Peptídeos antimicrobianos (PAMs) fazem parte de um dos mecanismos da imunidade inata contra infecções. A microplusina é um PAM de 10.204 Da, isolado da hemolinfa livre de células e dos ovos do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. É um PAM aniônico em pH fisiológico, possui seis resíduos de cisteína, com formação de três pontes dissulfeto, além de sete resíduos de histidina concentrados principalmente na sua porção C-terminal. O presente trabalho teve como objetivo investigar o mecanismo de ação antimicrobiana da microplusina. A microplusina recombinante é ativa contra várias bactérias Gram-positivas e fungos, porém não apresenta atividade contra bactérias Gram-negativas. Para avaliar o seu mecanismo de ação, foram utilizados dois modelos: a bactéria Micrococcus luteus e o fungo Cryptococcus neoformans. A microplusina é bacteriostática contra M. luteus e apresenta localização intracelular na bactéria. Além disso, observamos que a microplusina liga cobre e que a adição deste metal ao meio de cultivo reduz sua atividade antibacteriana. Bactérias M. luteus pré-incubadas com microplusina retomam o seu crescimento quando cobre é adicionado ao meio. Estes dados indicam que a atividade da microplusina está relacionada à sua habilidade de depletar cobre do meio extra ou intracelular, sugerindo um efeito nutricional para o peptídeo. A microplusina apresenta estrutura terciária com cinco a-hélices e sua ligação ao cobre não induz mudanças conformacionais. Observou-se que as histidinas 1, 2 e 74 da microplusina podem estar envolvidas na formação de um sítio de ligação ao cobre. Quanto à C. neoformans, verificou-se que a microplusina inibe a melanização do fungo, um fator de virulência catalisado pela lacase, uma enzima cobre-dependente. Entretanto, a microplusina não afeta a atividade da lacase, nem sua expressão gênica. O peptídeo também não inibe a auto-polimerização de substratos fenólicos que levam à melanização. Sendo assim, mais estudos são necessários a fim de avaliar o mecanismo pelo qual a microplusina inibe a melanização. Adicionalmente, a microplusina afeta a viabilidade do fungo e reduz o tamanho de sua cápsula, outro importante fator de virulência. As atividades da microplusina sobre C. neoformans sugerem o seu potencial terapêutico. Experimentos in vivo com modelo murino, mostraram que a microplusina reduz o processo inflamatório e a viabilidade de C. neoformans nos pulmões, indicando que em condições otimizadas, o peptídeo pode atuar no controle de infecções. / Antimicrobial peptides (AMPs) take part of innate immune mechanisms against infections. Microplusin is a 10,204 Da AMP, isolated from cell-free hemolymph and eggs of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. It is an anionic AMP at physiological pH, with six cysteine residues forming three disulfide bridges and seven histidine residues clustered mainly at the carboxy end portion. The goal of the present work was investigate the antimicrobial action mechanism of microplusin. Recombinant microplusin is active against Gram-positive bacteria and fungi, however, no activity is detected for Gram-negative bacteria. Two models were used to evaluate the action mechanism of microplusin: the bacteria Micrococcus luteus and the yeast Cryptococcus neoformans. Microplusin is bacteriostatic against M. luteus and its localization is intracellular for these bacteria. Moreover, microplusin binds copper and the addition of this metal into the medium reduces its antibacterial activity. M. luteus bacteria pre-treated with microplusin recover its growth when copper is added. These data indicate that microplusin activity is related to its ability to deplete copper present in the extracellular or intracellular environment, suggesting a nutritional effect. Microplusin presents a tertiary structure with five a-helix and the copper binding does not induce conformation changes. In addition, it was observed that histidines 1, 2 and 74 from microplusin may be involved in the formation of a copper binding site. About C. neoformans, it was verified microplusin inhibits its melanization, a virulence factor catalyzed by laccase, a copper dependent enzyme. However, microplusin does affect neither laccase activity nor its gene expression. The melanization caused by auto-polymerazation of phenolic substrates, is also not inhibited by microplusin. Hence, additional studies are required to evaluate the mechanism by which microplusin inhibits melanization. In addition, microplusin also affects the fungi viability and reduces the capsule size, another important virulence factor.The microplusin activities against C. neoformans suggest its therapeutic potential. In vivo experiments with murine model showed that microplusin reduces the inflammation and the viability of C. neoformans in the lungs, indicating that, in optimized conditions, the peptide may act in the infection control.

