A degradação de proteínas da matriz extracelular pelas metaloproteases da matriz (MMPs) ocorre nos processos fisiológicos (turnover) bem como nos processos patológicos (inflamação, neoplasias, etc). A atividade das MMPs nos tecidos é regulada, naturalmente, por um grupo de inibidores teciduais de metaloproteases (TIMPs). Recentemente, um novo inibidor de MMPs, chamado RECK (proteína indutora de reversão rica em cisteína com domínios Kazal) foi identificado. Neste estudo, verificamos os níveis de transcritos para metaloproteases da matriz (MMP-2, -9 e -14), inibidores teciduais de metaloproteases (TIMP-1 e -2) e RECK, por meio da técnica de Real-Time RT-PCR, assim como as células envolvidas em granulomas periapicais para MMP-2 e -9, por meio de marcações de imuno-histoquímica. As amostras deste estudo foram coletadas de cirurgias paraendodônticas, sendo 15 submetidas ao Real-Time RT PCR (8 granulomas periapicais, 6 cistos periapicais e 1 cicatriz apical), e 10 para imuno-histoquímica (10 granulomas periapicais). Os resultados para o Real-Time PCR demonstraram que houve a expressão de MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, e RECK em granulomas e cistos periapicais, não havendo diferença estatisticamente significante entre as duas patologias periapicais frente aos genes testados. Todavia, quando o grupo lesão periapical (granuloma e cisto periapical) foi confrontado frente aos genes pesquisados, houve uma correlação significativa entre os níveis de transcritos para MMP-2, -9 e -14, TIMP-1, -2 e RECK. Para as imunomarcações nos granulomas periapicais, a MMP-2 apresentou um padrão mais difuso, dispondo-se perifericamente às células e dispersas pela MEC, em comparação com a MMP-9 que apresentou um padrão mais localizado e restrito. Os macrófagos foram às células que mais expressaram estas metaloproteases da matriz. / Degradation of extracellular matrix (ECM) proteins by matrix metalloproteinases (MMPs) occurs during matrix turnover and pathologic processes (inflammation, cancers). MMP activity in the tissues is regulated in part by a group of tissue inhibitors (TIMPs). Recently, a new MMP inhibitor called RECK (reversion inducing cysteine-rich protein with a Kazal motif) has been identified. In this study, we verified the message (mRNA) for MMPs (MMP-2, -9 e -14), tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP-1 e -2) and RECK, through a Real-Time RT-PCR technique, as well as the cells expressing MMP-2 and -9 in periapical granulomas using immunohistochemistry. Samples were collected during periapical surgery, of which 15 were used for Real-Time RT PCR (8 periapical granulomas, 6 periapical cysts and 1 apical scar), and 20 for immunehistochemistry (10 periapical granulomas). The results for Real-Time PCR showed MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, and RECK expression in periapical granulomas and cysts, with no significant statistical differences between the twoperiapical pathologies regarding the genes tested. However, when the group periapical lesion (granuloma and cyst) was confronted with the genes tested,there was a significant correlation in some mRNA expression for MMP-2, -9, - 14, TIMP-1, -2 and RECK. Regarding immunostainings in the periapical granulomas, MMP-2 was more diffusely expressed, being located peripherally to the cells and dispersed through the ECM, when compared to MMP-9 which presented a more localized and restrained pattern. Macrophages were the most abundant cells expressing these MMPs.

MOURÃO, Renata Veras Carvalho. Estudo da relação do infiltrado inflamatório mononuclear e expressão de Ki-67, colágeno tipo IV e laminina em cistos radiculares. 2013. 55 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-05-10T16:16:51Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_rvcmourão.pdf: 1282049 bytes, checksum: 3750ec775d984e0cf02e33acd4dd7626 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-05-16T13:40:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_rvcmourão.pdf: 1282049 bytes, checksum: 3750ec775d984e0cf02e33acd4dd7626 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-16T13:40:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_rvcmourão.pdf: 1282049 bytes, checksum: 3750ec775d984e0cf02e33acd4dd7626 (MD5) Previous issue date: 2013 / Jawbone cysts are classified as odontogenic and non-odontogenic cysts. The radicular cyst is the most common odontogenic cyst of inflammatory origin, whereas the detigerous cyst is the most common type of developmental odontogenic cyst. These cysts and their variations have different etiopathogenesis and biological behavior, but are equally lytic. The proliferation activity of the epithelial lining and the components of the basement membrane and extracellular matrix constitute targets of research. The aim of this study was to evaluate the relation between mononuclear inflammatory infiltrate and the expression of proliferative immunomarkers (Ki 67), and proteins of basement membrane and extracellular matrix in radicular cysts. In this retrospective observational study, all cases of jawbone cysts that had been recorded in the files of the Department of Pathology and Legal Medicine (FAMED), and of the Laboratory of Oral Pathology (FFOE) of the Federal University of Ceará (UFC) and reviewed. After histological revision, the groups were divided into heavily inflamed radicular cysts (HIRC) (n=17), slightly inflamed radicular cysts (SIRC) (n=9) and dentigerous cysts (DC) (n=9). The presence and intensity of the lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate and the preservation of the epithelial lining were the parameters used to select the cases. Immunohistochemical analyses were performed using the standard streptavidin-biotin-peroxidase method. The primary antibodies used in this study included Ki 67 (Dako®, 1:50), Anti-Collagen Type IV (DBS®, 1:40) and Anti- Laminin (DBS®, 1:20).The immunoexpression of Ki-67 was more intense in the SIRC group compared to the HIRC group and DC. Likewise, the immunoexpression of Anti-Collagem Type IV in the basement membrane of the SIRC group presented a statistically significant difference compared to the HIRC group and DC . The expression of laminin in the basement membrane and in group HIRC and DC was negative and the group of SIRC was weak and punctual. It was concluded that presence and severity of inflammatory content wall of radicular