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Solução hidropônica residual como meio de cultura para cultivo de Chlorella vulgaris

Bertoldi, Fabiano Cleber January 2006 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. / Made available in DSpace on 2012-10-22T06:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O cultivo de microalgas em meios de cultura alternativos vem sendo avaliado nas últimas décadas, entre eles, estão os efluentes industriais e agrícolas, possibilitando a reciclagem desse resíduo, bioconvertendo-o em uma biomassa enriquecida nutricionalmente, que pode ser utilizada como suplemento alimentar, na fabricação de rações, extração de pigmentos e em várias outras áreas de atuação. O presente estudo teve como finalidade verificar a potencialidade da solução hidropônica residual como um meio de cultura alternativo para o cultivo da microalga Chlorella vulgaris e, consecutivamente, analisar as características físico-químicas da biomassa obtida, bem como, avaliar a biorremoção de N e P pela microalga cultivada nas soluções residuais. Um volume de 180 mL contendo densidade celular de 2,5x106 cel.mL-1 de Chlorella vulgaris em meio Bold's Basal Medium (BBM) foi inoculado em fotobiorreatores cônicos invertidos contendo 3,7 L de quatro diferentes meios de cultura: meio BBM, que foi considerado como cultivo referência; solução hidropônica residual (SHR), solução hidropônica residual na proporção de 1:1 (SHR50) e 1:3 (25% de resíduo para 75% de água deionizada) denominado de SHR25. Os cultivos foram mantidos sob aeração constante, temperatura de 25 2 ºC e iluminação contínua de 150 mol.m-2.s-1. Durante os 7 dias de cultivo foram determinadas a densidade celular, o pH e a remoção de N e P. No sétimo dia, a biomassa obtida de cada cultivo foi separada dos meios por centrifugação, sendo uma parte utilizada para determinar o teor de carotenóides totais e clorofilas a e b e o restante da biomassa foi liofilizada, sendo posteriormente utilizada para determinação do conteúdo de proteínas, perfil aminoacídico, lipídios, composição de ácidos graxos da fração lipídica e composição de sais minerais. Os resultados sugerem que a Chlorella vulgaris, cultivada em solução hidropônica residual, possui potencial para obtenção de proteína unicelular de boa qualidade em razão da composição e distribuição dos aminoácidos, bem como do elevado conteúdo protéico, sendo os valores médios em BBM, SHR, SHR50 e SHR25: 52,40; 50,51; 43,96 e 39,97 g.100g-1, respectivamente. Além disso, geram boas perspectivas para produção de ácidos graxos insaturados (principalmente 18:3n-6), de carotenóides e de lipídios com 18,21% para BBM, 15,80% para SHR, 15,02 para SHR50 e 17,41% para SHR25. A microalga Chlorella vulgaris demonstrou ser uma boa fonte de clorofila e de sais minerais. Obteve bons resultados de biorremoção de N e P da solução hidropônica residual removendo até 87,0% de nitrato de SHR25 e 51,9% de fósforo total de SHR. Desta forma, pode-se concluir que a solução hidropônica residual apresentou potencial alternativa como meio de cultura para a produção de biomassa de Chlorella vulgaris, possibilitando a utilização desse resíduo de forma sustentável.
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Proposta protocolar para avaliar in vitro o crescimento e adesão celulares frente a implantes de titânio c.p. com quatro texturas superficiais obtidas por usinagem

Makowiecky, Edson January 2002 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2012-10-19T15:29:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T01:57:59Z : No. of bitstreams: 1 182038.pdf: 8962650 bytes, checksum: 18471b0f80e7a5054554eaf43450f159 (MD5) / A biocompatibilidade promove a oportunidade de investigar e comparar os resultados fenomenológicos gerados pelos estudos laboratoriais in vitro, investigações in vivo, em animais e, em humanos. Este trabalho situa-se entre estudos que visam beneficiar processos de osseointegração, fundamentais no desenvolvimento dos implantes, por meio de estudos in vitro. Trata-se da proposta de um protocolo para avaliar in vitro, em culturas de células osteoprogenitoras e células osteoblásticas provenientes de maxilares humanos, o crescimento e adesão celulares frente à quatro diferentes rugosidades obtidas por usinagem na superfície de amostras de cilindro de titânio c.p. seccionados.
