Orientador: José Eduardo Corá / Banca: Álvaro Pires da Silva / Banca: Carolina Fernandes / Resumo: A adaptação do sistema de semeadura direta (SSD) depende da escolha adequada da seqüência de culturas, que devem contribuir para melhorar os atributos solo. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito de seqüências de culturas na agregação do solo e no teor de carbono orgânico e polissacarídeos em diferentes classes de agregados estáveis em água de um Latossolo Vermelho eutrófico sob SSD. Um experimento foi implantado em 2002 em Jaboticabal, SP. Os tratamentos foram constituídos pela combinação de quatro seqüências de culturas de verão e sete culturas de inverno. As seqüências de culturas de verão, semeadas em outubro/novembro, foram: monocultura de milho; monocultura de soja; cultivos intercalados ano a ano de soja e milho; seqüência de cultivos de arroz/feijão/algodão/feijão. As culturas de inverno, semeadas em fevereiro/março, repetidas todos os anos nas mesmas parcelas, foram: milho, girassol, nabo forrageiro, milheto, feijão guandu, sorgo granífero e crotalária. A amostragem do solo foi realizada após o quarto ano de condução do experimento, em outubro de 2006. O cultivo de milho em monocultura no verão favoreceu a formação de agregados estáveis em água com diâmetro entre 6,30-2,00 mm e proporcionou o maior teor de COT e PAD nessa classe de tamanho de agregados. Isso indica que a influência das culturas sobre a estabilidade de agregados foi intermediada pelos teores de COT e PAD. Não foi verificada diferença na agregação do solo entre culturas de inverno utilizadas. Os maiores teores de COT, PST e PAD foram verificados nos agregados com diâmetro entre 2,00-1,00 mm e os menores teores nos agregados <0,25 mm. / Abstract: A better performance of the no-tillage system in tropical regions depends on the choice of suitable crop sequences in summer and winter. These crops should contribute to improvement of soil properties. The objective of this work was to assess crop sequences effects on soil aggregation and organic carbon and polysaccharide contents in water-stable aggregate size classes of a Rhodic Oxisol under no-tillage. An experiment was established in Jaboticabal town, São Paulo state, in 2002. Treatments were constituted for a combination of four crop sequences in summer and seven crop sequences in the winter. Crop sequences in the summer were: corn monoculture (CC); soybean monoculture (SS); soybean/corn/soybean/corn sequence (SC) and rice/bean/cotton/bean sequence (RB), seeded in October/November. Winter crops were: corn, sunflower, oilseed radish, millet, pigeonpea, sorghum and sunn hemp, seeded in February/March. Soil sampling took place after forth year after experiment implantation, in October 2006. The MV sequence in summer increased the percentage of 6,30-2,00 mm water-stable aggregates and provided the highest total organic carbon and diluted-acid-extractable polysaccharides contents in the same aggregate size class. These results suggest that crop effects on soil aggregate stability can be mediated by total organic carbon and diluted-acid-extractable polysaccharides. The winter crops do not influence soil aggregation. The highest and lowest total organic carbon, total polysaccharides and diluted-acid-extractable polysaccharides contents was verified, respectively, in 2,00-1,00 mm and <0,25 mm water-aggregate soil size classes. / Mestre

Orientador: Dirlei Antonio Berto / Banca: Valdomiro Shigueru Miyada / Banca: Margarida Maria Barros / Abstract: Two experiments were conducted to evaluate the effects of partial replacement of lactose by maltodextrin and the inclusion of an acid mix in diets for weanling pigs, on performance, digestibility and economical viability. One hundred and forty-four Dalland piglets with average initial weights of 6.0 0.45 and 5.8 0.53 kg were used in experiments I and II, respectively. Both experiments were conducted in a randomized complete block design, with factorial arrangement of treatments: absence of maltodextrin and acid mix; absence of maltodextrin and presence of acid mix; presence of maltodextrin and absence of acid mix; presence of maltodextrin and acid mix. More complex diets were used in experiment I, while less complex diets were employed in experiment II. There were no maltodextrin x acid mix interaction or acid mix effects on piglet performance in all evaluated periods in both experiments (P>0.05). Maltodextrin determined improvement in average daily feed intake and average daily gain from 0 to 14 days of experiment I (P=0.009), however no effect on pig performance was observed from 0 to 28 days (P>0.05) and from 0 to 16 and 0 to 30 days of experiment II (P>0.05). There were no maltodextrin x acid mix interaction and main factors effects (P>0.05) on nutrient apparent digestibility of pre-starter diets used in experiment II. Diets containing maltodextrin and maltodextrin with acid mix provided the best economical results. Neither maltodextrin nor acid mix affected the nutritional values of the diets. Therefore, maltodextrin is an alternative to replace lactose sources in diets for weanling pigs. The use of maltodextrin, associated or not with acid mix, resulted in larger economical advantages than lactose. / Resumo: Para avaliar os efeitos da suplementação dietética de maltodextrina, substituindo parcialmente a lactose, e de acidificante sobre o desempenho, viabilidade econômica e digestibilidade em leitões desmamados, foram conduzidos dois experimentos, sendo utilizados 144 leitões Dalland, com pesos iniciais médios de 6,0 0,45 e 5,8 0,53 kg nos experimentos I e II, respectivamente. Os delineamentos experimentais foram em blocos ao acaso, com arranjo fatorial dos tratamentos: ausência de maltodextrina e de acidificante; ausência de maltodextrina e presença de acidificante; presença de maltodextrina e ausência de acidificante; presença de maltodextrina e de acidificante. No experimento I foram utilizadas rações mais complexas, e no II, rações menos complexas. Não houve interação maltodextrina x acidificante e efeito de acidificante sobre o desempenho dos leitões nos períodos estudados nos dois experimentos (P>0,05). A maltodextrina determinou melhores consumo diário de ração e ganho diário de peso de 0 a 14 dias do experimento I (P=0,009), não sendo verificados efeitos sobre o desempenho de 0 a 28 dias (P>0,05) e nos períodos de 0 a 16 e 0 a 30 dias do experimento II (P>0,05). Não houve interação maltodextrina x acidificante e efeitos dos fatores (P>0,05) sobre os coeficientes de digestibilidade aparente dos nutrientes das rações pré-iniciais do experimento II. As rações com maltodextrina e maltodextrina mais acidificante proporcionaram maior vantagem econômica. A maltodextrina e o acidificante não influenciaram o valor nutricional das rações, sendo a maltodextrina uma alternativa às fontes de lactose para leitões desmamados. Combinado ou não com o acidificante nas rações, o uso da maltodextrina resultou em maior vantagem econômica em relação à lactose. / Mestre