cysts appear to modify the expression of proliferation factors in the coating epithelium and collagen type IV and laminin in the basement membrane but not modific with the behavior of extracellular matrix in radicular cyst. The expression of basement membrane components (laminin and collage type IV) is higher in radicular cyst with mild inflammatory infiltrade. / Os cistos dos ossos maxilares são classificados como odontogênicos e não odontogênicos. Dentre os odontogênicos inflamatórios, destaca-se o cisto radicular, e entre os de desenvolvimento, o dentígero. Estes cistos e suas variantes apresentam etiopatogênese e comportamento biológico diferentes, mas são igualmente líticos. A atividade proliferativa do epitélio de revestimento, dos componentes da membrana basal e da matriz extracelular, possivelmente, interferem nos mecanismos de crescimento, constituindo alvos de pesquisas. Este trabalho teve por objetivo avaliar a relação do infiltrado inflamatório mononuclear com a expressão de marcadores de proliferação (Ki 67) e das proteínas da membrana basal e matriz extracelular nos cistos radiculares. Trata-se de um estudo retrospectivo e observacional tendo sido realizado um levantamento dos casos catalogados no Serviço de Biopsia do Departamento de Patologia e Medicina Legal (FAMED) e no Laboratório de Patologia Bucal (FFOE) (UFC). Após a revisão histológica, os grupos foram divididos em cisto radicular intensamente inflamado (CRII) (n=17), cisto radicular levemente inflamado(CRLI)(n=.9) e cisto dentígero (CD) (n= 9). A presença e intensidade do infiltrado inflamatório histiolinfoplasmocitário e preservação do epitélio de revestimento foram os parâmetros utilizados para seleção dos casos. Os espécimes foram submetidos à reação de imuno-histoquímica por estreptoavidina biotina, utilizando-se os anticorpos Ki 67 (Dako®, 1:50), anti-colágeno IV (DBS®, 1:40) e anti-laminina (DBS®, 1:20). A expressão de Ki 67 foi mais intensa no grupo CRLI, quando comparada ao grupo CRII e CD. A expressão de colágeno tipo IV na membrana basal foi significante no grupo CRLI, quando comparada com o grupo CRII e CD. Já a imunomarcação de matriz extracelular variou de ausente a fraca nos grupos CRII e CRLI, enquanto no CD se exibiu de forma fraca a moderada, sendo esta diferença significativa. A expressão de laminina em membrana basal nos grupos CRII e CD foi negativa e no grupo dos CRLI foi fraca e pontual. Concluiu-se que a presença e a intensidade do conteúdo inflamatório na parede dos cistos radiculares parecem modificar a expressão dos fatores de proliferação no epitélio de revestimento, e colágeno tipo IV e laminina na membrana basal, mas não interferem no comportamento do colágeno IV da matriz extracelular nos cistos radiculares. A expressão de componentes da membrana basal (laminina e colágeno tipo IV) é maior nos cistos radiculares com leve infiltrado inflamatório.

A degradação de proteínas da matriz extracelular pelas metaloproteases da matriz (MMPs) ocorre nos processos fisiológicos (turnover) bem como nos processos patológicos (inflamação, neoplasias, etc). A atividade das MMPs nos tecidos é regulada, naturalmente, por um grupo de inibidores teciduais de metaloproteases (TIMPs). Recentemente, um novo inibidor de MMPs, chamado RECK (proteína indutora de reversão rica em cisteína com domínios Kazal) foi identificado. Neste estudo, verificamos os níveis de transcritos para metaloproteases da matriz (MMP-2, -9 e -14), inibidores teciduais de metaloproteases (TIMP-1 e -2) e RECK, por meio da técnica de Real-Time RT-PCR, assim como as células envolvidas em granulomas periapicais para MMP-2 e -9, por meio de marcações de imuno-histoquímica. As amostras deste estudo foram coletadas de cirurgias paraendodônticas, sendo 15 submetidas ao Real-Time RT PCR (8 granulomas periapicais, 6 cistos periapicais e 1 cicatriz apical), e 10 para imuno-histoquímica (10 granulomas periapicais). Os resultados para o Real-Time PCR demonstraram que houve a expressão de MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, e RECK em granulomas e cistos periapicais, não havendo diferença estatisticamente significante entre as duas patologias periapicais frente aos genes testados. Todavia, quando o grupo lesão periapical (granuloma e cisto periapical) foi confrontado frente aos genes pesquisados, houve uma correlação significativa entre os níveis de transcritos para MMP-2, -9 e -14, TIMP-1, -2 e RECK. Para as imunomarcações nos granulomas periapicais, a MMP-2 apresentou um padrão mais difuso, dispondo-se perifericamente às células e dispersas pela MEC, em comparação com a MMP-9 que apresentou um padrão mais localizado e restrito. Os macrófagos foram às células que mais expressaram estas metaloproteases da matriz. / Degradation of extracellular matrix (ECM) proteins by matrix metalloproteinases (MMPs) occurs during matrix turnover and pathologic processes (inflammation, cancers). MMP activity in the tissues is regulated in part by a group of tissue inhibitors (TIMPs). Recently, a new MMP inhibitor called RECK (reversion inducing cysteine-rich protein with a Kazal motif) has been identified. In this study, we verified the message (mRNA) for MMPs (MMP-2, -9 e -14), tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP-1 e -2) and RECK, through a Real-Time RT-PCR technique, as well as the cells expressing MMP-2 and -9 in periapical granulomas using immunohistochemistry. Samples were collected during periapical surgery, of which 15 were used for Real-Time RT PCR (8 periapical granulomas, 6 periapical cysts and 1 apical scar), and 20 for immunehistochemistry (10 periapical granulomas). The results for Real-Time PCR showed MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, and RECK expression in periapical granulomas and cysts, with no significant statistical differences between the twoperiapical pathologies regarding the genes tested. However, when the group periapical lesion (granuloma and cyst) was confronted with the genes tested,there was a significant correlation in some mRNA expression for MMP-2, -9, - 14, TIMP-1, -2 and RECK. Regarding immunostainings in the periapical granulomas, MMP-2 was more diffusely expressed, being located peripherally to the cells and dispersed through the ECM, when compared to MMP-9 which presented a more localized and restrained pattern. Macrophages were the most abundant cells expressing these MMPs.

