Submitted by Luiz Felipe Barbosa (luiz.fbabreu2@ufpe.br) on 2015-04-17T13:58:12Z No. of bitstreams: 2 Tese Ana Paula da Costa.pdf: 11703201 bytes, checksum: 21beb28c4cce405340195e0c8ba78a09 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T13:58:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese Ana Paula da Costa.pdf: 11703201 bytes, checksum: 21beb28c4cce405340195e0c8ba78a09 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / FACEPE / Listeria monocytogenes é um bacilo gram-positivo, intracelular facultativo, transmitido por alimentos, que pode causar doença, a listeriose, em indivíduos susceptíveis. Embora rara, a listeriose tem grande importância para a saúde pública pela sua alta letalidade. Este trabalho teve como objetivo, identificar marcadores moleculares para utilização no desenvolvimento de nova técnica de diagnóstico molecular da listeriose. Os estudos envolveram sorotipagem, tipagem molecular pela amplificação das sequências 23S, 16S-23S e RAPD, pesquisa de plasmídios e de genes de virulência (inlA, inlB, inlC, inlJ, hly, iap, plcA, actA) em 135 cepas de L. monocytogenes de casos humanos e alimentos isoladas no Brasil no período de 1975 a 2001; infecção experimental em camundongos com cepas portando ausência ou alterações em genes de virulência; e a caracterização de isolados de um caso de endocardite atendido numa unidade de emergência cardiológica em Recife, PE, em 2010. Nenhuma relação foi encontrada entre a origem das cepas, sorotipos, perfis genéticos, conteúdo plasmidial e distribuição dos genes de virulência. Os ensaios de infecção experimental em camundongos também não permitiram estabelecer uma relação entre a presença dos marcadores de virulência considerados no estudo e as respostas dos animais inoculados. Seis isolados de hemocultura de um caso de endocardite com identificação presuntiva de Listeria spp. foram classificados como L. monocytogenes sorotipo 4b pela amplificação por PCR dos genes 23S, lmo2243 e ORF2210 específicos do gênero Listeria, espécie L. monocytogenes e sorotipo b respectivamente. Todos os genes de virulência pesquisados foram detectados por PCR nas amostras e a análise do perfil de amplificação da sequência 16S-23S revelou que os seis isolados são uma mesma cepa. Embora esses estudos não tenham revelado nenhum marcador molecular de patogenicidade, a alta frequência de genes de virulência observada entre cepas dos sorotipos mais patogênicos (1/2a, 1/2b, 4b) evidencia o potencial patogênico nas cepas brasileiras de L. monocytogenes e a necessidade de incrementar a vigilância e diagnóstico dessa bactéria. Considerando a prevalência dos sorotipos 1/2a, 4b nas amostras clinicas e dos sorotipos 1/2a, 1/2b, 4b em alimentos, desenvolvemos e padronizamos um procedimento baseado em LAMP (loop-mediated isothermal amplification) para identificação desses sorotipos. A técnica é rápida e de fácil operacionalização, utiliza um bloco de aquecimento ou banho-maria e o produto da reação pode ser visualizado a olho nu mediante adição de reagentes fluorescentes. O procedimento padronizado mostrou-se sensível, capaz de detectar 100pg de DNA ou 104 UFC, e espécie - específica, capaz de diferenciar L. monocytogenes de espécies intimamente relacionadas geneticamente. Outros sorotipos intimamente relacionados (3a, 3b, 4e e 4d) foram amplificados sem detrimento da técnica porque são raramente encontrados em amostras humanas e animais. A técnica LAMP se apresenta como uma alternativa fácil e rápida para diagnóstico e tipagem de L. monocytogenes especialmente para os programas de vigilância e investigação epidemiológica.

