Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-04Bitstream added on 2014-06-13T19:16:46Z : No. of bitstreams: 1 takada_hm_me_botfca.pdf: 587174 bytes, checksum: 68fcfeed820ef9c331817e76b2f9fab3 (MD5) / Com o objetivo de avaliar a patogenicidade e a virulência de fungos entomopatogênicos ao gorgulho aquático do arroz irrigado, Oryzophagus oryzae, foram testados 24 isolados de Metarhizium anisopliae e 2 de Beauveria bassiana. Os bioensaios foram realizados em condições controladas (26+1°C e 12 horas de fotofase). Nos testes para determinar a concentração adequada, a espécie M. anisopliae, isolado E9, apresentou maior patogenicidade quando comparado aos isolados de B. bassiana. A mortalidade confirmada, provocada pelo M. anisopliae, teve início no 4º dia, aumentando em seguida até estabilizar-se no 8º dia. Para a seleção dos isolados de M. anisopliae, adultos dos insetos foram inoculados com 1 mL de suspensão fúngica a 5x108 conídios/mL (1,6x104 conídios/mm2). Todos os isolados foram patogênicos ao inseto, sendo que a mortalidade variou entre 9,3 e 85,3 %. Os isolados de M. anisopliae mais patogênicos foram CB-103, CB-104, CB-233, E9 e CB-10. No teste de produção, os isolados CB-104, CB-233 e CB-103 foram superiores ao padrão E9, apresentando-se promissores para a utilização no controle de Oryzophagus oryzae. / Strains of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana were evaluated concerning their pathogenicity and virulence for control of the rice water weevil, Oryzophagus oryzae. Bioassay conditions were 26+1ºC and 12 h. light. M. anisopliae (E9 strain) was been more pathogenic than two Beauveria bassiana strains (CB-66 and CB-74). For Metarhizium anisopliae (E9 strain), the mean mortality started at 4th day, increasing soon after until stabilize at 8 th day. A screening of M. anisopliae isolates was done inoculating adults of the insect with 1 mL of spore suspension containing 5x108 conídia/mL (1.6x104 conídia/mm2). All isolates were pathogenic to the insect, causing mortality between 9.3 and 85.3%. The most pathogenic isolates were CB-103, CB-104, CB-233, E9 and CB-10. These 6 isolates were evaluated concerning their spore production on cooked rice. The isolates CB-104, CB-233 and CB-103 afforded the highests spores production, significantly higher compared to E9, showing potential to be used for Oryzophagus oryzae control.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-01-29Bitstream added on 2014-06-13T20:44:14Z : No. of bitstreams: 1 mochi_da_dr_jabo.pdf: 1918684 bytes, checksum: f29aa98fefb34604c991782bab720e3b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A mosca-dos-chifres Haematobia irritans é um dos principais ectoparasitos associados a bovinos em pastagens. O presente trabalho objetivou analisar a ação patogênica dos isolados E9, IBCB425 e IBCB159 do fungo Metarhizium anisopliae, JAB06, JAB07 e AM09 de Beauveria bassiana, IBCB133 e CB75 de Isaria fumosorosea (=Paecilomyces fumosoroseus) e CG189 e CG195 de Isaria farinosa (=Paecilomyces farinosus) para a mosca-dos-chifres H. irritans em laboratório e campo. Avaliou-se em laboratório, a ação de todos os isolados dos fungos sobre ovos, larvas, pupas e adultos. Grupos de 30 ovos foram inoculados com suspensões fúngicas, e colocados sobre papel de filtro esterilizado, em 5 g de fezes bovinas frescas, acondicionadas em tubos de plástico. No ensaio com larvas, pedaços de papel filtro esterilizado contendo na superfície grupos de 30 ovos foram colocados sobre 5 g de fezes bovinas frescas, contidas em tubos de plástico, às quais incorporaram-se diversas concentrações de conídios mg fezes-1. No ensaio com ovos e larvas, o término do experimento ocorreu com a emergência dos adultos. Grupos de 20 pupas foram imersas por 60 segundos em suspensão do fungo, e colocadas em placas de Petri. Após a emergência, os adultos foram transferidos para gaiolas de isopor pequenas. Para o ensaio com adultos, grupos de 30 adultos foram separados e pulverizados com 0,3 mL das suspensões de conídios. Doze horas após, as moscas foram transferidas para gaiolas de isopor e avaliadas diariamente até o 15o dia. Para todos os ensaios, foram utilizadas suspensões contendo 106, 107 e 108 conídios mL-1. O isolado que promoveu os melhores resultados nos ensaios anteriores, foi usado em um experimento de campo para avaliar a ação fúngica em larvas e adultos de H. irritans em bovinos naturalmente infestados. Para o controle de larvas, foi oferecido aos bovinos conídios de M. anisopliae isolado... / Horn fly Haematobia irritans is one of the main ectoparasites associated to cattle on pastures. The present work had the objective