O cisto periodontal apical (CPA) forma-se como resultado de uma inflamação crônica induzida por um processo infeccioso bacteriano, com a presença de células inflamatórias e citocinas, as quais estão relacionadas com a formação e crescimento cístico. Os linfócitos são as células predominantes no infiltrado inflamatório de lesões periapicais, e podem se diferenciar em células das respostas imunes Th1 e Th2. Assim como os linfócitos, os macrófagos podem se diferenciar em subtipos celulares. Macrófagos M1 e M2 desempenham um papel importante no direcionamento da resposta imune, devido a sua capacidade de promover a diferenciação de linfócitos em Th1 e Th2 respectivamente. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a presença da resposta Th1 e macrófagos M1, por meio da expressão de IL-1β, TNF- α e IL-6, e a resposta Th2, pela presença de macrófagos M2 por meio da expressão de CD163 na cápsula cística de 24 casos de CPAs. A avaliação dos biomarcadores foi realizada através de reações imuno-histoquímicas, dividindo a espessura da cápsula em regiões superficial e profunda. Observou-se uma maior expressão das citocinas IL-1β, IL-6, TNF-α e macrófagos M2 na região superficial (p < 0,001). Ausência de correlação foi notada entre a intensidade da inflamação e CD163 na região superficial (p = 0,082; r = 0,362) e profunda (p = 0,415; r = 0,174). Verificou-se, ainda, correlação positiva entre IL-1β e IL-6 e a intensidade da inflamação em ambas regiões. A correlação das expressões das citocinas IL-1β, IL-6 e TNF-α mostrou-se positiva em ambas regiões. Em relação ao CD163, houve correlação positiva quando correlacionado com o TNF-α (p = 0,007; r = 0,537) e a IL-6 (p = 0,018; r = 0,478) na região superficial. Nossos resultados demonstraram a presença da resposta imune Th1 e macrófagos M1 nos CPAs por meio da expressão das citocinas TNF-α, IL-1β, IL-6 e resposta imune Th2 por meio da presença de macrófagos M2 nestas lesões, sendo estas células associadas às citocinas TNF-α e IL-6. / The radicular cyst (RC) results from chronic inflammation induced by a bacterial infectious process and reveals the presence of inflammatory cells and cytokines, which are related to the cystic formation and growth. The lymphocytes are the predominant cells in the inflammatory infiltrate of periapical lesions. These cells can differentiate into cell subtypes and produce two types of cellular immune responses: T-helper type 1 (Th1) and T-helper type 2 (Th2). In the same way as lymphocytes, the macrophages can differentiate into cell subtypes. M1 and M2 macrophages play an important role in the targeting of the immune response, due to their ability to promote the differentiation of lymphocytes towards Th1 and Th2 pathways, respectively. The aim of the present study was to evaluate the presence of Th1 response and macrophages M1, through the expression of IL-1 β, TNF-α and IL-6, and Th2 response and the presence of macrophages M2 through the expression of CD163 in cystic capsule of twenty-four cases of RCs. The biomarkers were evaluated by immunohistochemical reactions, dividing the capsule thickness into superficial and deep regions. A greater expression of the cytokines IL-1β, IL-6, TNF-α and M2 macrophages in the superfcial region (p < 0.001) was observed. Absence of correlation was noted among the intensity of inflammation and CD163 in the superficial (p = 0.082, r = 0.362) and deep region (p = 0.415; r = 0.174). There was also a positive correlation among IL-1β and IL-6 and the intensity of inflammation in both regions. The correlation of IL-1β, IL-6 and TNF-α cytokines expression was positive in both regions. In relation to CD163, there was a positive correlation when correlated with TNF-α (p = 0.007, r = 0.537) and IL-6 (p = 0.018, r = 0.478) in the superficial region. Our results demonstrated the presence of the Th1 immune response and M1 macrophages in CPAs through the expression of TNF-α, IL-1β, IL-6 cytokines and Th2 immune response through the presence of M2 macrophages in these lesions. In addition, M2 cells were associated with TNF-α and IL-6 cytokines. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2009. / Made available in DSpace on 2012-10-24T13:57:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 267161.pdf: 2643687 bytes, checksum: cbc35430374d13d70bc30bf92fdd1b70 (MD5) / Esse estudo propôs investigar os aspectos relacionados à proliferação celular e ao mecanismo da apoptose no epitélio de revestimento de cistos radiculares (CRs) e dentígeros (CDs). Secções seriadas de 17 cistos radiculares e nove cistos dentígeros foram preparadas para detecção imunoistoquímica, pelo método estreptavidina-biotina-peroxidase (LSAB), dos antígenos Caspase-3 (pró-apoptótico), Bcl-2 (anti-apoptótico) e do marcador de proliferação celular Ki-67. A análise e quantificação das reações foram obtidas com auxílio do programa NIH ImageJ. O marcador Caspase-3 foi detectado principalmente nas camadas suprabasal e superficial de CRs e CDs, enquanto a expressão de Ki-67 foi predominante na camada basal dessas lesões. Ambos marcadores tiveram expressão mais significativa em epitélios hiperplásicos, relacionados a um intenso infiltrado inflamatório na cápsula conjuntiva. A expressão de Bcl-2 foi observada exclusivamente na camada basal do epitélio, com diminuição em áreas associadas a infiltrado inflamatório na