Submitted by Luiza Maria Pereira de Oliveira (luiza.oliveira@ufpe.br) on 2015-05-15T15:59:14Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciana Cardoso Martins Arraes.pdf: 783986 bytes, checksum: da46743dd6cc6e41669c6c1f2bf0e0e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-15T15:59:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Luciana Cardoso Martins Arraes.pdf: 783986 bytes, checksum: da46743dd6cc6e41669c6c1f2bf0e0e9 (MD5) Previous issue date: 2014-12-02 / Na fase primária da infecção pelo HIV, o vírus penetra no Sistema Nervoso Central (SNC) e estabelece um reservatório viral protegido. A infecção crônica do SNC pode levar a complicações neurodegenerativas com a possibilidade de gerar transtornos da função cognitiva e déficits dos processos mentais, tais como atenção, aprendizado, memória, rapidez do processamento de informações, capacidade de resolução de problemas e sintomas sensoriais e motores. O Distúrbio Neurocognitivo Associados ao HIV (HAND) tem merecido atenção devido ao potencial em determinar impacto funcional desfavorável na vida das pessoas vivendo com HIV (PVHIV), como dificuldade na execução das atividades da vida diária e necessidade de assistência para garantir adesão às medicações. Além disso, os pacientes apresentam dificuldade em manter seus empregos, necessitando de uma melhor assistência social. O diagnóstico clínico do HAND é idealmente baseado no desempenho dos testes neuropsicológicos. Entretanto, a aplicação destes testes é impraticável em muitos cenários clínicos, principalmente em países subdesenvolvidos. A Escala Internacional de Demência pelo HIV (IHDS) é um teste de triagem rápido, validado para a população brasileira que, de acordo com o ponto de corte estabelecido, pode detectar todas as formas do HAND (assintomática, leve e demência). Realizamos um estudo transversal, com comparação de grupos, para estimar a freqüência do HAND por meio da IHDS. As variáveis quantitativas foram descritas por meio de média, enquanto que as qualitativas foram representadas por distribuição de freqüência. As associações dos fatores relacionados ao HAND foram testadas utilizando o teste Qui-Quadrado de Pearson. Foram estudadas 98 PVHIV entre 18 e 50 anos, sem outras doenças neurológicas e psiquiátricas, atendidas nos ambulatórios de dois centros de referências para o tratamento do HIV em Recife- PE. Também foram excluídas da pesquisa as pessoas em uso de efavirenz e drogas ilícitas nos 30 dias que antecederam a entrevista. Utilizou-se como critério diagnóstico do HAND um ponto de corte ≥ 11 na IHDS, cuja sensibilidade e especificidade é de 78% e 52%, respectivamente. Encontrou-se uma elevada prevalência (66,7%) do HAND e uma associação entre o distúrbio e as pessoas com mais idade e do sexo feminino. O diagnóstico de depressão e o uso de terapia antirretrovial (TARV) com menor penetração no SNC (CPE < 8) foi mais freqüente entre as mulheres e essa associação foi estatisticamente significante (P = 0,001 e P = 0,028, respectivamente), o que poderia justificar a maior prevalência do HAND no sexo feminino. Esse trabalho alerta para a necessidade de se realizar uma triagem nas PVHIV para o HAND uma vez que parece uma comorbidade frequente, principalmente entre as pessoas com mais idade e do sexo feminino, com a finalidade de auxiliar nas estratégias de melhoria à adesão terapêutica e na oferta de TARV com maior efetividade de penetração no SNC e de medicações psicotrópicas quando necessárias.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2015-05-27T14:42:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_edeneidexavier_2015.pdf: 1276532 bytes, checksum: 0d5ea9ef9662713f64d8399456904db5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-27T14:42:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_edeneidexavier_2015.pdf: 1276532 bytes, checksum: 0d5ea9ef9662713f64d8399456904db5 (MD5) Previous issue date: 2014-12-15 / A leishmaniose visceral (LV) é na atualidade considerada um grave problema em saúde pública no mundo, e quando não tratada rapidamente pode levar a morte. A busca por diagnósticos rápidos e precisos vem sendo cada vez mais alvo de pesquisas. Existe uma variedade de testes para detecção da Leishmania, os quais envolvem os testes sorológicos, parasitológicos e moleculares. Todos apresentam certas limitações, busca por testes rápidos e sensíveis vem sendo cada vez mais estudadas. O teste ELINOR é baseado na utilização de nanopartículas magnéticas fluorescente híbridos, o qual produz um sinal de luminescência, que é facilmente visualizado em microscópio de fluorescência, em baixas concentrações de DNA ou de RNA, sem a necessidade de amplificação do material genético, antes de ser testado. O objetivo desse estudo foi avaliar o desempenho do teste ELINOR, assim como sua sensibilidade e especificidade, frente a alguns testes para o diagnóstico da LV. Foram analisadas um total de 100 