of analyzing the pathogenic action of the isolates E9, IBCB425 and IBCB159 of the fungus Metarhizium anisopliae, JAB06, JAB07 and AM09 of Beauveria bassiana, IBCB133 and CB75 of Isaria fumosorosea (=Paecilomyces fumosoroseus) and CG189 and CG195 of Isaria farinosa (=Paecilomyces farinosus) for horn fly H. irritans, in laboratory and field conditions. The action of all the fungi isolates over the eggs, larvae, pupae and adults were evaluated in laboratory. Groups of 30 eggs were inoculated with fungal suspensions and placed over sterilized filter paper on top of 5 g of fresh bovine feces, put in plastic tubes. In the larvae assay, peaces of sterilized filter paper, containing groups of 30 eggs on the surface, were placed over 5 g of fresh bovine feces, contained in plastic tubes, in which different concentrations of conidia mg feces-1 were incorporated. In the eggs and larvae assay, the end of the experiment matched the emergence of the adults. Groups of 20 pupae were immersed for 60 seconds in the fungus suspension and placed on Petri dishes. After the emergence, the adults were transferred to small Styrofoam cages. In the adults assay, groups of 30 adults were separated and pulverized with 0,3 ml of the conidia suspensions. After twelve hours, the adults were transferred to Styrofoam cages and the evaluations were done daily until the 15th day. Suspensions containing 106, 107 and 108 conidia ml-1 were used for all the assays. The isolate that promoted best results on the previous assays was used in a field experiment, where the fungal action on larvae and adults of H. irritans, on naturally infested bovines, was evaluated. For the larvae control conidia of the E9 isolate of M. anisopliae, microencapsulated... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-10Bitstream added on 2014-06-13T19:14:44Z : No. of bitstreams: 1 botelho_aaa_me_jabo.pdf: 299640 bytes, checksum: e82d7c36c6135c74da78cba583a23175 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / No manejo integrado da cana-de-açúcar são utilizados fungos entomopatogênicos para o controle de insetos e também diversos agroquímicos visando aumento de produtividade. Porém, vários destes agroquímicos podem interferir na sobrevivência de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos agroquímicos mais utilizados no manejo da cana-de-açúcar para B. bassiana e M. anisopliae em experimentos feitos com a utilização em meio de cultura e de solo. Nos ensaios com meio de cultura, os fungos foram inoculados em meio de batata, dextrose e ágar (BDA) contendo diversos inseticidas (4), herbicidas (7) e maturadores (3). Avaliou-se o crescimento, a esporulação e a viabilidade, e com base nesses parâmetros fez-se a classificação toxicológica dos agroquímicos. Para verificar se o efeito encontrado em meio de cultura se mantém no ambiente do solo, foram usados os agroquímicos que apresentaram maior toxicidade no ensaio com meio de cultura. Nesta etapa os fungos foram inoculados nos solos argiloso e arenoso esterilizados, contendo os agroquímicos nas doses recomendadas pelos fabricantes, observando-se as seguintes formas de aplicação: T1 - inoculação do fungo no solo 1 hora antes da aplicação do agroquímico; T2 - inoculação do fungo no solo 1 hora após a aplicação do agroquímico; T3 - inoculação do fungo no solo 48 horas após a aplicação do agroquímico. Avaliou-se a sobrevivência dos fungos por um período de sete dias através das unidades formadoras de colônias (UFC) em placas de Petri. Nos ensaios com meios de cultura, os inseticidas à base de Fipronil (Regente®) e Thiametoxan (Actara®) foram compatíveis com os fungos, mas Aldicarbe (Temik®) foi considerado tóxico. A maior parte dos herbicidas avaliados foram classificados como tóxicos aos entomopatógenos, mas aqueles formulados com Imazapir... / In the management of sugarcane are used entomopathogenic fungi to control insects; and various agrochemicals aimed at increasing productivity. However, several of these agrochemicals may interfere with survival of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae. Therefore, this research had the objective to evaluate the toxicity of agrochemicals used in handling of sugarcane to B. bassiana and M. anisopliae in experiments in culture medium and soil. In tests in culture medium, the fungi were inoculated on potato dextrose agar (PDA) containing various insecticides (4), herbicides (7) and ripeners (3). It were evaluated the growth, sporulation and viability, and based on these parameters became the toxicological classification of agrochemicals. To examine whether the effect found in the culture medium remains in the soil