cápsula. Nos CDs a expressão de Bcl-2 foi significantemente maior quando comparada aos CRs. Esses resultados sugerem que a atividade proliferativa dos cistos é balanceada pela apoptose, agindo como um mecanismo regulador na manutenção da espessura do revestimento epitelial. Demonstrou-se, ainda, que o processo inflamatório inibe a expressão de Bcl-2, sendo esse resultado mais evidente em CRs. Os cistos dentígero e radicular apresentam mecanismos distintos de formação, mas possuem comportamento biológico semelhante do revestimento epitelial diante da presença de intenso infiltrado inflamatório na cápsula de tecido conjuntivo fibroso. / This study proposed to investigate the aspects related to cell proliferation and the mechanism of apoptosis in epithelial linings of radicular cysts (RCs) and dentigerous cysts (DCs). Serial sections of 17 RCs and nine DCs were prepared for immunohistochemical detection, by the method streptavidin-biotin-peroxidase (LSAB), of antigens Caspase-3 (pro-apoptotic), Bcl-2 (anti-apoptotic) and of the cell proliferation marker Ki-67. The analysis and quantification of the reactions were obtained using the program NIH ImageJ. The marker Caspase-3 was detected mainly in the suprabasal and superficial layers of RCs and DCs, while the expression of Ki-67 was predominantly in the basal layer of these lesions. Both markers had higher expression in hyperplasic epithelium, related to an intense inflammatory infiltrate in conjunctive capsule. The expression of Bcl-2 was observed exclusively in the basal layer of the epithelium, with a reduction in areas associated with inflammatory infiltration in the capsule. The expression of Bcl-2 in DCs was significantly higher when compared to the RCs. These results suggest that the proliferative activity of the cysts is balanced by apoptosis, acting as a regulatory mechanism in maintaining the thickness of the lining epithelium. It was shown also that the inflammatory process inhibits the expression of Bcl-2, this result was more evident in RCs. The dentigerous and radicular cysts have different mechanisms of formation, but have similar biological behavior of the epithelial lining facing the presence of intense inflammatory infiltrate in the capsule of fibrous connective tissue.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-02T20:16:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Raphaela Silva Leandro Santos.pdf: 2858553 bytes, checksum: fed89296295c51fb6999d3c552b880f5 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-03T21:59:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Raphaela Silva Leandro Santos.pdf: 2858553 bytes, checksum: fed89296295c51fb6999d3c552b880f5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:59:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Raphaela Silva Leandro Santos.pdf: 2858553 bytes, checksum: fed89296295c51fb6999d3c552b880f5 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Introdução: Pouco se sabe sobre o papel modulador exercido pelos linfócitos T reguladores (Treg) e pelas diferentes citocinas envolvidas no desenvolvimento e manutenção dos cistos radiculares (CR). Diante disso, o objetivo deste estudo foi avaliar a imuno-expressão dos marcadores CD4, CD25, interleucina-10 (IL-10), interleucina -17 (IL-17) e forkhead box P3 (FoxP3) em CR e associar esses achados com características histológicas dessas lesões. Métodos: Cinquenta e cinco espécimes teciduais de CR foram analisados quanto às suas características histológicas e submetidos à análise imuno-histoquímica utilizando os anticorpos anti-CD4, anti-CD25, anti IL-10, anti-IL-17 and anti-FoxP3. Os resultados da imunoexpressão foram correlacionados com a intensidade do infiltrado inflamatório e a espessura do revestimento epitelial cístico. Resultados: Todos os casos apresentaram marcação positiva para todos os marcadores estudados, mas com intensidades de expressão diferentes. A expressão de CD4, CD25, IL-10 e FoxP3 foi considerada fraca para todos os casos avaliados, enquanto que a IL-17 apresentou expressão forte e foi observada tanto nas células inflamatórias quanto no revestimento epitelial. Não foi observada diferença estatisticamente significante entre os marcadores avaliados e a intensidade do infiltrado inflamatório e a espessura do revestimento epitelial. Foi observada correlação positiva as marcações de IL-17 e FoxP3. Conclusão: Os presentes resultados evidenciaram uma participação menos expressiva de células Treg em cistos radiculares, através da fraca expressão de CD4, CD25, IL-10 e FoxP3, em detrimento de uma presença mais significativa de IL-17. / Introduction: Little is known about T regulatory (Treg) lymphocytes and cytokines modulation in development and maintenance of radicular cysts (RC). In this perspective, the aim of this study was to evaluate immunoexpression of the markers CD4, CD25, interleukin-17 (IL-17) and interleukin-10 (IL-10) and forkhead box P3 (FoxP3) in RC and to correlate these findings with the histological features of these lesions. Methods: Fifty five RC tissue specimens were analyzed for their histological characteristics and submitted to immunohistochemical analysis using anti-CD4, anti-CD25, anti IL-10, anti-IL-17 and anti-FoxP3 antibodies. The results of immunoexpression were correlated with the intensity of the inflammatory infiltrate and thickness of the epithelial lining. Results: All cases were positive to all studied markers, but with different expression intensity. The immunoexpression of CD4, CD25, IL-10 and FoxP3 was weak for all evaluated cases, whereas IL-17 exhibited strong expression in all cases. In addition, IL-17 was expressed in both inflammatory and epithelial cells of cystic lining. No significant differences in the number of positive cells were observed in terms of the intensity of the inflammatory infiltrate or epithelial thickness. It was observed positive correlations between the immunoexpressions of IL- 17 and FoxP3. Conclusion: The present results showed a less expressive participation of Treg cells in radicular cysts due to weak expression of CD4, CD25, IL-10 and FoxP3 in detriment to a more significant presence of IL-17.