amostras (humanos e cães) previamente diagnosticada com LV, e 63 amostras de (humanos e cães) como controle. As amostras de humanas foram submetidas a testes (cultura, IT-Leish, PCR, qPCR) as de cães apenas a PCR, qPCR e em seguida todas submetidas ao teste ELINOR com a utilização das sondas LINF 1b. Os resultados em humanos mostram uma acurácia de 90,2%, sensibilidade de 94,2% e especificidade de 88,3%. Em cães a sensibilidade foi de 79.4%, especificidade de 93.3%, e uma acurácia de 86.5%. Levando-se em consideração todas as amostras (cães + humanos), a sensibilidade foi de 87,3 %, a especificidade 89,8 %, e a acurácia de 88,9%. Comparando esses resultados com os encontrados na literatura, observa-se que tanto a sensibilidade quanto a especificidade do Teste ELINOR são equivalentes a resultados obtidos por outros testes usados para o diagnóstico da LV. Este estudo indica que possivelmente um sistema de diagnóstico rápido baseado na luminescência exacerbada de origem inorgânica/orgânica (“ELINOR”, do acrônimo em inglês) identificada nos compósitos PANI/AuNPs pode ser bastante promissora, tendo em vista que o teste ELINOR detectou de forma rápida e específica a presença de DNA do patógeno em material biológico, revelando-se assim uma boa plataforma para o desenvolvimento de testes moleculares simples e de baixo custo.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5241_1.pdf: 1391958 bytes, checksum: 9f7ccf6aa1b11b65906eaff7ba2deb15 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O câncer do colo do útero é o segundo câncer em número de casos entre as mulheres e o sétimo de maior incidência no mundo com 493 mil novos casos por ano, com uma taxa de mortalidade de 50 a 55%. A estimativa para o Brasil é de 19.260 novos casos para 2006, com um risco estimado de 20,31 casos a cada 100 mil mulheres. No Brasil, assim como nos outros países em desenvolvimento, a freqüência do teste de Papanicolau é baixa e os casos são normalmente diagnosticados em fase avançada. Em todo o mundo o Papillomavirus Humano (HPV), diretamente associado ao câncer do colo do útero, é um problema de saúde pública. A análise do genoma, através da genômica comparativa, dos HPVs de alto e baixo risco pode indicar regiões de grande importância associadas à sua patogenicidade. O presente trabalho propõe uma metodologia capaz de classificar o risco à carcinogenicidade utilizando as seqüências de cinco proteínas, E6, E7, E1, L1 e L2 que estão presente em 78 genomas de HPV disponíveis nos bancos de dados públicos. Utilizando-se dos Modelos Ocultos de Markov (HMM) foram selecionadas 24 regiões nas cinco proteínas. Destas 24 regiões, oito foram escolhidas após aplicação de modelo discriminativo baseado em Máquinas de Vetores de Suporte (SVM) acoplado a um algoritmo genético. Diferentes combinações destas oito regiões produziram um conjunto de classificadores capazes de predizer com 100% de eficiência o tipo de risco do HPV. Esta técnica permitiu determinar regiões de potencial importância na carcinogenicidade do HPV. Tais resultados sugerem regiões gênicas de interesse para o desenvolvimento de um método de diagnóstico da presença do DNA viral, contribuindo na prevenção do câncer do colo do útero

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-18T19:22:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_BRUNO TRAJANO BARBOSA_BIBLIOTECA CENTRAL UFPE.pdf: 2346317 bytes, checksum: f4f55bcf337c3b73228a9b7ff0863cdf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T19:22:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_BRUNO TRAJANO BARBOSA_BIBLIOTECA CENTRAL UFPE.pdf: 2346317 bytes, checksum: f4f55bcf337c3b73228a9b7ff0863cdf (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / CAPES / O câncer de mama é uma das neoplasias com as maiores taxas de morbidade e mortalidade em todo o mundo e a principal causa de mortes por câncer em mulheres. Os objetivos deste trabalho foram: a) avaliar a expressão das proteínas HIF-1α, MGAT5, BRCA1 e BRCA2 em tumores de mama humana diagnosticados como carcinoma ductal invasivo (CDI) utilizando imunohistoquímica; b) avaliar a expressão de Gal-1 e Gal-3 e o glicocódigo em glicoconjugados de superfície celular de tumor mamário diagnosticado como carcinoma mucinosopurousando imunohistoquímica e histoquímica com lectinas (Con A, HPA, PNA e UEA-I), respectivamente; c)avaliar a expressão de BRCA1 e BRCA2 em carcinoma ductal invasivo de mama (CDI) bilateralutilizando imunohistoquímica;d) avaliar a expressão de MUC1, Gal-1 e Gal-3 em tumor de mama humana diagnosticado como carcinoma mucinoso com componente invasivo (CDI) utilizando imunohistoquímica. Os resultados foram; a) HIF-1α apresentou correlação estatística direta com a invasão linfonodal (p=0,036), BRCA2 apresentou uma correlação inversa com o receptor de progesterona (p=0,02), MGAT5, embora com imunomarcação positiva, não apresentou nenhuma correlação significativa