam inibi??o pelo substrato tidimina. Estudos espectofotom?tricos de velocidade inicial e estudos de liga??o por microcalorimetria de titutala??o isot?rmica (ITC) sugerem que a cat?lise enzim?tica segue um mecanismo cin?tico bi-bi aleat?rio de r?pido equil?brio. As constantes termodin?micas e o perfil de discrimina??o termodin?mica permitiram a identifica??o dos modos de intera??o dos substratos/produtos naturais das enzimas com seus s?tios de liga??o. Al?m disto, esses estudos revelaram diferen?as nas constantes cin?ticas e nos par?metros termodin?micos entre o precursor e a prote?na madura e tais diferen?as foram evidenciadas por meio da an?lise estrutural de ambas as enzimas. O perfil de pH mostrou que a atividade enzim?tica m?xima foi obtida em valores de pH baixos, e que grupamentos funcionais com valores de pK de 5,1 5,2 e 9,0 9,2 est?o envolvidos na liga??o ? timidina e grupamentos com valores de pK de 6,1 6,2 e 7,8 8,6 est?o envolvidos na liga??o ao fosfato. Os resultados da caracteriza??o da enzima fornecem dados adicionais que podem ser ?teis para o desenho racional de novos inibidores da hTP. Os compostos qu?micos planejados e sintetizados como poss?veis inibidores da atividade da hTP foram ativos em ambas as formas da enzima, sendo que o composto 5g apresentou o melhor potencial inibit?rio. O composto 5g foi caracterizado como um inibidor n?o competitivo em rela??o aos substratos naturais timidina e fosfato. O mecanismo de inibi??o n?o competitiva sugere a exist?ncia de um sit?o de liga??o alost?rico na hTP, diferente dos s?tios de liga??o aos substratos, podendo ser considerado um alvo molecular importante para a busca de inibidores potentes e seletivos para hTP.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455917.pdf: 2015931 bytes, checksum: 9c232dbbf603a1ea4db4fc35a200c003 (MD5) Previous issue date: 2013-12-13 / INTRODUCTION: Studies have shown that LAIV is more effective than TIV for prevention of influenza infection in young children, but the underlying mechanisms associated with protection are still not well defined. OBJECTIVES: To assess differences in cellular immunity and gene expression profiles in children after immunization with LAIV or TIV. METHODS: Peripheral blood of previously healthy children was collected pre and postvaccination and analyzed for B cells measurement and antibodies production. Microarray analyses were applied to assess the gene expression profiles. RESULTS: LAIV vaccinees showed number of na?ve, memory and transitional B cells increased on day 1 compared to baseline (p<0.05). TIV vaccinees showed the number of plasmablasts increased on day 7 post-vaccination (p&#8804;0.01). In addition, the titers for the three strains of the vaccine (H1N1, H3N2 and B) were significantly elevated on the TIV group when compared with the LAIV group. Regarding the transcriptional profiles presented, both vaccines induced interferon signaling, but in different time points, TIV 1 day postvaccination and LAIV 7 days post-vaccination, the last only in children younger than 5 years old. CONCLUSIONS: These results indicate that LAIV and TIV induced different immune responses in peripheral blood of vaccinated children and that both vaccines induce interferon signaling post-vaccination. / INTRODU??O: Estudos t?m demonstrado que a vacina contra os v?rus influenza LAIV ? mais eficiente que a formula??o TIV para a preven??o de infec??o em crian?as, por?m os mecanismos envolvidos ainda n?o est?o bem definidos. OBJETIVOS: Acessar as diferen?as na imunidade celular humoral e de express?o de perfis g?nicos em crian?as imunizadas com LAIV ou TIV. M?TODOS: Sangue perif?rico de crian?as previamente h?gidas foi coletado pr? e p?svacina??o e analisado para mensura??o de c?lulas B e para titula??o de anticorpos. An?lise pela t?cnica de microarranjos foi empregada para avalia??o dos perfis de express?o g?nica. RESULTADOS: Vacina??o com LAIV induziu aumento do n?mero absoluto de c?lulas B na?ve, de mem?ria e transicionais no ap?s 30 dias comparado aos valores medidos antes da vacina??o (p<0.05). Vacina??o com TIV, no entanto, induziu aumento de plasmoblastos no dia 7 p?s-vacina??o (p<0.01). Os t?tulos de anticorpos para os tr?s ant?genos da vacina (H1N1, H3N2 e B) encontraram-se significativamente elevados no grupo vacinado com TIV quando comparado ao grupo que recebeu LAIV. Ambos os grupos vacinados induziram sinaliza??o de genes relacionados ao interferon, por?m em diferentes momentos: TIV induziu-os 1 dia p?s-vacina??o, enquanto LAIV 7 dias p?s-vacina??o, especialmente em crian?as com menos de cinco anos de idade. CONCLUS?ES: Esses resultados sugerem que as vacinas LAIV e TIV induzem resposta celular imune diferente em crian?as e que ambas induzem sinaliza??o de interferon p?s-vacina??o.