Influenza A virus infections are a major cause of morbidity and mortality in the United States and throughout the world. The current vaccine elicits primarily a humoral response that is specific for the external glycoproteins hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA). However, these are the viral proteins that are most susceptible to antigenic shift and drift, and can evade the humoral response. Cytotoxic T lymphocytes (CTL) recognize and lyse virus-infected cells and are important in clearing influenza A virus infections. CTL can recognize epitopes on both the external glycoproteins and the more conserved internal viral proteins. This thesis investigates the hypothesis that there is a broad CTL memory response in humans, and, if boosted by vaccines, these CTL may help clear influenza A virus strains of different subtypes. The CTL repertoire specific for influenza A viruses reported in inbred mice is extremely limited and has focused on a few immunodominant epitopes. We perfonned preliminary bulk culture chromium release assays using human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) stimulated with influenza virus strain A/PR/8/34 (H1N1) in vitro. CTL activity was observed against autologous B-lymphoblastoid cell lines (B-LCL) infected with vaccinia constructs that expressed several influenza A viral proteins, including nucleoprotein (NP), matrix (M1), nonstructural 1 (NS1) and polymerase (PB1). This was more diverse than the limited response reported in inbred mice. To further characterize the CTL repertoire in humans, PBMC from healthy adult donors were stimulated and CTL were cloned by limiting dilution. Isolated cell lines were further characterized by their CD4/CD8 surface expression, histocompatibility leukocyte antigen (HLA) restriction, cross-reactive or subtype-specific influenza A subtype recognition, and epitope recognition. CTL lines isolated from three donors recognized epitopes on many different influenza virus proteins. The ELISPOT assay was used to identify the number of IFN-γ- secreting cells and determine the precursor frequency of the CTL specific for the epitopes that were mapped. The precursor frequency of IFN-γ producing CTL ranged from 1 in 4,156 PBMC to 1 in 31,250 PBMC. The precursor frequency for one epitope was below the level of detection of this assay, but most of the memory CTL were readily detected. The cross-reactive or subtype-specific recognition of various human influenza A subtypes by these T cell lines was determined by chromium release assays. Most of the CTL lines recognized B-LCL infected with any of the three influenza A subtypes that have caused epidemics in the last century (H1N1, H2N2, and H3N2) and recognized epitopes on conserved internal influenza viral proteins. Most of the subtype-specific cell lines recognized the surface HA or NA glycoproteins, which are not well conserved between influenza subtypes. Although most of the T cell lines that were characterized were cross-reactive with influenza viruses of human origin, infection of humans with a divergent swine or avian derived strain could cause a global pandemic. To study the human CTL responses to non-human influenza viruses, B-LCL were infected with an Hsw1N1 influenza A virus of swine origin, and cell lines were tested for recognition of these targets in a chromium release assay. Most cell lines lysed the targets infected With the Hsw1N1 subtype to the same degree as targets infected with the human H1N1 strain. Two influenza viruses of duck origin were also tested and were recognized by many of the cell lines. The subtypes of these duck strains were Hav1N1 and H5N2. The isolates of influenza A virus from the Hong Kong outbreak of 1997 were also used to infect targets and analyze recognition by these CTL. We found that approximately 50% of the human T cell lines tested recognized both of the Hong Kong isolates, 25% recognized at least one isolate, and 25% recognized neither isolate to the same degree as the A/PR/8/34 (H1N1) virus. We analyzed the amino acid (aa) changes in the epitopes of the T cells lines from the 25% of cell lines that did not recognize either Hong Kong virus isolate. Non-conservative mutations were found in all of the epitopes that lost recognition by the human CTL lines. Bulk cultures of PBMC from three donors that were stimulated with A/PR/8/34 (H1N1) influenza A virus of human origin recognized all of the non-human virus strains tested. Thus, humans have memory CTL that recognize influenza viruses of avian and swine species. This may provide a second line of defense against influenza infection in case of exposure to a novel influenza A virus derived from these species. These results made it clear that humans have broad CTL memory to influenza A virus. In order to determine whether these T cells could be boosted in a vaccine, immune-stimulatory complexes (Iscom) incorporating inactivated influenza particles were tested in vitro. Iscoms containing inactivated influenza A vaccine (Flu-Iscom) were used to pulse autologous B-LCL overnight that were then used as targets in chromium release assays with human CTL lines as effectors. A CD8+ HA-specific CTL line lysed these targets, but not targets pulsed with Iscoms alone or with inactivated influenza A vaccine alone. An NS1-specific cell line recognized targets pulsed with NS1 protein and Iscoms, but not targets pulsed with Iscoms or NS1 protein alone. Therefore, CTL could recognize in vitrotarget cells that were exposed to the Iscom vaccines containing their specific epitope. Flu-Iscom and Iscom mixed with inactivated influenza virus particles (Flu-Iscomatrix) were then used as vaccines in a clinical trial to test CTL and neutralizing antibody induction against influenza. Fifty-five donors were bled pre-vaccination, and on days 14 and day 56 post-vaccination. Bulk culture chromium release assays were performed using targets infected with live vaccine strain viruses. There were significantly more increases in the