comfatores clínico-histopatológico analisado (idade, invasão linfonodal e grau nuclear) nem com os marcadores de rotina no diagnóstico (receptor de estrógeno, receptor de progesterona e HER-2); b) a marcação de Con A e HPA foram positivas para histoquimica com lectinas, a imunohistoquímica foi positiva para Gal-1 e Gal-3. Gal-3 foi tambémpositivapara o estroma associado as células tumorais e ao endotélio vascular; c) a positividade para BRCA1 e BRCA 2 bem como para RE, RP e HER-2 não conferiu um aspecto de proteção quanto a progressão do câncer ecomprometimento linfonodal, d) os marcadores avaliados apresentaram expressão diferenciada nos componentescelulares do tumor: BRCA1 (componente mucinoso), BRCA2 (CDI), MUC1 e Gal-3 (citoplasma e membrana apical das células do carcinoma mucinoso e apenas na membrana apical das células de CDI) e Gal-1 (células estromais associadas ao tumor). Desta forma se conclui que: a) HIF-1α e BRCA2 são capazes de serem correlacionados com parâmetros clínico-histopatológicos da rotina diagnóstica e que seua positividade auxilia na caracterização do carcinoma ductal invasivo; b) apesar de ser caracterizado por um bom prognóstico, o carcinoma mucinoso aqui estudado apresentou características glicobiológicas que indicam a aquisição de um fenótipo agressivo; c) os resultados possibilitam a caracterização dos tumores como Luminal B cujo prognóstico se caracteriza como reservado. Eos biomarcadores avaliados BRCA1 e BRCA2 aliados aos da rotina clínica (RP, RE, HER-2 e Ki-67) possibilitaram um melhor entendimento e correlação dos aspectos clínicos, morfológicos e moleculares do câncer de mama bilateral tendo importância terapêutica, epidemiológica e preditiva; d) os resultados possibilitaram um melhor entendimento e correlação dos aspectos morfológicos e moleculares do carcinoma de mama mucinoso misto (com componente invasivo–CDI) auxiliando o diagnóstico apresentado pelos biomarcadores de rotina clínica (RP, RE, HER-2). / Breast cancer is one of the neoplasms with the highest rates of morbidity and mortality worldwide.The aims of this work were: a) evaluate the protein expression of HIF-1α, MGAT5, BRCA1 and BRCA2 in human mammary tumors diagnosed as invasive ductal carcinoma (CDI) using immunohistochemistry; b) evaluate the expression of Gal-1 and Gal-3 and the glycocode of glycoconjugates of cell surface in a mammary tumor diagnosed as pure mucinous carcinomausing immunohistochemistry and lectin histochemistry (Con A, HPA, PNA and UEA-I), respectively; c) evaluate the expression of BRCA1 and BRCA2 in bilateral invasive ductal carcinoma (IDC) of human breast using immunohistochemistry;d) evaluate the expression of MUC1, Gal-1 andGal-3 in human breast tumor diagnosed as mucinous carcinoma with invasive component (IDC) using immunohistochemistry. Results were: a) HIF-1αpresented a direct correlation with lymph node invasion (p=0.036), BRCA2 presented an inverse correlation to progesterone receptor (p=0.02), MGAT5(positive staining)did notpresentcorrelation with neither the clinic-histopathologic features studied (age, lymph node invasion and nuclear grade)nor routine diagnostic parameters (progesterone and estrogen receptorsand HER-2); b) Con A and HPA staining were positive and immunohistochemistry waspositive for Gal-1and Gal-3. Gal-3 was also positive to tumor cells associated stroma and vascular endothelium; c) BRCA1 and BRCA2 positivity as well as ER, PR and HER-2 positivity, did not conferred a protection to cancer aggressive progress where it was also observed a lymph node invasion; d) the tumor markers evaluated presented a positive differential expression in tumor cell components: BRCA1 in mucinous component, BRCA2in IDC cells, MUC1 and Gal-3 in the cytoplasm and membrane of apical cells of mucinous carcinoma and also exclusively in the membrane of apical cells of IDC, Gal-1 was positive in tumor cells associated to stroma. As conclusions it can be presented that: a) HIF-1αand BRCA2 were correlated to clinic-histopathologic parameters of routine diagnosis ans their positivity helps the characterization of invasive ductal carcinoma; b) despite being characterized by a good prognosis breast carcinoma, the mucinous carcinoma here studied presented glycobiology features that indicate the acquisition of an aggressive phenotype; c) results allowed to characterize both tumors as luminal B type which is a poor prognosis tumor and that the biomarkers evaluated, BRCA1 and 2, together with ER, PR and HER-2 contribute to a better understanding and correlations with clinic, morphologic and molecular aspects of the bilateral carcinoma regarding therapy, epidemiology and predictive informations; d) it was possible to conclude that correlation to morphology and molecular features of breast mucinous carcinoma with invasive component (IDC) helps the diagnosis when in association to routine diagnoses biomarkers (PR, ER, HER-2).