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Produção de diacetil e acetoína: desenvolvimento de um meio de cultivo e avaliação de fatores que alteram o crescimento de Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetylactis

Carvalho, Júlio Cesar de January 1999 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química / Made available in DSpace on 2012-10-18T18:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T03:08:14Z : No. of bitstreams: 1 182861.pdf: 7692469 bytes, checksum: 221a62aef1816ef22c14ffebdf6c8dc7 (MD5) / O diacetil e a acetoína são substâncias responsáveis por parte do aroma de diversos derivados do leite. São substâncias que podem ser produzidas por diversos microorganismos, entre eles o Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetilactis (Llld). Esse microorganismo - especificamente a cepa NRRL 2356 - foi escolhido para estudos que levassem ao desenvolvimento de meios de cultura adequados para o processo de produção de diacetil e acetoína. No presente trabalho avaliou-se a influência de alguns fatores sobre o crescimento e produtividade de biomassa de Llld, desenvolveu-se meios de cultura visando a máxima produção de biomassa, e comparou-se meios de cultura em fermentador em termos de produção de biomassa, diacetil e acetoína. Os fatores estudados inicialmente foram a quantidade de inóculo, a velocidade de transferência de oxigênio e o pH dos meios de cultura. A produção de biomassa foi diretamente proporcional à quantidade de inóculo (para volumes de inóculo menores que 0,8% do volume de meio), inversamente proporcional à velocidade de transferência de oxigênio e diretamente proporcional ao pH (ou seja, inversamente proporcional à acidez do meio). Experimentos com diferentes meios de cultivo contendo lactose (LAC), extrato de levedura (YEA) e peptona (PEP) foram feitos, seguindo um planejamento experimental evolucionário. Os resultados desse planejamento permitiram elaborar um modelo segundo o qual a máxima produção de biomassa ocorre com 1,3% de LAC, 3,6% de YEA e 8,3% de PEP, dando uma produção teórica de 2,5 g/L de biomassa seca. Outro planejamento experimental, utilizando soro de leite reconstituído e ultrafiltrado (SORO), extrato de levedura e triptona (TRYP) permitiu elaborar um modelo segundo o qual a máxima produção de biomassa ocorre com de 50% (mL/mL) de SORO com 8,2% de sólidos, 2,85% de YEA e 11% de TRYP. Foram feitos ainda experimentos em fermentador de bancada de 6L usando meios MRS e SORO + YEA, adicionados ou não de citrato de amônio, dando produtividades maiores para os meios com SORO e produções de biomassa equivalentes para todos os experimentos. Determinações da concentração de diacetil e de acetoína foram feitas para os experimentos em fermentador; ocorreram interferências entre os reagentes usados na análise e substâncias na amostra. Não foi detectado diacetil, e a acetoína foi encontrada em concentrações de 3,5 a 7 ppm ou mg/L.