influenza A specific CTL activity in the PBMC of donors that were vaccinated with the Flu-Iscom and Flu-Iscomatrix vaccines than in recipients of the standard vaccine. In order to determine whether these increases in cytotoxicity were due to an increase in the precursor frequency of influenza specific CTL, the PBMC were used in ELISPOT assays to assess the changes pre-and post-vaccination. When there was an increase in the level of cytotoxicity detected in bulk culture CTL, there was often also an increase in the precursor frequency of influenza-specific CTL. Peptide-specific increases in the number of CTL that recognize epitopes such as M1 aa 58-66 were detected in several donors confirming the increase in influenza-specific CTL post-vaccination. Another type of T cell that may be involved in defense against viruses is the γδ T cell. T cells expressing the γδ T cell receptor (TCR) have been found extensively in mucosal tissues in mice and humans. Influenza A viruses enter via the airway tract, infecting the epithelial cells at the mucosal surface. These epithelial cells have been shown in vitro to be targets for influenza-specific cytolytic recognition of αβ T cells. To analyze whether γδ T cells can respond to influenza A-infected APCs, PBMC were stimulated with influenza A virus. Intracellular IFN-γ staining was used to determine whether γ/δ T cells can secrete IFN-γ in response to the influenza A virus infection. We observed an increase in the percentage of γ/δ T cells secreting IFN-γ post-influenza A virus infection of PBMC compared to uninfected or allantoic fluid-stimulated cultures. These T cells also upregulated CD25 and CD69 in response to live influenza A virus. We focused on the responses in the CD8- population of γδ T cells, which are the majority of γδ T lymphocytes. Furthermore, the increases in IFN-γ production and activation marker expression were much more clear in the CD8- γδ+ T cells. The level of CD8- γδ T cell activation with inactivated influenza A virus was much less, and in some cases no higher than uninfected PBMC. The CD8+ αβ and γδ responses could be partially blocked by anti-class I antibodies, but the CD8- γδ responses could not. Vaccinia virus infection did not activate the CD8- γδ T cells to the same degree as influenza virus infection. γδ T cells are thought to have a regulatory role that includes the secretion of cytokines and epithelial growth factors to help restore tissue back to health. Humans have broad multi-specific T lymphocyte responses by αβ T cells to influenza A viruses and those responses are cross-reactive with human, avian, and swine virus strains. These CTL can be activated in vitro and boosted in number in vivo by Iscom incorporating vaccines. There is also a population of γδ+ T lymphocytes in humans that responds to influenza virus infection by producing cytokines and becoming activated. Increasing memory CTL as a second line of defense against influenza A viruses may be important in future vaccine development.

The medicinal plants are included within the wide diversity of the MaciÃo de Baturità ecosytem and they are an important component of traditional medicine of this region. However, scientific information that may contribute to the increase in the cultivation of these plants are still rare, particularly at conditions of the State of CearÃ. The overall objective of this project is to evaluate the development and the production of alecrim pimenta (Lippia origanoides) at conditions of MaciÃo de BaturitÃ, CearÃ. Two experiments were conducted, the first during the dry season of 2013 (August to November) and the second during the rainy season of 2014 (February to May). The experiment was corned out in completely randomized design with split plots, being the plots defined by two seasons (drought and rainy), the subplot formed by light conditions (greenhouse and full sun), and the subsubplots formed by four evaluation times (0, 40, 80 and 120 days after transplanting). Five replications were used, each one represented by a pot of 20 L containing a plant. The following variables were evaluated: leaf area, plant height, stem diameter, dry matter production, leaf gas exchange, chlorophyll content, mineral nutrients, organic solutes, and essential oils. The alecrim pimenta grows well in the Baturità region, with yields of biomass and essential oil similar to those observed in other studies. The cultivation in greenhouse (50% of solar radiation) changed the pattern of development of alecrim pimenta, resulting in plants with better overall appearance, taller, with larger leaves, higher specific leaf area, less developed root system, and lower root/shoot ratio, regardless of the season of cultivation. The production of dry biomass of leaves and total did not differ between the two environments (light conditions) after 120 days cultivation, regardless of the period of year. During the drought season there was a strong influence of the light condition on stomatal conductance and transpiration, with the values being lower in full sun environment, suggesting stomatal sensitivity to climate conditions in this species. Plants grown in greenhouse showed, in general, higher levels of nutrients and nitrogen compounds (N-aminossolÃveis), compared to plants under full sunlight, regardless of the cropping season. / Dentre os vegetais que compÃem ampla diversidade do MaciÃo de Baturità se inserem as plantas medicinais, sendo estas, principais componentes da medicina tradicional. No entanto, informaÃÃes cientÃficas que possam contribuir para o incremento do cultivo dessas plantas ainda sÃo raras, particularmente nas condiÃÃes edafoclimÃticas do Estado do CearÃ. Objetivou-se com o presente trabalho, avaliar o desenvolvimento e o potencial produtivo do alecrim pimenta (Lippia origanoides) nas condiÃÃes edafoclimÃticas do MaciÃo de BaturitÃ, CearÃ. Foram realizados dois experimentos, sendo o primeiro durante o perÃodo seco de 2013 (agosto a novembro) e o segundo durante o perÃodo chuvoso de 2014 (fevereiro a maio). O experimento foi conduzido seguindo um delineamento inteiramente casualizados com parcelas subsubdivididas, sendo as parcelas definidas pelas duas estaÃÃes (seca e chuvosa), as subparcelas formadas pelas condiÃÃes de luminosidade (telado e pleno sol), e as subsubparcelas pelas quatro Ãpocas de avaliaÃÃo (0, 40, 80 e 120 dias apÃs o transplantio). Foram utilizadas cinco repetiÃÃes, sendo cada repetiÃÃo representada por um vaso de 20 litros contendo uma planta. Foram avaliadas