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-17T21:26:24Z No. of bitstreams: 1 TESE Aluizio Gonçalves Brasil Junior.pdf: 9131459 bytes, checksum: 6f52829993bc444f3d7aa2e53d6ff20f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T21:26:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE Aluizio Gonçalves Brasil Junior.pdf: 9131459 bytes, checksum: 6f52829993bc444f3d7aa2e53d6ff20f (MD5) Previous issue date: 2014-08-01 / CAPES / O vírus do dengue (DENV) pertence ao gênero Flavivirus, família Flaviviridae, possuindo RNA genômico de fita simples e apresentando quatro sorotipos antigenicamente relacionados (DENV 1-4). A identificação precoce dos casos de dengue é de vital importância para a tomada de decisões e implementação de medidas de maneira oportuna. No entanto, os métodos de eleição para o diagnóstico das infecções pelos DENV (ensaios imunoenzimáticos de captura de anticorpos das classes IgM e IgG) apesar de possibilitarem a análise rápida e reprodutível, apresentam a limitação da não detecção da enfermidade em sua fase inicial. Tendo por finalidade suplantar essa dificuldade, a obtenção de insumos que possam ser empregados em fluoroimunoensaios de detecção da proteína viral solúvel NS1, apresenta acentuada relevância. Pontos quânticos (PQs) fluorescentes de CdTe foram preparados em água com os estabilizantes, cisteamina (CTM) e ácido mercaptosuccínico (MSA). Os PQs obtidos exibiram elevada fluorescência e estabilidade coloidal, realizando-se a caracterização óptica (emissão/excitação/absorção) e estrutural (DRX/MET). Anticorpos monoclonais anti-NS1 DENV (Mab-anti NS1) específicos para os quatro sorotipos do DENV foram acoplados covalentemente aos PQs, via agentes de acoplamento. Microplacas negras de poliestireno foram previamente sensibilizadas com a proteína viral NS1 nativa, e os bioconjugados obtidos (PQs-Mab anti-NS1) foram utilizados em fluoroimunoensaios de detecção da proteína viral. Os bioconjugados de CdTe/MSA-anti-NS1 DENV para os quatro sorotipos apresentaram resultados promissores nos ensaios de detecção da proteína viral NS1, destacando-se o bioconjugado constituído pelo anticorpo monoclonal anti-NS1 DENV-2. Os bioconjugados foram empregados em ensaios de marcação de células fixadas e não fixadas clone C6/36 infectadas com DENV2, obtendo-se resultados satisfatórios para as células não fixadas. / The dengue virus (DENV) belongs to the Flavivirus gender, Flaviviridae family possessing a single-stranded RNA genome and 4 antigenic related serotypes (DENV1 – 4). The early dengue diagnosis is vital for the efficient medical intervention. The existing diagnostic methods for the DENV infections (immunoenzymatic antibody capture based methods of the IgM and IgG classes) although precise and fast still present limitations related to the diagnosis at early stages of the patology. Aiming the development of new diagnostic products for the immunodetection of the NS1 soluble viral protein is still of great importance. Fluorescent CdTe quantum dots (QDs) were prepared in aqueous medium applying mercaptosuccinic acid (MSA) and cysteamine (CTM) as stabilizing agents and used to produce an immunodiagnostic tool for the DENV detection. The QDs showed high fluorescent yield and great colloidal stability and were characterized by X-ray diffractometry, Electronic transmission microscopy, zeta potential and spectroscopic measurements. Monoclonal anti-NS1 DENV (Mab-anti NS1) antibodies specific for the 4 serotypes were covalently attached to the QDs via coupling agents. Black polystyrene microplates were sensibilized with the viral NS1 native protein and the (QDs-Mab anti-NS1) bioconjugates were applied in immunoassays aiming the detection of the viral protein. The CdTe/MSA-anti-NS1 DENV bioconjugates applied for the four serotypes showed promising results in the detection assays of the viral NS1 protein, being the most efficient the bioconjugate that used the monoclonal anti-NS1 DENV-2. The bioconjugates were used in the staining of fixed and live cells of the clone C6/36 infected with DENV2. The results were satisfactory for the live cells.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-20T19:41:02Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Cybelle Emanuele da Silva.pdf: 2250513 bytes, checksum: 4e34e57e4474ad3663b48e9669c360e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-20T19:41:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Cybelle Emanuele da Silva.pdf: 2250513 bytes, checksum: 4e34e57e4474ad3663b48e9669c360e2 (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / FACEPE / A busca por métodos que possibilitem o diagnóstico mais rápido e eficaz do infarto agudo do miocárdio é preponderante atualmente. Como possibilidade analítica mais atrativa, os imunossensores são uma grande tendência na área cardiológica. Entretanto, para o aperfeiçoamento destes dispositivos, buscam-se continuamente algumas estratégias, tais como o uso de nanomateriais e polímeros condutores com objetivo de obter uma plataforma sensora mais sensível, estável e