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Tumor mamário canino: estudo in vitro, imunomarcação e ação da doxorrubicina

Lima, Silmara Sanae Sakamoto de [UNESP] 09 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-09. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:51Z : No. of bitstreams: 1 000850064.pdf: 4306282 bytes, checksum: 43716ecb90f85e6190ef2c7b4fcce07b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A neoplasia mamária canina representa uma das maiores casuísticas na oncologia veterinária e o emprego de seus respectivos cultivos celulares são importantes, principalmente, na área terapêutica. Assim, o objetivo do presente estudo foi padronizar e estabelecer cultivos celulares de tumores mamários caninos para testes in vitro com doxorrubicina e, correlacionar imunomarcações com vimentina, citoqueratina, p53 e HER-2 no tumor original e nas células do seu cultivo. Tumor misto benigno e os carcinomas complexo, simples e espinocelular foram cultivados a partir de explantes com posterior exposição das células à doxorrubicina (controle-0,25-0,50-0,75-1,0-2,0μM). A viabilidade celular foi mensurada pelo azul de Tripan e os testes com imunomarcadores para cada espécie tumoral foram por imuno-histoquímica e, no cultivo, pela imunofluorescência. Do total de 39 amostras, 40% foram cultivadas até a quinta ou mais passagens. As imunomarcações não foram expressas de forma similar entre as técnicas, com diferença significativa na frequência de vimentina, p53 e HER-2, de forma aumentada nos cultivos. A doxorrubicina apresentou alta eficácia nas células tumorais, mas sem diferença entre os tipos histológicos, porém cada cultivo comportou-se distintamente quando analisado em isolado. Conclui-se que é possível cultivar primariamente diferentes tumores mamários caninos utilizando-se meio de cultivo básico; os testes de expressão gênicas são mais indicados para análises comparativas entre tumor e seu respectivo cultivo e, quanto maior a concentração do quimioterápico, menor a viabilidade celular / Canine mammary tumors represent a high casuistry in veterinary oncology and few studies with cell culture are being employed, mainly with drug application. The purpose was to establish and standardize the cell culture of canine mammary tumors for in vitro efficacy of doxorubicin and to correlate the immunostaining of vimentin, cytokeratin, p53 and HER-2, in paraffin sections of original tumor and the cell cultures derivated. Benign mixed tumor, complex carcinoma, simple carcinoma and espinocelular carcinoma were cultivated from explants and the cells originated were incubated with doxorubicin in different concentrations (control-0.25-0.50-0.75-1.0-2.0μM). The percentual of viable cells were determined by the Trypan blue dye exclusion test and for immunoexpression, the immunohistochemistry was performed for the primary tumor and immunofluorescence, for the cells. A total of 39 tumor samples were collected and, 40% were cultivated up to fifth passages. A different imunnoexpression was observed between methodologies with higher expression at vimentin, p53 and HER-2 groups. It was observed that doxorubicin presented an elevated efficacy in canine mammary cell culture but without difference among the histological groups and each sample presented an individual responsiveness for the same treatment. So, it can be concluded that it was possible to realize a primary cell culture with a simple culture medium formulation; gene expression profiles in tumor tissue and cell culture derived from those tumors are better designated than immunoexpression tests and higher the concentration of doxorubicin, lower the cell viability
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Desenvolvimento do cultivo 3D a partir de células primarias de neoplasias mamárias caninas: estudo da apoptose sobre efeito ou não da carboplatina