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaiaraM_Dissert.pdf: 2968185 bytes, checksum: 105b46ac6fb81afd7b7596a11828a3c8 (MD5) Previous issue date: 2010-03-10 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Receptor ativador nuclear &#954;appa B (RANK), ligante do receptor ativador nuclear &#954;appa B (RANKL) e osteoprotegerina (OPG) s?o membros da fam?lia do fator de necrose tumoral relacionados com o metabolismo ?sseo. A forma??o, diferencia??o e atividade dos osteoclastos s?o reguladas por estas tr?s prote?nas. RANK ? um receptor transmembrana presente em diversos tipos celulares, principalmente em c?lulas de linhagem macrof?gica, linf?citos, c?lulas dendr?ticas e fibroblastos e quando ativado pelo seu ligante, RANKL, promove a diferencia??o e ativa??o de c?lulas osteocl?sticas respons?veis pelo processo de reabsor??o ?ssea. A OPG impede a liga??o RANK/RANKL atuando como um receptor inibit?rio para a atividade osteol?tica. O objetivo deste estudo foi comparar a express?o imuno-histoqu?mica destes biomarcadores em cistos radiculares (n=20) e cistos dent?geros (n=20). A express?o imuno-histoqu?mica destes marcadores foi avaliada no epit?lio e na c?psula dos cistos por escores e percentuais m?dios de imunomarca??o. Para o epit?lio, a an?lise semi-quantitativa revelou um padr?o similar dos escores de imunomarca??o de RANK, RANKL e OPG nas les?es, n?o havendo diferen?a estat?stica significante (p=0.589, p=0.688, p=0.709, respectivamente). Para a c?psula c?stica a an?lise quantitativa, mostrou diferen?a estat?stica significante entre os percentuais m?dios de imunomarca??o do RANK e RANKL (p=0,001 e p=0,005, respectivamente) nos cistos. A correla??o dos escores de imunomarca??o de RANKL e OPG no epit?lio do CR e do CD revelou diferen?a estat?stica significante (p=0,029, p=0,003, respectivamente). No epit?lio dos CRs e dos CDs observou-se uma maior imunoexpress?o da OPG comparada a do RANKL. Os resultados apontam a presen?a de RANK, RANKL e OPG nos cistos radiculares e cistos dent?geros, sugerindo a atua??o destas prote?nas no desenvolvimento e expans?o das les?es no osso adjacente / Receptor ativador nuclear &#954;appa B (RANK), ligante do receptor ativador nuclear &#954;appa B (RANKL) e osteoprotegerina (OPG) s?o membros da fam?lia do fator de necrose tumoral relacionados com o metabolismo ?sseo. A forma??o, diferencia??o e atividade dos osteoclastos s?o reguladas por estas tr?s prote?nas. RANK ? um receptor transmembrana presente em diversos tipos celulares, principalmente em c?lulas de linhagem macrof?gica, linf?citos, c?lulas dendr?ticas e fibroblastos e quando ativado pelo seu ligante, RANKL, promove a diferencia??o e ativa??o de c?lulas osteocl?sticas respons?veis pelo processo de reabsor??o ?ssea. A OPG impede a liga??o RANK/RANKL atuando como um receptor inibit?rio para a atividade osteol?tica. O objetivo deste estudo foi comparar a express?o imuno-histoqu?mica destes biomarcadores em cistos radiculares (n=20) e cistos dent?geros (n=20). A express?o imuno-histoqu?mica destes marcadores foi avaliada no epit?lio e na c?psula dos cistos por escores e percentuais m?dios de imunomarca??o. Para o epit?lio, a an?lise semi-quantitativa revelou um padr?o similar dos escores de imunomarca??o de RANK, RANKL e OPG nas les?es, n?o havendo diferen?a estat?stica significante (p=0.589, p=0.688, p=0.709, respectivamente). Para a c?psula c?stica a an?lise quantitativa, mostrou diferen?a estat?stica significante entre os percentuais m?dios de imunomarca??o do RANK e RANKL (p=0,001 e p=0,005, respectivamente) nos cistos. A correla??o dos escores de imunomarca??o de RANKL e OPG no epit?lio do CR e do CD revelou diferen?a estat?stica significante (p=0,029, p=0,003, respectivamente). No epit?lio dos CRs e dos CDs observou-se uma maior imunoexpress?o da OPG comparada a do RANKL. Os resultados apontam a presen?a de RANK, RANKL e OPG nos cistos radiculares e cistos dent?geros, sugerindo a atua??o destas prote?nas no desenvolvimento e expans?o das les?es no osso adjacente