O carrapato do boi, Rhipicephalus microplus, é o principal empecilho para o avanço da produção pecuária, causando enormes prejuízos econômicos. Durante a infestação, o carrapato acaba ingerindo uma grande quantidade de imunoglobulinas presentes no soro do hospedeiro. Desse modo, como mecanismo de defesa e com o objetivo de auxiliar o repasto sanguíneo realizado pelas fêmeas, carrapatos machos Ixodidae, secretam proteínas ligantes de IgG (IGBPs) contidas em sua saliva, teoricamente interferindo na ligação específica de anticorpos com antígenos do carrapato, bem como nas funções efetoras da IgG. Raças bovinas taurinas e zebuínas possuem uma peculiar distribuição de alótipos de IgG e, ao mesmo tempo, frente às infestações por carrapatos, tais raças se comportam de maneira distinta, sendo taurinas susceptíveis e zebuínas resistentes a esse ectoparasita. Uma vez que já é relatado na literatura existir diferença na ligação entre as IGBPs de diversos patógenos e os diferentes alótipos de IgG, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a natureza das interações entre a IGBP-C de R. microplus e os alótipos de IgG bovina de animais suscetíveis ou resistentes a carrapatos. Para isso, foi feita a genotipagem por sequenciamento da região CH1-CH3 de IgG1 e IgG2, de 40 bovinos da raça taurina Holandesa (Holandês preto e branco - HPB) e 40 bovinos zebuínos da raça Nelore, com posterior purificação do alótipo de IgG1 e IgG2 mais comum em cada raça a partir do soro dos animais homozigotos. Curiosamente, verificou-se que havia uma associação entre os genótipos da região constante da cadeia pesada de IgG1 e IgG2 com os fenótipos de infestação por carrapato observados nos animais estudados. Em seguida, foram realizados ensaios em sistema de Ressonância Plasmônica de Superfície (Biacore T200 - GE Healthcare) para avaliar a afinidade de ligação entre a proteína recombinante IGBP-C e os alótipos de IgG1 e IgG2 bovinas, de uma forma não cognata. Por meio do ensaio em Biacore, observou-se uma maior afinidade de ligação da IGBP-C com alótipos de IgG2 de ambas as raças estudadas em relação aos alótipos de IgG1 e apesar de ligar em mais moléculas do alótipo de IgG2 mais frequente em bovinos Nelore (resistente a carrapato), apresentou uma afinidade maior para o alótipo de IgG2 mais frequente na raça HPB (suscetível a carrapato). Além disso, foi possível confirmar a porção Fc como o sítio de ligação preferencial da IGBP-C na IgG. Por fim, para um maior entendimento da sua função, foi feita a modelagem por homologia da IGBP-C e em ensaios adicionais, visto que essa proteína também interfere no processo de angiogênese, bem como na ativação da via clássica do complemento. Em suma, no presente trabalho foi possível descrever algumas funções promovidas pela IGBP-C, demonstrando assim, a sua importância em compor mecanismos de escape do carrapato R. microplus em relação a resposta imune do hospedeiro / The cattle tick, Rhipicephalus microplus, is the main impediment to the advance of livestock production, causing enormous economic losses. During infestation, the tick ingests a large amount of immunoglobulins present in the host\'s serum. Consequently as a defense mechanism and for assisting the blood meal performed by females, male Ixodidae ticks secrete IgG binding proteins (IGBPs) contained in their saliva, theoretically interfering in the specific binding of antibodies with tick antigens and in the effector functions of IgG. The taurine and zebu bovine breeds have a peculiar distribution of IgG allotypes and also present different phenotypes of tick infestation, being susceptible taurines and zebuines resistant to this ectoparasite. Since it is reported in the literature that there is a difference in the binding between the IGBPs of different pathogens and the different IgG allotypes, the present work aimed to evaluate the nature of the interactions between the IGBP-C of R. microplus and the IgG from susceptible or tick resistant animals. For this, was done genotyping by sequencing of the CH1-CH3 region of IgG1 and IgG2 from forty Holstein taurine and forty Nelore zebu cattle, with subsequent purification of the more common IgG allotypes in each breed, from the serum of homozygous animals. Interestingly, there was an association between IgG1 and IgG2 heavy chain constant region genotypes with tick infestation phenotypes. Subsequently, assays were performed in Surface Plasmon Resonance System (Biacore T200) to evaluate the binding affinity between the recombinant IGBP-C protein and the bovine IgG1 and IgG2 allotypes in a non-cognate manner. Through the Biacore assay, was observed that IGBP-C binding more affinity with IgG2 than IgG1 allotypes of both breeds, and although IGBP-C binds more molecules of the most frequent IgG2 allotype in Nelore tick resistant cattle, showed a higher affinity for the most frequent IgG2 allotype in the HPB, tick susceptible cattle. In addition, it was possible to confirm the Fc portion as the preferred binding site of IGBP-C in IgG. The homology modeling of this protein was done for a better understanding of its function and finally, IGBP-C has also been shown to interfere with the angiogenesis process, as well as in the activation of the classical complement pathway. In short, in the present work it was possible to describe some of the functions promoted by the IGBP-C, thus demonstrating its importance in composing escape mechanisms of the R. microplus tick to the host immune response

Orientador: Gervásio Henrique Bechara / Banca: Romário Cerqueira Leite / Banca: Rosângela Zacarias Machado / Resumo: No presente estudo avaliou-se o desenvolvimento de resistência a ninfas do ixodídeo Amblyomma cajennense, induzida por infestações controladas, e a possível existência de reatividade cruzada com Amblyomma hebraeum. Para tal, caprinos sem contato prévio com carrapatos, com seis meses de idade, machos ou fêmeas, foram infestados três vezes sucessivamente com ninfas de A. cajennense. Ademais, outro grupo de caprinos foi infestado nas mesmas condições com ninfas de A. hebraeum e colhidos soros para pesquisa de possível reatividade cruzada com A. cajennense. Observou-se que caprinos desenvolveram resistência apenas parcial a ninfas de A. cajennense, como demonstrado pela alteração significativa dos seguintes parâmetros biológicos das ninfas, em relação à primoinfestação: redução de 41,7% e 37,1% no peso de ingurgitamento, respectivamente na 2ª e 3ª infestações; aumento de 20% no período de ecdise e redução de 25,7% na taxa de ecdise, respectivamente nas 3ª e 2ª infestações. Não houve alteração no período de ingurgitamento nem na porcentagem de recuperação de ninfas com as infestações sucessivas. A reação cutânea induzida pelas ninfas de A. cajennense durante as