Silva, Daniela Stockmann [UNESP] 08 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-08. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:18:27Z : No. of bitstreams: 1 000850082.pdf: 818616 bytes, checksum: 3fd2568d0eccab7527d2da8ab5c61b6f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Em medicina veterinária, os tumores mamários de cadelas possuem alta casuística e o seu prognóstico, em muitos casos, já desfavorável. Dessa forma, é imperioso desenvolver formas eficientes para estudar o comportamento dessa neoplasia, utilizando cultivos celulares para aplicação de testes quimioterápicos associados à expressão de indutores da apoptose. Assim o objetivo desse estudo foi realizar o cultivo, em 3D, de tumores mamários, mimetizando o ambiente tumoral in vivo, em substituição aos testes experimentais com animais e cobaias de laboratório. Adicionalmente, pretendeuse analisar a expressão das proteínas caspase 2, 3, 8, 9, Bcl-2 e Bax em células após o tratamento com carboplatina (dose 1,25μM), e a p53 em cultivo monocamada em células de baixa e alta passagem (20 até 58, respectivamente). O cultivo em 3D demonstrou ser uma boa ferramenta para o estudo in vitro. Os esferoides formados diminuíram de tamanho após tratamento com carboplatina. A expressão de Bcl-2, em duas amostras, indicou resistência à carboplatina em dois tipos histológicos (carcinoma solido e carcinoma espinocelular). As caspases 2 e 3 não foram expressas em amostras tratadas, indicando que a carboplatina não causa morte celular pela apoptose. A p53 foi marcada no núcleo e no citoplasma, indicando anormalidade nessa proteína, que pode estar associada à progressão maligna em neoplasias. Todos os ensaios desenvolvidos no cultivo 3D mostraram que é possível, com essa técnica, aprofundar os estudos sobre as neoplasias mamárias em cães, podendo contribuir para novas descobertas referente ao prognóstico e novos tratamentos / In Veterinary Medicine canine mammary tumors have high casuistry and in many cases bad prognosis the prognosis is bad. Thus it is imperative to develop efficient ways to study the behavior of this tumor using tissue culture tests for applying chemotherapeutic associated with expression inducers of apoptosis. The aim of this study was to grow cells of breast tumors in 3D culture where can mimic the environment in vivo. Additionally, analyze the expression of the caspase protein 2, 3, 8, 9, Bcl-2 and Bax and cells after treatment with carboplatin (dose 1.25 mM). Thus, analyse of p53 cells in monolayer culture in high-pass (up to 58 passages) and low-pass (up to 20 passages). The spheroids formed decreased in size after treatment with carboplatin. The expression of Bcl- 2 in both samples showed resistance to carboplatin in two histological types (solid carcinoma and squamous cell carcinoma). The caspase 2 and 3 not expressed in treated samples indicating that carboplatin does not cause cell death by apoptosis. P53 showed cytoplasmic and in the nucleus, indicating that abnormal protein may be associated with malignant progression in cancer. All assays developed in 3D culture showed that it is possible with this technique, further studies on mammary tumors in dogs that can contribute on new discoveries regarding the prognosis and treatments / FAPESP: 2011/613-7
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Expressão gênica diferencial em resposta aos efeitos da proteína anti-inflamatória Anexina A1 nas células epiteliais pigmentadas da retina humana

Cardin, Laila Toniol [UNESP] 25 February 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:33:16Z : No. of bitstreams: 1 cardin_lt_me_sjrp_parcial.pdf: 176602 bytes, checksum: ff28363703d8dd3bbc92fef1981922c5 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-01T12:51:15Z: cardin_lt_me_sjrp_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-04-01T12:51:49Z : No. of bitstreams: 1 000714251.pdf: 1224592 bytes, checksum: b3e0c7d1422ace17fba65af406dd3879 (MD5) / INTRODUÇÃO: A inflamação é caracterizada pelo acúmulo de leucócitos nos tecidos oculares, podendo afetar qualquer parte do olho, sendo um processo doloroso, associado à fotofobia e podendo resultar em complicações secundárias. Em geral, no tratamento dessas inflamações intra-oculares, os glicocorticóides são os medicamentos freqüentemente administrados. Porém, devido aos efeitos adversos, existe uma demanda óbvia para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Entre elas, a proteína anexina A1 (ANXA1) tem mostrado a sua participação ativa nos processos inflamatórios. OBJETIVO: Em função desses dados, foi realizado o presente trabalho que teve como objetivo