as seguintes variÃveis: Ãrea foliar, altura da planta, diÃmetro do caule, massa seca dos diferentes ÃrgÃos vegetais, trocas gasosas, teores de clorofila, teores de minerais, solutos orgÃnicos e rendimento do Ãleo essencial. O alecrim pimenta desenvolveu-se bem na regiÃo do MaciÃo de BaturitÃ, com produtividades de biomassa e de Ãleo essencial similares Ãs observadas em outros estudos. O cultivo em telado alterou o padrÃo de desenvolvimento do alecrim pimenta, resultando em plantas com melhor aparÃncia geral, mais altas, com folhas maiores, maior Ãrea foliar especÃfica, menor desenvolvimento do sistema radicular e menor relaÃÃo raiz/parte aÃrea, independentemente da Ãpoca de cultivo. A produÃÃo de massa seca de folhas e total nÃo diferiu entre os dois ambientes apÃs 120 dias de cultivo, independentemente do perÃodo do ano. Houve forte influÃncia do ambiente de cultivo no perÃodo seco, sobre a condutÃncia estomÃtica e a transpiraÃÃo, com os valores sendo menores no ambiente a pleno sol, sugerindo a sensibilidade estomÃtica da espÃcie Ãs condiÃÃes atmosfÃricas do perÃodo. As plantas cultivadas em telado apresentaram, de forma geral, maiores teores de nutrientes minerais e de compostos nitrogenados (N-aminossolÃveis), em comparaÃÃo Ãs plantas submetidas a pleno sol, independente do Ãpoca de cultivo.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-05-09T14:08:24Z No. of bitstreams: 1 Maria Josilaine Matos dos Santos Silva.pdf: 148014 bytes, checksum: 75616ec345259bf80c5b0250d02bf7b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T14:08:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Josilaine Matos dos Santos Silva.pdf: 148014 bytes, checksum: 75616ec345259bf80c5b0250d02bf7b1 (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The experiment was conducted to evaluate the effects of inclusion of cassava instead of maize as feed for dairy goats of Saanen. The results were discussed in two chapters, the first consisting of the nutrient consumption, production, composition and physical characteristics of milk and the second digestibility and ingestive behavior of animals. Five lactating goats were used with an average production of 2 kg of milk per day allotted to a 5x5 Latin square design with five levels of inclusion of cassava (0, 10, 20, 30 and 40%) replacing corn. The dry matter intake in grams (g/day) in relation to body weight (%BW) and gram metabolic weight showed a quadratic behavior as a function of inclusion levels of cassava instead of maize grits. The intake of nutrients followed the behavior of dry matter intake. NDF intake, expressed in kilograms, depending on body weight and metabolic weight decreased linearly and non-fibrous carbohydrates linear increase. The replacement of cracked corn by cassava production did not affect kg of milk and milk yield corrected for 3.5% fat. The fat and total solids of milk in kg and percentage were not affected by inclusion levels of cassava instead of maize. The protein showed a linear increased and lactose quadratic effect. The physical characteristics of pH, temperature and density were not affected by inclusion levels of cassava instead of maize. The apparent digestibility of DM, CP, OM, TC was not affected by the replacement levels of ground corn for cassava. The apparent digestibility of the NDF fraction decreased linearly while that of CNF increased linearly with the increase of cassava in diets. Feeding behavior in all studied variables was not influenced by the inclusion of zest in place of corn. In dairy goats with produce of 2,0kg of milk per day, the corn grain can be completely replaced by cassava, resulting in increased nutrient intake above 30% inclusion, without changing the physical characteristics and production of milk, positively just changes the protein and lactose. The replacement of cracked corn by cassava did not affect the digestibility and chewing behavior of lactating goats. However, chalking and non-fiber carbohydrate of cassava are characteristics that should be considered. / O experimento foi conduzido com o objetivo de avaliar os efeitos da inclusão da raspa de mandioca em substituição ao milho na alimentação de cabras leiteiras de raça Saanen. Os resultados foram discutidos em dois capítulos: o primeiro tratou do consumo de nutrientes, produção, composição e características físicas do leite, e o segundo da digestibilidade de nutrientes e do comportamento ingestivo dos animais. Foram utilizadas cinco cabras lactantes com produção média de 2kg de leite/dia, distribuídas em um quadrado latino 5x5, com cinco níveis de inclusão de raspa de mandioca (0, 10, 20, 30 e 40%) em substituição ao milho. O consumo de matéria seca em grama (g/dia), em relação ao peso vivo (%PV) e grama por peso metabólico apresentou comportamento quadrático em função dos níveis de inclusão da raspa de mandioca em substituição do milho triturado. O consumo dos nutrientes seguiu o comportamento do consumo de matéria seca. O consumo de FDN, expresso em quilograma, em função peso vivo e peso metabólico, apresentou comportamento linear decrescente e carboidratos não fibrosos linear crescente. A substituição do milho triturado pela raspa de mandioca não influenciou a produção de leite em kg e produção de leite corrigido para 3,5% de gordura. A gordura e sólidos totais do leite em percentuais e em kg não foram influenciados pelos níveis de inclusão de raspa de mandioca em substituição ao milho. A proteína apresentou efeito linear crescente e lactose efeito quadrático. As características físicas pH, densidade e temperatura não foram influenciadas pelos níveis de inclusão da raspa de mandioca em substituição ao milho. A digestibilidade aparente da MS, PB, MO, CHOT não foi influenciada pelos níveis de substituição do milho triturado por raspa de mandioca. A digestibilidade aparente da fração FDN diminuiu linearmente enquanto que a dos CNF aumentou linearmente em função do aumento de raspa de mandioca nas dietas experimentais. O comportamento ingestivo, em todas as variáveis estudadas, não teve influência da inclusão da raspa em substituição ao do milho. Em cabras leiteiras com produção de 2,0kg de leite/dia o milho triturado pode ser substituído pela raspa de mandioca em níveis superiores de 30% até a completa substituição, com aumento de consumo de nutrientes, sem alterar a produção e características físicas de leite, apenas altera positivamente os teores de proteína e lactose. Não interfere na digestibilidade, assim como no comportamento ingestivo de cabas em lactação.