environment, were used agrochemicals that showed higher toxicity in culture medium assays. At this stage the fungi were inoculated in clay and sandy soils sterilized, containing the chemicals in the recommended dosages, observing the following application forms: T1 - inoculation of the fungi in soil 1 hour before to herbicide application, T2 - inoculation fungi in the soil 1 hour after herbicide application, T3 - inoculation of the fungi in the soil 48 hours after herbicide application. It was evaluated the survival of the fungi for a period of seven days through the colony forming units (CFU) in Petri dishes. Insecticides based on Fipronil (Regente®) and Thiamethoxan (Actara®) are compatible with the fungi, but Aldicarbe (Temik®) proved to be toxic. Most of the herbicides evaluated were classified as toxic to entomopathogenic fungi, but those made with Imazapir (Contain®), Glyphosate (Glifosato®) and Metribuzin (Sencor®) were considered compatible. Among the ripeners only Glyphosate (Round up®) showed compatibility with B. bassiana and M. anisopliae... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-10Bitstream added on 2014-06-13T18:56:04Z : No. of bitstreams: 1 yoshida_l_me_jabo.pdf: 663799 bytes, checksum: 4dc9e1d64b26d27a609814b1eb9e7c39 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo investigou, em condições de laboratório, a atividade patogênica de diferentes isolados dos fungos Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana e Paecilomyces fumosoroseus, aplicados nas concentrações de 1 x1 06 e 1 x1 08 conídios/mL nos estágios de ovo, larva L2, pupa e adulto de Chrysomya puloria. Grupos de 30 ovos, 20 larvas L2 e 20 pupas foram banhados com as suspensões de conídios e no ensaio com adultos, grupos de 30 moscas, foram pulverizados com as mesmas suspensões. Em todos os ensaios, utilizaram-se quatro repetições por tratamento. Os três fungos e seus respectivos isolados apresentaram baixa atividade patogênica para a fase de ovo. Os isolados de B. bassiana e M. anisopliae, aplicados na concentração de 108 conídios/mL, promoveram 100% de mortalidade de larvas de C. puloria. O tratamento de pupas com o isolado JAB 07 de B. bassiana, na concentração de 108 conídios/mL, reduziu significativamente a emergência de adultos. O efeito dose¬resposta foi melhor evidenciado no ensaio com adultos, pois os isolados de M. anisopliae e B. bassiana dimimuiram a sobrevivência somente quando aplicados na concentração de 108 conídios/mL. Todos os fungos se mostraram patogênicos para C. putoria, havendo diferença entre os isolados quanto a ação patogênica. Os isolados de B. bassiana e M. anisopliae foram mais eficientes, atuando principalmente nas fases de larva e adulto. P. fumosoroseus evidenciou menor atividade patogênica, apenas reduzindo a sobrevivência de adultos emergidos a partir de pupas inoculadas. A eficiência do controle foi influenciada pela concentração de conidios, obtendo-se os melhores resultados com as suspensões mais concentradas. / The present study investigated, in laboratory conditions, the pathogenic activity of different isolates of the fungi Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Paecilomyces fumosoroseus, applied in the concentrations of 1 x1 06 and 1 x1 08 conidia/ml in the stages of egg, L2 larvae, pupa and adult of Chrysomya putoria. Groups of 30 eggs, 20 L2 larvae e 20 pupae were bathed with the conidia suspensions and in the assay with adult, graups of 30 f1ies were pulverized with the same suspensions. In ali the assays there were used four repiicates per treatment. The three fungus and their respective isolates presented low pathogenic activity for the egg stage. The isolates B. bassiana and M. anisopliae, applied in the concentration of 108 conidia/ml, promoted a 100% of C. puloria larvae morta!ity. The pupae treatment with the isolate JAB 07 of B. bassiana, in the concentration of 108 conidia/ml, decreased significantly adult emergence. The dose-response effect was better evidenced in the assay with adults, because the isolates of M. anisopliae and B. bassiana only reduced the survival when applied in the concentration of 108 conidia/ml. All fungus demonstrated to be pathogenic to C. puloria, although there is a difference between the isolates in their pathogenic activity. The isolates of B. bassiana and M. anisopliae were more efficient, mainly acting in the larva and adult stages. P. fumosoroseus evidenced lower pathogenic activity, decreasing the survival of emerged adult only through inoculated pupae. The control efficiency was influenced by the conidia concentration, obtaining the best results with the most concentrated suspension.