infestações em caprinos caracterizou-se por infiltrado de células inflamatórias, predominantemente neutrófilos e basófilos, estas últimas envolvidas na imunidade a carrapatos por meio de hipersensibilidade basofílica cutânea. Células apresentadoras de antígeno, nomeadamente macrófagos, linfócitos B e células dendríticas foram detectadas por imunoistoquímica em linfonodos drenantes de locais de fixação dos carrapatos, em maior número nos linfonodos dos animais infestados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the acquision of resistance against Amblyomma cajennense nymphs in naïve goats, induced by repeated and controlled infestations, and a possible cross-reactivity with A. hebraeum. Ten naive goats, of both sexes, aged six months were used throughout the experiment. Animals were infested artificially thrice, 30 days intervals between infestations. In addition, goats were infested at same conditions with the tick A. hebraeum as well. Sera from these animals were collected looking for possible cross-reactivity between antigens from these ixodids. It was observed that goats developed partially resistance to A. cajennense nymphs from the 1st infestation on as shown by changes in some biological parameters, as follows: increase of 41.7% and 37.1% in engorgement weight, respectively at the 2nd and 3rd infestations, decrease in 25.7% in nymph’s ecdise rate and increase of 20% in ecdise period, respectively at the 3rd and 2nd infestations. It was not observed alterations in engorgement period and percentage of yielded nymphs. Biopsies of tick bite lesions induced by A. cajennense nymphs during infestations in goats were characterized by inflammatory reaction with cellular influx by neutrophils and basophils predominantly, being the last one involved in the well-known cutaneous basophilia. Antigen presenting cells like macrophages, B-lymphocytes and dendritic cells were detected by immunohistochemical analysis of lymph nodes draining tick infested areas. It should be stressed that these cells were found in higher numbers at lymph nodes from infested goats than from the naïve ones. Western blotting analysis of nymphal A. cajennense extracts revealed shared polypeptides (160, 90 and 16kDa) when used sera from goats infested with A. cajennense either A. hebraeum, indicating cross reactivity between these two tick species. / Mestre

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-02-28T16:12:09Z No. of bitstreams: 2 Tese - Jaires Gomes de Oliveira Filho - 2018.pdf: 1814554 bytes, checksum: 3897a940820688b6672b09b6a409c4b8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-02-28T16:12:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Jaires Gomes de Oliveira Filho - 2018.pdf: 1814554 bytes, checksum: 3897a940820688b6672b09b6a409c4b8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-28T16:12:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Jaires Gomes de Oliveira Filho - 2018.pdf: 1814554 bytes, checksum: 3897a940820688b6672b09b6a409c4b8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Rhipicephalus sanguineus sensu lato, the "brown dog tick", preferentially parasite the domestic dog, in the latter can parasite others mammals species including humans. This tick demonstrates a hunting behavior by its host, being widely attracted by the bark and the CO2 among other signs related to the presence of its hosts. Despite being commonly found parasite on dogs, it is known that some breeds such as beagles are less parasitic than other breeds like English Cocker Spaniel which can present a parasitic load about up to 11.5 times higher than mongrel dogs. It is notable a capacity of ticks and other arthropods in their hosts in relation to desirable or undesirable characteristics that can perceive these by means of chemoreception of volatile compounds emanated by these hosts. This adaptive tool is called olfactory aposematism. Olfactory apostotism is capable of an ectoparasite in avoiding its hosts through a perception of a volatile chemical emanated by it that signals a negative adaptive response to the arthropod. Usually this response may be linked to immune factors, excessive grooming, inaccessibility or other factors. One of the big problems nowadays undoubtedly is the control of ticks and diseases that are transmitted to their hosts during the blood repast. One of the alternatives for control of parasitism in order to deter ticks from the search for their hosts is a use of compounds found in resistant hosts that are interpreted by these arthropods as non-hosts. These compounds demonstrate a more specific activity between arthropod parasites and their hosts, since they were selected during an adaptation between species involved in this parasite-host relationship forging bases of parasite selection by susceptible and resistant hosts. / Rhipicephalus sanguineus sensu lato, também conhecido como “carrapato marrom do cão”, parasita preferencialmente o cão doméstico, no entanto pode parasitar inúmeras outras espécies mamíferas inclusive seres humanos. Este carrapato demonstra um comportamento de busca ativa por seu hospedeiro, sendo amplamente atraído pelo latido e pelo CO2 e outros sinais relacionados a presença de seus hospedeiros. Apesar de parasitar preferencialmente cães sabe-se que algumas raças como o beagle são menos parasitadas que outras raças como Cocker spaniel inglês que podem apresentar uma carga parasitaria cerca de até 11,5 vezes maior que cães mestiços. É notável a capacidade de carrapatos e demais artrópodes tem em selecionar seus hospedeiros em relação a características desejáveis ou indesejáveis que conseguem perceber destes, por meio da quimiorrecepção de compostos voláteis emanados pelos hospedeiros. A esta ferramenta adaptativa damos o nome aposematismo olfativo que é capacidade de um de parasito em evitar seus hospedeiros mediante a percepção de um químico emanado por este que sinalize uma resposta adaptava negativa ao artrópode. Geralmente esta resposta pode estar ligada a fatores imunes, excesso de grooming ou inacessibilidade ou demais fatores. Um dos grandes problemas na atualidade sem dúvida e o controle de carrapatos e doenças que são transmitem a seus hospedeiros durante o repasto sanguíneo. Uma das alternativas para o controle de parasitismo afim de dissuadir os carrapatos da busca por seus hospedeiros é uma utilização de compostos encontrados em hospedeiros resistentes que são interpretados por estes artrópodes como não hospedeiros. Estes compostos demonstram atividade mais especifica entre artrópode parasitos e seus hospedeiros, pois foram selecionados durante uma adaptação entre espécies envolvidas nesta relação parasitohospedeiro forjando bases da seleção de parasitos por hospedeiros suscetíveis e resistentes.