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Caracterização genotípica e fenotípica de cepas de Escherichia coli associadas à diarreia pós-desmame em suínos / Genotypic and phenotypic characterization of Escherichia coli strains associated with from post-weaning swine

Moreno, Marina 24 February 2015 (has links)
A Escherichia coli é um dos principais agentes envolvidos na síndrome da diarreia pós-desmame em suínos, sendo a infecção de difícil controle devido à elevada capacidade deste agente em desenvolver e disseminar mecanismos de resistência aos antimicrobianos utilizados para o tratamento da doença. No presente estudo foi estabelecido o perfil de virulência de cepas de E. coli isoladas de 621 leitões com sintomas de diarreia na fase de creche (21 a 40 dias de vida), provenientes de 52 granjas de suínos no Brasil. Foram selecionadas 148 cepas de E. coli, positivas para fímbria F4 e /ou F18 e destas foi determinado o perfil de resistência à antimicrobianos por determinação da concentração inibitória mínima para os seguintes antimicrobianos: ampicilina, clindamicina, clortetraciclina, danofloxacina, enrofloxacina, florfenicol, gentamicina, neomicina, oxitetraciclina, sulfadimetoxina, espectinomicina, trimetoprima / sulfametoxazole, tiamulina, tilmicosina, tulatromicina, tilosina, ceftiofur e enrofloxacina. Dos 621 animais observados, 321 animais foram positivos para pelo menos um fator de virulência. Das cepas estudadas, todas as 148 foram resistentes a tilosina, clindamicina, tiamulina, tilmicosina e sulfadimetoxina. A frequência de cepas resistentes foi elevada também para o oxitetraciclina, clortetraciclina, danofloxacina, ampicilina e ao florfenicol. Considerando-se o fato de 100% das cepas terem apresentado resistência a mais de três classes de antimicrobianos pode-se concluir que todas as cepas de E.coli do presente estudo foram multirresistentes sendo frequente a resistência aos principais antimicrobianos utilizados na terapia da diarreia em leitões de creche / Escherichia coli is one of the agents involved in the syndrome of post-weaning diarrhea in swine. The infection is difficult to control because of high ability of this agent to develop and spread antimicrobial resistance mechanisms against commonly used antibiotics. This study has as goal determine the virulence profile of E. coli strains isolated of 621 piglets with diarrhea symptoms in the nursery with 21-40 days of age, from 52 pig farms in Brazil. Of the isolated strains, we selected 148 strains of E. coli, positive for F4 fimbriae and / or F18 and these were tested for antimicrobial resistance for determining the minimum inhibitory concentration for the following antibiotics: ampicillin, clindamycin, chlortetracycline, danofloxacin, enrofloxacin, florfenicol, gentamicin, neomycin, oxytetracycline, sulfadimethoxin, spectinomycin, trimethoprim / sulfamethoxazole, tiamulin, tilmicosin, tulathromycin, tylosin, ceftiofur and enrofloxacin. Of the 621 observed animals 321 animals were positive for at least one virulence factor. Of the studied strains, all 148 were resistant to tylosin, clindamycin, tiamulin, tilmicosin and sulfadimethoxin. The frequency of resistant strains was also high for oxytetracycline, chlortetracycline, danofloxacin, ampicillin and florfenicol. Considering the fact that 100% of the strains have shown resistance to more than three classes of antimicrobials can be concluded that all E. coli strains in this study were multidrug-resistant and are frequent the resistance to the main antimicrobials used in therapy of diarrhea in nursery pigs
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Norovírus: principal causa de gastroenterite epidêmica no município deSão Paulo / Norovirus: leading cause of epidemic gastroenteritis in São Paulo city

Kamioka, Gabriela Akemi 01 February 2018 (has links)
Introdução: Norovírus é o principal agente viral de infecções gastrointestinais no mundo e sua alta infectividade gera aumento importante da demanda e dos custos para a saúde pública. Surtos ocorrem em ambientes fechados ou com aglomeração de pessoas. No município de São Paulo, o Norovírus tem se destacado como principal agente etiológico das gastroenterites. Objetivo: Descrever as noroviroses como causa de gastroenterite epidêmica no Município de São Paulo no período de 2010 a 2016. Métodos: Estudo transversal descritivo com dados dos sistemas de Vigilância Epidemiológica de surtos de gastroenterite e da Vigilância Sentinela Laboratorial do Rotavírus do Município de São Paulo entre os anos