Orientador: Antonio Batista Filho / Resumo: Com o objetivo de avaliar a patogenicidade e a virulência de fungos entomopatogênicos ao gorgulho aquático do arroz irrigado, Oryzophagus oryzae, foram testados 24 isolados de Metarhizium anisopliae e 2 de Beauveria bassiana. Os bioensaios foram realizados em condições controladas (26+1°C e 12 horas de fotofase). Nos testes para determinar a concentração adequada, a espécie M. anisopliae, isolado E9, apresentou maior patogenicidade quando comparado aos isolados de B. bassiana. A mortalidade confirmada, provocada pelo M. anisopliae, teve início no 4º dia, aumentando em seguida até estabilizar-se no 8º dia. Para a seleção dos isolados de M. anisopliae, adultos dos insetos foram inoculados com 1 mL de suspensão fúngica a 5x108 conídios/mL (1,6x104 conídios/mm2). Todos os isolados foram patogênicos ao inseto, sendo que a mortalidade variou entre 9,3 e 85,3 %. Os isolados de M. anisopliae mais patogênicos foram CB-103, CB-104, CB-233, E9 e CB-10. No teste de produção, os isolados CB-104, CB-233 e CB-103 foram superiores ao padrão E9, apresentando-se promissores para a utilização no controle de Oryzophagus oryzae. / Abstract: Strains of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana were evaluated concerning their pathogenicity and virulence for control of the rice water weevil, Oryzophagus oryzae. Bioassay conditions were 26+1ºC and 12 h. light. M. anisopliae (E9 strain) was been more pathogenic than two Beauveria bassiana strains (CB-66 and CB-74). For Metarhizium anisopliae (E9 strain), the mean mortality started at 4th day, increasing soon after until stabilize at 8 th day. A screening of M. anisopliae isolates was done inoculating adults of the insect with 1 mL of spore suspension containing 5x108 conídia/mL (1.6x104 conídia/mm2). All isolates were pathogenic to the insect, causing mortality between 9.3 and 85.3%. The most pathogenic isolates were CB-103, CB-104, CB-233, E9 and CB-10. These 6 isolates were evaluated concerning their spore production on cooked rice. The isolates CB-104, CB-233 and CB-103 afforded the highests spores production, significantly higher compared to E9, showing potential to be used for Oryzophagus oryzae control. / Mestre

A terapia fotodinâmica é a combinação do agente fotossensibilizador, da fonte de luz e do oxigênio que pode resultar na oxidação de biomoléculas e gerar danos celulares. Esta técnica é aplicada em diversas situações, desde o controle microbiológico até o tratamento de câncer. A maioria dos estudos utiliza as fontes de luz tradicionais, ou seja, lasers, sistemas à LED e lâmpadas. No entanto, poucos são os estudos que se concentram em propostas de fonte de luz alternativas. Iluminação portátil, flexível e independente de energia elétrica são características de grande interesse, principalmente, aos países em desenvolvimento no qual há uma grande parcela da população não assistida por hospitais de referência, além de cidades que não possuem o fornecimento de energia elétrica. Neste estudo, foi avaliada a viabilidade do uso, in vitro, da quimiluminescência como uma fonte de luz para a terapia fotodinâmica, induzindo a redução microbiana de Staphylococcus aureus. A quimiluminescência é uma reação química onde por meio da mistura de reagentes líquidos ocorre a emissão de luz sem a necessidade de qualquer ativação externa. Previamente aos estudos da aplicação terapia fotodinâmica in vitro, foram avaliadas diversas reações de quimiluminescência no intuito de estabelecer as características mais viáveis ao efeito fotodinâmico. Através de um modelo similar a teoria de Förster, foi estabelecida a relação espectral entre a banda de emissão da quimiluminescência e o espectro de absorção do fotossensibilizador Photogem®. Na análise in vitro, o agente fotossensível foi utilizado em quatro concentrações entre 6 e 75 g/ml e iluminação entre 60 minutos até 240 minutos. Longos tempos de irradiação são necessários devido a baixa intensidade de luz oriunda da quimiluminescência (intervalo de algumas dezenas de W/cm²). Os resultados demonstraram que o longo tempo de experimento não gerou redução microbiana nos grupos em que foi avaliado o efeito isolado da fonte de luz e do fotossensibilizador. Porém, quando foi avaliado o efeito fotodinâmico na combinação da reação química e o fotossensibilizador, atingiu-se redução da bactéria próxima de 98% (redução de duas ordens logarítmicas, aproximadamente) nas maiores concentrações de Photogem® e de dose de luz aplicada. Este estudo demonstra a possibilidade do uso da quimiluminescência como uma fonte de luz alternativa no controle microbiano através do efeito fotodinâmico, além de apresentar as vantagens de irradiação portátil, flexível entre outras quando comparada com as fontes de luz convencionais. / Photodynamic therapy is a combined action of the photosensitizer, a light source and the oxygen that may result in an oxidation of biomolecules and cellular damage. This technique is used for several applications, from microbial control to cancer treatment. The majority of the studies use conventional light sources as lasers, LED systems and lamps, just a few focuse on the proposal of alternative light sources. Portable, flexible and non-wired illumination are duired characteristics especially for developing countries where still great part of the population is not assisted by hospitals and several regions do not have electricity. In this study, the viability of chemiluminescence use a PDT light source was evaluated in the in vitro microbial reduction of Staphylococcus aureus. Chemiluminescence is a chemical reaction where after the reagents mixture a light emission occurs. Previously to the microorganism experiment, several chemiluminescence protocols were tested for the determination of the best reaction for this study photodynamic effect. Using a mathematical model similar to the Förster theory, the spectral relation of chemiluminescence emission and Photogem® absorption band was calculated. The photosensitizer was tested at four concentrations between 6 an 75 g/ml and illumination at exposure times between 60 and 240 minutes. Long exposure times were needed due to the low irradiances of about dozens of W/cm².The results showed that the experiment long procedure did not result in microbial reduction, which was verified at the individual effect of light and of photosensitizer. On the other hand, the photodynamic effect produced by the combination of the photosensitizer and chemiluminescence resulted in 98% microorganism reduction for the higher Photogem® concentrations and light dose. This study shows the viability of the chemiluminescence as a light source for the microbial control by PDT, associated with the characteristics of a portable and flexible illumination device.