Este estudo buscou verificar a ocorrência de casos de cisto radicular em incisivos superiores decíduos traumatizados e descrever suas características relacionadas à criança, ao dente, ao trauma e ao cisto. Para tanto, realizou-se um levantamento das informações clínicas e radiográficas, de 2498 prontuários de pacientes atendidos na Clínica do Centro de Pesquisa e Atendimento de Traumatismo de Dentes Decíduos da Disciplina de Odontopediatria da FOUSP, no período de 1998 a setembro de 2013. Foi utilizado o método exploratório descritivo de uma série de casos. Foram avaliados 30 prontuários com casos de cistos, totalizando 32 incisivos superiores decíduos traumatizados com cisto. A ocorrência de cisto em pacientes com incisivos superiores decíduos traumatizados foi de 1,2%. Os resultados mostraram que a maioria dos cistos acometeram o gênero feminino (59,4%), os incisivos centrais superiores decíduos (93,8%), em crianças maiores de 5 anos (81,2%), mas que sofreram traumatismos com menos de 4 anos de idade (81,2%). A maioria dos casos não apresentou alteração clínica que levasse a suspeita de lesão cística, pois não foi encontrado em 90,7% retração gengival, 65,6% alteração de cor da mucosa vestibular, 65,6% fistula, 75% abscesso, 56,2% abaulamento gengival, 78,1% depressão da mucosa vestibular e 56,3% flutuação cistíca. A alteração clínica mais frequente foi a alteração de cor da coroa (56,3%). A média da idade do paciente no momento do trauma foi de 2,7 anos e do diagnóstico do cisto de 5,9 anos, sendo que a média de tempo do trauma até o diagnóstico do cisto foi de 2,8 anos. Em 46,9% dos dentes ocorreu trauma dental. A maioria dos traumas foram de baixa severidade (59,3%). Em 46,8% dos casos, o dente decíduo envolvido na lesão apresentava maior formação radicular que seu homólogo e em 62,5% o germe sucessor do dente decíduo com a lesão cística encontrava-se em estágio de Nolla anterior que o homólogo. A maioria das lesões císticas (81,2%) não envolveu dentes adjacentes, mas promoveram deslocamento de germes em 56,2%. Na dentição permanente foram encontrados repercussões em 31,3,% dos casos e retenção prolongada do permanente em 15,6%. Diante dos achados deste estudo observou-se que o cisto radicular em incisivos decíduos traumatizados é raro, assume um perfil menos agressivo, de crescimento controlado e necessitando de um tempo longo para se desenvolver. Além do mais, parece causar sequelas menos danosas às dentições, influenciar no processo de rizólise e rizogênese e estar relacionado a traumas de baixa severidade. O diagnóstico deve ser realizado pelos achados radiográficos, sendo que a reabsorção radicular externa sem formação óssea, assimetria no tamanho do folículo do germe dentário sucessor ao dente envolvido com a lesão cística e o folículo homólogo, bem como a diferença de altura e/ou posição entre os germes dentários homólogos deveriam ser considerados como sinais radiográficos no diagnóstico de cistos radiculares. / The present study aimed to verify the occurrence of radicular cyst in traumatized primary upper incisors and describe their characteristics in relation to the children, teeth, trauma and cysts. The survey of 2, 498 patients that presented and were treated at the Research and Clinical Center of Dental Trauma in Primary Teeth of the School of Dentistry of the University of Sao Paulo from 1998 to September 2013 was carried out, in order to collect clinical and radiographic information. A descriptive and exploratory approach was taken in the study. A total of thirty clinical records involving radicular cysts included thirty two traumatized primary upper incisors were studied in detail. The overall occurrence of cysts in patients with traumatized primary incisors was 1.2% with females affected more (59.4%) often than males 93.8% involved the upper central incisors. 81.2% of the children were older than 5 year of age but suffered traumatic injuries before 4 years old. In most cases, gingival recession (90.7%); color change of the vestibular mucosa (65.6%); fistula (65.6%); abscess (75%); gingival bulging (56.2%); depression of the vestibular mucosa (78.1%) and cystic fluctuation (56.3%) were not present showing no clinical alterations that might suggest cystic lesion. The most frequent clinical alteration was the color change of the crown (56.3%). The mean patient age at the time of traumatic injury was 2.7 years and the diagnosis of cyst at 5.9 years, and the mean time from trauma to diagnosis of cysts was 2.8 years. The hard tissue trauma occurred in 46.9% of teeth. Most injuries (59.3%) were of low severity. The radicular formation in the primary tooth involved in the lesion in 46.8% of cases was larger than its homologous and 62.5 % of cases the successor tooth germ of primary tooth with the cystic lesion was at a Nolla stage earlier than the homologous. The majority (81.2%) of cystic lesions did not involve adjacent teeth but promoted displacement of tooth germs in 56.2%. Repercussions in the permanent dentition were found in 31.3% of cases and prolonged retention of permanent in 15.6%. Given the findings, this study observed that the radicular cyst in traumatized primary incisors is rare. It assumes a less aggressive profile, controlled growth and requiring a long time to develop. Moreover, it seems to cause less harmful sequelae in dentitions, influence the process of root resorption and root formation and is associated with low severity trauma. The diagnosis must be made by radiographic findings. An external root resorption without bone formation, asymmetry in size between dental follicle (dental follicle of successor germ to the primary tooth involved with the cystic lesion and th homologous tooth follicle) and the difference in height and/or position between homologous teeth germs should also be considered amongst the radiographic signs in the diagnosis of radicular cysts.