de 2010 a 2016. A definição de caso foi a identificação laboratorial do Norovírus como agente etiológico de surto de doença diarreica em todas as faixas etárias ou de casos esporádicos em menores de cinco anos internados em unidades sentinelas da Vigilância do Rotavírus. Os dados foram descritos segundo tempo, lugar e pessoa, por meio do Epi InfoTM versão 3.5.4 e ArcGIS versão 10.1. Resultados: O Norovírus foi associado a 20,4 por cento (68/334) dos surtos com pesquisa de agente realizada. Ocorrendo com maior frequência na região Norte, seguida das regiões Sul e Sudeste do Município de SP; principalmente em creches, domicílios e hospitais. Houve um predomínio de casos em crianças menores de 5 anos (47,2 por cento do sexo masculino; 28,6 por cento do sexo feminino) e em mulheres entre 20 a 49 anos (38,9 por cento). Na Vigilância Sentinela Laboratorial do Rotavírus do município de São Paulo, o Norovírus foi associado a 28,4 por cento (444/1565) dos casos menores de 5 anos. Os casos foram provenientes principalmente das regiões Norte e Sul, onde estão localizadas as duas unidades sentinelas. Verificou-se pico de ocorrência do Norovírus nos meses mais quentes. Destaca-se que o perfil das gastroenterites descrito foi fortemente influenciado pelas características da Vigilância Epidemiológica das Doenças de Transmissão Alimentar do Município de São Paulo. Conclusão: O Norovírus foi o principal agente etiológico de surtos de gastroenterite e de casos menores de 5 anos internados por diarreia aguda no Município de São Paulo. A vigilância das gastroenterites por Norovírus é importante para o estabelecimento de uma rede integrada entre diferentes estados e países que possibilitem o conhecimento da doença, planejamento de medidas de prevenção e controle e comunicação da informação. / Introduction: Norovirus is the major viral agent of gastroenteritis in the world and its high infectivity causes an important increase in demand and costs for public health. Outbreaks occur in closed environments or crowded settings. In the city of São Paulo, Norovirus has been highlighted as the main etiological agent of gastroenteritis. Objective: To describe the noroviruses as the cause of epidemic gastroenteritis in the city of São Paulo from 2010 to 2016. Methods: Descriptive cross-sectional study with data from the Epidemiological Surveillance systems of gastroenteritis outbreaks and Laboratory Sentinel Surveillance of Rotavirus of the city of São Paulo from 2010 and 2016. The case definition was the laboratory identification of Norovirus as the etiological agent of diarrheal disease outbreak in all age groups or sporadic cases in children under five years of age hospitalized in sentinel units of Rotavirus Surveillance. The data were described by time, place and person, using Epi InfoTM version 3.5.4 and ArcGIS version 10.1. Results: Norovirus was associated to 20.4 per cent (68/334) of outbreaks with agent identification performed. Occurred more frequently in the North region, followed by the South and Southeast regions of the city of São Paulo, especially in nurseries, residences and hospitals. A predominance of cases in children aged <5 years (47.2 per cent male, 28.6 per cent female) and in women aged 20 to 49 years (38.9 per cent) was observed. In the Laboratory Sentinel Surveillance of Rotavirus in the city of São Paulo, Norovirus was associated with 28.4 per cent (444/1565) of cases in children younger than 5 years old. The cases were mainly from the North and South regions, where the two sentinel units are placed. There was a peak of Norovirus occurrence in warmer months. It can be noticed that the profile of gastroenteritis described was strongly influenced by the characteristics of Foodborne Disease Surveillance of the city of São Paulo. Conclusion: Norovirus was the major etiological agent of gastroenteritis outbreaks and diarrhea cases under 5 years old hospitalized in the city of São Paulo. Surveillance of gastroenteritis caused by Norovirus is important for the establishment of an integrated network between different states and countries to contribute to disease knowledge, planning of prevention and control actions and distribution of information.
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Interação de Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) atípica que apresenta o padrão de adesão localizada-like com a célula epitelial in vitro. / In vitro interaction of LAL-adherent atypical enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) with the epithelial cell.

