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Synthèse de nouveaux composés pour la prévention et/ou le traitement de coccidiose aviaire / Synthesis of new compounds for the prevention and / or treatment of avian coccidiosis

Silpa, Laurence 19 December 2014 (has links)
Les parasites du genre Eimeria sont des parasites apicomplexes provoquant des maladies graves, appelées coccidioses. Ce genre compte sept espèces qui envahissent spécifiquement les cellules épithéliales des intestins de poulet. L’espèce de choix étudiée dans notre laboratoire est Eimeria tenella. La prophylaxie repose sur les vaccins qui sont onéreux et les traitements anticoccidiens, qui sont administrés dans l’alimentation dès l’éclosion du poussin. Depuis 50 ans, l’utilisation massive de ces molécules s’accompagne de l’émergence de populations parasitaires résistantes. Les modes d’action des cibles parasitaires des anticcocidiens étant peu connus, il est difficile de mettre en place une stratégie de contournement de la résistance. Dans l’optique de répondre aux besoins des éleveurs, une collaboration entre le laboratoire de chimie organique et celui de parasitologie a été mise en place en utilisant la capacité de composés chimiques à inhiber l’invasion ou le développement des parasites. Notre stratégie repose sur la syntèse, le développement ainsi que l’évaluation de l’efficacité des composés pouvant potentiellement être utilisés en tant qu’inhibiteurs de la coccidiose aviaire. Un criblage de composés nous a permis d’identifier deux composés « chefs de files », inhibant le processus d’invasion et de développement des parasites au sein de la cellule hôte. Les pharmacomodulations entreprises ont engendrés la découverte de composés plus actifs avec des valeurs d’IC50 égales à 0,8 et 3,4 µM respectivement. / Intracellular developing parasites that belong to the apicomplexan phylum represent a great threat to both animal and human being health. Apicomplexan contains a genus of parasites called Eimeria. This genus is composed of seven species which cause avian coccidiosis such as E. tenella, the most virulent agent. Control of E. tenella is presently accomplished by a prophylaxis that uses vaccines and anticoccidial drugs. However, the rapid emergence of drug resisitant parasites coupled with the expense of most vaccines has led us to a search of new approaches to control coccidiosis via the synthesis of new compounds. In order to achieve that goal, collaboration between two laboratories has been established. Our strategy relies on the laboratories scientific knowledge in two complementary domains such as oraganic chemistry and parasitology. Our research is based on the effectiveness that synthesized compounds could have to inhibit parasites first steps of infection of the host cells. The screening of compounds has led us to the discovery of two lead compound inhibiting the invasion and development process of the parasites. Undertaken pharmacomodulations of these leads have allowed us to lower these concentrations values to 0,8 and 3,4 µM
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Vliv vybraných krmných doplňků na výskyt kokcidií v zažívacím traktu bažantů / Influence of selected feeding supplements on the occurrence of coccidias in digestive tract of pheasants

ŠÍP, Pavel January 2015 (has links)
The occurrence of coccidiosis is an enormous problem of pheasant farming. The aim of this study is to show, that this disease can be cured by unconventional dietary supplements. Dietary supplements which were used in this study were as follows: prebiotics (Ascophyllum nodosum), probiotics (Lactobacillus fermentum), homeopathics, Sulfacox and scrap from the seed by Vitis vinifera. The experiment took place in the Ranč Daniela farm in the town Hůrka (close to the Horní Planá Town) from 26.7.2014 to 5.10.2014. Six groups of pheasants were made - three experimental groups and one control group. All groups were consisted of 15 individuals. The pheasant Phasianus colchicus was used in this experiment. Dietary supplements were served for two weeks, than the serving stopped for two weeks and continued again. The samples of excrements were tested all the study long using the floatation method in Sheather's sugar solution. The results were marked and evaluated. The favourable effect of Ascophyllum nodosum, homeopatics and Lactobacillus fermentum on the intestinal tract of pheasant was significant.
