Houve um crescimento no consumo de alimentos fora do domicílio nas últimas décadas, impulsionado pela urbanização, economia, fatores demográficos e participação das mulheres no mercado de trabalho. O consumo em restaurantes de hotéis passou de 1,4 kg para 7,2 kg per capita entre 2005 e 2014 e apesar de seguir as orientações sanitárias, pode ser risco à saúde humana, devido ao tipo de prato, matéria prima ou cozimento. Assim, foram avaliados os cardápios de hotéis através de um índice de risco sanitário para os usuários, e comparou-se este índice médio do cardápio com características organizacionais e demográficas dos hotéis, seu sucesso midiático e a percepção do pessoal de problemas sanitários. Foi possível mostrar que há um conhecimento de risco pelo maior preço de pratos com risco mais alto. Os hotéis com mais risco têm cardápios mais variados e taxa de ocupação mais alta, sem diferença nos demais critérios demográficos. O pessoal de atendimento tem mais consciência de riscos que a gerência e avaliações midiáticas são menores nos hotéis de maior risco. Quanto à gestão do restaurante pelo hotel, este se mostrou mais segura para os hóspedes na gestão, sendo os restaurantes independentes mais ativos em número de pratos e turismo gastronômico, o que leva a uma melhor avaliação midiática, independente do maior risco. A avaliação do risco médio do cardápio pode levar uma melhor segurança sanitária do hóspede, mas existem outros fatores mercadológicos que podem interferir no cardápio do restaurante. Este conhecimento de risco sanitário pode orientar a escolha mercadológica do restaurante do hotel, provendo um elemento de julgamento da oferta de alimentos que podendo aumentar a fidelização e a segurança sanitária dos hóspedes. A alimentação segura de hóspedes é um processo extremamente importante para o sucesso da hotelaria, já que estes são associados a problemas pelos clientes, o que implica em maior cuidado sanitário na atual expansão do turismo de negócio e lazer no Brasil. / There has been an increase in consumption of food outside the home in the last decades, driven by urbanization, economy, demographic factors and women\'s participation in the labor market. The consumption in hotel restaurants went from 1.4 kg to 7.2 kg per capita between 2005 and 2014 and despite following the sanitary guidelines, can be risk to human health, by type of dish, raw food or cooking. Thus, we evaluated the hotel menus through a sanitary risk index for the users, and compared this average menu index with organizational and demographic characteristics of the hotels, their media success and the staff\'s perception of health problems. It was possible to show that there is a knowledge of risk by the higher price of dishes with higher risk. The hotels with more risk have more varied menus and higher occupancy rate, with no difference in the other demographic criteria. Service staff are more aware of risks that management and media reviews are lower in hotels at higher risk. As for the management of the restaurant by the hotel, this is safer for guests in hotel management, with independent restaurants more active in number of dishes and gastronomic tourism, which leads to a better media assessment, regardless of the greater risk. The evaluation of the average risk of the menu may lead to a better sanitary security of the guest, but there are other marketing factors that can interfere with the menu of the restaurant. This knowledge of sanitary risk can guide the market choice of the hotel restaurant, providing an element of judgment of the food supply that can increase the loyalty and sanitary security of the guests. The safe feeding of guests is an extremely important process for the success of the hotel industry, since these are associated with problems by the clients, which implies in greater health care in the current expansion of business and leisure tourism in Brazil.

O objetivo do trabalho foi avaliar a utilização de uma mistura comercial de óleos essenciais, fornecidos via concentrado e/ou sucedâneo lácteo, no que se refere ao escore fecal, fermentação ruminal e desempenho geral dos animais. Foram utilizados 30 bezerros da raça Holandês que receberam 6L/d de dieta líquida, composta por sucedâneo lácteo comercial (20PB:15EE), além de livre acesso à água e ao concentrado inicial. O desaleitamento ocorreu na 8ª semana, sendo os animais acompanhados até a 10ª semana de vida. Os animais foram distribuídos em delineamento de blocos casualizados, nos seguintes tratamentos: 1) Controle: sem suplementação com óleos essencias (C); 2) Suplementação: 400 mg/kg de blend de óleos essenciais no sucedâneo lácteo (S) e 3) Suplementação: 200 mg/kg de blend de óleos essenciais no sucedâneo lácteo e 200 mg/kg no concentrado inicial (SCI). A partir da 2ª semana foram realizadas pesagens e aferições das medidas corporais, bem como avaliação diária de consumo de concentrado e escore fecal. Além disso, foram realizadas semanalmente colheita de sangue para determinação de hematócrito, glicose, ?-hidroxibutirato e proteínas totais; fezes, para a contagem de bactérias ácido lácticas e enterobactérias; e fluido ruminal, para determinação do pH, ácidos graxos de cadeia curta, nitrogênio amoniacal e contagem de bactérias amilolíticas, celulolíticas e protozoários. As medidas de desempenho, escore fecal e microrganismos intestinais não foram afetadas pela suplementação com blend de óleos essenciais (P>0,05). Os parâmetros ruminais e sanguíneos também não foram alterados pela suplementação de óleos essenciais (P>0,05), a exceção da concentração ruminal de N-amoniacal, com maiores valores para animais suplementados via sucedâneo e concentrado inicial (P<0,05). A maior parte dos parâmetros avaliados foi afetada pela idade dos animais, em reposta aos aumentos no consumo de concentrado inicial observados com o passar do tempo. A análise de contrastes não revelou efeito da via de fornecimento dos óleos essenciais nos parâmetros avaliados (P>0,05), a não ser pelos ganhos semanais de altura na cernelha, sendo estes superiores para animais suplementados via sucedâneo (P<0,05). Os óleos essenciais