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455940.pdf: 8781649 bytes, checksum: 26c5228694b3da7cdad3b29d9669c17a (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / We investigate whether the extinction of inhibitory avoidance (IA) learning can be subjected to endogenous state-dependence with systemic injections of epinephrine (E), and whether endogenous norepinephrine (NE) and the Nucleus Tractus Solitarius NTS &#8594; Hippocampus/Amygdala (HIPP/BLA) pathway participate in this. Thus, rats trained in Inhibitory Avoidance Learning (IA; 0,5 mA/2s) were submitted to session of extinction 24 h apart: the animals were placed to the same apparatus but without the footshock. 24 h after the extinction session, they were tested for the retention of extinction. Results indicate that post-extinction training E (50 or 100 &#956;g/kg) induced a poor retrieval of extinction in the test session of this task unless an additional E injection (50 &#956;g/kg) was given prior to the extinction test. This suggested state-dependence. Muscimol (0,01 &#956;g/side) microinfused into the NTS prior to the extinction test session blocked E-induced state-dependence. Norepinephrine (NE, 1 &#956;g/side) infused bilaterally into NTS restores the extinction impairment caused by post-extinction training i.p. E. In animals that received post-extinction training injections E and 6 min before the extinction test bilateral NTS blockade induced by muscimol plus NE (1 &#956;g/side) into the CA1 region of the dorsal hippocampus or into the basolateral amygdala restored the normal extinction levels that had been impaired by muscimol. These findings suggest that the state-dependence occurs during the extinction of the fear memory and that are a role for the NTS &#8594; HIPP/BLA pathway in the retrieval of extinction. / O desenvolvimento desta disserta??o teve como objetivo investigar se a depend?ncia de estado end?gena ocorre durante a extin??o de mem?ria aversiva atrav?s de inje??es sist?micas de adrenalina, e, havendo esta constata??o, analisar se a noradrenalina e a via do N?cleo do Trato Solit?rio (NTS) &#8594; Hipocampo/Am?gdala Basolateral (HIP/ABL) participam deste processo. Para responder ?s quest?es levantadas nesta disserta??o, ratos Wistar machos foram treinados na tarefa de esquiva inibit?ria (EI; 0,5 mA/2s). Ap?s 24 h os animais foram expostos ao mesmo aparato, na aus?ncia do est?mulo el?trico (sess?o de extin??o). Para reten??o da mem?ria de extin??o (sess?o de teste) os animais foram novamente expostos ? caixa de EI na aus?ncia de est?mulo el?trico, 24 h ap?s a sess?o de extin??o. Foi observado que os animais que receberam a administra??o intraperitoneal (i.p.) de adrenalina (50 ou 100 &#956;g/Kg) imediatamente ap?s a sess?o de extin??o apresentaram um preju?zo na evoca??o da mem?ria de extin??o e este efeito ? revertido pela administra??o i.p. de adrenalina (50 &#956;g/Kg) 6 min antes da sess?o de teste. Isto sugere depend?ncia de estado. A noradrenalina (1 &#956;g/lado) quando infundida intra-NTS antes da sess?o de teste reverte o preju?zo da evoca??o da mem?ria de extin??o causado pela adrenalina i.p. quando administrada ap?s a sess?o de extin??o. E a infus?o intra-NTS de muscimol (0,01 &#956;g/lado) antes da sess?o de teste impede a depend?ncia de estado induzida pela adrenalina. Al?m disso, os animais que receberam adrenalina i.p. ap?s a sess?o de extin??o e, infus?o intra-NTS de muscimol seguido da administra??o de noradrenalina intra-HIP ou intra-ABL antes da sess?o de teste, restauraram a capacidade de evocar a mem?ria de extin??o que havia sido prejudicada pelo muscimol. Os resultados sugerem que a depend?ncia de estado ocorre durante o processo de extin??o da mem?ria de EI e que a noradrenalina e a via NTS &#8594; HIP/ABL desempenham um papel importante na evoca??o da mem?ria de extin??o.