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Výskyt prvoků střev u selat před odstavem a po odstavu. / The occurrence of Coccidiosis in the intestine of sucking pigs before and after weaning

KOTILOVÁ, Jiřina January 2009 (has links)
In two years of observation, (spring 2006, autumn 2006, spring 2007 and autumn 2007) were being screened for parasites in total 495 faecal samples coming out of three farms from Ceske Budejovice (285 samples of sucking pigs not older then 28 days and 174 samples of piglets not older then 8 weeks). The method used to examine those samples was a flotation-concentrating method (Sheather{\crq}s carbohydrate fusion) and in the year of 2007 was also used a specific aniline-carbol-methyl violet staining method to detect the Cryptosporidium spp. followed by positive molecular characterized (direct sequencing of partial SSU rRNA partial genes and PCR-RFLP at the SSU rRNA). In screened samples were mainly detected parasites named Cryptosporidium spp., found in 4,1% of faecal samples in 2006 and in 2007 in 32,8% faecal samples, out of which 14,4% was found in pre-weaned piglets samples and 26,4% in post-weaned piglets. Based on genotyping provided on positive samples out of the year 2007, using method of sequensing analysis SSU rRNA, was the occurence of C. suis, Cryptosporidium pig genotype II aC. Muris described. High prevalence of Isosporou suis 13,9 % (64/459) was also detected with its appearance, in particular, in pre-weaned piglets 21,4 % (61/285). Further on, some of other identified group was Eimerie spp. 5,7 % (26/459) infecting, in the main, post-weaned piglets 10,9% (19/174) and Giardia intestinalis 2,4 % (10/459). Most of the samples mentioned occured in conditioned faeces and there is no seasonal relationship to the parasital occurance.
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Suplementação da L-glutamina em ração sem anticoccidiano para frangos : desempenho e desenvolvimento intestinal / Supplementation of L-glutamine without anticoccidial feed for chickens: performance and intestinal development

NASCIMENTO, Gisele Mendanha 16 August 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao - Gisele Mendanha Nascimento.pdf: 238558 bytes, checksum: 50568ce756460f6c8824f193341cd280 (MD5) Previous issue date: 2010-08-16 / The objective of this study was to evaluate the supplementation of L-glutamine in the diet of chickens on the floor and fed diets without anticoccidial agents and promoters of growth. Were used 500 chicks, males, Cobb distributed in randomized blocks design with five treatments and four replicates with 25 birds each. The treatments consisted of increasing levels of glutamine in the diets (0.0, 0.5, 1.0, 1.5 or 2.0%) throughout the rearing period, 42 days old. Were evaluated performance, digestibility (18-21 days), carcass yield and Histomorphometry of small intestine (18 and 42 days old). Data were submitted to polynomial regression analysis and means compared by Scott Knott (0,05) test. There was an effect of glutamine supplementation only during pre-starter feed, and the best level of feed addition of 1%. The results for performance up to 42 days of age, carcass yield and nutrient digestibility of the diet showed no difference (P> 0.05) between the levels of glutamine in the diet. histomorphometry at 18 days of age difference was observed for crypt depth in the small intestine (duodenum, jejunum and ileum) (P <0.05), being the duodenum and ileum the best level of glutamine was 2% and jejunum 1%. For the results of histomorphometry at 42 days old, significant effect of glutamine to crypt depth in duodenum, jejunum and ileum, with the highest levels found in 1, 0.5 and 2% respectively. It is recommended the addition of 1% L-glutamine in the pre-started the improvement of feed conversion rate at 1-7 days of age and better development of the small intestine. / Objetivou-se com este estudo avaliar a suplementação da L-glutamina na ração de frangos criados no chão e alimentados com rações sem agentes anticoccidianos e promotores de crescimento sobre desempenho, rendimento de carcaça, digestibilidade e desenvolvimento intestinal. Foram utilizados 500 pintos, machos, da linhagem Cobb distruibuídos em delineamento em blocos ao acaso com cinco tratamentos e quatro repetições com 25 aves cada. Os tratamentos estudados foram níveis crescentes de glutamina nas rações (0,0; 0,5; 1,0; 1,5 ou 2,0%) durante todo o período de criação, 42 dias de idade. Foram avaliados desempenho, digestibilidade (18 a 21 dias), rendimento de carcaça e histomorfometria da mucosa intestinal (18 e 42 dias de idade). Os resultados foram submetidos a análise de regressão polinomial e as médias comparadas pelo teste Scott Knott (0,05). Houve efeito da suplementação de glutamina somente no período pré-inicial para a conversão alimentar, sendo o melhor nível de adição na ração de 1%. Os resultados para o desempenho até 42 dias de idade, rendimento de carcaça e digestibilidade dos nutrientes da ração indicaram que não houve diferença (P>0,05) entre os níveis de glutamina nas rações. Na histomorfometria aos 18 dias de idade foi observada diferença para profundidade de cripta na mucosa intestinal (duodeno, jejuno e íleo) (P<0,05), sendo que para duodeno e íleo o melhor nível de inclusão de glutamina foi 2% e para jejuno 1%. Para os resultados de histomorfometria aos 42 dias de idade, houve efeito dos níveis de glutamina para profundidade de cripta no duodeno, jejuno e íleo, sendo os melhores níveis encontrados de 1, de 0,5 e 2 % respectivamente. Recomenda-se a adição de 1% de L-glutamina na ração pré-inicial considerando a melhora na conversão alimentar no período de 1 a 7 dias de idade e no melhor desenvolvimento da mucosa intestinal.