Bueris, Vanessa 04 July 2008 (has links)
As EPEC típicas apresentam padrão de adesão localizada (LA) em células epiteliais, formando de microcolônias compactas. As EPEC atípicas aderem no padrão de adesão localizada-like (LAL), no qual não se observa microcolônias e que ocorre tardiamente em relação à LA. O objetivo deste estudo foi caracterizar a interação de EPEC atípica que apresenta o padrão LAL com a célula epitelial. A cinética da formação da lesão A/E, característica da patogênese de EPEC, demonstrou um atraso na adesão e na formação da lesão em EPEC atípica, que correspondeu à expressão tardia de Intimina, Tir e EspA. A complementação de EPEC atípica com o regulador perABC antecipou a expressão destes fatores e a formação da lesão A/E. Não foi observada relação entre outras adesinas descritas em DEC com o padrão LAL, bem como a mobilização dos receptores eucarióticos nucleolina e <font face=\"symbol\">b1-Integrina para o foco de adesão. Observou-se a possível interação da Intimina com um peptídeo da membrana da célula epitelial de 300 kDa, podendo tratar-se de um provável receptor para essa adesina. / Typical EPEC exhibit a localized adherence (LA) pattern in epithelial cells, where tight bacterial clusters are produced. Atypical EPEC produce a localized-like (LAL) adhesion pattern, in which the compact clusters are not formed and that occurs in a later stage of the infection. The aim of this study was to characterize the interaction of LAL-adherent atypical EPEC with the epithelial cell. The kinetics of the A/E lesion, the main feature of EPEC pathology, showed a clear delay in its formation by the atypical strains, probably a consequence of the delay observed in the expression of Intimin, Tir and EspA. The complementation of atypical EPEC with the perABC regulator revealed to be effective in not only advancing the expression of these factors, as well the formation of A/E lesion. No correlation was found between the presence of different adhesins already described in DEC and the LAL pattern. The analysis of the possible interaction of Intimin with epithelial cell receptors showed the presence of a 300 kDa peptide that it seems to interact with this adhesin.
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Aspectos microbiologicos e epidemiologicos da infeccao por Yersinia pseudotuberculosis em bovinos no estado do Paraná - Brasil. / Epidemiological and microbiological aspects of Yersinia pseudotuberculosis infectious in bovine of Parana State - Brazil.

Warth, Jose Francisco Ghignatti 03 November 1990 (has links)
A fim de pesquisar a presença de yersinia pseudotuberculosis em quadro de diarreia bovina, foram analisadas 220 amostras de fezes, 60 conteudos de intestino delgado e 56 conteudos de intestino grosso. Obteve-se isolamento positivo em 46 (21%), 9 (15%) e 5 (9%) das amostras respectivamente, totalizando 60 cepas do microrganismo. As 60 cepas de yersinia pseudotuberculosis pertenciam ao sorogrupo o iii., Apresentando identica sensibilidade aos antibioticos e quimioterapicos quando testados in vitro. Estatisticamente comprovou-se haver relação entre os isolamentos das cepas de yersinia pseudotuberculosis e os meses mais frios do ano. A cepa y. Pseudotuberculosis mostrou-se patogenica aos cobaios, quando administrada via oral. Apesar dos resultados bacteriologicos negativos, não se descartou a possibilidade do envolvimento de roedores silvestres e comensais na transmissão do microrganismo aos bovinos, podendo os proprios bovinos ou o solo, servirem como reservatorios do microrganismo. A metodologia utilizada no isolamento das cepas de y. Pseudotuberculosis possibilitou que 73,3% das mesmas fossem isoladas no cultivo primario e 26,66% apos o crioenriquecimento na temperatura de 4 GRAUS c por 7, 14 e 21 dias. / The main purposes of this research was to search for Yersinia pseudotuberculosis in faecal samples from bovine with diarrhea, from farms in the State of Paraná. We have analyzed 220 faecal samples, 60 samples from small intestine contents and 56 samples from large intestine contents. Yersinia pseudotuberculosis isolation was positive in 46 (21%), 9 (15%) and 5 (9%), respectively, totalizing 60 strains of the microrganism. The 60 strains of Yersinia pseudotuberculosis belong to serogroup 0 III, and they shown identical sensibility to antibiotics and other drugs, when tested in vitro. Through the statistical methods, X2 test, we found a positive correlation between Yersinia pseudotuberculosis isolation and the winter season. To establish the morbidity and mortality rates, cattle population was separated into three age related categories, wich are: calfs, yearlings and adults. In 1987 and 1988, the morbidity rates were 0%, 10,3% and 6,7%; 0%, 13,4% and 11,7%, respectively. In relation to mortality rates, they were 0%, 1,0% and 2,6% in 1987, and 0%, 2,1% and 2,6% in 1988. The strains of Yersinia pseudotuberculosis placed on serogroup 0 III, were pathogenic to guinea pigs, when giver per-os. We didn\'t get any isolation of Yersinia pseudotuberculosis from wild rodents and others, but we still think that may be incriminated in the transmission of the microrganism to bovines, although the bovines as well as the soil, may function as reservoires of the bacteria. Isolation of Yersinia pseudotuberculosis in primary cultures was possible in 73,33% although 26,66% of the isolations were successfull only after cold-temperature enrichment, with incubation at 4 C for 7, 14 an 21 days.