A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica baseada na interação entre uma substância fotossensibilizadora e luz, na presença do oxigênio, para causar morte celular. Sob iluminação de comprimento de onda específico, o fotossensibilizador é excitado e reage com oxigênio celular, dando origem a espécies reativas de oxigênio capazes de promover danos a biomoléculas da célula-alvo. O mesmo processo ocorre para micro-organismos, como bactérias, vírus e fungos. A Pitiose é uma doença causada por um micro-organismo semelhante a fungo denominado Pythium insidiosum. Por não ser um fungo verdadeiro, o agente não apresenta ergosterol em sua membrana plasmática e por isso, não responde à maioria das drogas antifúngicas disponíveis. Procedimentos cirúrgicos extensos, como amputação de membros, são indicados; porém as recidivas são frequentes. Neste trabalho, foi avaliado o efeito da TFD em modelo in vitro, em infecção experimental de pitiose e em pitiose equina. Além disso, foram realizados ensaios de cinética dos fotossensibilizadores utilizados, porfirina, clorinas e azuleno. As taxas de inibição de crescimento in vitro do P. insidiosum foram superiores a 95% para os ensaios com Photodithazine&reg. Photogem&reg apresentou inativação satisfatória e o azul de metileno se mostrou ineficiente para a inativação do patógeno. A cinética comprova os resultados obtidos in vitro, e revelou possível afinidade das clorinas com o oomiceto. Dez minutos após a incubação em solução de Photodithazine&reg e clorina e6 foi possível observar os compostos em estruturas intracelulares específicas. Para maiores tempos de incubação, a distribuição destes compostos se dá por toda a hifa e parede celular. O Photogem&reg mostrou distribuição heterogênea na cultura. Este fato explica o crescimento de algumas hifas após a TFD. O azul de metileno não penetrou na célula microbiana e por isso não foi eficiente na inativação do patógeno. Ao observar a estrutura morfológica da hifa do patógeno após a TFD com diferentes tempos de incubação, ficou evidente que a TFD é mais eficiente para maiores tempos de incubação. Apenas o azul de metileno não inativou o patógeno em nenhum dos parâmetros avaliados. Os estudos em pitiose experimental mostraram que o Photodithazine&reg concentra-se na lesão 4 horas após a administração por via endovenosa, o que não foi observado para o Photogem®. Altas fluências e intensidades luminosas foram necessárias para o tratamento das lesões. Foram avaliados 21 coelhos com aproximadamente 95% de cura. O tratamento de equinos naturalmente infectados mostrou resultados animadores. Foram avaliados quatro cavalos, realizando-se apenas duas sessões de TFD em cada animal e foi possível observar regiões de cicatrização tecidual e recuperação da função motora dos animais. Mais uma vez as clorinas mostraram maior eficiência quando comparadas aos outros fotossensibilizadores. Além disso, observou-se a relação entre os tempos de incubação e resposta tecidual que condizem aos observados no estudo farmacocinético. O protocolo para o tratamento da pitiose, provavelmente basear-se-á em tempos de incubação do composto maiores que 1 hora, altas fluências e intensidades luminosas e clorinas como agente fotossensibilizador. Neste trabalho, a TFD mostrou potencial terapêutico e pode vir a se tornar uma importante ferramenta no tratamento da pitiose. / Photodynamic Therapy (PDT) is a therapy based on the interaction of photosensitizer and light, in the presence of oxygen, to induce cellular death. Under the incidence of light, at an appropriated wavelength, these chemical compounds produce reactive oxygen species which affects the biomolecules of the target-cells. Pythiosis is a lifethreatening emerging disease caused by a fungus-like organism called Pythium insidiosum. Since it is not a true fungus, this microorganism does not present ergosterol in its plasmatic membrane, and so, does not respond satisfactorily to most antifungal drugs. Extensive surgical debridements are required, such as limb amputation, however, reccurence frequently occurs. In this study the PDT effect was investigated in an in vitro model, experimental in vivo infection and naturally occurred equine pythiosis. Besides, pharmacokinetic assays with chlorine, porphyrin and methylene blue were also carried out. It was observed inhibition rates greater than 95% for chlorine, while porphyrin showed satisfactory inhibition and methylene blue was inefficient to inactivate the pathogen. Pharmacokinetics assays corroborate with obtained in vitro results and demonstrated a possible affinity between chlorine and oomicetes. After ten minutes of incubation, for both chlorine and clorin e6 solutions, it was observed that these compounds were concentrated in intracellular specific structures. For longer incubation times the distribution of these compounds was observed along the hyphae and cellular wall. Porphyrin has shown heterogeneous distribution on cell culture. This fact may explain hyphal growth observed after PDT with this photossensitizer. Methylene blue was present only in the cell surface and so, did not inhibit the pathogen. By observing the morphological structure of the pathogen after PDT with different incubation times, it was evident that PDT is more efficient when employing longer incubation times. Only methylene blue did not inactivate the pathogen in none of the evaluated protocols. Concerning experimental infection, it was observed that chlorine concentrates in lesion 4 hours after intravenous administration, while the same was not observed for porphyrin. High light doses and irradiances were necessary for treating the lesions. It was evaluated 21 rabbits with complete response around 95%. The treatment of naturally infected equines showed promising results. Four horses were treated with two PDT sessions. Treated regions of healing and recovery of motor function of the animals were observed. Once again, chlorins showed improved results when compared to the other photosensitizers. Besides, it was observed the relation between incubation time and tissue response correlated to those observed in the kinetics study. The protocol for treating pythiosis, probably will be based on chlorine incubation time greater than 1 hour, high light dose and irradiance, that the results of the present study demonstrate that PDT is a potential treatment option for pythiosis.