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Ocorrência de parasitoses intestinais com ênfase na infecção por Strongyloides stercoralis e coccídios (Cryptosporidium sp., Cystoisospora belli e Cyclospora cayetanensis) em pacientes portadores de HIV/AIDS atendidos no serviço de assistência especializada (SAE) do município de Jataí-Go / Occurrence of intestinal paasites with emphasis on infection by strongyloides stercoralis and coccidia (Cryptosporidium sp., Cystoisospora belli e Cyclospora cayetanensis) among patient HIV/AIDS attend at serviço de assistência especializada (SAE) in Jatai city - Goiás

Barcelos, Natane Barbosa 07 April 2016 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-10T20:40:36Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Natane Barbosa Barcelos - 2016.pdf: 1790957 bytes, checksum: bb3fbe9e0077cacc8493c76bc9d73a34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-12T15:53:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Natane Barbosa Barcelos - 2016.pdf: 1790957 bytes, checksum: bb3fbe9e0077cacc8493c76bc9d73a34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T15:53:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Natane Barbosa Barcelos - 2016.pdf: 1790957 bytes, checksum: bb3fbe9e0077cacc8493c76bc9d73a34 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-07 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Opportunistic infections are frequently observed in patients with HIV / AIDS. Among the most common parasites, have the nematode Strongyloides stercoralis and intestinal coccidia responsible for aggravating the situation of patients, often recurrent cases and chronic nature. The aim of this study was to evaluate the prevalence of intestinal parasites with emphasis on infections caused by S. stercoralis and intestinal coccidia in patients with HIV/AIDS attended at Serviço de Assistência Especializada (SAE) in the municipality of Jataí-GO, correlating with clinical, laboratory and socioepidemiological parameters. Was a harvested three stool sample on alternate days and processed by Lutz techniques, Rugai, agar plate culture, Ritchie and specific staining, Ziehl-Neelsen modified, Kinyoun and rapid method of Safranin. Data were analyzed using GraphPad Prism version 5.0 software and the values of p <0.05 were considered statistically significant. Fecal samples were analyzed three collected on alternate days in 90 patients, totaling 270 samples. The age ranged from 23 to 77 years, with mean and median of 42 years, the majority of female patients (54.44%). The prevalence was 28.88% for intestinal parasites, of these, 3.8% for S. stercoralis, Cryptosporidium sp. and C. belli, respectively. There was a significant correlation between positive for intestinal parasites stratified by clinical status (OR: 11.42; 95% CI: 2.18 to 59.6) and the use of antiretroviral therapy TARV (p = 0.0419) as a protective factor against opportunistic infections. The smoking (OR: 6.522- 95: 1.1 to 36.0) showed significance when correlated with the increase in viral load. Furthermore, there correlation between parasitic association with CD4 + lymphocyte counts (p = 0.0132) and type of sex (p = 0.0001). We conclude that the low prevalence of S. stercoralis and intestinal coccidia is due to the widespread use of TARV among patients in this county. In addition, the parameters analyzed are of great importance to understand the parasites acquisition risk in this population, and assist in establishing specific and early diagnosis of strategies that improve the quality of life of these patients. / As infecções oportunistas são frequentemente observadas em pacientes portadores do vírus HIV/aids. Dentre os parasitos mais comuns, tem-se o nematódeo Strongyloides stercoralis e os coccídios intestinais responsáveis por agravar o quadro clínico dos pacientes, muitas vezes por casos recorrentes e de caráter crônico. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a prevalência de enteroparasitos com ênfase em infecções causadas por S. stercoralis e coccídios intestinais em pacientes portadores do vírus HIV/aids atendidos no Serviço de Assistência Especializada (SAE) do município de Jataí-GO, correlacionando com os parâmetros clínicos, laboratoriais e socioepidemiológicos. Foi colhida três amostras de fezes em dias alternados e processadas pelas técnicas de Lutz, Rugai, cultura em placa de ágar, Ritchie e as colorações específicas, Ziehl-Neelsen Modificado, Kinyoun e o Método rápido da Safranina. Os dados foram analisados utilizando o software GraphPad Prism versão 5.0 e os valores de p <0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Foram analisadas três amostras fecais colhidas em dias alternados de 90 pacientes, totalizando 270 amostras. A idade variou de 23 a 77 anos, com média e mediana de 42 anos, sendo a maioria dos pacientes do sexo feminino (54,44%). A prevalência foi 28,88% para de enteroparasitos, destes, 3,8% para S. stercoralis, Cryptosporidium sp. e C. belli, respectivamente. Verificou-se correlação significativa da positividade para parasitos intestinais estratificados pelo status clínico (OR: 11,42; IC95%: 2,18-59,6) e pelo uso da Terapia Antiretroviral (TARV) (p=0,0419) como um fator protetor contra as infecções oportunistas. O tabagismo (OR: 6,522- IC95:1,1-36,0) demonstrou significância quando correlacionado com o aumento da carga viral. Além disto, verificou correlação entre associações parasitárias com contagem de linfócitos TCD4+ (p= 0,0132) e tipo de relação sexual (p=0,0001). Conclui-se que a baixa prevalência de S. stercoralis e coccídios intestinais seja devido ao amplo uso da TARV nos pacientes deste município. Além disto, os parâmetros analisados são de grande relevância para compreender a situação de risco de aquisição de parasitos nesta população, além de auxiliar no estabelecimento de estratégias de diagnóstico específico e precoce que melhoraram a qualidade de vida destes pacientes.