geral avaliar a influência desse tratamento anti-inflamatório nas células epiteliais pigmentadas da retina humana (ARPE-19), sobre a morfologia, proliferação, migração e na expressão gênica e proteica. MATERIAL E MÉTODOS: As células ARPE-19 foram cultivadas em meio completo e estimuladas pelo Lipopolissacarideo bacteriano (LPS), e em outro experimento foi acrescentado o tratamento com o peptídeo ANXA1 Ac2-26 , para avaliar o possível efeito anti-inflamatório dessa proteína, nos tempos de 1, 2, 4, 24, 48 e 72 horas sobre a morfologia, proliferação e migração celular. Após análises estatísticas, que evidenciaram o tempo de 72 horas, foi realizado um novo cultivo celular para a extração do RNA e conduzida a técnica de Hibridização Subtrativa Rápida (RaSH). A validação de cinco genes encontrados como diferencialmente expressos foi realizada por RT-qPCR. Além dessas técnicas, também foi analisada a expressão das citocinas anti e pró-inflamatórias pelo ensaio Multiplex. RESULTADOS: O ANXA1Ac2-26 não modificou a morfologia das células ARPE-19, entretanto diminui a proliferação e aumenta a migração celular. Pela tecnologia de... / INTRODUCTION: The inflammation is characterized by the accumulation of leukocytes in ocular tissues, and it can affect any part of the eye, been a painful process, associated with photophobia and may result in secondary complications. In general, for the treatment of these intraocular inflammations, the glucocorticoids are the drugs frequently administered. However, due to its side effects, there is an obvious demand for developing new therapeutic strategies. Among them, the protein annexin A1 (ANXA1) has shown its active participation in inflammatory processes. AIM: In the present study we investigated the influence of anti-inflammatory treatment in human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19), on the morphology, proliferation, migration and gene and protein expression. MATERIALS AND METHODS: The ARPE-19 cells were cultured in complete medium and stimulated by bacterial lipopolysaccharide (LPS), and in another experiment was added treatment with ANXA1Ac2-26 peptide, to evaluate the possible anti- inflammatory effects of this protein, in 1, 2, 4, 24, 48 and 72 hours on the morphology, cell proliferation and migration. After statistical analyzes, which demonstrated that the time 72 hours is the best, was performed a new culture bottles for RNA extraction technique and conducted the Rapid Subtractive Hybridization (RaSH). The validation of five genes founded differentially expressed was done by RT-qPCR. In addition to these techniques was also analyzed the expression of anti and pro-inflammatory cytokines by Multiplex assay. RESULTS: The ANXA1Ac2-26 did not alter the morphology of the ARPE- 19 cells, however decreased proliferation and increased cell migration. After statistical analysis, it was evident that the time of 72 hours was the best to proceed with the methodology. By RaSH technology... (Complete abstract click electronic access below)
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Embriogênese somática e transformação genética de soja via biobalística

Santos, Roberta Borges dos [UNESP] 22 June 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-22Bitstream added on 2014-06-13T19:33:23Z : No. of bitstreams: 1 santos_rb_me_jabo.pdf: 1467164 bytes, checksum: 5cce9136001027d260fc80ff1c5229f4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os objetivos do presente trabalho foram (i) identificar uma cultivar de soja (Glycine max) com melhor resposta in vitro para indução de calos e regeneração; (ii) otimizar o processo de transformação genética via biobalística em embriões oriundos de cotilédone maduros de soja. Os experimentos de indução de calos e transformação genética foram realizados com as cultivares IAS-5, BR16 e MSOY6101. Para indução de calos foram utilizadas altas doses de auxinas [5 mg/L 2,4D (2,4-diclorofenoxiacético- 2,4D), 5 mg/L 2ip (2-isopenteniladenina) e 10 mg/L ANA (ácido-naftalenacético)] e para regeneração de 0 a 2 mg/L de BAP (6-benzylaminopurine), adicionando-se 0,5 mg/L de ANA em todos os tratamentos. Vários parâmetros foram testados na transformação: concentração do tungstênio; BAP (0 a 5 mg/L) no co-cultivo e a