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-03-06T12:57:42Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - João Eduardo Nicaretta - 2018.pdf: 2264636 bytes, checksum: 885684a1eedaa0841a3168ca98a5ac48 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-03-06T12:58:02Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - João Eduardo Nicaretta - 2018.pdf: 2264636 bytes, checksum: 885684a1eedaa0841a3168ca98a5ac48 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T12:58:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - João Eduardo Nicaretta - 2018.pdf: 2264636 bytes, checksum: 885684a1eedaa0841a3168ca98a5ac48 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The knowledge of population dynamics allows us to study the variations in the abundance of populations of living beings. Knowledge of the abundance of ticks that parasitize lactating cattle in a given region is important when considering the direct damage that these ectoparasites cause and their ability to transmit pathogens to animals. The aim of the present study was to characterize the population dynamics of Rhipicephalus microplus in naturally infested mestizo dairy cattle maintained in a rotational grazing system for 12 months in a semi - humid tropical region in the state of Goiás. the selected cattle had the female ticks counted (4.5 to 8.0 mm). A flannel-dragging technique was also carried out in the pasture for the capture and subsequent counting of R. microplus larvae. The meteorological data were collected during the study to be used in regression and variance analyzes. Based on the experimental design used, it was possible to observe the increase in the number of tick generations during the experiment, for five generations during the year. It was also observed that the climatic variables such as humidity, temperature and rainfall had a direct relation with the amount of larvae present in the pasture (P> 0.05). The number of larvae present in pastures presented significant negative correlation (P≤0.05) with rainfall (P = 0.0001), ambient temperature (P = 0.0005) and relative humidity (P = 0.0120). On the other hand, the average parthenogenic counts in the animals' body did not show a significant correlation (P> 0.05) with the climatological parameters. In summary, it was possible to verify the presence of five generations / year of R. microplus in the tropical semi-humid region, besides the influence of the climatic variables on the non-parasitic phase of the bovine tick. These results are related to the biological, ecological, population and behavioral aspects of R. microplus, allowing us to help map an epidemiological profile in the region and to define future strategies for the management and control of this ectoparasite of cattle. / O conhecimento da dinâmica populacional nos permite estudar as variações na abundância das populações de seres vivos. O conhecimento da abundância de carrapatos que parasitam os bovinos em lactação em uma determinada região é importante quando se considera os danos diretos que estes ectoparasitos causam e suas capacidades de transmitir agentes patogênicos para os animais. Assim, o objetivo do presente estudo foi caracterizar a dinâmica populacional de Rhipicephalus microplus em bovinos leiteiros mestiços naturalmente infestados, mantidos em sistema de pastejo rotacionado, durante 12 meses, em uma propriedade com climatologia regional tropical semiúmido no estado de Goiás. Para isso, semanalmente os bovinos selecionados tiveram os carrapatos fêmeas contado (4,5 a 8,0 mm). Também foi realizado quinzenalmente a técnica de arraste com flanela na pastagem para captura e posterior contagem das larvas de R. microplus. Os dados meteorológicos foram coletados durante o estudo para serem utilizados em análises de regressões e variância. Com base no delineamento experimental utilizado, foi possível observar o aumento no número de gerações do carrapato durante o experimento, para cinco gerações durante o ano. Observou-se, ainda, que as variáveis climáticas como umidade, temperatura e pluviometria teve relação direta com a quantidade de larvas presentes na pastagem (P>0,05). O número de larvas presente nas pastagens apresentou correlação negativa significativa (P≤0,05) com a precipitação pluviométrica (P=0,0001), temperatura ambiente (P=0,0005) e umidade relativa do ar (P=0,0120). Por outro lado, as contagens médias de partenógenas presentes no corpo dos animais, não apresentaram correlação significativa (P>0,05) com os parâmetros climatológicos. Em síntese, foi possível constatar a presença de cinco gerações/ano de R. microplus na região tropical semiúmido, além de influência das variáveis climáticas sobre a fase não parasitária do carrapato bovino. Tais resultados relacionam-se com os aspectos biológicos, ecológicos, populacionais e comportamentais de R. microplus, permitindo nos auxiliar a traçar um perfil epidemiológico na região e definir estratégias futuras de manejo e controle deste ectoparasito de bovinos.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Paulo Henrique Duarte.pdf: 2250009 bytes, checksum: dd3eac04ae943ebe159aceec0bddbead (MD5) Previous issue date: 2008-02-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / This research is a study about the tick fauna of Pantanal wetlands, MS, Brazil. Evaluation of cattle-raising on ticks populations, a detailed study on tick feeding on feral pigs and a list of ticks witch are reported in the study area are included. The cattle-raising impact was evaluated by trapping free-living ticks using a CO2 tick-trap. The traps were distributed in two areas: protected area, and the Nhumirim Ranch. Both areas are contiguous and locate at sub-region of Nhecol?ndia (18?59 S and 56?39 W), Pantanal of Mato Grosso do Sul state, Brazil. In each area, four habitat types were selected: cerrado (tropical savanna), forest patches, lakes and soda lakes. The last two are temporary lagoons of fresh and salted water, respectively. A total of 980 nymphs, 613 adults and 13 larvae of ticks of the genus Amblyomma were collected in 256 hours of collection. In a pen of calves infested by Ornithodoros rostratus 114 specimens were collected in just two hours including larvae, nymphs and adults. Adults of A. cajennense and A. parvum were more abundant in the savanna at Nhumirim Ranch, but did not differ among habitat types at protected area. There was a tendency of having more nymphs in Nhumirim Ranch than in protected area. The second conduced experiment was the comparison of the tick fauna of feral pigs at dry and wet seasons. A total of 44 feral pigs were examined and the species found were A. cajennense, A. parvum e O. rostratus. More adult ticks were collected in the dry season. Ecological and epidemiological aspects were discussed. Feral