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Desempenho, desenvolvimento e atividade enzimática da mucosa intestinal de frangos de corte alimentados com dietas suplementadas com glutamina e nucleotídeos / Performance, development and enzymatic activity of the intestinal mucosa of broiler chickens fed with diets supplemented with glutamine and nucleotides

Márcia Izumi Sakamoto 17 December 2009 (has links)
Foram conduzidos três experimentos com os objetivos de avaliar a influência da glutamina e nucleotídeos nas dietas de frangos de corte, considerando o desempenho, desenvolvimento e atividade enzimática da mucosa intestinal. No 1º experimento, foi determinado os melhores níveis de suplementação das fontes de glutamina, isolado (L-Gln) ou associado com ácido glutâmico (Aminogut®), e de acordo com resultados obtidos para as características de desempenho e atividades enzimáticas (mucosa intestinal e pâncreas), observou-se melhor desempenho para aves suplementadas com 1,5% de L-Gln e 3,0% de Aminogut®. No 2º experimento, foi determinado o melhor período (1 a 7, 1 a 14 ou 1 a 21 dias de idade) de suplementação dos níveis ótimos das fontes de glutamina observados no experimento 1. Segundo dados de desempenho, atividades enzimáticas e morfometria do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo), determinou-se que as fontes de glutamina podem ser suplementadas durante os primeiros sete dias de vida das aves, proporcionando aumento nas atividades das enzimas digestivas e pancreáticas nos frangos. No 3º experimento, foram avaliados os efeitos de três fontes de ação trófica (L-Gln, Aminogut® e nucleotídeos) associadas à vacinação contra a coccidiose, sobre o desenvolvimento do intestino delgado e algumas respostas imunológicas das aves. Pode ser observado efeito negativo da vacinação sobre o desempenho e morfometria da mucosa intestinal, entretanto, ao final do período experimental, as fontes de glutamina mostraram-se eficiente em recuperar perdas epiteliais da mucosa intestinal das aves desafiadas contra a coccidiose. Portanto, a suplementação destas fontes de ação trófica pode ser uma estratégia para o bom desenvolvimento dos frangos quando submetidos à estresse vacinal, considerando ainda a viabilidade econômica pelo segmento produtivo. / Three experiments were carried out to evaluate the influence of glutamine and nucleotides in diets of broiler chickens, on performance, development and enzymatic activity of the intestinal mucosa. In the first experiment, was estimated the best levels of glutamine sources supplementation, isolated (L-Gln) or associated with glutamic acid (Aminogut®). According to results for performance characteristics and enzymatics activities (intestinal mucosa and pancreas), was observed best performance for birds supplemented with 1.5% of L-Gln and 3.0% of Aminogut®. In the second experiment, was determined the best supplementation period (1 to 7; 1 to 14 or 1 to 21 days of age) of levels of glutamine sources observed in the first experiment. The results of performance, enzymatics activities and small intestine morphometry (duodenum, jejunum and ileum), suggested that glutamine sources evaluated can be supplemented during the first seven days of age, providing an increase in the enzymatics digestives and pancreatic activities at the broiler chickens. In the third experiment, were evaluated the effects of three sources with action trophic (L-Gln, Aminogut® and nucleotides) associated with vaccination against coccidiosis on development of small intestine and immune responses of the broilers. It was observed negative effect of vaccination on performance and morphometry of intestinal mucosa, however, at the end of experimental period, the glutamine sources showed efficiency to recovery epithelial losses of intestinal mucosa of birds, which were challenged against coccidiosis. Therefore, the supplementation of the trophic sources can be a strategy for optimum development of broilers when submitted to vaccination stress, considering the economic viability by the productive segment.