concentração de canamicina para seleção de plantas. A construção utilizada foi constituída pelo vetor pCAMBIA 2301, contendo o gene repórter GUS, regulado pelo promotor constitutivo 35SCaMV e adição do gene de seleção NPTII que confere resistência a canamicina. Foram observadas diferenças para a indução e regeneração via embriogênese somática entre as cultivares de soja, resultando na seleção da cultivar 'IAS-5' para avaliação do potencial embriogênico quanto à diferenciação e regeneração de plantas. Essa cultivar apresentou alta taxa de indução, proliferação e regeneração estável. Os resultados mostraram que a adição de 0,5 mg/L de BAP ao meio de regeneração e 5 mg/L de 2,4D ao meio de indução aumentaram as taxas de diferenciação dos embriões de 0 para 27,77%. A partir dos resultados observados na transformação genética em N. benthamiana, adotou-se 24 mg/μL de tungstênio por membrana para as três cultivares de soja. Para regeneração em embrião maduro de soja o melhor resultado... / The present work aimed to (i) identify the best soybean (Glycine max) cultivar for in vitro response for callus induction and plant regeneration; (ii) optimize genetic transformation of soybean mature cotyledon embryo via biobalistic. The callus induction and genetic transformation experiments were performed using IAS- 5, BR16 and MSOY6101 soybean cultivars. High auxin levels (5 mg/L 2,4- diclorofenoxiacetic, 5 mg/L 2-isopenteniladenine and 10 mg/L acid-naftalenacetic) were used for callus induction and to regeneration, adding 0,5 mg/L of acid-naftalenacetic and 0 to 2 mg/L of 6-benzylaminopurine (BAP), in all the treatments of regeneration. The following parameters were tested in order to optimize the transformation: tungsten concentration; BAP concentration (0 to 5 mg/L) in the co-cultivation medium and Kanamycin concentration in the selection medium. The genetic construction used was comprised of pCAMBIA2301 vector, containing gusA gene reporter, under the regulation of 35SCaMV constitutive promoter and NPTII selection gene that provides resistance to Kanamycin. Some differences were observed at the induction and regeneration of somatic embryogenesis among the three cultivars and only IAS-5 cultivar was selected for the assessment of embryogenic potential regarding plant differentiation and regeneration. This cultivar presented high level of callus induction, stable proliferation and stable regeneration. The results showed that the addition of 5 mg/L of 2,4D to the induction medium and 0,5 mg/L of BAP to the regeneration medium increased the levels of differentiation of the IAS-5 soybean embryos from 0 to 27,77%. Based on the results observed in the genetic transformation in N. benthamiana, 24 mg/μL of tungsten per membrane is now being used in the bombardment for the three soybean cultivars... (Complete abstract click electronic access below)
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Potencial morfogenético e carotenóides em tecidos cultivados in vitro de Pothomorphe umbellata L

Borda Yepez, Charlotte Cesty [UNESP] 23 June 2003 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-06-23Bitstream added on 2014-06-13T20:23:47Z : No. of bitstreams: 1 bordayepez_cc_me_botfca.pdf: 605083 bytes, checksum: 56a87160ec1d63940d534d9e6a51cff7 (MD5) / O presente trabalho teve como objetivo estabelecer o protocolo de desinfestação de estacas e sernentes e germinação de Pothomorphe umbeilata (L) e adaptar o protocolo de micropropagação de Pothomorphe umbeilata (L), incluindo a produção de calos e organogênese, além de comparar o teor de carotenóides entre calos e plântulas. O experimento foi conduzido no Laboratório de Biotecnologia Vegetal do Departamento de Química e Bioquímica, do Instituto de Biociências da UNESP - Botucatu, SP e o material vegetal (sementes e estacas) foi obtido no município de Adrianópolis-PR. Semente germinadas de P. umbeilata foram inoculadas em diferentes concentrações de BAP (0,5 mg.L ; 1,0 mgL ; 1,5 mg.L) e NAA (0,4 mg.L 0,6 mg.L ; 0,6 mg.L ) respectivamente, visando estimular a produção de calos e dosar o carotenóides. Após 60 dias do cultivo, os calos contendo algumas brotações, foram transferidos para meio de diferenciação das plântulas (GA3 0,1 mg.L , BAP 0,5 mgL ) por um período