reprodutível. Neste trabalho, um filme nanoestuturado de nanotubos de carbono e polipirrol foi desenvolvido sobre a superfície de um eletrodo de platina para detecção eletroquímica da troponina T cardíaca humana. O filme de pirrol (0,3M) e nanotubos de carbono (0,1 mg/mL) foram eletropolimerizados através da técnica de cronoamperometria (0,8 V) sobre a superfície sensora. Os grupos carboxílicos reativos do filme foram ativados para imobilização covalente dos anticorpos anti-troponina T. Os sítios livres não reativos foram bloqueados com uma solução de glicina (0,01 M). A técnica de voltametria cíclica em sonda redox foi empregada para caracterização do processo de construção da plataforma sensora. Nos resultados obtidos, a eletrossíntese do pirrol em conjunto com os nanotubos apresentou um aumento significativo na transferência de elétrons. O tempo de polimerização do filme sobre a interface do eletrodo foi otimizado quando o ensaio croamperométrico foi programado para 80 s no potencial de 0,8 V. O filme de pirrol e nanotubos apresentou uma boa estabilidade eletroquímica, com coeficientes de variação para os picos redox ≤ 5%. Uma vez confirmada à viabilidade do filme, ensaios para otimização da concentração do anticorpo imobilizado, tempo de imunoreação e transferência de carga foram realizados. Uma curva de calibração foi obtida para quantificação livre de marcação da troponina T em amostras limpas, utilizando a técnica de voltametria de pulso diferencial. O imunossensor alcançou uma boa linearidade (r=0,94; p<0,0001) com erro relativo menor do que 1%, apresentando um limite de detecção de 0,006 ng/mL para cTnT. Com a metodologia proposta foi possível desenvolver um filme nanoestruturado em uma única etapa de síntese para determinação da troponina T humana em níveis de importância clínica. / The search for methods that allow the fast and effective diagnosis of acute myocardial infarction is currently preponderant. As a more attractive analytical possibility, the immunosensors are a big trend in the field of cardiology. However, for the improvement of these devices, the search for some strategies such as the use of nanomaterials and conducting polymers is continuous in order to obtain a more sensitive, stable and reproducible sensor platform. In this work, a nanostructured film of carbon nanotubes and polypyrrole was developed on the surface of a platinum electrode for electrochemical detection of human cardiac troponin T. The pyrrole film (0.3M) and carbon nanotubes (0.1 mg/mL) were electropolymerized using the chronoamperometry technique (0.8 V) on the sensor surface. The reactive carboxylic groups of the film were activated for the covalent immobilization of anti-troponin T. The non-reactive free sites were blocked with a solution of glycine (0.01 M). The cyclic voltammetry technique in redox probe was used to characterize the process of construction of the sensor platform. In the results, the electrosynthesis of pyrrole in conjunction with the nanotubes had a increase in the electron transfer. The film’s polymerization time over the electrode interface was optimized when the chronoamperometric test was set to 80 s in the potential of 0.8 V. The pyrrole and nanotube film exhibited good electrochemical stability, with variation coefficients for the redox peaks ≤ 5%. Once confirmed the viability of the film, testing for optimization of the immobilized antibody concentration, immunoreaction time and charge transfer were performed. A calibration curve was obtained for quantification of the marking free troponin T in clean samples, using the technique of voltammetry differential pulse. The immunosensor achieved a good linearity (r = 0.94, p <0.0001) with less than 1% relative errors, presenting a detection limit of 0.006 ng/mL for cTnT. With the proposed methodology has been possible to develop a nanostructured film in a one-step synthesis for determination of human cardiac troponin T at clinical importance levels.

Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_7280_Julia Assis Pinheiro.pdf: 31553 bytes, checksum: 448a27d7cb01aae2bde508e8512df522 (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / O presente projeto pretende avaliar a proteção de duas diferentes vacinas comercialmente disponíveis para proteção contra leishmaniose visceral na proteção contra leishmaniose tegumentar americana (LTA) em cães de município endêmico para enfermidade. Para tanto, serão selecionados pela técnica sorológica de ELISA 70 cães soronegativos para LTA (1,0% da população canina) no município de Íuna, Espírito Santo, sendo posteriormente divididos em dois grupos de igual número e vacinados com três doses segundo orientação dos fabricantes (Leishmune®;FORT DODGE Saúde Animal Ltda / Leish-Tec®;Hertape Calier Saúde Animal S.A.). Semestralmente, estes animais serão monitorados clinicamente e sorologicamente para verificar proteção contra desenvolvimento de LTA. Espera-se que ambas vacinas protejam significativamente os cães vacinados frente a infecção para Leishmania (Viannia) braziliensis.