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Avaliação da viabilidade de oocistos esporulados de Neospora caninum a diferentes condições de temperatura e ação de desinfetantes / Evaluation of the viability of sporulated oocysts of Neospora caninum under different temperature and disinfectants treatments

Aldo Francisco Alves Neto 26 October 2009 (has links)
Neospora caninum é um parasita Apicomplexa que causa doença neuromuscular em cães e abortamento em bovinos. Cães e coiotes são as únicas espécies reconhecidas como hospedeiros definitivos, nas quais ocorre a fase sexuada do ciclo evolutivo do N. caninum, com eliminação de oocistos através das fezes, os quais esporulam no ambiente e tornam-se infectantes. Apesar da importância dos oocistos como fonte de infecção para várias espécies de hospedeiros, a viabilidade e resistência desses oocistos a tratamentos físicos e químicos ainda são desconhecidas. Este estudo teve por objetivo avaliar a viabilidade de oocistos esporulados de N. caninum após tratamentos com diferentes desinfetantes, temperaturas e tempos de exposição. Três cães foram alimentados com tecido cerebral de búfalos soropositivos para anticorpos anti-N.caninum pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI 100) para a obtenção de oocistos. Desses, somente um cão eliminou oocistos tipo Neospora-Hammondia sendo confirmado serem de N. caninum por bioensaio em gerbilos e por métodos moleculares (PCR-RFLP). Os oocistos esporulados foram purificados e 11 alíquotas contendo aproximadamente 3000 oocistos por alíquota constituíram cada um dos tratamentos, sendo estes: Formol 10% por 1h; Amônia 10% por 1h; Álcool 70% por 1h; Álcool absoluto por 1h; Iodo 2% por 1h; Hipoclorito de sódio 10% por 1h; Temperatura ambiente, controle; -20ºC por 6h; 4ºC por 6h; 60ºC por 1m e 100ºC por 1m. Os tratamentos químicos foram todos realizados à temperatura ambiente. Após tratamento os oocistos foram divididos em alíquotas com 1000 oocistos cada e estas foram administradas, via oral, a gerbilos (1000 oocistos por gerbilo) sendo cada grupo experimental constituídos por três animais. Depois de 63 dias os gerbilos foram sacrificados e colheu-se sangue para a pesquisa de anticorpos anti-N. caninum (RIFI e western blotting) e tecidos para a pesquisa de cistos em esfregaço direto de cérebro e DNA do parasito (PCR em tempo real), além de pesquisa do agente por técnicas histopatológicas e imuno-histoquímica. Considerou-se eficaz o tratamento que confirmou a inviabilidade dos oocistos por resultados negativos em todas as cinco provas realizadas. Dos tratamentos realizados mostrou-se eficaz o uso de calor a 100ºC por 1 minuto e do hipoclorito de sódio a 10% por 1 hora, podendo ser estes indicados para o controle dessas formas no ambiente. / Neospora caninum is an Apicomplexan parasite that causes neuromuscular disorders in dogs and abortion in cattle. Dogs and coyotes are the only species identified as definitive hosts. The sexual phase of the N. caninum life cycle occurs within the host, and results in the shedding of oocysts in the feces that will sporulate in the environment and become infective. Despite their relevance as a source of infection for a number of different hosts, the resistance and viability of such oocysts to physical and chemical treatments are yet to be known. The purpose of this study was to assess the viability of N. caninum sporulated oocysts after exposure to treatments using different disinfectants, temperatures and periods of time. For acquisition of the oocysts, three dogs were fed brain tissue from buffaloes positive for antibodies to N. caninum by an indirect fluorescent antibody test (IFAT 100). Only one of the dogs excreted Neospora-Hammondia type oocysts. Such oocysts were confirmed to be N. caninum by bioassay in gerbils and molecular methods (PCR-RFLP). The sporulated oocysts were purified and 11 doses with approximately 3,000 oocysts each were treated as follows: 10% formaldehyde (formol) for 1 h; 10% ammonia for 1 h; 70% alcohol for 1 h; absolute alcohol for 1 h; 2% iodine for 1 h; 10% sodium hypochlorite for 1 h; Room temperature, control; -20ºC for 6 h; 4ºC for 6 h; 60ºC for 1 min, and 100ºC for 1 min. All chemical treatments were performed at room temperature. After treatment, the oocysts were divided into doses of 1,000 oocysts each and administered into three gerbils (Meriones unguiculatus) orally (1,000 oocysts per gerbil) per treatment. The gerbils were euthanized after 63 days. Blood samples were taken to be tested for the presence of N. caninum antibodies (IFAT and Western blotting analysis), and tissues samples to be tested for the presence of cysts by brain smear technique and detection of the parasite DNA (real-time PCR), and the identification of the parasite by immunohistochemical and histopathological examinations. In order to be considered an effective treatment, negative results should be observed in the gerbils of all five evaluations conducted. Out of the treatments carried out in this study, exposures to a temperature of 100ºC for 1 min and to a 10% sodium hypochlorite solution for 1 h were effective.