de 40 dias, para logo serem transferidos para meio de diferenciação de plântulas. Calos (coletados aos 60 dias) e plântulas (coletadas aos 140 dias) foram congelados em nitrogênio líquido e mantidos em freezer a 80°C para posteriores análises de carotenóides. O melhor tratamento para a produção de calos e formação de gemas foi NAA 0.6 mgL em combinação com BAP 10 mg.L . Nas plântulas sem adição de reguladores vegetais foi encontrada uma maior concentração de carotenõides, em comparação aos calos. / The present research aimed at establishing a protocol of stalks and seed desinfectation, and seed germination of Pothomorphe umbeilata (L.). A protocol of micropropagation including the induction of callus formation and organogenesis was adapted. Besides, it was compared the carotenoids quantity between Porhomorphe umbeliata calius and plantlets. This experiment was carried out iii Biotechnology Vegetal Laboratory of the Chernistr and Biochemistry Department at the Instituto de Biociências of Universidade Estadual Paulista, Botucatu campus. The vegetal matenal (seed and stalks) was obtained from Adranópolis - PR. Pothomorphe umbeilata germinated seeds were inoculated in different concentrations of BAP (0,5 mg.L-l; 1,0 mg.L.-l; 1,5 mg.L-l) and NAA (0,4 mg.L-l; 0,6 mg.L-1; 0,6 mg.L-l) respectively, in order to stimulate calius induction and increase quantity of earotenoids. Afler 60 days, calius which contained shoots were inoculated in plantlets diferenciation medium GA3 0,1 mg.L4, BAP 0,5 mg.U ) during 40 days and transferred to plantlets growth medium. Plantlets were acclimatized Calius collected after 60 days and plantlets were collected afier 140 days. There were frozen in liquid nitrogen and maintained in freezer 80°C to be used in further carotenoids test. The best treatment for callus production and shoots elongation was NAA 0.6 mg.L in association with BAP 1.0 mg.L . The higher carotenoids coneentration was in plantlets without growth regulators, compared with calius.
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Osteogênese in vitro em amostras de titânio com diferente porosidades

Nascimento, Rodrigo Dias [UNESP] 27 April 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-27Bitstream added on 2014-06-13T20:05:14Z : No. of bitstreams: 1 nascimento_rd_dr_sjc.pdf: 665145 bytes, checksum: eb26b18d83008dbc3f700ae579c575a4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Alterações nas propriedades físicas e químicas na superfície do titânio (Ti) buscam acelerar e melhorar a osseointegração. Além disso, a criação de substratos porosos, além de beneficiar fenômenos celulares, propiciaria uma maior resistência mecânica na interface osseointegrada devido ao crescimento de tecido ósseo para o interior dos poros. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da porosidade de amostras de Ti na osteogênese in vitro em amostras de titânio. Foram confeccionadas por metalurgia do pó, discos de titânio puro grau 2 com 12 mm de diâmetro e 3 mm de altura, que foram divididos em três grupos: a) G1: controle - titânio denso; b) G2: 30% de porosidade e poros com 300 μm; c) G3: 40% de porosidade e poros com 300 μm. Inicialmente, a superfície de 03 espécimes de cada grupo foi caracterizada por meio de analise metalográfica, visando confirmar a quantidade, área, morfologia e interligação dos poros. Para a realização da pesquisa, células osteogênicas obtidas da calvária de ratos recém-nascidos foram cultivadas sobre as amostras de cada grupo e avaliadas quanto à adesão celular, após 24 horas, proliferação e viabilidade celular, após 7, 10 e 14 dias. A diferenciação celular foi avaliada através da mensuração do conteúdo de proteína total, atividade da fosfatase alcalina e formação de matriz nodular mineralizada nos períodos de 7, 10 e 14 dias. Os resultados obtidos com os testes ANOVA e Tukey (5%) indicaram que houve adesão celular em todas as superfícies e que esta não interferiu nos resultados. As superfícies porosas (G2 e G3) favoreceram a proliferação celular quando comparadas as superfícies densas. O conteúdo de proteína total e a formação de matriz mineralizada foram significantemente maiores nas amostras de G3. Entretanto, não houve diferença estatística nos valores da atividade da