O inseto vetor Diaphorina citri Kuwayama 1907 (Hemiptera: Liviidae) é considerado a principal praga da citricultura mundial. O controle desta praga é feito quase exclusivamente com inseticidas químicos, existindo a demanda por alternativas mais sustentáveis de controle. O desenvolvimento de um bioproduto a base de fungo entomopatogênico pode ser uma alternativa promissora para o manejo integrado de D. citri em pomares comerciais de citros. Assim, esse estudo teve como objetivo viabilizar a utilização do fungo entomopatogênico Isaria fumosorosea ESALQ-1296 para o controle de D. citri, avaliando: 1- a ação de adjuvantes na adesão e germinação de I. fumosorosea em ninfas e adultos de D. citri; 2- a relação entre a viabilidade dos conídios e a mortalidade de D. citri; 3- o efeito da umidade relativa do ar e da radiação ultravioleta na eficácia de I. fumosorosea em condições de laboratório; 4- o período entre a aplicação de fungicidas químicos e I. fumosorosea em campo; 5- a seletividade de I. fumosorosea aos inimigos naturais Tamarixia radiata e Ceraeochrysa cincta em condições de laboratório; 6- o volume de calda adequado para as aplicações de I. fumosorosea para o controle de D. citri em pomares comerciais; 7- a eficiência de I. fumosorosea no manejo de D. citri e seu efeito em outras espécies de artrópodes em dois sistemas de produção de citros. Análises por microscopia eletrônica de varredura revelaram que a adição dos adjuvantes KBRAdj e Silwet L-77 acelerou o desenvolvimento dos conídios de I. fumosorosea na cutícula de todos os estágios do inseto em comparação com o Tween 80. As formulações de I. fumosorosea com KBRAdj 0,075% apresentaram melhor desempenho no controle de D. citri em todos os níveis de umidade, mas especialmente em períodos de baixa umidade relativas (≤50%) e sob exposição à radiação UV-B (> 2 horas) em relação a aplicação com Tween. Os fungicidas Kumus® DF, Kocide® WDG, Nativo®, Flint 500® WG não influenciaram no desempenho do entomopatógeno quando esses foram pulverizados um dia antes ou após a aplicação do fungo sobre os adultos de D. citri. Nos estudos de seletividade foi demonstrado que a maioria das misturas de I. fumosorosea com os adjuvantes foi inócua para os adultos de T. radiata e as larvas neonatas de C. cincta. Em pomares comerciais, foi demostrado que as aplicações de I. fumosorosea foram mais eficientes no volume de 60 mL.m-3 de área de copa. Na área com produção orgânica de citros foi verificado que as aplicações de I. fumosorosea reduziram significativamente a população natural de D. citri e do ácaro da leprose (Brevipalpus spp.). Já na área com produção convencional de citros foi observado que as pulverizações de I. fumosorosea reduziram significativamente a população do ácaro da falsa ferrugem (Phyllocoptruta oleivora) e a população de D. citri foi extremamente baixa em todos os tratamentos. As aplicações de I. fumosorosea não apresentaram efeitos negativos nas populações dos predadores joaninhas, crisopídeos e hemerobídeos. Portanto, conclui-se que a utilização do fungo I. fumosorosea no manejo de D. citri pode ser uma tática sustentável para minimizar as aplicações sistemáticas de pesticidas, diminuindo seus impactos no agroecossistema. / The insect vector Diaphorina citri Kuwayama 1907 (Hemiptera: Liviidae) is the main citrus pest in the world. The control of this pest is done almost exclusively with chemical insecticides, and there is a demand for more sustainable control alternatives. The development of a bioproduct based on entomopathogenic fungi may be a promising alternative for the integrated management of D. citri in commercial citrus orchards. The objective of this study was to evaluate important parameters to increase efficiency of applications of the entomopathogenic fungus Isaria fumosorosea ESALQ-1296 for the control of D. citri. The following studies have been developed: 1- the action of adjuvants on adhesion and germination of I. fumosorosea on nymphs and adults of D. citri; 2- the relationship between the conidia viability and the mortality of D. citri; 3- the effect of relative air humidity and ultraviolet radiation on the efficacy of I. fumosorosea under laboratory conditions; 4 - the period between the application of chemical fungicides and I. fumosorosea in field; 5- the selectivity of I. fumosorosea to the natural enemies Tamarixia radiata and Ceraeochrysa cincta under laboratory conditions; 6 - the volume of syrup suitable for I. fumosorosea applications for the control of D. citri in commercial orchards; 7- the efficiency of I. fumosorosea to management of D. citri and its effect against other species of arthropods in two systems of citrus production. Scanning electron microscopy analysis revealed that the addition of the adjuvants KBRAdj and Silwet L-77 accelerated the development of I. fumosorosea conidia on the cuticle of all stages of the insect compared to Tween 80. The formulations of I. fumosorosea with KBRAdj 0.075% showed better performance in controling D. citri at all moisture levels, but especially in periods of low relative humidity (≤50%) and exposure to UV-B radiation (> 2 