Orientadores: Jesse de Paula Neves Jorge, Jose Guilherme Cecatti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T00:40:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_OrlandoJosede_M.pdf: 454433 bytes, checksum: e51ed294948e0a48779cb54991cf071f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: As doenças da mama, principalmente o câncer, são freqüentes em nosso meio e por esse motivo deve-se realizar o diagnóstico diferencial dos nódulos mamários, utilizando métodos simples e de baixo custo. O teste tríplice, composto do exame clínico, mamografia e punção aspirativa por agulha fina conjuntamente, parece preencher esses requisitos. Assim realizou-se um estudo prospectivo do diagnóstico diferencial de nódulos mamários palpáveis em 102 mulheres a partir dos 30 anos de idade, com análise da sensibilidade, especificidade e valores preditivos do teste tríplice e dos exames isolados (exame clínico, mamografia e punção aspirativa por agulha fina). Em todas as situações o padrão-ouro foi o exame anatomopatológico. O teste tríplice apresentou sensibilidade de 90% e especificidade de 100%. Entre os testes isolados, o exame clínico teve sensibilidade de 93% e especificidade de 94%, a mamografia 96% e 69% e a punção aspirativa por agulha fina de 97% e 87%, respectivamente, com o melhor desempenho. Na avaliação da combinação de dois testes, a melhor foi o exame clínico mais a punção, com sensibilidade de 100% e especificidade de 87%. Os resultados sugerem a necessidade de sistematização de condutas terapêuticas em doenças malignas e benignas / Abstract: Breast diseases, mainly breast cancer, are frequent. For this reason, differential diagnosis of breast nodes should be made using simple and low cost methods. The triple test, which is an association of a physical examination, a mammography and a fine needle aspiration biopsy, jointly seems to fill these requirements. A prospective study on differential diagnosis of palpable breast nodes, in 102 women aged 30 years and above, was performed. There was an estimation of sensitivity, specificity and predictive values for the triple test, and for each isolated test (physical examination, mammography and fine needle aspiration biopsy). In all cases, the histologic examination of the lesions was the gold standard. Sensitivity of the triple test was 90% and specificity was 100%. Among isolated tests, the sensitivity for physical examination was 93%, and the specificity was 94%, mammography was 96% and 69%, and fine needle aspiration biopsy was 97% and 87%, respectively; being that the last presented the best performance. When evaluating combinations of two specific tests, the best combination was a physical examination plus a fine needle aspiration biopsy, which the sensitivity was 100%, and the specificity was 87%. These results suggested the need for systematic standard treatment for benign and malign palpable breast nodes / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Orientador : Jayme Antunes Maciel Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T22:17:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melhado_ElianaMeire_M.pdf: 6007156 bytes, checksum: 8c1eee249f18908ce96bde6862083ff5 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O objetivo do traballio foi realizar estudo epidemiológico de cefaléia em serviço de atenção primária. Foram avaliados o comportamento do paciente quanto ao sintoma cefaléia, o comportamento do médico diante do distúrbio cefaléia, a apreciação da acurácia diagnóstica e a adequação do tratamento proposto. Utilizou-se o método da entrevista face a face, orientada por questionário, realizada por um mesmo neurologista com treinamento em cefaléia. A amostra constou de pacientes atendidos em ambulatório geral de empresa privada, em pronto-socorro e em consultório privado. Foram estudados 1234 pacientes [43,52% do sexo feminino e 56,48% do sexo masculino]. A maioria deles encontrava-se entre 16 e 45 anos de idade (78,12%). A prevalência de cefaléia foi de 93,84%, predominando no sexo feminino (96,65%). Em relação ao comportamento do paciente, a maioria (56,74%) não procurou atenção médica para cefaléia. A mulher procurou mais freqüentemente (57,09%) os serviços médicos. A maioria dos pacientes consultou 01 (47,31 %) e 02 (20,96%) médicos para cefaléia. Os tipos de atendimentos médicos mais procurados foram o de clínica geral (44,52%) e o de neurologia ou de neurocirurgia (27,95%). A auto-medicação para alívio da dor de cabeça foi utilizada por 83,72% dos pacientes, predominando no sexo feminino. A média de duração do sintoma foi de 12,2 :tIO,3 anos. A média de tempo levado pelo paciente para procurar o médico foi de 4,8:t6,9 anos. Quanto