fosfatase alcalina... / Changes in physical and chemical properties on the surface of titanium seek to accelerate and improve osseointegration. Furthermore, the creation of porous substrates, provide greater strength in the osseointegrated interface due to the bone ingrowth. The aim of this study was to evaluate the influence of porosity on osteogenesis in vitro in samples of titanium. Were made by the powder metallurgy, discs of pure titanium grade 2 with 12 mm diameter and 3 mm in height, which were divided into three groups: a) G1: control - titanium machined b) G2: 30% porosity and pore with 300 μm c) G3: 40% of porosity and pore size of 300 μm. Initially, the area of 03 specimens of each group was characterized by metallography analysis, to confirm the quantity, area, shape and interconnection of pores. To conduct the study, osteogenic cells derived from calvaria of newborn rats were cultured on the samples of each group and evaluated for adhesion, after 24 hours, proliferation and cell viability after 3, 7 and 10 days. The cell differentiation was assessed by measuring the total protein content, alkaline phosphatase activity and bone-like nodule formation at 7, 10 and 14 days. The results obtained with ANOVA and Tukey tests (5%) indicated that there was cell adhesion on all surfaces and it does not interfere in the results. The porous surfaces (G2 and G3) provide better results in cell proliferation when compared to smooth surfaces. The content of total protein and the formation of bonelike nodules were significantly higher in samples from G3. However, there was no statistical difference in the values of alkaline phosphatase activity between the experimental groups. These results suggest a correlation between the surface topography of the samples and the phenomena of adherence, proliferation and cell differentiation.
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Germinação “in vitro” de grãos de pólen de bacuri (Platonia insignis Mart.) – Clusiaceae

Sinimbú Neto, Francisco de Assis [UNESP] 27 May 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-27Bitstream added on 2014-06-13T20:25:30Z : No. of bitstreams: 1 sinimbuneto_fa_dr_jabo.pdf: 1254027 bytes, checksum: c24ee888986c7eaef05caa5e9f93c121 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O bacurizeiro (Platonia insignis Mart.) é uma frutífera nativa da Amazônia que apresenta alogamia acentuada e auto-incompatibilidade esporofítica. O objetivo desse trabalho foi estudar a germinação de pólens de bacuri por admitir-se tratar de uma técnica semelhante ao comportamento germinativo “in vivo”. A viabilidade “in vitro” tem sido utilizada para representar a capacidade potencial do pólen para completar o processo de fertilização. Os ensaios foram conduzidos em condições de laboratório em um delineamento inteiramente casualizado, analisados em esquema fatorial 2 x 3 x 4, onde: 2- formas de propagação (pé-franco e enxertada) X 3-estágios da antese (préantese, antese e pós-antese) X 4-concentrações de sacarose (0%; 7,5%; 10 e 20%), com 10 repetições. Para plantas de bacuri estudadas, há diferença de germinação do pólen, sendo que para polinização manual, o pólen deve ser coletado na antese, enquanto que o melhor meio para germinação é com 7,5 g 100 mL-1 de sacarose / The “bacurizeiro” (Platonia insignis Mart.) is an Amazon fruitful native tree that has marked allogamy and self-sporophytic incompatibility. The aim of this work was to study the pollen germination of “bacuri” to admit it is a similar technique to the germination behavior “in vivo”. The viability in vitro has been used to represent the potential ability of pollen to complete the fertilization process. The tests were conducted under laboratory conditions in a completely randomized design, tested in a 2 x 3 x 4 factorial, where: 2- plant forms (grafted and freestanding) X 3- pollen stage (pre-anthesis , anthesis and post anthesis) X-4 sucrose concentrations (0%, 7.5%, 10 and 20%), with 10 repetitions. For each bacurizeiro plant studied, there is difference in pollen germination, and for hand pollination, pollen should be collected at anthesis, while the best medium for germination is with 7,5 g 100 mL-1 of sucrose

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