Orientador: Marcos Hikari Toyama / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T12:20:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_SimoneCristinaBuzzo_D.pdf: 2257171 bytes, checksum: dafe56777caf52fdf6e83be317bb28f9 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de glicações sobre a PLA2 secretórias isoladas do veneno das serpentes Crotalus durissus collilineatus e Bothrops jararacussu. A técnica de MALDI-TOF foi usado para comprovar a glicação dos carboidratos nas PLA2: a PLA2 de Cdcolli apresentou glicação a 6 moléculas de D-Glicose e de 5 moléculas de D-Lactose, mas aparentemente não houve glicação com nenhuma molécula de D-Galactose; a BthTX-I apresentou glicação com 5 moléculas de D-Glicose, 1 molécula de D-Galactose e 4 moléculas de D-Lactose; a BthTX-II apresentou ligação a 6 moléculas de D-Glicose, a 1 molécula de D-Galactose e a 4 moléculas de D-Lactose; além disso, a dimerização das PLA2 não ocorreu. A glicação da PLA2 de Cdcolli com D-Glicose e D-Lactose aumentou sua atividade enzimática e mudou seu perfil alostérico, da mesma forma, esses carboidratos aumentaram a ação edematogênica e anularam a atividade citotóxica dessa PLA2. No entanto, D-Lactose e D-Glicose diminuíram o efeito miotóxico e modificaram o perfil de agregação plaquetária da PLA2 de Cdcolli nativa, embora apenas a D-Lactose tenha diminuído significantemente a agregação. A glicação de BthTX-I a D-Glicose e D-Galactose diminuiu sua ação edematogênica, e sua glicação aos carboidratos testados diminuiu seu efeito miotóxico. A glicação de BthTX-II a D-Lactose diminuiu sua atividade enzimática, a ação edematogência foi diminuída pela glicação a todos os carboidratos, enquanto a glicação a D-Glicose e D-Galactose diminuíram seu efeito miotóxico. A fluorescência intrínseca apresenta mudanças na estrutura terciária de BthTX-I e BthTX-II após a glicação e o dicroísmo circular sugere modificação na estrutura secundária da PLA2 de Cdcolli. Além disso, a modelação da PLA2 de Cdcolli apresentou várias regiões da proteína livres onde pode estar ocorrendo a glicação. Esse resultados sugerem que a glicação modifica a estrutura da PLA2, modulando de forma diferente a atividade enzimática e o efeito biológico, possivelmente a mudança estrutural ou mesmo os carboidratos ligados a estrutura da PLA2 estão modificando sua afinidade a receptores de membrana. Adicionalmente, os resultados evidenciam que os sítios responsáveis pelas atividades enzimática e biológica estão em lugares diferentes dentro da estrutura da PLA2 / Abstract: The objective of this work was evaluate the effect of glycations in the secretory PLA2 isolated from Crotalus durissus collilineatus (Cdcolli) and Bothrops jararacussu (BthTX-I, catalytic inative K49 and BthTX-II, catalytic active D49) rattlesnake venom. The MALDI-TOF technic was used to test the glycation in the PLA2: Cdcolli showed glycation to 6 molecules of D-Glucose and 5 molecules of D-Lactose, but no glycation to D-Galactose; the BthTX-I showed glycation to 5 molecules of D-Glucose, 1 molecule of D-Galactose and 4 molecules of D-Lactose; the BthTX-II showed glycation to 6 molecules of D-Glucose, 1 molecule of D-Galactose and 4 molecules of D-Lactose. The glycation of PLA2 from Cdcolli to D-Glucose and D-Lactose increased the enzymatic activity and changed its alosteric profile, in the same way, theses carbohydrates increased the edematogenic effect and annuled the citotoxic activity. However, D-Lactose and D-Glucose decreased the miotoxic effect and changed the platelet aggregation profile of native PLA2, although only D-Lactose had decreased the aggregation. The glycation of BthTX-I to D-Glicose and D-Galactose decreased the edematogenic effect and its glycation to all carbohydrates decreased the miotoxic effect. The glycation of BthTX-II to D-Lactose decreased its enzymatic activity; the edematogenic effect was decreased by the glycation to all the carbohydrates, while the glycation to D-Glucose and D-Galactose decreased the miotoxic effect. The intrinsec fluorescence shows changes in the terciary structure of BthTX-I and BthTX-II after glycation and the circular dichroism suggests modification in the secundary structure of glycated PLA2 from Cdcolli. Besides, the structure modelation shows many free areas in the PLA2 from Cdcolli, where the glycation can be happening. Theses results suggest that the glycation modifies the structure of PLA2, modulating in a different way the enzymatic and the biologic activity; probably the structure changes or even the linked carbohydrates to the PLA2 structure are modifying the affinity for membrane receptors. Additionally, the results show that the enzymatic and biological sites are in different areas in the PLA2 structure. / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / INTRODUCTION: Carbohydrate restriction have been currently pointed as the main strategy for weight loss and improvement of cardiometabolic health. However, it is not elucidated its real effect over cardiometabolic risk factors, due to the different levels of restriction and specially when associated with regular exercise practice. OBJECTIVE: This study aimed to propose a protocol of intervention for healthy weight loss and to evaluate its effect over the metabolic risk factors of overweight individuals. METHODS: The present study was a Randomized Controlled Trial of 12 weeks, with nutritional monitoring and diet with low carbohydrate (L-CHO – 100 g/d) or adequate carbohydrate (A-CHO – 250 g/d) amounts, associated to high intensity intermittent (HIIT) or continuous exercises. The study began with 106 overweight subjects, of wich 57 were allocated to the continuous exercise group and 49 were allocated to the HIIT group, distributed into two groups, according to the amount of carbohydrate. The subjects were assessed for weight, height, abdominal and hip circumference, in the baseline (M0) and after 12 weeks (M1). Thirty one volunteers ended the intervention in the HIIT group and their datum were analized for cardiometabolic risk factors changes after the intervention, based on their lipid markers, insulin and glucose levels. For the statistical analysis were apllyied two-way ANOVA with Bonferroni post-hoc and p<0,05 was considered significant. RESULTS: Both groups showed improvements in the antropometric variables. Regarding cardiometabolic risk factors, it was observed that there was an improvement for both groups, however, a significant increase in HDL-c was observed only in the A-CHO group (53,3 mg/dl – 60,1 mg/dl), while the LDL-c similarly decreased in both groups (A-CHO: 121,8 mg/dl – 97,4 mg/dl; R-CHO: 112,7 mg/dl – 94,9 mg/dl). A significant reduction in the number of risk factors associated with metabolic syndrome was observed, but the reduction in the prevalence of metabolically unhealthy individuals was more expressive among individuals in the A-CHO group. CONCLUSION: Thereby, It is concluded that both diets applied were efficient to guarantee improvement of body composition and weight loss. In addition, both diet strategies may be efficient to promote improvements in cardiometabolic risk parameters. However, the improvement in the protective factor (HDL) and the final risk classification indicated the adequacy of carbohydrates as the best strategy associated with caloric restriction and HIIT. / INTRODUÇÃO: Atualmente, uma das principais estratégias aplicadas para redução ponderal e melhora da condição cardiometabólica é a restrição de carboidratos da dieta. Porém, ainda não se encontra totalmente elucidado o real efeito desta restrição sobre a condição cardiometabólica, devido aos diversos níveis de restrição e principalmente quando se trata da associação com a prática de exercício físico de alta intensidade. OBJETIVO: Propor um protocolo de intervenção para perda de peso saudável e avaliar o seu efeito sobre os marcadores do risco cardiometabólico de indivíduos com excesso de peso. METODOLOGIA: Trata-se de um ensaio clínico controlado randomizado desenvolvido em 12 semanas de acompanhamento nutricional com dieta com baixo teor de carboidratos (R-CHO – 100 g/d) ou teor adequado deste nutriente (A-CHO – 250 g/d) associado ao treinamento intermitente (HIIT) ou contínuo. Iniciaram o estudo 106 indivíduos com excesso de peso, destes, 57 foram alocados no grupo de treinamento contínuo e 49 foram alocados no grupo HIIT, distribuidos em dois subgrupos, de acordo com o teor de carboidratos da dieta. Os indivíduos foram avaliados no período pré-intervenção (M0) e ao final das 12 semanas (M1). Foram aferidos peso, estatura, circunferências abdominal e do quadril. Para o artigo II desta dissertação, foram considerados os dados dos 49 voluntários alocados no grupo HIIT, onde finalizaram a intervenção 31 indivíduos. Este artigo propõe a avaliação do efeito da intervenção com dieta R-CHO e HIIT sobre o risco cardiometabólico dos participantes, avaliado com base nos marcadores lipidêmicos, insulinêmicos e glicêmicos. Para análise estatística foi aplicado o teste ANOVA two-way com post-hoc de Bonferroni, considerando significativo os valores de p<0,05. RESULTADOS: Ambos os grupos apresentaram melhora significativa das variáveis antropométricas. Já com relação aos marcadores de risco cardiometabólico, observou-se que houve melhora para ambos os grupos, no entanto, o aumento significativo do HDL-c foi observado apenas no grupo A-CHO (de 53,3 mg/dl para 60,1 mg/dl), enquanto que o LDL-c reduziu significativamente em ambos os grupos (A-CHO: de 121,8 mg/dl para 97,4 mg/dl; R-CHO: de 112,7 mg/dl para 94,9 mg/dl). Observou-se redução significativa do número de fatores de risco associados ao risco cardiometabólico, porém a redução da prevalência de indivíduos metabolicamente não saudáveis foi mais expressiva entre os indivíduos do grupo A-CHO (24,3%). CONCLUSÃO: Conclui-se que ambas as dietas foram eficientes na melhora da composição corporal e perda de peso. Ambas estratégias dietéticas podem ser eficientes para promover melhorias dos marcadores de risco cardiometabólico, porém, o aumento no fator de proteção (HDL) e na classificação final do risco apontou a adequação de carboidratos na dieta como melhor estratégia associada à restrição calórica e HIIT.

INTRODUCTION The handling of the carbohydrate diet associated with physical exercise regularly bring benefits on body composition, cardiometabolic capacity and physical fitness in individuals with overweight. AIM 1 To compare changes in body composition and physical fitness in overweight and obese undergoing a 12-week weight loss program. METHODS 1 Study participants were 33 adults overweight and sedentary undergoing intermittent exercise and continuous exercise of semi-supervised way for 12 weeks. anthropometric measurements were measured (body mass, waist and hip circumferences, weight in fat and fat percentage) and physical tests (neuromuscular and cardiovascular). We used two-way ANOVA for data analysis, and 5% significance level. RESULTS 1 There was reduced body weight, abdomen and hip circumferences, fat percentage, weight in fat and weight in lean mass (p <0.05). On the parameters of physical fitness, there was an improvement of lower limb strength, agility, speed and cardiorespiratory capacity of individuals, however, with moderate to high effect size in intermittent exercise group for agility and a 6-minute running test (p < 0.05). There was no interaction between the type of exercise and physical fitness parameters (p> 0.05). CONCLUSION 1 Regular physical exercise in obese cause improvements in body composition and physical fitness regardless of the type of exercise. However, it seems that intermittent exercise has a greater clinical effect. AIM 2 To evaluate the effectiveness of reducing carbohydrate on body composition and cardiometabolic markers of sedentary obese women. METODOLODIA 2 study included 24 obese women and 8 consuming diets with adequate carbohydrate (A-CHO) and 16 consuming diets with reduced carbohydrate (R-CHO) performing continuous exercise semi-supervised for 12 weeks. anthropometric measurements were measured (body mass, waist and hip circumferences, weight in fat and fat percentage), biochemical (cholesterol and its fractions, ALT, AST, uric acid, urea, glucose). We used two-way ANOVA for data analysis, and 5% significance level. RESULTS 2 There was a reduction of body weight, abdomen and hip circumferences, fat percentage, weight in fat and weight in lean mass over time (p <0.05). About cardiometabolic parameters, carbohydrate diet manipulations responded similarly over time over time in the lipid profile, glycemia and AST (P <0.05). When evaluating the interaction of both diets with anthropometric and crdiometabólicos parameters, there was no interaction (p> 0.05). CONCLUSION 2 The improved food profile associated with regular physical exercise in obese cause improvements in body composition, cardiometabolic profile regardless of the type of dietary carbohydrate / INTRODUÇÃO A manipulação do carboidrato da dieta asociado a prática de exercício físico de forma regular trazem benefícios sobre a composição corporal, capacidade cardiometabólica e aptidão física em indivíduos com excesso de peso. OBJETIVO 1 Comparar as alterações na composição corporal e na aptidão física em sobrepesados e obesos submetidos a um programa de perda de peso de 12 semanas. METODOLOGIA 1 Participaram do estudo 33 indivíduos adultos com excesso de peso e sedentários submetidos a exercícios físicos intermitente e exercício físico contínuo de forma semi-supervisionada por 12 semanas. Foram aferidos medidas antropométricas (massa corporal, circunferências abdominal e do quadril, peso em gordura e percentual de gordura) e testes físicos (neuromusculares e cardiovasculares). Utilizou-se ANOVA two-way para análise dos