pigs are introduced specie and the role of this mammal on amplifying Amblyomma cajennense is clear. O. rostratus seems to be accidental parasite of feral pigs. The last part is a commented list of species including collected data and scientific literature. Up to day 18 tick s specie are reported on Pantanal wetlands including Argasidae (two) and Ixodidae (16) tick s species. The main genus was Amblyomma and the same species founded on wildlife are present on domestic animals and humans. / A presente tese ? um estudo sobre o impacto da bovinocultura extensiva sobre a popula??o de carrapatos, e um levantamento da fauna de carrapatos da regi?o com um estudo detalhado sobre a ixodofauna do porco monteiro. Para o estudo de impacto da bovinocultura, foram utilizadas armadilhas de CO2, distribu?das em duas ?reas: Reserva Biol?gica e Fazenda Nhumirim. Ambas as ?reas s?o contiguas e est?o localizadas na sub-regi?o da Nhecol?ndia (18?59 S e 56?39 W). Em cada ?rea quatro tipos de habitat foram selecionados: cerrado, mata, baia e salina. Os dois ?ltimos s?o lagoas tempor?rias de ?gua doce e salobra, respectivamente. Na totalidade foram coletadas 980 ninfas, 613 adultos e 13 larvas de carrapatos do g?nero Amblyomma em 256 horas de coletas. Em um bezerreiro infestado por Ornithodoros rostratus, 114 exemplares, dentre larvas ninfas e adultos foram coletados em apenas duas horas de atividade. Adultos de A. cajennense e A. parvum foram mais abundantes no cerrado da Fazenda, mas n?o diferiram entre os tipos de habitat na Reserva Biol?gica. Existe uma tend?ncia para uma maior abund?ncia de ninfas de Amblyomma na Fazenda do que na Reserva Biol?gica. O outro estudo realizado comparou a fauna de carrapatos adultos dos porcos monteiros entre as esta??es, cheia e seca. Os carrapatos encontrados foram A. cajennense, A. parvum e O. rostratus. E foram encontrados mais carrapatos adultos na seca que na cheia, foi discutida a import?ncia eco-epidemiol?gica destas rela??es parasit?rias, principalmente em fun??o do Porco monteiro ser uma esp?cie introduzida na regi?o. O ?ltimo cap?tulo apresenta uma lista comentada que reuniu os dados coletados pelo autor bem como resultados publicados na literatura cient?fica. Nos dias de hoje, existe registro de 18 esp?cies de carrapatos inclu?do as fam?lias Argasidae (2) e Ixodidae (16). O g?nero mais comum foi Amblyomma e as mesmas esp?cies de carrapatos foram comuns para animais selvagens, dom?sticos e para o homem, o que constitui uma rede complexa e din?mica de hospedeiros e parasitas.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-09-08T13:37:00Z No. of bitstreams: 1 2011 - Mariana Guedes Camargo.pdf: 1490617 bytes, checksum: fa92cbaf85207d3979daee781f5d74b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T13:37:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011 - Mariana Guedes Camargo.pdf: 1490617 bytes, checksum: fa92cbaf85207d3979daee781f5d74b1 (MD5) Previous issue date: 2011-08-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The formulations of entomopathogenic fungi to control ticks has been widely studied. The present study evaluated the efficacy of Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) and Beauveria bassiana oily formulations on different Rhipicephalus microplus stages. The efficacy of conidial aqueous suspensions was compared to the efficacy of conidia formulated in 10, 15 or 20% mineral oil. Twelve groups were studied: one control aqueous, three control groups oil-based at 10%, 15% or 20%, two fungal aqueous suspensions of M. anisopliae s.l. or B. bassiana and M. anisopliae s.l. or B. bassiana oil-based formulations at 10%, 15% or 20%. To prepare aqueous suspensions and oily formulations, fungal isolates were cultivated on grains rice in polypropylene bags. The conidial suspensions and formulations had concentration of 108 conidia/mL. Bioassays were repeated twice. After treatment, the biological parameters of engorged females were evaluated; the following parameters were evaluated in the bioassays with eggs: period of incubation, period of hatch and hatching percentage; in bioassays with larva mortality was evaluated. Metarhizium anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations were more effective than aqueous suspensions to R. microplus eggs, larvae and engorged females. Metarhizium anisopliae s.l. oil-based formulations caused significant effects in all biological parameters of engorged females while B. bassiana oil-based formulations modified significantly the nutritional index only. Metarhizium anisopliae s.l. and B. bassiana formulated in mineral oil caused a control percentage up to 93.69% and 21.67%, respectively, while M. anisopliae s.l. and B. bassiana aqueous suspension caused a control percentage of 18.70% and 1.72%, respectively. Eggs treated with M. anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations had reduced percentage of hatch up to 102.5 and 3.65 times, respectively. In the bioassay with larvae, M. anisopliae s.l. oil-based formulations caused approximately 100% mortality five days after treatment, while larva treated with B. bassiana oil-based formulations reached 100% mortality only at day 20 after treatment. Larva from oil-based control groups had mortality at day 15 after treatment, indicating possible toxic effect off the oil for this R. microplus stage. The results showed that M. anisopliae s.l., Ma 959 isolate, was more virulent to R. microplus engorged females, eggs and larvae than B. bassiana, Bb 986 isolate. The fungal mineral oily formulations tested were more effective than the aqueous suspension. Oil-based formulations at 10%, 15% or 20% enhances the activity of M. anisopliae s.l., Ma 959, and B. bassiana, Bb 986, to R. microplus tick and can be used as an adjuvant for oily formulations / A utiliza??o de formula??es de fungos entomopatog?nicos no controle de carrapatos tem sido amplamente estudada. O presente estudo avaliou a efic?cia de formula??es do isolado Ma 959 de Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) e Bb 986 de Beauveria bassiana contendo 10%, 15% e 20% de ?leo mineral sobre ovos, larvas e f?meas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus, al?m de comparar a efici?ncia entre formula??es oleosas e suspens?es aquosas dos mesmos isolados f?ngicos sobre as fases do desenvolvimento do carrapato R. microplus. Foram formados doze grupos: controle aquoso e controles com 10%, 15% ou 20% de ?leo mineral, suspens?o aquosa de M. anisopliae s.l. ou B. bassiana e formula??es de M. anisopliae s.l. ou B. bassiana contendo 10%, 15% ou 20% de ?leo mineral. Para o preparo das suspens?es aquosas e formula??es oleosas, os isolados f?ngicos foram cultivados em gr?os de arroz acondicionado em sacos de polipropileno. As suspens?es e