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-06-05T21:48:08Z No. of bitstreams: 1 JulianaCamposPinheiro_DISSERT.pdf: 3156974 bytes, checksum: c1f3d2042d35ddeed6bb80575a688402 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-06-11T19:08:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JulianaCamposPinheiro_DISSERT.pdf: 3156974 bytes, checksum: c1f3d2042d35ddeed6bb80575a688402 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-11T19:08:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaCamposPinheiro_DISSERT.pdf: 3156974 bytes, checksum: c1f3d2042d35ddeed6bb80575a688402 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Os mastócitos são células secretoras que liberam diferentes mediadores químicos, dentre eles a triptase, participando tanto de estímulos fisiológicos quanto patológicos. A Ecaderina é um elemento da família das caderinas conhecida por desempenhar um papel importante na regulação da adesão intercelular em tecidos epiteliais. O presente estudo se propôs a avaliar a relação entre mastócitos e a expressão da E-caderina em ceratocistos odontogênicos e cistos radiculares. A avaliação imuno-histoquímica da triptase consistiu na quantificação de mastócitos degranulados e não degranulados em 15 campos, sendo 5 no tecido epitelial, 5 no tecido conjuntivo superficial e 5 campos no tecido conjuntivo profundo. A avaliação da E-caderina foi realizada de forma semi-quantitativa, utilizando os escores: 1 (0 a 50%) e 2 (>50%), sendo observado também o padrão de imunorreatividade celular (membranar, citoplasmática, membranar e citoplasmática) além da verificação do tamanho das lesões a partir da coleta de dados nas fichas clínicas dos pacientes. A análise das lesões císticas estudadas revelou maior média total de mastócitos nos cistos radiculares, quando comparados aos ceratocistos odontogênicos (IC 95%). No que diz respeito a quantidade de mastócitos no componente epitelial, verificou-se maior mediana nos cistos radiculares em relação aos ceratocistos odontogênicos, já no tecido conjuntivo constatou-se que os ceratocistos odontogênicos apresentaram a maior mediana. Ao verificar a densidade de mastócitos degranulados e não degranulados através do teste não paramétrico de Kruskal-Wallis, constatou-se que as maiores concentrações estavam relacionadas a mastócitos degranulados no epitélio de cistos radiculares (KW=30,343; p=0,000), sendo que nos ceratocistos odontogênicos as maiores densidades desses tipos celulares degranulados foram encontrados no tecido conjuntivo (KW=0,092; p=0,762). Ao se examinar a expressão da E-caderina no componente epitelial, observou-se uma similaridade entre as lesões císticas com maior expressão nos ceratocistos odontogênicos (p=0,798) que apresentaram marcação membranar em 63.3% dos casos. Realizando a análise da correlação de Spearman (r) foi observada uma correlação negativa entre a expressão da E-caderina e o número total de mastócitos (r= -0,311; p= 0,016), número de mastócitos degranulados (r= -0,255; p= 0,049) e a localização desses tipos celulares no tecido conjuntivo total e profundo tanto nos cistos radiculares quanto nos ceratocistos odontogênicos. Observou-se também, outra correlação negativa entre os mastócitos intraepiteliais (r= -0,265; p=0,016) e o tamanho das lesões císticas. Diante desses achados, verificamos que a maior concentração de mastócitos nos cistos radiculares confirma a sua natureza inflamatória, destacando a maior quantidade de mastócitos degranulados no componente epitelial, refletindo em menor expressão de e-caderina quando comparados aos ceratocistos odontogênicos, sugerindo desta forma, uma possível atuação da triptase na alteração das junções de adesão e consequente aumento na permeabilidade epitelial. No que diz respeito ao tamanho das lesões, verificou-se que as maiores densidades mastocitárias no componente epitelial foram identificadas em lesões menores, sugerindo uma atuação desses tipos celulares em uma etapa inicial de crescimento das lesões císticas estudadas. / Mast cells are secretory cells that release different chemical mediators, among them tryptase, participating in both physiological and pathological stimuli. E-cadherin is an element of the cadherin family known to play an important role in the regulation of intercellular adhesion in epithelial tissues. The present study aimed to evaluate the relationship between mast cells and E-cadherin expression in odontogenic keratocysts and radicular cysts. The immunohistochemical evaluation of tryptase consisted of the quantification of degranulated and non-degranulated mast cells in 15 fields, 5 in the epithelial tissue, 5 in the superficial connective tissue and 5 fields in the deep connective tissue. The evaluation of E-cadherin was performed semi-quantitatively, using the scores: 1 (0 to 50%) and 2 (> 50%), also observing the cellular immunoreactivity pattern (membrane, cytoplasmic, membrane and cytoplasmic) in addition to the verification of the size of the lesions from the data collection in the clinical records of the patients. The analysis of the cystic lesions studied revealed a higher total mean number of mast cells in the radicular cysts when compared to odontogenic keratocysts (95% CIs). With regard to the amount of mast cells in the epithelial component, a higher median was observed in the radicular cysts in relation to odontogenic keratocysts; in the connective tissue, odontogenic keratocysts were the largest median. When verifying the density of degranulated and non-degranulated mast cells through the Kruskal-Wallis non-parametric test, it was found that the highest concentrations were related to degranulated mast cells in the epithelium of radicular cysts (KW = 30,343; p = 0,000). Odontogenic keratocysts the highest densities of these degranulated cell types were found in connective tissue (KW = 0,092; p = 0,762). When examining the expression of E-cadherin in the epithelial component, a similarity was observed between cystic lesions with greater expression in odontogenic keratocysts (p = 0,798), which presented membrane marking in 63.3% of the cases. Spearman's correlation analysis showed a negative correlation between E-cadherin expression and total mast cells (r = -0,311; p = 0,016), number of degranulated mast cells (r = -0,255; p = 0,049) and the location of these cell types in total and deep connective tissue in both radicular cysts and odontogenic keratocysts. There was also another negative correlation between intraepithelial mast cells (r = -0,265; p = 0,016) and cystic lesion size. In view of these findings, we observed that the higher concentration of mast cells in the radicular cysts confirms their inflammatory nature, highlighting the greater amount of degranulated mast cells in the epithelial component, reflecting less e-cadherin expression when compared to odontogenic keratocysts. Possible tryptase activity in the alteration of adhesion joints and consequent increase in epithelial permeability. Regarding the size of the lesions, it was verified that the higher mast cell densities in the epithelial component were identified in smaller lesions, suggesting an action of these cell types in an initial stage of growth of cystic lesions studied.