ao comportamento do médico, observou-se que o diagnóstico mais realizado nas consultas iniciais para cefaléia foi o de sinusopatia (33,93%). A migrânea foi diagnosticada em 17,37%, predominando no sexo feminino (72,41 %). A cefaléia não foi diagnosticada em 15,97% dos pacientes. Os médicos não solicitaram investigação complementar para 52,30% dos pacientes. Quando o fizeram, o EEG (38,08%) seguido do Rx de crânio ou seios da face (22,59%) foram os mais fteqüentes, em especial no sexo feminino. O tratamento mais recomendado foi do tipo abortivo (34,81 %) em comparação ao tratamento profilático (6,65%). A classificação das cefaléias, segundo a SI C, mostra que, no grupo que procurou médico para cefaléia, predominou migrânea (53,89%), seguida da associação de migrânea e sinusopatia (16,77%); no grupo que não procurou médico, predominou migrânea (48,40%), seguida de outros tipos de cefaléias (29,98%). Os resultados deste estudo epidemiológico prospectivo mostram que a maioria dos pacientes não procura assistência médica para cefaléia. Quando o fazem, a muJher procura o médico com mais fteqüência. O atendimento mais procurado é o de clínica geral. O diagnóstico inicial mais constante. é de sinusopatia como causa de cef8J.éia. A migrânea é subdiagnosticada. A maioria dos médicos não solicita exame complementar para cefaléia. A estratégia terapêutica, em geral, resume-se ao tratamento da crise aguda. Quando revisados pelo neurologista, com treinamento em cefaléia, o diagnóstico de migrânea, segundo a SIC, é o mais fteqüente em ambos os grupos de pacientes (que procuraram e que não procuraram atendimento médico para cefaléia) / Abstract: The objective of this paper was to conduct an epiderniological study in primary care service and evaluate the patient' s behavior as regards the cephala1gia symptom, the doctor's behavior in face of the disorder, assessment of the diagnosis accuracy and the adequacy of the proposed treatment. The method used was an interview with the patients guided by a questionnaire, applied by the same neurologist with headache management training. The sample was composed of patients assisted at the general clinic of a private company, emergency room and a doctor's office. A thousand two hundred and thirty four patients were studied [43,52% female and 56,48% male]. Most ofthem were between 16 and 45 years old (78,12%). Headache prevalence was 93,84%, with greater female prevalence (96,65%). As regards patient behavior, most ofthem (56,74%) did not seek medical care for headaches. Women sought medical services for headache more frequent1y (57,09%). Most patients sought 1 (47,31 %) and 2 (20,96%) doctors for headache. The types of medical care more frequent1y looked for were the general clinic (44,52%) and neurology or neurosurgery (27,9~%). Over-the-counter headache-relief drugs were used by 83,72% of the patients, ithpredominance ofthe female sexo The average ofthe headache symptom duration was 12.2+/-10.3 years. The average time for the patient to 100k for a doctor and headache treatment was 4.8+/-6.9 years. As regards the doctor's behavior, the more frequent initial diagnosis was sinus headache (33.93%). Migraine was diagnosed in 17.37%, with predorninance of the female sex (72.41%). The headache was not diagnosed in 15.97% ofthe patients. The doctors didn't request supplementary headache investigation in 52.30% of the patients. The more ftequent supplementary headache investigation was EEG (38.08%) and cranium or facial x-rays (22.59%), especia1ly in the female sexo The abortive treatment was more ftequent1y recommended for headache (34.81%) than the prophylactic treatment (6.65%). The cepha1algia classification according to SIC shows that in the group that sought medica1 care migraine prevailed (53.89%), folIowed by an association of migraine and sinus headache (16.77%); in the group that didn't seek a doctor migraine prevailed (48.40%), folIowed by other types ofheadaches (29.98%). The results of this study show that most patients don't seek medica1 care for headaches and that when they do, women seek the doctor more ftequent1y. The general clinic is the type ofmedical care more ftequent1y looked for. Sinus headache is the kind of headache more ftequent1y diagnosed by the doctors. Migraine is many times sub-diagnosed. Most ofthe doctors don't request supplementary headache investigation. The therapeutic strategy is usua1ly only the headache crisis treatment. When revised by the neurologist with headache training, the nugrame diagnosis, according to SIC, is the most ftequent in both groups (those who sought and those who did not seek medical care for headache) / Mestrado / Neurologia / Mestre em Ciências Médicas