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Um estudo longitudinal da ocorrência de potenciais patógenos entéricos em fazendas com casos esporádicos e com casos recorrentes de diarréia em bezerros de corte / A longitudinal study on the occurrence of potential enteric pathogens in farms with recurrent and sporadic cases of diarrhea in beef calves

Razera, Giselle Ayres 08 July 2010 (has links)
A diarréia em bezerros é comprovadamente uma das principais causas de perdas econômicas em rebanhos de corte, sendo os prejuízos diretamente derivados da redução do ganho de peso e custos com tratamento. Considerando-se que, para o delineamento de medidas profiláticas adequadas ao controle de uma doença é necessário o conhecimento de suas causas, o presente trabalho teve por objetivo estudar de modo longitudinal a freqüência de ocorrência de coronavírus bovino (BCoV), rotavírus do grupo A (RV-A), protozoários, helmintos e enterobactérias em uma propriedade com casos esporádicos e em outra com casos recorrentes de diarréia em bezerros. Investigou-se, ainda, a presença de genes codificadores de para as toxinas shiga-like 1 e 2 , para as adesinas K99 e F41 e para a intimina (eae) nas E. coli isoladas. Para a detecção de BCoV, utilizou-se uma nested-RT-PCR direcionada ao gene codificador da RNA polimerase RNA dependente, e para a detecção de RV-A utilizou-se ELISA direto duplo sanduíche. O isolamento e caracterização bioquímica das colônias de bactérias foram conduzidos de acordo com técnicas de bacteriologia clássica. A caracterização genotípica das colônias de E. coli isoladas foi realizada através de uma Multiplex-PCR, utilizando primers para os genes codificadores dos seguintes fatores de virulência: Stx1, Stx2, Sta, K99, F41 e eae. A detecção de parasitas foi realizada por centrífugo sedimentação em água-eter e centrífugo-flutuação em solução supersaturada de sacarose, considerando-se como resultado final do exame coproparasitológico todos os parasitas encontrados em ambas as técnicas em sua maior contagem. A freqüência de ocorrência de coronavírus bovino e rotavírus do grupo A foi baixa, restrita a animais com até quatro meses de idade, enquanto que protozoários, helmintos e enterobactérias apresentaram tendência crescente em freqüência relacionada à progressão da idade dos animais. Foram identificados os patotipos STEC, AEEC e um padrão atípico com os genes de K99 e eae. Além disso, encontrou-se associação entre baixo padrão sanitário e maior freqüência de ocorrência de Eimeria spp, Strongyloidea, Strongyloides spp, Trichuris spp e Escherichia coli portadora de fatores de virulência Stx1, Stx2, K99 e eae. O presente trabalho colabora para a caracterização da microbiota entérica de bezerros, mas mantém abertas as questões relativas às diferenças específicas entre as biotas entéricas de bezerros sadios e com diarréia, enfatizando a importância de se realizarem mais estudos que investiguem simultaneamente diversos enteropatógenos potenciais nestes animais / Diarrhea in calves is proved to be one of the main causes of economic loss in beef herds, which is direct originated by reduction of weight gain and increment of treatment costs. It is known that the determination of appropriate preventive measures to control a disease depends on the knowledge of its causes. In this manner, the present work aimed to study longitudinally the frequency of occurrence of bovine coronavirus (BCoV), group A rotavirus (RV-A), protozoa, helminths and enterobacteria in a beef farm presenting sporadic cases and other with recurrent cases of diarrhea. Moreover, the presence of genes that express the following virulence factors were investigated in the isolated E. coli: shiga-like toxins 1 and 2, adhesins K99 and F41 and intimin (eae). A nested-RT-PCR targeted to the RNA-dependent RNA polimerase gene was conducted to detect BCoV, and a double-sandwich direct ELISA was used to detect RV-A. Classical bacteriology techniques were used to isolate and indentify bacterial colonies. A Multiplex-PCR, with primers designed to previously described E. coli genes, was used to genotype these colonies. Centrifuge sedimentation in water-ether and centrifuge flotation in sucrose supersaturated solution were used to detect the presence of parasites. The final result was achieved by the highest count of all the parasites found. The observed frequency of occurrence of both BCoV and RV-A was low and restricted to animals up to 4 months of age whereas protozoa, helminths and enterobacteria showed an increasing tendency on its frequency related to progression of animals aging. STEC, AEEC and an atypical pathotype of E. coli, with K99 and eae genes were found. Moreover, an association between low sanitary pattern and a higher frequency of Eimeria spp, Strongyloidea, Strongyloides spp, Trichuris spp and Escherichia coli bearing Stx1, Stx2, K99 and eae genes was observed. The present study contributes to the characterization of calf enteric microbiota. However, the points related to the specific differences between healthy and diarrheic calves enteric microbiota remain unclear, emphasizing the importance of future studies to investigate different potential enteropathogens in beef calves simultaneously
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Interação de Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) atípica que apresenta o padrão de adesão localizada-like com a célula epitelial in vitro. / In vitro interaction of LAL-adherent atypical enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) with the epithelial cell.