FERREIRA, T. A. P. Avaliação da imunoexpressão do fator induzido por hipóxia 1α (hif-1α) em cistos radiculares e dentígeros. 2017. 78 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-03T16:04:56Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_tapferreira.pdf: 1815935 bytes, checksum: 497436a1657a7015396f9e473040cadf (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-03T16:05:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_tapferreira.pdf: 1815935 bytes, checksum: 497436a1657a7015396f9e473040cadf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-03T16:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_tapferreira.pdf: 1815935 bytes, checksum: 497436a1657a7015396f9e473040cadf (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Odontogenic cysts are classified according to their origin in: developmental cysts, which include the dentigerous cyst (CD), or in inflammatory cysts, which have the root cyst (CR) as the main representative. In lesional microenvironments with low oxygen concentrations, the Hypoxia Induced Factor 1α (HIF-1) influences mechanisms responsible for cell survival. Thus, the aim of this research was to analyze the immunoexpression of HIF-1α in root and dentigerous cysts. The sample consisted of 40 cases of odontogenic cysts, 20 of CD and 20 of CR. Verification of HIF-1α expression was performed by the immunohistochemistry technique using anti-HIF-1α primary antibody (Clone EP1215Y, Abcam®, 1: 500, overnight, citrate pH 6, Pascal). Quantitative analysis was performed by counting the number of epithelial cells with immunostaining in the cytoplasm or nucleus in five fields photographed at a magnification of 400x. A qualitative analysis was also performed, observing the intensity of cytoplasmic immunostaining. The collected clinical data, such as sex, age and location site, were expressed in absolute and percentage frequency form and compared by Pearson's Chi-square test or Fisher's Exact and by Binomial Logistic Regression. The number of positive epithelial cells was expressed as mean and standard deviation and analyzed using the Student's T-test using the Statistical Package for the Social Sciences program. For all the tests performed, a significance level of 5% (p <0.05) was established. Immunohistochemical analysis evidenced positive marking throughout the sample. For the total number of cells with cytoplasmic immunostaining, between CR (67.7 ± 12.6) and CD (64.5 ± 16.1), there was no significant difference between the lesions (p = 0,480) and the Same result was found for nuclear immunostaining (p = 0.354). When the intensity of strong cytoplasmic immunostaining was observed and the clinical characteristics, the CD group presented a lower number of cells immunized by HIF-1α (11.7 ± 13.6) for the age group up to 30 years when compared to the age group of Individuals older than 30 years (34.5 ± 20.0), showing statistical difference (p = 0.010). When the strong cytoplasmic immunostaining was observed between the CR and CD groups in the anterior region of the jaws, it was verified that the CR group presented a greater quantity of immunolabelled cells (28.5 ± 8.5) than the CD group (14 , 0 ± 11.4), with statistical difference (p = 0.014). Considering the results obtained in this research, it can be concluded that HIF-1α is present in the epithelial constituents of CR and CD. However, further studies are needed to better elucidate the role of HIF-1α in odontogenic cysts. / Os cistos odontogênicos são classificados conforme sua origem em: cistos de desenvolvimento, dos quais faz parte o cisto dentígero (CD), ou em cistos inflamatórios, que têm o cisto radicular (CR) como principal representante. Em microambientes lesionais com baixas concentrações de oxigênio, o Fator Induzido por Hipóxia 1α (HIF-1) influencia mecanismos responsáveis pela sobrevida celular. Assim, o objetivo desta pesquisa foi analisar a imunoexpressão do HIF-1α em cistos radiculares e dentígeros. A amostra foi constituída por 40 casos de cistos odontogênicos, sendo 20 de CD e 20 de CR. A verificação da expressão de HIF-1α foi realizada através da técnica de imunoistoquímica, utilizando anticorpo primário anti-HIF-1α (Clone EP1215Y,Abcam®, 1:500, overnight,citrato pH 6, Pascal). A análise quantitativa foi realizada por meio da contagem do número de células epiteliais com imunomarcação no citoplasma ou núcleo, em cinco campos fotografados no aumento de 400x. Realizou-se, também, uma análise qualitativa observando a intensidade de imunomarcação citoplasmática. Os dados clínicos coletados, tais como sexo, idade e sítio de localização, foram expressos em forma de frequência absoluta e percentual e comparados por meio do teste qui-quadrado de Pearson ou Exato de Fisher e por meio de Regressão Logística Binomial. O número de células epiteliais positivas foi expresso em forma de média e desvio-padrão e analisado por meio do teste de T de Student, utilizando-se o programa Statistical Package for the Social Sciences. Para todos os testes realizados, foi estabelecido o nível de significância de 5% (p <0,05). A análise imunoistoquímica evidenciou marcação positiva em toda a amostra. Para o total de células com imunomarcação citoplasmática entre os casos de CR (67,7±12,6) e CD (64,5±16,1), não houve diferença significativa entre as lesões (p=0,480), bem como o mesmo resultado foi encontrado para imunomarcação nuclear (p=0,354). Quando se observou a intensidade de imunomarcação citoplasmática forte e as características clínicas, o grupo de CD apresentou para faixa etária de até 30 anos menor número de células imunomarcadas por HIF-1α (11,7±13,6) quando comparada à faixa etária de indivíduos maiores de 30 anos (34,5±20,0), demonstrando diferença estatística (p= 0,010). Já quando observada a imunomarcação citoplasmática forte entre os grupos de CR e CD na região anterior dos maxilares, verificou-se que o grupo de CR apresentou maior quantidade de células imunomarcadas (28,5±8,5) que o grupo de CD (14,0±11,4), com diferença estatística (p= 0,014). Diante dos resultados obtidos nesta pesquisa, pode-se concluir que HIF-1α está presente nos constituintes epiteliais de CR e CD. No entanto, novos estudos são necessários para melhor elucidar o papel desenvolvido pelo HIF-1α nos cistos odontogênicos.