formula??es conidiais utilizadas possu?am concentra??o de 108 con?dios/mL. Os bioensaios foram repetidos duas vezes. Os par?metros biol?gicos das f?meas ingurgitadas foram avaliados; em rela??o aos ovos foram avaliados os per?odos de incuba??o e eclos?o e o percentual de eclos?o, e para larvas foi avaliado o percentual de mortalidade. As formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. e de B. bassiana foram mais eficazes sobre ovos, larvas e f?meas ingurgitadas de R. microplus do que as suspens?es aquosas. O isolado de M. anisopliae s.l. formulado em ?leo mineral causou altera??es significativas em todos os par?metros de f?meas ingurgitadas, entretanto, as formula??es oleosas do isolado de B. bassiana alteraram significativamente somente o ?ndice nutricional. Os isolados f?ngicos de M. anisopliae s.l. e B. bassiana formulados em ?leo mineral apresentaram percentual de controle de at? 93,69% e 21.67%, respectivamente, enquanto que o percentual de controle das suspens?es aquosas de M. anisopliae s.l. e B. bassiana foi de 18,70% e 1,72%, respectivamente. No tratamento de ovos, as formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. e B. bassiana causaram redu??o no percentual de eclos?o de at? 102,5 e 3,64 vezes, respectivamente. No bioensaio com larvas, as formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. causaram um percentual de mortalidade pr?ximo a 100% no quinto dia ap?s o tratamento, enquanto que as formula??es de B. bassiana atingiram este percentual somente no 20? dia ap?s o tratamento. Os grupos controle contendo ?leo mineral causaram mortalidade de larvas a partir do 15? dia ap?s o tratamento, indicando um poss?vel efeito t?xico do ?leo sobre este est?gio de R. microplus. Os resultados demonstram que o isolado Ma 959 de M. anisopliae s.l. foi mais virulento para f?meas ingurgitadas, ovos e larvas de R. microplus do que o isolado Bb 986 de B. bassiana. As formula??es oleosas dos fungos testados foram mais eficazes do que as suspens?es aquosas. O ?leo mineral utilizado nas concentra??es de 10%, 15% e 20% potencializa a a??o dos isolados Ma 959 de M. anisopliae s.l. e Bb 986 de B. bassiana contra o carrapato R. microplus, podendo ser utilizado como adjuvante em formula??es oleosas.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-11-09T18:08:26Z No. of bitstreams: 1 2017 - Giselle Arieiro Jones.pdf: 1320964 bytes, checksum: e8d0ab39f4d7067b17f7ebd4d2d26139 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T18:08:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Giselle Arieiro Jones.pdf: 1320964 bytes, checksum: e8d0ab39f4d7067b17f7ebd4d2d26139 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / CAPES / The parasitism caused by Rhipicephalus microplus, popularly known as cattle tick, causes several losses to the Brazilian livestock. The indiscriminate use of chemical products for its control has generated several negative effects and in this context, studies involving the fungus Metarhizium spp. for biological control of ticks have shown great importance. The present study evaluated the virulence of 11 isolates of Metarhizium spp. for engorged females, eggs and larvae of R. microplus and also the conidiogenesis potential of the same isolates and their relationship with virulence. Single point of inoculum and cultivation between slide and coverslip were performed to evaluate the macro and micromorphology of the isolates. During the bioassay using engorged females, the effects of fungi on reproductive parameters were evaluated by analyzing the control percentage of each isolate after treatment by immersion of females in suspensions of 107 and 108 conidia / mL. The virulence of the isolates for eggs and larvae was evaluated by observing the hatch rate and mortality, respectively, after treatment with aqueous suspensions of Metarhizium spp. at concentrations of 105, 106, 107 and 108 conidia / mL. The LC50 and CL90 of each isolate for larvae were also calculated on the 25th day after treatment. To calculate the conidiogenesis of the isolates, three random cuts of 1.256 cm2 of area of each plate containing fungal conidia of 14 days of culture were made, then stirred in 1 ml of distilled water solution and 0.1% tween 80 and one aliquot of this suspension was quantified using a Neubauer chamber and optical microscope. Parametric data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey test and non-parametric by Kruskal Wallis test followed by Student-Newman-Keuls (SNK) with significance level of 5% through free software R Studio Version 0.99 .903 and the "agricolae" package (Statistical Procedures for Agricultural Research), version 1.2-4. In addition, multivariate statistics were applied using Principal Component Analysis (PCA) for parameters of engorged females. The macro and micromorphological analysis of the isolates tested were compatible with those described in the literature for Metharizium spp. In general, the results were directly proportional to the concentrations that were tested and the isolates ARSEF 729 of Metarhizium anisopliae and ARSEF 3643 of Metarhizium anisopliae senso latu, presented the best results for R. microplus females, eggs and larvae, proving to be good candidates for future studies, whereas the isolate ARSEF 2211 of Metarhizium anisopliae senso latu demonstrated low virulence for all stages. The conidiogenesis of the different isolates tested varied a lot and no relation between conidia production and virulence was observed. The present study made possible the selection of isolates of Metarhizium spp. with high virulence for several stages of life of the R. microplus tick as well as isolates with high conidia production and their relationship with virulence, emphasizing the importance of studies to select suitable isolates for future use in formulations for biological control in the field. / O parasitismo causado por Rhipicephalus microplus, conhecido popularmente como carrapato dos bovinos, acarreta diversos preju?zos para a pecu?ria brasileira. O uso indiscriminado de produtos qu?micos para o seu controle tem gerado diversos efeitos negativos e nesse contexto, estudos envolvendo o fungo Metarhizium spp. para controle biol?gico de carrapatos tem demonstrado grande import?ncia. O presente estudo avaliou a virul?ncia de 11 isolados de Metarhizium spp. para f?meas ingurgitadas, ovos e larvas de R. microplus e tamb?m o potencial de conidiog?nese dos mesmos isolados e a sua rela??o com a virul?ncia. Pontos ?nicos de in?culo e microcultivo entre l?mina e lam?nula foram realizados a fim de avaliar a macro e micro morfologia dos isolados. Durante o bioensaio utilizando f?meas ingurgitadas, foram avaliados os efeitos dos fungos sobre os par?metros reprodutivos atrav?s da an?lise do percentual de controle