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Análise da expressão diferencial entre merozoítos e esporozoítos de Eimeria tenella empregando a técnica de LongSAGE. / Differential expression analysis between merozoites and sporozoites of Eimeria tenella using LongSage.

Jeniffer Novaes Gonçalves Dias 10 December 2009 (has links)
Eimeria tenella é umas das principais espécies que causam a coccidiose aviária. Para se estudar o perfil de expressão gênico quantitativo em estágios infectantes bibliotecas de LongSAGE foram geradas a partir de merozoítos e esporozoítos. Mais de 35.000 tags foram obtidas, das quais, 9.516 eram únicas. Para a identificação e anotação de genes diferencialmente expressos, as tags foram extraídas, contadas e analisadas estatisticamente por um pacote desenvolvido pelo nosso grupo, SAGE Analysis. Um total de 197 seqüências foram reconstruídas e anotadas automaticamente. Foi observado uma expressão estágio-específica e perfil transcricional distinto entre os estágios. Em merozoítos, foram encontradas proteínas envolvidas na tradução e manutenção da conformação protéica e em esporozoítos, os resultados positivos foram relacionados à cromatina, transporte e atividade catalítica. Para validação da técnica, a expressão diferencial de um pequeno conjunto de genes foi quantificada por RT-qPCR. Os resultados demonstraram uma boa correlação entre estas duas plataformas. / Eimeria tenella is one of the most important causing agents of poultry coccidiosis. To study the quantitative gene expression profile in zoite stages of LongSage libraries were generated from merozoites and sporozoites. More than 35.000 tags were obtained, whose 9.516 were unique. For identification and annotation of differential expressed genes, tags were extracted, counted and submitted to statistical analysis by Sage Analysis, software developed by our group. A total of 197 tags were reconstructed and automatic annotated. Stage-specific expression genes and distinct transcriptional profile were observed between these stages. In merozoites the results were related to protein translation and folding, and in sporozoites the proteins were involved to chromatin structure, transport and catalytic activity. To LongSAGE validation, differential expression was quantified using RT-qPCR to a small group of genes. Good correlation was observed between these platforms.
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Desempenho produtivo e microbiota intestinal de frangos de corte suplementados com ß-ácidos do lúpulo (Humulus lupulus) após desafio com Eimeria acervulina e E. tenella / Performance and intestinal microbiota of broiler chickens supplemented with hops ß-acids (Humulus lupulus) following challenge with Eimeria acervulina and E. tenella

Cristiano Bortoluzzi 04 February 2014 (has links)
Este estudo teve por objetivos avaliar diferentes níveis de suplementação de ?-ácidos do lúpulo como aditivos de rações para frangos de corte sobre o desempenho e a manutenção do equilíbrio da microbiota intestinal após desafio com Eimeria. No experimento 1, foram alojados 1440 pintos de corte da linhagem Cobb 500, no período de 1 a 42 dias de idade, com 6 tratamentos e 6 repetições. Os tratamentos utilizados foram: controle negativo, ração sem antimicrobiano; controle positivo, ração com 30 mg/kg de bacitracina de zinco e rações com 30, 60, 120 ou 240 mg/kg de ?-ácidos do lúpulo, compondo 4 tratamentos adicionais. Os ?-ácidos foram microencapsulados com 30%de extrato. As rações foram formuladas à base de milho e farelo de soja, com inclusão de 5% de farelo de trigo e 5% de farinha de penas e vísceras. Aos 7 dias de idade todas as aves foram vacinadas contra coccidiose. As aves e as rações foram pesadas semanalmente para cálculo de desempenho. No experimento 2, foram alojados 1440 pintos de corte da linhagem Ross 308, no período de 1 a 42 dias de idade, com 6 tratamentos e 6 repetições. Os tratamentos foram: controle negativo, dieta basal; controle positivo, ração com 30 mg/kg de bacitracina de zinco; controle negativo mais desafio; controle positivo mais desafio; controle negativo suplementado com 30 mg/kg de ?-ácidos mais desafio; controle negativo suplementado com 240 mg/kg de ?