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455926.pdf: 1580649 bytes, checksum: 43ccab4db0f539ea4361b47f57d0cedd (MD5) Previous issue date: 2014-01-24 / We assessed the effects of pharmacological spinal inhibition of voltage-gated calcium channels (VGCC) in mouse pruritus. The epidural administration of P/Q-type MVIIC or PhTx3.3, L-type verapamil, T-type NNC 55-0396 or R-type SNX-482 VGCC blockers failed to alter the scratching behavior caused by the PAR-2 activator trypsin, injected into the mouse nape skin. Otherwise, trypsin-elicited pruritus was markedly reduced by the spinal administration of preferential N-type VGCC inhibitors MVIIA and Ph&#945;1&#946;. C. magus-obtained toxin MVIIA displayed significant effects when dosed from 1 to 4 h before trypsin, whereas the effects of P. nigriventer-derived Ph&#945;1&#946; remained for up to 12 h. MVIIA or Ph&#945;1&#946; also prevented the itching elicited by intradermal (i.d.) injection of SLIGRL-NH2, compound 48/80 or chloroquine, although they did not affect H2O2-induced itching. Furthermore, the co-administration of MVIIA or Ph&#945;1&#946; markedly inhibited the pruritus caused by the spinal injection of gastrin-releasing peptide (GRP), but not morphine. Notably, spinal MVIIA or Ph&#945;1&#946; greatly prevented chronic pruritus allied to dry skin. However, either toxin failed to alter the edema formation or neutrophil influx caused by trypsin. In addition, epidural MVIIA or Ph&#945;1&#946; did not modify the expression of GRP receptor (GRP-R) in the spinal cord, whilst they brought c-Fos activation to control levels. Finally, the in vitro incubation of MVIIA or Ph&#945;1&#946; prevented the calcium influx evoked by the synthetic PAR-2 agonist AC264613 in spinal cord synaptosomes. Data brings novel evidence on itching transmission mechanisms, pointing out the therapeutic relevance of N-type VGCC inhibitors to control refractory pruritus. / Foram avaliados os efeitos da inibi??o farmacol?gica dos canais de c?lcio voltagem-dependentes (CCVD) no prurido em camundongos. A administra??o intratecal (i.t.) dos bloqueadores CCVD do subtipo P/Q (MVIIA ou PhTx3.3), subtipo L (verapamil), subtipo T (NNC 55-0396) ou do subtipo R (SNX-482) n?o alterou o comportamento de co?ar induzido pela tripsina (agonista do receptor PAR-2), aplicada na regi?o dorsal do pesco?o de camundongos. Entretanto, o comportamento de co?ar induzido pela tripsina foi significativamente diminu?do pela administra??o i.t. dos bloqueadores de CCVD do subtipo N (MVIIA e Ph&#945;1&#946;). A toxina MVIIA, derivada do C. magus, apresentou efeitos significativos quando administrada entre 1 a 4 horas antes da aplica??o de tripsina. Por outro lado, a toxina Ph&#945;1&#946; derivada do veneno da aranha P. nigriventer demonstrou atividade, quando injetada at? 12 h antes da tripsina. O pr?-tratamento com MVIIA ou Ph&#945;1&#946; foi efetivo em inibir o comportamento de co?ar induzido pela aplica??o intrad?rmica (i.d.) de SLIGRL-NH2, composto 48/80 ou cloroquina; entretanto, as toxinas n?o inibiram o comportamento de co?ar induzido pela inje??o i.d. de H2O2. A co-inje??o de MVIIA ou Ph&#945;1&#946; inibiu o comportamento de co?ar induzido pela aplica??o i.t. do pept?deo liberador de gastrina (GRP), mas n?o inibiu o prurido causado pela morfina. Relevantemente, a administra??o i.t. da toxina MVIIA ou Ph&#945;1&#946; inibiu a coceira cr?nica induzida pelo modelo de pele seca em camundongos. A atividade anti-pruritog?nica de ambas as toxinas n?o parece estar relacionada com a modula??o do processo inflamat?rio na pele, uma vez que as toxinas MVIIA ou Ph&#945;1&#946; n?o foram capazes de inibir o edema e a migra??o de neutr?filos induzidos pela aplica??o i.d. de tripsina. A aplica??o i.t. de MVIIA ou Ph&#945;1&#946; n?o modificou a express?o do receptor para o GRP (GRP-R) na medula espinhal. Por outro lado, as duas reduziram a express?o de c-Fos aos n?veis do grupo controle, de acordo com a avalia??o na medula dos camundongos. Finalmente, a incuba??o de MVIIA ou Ph&#945;1&#946; preveniu o influxo de c?lcio estimulado pelo agonista do receptor PAR-2 AC264613 em sinaptossomas de medula de camundongos. Estes resultados trazem uma nova perspectiva acerca dos mecanismos envolvidos na sinaliza??o da coceira, indicando os inibidores de CCVD do subtipo N como poss?veis estrat?gias para o tratamento do prurido, especialmente nas condi??es onde h? aus?ncia de resposta ? terapia atual.