dados, e nível de significância de 5%. RESULTADOS 1 Houve redução de massa corporal, circunferências do abdômen e do quadril, percentual de gordura, peso em gordura e peso em massa magra (p<0,05). Sobre os parâmetros da aptidão física, houve melhora da força de membros inferiores, agilidade, velocidade e capacidade cardiorrespiratória dos indivíduos, porém, com efeito clínico moderado e alto no grupo do exercício físico intermitente para agilidade e teste de corrida de 6 minutos (p<0,05). Não houve interação entre o tipo de exercício e parâmetros da aptidão física (p>0,05). CONCLUSÃO 1 A prática de exercício físico regular em obesos provocam melhorias na composição corporal e na aptidão física independente do tipo de exercício físico. Entretanto, parece que o exercício intermitente possui um maior efeito clínico. OBJETIVO 2 Avaliar a efetividade redução de carboidrato sobre a composição corporal e marcadores cardiometabólicos de mulheres obesas sedentárias. METODOLODIA 2 Participaram do estudo 24 mulheres obesas sendo 8 consumindo dietas com adequado teor de carboidrato (A-CHO) e 16 consumindo dietas com redução de carboidrato (R-CHO) realizando exercício físico contínuo semi-supervisionado por 12 semanas. Foram aferidos medidas antropométricas (massa corporal, circunferências abdominal e do quadril, peso em gordura e percentual de gordura), bioquímico (colesterol e suas frações, ALT, AST, ácido úrico, ureia, glicemia). Utilizou-se ANOVA two-way para análise dos dados, e nível de significância de 5%. RESULTADOS 2 Houve redução de massa corporal, circunferências do abdômen e do quadril, percentual de gordura, peso em gordura e peso em massa magra ao longo do tempo (p<0,05). Sobre os parâmetros cardiometabólicos, as manipulações de carboidrato da dieta responderam ao longo do tempo de maneira semelhante ao longo do tempo no perfil lipídico, AST e glicemia (p<0,05). Ao avaliar a interação de ambas as dietas com o perfil antropométrico e parâmetros crdiometabólicos, não houve interação (p>0,05). CONCLUSÃO 2 A melhora do perfil alimentar associado a prática de exercício físico regular em obesos provocam melhorias na composição corporal, perfil cardiometabólico independente do tipo do teor de carboidrato da dieta.

Currently, the oil of easy exploration has become increasingly scarce, and it may promote an increase in the prices of its derivatives and/or a possible shortage of raw materials, chemical products of great importance for the chemical industry. In addition, the reduction of dependence on non-renewable resources, such as the ones on petroleum-based, are firmly linked in the yearning of contemporary society, being the concept of "green" chemistry closely associated with the search for products and/or chemical processes that are linked to the use of clean technologies and sustainable development. Thus, many efforts have been employed in the search for new sources as chemical raw materials and energy through sources like carbohydrates from lignocellulosic biomass. In this context, the aim of this study was to implement and evaluate catalytic systems Sn base (IV) (dibutyltin dilaurate (IV) (DBTDL), Butylstannoic acid (BTA), di-n-butyl-oxo-stannane (DBTO) and tin oxide (SnO2)), in the conversion of carbohydrates such as fructose and glucose and chemical products with high added value (5-hidroximetilfurfal and lactic acid, for example), as compared to conventional systems without using catalyst reactions with the catalyst and sulfuric acid. The activity in terms of conversion, yield and selectivity of these catalytic complexes were evaluated in reactions performed at temperatures of 150 to 190 ° C, in water, at various reaction times. At 150 ° C, the use of catalysts led to low yields and conversions, however, the 190 ° C catalysts BTA, DBTO and DBTDL performed well in the fructose degradation reactions, with complete conversion within 30 min of reaction. The three systems were selective principally to lactic acid: BTA showed lower selectivity (33%) whereas the selectivity to DBTO and DBTDL catalyst was 55% at 30 min. The DBTO was also evaluated at times of 5, 10 and 15 min. The conversion was greater than 90% at 5 and 10 min, and the total in 15 min, with selectivity to lactic acid of 58% already at 15 min. For glucose degradation reactions, the metal complex DBTO was also active in isomerizing glucose to fructose and convert it into products such as 5-hydroxymethylfurfural and lactic acid, but with lower yields when compared with the results obtained with fructose. / Atualmente, o petróleo de fácil exploração vem ficando cada vez mais escasso, podendo promover um aumento nos preços de seus derivados e/ou uma possível escassez das matérias-primas, insumos químicos de grande importância para a indústria química. Além disso, a redução da dependência de recursos não renováveis, como os a base de petróleo, estão firmemente atrelados no anseio da sociedade contemporânea, sendo o conceito de química “verde”, intimamente associado à busca por produtos e/ou processos químicos que estejam vinculados ao uso de tecnologias limpas e ao desenvolvimento sustentável. Com isso, muitos esforços têm sido empregados na busca de novas fontes como insumos químicos e energia através de fontes como carboidratos da biomassa lignocelulósica. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi o de aplicar e avaliar sistemas catalíticos a base de Sn(IV) (Dibutildilaurato de estanho (IV) (DBTDL), Ácido butilestanóico (BTA), Óxido de dibutil estanho (DBTO) e Óxido de estanho (SnO2)), na conversão de carboidratos como frutose e glicose em insumos químicos com alto valor agregado (5-hidroximetilfurfal e ácido lático, por exemplo), comparativamente a sistemas tradicionais como reações sem uso de catalisador e com o catalisador ácido sulfúrico. A atividade em termos de conversão, rendimento e seletividade desses complexos catalíticos foram avaliadas em reações realizadas nas temperaturas de 150 e 190 ºC, em água, em diversos tempos de reação. A 150 ºC, o emprego dos catalisadores conduziram a baixos rendimentos e conversões, porém, a 190 ºC os catalisadores BTA, DBTO e DBTDL apresentaram bom desempenho nas reações de degradação da frutose, havendo conversão total em 30 min de reação. Os três sistemas foram seletivos, principalmente, a ácido lático: o BTA apresentou menor seletividade (33 %) enquanto que a seletividade para os catalisadores DBTO e DBTDL foi de 55 % em 30 min. O DBTO também foi avaliado em tempos de 5, 10 e 15 min. A conversão foi superior a 90 % em 5 e 10 min e total em 15 min, com seletividade a ácido lático de 58 % já em 15 min. Para as reações de degradação da glicose, o complexo metálico DBTO também foi ativo em isomerizar a glicose à frutose, e convertê-la em produtos como o 5-hidroximetilfurfural e ácido lático, porém com menores rendimentos quando se compara com os resultados obtidos com a frutose.