hours) compared to Tween application. The fungicides Kumus® DF, Kocide® WDG, Nativo®, Flint 500® WG did not influence the performance of the entomopathogen when they were sprayed the day before or after application of the fungus on D. citri adults. In the selectivity studies, it was shown that most of the mixtures of I. fumosorosea with the adjuvants were innocuous for the adults of T. radiata and the neonates of C. cincta. In commercial orchards, it was demonstrated that I. fumosorosea applications were more efficient in the volume of 60 mL.m-3 of leaves. In the area with organic citrus production it was verified that I. fumosorosea applications significantly reduced the natural population of D. citri and the false spider mite (Brevipalpus spp.). In the area with conventional citrus production it was observed that sprays of I. fumosorosea significantly reduced the population of the false rust mite (Phyllocoptruta oleivora) and D. citri population was extremely low in all treatments. The applications of I. fumosorosea did not present negative effects in the populations of the ladybirds, lacewings and hemerobide predators. Therefore, it is concluded that the use of I. fumosorosea fungus in the management of D. citri can be a sustainable tactic to minimize the systematic applications of pesticides, reducing their impacts on the agroecosystem.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-08-30T13:40:23Z No. of bitstreams: 1 Ana Caroline de Azevedo Teixeira.pdf: 500119 bytes, checksum: c6f5c469790bac6fbe0bfe816ac29466 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-30T13:40:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Caroline de Azevedo Teixeira.pdf: 500119 bytes, checksum: c6f5c469790bac6fbe0bfe816ac29466 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Cucumber crop has its production affected by the attack of the aphid Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae), which colonizes the plant throughout all developmental stages. The use of chemical insecticides to control it has generated serious problems such as the emergence of resistant populations to the active ingredients used. This work aimed to evaluate fungus preparations based on entomopathogenic to control this insect pest in cucumber plants, and develop an insecticide the base of Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. Under laboratory conditions, the three most promising isolates were tested, CG 864, PL 63 and IBCB 66,with five concentrations of conidia (1x105, 1x106, 1x107, 1x108 and 1x109 conidia / ml) and control (sterile water + Tween 80) . In the third stage of the experiments studies were conducted involving two preparations of biological insecticide: a) an aqueous suspension [pure conidia of B. bassiana 864 CG + 0.01% Tween 80; used as a standard] b) formulation of oil dispersion [conidia pure vegetable oil emulsifiable +] CG 864 isolated, and diluted with water for spraying the concentrations of 0.5; 1; 2 and 4% oil. The fungus preparations were standardized to have 1.0 x 107 spores / mL in applied spray. Isolates of the fungus B. bassiana were more virulent aphid A. gossypii that isolates Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorok. and Lecanicillium longisporum (Zimmerman) Zare & Gams. The isolates CG 864, IBCB 66 and PL 63 of the B. bassiana were the most virulent. B. bassiana preparations reduced the aphid population A. gossypii, with control efficiencies of 52.3% to 83.8%, however, there was no difference in the pest population density between the oil dispersion and the aqueous suspension conidia. / A cultura do pepino tem sua produção afetada pelo ataque do pulgão Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae), que coloniza a planta durante todo seu estágio fenológico. O uso de inseticidas químicos para seu controle tem gerado sérios problemas, como o surgimento de populações resistentes aos princípios ativos utilizados. Este trabalho teve por objetivo avaliar preparações à base de fungo entomopatogênico para controle desse inseto-praga em plantas de pepino e desenvolver um inseticida a base de Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. Em condições de laboratório, os três isolados mais promissores CG 864, PL 63 e IBCB 66, foram testados, com cinco concentrações de conídios (1x105; 1x106; 1x107; 1x108 e 1x109 conídios/mL) e a testemunha (água esterilizada +Tween 80). Foram realizados estudos envolvendo duas preparações do inseticida biológico: a) suspensão aquosa (conídios puros de B. bassiana CG 864 + Tween 80 a 0,01%), utilizada como padrão e b) formulação em dispersão oleosa [conídios puros + óleo vegetal emulsionável], do isolado CG 864, sendo diluída em água para pulverização nas concentrações de 0,5, 1; 2; 4; 8 e 16% de óleo. As preparações do fungo foram padronizadas para 1,0 x 107 conídios/mL na calda aplicada. Isolados do fungo B. bassiana foram mais virulentos ao pulgão A. gossypii que os isolados de Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorok. e Lecanicillium longisporum (Zimmerman) Zare & Gams. Os isolados CG 864, IBCB 66 e PL 63 de B. bassiana foram os mais promissores. Preparações de B. bassiana reduziram a população do pulgão A. gossypii, com níveis de eficiência de controle de 52,3% a 83,8%, porém, não houve diferença na densidade populacional da praga entre a dispersão oleosa e a suspensão aquosa de conídios.