-ácidos mais desafio. As rações foram formuladas à base de milho e farelo de soja com inclusão de 5% de farinha de penas e vísceras. Aos 14 dias de idade, as aves dos tratamentos 3, 4, 5 e 6 foram desafiadas, via oral, com 2x105 e 5x104 oocistos de Eimeria acervulina e E. tenella, respectivamente. As aves e as rações foram pesadas semanalmente para obtenção dos dados de desempenho. Aos 21 e 35 dias de idade das aves, coletou-se o conteúdo do intestino delgado e cecos das aves para análise da microbiota intestinal, com auxílio de técnicas moleculares. No experimento 1, aos 21 dias de idade as aves os tratamentos com 30 ou 60 mg/kg de ?-ácidos apresentaram desempenho semelhante às do controle positivo. Aos 42 dias houve melhora na conversão alimentar das aves recebendo 30 e 240 mg/kg de ?-ácidos ou antimicrobiano. No segundo experimento, a coccidiose causou significativa redução no desempenho das aves e nenhum dos aditivos utilizados foi capaz de reverter esta situação. Houve aumento de bactérias do gênero Clostridium no intestino delgado aos 21 dias, em consequência do desafio, entretanto, o maior nível de ?-ácidos reduziu esta população. Aos 35 dias de idade a infecção de coccidiose não alterou a comunidade bacteriana do intestino delgado, mas nos cecos houve aumento do gênero Bacteroides.Os ?-ácidos possuem potencial para serem utilizados nas dietas de frangos de corte em situações de baixo desafio, e podem auxiliar no controle da proliferação de Clostridium, embora ineficazes contra a Eimeria. / The objective was to evaluate increasing level of hops ?-acids in the feed on performance of broiler chickens. A pen trial using 1440 one-day old chickens, from 1 to 42 days, with 6 treatments and 6 replicates was conducted (Experiment 1). The experimental treatments were: negative control, basal diet; positive control, basal diet supplemented with zinc bacitracin, 30 mg/kg; and basal diet supplemented with 30, 60, 120 or 240 mg/kg of hops ?-acids, for 4 additional treatments. The corn soybean meal basal diet was formulated with inclusion of 5% poultry by-product meal and 5% wheat bran. At 7 days of age all birds were vaccinated against coccidiosis. The chickens and the feed were weighted weekly to calculate the performance. In the second experiment, the objective was to evaluate the supplementation of hops ?-acids on performance and the balance of intestinal microbiota of broilers, following challenge with Eimeria acervulina and E. tenella. A pen trial using 1440 one-day-old chickens, from 1 to 42 days, with 6 treatments and 6 replicates was conducted. The experimental treatments were: negative control, basal diet; positive control, basal diet supplemented witn zinc bacitracin, 30 mg/kg; negative controle + challenge; Positive control + challenge; negative control supplemented with 30 mg/kg of hops ?-acids + challenge; negative control supplemented with 240 mg/kg of hops ?-acids + challenge. The corn soybean meal basal diet was formulated with inclusion of 5% poultry byproduct meal. At 14 days of age, the birds in treatments 3, 4, 5 and 6 were challenged with 2x105 and 5x104 oocists of Eimeria acervulina and E. tenella, respectively. The chickens and the feed were weighted weekly to calculate the performance. At 21 and 35 days of age, the small intestine and ceca content was collected to analyze the intestinal microbiota, using molecular techniques. In the first experiment, at 21 days of age the treatment with 30 or 60 mg/kg of ?-acids had the same performance of chickens in positive control. At 42 days, the treatments containing 30 or 240 mg/kg of ?-acids and positive control had improved feed conversion. In the second experiment, there was worse performance in broilers chickens challenged with coccidiosis and the additives were not able to oppose this situation. There was increase in the Clostridium population in the small intestine at 21 days, due to challenge, however, the highest level of ?-acids decreasead this genus. At 35 days, the coccidiosis did not alter the bacterial community in the small intestine, although the ceca had higher level of Bacteroides. The hops ?-acids have the potential to be used in the diets of broiler chickens, under low level of challenge, and to proliferation of Clostridium, although ineffective against Eimeria.