Orientador: Prof. Dr. Danilo da Cruz Centeno / Coorientadora: Profª. Drª. Hana Paula Masuda / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, São Bernardo do Campo, 2018. / A busca por fontes renováveis de energia tem aumentado devido à preocupação mundial com o uso excessivo de combustíveis fósseis, destacando-se como alternativa o etanol produzido a partir da cana-de-açúcar. O plantio de cana é intenso no Brasil, por ser uma cultura relativamente bem adaptada às distintas condições locais. No entanto, condições de estresse biótico e abiótico podem reduzir a produtividade e gerar grandes prejuízos, sobretudo em períodos de seca. Nesta perspectiva, o estudo de características agronomicamente desejáveis, como a tolerância ao déficit hídrico, em diferentes variedades é fundamental para a seleção de cultivares apropriadas e o desenvolvimento de cultivares mais produtivas, que elevem a produção de etanol, sem que haja uma expansão demasiada das áreas de cultivo de cana. Neste trabalho, indivíduos de cana-de-açúcar SP80-3280, uma das cultivares mais produzidas no Estado de São Paulo, foram cultivados em condições hídricas distintas e tiveram suas folhas mais jovens (folha +1) analisadas em diferentes aspectos. Os dados fisiológicos foram medidos no Infra-Red GAS Analyzer (IRGA). A quantificação relativa de transcritos foi feita através do método de PCR em tempo real (qPCR), para galactinol sintase (ScgolS), rafinose sintase (ScrafS) e estaquiose sintase (ScstaS), genes-chave na via dos Oligossacarídeos da Série da Rafinose (OSR), envolvida na tolerância à seca. As sequências codificantes de ScgolS, ScrafS e ScstaS, foram obtidas através de análises fenéticas, realizadas com as regiões codificantes de homólogos em milho, sorgo e cana. A quantificação dos metabólitos primários foi realizada através da técnica de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). Plantas que permaneceram sob déficit hídrico por 7 dias (DH - 7 dias) apresentaram diminuição em todos os parâmetros ecofisiológicos, e aumento nos níveis de mio-inositol, manitol, glicose, frutose, ácido quínico e ácido chiquímico. Já plantas com 20 dias de déficit hídrico (DH - 20 dias) mostraram diminuição na taxa de crescimento, no número de folhas verdes e na taxa fotossintética, mesmo com aumento nos níveis de condutância estomática e na concentração interna de CO2. Também apresentaram aumento nos níveis de frutose, galactose, ácido quínico e ácido chiquímico, e redução nos níveis de manitol. As plantas Reidratadas sobreviverem à reidratação e voltaram à crescer após o reestabelecimento da água, apresentando aumento na taxa fotossintética, mesmo com redução nos níveis de condutância estomática, na concentração interna de CO2 e na transpiração. Apresentaram também, aumento nos níveis de mio-inositol, manitol, frutose, ácidos orgânicos e ácidos graxos, e na quantidade relativa de transcritos de ScstaS. Em conclusão, plantas que passaram pelo déficit hídrico apresentaram redução da taxa de crescimento, maior quantidade de compostos relacionados ao ajuste osmótico, e não foi observada indução elevada dos genes-chave da via dos OSR. A sensibilidade de SP80-3280 ao déficit hídrico foi reafirmada, mas foi surpreendente a sobrevivência e reestabelecimento após a reidratação. Aparentemente, SP80-3280 induz mecanismos de prevenção ao déficit hídrico, que possibilitam sua sobrevivência, mas não consegue induzir suficientemente mecanismos de tolerância que garantam à planta melhores condições de crescimento diante do estresse. / The search for renewable sources of energy has increased due to the worldwide preoccupation with the excessive use of fossil fuels, highlighting as alternative the ethanol produced from sugarcane. Cane planting is intense in Brazil, because it is a relatively well adapted crop to the different local conditions. However, biotic and abiotic stress can reduce productivity and generate great losses, especially in periods of drought. In this perspective, the study of agronomically desirable characteristics, such as tolerance to water deficit, in different varieties is fundamental for the selection of appropriate cultivars and the development of more productive cultivars, increasing the ethanol production, without extensive expansion of sugarcane planting areas. In this work, individuals of cultivar SP80-3280, one of the most produced in the State of São Paulo, were cultivated under different water conditions and had their youngest leaves (leaf +1) analyzed in different aspects. Physiological data were measured in the Infra-Red GAS Analyzer (IRGA). The relative quantification of transcripts was done by real-time PCR method (qPCR) for galactinol synthase (ScgolS), raffinose synthase (ScrafS) and stachyose synthase (ScstaS), keygenes in the Raffinose Family Oligosaccharides (RFO), involved in drought tolerance. The coding sequences of ScgolS, ScrafS and ScstaS were obtained through phenetic analyzes performed with the homologous coding regions of maize, sorghum and cane. The primary metabolites were quantified by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The plants that remained under water deficit for 7 days (DH - 7 days) presented a decrease in all the ecophysiological parameters, and increased levels of myo-inositol, mannitol, glucose, fructose, quinic acid and shikimic acid. Plants with 20 days of water deficit (DH - 20 days) showed a decrease in the growth rate, in the number of green leaves and in the photosynthetic rate, even with an increase in stomatal conductance and in the internal CO2 concentration. There was also an increase in the levels of fructose, galactose, quinic acid and shikimic acid, and reduction in mannitol levels. The rehydrated plants survived rehydration and returned to grow after water reestablishment, with an increasing in the photosynthetic rate, even with a reduction in stomatal conductance, internal CO2 concentration and transpiration levels. They also showed increased levels of myo-inositol, mannitol, fructose, organic acids and fatty acids, and at the relative amount of ScstaS transcripts. In conclusion, plants that underwent water deficit had a reduction in the growth rate, a greater number of compounds related to the osmotic adjustment, and no high induction of the key genes of the RFO pathway was observed. The sensitivity of SP80-3280 to water deficit was reaffirmed, but survival and reestablishment after rehydration was surprising. Apparently, SP80-3280 induces prevention mechanisms that allow its survival, but it can not sufficiently induce tolerance mechanisms that guarantee the plant better growth conditions in the face of stress.