de cada isolado ap?s o tratamento por imers?o das f?meas em suspens?es aquosas de 107 e 108 con?dios/mL. A virul?ncia dos isolados para ovos e larvas foi avaliada atrav?s da observa??o da taxa de eclos?o e mortalidade, respectivamente, ap?s tratamento com suspens?es aquosas nas concentra??es de 105, 106, 107 e 108 con?dios/mL. Tamb?m foi calculada a CL50 e CL90 de cada isolado para larvas no vig?simo quinto dia ap?s o tratamento. Para calcular a conidiog?nese dos isolados, foram feitos tr?s recortes aleat?rios de 1,256 cm2 de ?rea de cada placa contendo con?dios f?ngicos de 14 dias de cultivo, em seguida foram agitados em 1mL de solu??o de ?gua destilada e tween 80 a 0,1% e uma al?quota desta suspens?o foi quantificada com o auxilio de c?mara de Neubauer e microsc?pio ?ptico. Os dados param?tricos foram avaliados pela an?lise de vari?ncia (ANOVA) seguida do teste de Tukey e os n?o param?tricos pelo teste de Kruskal Wallis seguido de Student-Newman-Keuls (SNK) com n?vel de signific?ncia de 5% atrav?s do software livre R Studio Vers?o 0.99.903 e o pacote ?agricolae? (Statistical Procedures for Agricultural Research), vers?o 1.2-4. Adicionalmente foi aplicada estat?stica multivariada mediante a An?lise de Componentes Principais (ACP) para par?metros de f?meas ingurgitadas. A an?lise macro e micromorfol?gica dos isolados testados se mostrou compat?vel com as descritas na literatura para Metharizium spp. De maneira geral, os resultados se apresentaram diretamente proporcionais ?s concentra??es que foram testadas e os isolados ARSEF 729 de Metarhizium anisopliae e ARSEF 3643 de Metarhizium anisopliae senso latu, apresentaram os melhores resultados para f?meas, ovos e larvas de R. microplus, demonstrando ser bons candidatos para estudos futuros. O isolado ARSEF 2211 de Metarhizium anisopliae senso latu demonstrou baixa virul?ncia para todos os est?gios. A conidiog?nese dos diferentes isolados testados se mostrou muito variada e n?o apresentou nenhuma rela??o com a virul?ncia dos mesmos. O presente estudo possibilitou a sele??o de isolados de Metarhizium spp. com alta virul?ncia para os diferentes est?gios de vida do carrapato R. microplus bem como isolados com alta produ??o de con?dios, ressaltando a import?ncia de estudos que visem selecionar isolados adequados para serem utilizados futuramente em formula??es para controle biol?gico a campo.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-08-28T18:22:19Z No. of bitstreams: 1 2016 - Allan Felipe Marciano.pdf: 1368631 bytes, checksum: bba1066f388233008b1c3f41343d33e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T18:22:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Allan Felipe Marciano.pdf: 1368631 bytes, checksum: bba1066f388233008b1c3f41343d33e2 (MD5) Previous issue date: 2016-10-03 / CAPES / CNPq / The tick Rhipicephalus microplus has been considered the most important parasite in cattles. It causes economic lost in dairy and beef cattle. As the fungus Metarhizium spp, a promising biocontrol agent, with remarkable virulence and efficacy against this arthropod. Environmental conditions can directly influence entomopathogenic fungal activity when it is released on the field. Therefore, adjuvants should be used to enhance fungal pathogenicity, stability and viability under unfavorable environmental conditions. Accordingly, several oily vehicles have been studied as adjuvant components. The present study aimed at investigate under semi-natural conditions, the permanence of fungi in the soil, the pathogenicity and the efficacy of two isolates of Metarhizium anisopliae sensu latu (ARSEF 3641 and CG 148) formulated in oil (soy and mineral), on engorged females of R. microplus engorged. The fungus was mass produced on rice cultivation and the semi-natural environment was framed from pots with Brachiaria brizantha cv. Marandu. The experiment was compound of seven groups: Control OLV (treated with vegetable oil and 0,1% of tween 80), Control OLM (treated with mineral oil and 0,1% of Tween 80), Treated 3641 OLV (treated with isolated ARSEF 3641 + vegetable oil); Treated 3641 OLM (treated with ARSEF 3641 isolated + mineral oil); Treated CG 148 OLV (treated with CG148 isolated + vegetable oil); Treated CG 148 OLM (treated with CG 148 isolated + mineral oil). Each group contained ten pots. The soil of each pot was sprayed with 80 ml of formulation at 108 conidia/ml in accordance with the proposed group. Afterwards, 5 engorged females were put on each pot. All pots were daily inspected for evaluating the percent mortality of famales. The efficacy of formulations tested was obtained by comparison of the number of live larvae collected at the apex of forage leaves of the control groups with the number of larvae from the treated groups. The collection of larvae was held on the 7th, 14th and 21st after the hatch. To evaluate the presence of Metarhizium spp. in the soil, a methodology was established to quantify the colonies number found in samples collected from each pot before the spraying and at 3th, 7th, 21th and 60th day after treatment. For the standardization of the methodology set out in the quantification of colonies in the soil, data from three evaluators were confronted by Kaapa test, the statistical analysis of data were submitted to the distribution of normality by the Shapiro-Wilk test. Data were analyzed as nonparametric and we used the Kruskal-Wallis test for analysis of variance followed by the Student-Newman-Keuls to compare the mean. The tested oil fungal formulations showed daily efficacy ranging between 85,08 and 96,13% compared to their respective controls. The group trated with isolated ARSEF 3641 formulated both in mineral oil and vegetable oil showed the better efficacy when compared to the respective control groups. Also, during tick females? laying period, it was possible to observe Metarhizium spp. externalization on R. microplus engorged females cuticle in all groups that were exposed to fungal formulations, confirming the ability of these fungal isolates on develop all growth stages over this arthropod in semi-natural conditions. Both fungal isolates formulated in vegetable or mineral oil showed to be able to remain active in semi-natural environment as they were pathogenic and effective against engorged females, and able to reduce significantly future generations of the tick. / O carrapato Rhipicephalus microplus ? considerado um dos principais agentes de parasitismo em bovinos por representar significativas perdas econ?micas na pecu?ria de leite e corte. Sendo o fungo Metarhizium spp, um promissor agente biocontrolador para este artr?pode, por apresentar grande virul?ncia e efic?cia contra este ectoparasita. Agentes microbianos quando lan?ados a campo, podem sofrer grande influ?ncia pelas