apresentam-se como promissores substitutos dos antibióticos promotores de crescimento. No entanto, a dose de óleos essenciais e as vias de fornecimentos merecem maiores estudos, de forma a se obter benefícios em saúde e desempenho animal. / The objective of this study was to evaluate the use of a commercial blend of essential oils, supplied via starter concentrate and/or milk replacer with regard to fecal scores, rumen fermentation and overall performance of the animals. Thirty Holstein calves were utilized and received 6L/d of liquid diet, consisting of commercial milk replacer (20CP:15EE), and had free access to water and starter concentrate. Weaning occurred at week 8, and the animals were followed until the 10th week of age. Animals were distributed in a randomized block design, in the following treatments: 1) Control: without supplementation with essential oils (C), 2) Supplementation: 400 mg/kg of blend of essential oils in milk replacer (M) and 3) Supplementation: 200 mg/kg of blend of essential oils in the milk replacer and 200 mg/kg in the starter concentrate (MRC). From the second week, calves were weighted and body measurements were taken, while concentrate intake and fecal scores were monitored daily. Furthermore, blood samples were drawn weekly for determination of hematocrit, glucose, ?-hydroxybutyrate and total proteins; as well as feces, for counting lactic acid bacteria and enterobacteria; and ruminal fluid for determination of pH, short chain fatty acids, ammonia-N and counts of amylolytic and cellulolytic, and protozoa. Performance, fecal scores and intestines microorganisms were not affected by the essential oils supplementation (P>0.05). Ruminal and blood parameters were also not affected (P>0.05), exception made for the rumen ammonia-N concentration, with higher values for animals supplemented through milk-replacer and starter concentrate (P<0.05). Most of the evaluated parameters were affected by age of animals, mainly as a response to the increase on concentrate intake as animal aged. Contrast analysis did not reveal a route of administration of essential oils effect (P>0.05), except for the wither´s height gains, being those higher for animals supplemented via milk-replacer (P<0.05). Essential oils are promising substitutes for antibiotic growth promoters. However, the dose and routes of administration deserve further studies, allowing a better animal performance and health to be achieved.

O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos clínicos, a eficiência produtiva, reprodutiva, a resposta imune inata e humoral em fêmeas da raça Holandesa persistentemente infectadas (PI) com BVDV. Para tanto, foram selecionadas 25 PI´s por meio do ELISA antígeno, das quais oito eram bezerras &le; 12 meses; seis novilhas entre 13 e 24 meses; e onze animais de 25 a 36 meses de idade. O grupo não infectado (NI) foi composto por fêmeas negativas com faixas etárias pareadas às PIs. Em geral, as fêmeas PIs apresentaram maior frequência de diarreia (P=0,012) e Doença Respiratória Bovina (DRB) (P=0,004), especialmente àquelas entre 25 a 36 meses de idade. As PIs apresentaram maior concentração sérica de haptoglobina (P=0,017). As vacas NI´s produziram mais leite (8-12 litros) do que as PIs (P&le;0.011). A contagem de células somáticas (CCS) foi maior para as vacas PI´s em relação NI´s durante a lactação (P&le;0,066). A média de CCS observada foi de 0,2-0,5 x 105 (células/mL) e 2,0-10,5 x 105 (células/mL) nos grupos PI e NI, respectivamente. A idade na primeira inseminação (P=0,001) e o número de inseminação necessário para a primeira prenhez foi maior para PI do que nas novilhas NI´s (P=0,051). Na avaliação hematológica, as PI´s apresentaram menores valores de hemoglobina (P=0,098), hematócrito (P=0,084), hemoglobina corpuscular média (P=0,092), plaquetas (P=0,040), plaquetócrito (P=0,059) e linfócitos (número absoluto P=0,075; relativo P=0,092) em relação às NI´s. Em contraste, a porcentagem de monócitos foi maior em PI do que animais NI (P=0,014). Em geral, a proporção (%) e a intensidade da fagocitose (MFI) para Staphylococcus aureus e Escherichia coli foram maiores nas PIs do que animais NI (P&lt;0,079). A porcentagem de células que produziram espécies reativas de oxigênio (EROs) endógeno foi menor em PI do que animais de NI (P=0,005). Padrão semelhante foi observado na porcentagem de células que produziram EROs após estímulo com Staphylococcus aureus (P=0,000) ou Escherichia coli (P=0,000). Em contraste, a intensidade da produção de EROS basal foi maior nas PI´s do que nas NI´s (P=0,011). Um padrão semelhante foi observado para a intensidade da produção de EROs quando as células foram estimuladas com Staphylococcus aureus (P=0,011) ou Escherichia coli (P= 0,013). Por meio da soroneutralização, observou-se que os títulos médios dos anticorpos neutralizantes para as BVDV, BRSV e BoHV foram menor no grupo PI (P=0,000). No entanto, os títulos de anticorpos para BPIV-3 foram semelhantes entre os grupos (P=0,146). A proteína sérica total (PT) foi menor nas PI em relação as NI´s (P=0,021). As fêmeas PIs apresentaram maior frequência de diarreia e DRB, além da menor produção leiteira, diminuição da qualidade do leite e menor fertilidade. O leucograma demonstrou diminuição dos tipos celulares, exceto monócitos. No geral, houve resposta imune inata foi exacerbada nas fêmeas PIs, provavelmente pela menor eficiência na produção de EROs. Em relação ao sistema imune específico observou-se linfopenia e títulos nulos ou baixos de anticorpos neutralizantes contra as viroses respiratórias. / The aim of this study was to evaluate the clinical problems, the efficiency of production, reproduction, the innate and humoral immune response of Holstein heifers and cows persistently infected (PI) with BVDV. Therefore, 25 PI animals were selected using ELISA antigen of which, eight were heifers &le; 12 months; six were heifers between 13 to 24 months; and eleven were animals from 25 to 36 months old. An uninfected group (NI) composed by negative females with same age of PI´s. We observed that PI´s presented more frequency of diarrhea (P=0.012) and