Vanessa Bueris 04 July 2008 (has links)
As EPEC típicas apresentam padrão de adesão localizada (LA) em células epiteliais, formando de microcolônias compactas. As EPEC atípicas aderem no padrão de adesão localizada-like (LAL), no qual não se observa microcolônias e que ocorre tardiamente em relação à LA. O objetivo deste estudo foi caracterizar a interação de EPEC atípica que apresenta o padrão LAL com a célula epitelial. A cinética da formação da lesão A/E, característica da patogênese de EPEC, demonstrou um atraso na adesão e na formação da lesão em EPEC atípica, que correspondeu à expressão tardia de Intimina, Tir e EspA. A complementação de EPEC atípica com o regulador perABC antecipou a expressão destes fatores e a formação da lesão A/E. Não foi observada relação entre outras adesinas descritas em DEC com o padrão LAL, bem como a mobilização dos receptores eucarióticos nucleolina e <font face=\"symbol\">b1-Integrina para o foco de adesão. Observou-se a possível interação da Intimina com um peptídeo da membrana da célula epitelial de 300 kDa, podendo tratar-se de um provável receptor para essa adesina. / Typical EPEC exhibit a localized adherence (LA) pattern in epithelial cells, where tight bacterial clusters are produced. Atypical EPEC produce a localized-like (LAL) adhesion pattern, in which the compact clusters are not formed and that occurs in a later stage of the infection. The aim of this study was to characterize the interaction of LAL-adherent atypical EPEC with the epithelial cell. The kinetics of the A/E lesion, the main feature of EPEC pathology, showed a clear delay in its formation by the atypical strains, probably a consequence of the delay observed in the expression of Intimin, Tir and EspA. The complementation of atypical EPEC with the perABC regulator revealed to be effective in not only advancing the expression of these factors, as well the formation of A/E lesion. No correlation was found between the presence of different adhesins already described in DEC and the LAL pattern. The analysis of the possible interaction of Intimin with epithelial cell receptors showed the presence of a 300 kDa peptide that it seems to interact with this adhesin.
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Aspectos microbiologicos e epidemiologicos da infeccao por Yersinia pseudotuberculosis em bovinos no estado do Paraná - Brasil. / Epidemiological and microbiological aspects of Yersinia pseudotuberculosis infectious in bovine of Parana State - Brazil.

Jose Francisco Ghignatti Warth 03 November 1990 (has links)
A fim de pesquisar a presença de yersinia pseudotuberculosis em quadro de diarreia bovina, foram analisadas 220 amostras de fezes, 60 conteudos de intestino delgado e 56 conteudos de intestino grosso. Obteve-se isolamento positivo em 46 (21%), 9 (15%) e 5 (9%) das amostras respectivamente, totalizando 60 cepas do microrganismo. As 60 cepas de yersinia pseudotuberculosis pertenciam ao sorogrupo o iii., Apresentando identica sensibilidade aos antibioticos e quimioterapicos quando testados in vitro. Estatisticamente comprovou-se haver relação entre os isolamentos das cepas de yersinia pseudotuberculosis e os meses mais frios do ano. A cepa y. Pseudotuberculosis mostrou-se patogenica aos cobaios, quando administrada via oral. Apesar dos resultados bacteriologicos negativos, não se descartou a possibilidade do envolvimento de roedores silvestres e comensais na transmissão do microrganismo aos bovinos, podendo os proprios bovinos ou o solo, servirem como reservatorios do microrganismo. A metodologia utilizada no isolamento das cepas de y. Pseudotuberculosis possibilitou que 73,3% das mesmas fossem isoladas no cultivo primario e 26,66% apos o crioenriquecimento na temperatura de 4 GRAUS c por 7, 14 e 21 dias. / The main purposes of this research was to search for Yersinia pseudotuberculosis in faecal samples from bovine with diarrhea, from farms in the State of Paraná. We have analyzed 220 faecal samples, 60 samples from small intestine contents and 56 samples from large intestine contents. Yersinia pseudotuberculosis isolation was positive in 46 (21%), 9 (15%) and 5 (9%), respectively, totalizing 60 strains of the microrganism. The 60 strains of Yersinia pseudotuberculosis belong to serogroup 0 III, and they shown identical sensibility to antibiotics and other drugs, when tested in vitro. Through the statistical methods, X2 test, we found a positive correlation between Yersinia pseudotuberculosis isolation and the winter season. To establish the morbidity and mortality rates, cattle population was separated into three age related categories, wich are: calfs, yearlings and adults. In 1987 and 1988, the morbidity rates were 0%, 10,3% and 6,7%; 0%, 13,4% and 11,7%, respectively. In relation to mortality rates, they were 0%, 1,0% and 2,6% in 1987, and 0%, 2,1% and 2,6% in 1988. The strains of Yersinia pseudotuberculosis placed on serogroup 0 III, were pathogenic to guinea pigs, when giver per-os. We didn\'t get any isolation of Yersinia pseudotuberculosis from wild rodents and others, but we still think that may be incriminated in the transmission of the microrganism to bovines, although the bovines as well as the soil, may function as reservoires of the bacteria. Isolation of Yersinia pseudotuberculosis in primary cultures was possible in 73,33% although 26,66% of the isolations were successfull only after cold-temperature enrichment, with incubation at 4 C for 7, 14 an 21 days.