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Studien zur Behandlung der Eimeria bovis - Kokzidiose des Kalbes mit Toltrazuril

Uebe, Friederike 11 October 2011 (has links)
Ziel der vorliegenden Arbeit war es, ein Infektionsmodell für Eimeria bovis zu etablieren und die induzierte Kokzidiose mit unterschiedlichen Anwendungen von Toltrazuril zu behandeln. Zusätzlich wurde eine histopathologische Studie durchgeführt, in der zu unterschiedlichen Zeitpunkten mit der gleichen Dosis Toltrazuril behandelt wurde. In der ersten Studie wurde die effektive Dosis Toltrazuril bei einer experimentellen E. bovis – Kokzidiose bestimmt. Nach der experimentellen Infektion mit 50000 Oozysten pro Kalb wurden die Tiere mit 5, 15 oder 25 mg/kg LM Toltrazuril oder mit einem Plazebo in der Präpatenz behandelt. In der Plazebogruppe entwickelten alle Tiere Durchfall, zwei Tiere auch hämorrhagische Diarrhoe. In den Behandlungsgruppen trat keine hämorrhagische Diarrhoe auf, sondern im Fall klinischer Kokzidiose nur katarrhalischer Durchfall. Auch in der durchschnittlichen Erkrankungsdauer unterschied sich die Plazebogruppe von den Behandlungsgrupppen ( 9,1 Tage bzw. 4,6, 4,3 oder 3,3 Tage). Bei der Oozystenausscheidung war ebenfalls ein statistisch signifikanter Unterschied zwischen der Plazebogruppe und den Behandlungsgruppen nachweisbar; ebenfalls war ein statistisch signifikanter Unterschied der Oozystenausscheidung der mit 5 mg/kg LM und den mit 15 bzw. 25 mg/kg LM behandelten Kälbern nachweisbar. Das Gewicht unterschied sich in dieser Studie nicht statistisch signifikant, was vermutlich auf die geringen Tierzahlen und begleitende Atemwegserkrankungen zurückzuführen ist. In der zweiten Studie wurde die Infektionsdosis auf 100000 Oozysten pro Kalb verdoppelt und zwei Behandlungsgruppen gebildet: unbehandelte Kontrollgruppe und 15 mg/kg LM Toltrazuril. Auch in dieser Studie traten signifikante Unterschiede zwischen den Gruppen auf. Dies betraf Kotkonsistenz, Oozystenausscheidung und Gewicht. Die unbehandelten Kälber wiesen alle hämorrhagische Diarrhoe mit Gewebefetzen auf, in der Behandlungsgruppe trat dies nur bei einem Tier auf, alle anderen Kälber wiesen nur eine katarrhalische Diarrhoe auf. Alle Tiere (n=9) der Kontrollgruppe schieden erhebliche Mengen von Oozysten aus, bei den behandelten Tieren schieden nur 2 von 9 Kälbern Oozysten aus, auch die OpG lagen deutlich niedriger. In der dritten Studie mit histopathologischer Untersuchung wurden die Tiere in drei Gruppen aufgeteilt, die jeweils aus 8 Tieren bestanden; alle Tiere wurden mit 100000 Oozysten pro Kalb infiziert. Eine Gruppe erhielt in der Präpatenz eine Plazebobehandlung, eine in der Präpatenz metaphylaktisch 15 mg/kg LM Toltrazuril und eine therapeutisch 15 mg/kg LM Toltrazuril. Die Untersuchungstermine für die Pathologie wurden in der Präpatenz und der frühen und späten Patenz, bzw. Postpatenz gewählt. Auch in dieser Studie unterschieden sich die Kotkonsistenz und die Oozystenausscheidung deutlich zwischen der metaphylaktisch behandelten Gruppe und den beiden anderen Gruppen. Auch die Gewichtszunahme lag in der metaphylaktisch behandelten Gruppe deutlich höher als in den beiden anderen Gruppen. Die pathologischen Ergebnisse zeigen ebenfalls einen deutlichen Unterschied zwischen der metaphylaktisch behandelten Gruppe und den beiden anderen Gruppen. Insgesamt lassen die Ergebnisse den Schluß zu, daß eine metaphylaktische Behandlung mit Toltrazuril in der Lage ist, eine massive klinische Kokzidiose, hervorgerufen durch E. bovis, zu verhindern. Da eine therapeutische Anwendung keinen deutlichen Effekt auf die klinische Ausprägung und die Oozystenausscheidung zeigt, ist es in der Praxis wesentlich, mit der Epidemiologie in dem zu behandelnden Bestand vertraut zu sein, um eine effektive Behandlung zu ermöglichen. Durch eine Behandlung in der Präpatenz kann über die Verringerung der Ausscheidung von Oozysten der Infektionsdruck für nachfolgende Kälbergruppen gesenkt werden.

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