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thiago Gechel Kloss.pdf: 874754 bytes, checksum: ef2f39dcbc8d4a2efd94b7fd9f513851 (MD5) Previous issue date: 2011-09-02 / Among the biological control agents, Bacillus thuringiensis Berliner (1911) stands out the most and the egg parasitoid of Trichogramma Westwood (1833). Diverse factors can interfere with the effectiveness of these agents and investigations are necessary to succeed in the utilization of these agents isolated or together. In this case, the objective of this study was to select the populations of Trichogramma and the isolated or formulated of B. thuringiensis the most adequate for the management of populations of Helicoverpa zea (BODDIE, 1850) and to evaluate the influence of variation in the populations of H. zea in these agents. Moreover, the effects of interaction between them in host populations were also evaluated. In the evaluation of the Trichogramma agents, ten females population, individually received a piece of cardboard containing eggs with a determined population of H. zea. The characteristics analyzed were parasitism (%), emergence of individuals (%), sex ratio and number of adults per host egg. In the analysis of B. thuringiensis, 34 isolates and the formulated commercial Agree® and Dipel® were used and also inoculated on a diet, in a concentration 3 x 108 spores mL-1. Furthermore, lethal concentration of the isolates and more virulent formulates were estimated. In the assessment of the interaction between these agents, the cardboard with the eggs of population of H. zea were sprayed with different isolates and formulated B. thuringiensis and were offered the females of population of Trichogramma. The characteristics evaluated where the same previously described for the populations of Trichogramma, except the female longevity. The biological control agents Trichogramma and B. thuringiensis showed adequate for the management of the populations of H. zea. In addition, the use of the agents together generated few negative effects and in some cases even strengthened the parasites of Trichogramma sp., showing the use of them together which can increase the efficiency of the control of populations of H. zea. Alterations caused by the difference population of the biological characteristics of Trichogramma and in the levels of virulence of the isolates and formulated of B. thuringiensis were registered, but these variations weren t sufficient to generate undesirable levels of these characteristics in the management of the insect populations / Entre os agentes de controle biológico destacam-se a bactéria Bacillus thuringiensis Berliner (1911) e o parasitoide de ovos Trichogramma Westwood (1833). Diversos fatores podem interferir na eficiência desses agentes e investigações são necessárias para se obter sucesso na utilização deles de forma isolada ou em conjunto. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi selecionar as populações de Trichogramma e os isolados ou formulados de B. thuringiensis mais adequados para o manejo de populações de Helicoverpa zea (BODDIE, 1850) e avaliar a influência da variação populacional de H. zea nesses agentes. Além disso, foram avaliados os efeitos da interação entre eles nas populações hospedeiras. Na avaliação do agente Trichogramma, fêmeas de dez populações receberam individualmente cartelas contendo ovos de uma determinada população de H. zea. As características analisadas foram parasitismo (%), emergência dos indivíduos (%), razão sexual e número de adultos por ovo do hospedeiro. Na análise de B. thuringiensis, foram utilizados 34 isolados e os formulados comerciais Dipel® e Agree®, que foram inoculados sobre a dieta, na concentração 3 x 108 esporos mL-1. Além disso, foi realizada a estimativa da concentração letal (CL50) para os isolados e formulados mais virulentos. Na avaliação da interação entre os agentes, cartelas com ovos das populações de H. zea foram pulverizados com diferentes isolados e formulados de B. thuringiensis e oferecidas para fêmeas de uma população de Trichogramma. As características avaliadas foram as mesmas descritas acima para as populações de Trichogramma, com exceção da longevidade das fêmeas. Os agentes de controle biológico Trichogramma e B. thuringiensis se mostraram adequados para o manejo de populações de H. zea. Além disso, o uso conjunto desses agentes gerou poucos efeitos negativos e em alguns casos até potencializou o parasitismo de Trichogramma sp., evidenciando que o uso deles em conjunto pode aumentar a eficiência de controle das populações de H. zea. Alterações ocasionadas pela diferença populacional nas características biológicas de Trichogramma e nos níveis de virulência dos isolados e formulados de B. thuringiensis foram registradas, porém essas variações não foram suficientes para gerar níveis indesejáveis dessas características no manejo das populações de insetos