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 455935.pdf: 11635887 bytes, checksum: 0a9f28950e212538501de3a72ecfaa0c (MD5) Previous issue date: 2014-01-02 / Aims: The aim of the present study was to evaluate possible preventative effects of glutamine in an animal model of gut ischemia/reperfusion (I/R). Materials and methods: Twenty male Wistar rats were divided into four experimental groups: (1) control group (Control) rats underwent exploratory laparotomy; (2) control + glutamine group (Control-GLU) rats were subjected to laparotomy and treated intraperitoneally with glutamine 24 and 48 h prior to surgery; (3) ischemia/reperfusion group (I/R) rats were subjected to occlusion of the superior mesenteric artery for 30 min followed by 15 min of reperfusion; and (4) ischemia/reperfusion + glutamine group (G+I/R) rats were treated intraperitoneally with glutamine 24 and 48 h before I/R. Local and systemic injuries were determined by evaluating intestinal and lung segments for oxidative stress using lipid peroxidation and the activity of superoxide dismutase (SOD), interleukin-6 (IL-6) and nuclear factor kappa beta (NF-&#954;B) after mesenteric I/R. Results: The animals from the G+I/R group exhibited reduced levels of lipid peroxidation, IL-6 and NF-KB and increased SOD activity when compared with the group of rats submitted to I/R without GLU. The findings were statistically significant (p < 0.05). Conclusions: These results demonstrate that pretreatment with glutamine prevents mucosal injury and improves gut and lung recovery after I/R injury in rats. / Objetivos: O objetivo principal do presente estudo foi avaliar a a??o antioxidante da glutamina no tecido intestinal e pulmonar de ratos submetidos ? isquemia e reperfus?o (I/R) mesent?rica. Os objetivos secund?rios foram: avaliar o estresse oxidativo e atividade inflamat?ria pela an?lise da lipoperoxida??o; avaliar a atividade de uma enzima antioxidante, a super?xido dismutase (SOD); determinar o papel do Fator de Transcri??o Nuclear Kappa B (NF-KB); e da interleucina 6 (IL-6). Material e M?todos: Ratos machos da ra?a Wistar foram mantidos em caixas pl?sticas, em ciclo de 12 horas claro/escuro, com ?gua e ra??o administradas ad libitum. Foram utilizados Vinte ratos divididos, de forma randomizada, em quatro grupos experimentais: (1) grupo controle (Controle) os ratos foram submetidos ? laparotomia exploradora; (2) grupo controle + glutamina (Controle-GLU) os ratos foram submetidos ? laparotomia e tratados, por via intraperitoneal, com glutamina 24h e 48h antes da cirurgia; (3) grupo isquemia/reperfus?o ( I/R ) os ratos foram submetidos a oclus?o da art?ria mesent?rica superior, durante 30 min seguido por 15 min de reperfus?o; e (4) grupo isquemia/reperfus?o + glutamina (G + I/R) - os ratos foram tratados, por via intraperitoneal, com glutamina 24h e 48h antes da I/R. As les?es locais e sist?micas foram determinadas por meio da avalia??o dos segmentos intestinais e pulmonares para o estresse oxidativo, atrav?s da lipoperoxida??o e da atividade da enzima SOD, a interleucina IL-6 e o NF-KB ap?s a I/R mesent?rica. Resultados: A lipoperoxida??o da membrana foi mais expressiva no grupo de animais submetidos ? I/R (p < 0.05). Entretanto, o grupo que recebeu a glutamina 24h e 48h antes do evento I/R, mostrou n?veis de lipoperoxida??o da membrana, de forma similar aos grupos controles (p < 0.05). A atividade da enzima antioxidante SOD estava diminu?da no intestino dos animais submetidos ? I/R, quando comparada a encontrada nos grupos controles sem a I/R (p < 0.05). Por outro lado, o grupo que recebeu a glutamina 24h e 48h antes da I/R, mostrou a atividade da SOD de forma similar a encontrada nos controles (com e sem a glutamina) (p < 0.05). A m?dia da ?rea, dosada atrav?s do m?todo de imunoistoqu?mica, de express?o do NF-KB para os grupos controles, foi similar. O grupo submetido ? I/R mostrou a maior ?rea de concentra??o do NF-KB. O grupo G + I/R foi o que teve a segunda maior ?rea, por?m com valores menores do que os encontrados no grupo do evento I/R (p < 0.05). Para a IL-6, os grupos controles, com e sem a glutamina, mostraram ?reas similares. O grupo da I/R apresentou a maior ?rea de express?o da IL-6, seguido pelo grupo G + I/R; por?m, esta ?rea foi significativamente menor do que a do grupo submetido ? I/R sem a glutamina (p < 0.05). Conclus?es: Estes resultados demonstram que, o pr?-tratamento com glutamina, previne a les?o da mucosa do intestino e dos pulm?es, ap?s I/R mesent?rica em ratos.