Bovine Respiratory Disease (BRD) score (P=0.004), especially the animals from 25 to 36 months old. The PI´s showed higher concentration of haptoglobin (P=0.017). During the lactations the milk production from NI cows was higher (8 to 18,2 litters) than PI (P&le;0.011). Somatic cells count (SCC) were higher for PI than NI cows across milk production (P&le;0.066). The mean of SCC observed was 0,2-0,5 x105 (cells/mL) in NI group and 2,0-10,5 x105 (cells/mL) for PI cows. The age at first insemination (P=0.001) and number of insemination required for the first pregnancy was higher for PI than NI heifers (P=0.051). For hematological evaluation, PI´s showed lower hemoglobin (P=0,098), hematocrit (P=0,084), mean corpuscular hemoglobin (P=0,092), platelet (P=0,040), plateletcrit (P=0,059) and lymphocytes (absolute number P=0.092; relative P=0,075) than NI. In contrast, the percentage of monocytes was higher in PI than NI animals (P=0.014). In aggregate, the percent of phagocytic cells and the average phagocytic avidity (expressed as mean fluorescence intensity, MFI) for Staphylococcus aureus and Escherichia coli were higher in PI than NI animals (P&le; 0.079). The percentage of cells producing endogenous reactive oxygen species (ROS) activity was lower in PI than NI animals (P=0.005). A similar pattern was observed in the percentage of cells producing ROS after exposure to Staphylococcus aureus (P= 0.000) or Escherichia coli (P=0.000). In contrast, the value for endogenous ROS per cell activity (MFI) was higher in PI than NI animals (P=0.011). A similar pattern was observed for ROS MFI after stimulating with Staphylococcus aureus (P=0.011) or Escherichia coli stimulation (P=0.013). The median conventional SN titers for specific antibody recognizing BVDV, BRSV and BoHV-1 in serum were lower in PI than NI animals (P=0.000). The antibody titers for BPIV3 were similar between the groups animals (P=0,146). In aggregate, the total serum protein (TP) was lower in PI than NI cattle (P=0.021). In summary, PI heifers had more diarrhea, BRD, produced less milk, worst milk quality and poorer reproductive performance than NI cattle. Leukogram showed decreased cell types except monocytes. Overall, there was a higher endogenous level innate cell reactivity in PI heifers and cows than NI animals, probably because of the lower efficiency in ROS production. In relation to the specific immune system it appear that the PI animals were less efficient in clearance of antigens due to lower numbers of lymphocytes and related lower titers of specific antibody against respiratory viruses.

Orientador: Alexandre Secorun Borges / Banca: Marcio Garcia Ribeiro / Banca: Carla Bargi Belli / Resumo: A diarreia é um grave problema em potros até seis meses de vida, acarretando em prejuízos na equideocultura. Sendo assim os objetivos desta pesquisa foram realizar o estudo clínico e a identificação dos principais enteropatógenos e fatores de virulência, responsáveis pela diarreia em potros. Foram avaliados 56 potros com diarreia (GD) e 60 sem diarreia (GC) até 90 dias de vida. Foram realizados hemogasometria e hemograma dos animais do GD. Amostras fecais dos potros do GD e GC foram utilizadas para a identificação dos enteropatógenos. As principais alterações clínicas nos animais GD foram aumento da peristalse e da frequência de defecação (100,0%) e desidratação (67,8%). A hiperfibrinogenemia (26,8%), leucocitose (12,5%), linfocitose (37,5%) e neutrofilia (17,8), acidose metabólica (16%) e diminuição de bicarbonato (16%) foram os principais achados hematológicos. Ao menos um dos enteropatógenos pesquisados foi detectado no GD (50/56) e GC (48/60). Em 32% (16/50) das amostras positivas foi identificado um único enteropatógeno, enquanto que dois ou mais enteropatógenos foram detectados em 68% (34/50) das amostras. E. coli apresentou a maior frequência nos isolamentos dos potros com diarreia (62,5%), seguida da Salmonella spp. (25%); Strongyloides (25%); estrongilídeos (10,7%); Clostridium perfringens (10,7%); Rhodococcus equi (7,1%); Cryptosporidium spp. (5,4%); Clostridium difficile (1,8%); coronavírus (1,8%); Giardia sp. (1,8%). Conclui-se que a identificação dos animais desidratados e com graves alterações hidroeletrolíticas, bem como a necessidade de se detectar os agentes etiológicos e seus fatores de virulência, são importantes para direcionar o médico veterinário a definir medidas de controle e terapêutica adequados / Abstract: Diarrhea is a serious problem in foals up to six months old, resulting in losses in equine business. The aims of this research were to perform the clinical study and the identification of main pathogens and virulence factors responsible for diarrhea in foals. A total of 56 foals with diarrhea (DG) and and 60 without diarrhea (CG) up to 90 days old were evaluated. Fecal samples of a (DG) and 60 without diarrhea (GC) up to 90 days old were evaluated. Hemogram and hemogasometry were performed in the animals of DG. Fecal samples of DG and GC were used to identify the enteropathogens. The main clinical findings in animals of GD were increased peristalsis and defecation frequency (100,%) and dehydration (67.8%). Hyperfibrinogenemia (26.8%), leukocytosis (12.5%), lymphocytosis (37.5%) and neutrophilia (17.8%), metabolic acidosis (16%) and decreased bicarbonate (16%) were the main hematologic findings. At least one of the enteropathogens studied was detected in DG (50/56) and in CG (48/60). In 32% (16/50) of positive samples was identified a single enteropathogen, while two or more enteropathogens were detected in 68% (34/50) of samples. E. coli showed the highest frequency in the isolations of foals with diarrhea (62.5%), followed by Salmonella spp. (25%); Strongyloides (25%); Strongyles (10.7%); C. perfringens (10.7%), Rhodococcus equi (7.1%); Cryptosporidium spp. (5.4%); C. difficile (1.8%), coronavirus (1.8), Giardia sp. (1.8%). In conclusion the identification of dehydrated animals and animals with severe electrolyte alterations as well as the need to detect the etiologic agents and their virulence factors are important to conduct the veterinarian to define control measures and appropriate therapy / Mestre

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-17T14:18:06Z No. of bitstreams: 1 PDF - Katharina Rodrigues de Lima Porto Ramos.pdf: 2185372 bytes, checksum: d2b102a4f6ef6b42be28bada2852f309 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-22T13:36:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Katharina Rodrigues de Lima Porto Ramos.pdf: 2185372 bytes, checksum: d2b102a4f6ef6b42be28bada2852f309 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-07-22T13:36:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Katharina Rodrigues de Lima Porto Ramos.pdf: 2185372 bytes, checksum: d2b102a4f6ef6b42be28bada2852f309 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-22T13:36:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Katharina Rodrigues de Lima Porto Ramos.pdf: 2185372 bytes, checksum: d2b102a4f6ef6b42be28bada2852f309 (MD5) Previous issue date: 2013-09-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Diarrhea is often associated with excessive defecation caused by increased motility and secretion. Spondias purpurea L. belongs to the genus Spondias, used by the population as gastroprotecti ve, antidiarrheal and antimicrobial. The objecti ve of this work was to evaluate the antidiarrheal acti vity of crude ethanol extract and dichloromethane phase of S. purpurea L., in animal models. Were obtained from the ethanol extract (Sp-EtOHE) and phase dichloromethane (Sp-DCPM) of the leaves of S. purpurea. In determi ning phytochemical noted that Sp-EtOHE was approximately 6.70% of total flavonoids, polyphenols and 3.17%. Toxicological evaluation by the method of Artemia salina Leach, the samples showed values of 50% lethal concentration (LC50) of 2300.67 ± 196.66 mg / mL for Sp-EtOHE and 1106.17 ± 102.24 mg / mL for Sp-DCPM, indicating not present toxicity. In Test Toxicology Preclinical acute was administered 2000 mg / kg Sp-EtOHE was observed only irritability reversed in females after the 2nd hour, this being a given insufficient for inferri ng toxicity, also did not cause variations i n the height or i n the macroscopic structure bodies, water consumption, diet and biochemical and hematological parameters. Unable to determine the LD50, as there were no deaths at the end of the 14 days of observation. With respect to antimicrobial acti vity by microdilution, there was no activity Sp-EtOHE and Sp-DCPM concentrations tested against the tested microorganisms. In determini ng the gastrointestinal motility through the model of induced diarrhea i n rats castor oil, the inhibition was 33, 54 and 63% Sp-EtOHE and 63, 68 and 85% for Sp-DCPM, both at doses of 125 , 250 and 500 mg/kg (po). It was observed a decrease i n the number of liquid stools at 41, 67 and 25% for Sp-EtOHE and 48, 68 and 65 for Sp-DCPM. In relation to the total number of feces both Sp- EtOHE and Sp-DCPM as presented similar behavior. The CRP-ultrasensitive was quantified and reduced levels of acute inflammation. There was an increase in the concentrations of ionograms. The study confirmed that Sp-DCPM minimized the histological damage in the ileum. The model to assess changes in gastric emptying and i ntesti nal motility values Sp-EtOHE and Sp-DCPM not statistically significant . These results show that S. purpurea may be possible antidiarrheal as indicated by the traditional medicine that does not cause constipation not reach the intesti nal bacterial flora and anti-inflammatory acti vity. / A diarreia está associada à frequência excessiva de defecação, provocada pelo aumento da motilidade e secreção. Spondias purpurea L. pertence ao gênero Spondias, utilizado pela população como gastroprotetora, antidiarreica e antimicrobiana. Assim, o objeti vo deste trabalho foi avaliar a atividade antidiarreica do extrato etanólico bruto e da fase diclorometano de S. purpurea L., em modelos animais. Foram obtidos o extrato etanólico (EEtOH-Sp) e a fase diclorometano (FaDCM-Sp) das folhas de S. purpurea. Na determi nação fitoquímica foi observado que o EEtOH-Sp apresentou aproximadamente 6.70% de flavonóides totais, e 3,17% de polifenóis. Na avaliação toxicológica, pelo método da Artemia salina Leach, as amostras apresentaram valores de Concentração Letal 50% (CL ) de 2300,67±196,66 µg/mL para o EEtOH-Sp e 1106,17±102,24 µg/mL para a FaDCM- Sp, indicando não apresentarem toxicidade. No Ensaio Toxicológico Pré-clínico Agudo, foi administrada 2000 mg/kg do EEtOH-Sp e foi observada apenas irritabilidade revertida nas fêmeas após a 2ª hora, sendo este um dado insufi ciente para inferir toxicidade, também não provocou variações no peso nem na estrutura macroscópica dos órgãos, no consumo de água, ração e nos parâmetros bioquímicos e hematológicos. Não foi possível determinar a DL , visto que não houve mortes, ao fi nal dos 14 dias de observação. Com relação à ati vidade 50 antimicrobiana pela técnica de microdiluição, não foi observada atividade de EEtOHSp e FaDCM-Sp nas concentrações testadas frente aos microorganismos testados. Na determi nação da motilidade gastri ntesti nal, através do modelo de diarreia induzida por óleo de rícino em ratos, a inibição foi de 33, 54 e 63% para EEtOH-Sp e 63, 68 e 85% para FaDCM-Sp, ambos nas doses de 125, 250 e 500 mg/kg (v.o.). Foi observada uma diminuição do número de fezes líquidas em 41, 67 e 25% para EEtOH-Sp e 48, 68 e 65% para FaDCM-Sp. Em relação ao número total de fezes tanto o EEtOH-Sp quanto a FaDCM-Sp apresentaram comportamento semelhante. A PCR-ultrassensível foi quantificada e reduziu os níveis de inflamação aguda. Houve um aumento nas concentrações dos ionogramas. O estudo histopatológico confirmou que FaDCM-Sp minimizou o dano histológico no íleo. No modelo para avaliar alterações no esvaziamento gástrico e na motilidade intestinal, os valores do EEtOH-Sp e FaDCM-Sp não apresentaram significância estatística. Estes resultados mostram que S. purpurea pode ser um possível antidiarreico, como indicado pela medicina tradicional, que não causa constipação, não atinge a flora bacteriana intestinal e com atividade anti-inflamatória.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-10-06T11:07:52Z No. of bitstreams: 2 Tese - Luciana Moura Ruffino - 2013.pdf: 1584461 bytes, checksum: 799d5f5a4ab701aeacaddf6cd2226117 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-06T15:49:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Luciana Moura Ruffino - 2013.pdf: 1584461 bytes, checksum: 799d5f5a4ab701aeacaddf6cd2226117 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-06T15:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Luciana Moura Ruffino - 2013.pdf: 1584461 bytes, checksum: 799d5f5a4ab701aeacaddf6cd2226117 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-09-20 / This study aimed to evaluate the performance in the pre-initial phase (6.7 kg to 15.0 kg), initial phase (15 kg to 25 kg), and in the total period (6.7 kg to 25 kg) as well as the digestibility and metabolism coefficients in pre-initial phase (6.7 kg to 15.0 kg) and initial phase (15 kg to 25 kg). The experimental design was in randomized complete blocks. ANOVA was performed and means were compared by Tukey test at 10 % confidence. We used 120 animals, four animals per experimental unit and five replications, to assess performance, and 48 piglets, each animal representing an experimental unit with four replications, to evaluate digestibility,. The treatments were as follows: 1 - control with Pd available at 0.4%; 2 - Pd reduced to 0.15%; 3 - Pd reduced to 0.15%, plus 1,000 FYT/kg; 4 - Pd reduced to 0.15%, plus 1,000 FYT/kg and 0.3% butyric acid; 5 - Pd reduced to 0.15%, plus 1,000 FYT/kg and 0.75% benzoic acid; 6 - Pd reduced to 0.15%, plus 1,000 FYT/kg, 0.3% butyric acid, and 0.75% benzoic acid. The variables studied in performance test were as follows: daily weight gain, total weight gain, daily feed intake, total feed intake and feed conversion rate in the pre-initial and initial phases, and the total period. For the assessment of digestibility and metabolization coefficients we used the method of total collection of faeces and urine. The analyzed variables were apparent digestibility coefficients for dry matter, crude protein, ether extract, calcium and phosphorus in the pre-initial and initial phases. We studied the metabolization coefficients of dry matter, crude protein, crude energy, calcium and phosphorus in the pre-initial and initial phases. In the pre-initial and initial phases and in the total period the best performance results were obtained when piglets were fed a diet containing benzoic acid and phytase. In the pre-initial phase, calcium digestibility was higher in piglets that ingested diet with reduced phosphorus and diet with phytase. In the initial phase, the digestibility coefficients of dry matter, crude protein and ether extract were lower for the animals fed diets with phytase, benzoic acid and butyric acid. In both phases there was no difference in the metabolization coefficients of dry matter, crude protein, ether extract, calcium and phosphorus. We concluded that the tested additives improved the performance of piglets from 6.7 kg to 25,0 kg live weight. / Objetivou-se avaliar o desempenho; os coeficientes de digestibilidade; o escore fecal; a presença de E. Coli e Salmonella no conteúdo intestinal e na urina, o pH do conteúdo estomacal e do intestino delgado, a histomorfometria do intestino delgado, a resistência óssea e a presença de cálcio e de fósforo nos metacarpos de leitões desmamados. Foram realizados dois ensaios experimentais em que o delineamento foi blocos ao acaso. Realizou-se análise de variância e as médias foram comparadas pelo Teste Tukey a 10% de probabilidade. Para avaliação do desempenho foram utilizados 120 animais, sendo quatro animais por unidade experimental e cinco repetições. No ensaio de digestibilidade foram utilizados 48 leitões e cada animal representou uma unidade experimental em quatro repetições. Os tratamentos foram: 1- controle com Pd disponível em 0,41%; 2- Pd reduzido a 0,15%; 3- Pd reduzido a 0,15%, mais 1.000 FYT/kg; 4- Pd reduzido a 0,15%, mais 1.000 FYT/kg mais 0,3% ácido butírico; 5- Pd reduzido a 0,15%, mais 1.000 FYT/kg mais 0,75% ácido benzóico; 6- Pd reduzido a 0,15%, mais 1.000 FYT/kg; mais 0,3% ácido butírico, mais 0,75% ácido benzóico. As variáveis foram: ganho diário de peso, ganho de peso total, consumo diário de ração, consumo total de ração e conversão alimentar nas fases pré-inicial, inicial e período total. Os coeficientes de digestibilidade aparente: da matéria seca, da proteína bruta, do extrato etéreo, do cálcio, do fósforo; os coeficientes de metabolização da matéria seca, da proteína bruta, da energia bruta, do cálcio e do fósforo; presença de E. Coli e Salmonella no conteúdo intestinal e na urina; pH do conteúdo estomacal e do intestino delgado; histomorfometria do intestino delgado; resistência óssea e a presença de cálcio e de fósforo nos metacarpos. Nas fases pré-inicial, inicial e no período total, os melhores resultados de desempenho foram para os leitões que alimentaram de dieta com fósforo inorgânico reduzido, ácido benzóico e fitase. Na fase pré-inicial a digestibilidade do cálcio foi maior em leitões que ingeriram dieta com fósforo reduzido e dieta com fitase. Na fase inicial os coeficientes de digestibilidade da matéria seca, proteína bruta e extrato etéreo dos animais que alimentaram de ração com fitase, ácido benzóico e butírico foram menores. Nas duas fases não houve diferença para os coeficientes de metabolização da MS, PB, EB, Ca e P. Não foram encontrados resultados significativos para escore fecal, contagem de E. coli e Salmonella, pH do sistema digestório e histomorfometria intestinal. A maior altura de vilosidades foi para o tratamento controle e a maior relação vilo:cripta foi para o tratamento com fitase, ácido butírico e benzóico. A menor resistência dos ossos crus foi para os tratamentos com fósforo disponível reduzido. Constatou-se que o ácido butírico prejudicou a deposição de Ca e P nos ossos. Conclui-se que os aditivos testados melhoraram o desempenho dos leitões dos 6,7kg aos 25 kg de peso vivo médio e que o uso de ácido butírico e benzóico separadamente, porém, associados à fitase melhoraram a resistência óssea.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) à um patÃtipo de E. coli que tem sido cada vez mais identificado como agente etiolÃgico das doenÃas diarrÃicas. Esse trabalho teve como objetivos determinar a prevalÃncia de EAEC e investigar a importÃncia de alguns genes associados à virulÃncia no grau de severidade das doenÃas diarrÃicas causadas pelo microorganismo, alÃm de avaliar o impacto dessas infecÃÃes na inflamaÃÃo intestinal e no estado nutricional de crianÃas carentes de Fortaleza, CearÃ. CrianÃas na faixa etÃria entre 2 e 36 meses, com histÃrico ou nÃo de diarrÃia nos Ãltimos 14 dias, tiveram suas medidas antropomÃtricas avaliadas e suas amostras fecais coletadas. O diagnÃstico de EAEC foi realizado por reaÃÃo de polimerase em cadeia (PCR) dos genes aaiC (cromossomal) e aatA (plasmidial). Amostras positivas foram pesquisadas quanto à presenÃa dos genes de virulÃncia aggR (regulador transcricional), aap (dispersina), pic (enterotoxina), pet (enterotoxina) e astA (enterotoxina). A sequÃncia nucleotÃdica do gene aggR foi analisada atravÃs de seqÃenciamento. AlÃquotas fecais foram submetidas à quantificaÃÃo de lactoferrina (LFF) e citocinas (IL-4, IL-10, TNF-&#945; e IFN-&#947;) atravÃs de reaÃÃo imunoenzimÃtica (ELISA). Esse estudo analisou 83 crianÃas com diarrÃia (casos) e 83 crianÃas sem diarrÃia (controles). EAEC foi encontrada na mesma proporÃÃo entre ambos os grupos (41,0%). CrianÃas com diarrÃia apresentaram reduÃÃo significativa na espessura da prega cutÃnea, Ãndice de massa corporal e escores-z peso-por-idade (WAZ) e peso-por-altura (WHZ), mas a presenÃa da bactÃria nÃo foi associada com alteraÃÃes nos Ãndices antropomÃtricos analisados. Entre as amostras positivas para EAEC, nÃo houve diferenÃa quanto à presenÃa isolada dos fatores de virulÃncia pesquisados nas crianÃas que desenvolveram ou nÃo diarrÃia. Avaliando as freqÃÃncias desses genes em combinaÃÃo, cepas de EAEC expressando os genes aggR, aap, pic, pet e astA foram isoladas em freqÃÃncia superior significativa de crianÃas doentes quando comparadas com cepas de EAEC expressando somente aggR, aap, pic e astA (excluindo o gene pet). A anÃlise da seqÃÃncia codificadora do gene aggR apresentou 27 polimorfismos em um Ãnico nucleotÃdeo (SNPs), distribuÃdos entre cinco amostras caso e trÃs controles. Mais de 80,0% das crianÃas estudadas apresentaram inflamaÃÃo intestinal caracterizada por elevados nÃveis de LFF, independente da presenÃa de diarrÃia e EAEC. Todas as crianÃas com diarrÃia associada com EAEC apresentaram altas concentraÃÃes de LFF. NÃveis basais de citocinas fecais foram observados entre crianÃas de ambos os grupos. A variabilidade na presenÃa dos fatores de virulÃncia pesquisados ratifica a heterogeneidade das cepas de EAEC. A combinaÃÃo de genes codificadores de fatores de virulÃncia mostrou que a presenÃa do pet està associada com a doenÃa causada por EAEC. A infecÃÃo pela bactÃria nÃo causou impacto significativo nos Ãndices antropomÃtricos analisados. As elevadas concentraÃÃes observadas de LFF sugerem a existÃncia de fatores adicionais desencadeadores do processo inflamatÃrio. / Enteroaggregative Escherichia coli (EAEC) is a pathotype of diarrheagenic E. coli, which has increasingly been identified as an etiological agent of diarrheal disease. This purpose of this study is to determine the prevalence of EAEC and examine the importance of some virulence-related genes in the severity of the diarrheal disease caused by this microorganism, and further evaluate the impact of these infections on intestinal inflammation and the nutritional status of poor children from Fortaleza, Ceara. Children aged 2 to 36 months, with and without an occurrence of diarrhea in the previous 14 days, had their anthropometric data evaluated and their stools collected. Diagnosis of EAEC was done by polymerase chain reaction (PCR) of the aaiC (chromosomal) and aatA (plasmidial) genes. Positive samples were further analyzed for the presence of the virulence genes aggR (transcription regulator), aap (dispersin), pic (enterotoxin), pet (enterotoxin) and astA (enterotoxin). The nucleotide sequence of aggR gene was also analyzed by sequencing. Aliquots of stool samples were quantified for lactoferrin (LFF) and cytokines (IL-4, IL-10, TNF-&#945; e IFN-&#947;) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). This study analyzed 83 children with diarrhea (cases) and 83 children without diarrhea (controls). EAEC was found in the same proportion in both groups (41.0%). Children with diarrhea presented with significantly reduced skin thickness, body mass index and weight-for-age (WAZ) and weight-for-height (WHZ) z-scores. However, the presence of the bacteria was not associated with changes in the analyzed anthropometric measures. Among the positive samples for EAEC, there was no difference in the presence of the isolated virulence genes in the children with or without diarrhea. Observing the frequencies of these genes in combination, EAEC strains carrying the aggR, aap, pic, pet and astA genes together were isolated in significantly higher frequencies from sick children when compared to EAEC strains expressing only aggR, aap, pic, and astA (excluding pet). Nucleotide sequence analysis of the aggR gene presented 27 polymorphisms of a single nucleotide (SNPs), distributed among five case samples and three control samples. More than 80.0% of studied children had intestinal inflammation characterized by elevated levels of LFF, regardless of the presence of illness and EAEC. All children with diarrhea associated with EAEC presented with high concentrations of LFF. Basal levels of fecal cytokines were observed among children from both groups. Variability in the presence of the evaluated virulence factors confirms the heterogeneity of EAEC strains. The combination of the virulence related genes expressed showed that pet has an association with illness caused by EAEC. The infection by this bacterium did not cause significant impact on the anthropometric index analyzed. The high concentrations of LFF observed suggest that there may be additional factors triggering the inflammatory process.

Em uma unidade produtora de matrizes pesadas, localizada no Estado de São Paulo, foram colhidas duas amostras de conteúdo intestinal de aves com duas semanas de idade, quatro amostras de fezes da cama do mesmo lote às 18 semanas e uma amostra da cama às 30 semanas para pesquisa de coronavirus por uma técnica de nested RT-PCR dirigida a um segmento do gene codificador da RNA–polimerase RNA-dependente (gene pol). Destas, foram positivas 6 amostras correspondentes às duas aves de duas semanas, 3 às aves com 18 semanas e 1 às aves com 30 semanas. A análise filogenética da seqüência do c-DNA correspondente a uma das amostras das aves de duas semanas agrupou este vírus entre os coronavirus do grupo 2. Quando inoculado pelas vias ocular e oral em aves White Leghorn SPF, evidenciou-se diarréia moderada, despigmentação e atraso no crescimento. Os exames anátomo e histopatológicos dos órgãos colhidos revelaram predominantemente enterite e atrofia de vilosidades no reto e duodeno, com infiltração de células mononucleares e exposição de lâmina própria. Aves sentinela SPF alocadas entre os grupos inoculados apresentaram os mesmos sinais clínicos e achados anátomo e histopatógicos. O coronavírus inoculado foi evidenciado em todos os grupos experimentais em intestino delgado, reto, pâncreas e pulmão, assim como em conteúdo entérico. Seqüenciamento e analise filogenética foram realizados com uma amostra positiva por PCR em cada um dos grupos experimentais, confirmando a identidade entres os vírus recuperados e o vírus inoculado e a proximidade deste vírus com os coronavirus do grupo 2, considerando-se o fragmento estudado. Estes resultados demonstram que o coronavirus encontrado, causa doença entérica nas aves, com tropismo predominante por reto e intestino delgado, transmitindo-se horizontalmente de modo eficiente poucas horas após a inoculação e que o segmento do gene pol estudado aproxima este vírus dos coronavirus do grupo 2. / In a broiler breeder farm located at São Paulo State two samples of intestinal contents of 2-week old birds, four fecal samples of the floor from the same flock at 18 weeks of age and one at 30 weeks of age were surveyed to coronavirus by a nested RT-PCR assay targeted to the RNA-dependent RNA-polymerase gene (pol gene). Six out of these samples were positive, two of which from the 2-week old birds, 3 from the 18-week old birds and 1 from the 30-week old birds. Phylogenetic analysis of the c-DNA sequence from one positive sample of a 2-week old bird showed that the virus clustered among group 2 coronaviruses. Oral and ocular inoculation of White Leghorn SPF birds with this coronavirus led to mild diarrhea, depigmentation and growth delay. Gross and histopatological examinations of collected tissues showed enteritis and atrophy of the villi on the small gut and rectum with mononuclear cells infiltration and exposition of the lamina propria. SPF sentinel birds placed between inoculated groups showed the same clinical signs and gross and histological findings. The inoculated coronavirus was evidenced in all experimental groups in the small gut, rectum, pancreas and lungs and also in intestinal contents. DNA sequencing and phylogenetic analysis was carried out with one positive sample per group, confirming the identity between the recovered viruses and the close relationship between this virus and group 2 coronaviruses taking into account the studied fragment. These results show that the coronavirus here found causes enteric disease in birds, with a predominant tropism by the rectum and the small gut, being horizontally transmitted in a few hours and that the pol gene studied segment bring this virus close to group 2 coronaviruses.

Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) é caracterizada pela expressão do padrão de adesão agregativa (AA) em células HEp-2 e sua classificação em típica e atípica se baseia na presença ou ausência de aggR, respectivamente. O gene shf de EAEC codifica uma proteína com similaridade a IcaB, relacionada à formação de biofilme. Os objetivos deste estudo foram verificar a prevalência de shf em 113 amostras de EAEC isoladas no Brasil e investigar o envolvimento de Shf na formação de biofilme e no padrão AA de EAEC típica e atípica. O gene shf foi detectado em 25 EAEC típicas e em 16 atípicas. As amostras shf+ foram analisadas quanto ao sorogrupo, adesão em células HEp-2 e formação de biofilme. Nenhuma dessas características foi associada a shf e a formação de biofilme foi detectada em todas essas amostras. A mutagênese em shf resultou na diminuição da capacidade de formação de biofilme e na incapacidade de adesão. Foi demonstrado que o gene shf é prevalente e que Shf participa do estabelecimento do padrão AA e de formação de biofilme em EAEC típica e atípica. / Enteroaggregative Escherichia coli (EAEC) is characterized by the expression of the aggregative adherence (AA) pattern to HEp-2 cells. The classification of EAEC in typical and atypical is based on the presence or absence of aggR, respectively. The shf gene encodes a protein with similarity to IcaB, associated with biofilm formation. The objectives of this study were to verify the prevalence of shf in 113 EAEC strains isolated in Brazil and investigate the role of the Shf in the establishment of the AA pattern and biofilm of typical and atypical EAEC. The shf gene was detected in 25 typical and in 16 atypical EAEC. The shf+ strains were analyzed regarding serogroups, adherence to HEp-2 cells and the ability to form biofilm. None of these characteristics was associated with the presence of shf and all strains were able to produce biofilm. The mutagenesis in shf reduced the biofilm formation and abolished the adherence to HEp-2 cells. This study demonstrated that shf is prevalent and Shf is involved in the AA and biofilm formation of typical and atypical EAEC.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-09-14T20:45:25Z No. of bitstreams: 1 HerminioMendes.pdf: 6465933 bytes, checksum: b67849d7574d0171fe7eab9850a0985a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-14T20:45:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HerminioMendes.pdf: 6465933 bytes, checksum: b67849d7574d0171fe7eab9850a0985a (MD5) Previous issue date: 2017-06-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão / The use of food for probiotic bacteria has recently been considered a possibility of prevention against the installation or attenuation of several infectious processes. Species belonging to the genera Bifidobacterium and Lactobacillus predominate in the gastrointestinal microbiota and are widely used in functional foods. In general, a selection of new probiotic strains for use in humans has as its source a human intestinal flora and breast milk. Thus, the objective of this study was to isolate and identify new species with potential probiotic from samples of breast milk and feces of infants exclusively breastfed, in addition to evaluating their probiotic potential. Samples of breast milk from two different lactation periods (colostrum and transitional milk) and samples of fecal material from infants were used. Isolation was used using MRSC and for Beerens for Lactic-Acid Bacteria and Bifidobacterium spp. respectively. Probiotic potential was assessed by physical pH and bile salt tolerance tests. Verified its ability to adhere to mucin and human intestinal cells (HT-29) and inhibit adhesion of different diarrheogenic strains of E. coli. The identification of the promising isolates was performed through the 16S rDNA region. Five isolates had acid-bile resistance, with CLM0109 insulation having 90.2% and 64.6% resistance, pH 3.0 and pH 2.0, respectively. These isolates have an ability to adhere to mucin and HT-29 cells, the isolate FEB0308 showed the highest level of adherence to HT-29 cells. The adhesion assay demonstrated that all isolates were absorbed by adhesion of diarrheogenic E. coli (DECs). Antimicrobial susceptibility analysis showed that 3 isolates showed resistance to one or two antibiotics (kanamycin and streptomycin). The molecular analysis allowed identifying the isolates as belonging to the species Lactobacillus casei. The results show that the five isolates present probiotic potential especially for use in the prevention and treatment of infections caused by DEC and demonstrate that milk and stool samples from infants can act as a source of potential probiotic bacteria. / O uso de alimentos contendo bactérias probióticas foi recentemente considerado uma possibilidade de prevenção contra a instalação ou atenuação de diversos processos infecciosos. Espécies pertencentes aos gêneros Bifidobacterium e Lactobacillus predominam na microbiota gastrintestinal humana e são amplamente utilizadas em alimentos funcionais. Em geral, a seleção de novas cepas probióticas para uso em humanos, tem como fonte a microbiota intestinal humana e o leite materno. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar e identificar novas estirpes com potencial probiótico a partir de fezes de lactentes amamentados exclusivamente com leite materno, além de avaliar seu potencial probiótico. Foram utilizadas amostras de material fecal de bebes alimentados exclusivamente com leite materno. O isolamento foi realizado utilizando-se ágar MRSC e ágar Beerens para bactérias ácido-lácticas (BAL) e Bifidobacterium spp. respectivamente. O potencial probiótico foi avaliado pelos testes de tolerância ao pH gástrico e sais biliares. Além disso, foi verificado sua capacidade de aderir à mucina e as células intestinais humanas (HT-29), bem como a capacidade de inibir adesão de distintas linhagens diarreiogênicas de E. coli além de sensibilidade a antimicrobianos. A identificação dos isolados promissores foi realizada através da região 16S rDNA. Cinco isolados apresentaram resistência ácido-biliar, com destaque para o isolado CLM0109 que apresentou 90.2% e 64.6% de resistência a pH 3.0 e pH 2.0 respectivamente. Estes isolados tiveram a capacidade de aderir à mucina e células HT-29, o isolado FEB0308 apresentou o maior nível de aderência a células HT-29. O ensaio de inibição da adesão demonstrou que todos os isolados foram capazes de inibir adesão de E. coli diarreiogênicas (DECs). Além disso, a análise de sensibilidade a antimicrobianos demonstrou que 3 isolados apresentaram resistência a um ou dois antibióticos (canamicina e estreptomicina). A análise molecular identificou os isolados como Lactobacillus casei. Concluímos que os cinco isolados apresentam potencial probiótico especialmente para uso na prevenção e tratamento de infecções causadas por DEC e demonstra que as amostras fecais de lactentes alimentados exclusivamente com leite materno, podem funcionar como fonte de bactérias com potencial probiótico.