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Norovírus: principal causa de gastroenterite epidêmica no município deSão Paulo / Norovirus: leading cause of epidemic gastroenteritis in São Paulo city

Gabriela Akemi Kamioka 01 February 2018 (has links)
Introdução: Norovírus é o principal agente viral de infecções gastrointestinais no mundo e sua alta infectividade gera aumento importante da demanda e dos custos para a saúde pública. Surtos ocorrem em ambientes fechados ou com aglomeração de pessoas. No município de São Paulo, o Norovírus tem se destacado como principal agente etiológico das gastroenterites. Objetivo: Descrever as noroviroses como causa de gastroenterite epidêmica no Município de São Paulo no período de 2010 a 2016. Métodos: Estudo transversal descritivo com dados dos sistemas de Vigilância Epidemiológica de surtos de gastroenterite e da Vigilância Sentinela Laboratorial do Rotavírus do Município de São Paulo entre os anos de 2010 a 2016. A definição de caso foi a identificação laboratorial do Norovírus como agente etiológico de surto de doença diarreica em todas as faixas etárias ou de casos esporádicos em menores de cinco anos internados em unidades sentinelas da Vigilância do Rotavírus. Os dados foram descritos segundo tempo, lugar e pessoa, por meio do Epi InfoTM versão 3.5.4 e ArcGIS versão 10.1. Resultados: O Norovírus foi associado a 20,4 por cento (68/334) dos surtos com pesquisa de agente realizada. Ocorrendo com maior frequência na região Norte, seguida das regiões Sul e Sudeste do Município de SP; principalmente em creches, domicílios e hospitais. Houve um predomínio de casos em crianças menores de 5 anos (47,2 por cento do sexo masculino; 28,6 por cento do sexo feminino) e em mulheres entre 20 a 49 anos (38,9 por cento). Na Vigilância Sentinela Laboratorial do Rotavírus do município de São Paulo, o Norovírus foi associado a 28,4 por cento (444/1565) dos casos menores de 5 anos. Os casos foram provenientes principalmente das regiões Norte e Sul, onde estão localizadas as duas unidades sentinelas. Verificou-se pico de ocorrência do Norovírus nos meses mais quentes. Destaca-se que o perfil das gastroenterites descrito foi fortemente influenciado pelas características da Vigilância Epidemiológica das Doenças de Transmissão Alimentar do Município de São Paulo. Conclusão: O Norovírus foi o principal agente etiológico de surtos de gastroenterite e de casos menores de 5 anos internados por diarreia aguda no Município de São Paulo. A vigilância das gastroenterites por Norovírus é importante para o estabelecimento de uma rede integrada entre diferentes estados e países que possibilitem o conhecimento da doença, planejamento de medidas de prevenção e controle e comunicação da informação. / Introduction: Norovirus is the major viral agent of gastroenteritis in the world and its high infectivity causes an important increase in demand and costs for public health. Outbreaks occur in closed environments or crowded settings. In the city of São Paulo, Norovirus has been highlighted as the main etiological agent of gastroenteritis. Objective: To describe the noroviruses as the cause of epidemic gastroenteritis in the city of São Paulo from 2010 to 2016. Methods: Descriptive cross-sectional study with data from the Epidemiological Surveillance systems of gastroenteritis outbreaks and Laboratory Sentinel Surveillance of Rotavirus of the city of São Paulo from 2010 and 2016. The case definition was the laboratory identification of Norovirus as the etiological agent of diarrheal disease outbreak in all age groups or sporadic cases in children under five years of age hospitalized in sentinel units of Rotavirus Surveillance. The data were described by time, place and person, using Epi InfoTM version 3.5.4 and ArcGIS version 10.1. Results: Norovirus was associated to 20.4 per cent (68/334) of outbreaks with agent identification performed. Occurred more frequently in the North region, followed by the South and Southeast regions of the city of São Paulo, especially in nurseries, residences and hospitals. A predominance of cases in children aged <5 years (47.2 per cent male, 28.6 per cent female) and in women aged 20 to 49 years (38.9 per cent) was observed. In the Laboratory Sentinel Surveillance of Rotavirus in the city of São Paulo, Norovirus was associated with 28.4 per cent (444/1565) of cases in children younger than 5 years old. The cases were mainly from the North and South regions, where the two sentinel units are placed. There was a peak of Norovirus occurrence in warmer months. It can be noticed that the profile of gastroenteritis described was strongly influenced by the characteristics of Foodborne Disease Surveillance of the city of São Paulo. Conclusion: Norovirus was the major etiological agent of gastroenteritis outbreaks and diarrhea cases under 5 years old hospitalized in the city of São Paulo. Surveillance of gastroenteritis caused by Norovirus is important for the establishment of an integrated network between different states and countries to contribute to disease knowledge, planning of prevention and control actions and distribution of information.
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Óleo de arroz na alimentação de leitões recém-desmamados / Rice oil in weanling pig diet

Sbardella, Maicon 18 July 2011 (has links)
A inclusão de óleos em dietas de leitões recém-desmamados tem por finalidade aumentar a densidade energética para atender às exigências energéticas dos leitões. Foram realizados dois experimentos para avaliar a inclusão do óleo semirrefinado de arroz como substituto ao óleo refinado de soja em dietas de leitões recém-desmamados. O Experimento 1 teve como objetivo determinar os valores de energia digestível e metabolizável dos óleos de arroz e soja para leitões na fase de creche. Foram utilizados 21 leitões, machos castrados, com peso inicial de 19,63 ± 0,37 kg, em um experimento em blocos completos casualizados, com sete repetições e um animal por unidade experimental (gaiola de metabolismo). Foi utilizado o método de coleta total de fezes e urina, sendo que o óleo substituiu 10% da ração-referência. Os valores de energia digestível, energia metabolizável e energia metabolizável corrigida para balanço de nitrogênio foram, respectivamente, 6.267, 6.158 e 6.213 kcal/kg para o óleo semirrefinado de arroz e 7.581, 7.489 e 7.527 kcal/kg para o óleo refinado de soja. Os valores energéticos do óleo de arroz foram em média 17,5% inferiores aos do óleo de soja, possivelmente, pela menor relação de ácidos graxos insaturados:saturados e pelo maior conteúdo de ácidos graxos livres no óleo semirrefinado de arroz. O Experimento 2 teve como objetivo avaliar os efeitos da substituição do óleo refinado de soja (OS) pelo óleo semirrefinado de arroz (OA) em dietas para leitões recém-desmamados sobre o desempenho, a histologia intestinal, a morfometria de órgãos e a ocorrência de diarreia. Foram utilizados 120 leitões desmamados, machos castrados e fêmeas, com peso inicial de 6,74 ± 0,42 kg, em um experimento em blocos completos casualizados, com oito repetições e três animais por unidade experimental (baia). Foram avaliados cinco níveis de substituição OS:OA na dieta: 4:0 dieta basal com 4% de OS; 3:1 dieta basal com 3% de OS e 1% de OA; 2:2 dieta basal com 2% de OS e 2% de OA; 1:3 dieta basal com 1% de OS e 3% de OA; e 0:4 dieta basal com 4% de OA. As dietas isonutritivas foram formuladas considerando os valores de energia metabolizável corrigida para balanço de nitrogênio determinados no Experimento 1. Não houve efeito dos níveis de substituição sobre o desempenho, a morfometria de órgãos e a ocorrência de diarreia. Houve efeito quadrático sobre a largura de vilosidade e efeito cúbico sobre a relação altura de vilosidade:profundidade de cripta no duodeno. Portanto, considerando os valores de energia dos óleos na formulação de dietas isonutritivas para leitões em fase de creche, o óleo semirrefinado de arroz pode substituir totalmente o óleo refinado de soja (4%) sem afetar o desempenho zootécnico, a morfometria de órgãos dos animais, nem a ocorrência de diarreia. / The purpose of the inclusion of oils in weanling pig diets is to increase diet energy density to meet energy requirement of pigs. Two experiments were conducted to evaluate the effects of the inclusion of semi-refined rice oil replacing refined soybean oil in diets of weanling pigs. Experiment 1 was carried out to determine digestible and metabolizable energy values of rice and soybean oils for weanling pigs. Twenty one borrows averaging 19.63 ± 0.37 kg BW were used in a randomized complete block design experiment, with seven replications and one pig per experimental unit (metabolism cage). Total collection method of feces and urine was used, and the oil replaced 10% of reference diet. Values of digestible energy, metabolizable energy and N-corrected metabolizable energy were, respectively, 6,267, 6,158 and 6,213 kcal/kg for semi-refined rice oil and 7,581, 7,489 and 7,527 kcal/kg for refined soybean oil. Energy values of rice oil were around 17.5% lower than values of soybean oil, possibly, due to the smaller unsaturated:saturated fatty acids ratio and due to the higher free fatty acids content in the semi-refined rice oil. Experiment 2 was conducted to evaluate the effects of the replacement of refined soybean oil (SO) by semi-refined rice oil (RO) in weanling pig diet on performance, intestinal histology, organs morphometry and the occurrence of diarrhea. One hundred and twenty weaned pigs, borrows and females, averaging 6.74 ± 0.42 kg BW, were used in a randomized complete block design experiment, with eight replications per treatment and three animals per experimental unit (pen). Five dietary levels of SO:RO replacement were studied: 4:0 basal diet with 4% of SO; 3:1 basal diet with 3% of SO and 1% of RO; 2:2 basal diet with 2% of SO and 2% of RO; 1:3 basal diet with 1% of SO and 3% of RO; and 0:4 basal diet with 4% of RO. Isonutritive diets were formulated considering N-corrected metabolizable energy values determined in Experiment 1. No effects of substitution levels were observed on performance, organs morphometry and occurrence of diarrhea. However, a quadratic effect on villus width and a cubic effect on villus height:crypt depth ratio were observed in the duodenum. Therefore, considering the energy values of oils in the formulation of isonutritive weanling pig diets, semi-refined rice oil can replace the refined soybean oil (4%) without affecting growth performance, organs morphometry of animals, or the occurrence of diarrhea.
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Anticorpo recombinante anti-intimina: uma ferramenta para o diagnóstico rápido de Escherichia coli enteropatogênica e de Escherichia coli enterohemorrágica. / Anti-intimin recombinant antibody: a tool for a rapid diagnosis of enteropathogenic and enterohemorrhagic Escherichia coli.

Caravelli, Andressa 12 April 2013 (has links)
Intimina é o principal fator de virulência envolvido na lesão attaching/effacing em E. coli enteropatogênica (EPEC) e E. coli enterohemorrágica (EHEC), que são responsáveis pela diarreia infantil e colite hemorrágica/síndrome hemolítico-urêmica, respectivamente. Nos países em desenvolvimento, o diagnóstico desses patógenos ou é demorado e caro, ou não é realizado em laboratórios de rotina. No entanto, a detecção é essencial para definição do tratamento da infecção. O objetivo do presente trabalho foi definir o vetor de expressão mais apropriado e avaliar a sensibilidade e especificidade do scFv-intimina obtido. O gene scFv-intimina anteriormente obtido foi clonado nos vetores de expressão pAE e pSMT3, transformados em uma E. coli BL21 (DE3). A expressão foi induzida com 1 mM de IPTG. Em ambos os vetores, a proteína expressa foi direcionada para o citoplasma bacteriano, dessa forma a construção pAE-scFv-intimina foi utilizada na obtenção do anticorpo recombinante. Após cromatografia de afinidade ao níquel o scFv-intimina foi empregado no ensaio de imunofluorescência indireta para definir um teste de ensaio rápido e confiável, analisando-se 199 isolados de E. coli e isolados de outras Enterobactérias, dos quais 132 resultaram em isolados eae-positivos e 67 isolados eae-negativos. O teste de imunofluorescência mostrou a detecção de 132 isolados eae-positivos (100% de sensibilidade) e a não detecção de 67 isolados eae-negativos (100% especificidade). Assim, o ensaio de imunofluorescência é um método eficaz e rápido, e o scFv-intimina é uma excelente ferramenta para o imunodiagnóstico de EPEC e EHEC. / Intimin is the main virulence factor involved in the attaching/effacing lesion of enteropathogenic E. coli (EPEC) and enterohemorrhagic E. coli (EHEC), which are responsible for infantile diarrhea and hemorrhagic colitis/hemolytic uremic syndrome, respectively. In developing countries, their diagnosis is either time-consuming and expensive or is not done in the routine laboratory. Nevertheless, their detection is essential in defining the infection treatment. The aim of the study was to define the most suitable expression vector and evaluate the sensitivity and specificity of the scFv-intimin obtained. The scFv-intimin gene previously obtained was cloned into pAE and pSMT3 expression vectors and transformed into an E. coli BL21 (DE3) strain. Expression was induced with 1 mM IPTG. In both vectors, recombinant protein was expressed as inclusion bodies, so pAE was chosen as the expression vector for nickel affinity chromatography. Once purified, scFv-intimin was employed in an indirect immunofluorescence assay to define a rapid and reliable assay testing 199 E. coli strains and other Enterobacteriaceae isolates, of which 132 isolates were eae-positive and 67 isolates were eae-negative. The immunofluorescence assay showed the detection of 132 eae-positive isolates (100% sensitive) and no detection in the 67 eae-negative isolates (100% specific). Thus, immunofluorescence is an effective and rapid method and scFv-intimin an excellent tool for the immunodiagnosis of EPEC and EHEC.

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