intemp?ries ambientais, devendo estes receberem componentes que favore?am a sua patogenicidade, perman?ncia e viabilidade no ambiente, a fim de atingirem resultados satisfat?rios. Visto isto, diferentes ve?culos oleosos v?m sendo alvos de estudos como componentes adjuvantes. O objetivo deste trabalho foi investigar, sob condi??es seminaturais, a perman?ncia no solo, a virul?ncia e a efic?cia de dois isolados do fungo Metarhizium anisopliae s.l. (ARSEF 3641 e CG 148) formulados em ?leo (soja e mineral) sobre f?meas de R. microplus, assim como a taxa e recupera??o de larvas. O fungo foi produzido em massa a partir do cultivo dos isolados em arroz e para a forma??o do ambiente seminatural, sementes de Brachiaria brizantha, cultivar Marandu, foram plantadas em vasos de polipropileno. O experimento foi composto por sete grupos: Controle CTR (grupo sem tratamento); Controle OLV (tratado com ?leo vegetal e Tween 80 a 0,1%), Controle OLM (tratado com ?leo mineral e Tween 80 a 0,1%), Tratado 3641 OLV (tratado com o isolado ARSEF 3641 + ?leo vegetal + Tween 80 a 0,1%); Tratado 3641 OLM (tratado com o isolado f?ngico ARSEF 3641 + ?leo mineral + Tween 80 a 0,1%); Tratado CG 148 OLV (tratado com o isolado 148 + ?leo vegetal + Tween 80 a 0,1%); Tratado CG 148 OLM (tratado com o isolado CG 148 + ?leo mineral + Tween 80 a 0,1%). Cada grupo conteve dez vasos. Foram pulverizados sobre a superf?cie do solo de cada vaso, 80ml da formula??o a 108 con?dios/ml de acordo com o grupo proposto para cada formula??o e posteriormente 5 f?meas ingurgitadas de peso m?dio e homog?neo foram adicionadas em cada vaso. Os mesmos foram vistoriados diariamente para a avalia??o da mortalidade das f?meas. O percentual de efic?cia das formula??es dos isolados testados foi obtido a partir da compara??o entre o n?mero de larvas vivas coletadas no ?pice das folhas da forrageira dos grupos controles e dos grupos tratados. A coleta de larvas foi realizada no 7?, 14? e 21? ap?s a eclos?o das mesmas. Para a avalia??o da presen?a de Metarhizium spp. no solo, foi estabelecido e validada uma metodologia para a quantifica??o do n?mero de col?nias encontradas em amostras coletadas de cada vaso antes da pulveriza??o e no 3?, 7?, 21? e 60? dia ap?s o tratamento. A valida??o do m?todo se fez pelo confronto da avalia??o de tr?s observadores utilizando o teste Kaapa. Para a an?lise estat?stica dos demais dados, os mesmos foram submetidos ? distribui??o da normalidade pelo teste de Shapiro-Wilk sendo classificados como n?o param?tricos e foi utilizado o teste de Kruskal Wallis para an?lise de vari?ncia, seguido do Student-Newman-Keuls para compara??o entre as ordena??es m?dias. Os grupos tratados com as formula??es f?ngicas oleosas apresentaram efic?cia m?dia no controle de R. microplus variando entre 85,08 e 96,13% em rela??o aos seus respectivos grupos controles durante o per?odo de avalia??o do n?mero de larvas infestantes. O isolado ARSEF 3641 formulado tanto em ?leo vegetal quanto em ?leo mineral apresentou os melhores percentuais de efic?cia. Durante o per?odo de postura das f?meas, foi poss?vel encontrar a exterioriza??o de Metarhizium sp. nas mesmas em todos os grupos tratados com as formula??es f?ngicas, confirmando a capacidade dos isolados f?ngicos em se manterem e realizarem todas as fases de desenvolvimento sobre o artr?pode em condi??es seminaturais. Ambos os isolados testados, nas duas condi??es de formula??es propostas, mostraram-se aptos a permanecerem ativos no ambiente seminatural, virulentos e eficazes contra f?meas de R. microplus, sendo capazes de reduzir significativamente gera??es futuras do carrapato.

Orientador: Maria Izabel Souza Camargo / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito tóxico e terapêutico do extrato da glândula salivar (EGS) de fêmeas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus senso lato (Acari: Ixodidae), alimentadas por 2 dias em hospedeiros, em diferentes concentrações, por meio de injeções intraperitoneais em ratas Wistar. Os resultados clínicos mostraram que na concentração de 10 μg/μL houve aumento da frequência de neutrófilos e diminuição da de linfócitos. Na análise histológica do fígado, observou-se que o extrato nessa concentração causou alguns efeitos tóxicos como vacuolização citoplasmática nos hepatócitos e desorganização estrutural dos cordões celulares. Nas concentrações de 40 e 80 μg/μL, as ratas ganharam peso corporal e tiveram o peso relativo do fígado diminuído, evidenciandoo que essas concentrações causaram toxicidade sistêmica. Nesse trabalho foi também analisado o efeito do EGS apenas na concentração de 0,04μg/μL, sobre lesões pré-neoplásicas (LPN) no fígado de ratos Wistar e observou-se aumento no peso relativo apenas do fígado nos animais dos grupos LPN e LPN+EGS quando comparados ao controle. A histologia mostrou que os animais LPN, antes da injeção do extrato, foram os que tiveram o tecido hepático com maiores danos (desorganização dos cordões, aumento de tecido conjuntivo, vacuolização citoplasmática, células apoptóticas e aumento na frequência de células de Kupffer, células de defesa deste órgão) os quais foram reduzidos quando os ratos receberam o EGS. No pres... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to evaluate the toxic and pharmacological effect of salivary gland extract (SGE) of female ticks Rhipicephalus sanguineus in different concentrations through intraperitoneal injections in Wistar rats. Clinical results showed that at the concentration of 10 μg/μL there was an increase in neutrophil frequency and a decrease in lymphocytes. It was also observed that in the liver histological analysis, the extract at this concentration caused some toxic effects: cytoplasmic vacuolization in the hepatocytes and structural disorganization in the cellular cords. At concentrations of 40 and 80 μg/μL, rats body weight increased, and relative liver weight decreased, showing that these concentrations caused systemic toxicity. In this study, was analysed the effect of SGE in the concentration of 0.04 μg/μL on the pre-neoplasic lesions (PNL) in the liver of Wistar rats, and there was an increase in the relative weight of the liver in the groups PNL and PNL + SGE. The histology showed that the PNL animals had the hepatic tissue with the biggest damage (cord disorganization, increase of connective tissue, cytoplasmic vacuolization, apoptotic cells and increased Kupffer cell quantity, indicating immune response), those alterations were reduced when the mice received the SGE as treatment. In the study about the in vitro evaluation of the acaricides effect of thymol and carvacrol on RML-15 cells from R. sanguineus s.l. ticks were carried out. Thymol at all tested concentration... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor