Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-19Bitstream added on 2014-08-13T18:00:43Z : No. of bitstreams: 1 000755542.pdf: 2197110 bytes, checksum: fc3a984e6f667312f69e889332c1f54b (MD5) / Foi descrito um modelo experimental de estudo de infusão rápida de cristaloide em ratos, discutindo-se os resultados clínicos, laboratoriais e histológicos obtidos com a administração de diferentes volumes. Utilizou-se 56 ratos machos da linhagem Wistar com peso médio de 318 g (± 4), divididos aleatoriamente em sete grupos de oito animais. Os animais dos grupos 1 ao 6 receberam solução de Ringer com lactato por via intravenosa, de maneira rápida (25 ml/min), no volume correspondente a 50%, 100%, 150%, 200%, 250% e 300% da volemia (V), respectivamente, formando os grupos de estudo. Os ratos do grupo 0 foram operados da mesma forma, mas não receberam o cristaloide, constituindo o grupo controle (SHAM). A avaliação laboratorial do sangue e dos sinais clínicos foram realizados em dois tempos (antes e dez minutos após a infusão líquida). A avaliação gravimétrica do edema pulmonar (EP) foi feita com o pulmão esquerdo e a histológica com o pulmão direito, ambos extraídos após eutanásia. As variáveis que apresentavam dois tempos foram analisadas através da diferença entre os momentos, comparando com o grupo controle por uma análise de variância, seguido do teste de Dunnet. As análises do índice pulmonar (IP), seco-úmido (ISU), histologia e desfecho foram realizadas utilizando uma análise de variância (ANOVA). O nível de significância foi fixado em 5%. Os sinais clínicos apresentaram alteração significativa a partir da hidratação com volume correspondente a 2 vezes a V. A queda na taxa de hematócrito foi significativa nos 6 grupos de estudo, confirmando a eficácia do método na promoção de hemodiluição. Os exames laboratoriais de sangue apresentaram-se alterados a partir da infusão de volume igual à V. O EP foi bem caracterizado pelo método gravimétrico e histológico após infusão de líquido de 2,5 vezes a V. A parada respiratória foi observada a partir da hidratação ... / It was described an animal model study of crystalloid rapid infusion in rats, discussing the clinical, laboratorial and histological results acquired with the administration of various amounts. Fifty six male Wistar rats were used with a medium weight of 318 (± 4) grams, divided randomly in seven groups of eight animals. The rats of groups 1 to 6 received lactated Ringer´s solution intravenously, in a rapid way (25 ml/min), in the amount of 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 and 3 fold its blood volume (BV), respectively, composing the study groups. The rats of group 0 were submitted to surgery the same way, but did not receive the crystalloid, composing the control group (SHAM). The laboratorial evaluation of blood and the clinical signs were made in two times (before and ten minutes after the fluid infusion). The gravimetric assessment of pulmonary edema (PE) was made with the left lung and the histological assessment with the right lung, both extracted after euthanasia. The data with two distinct times were analyzed through the difference between the moments, comparing to the control group with an analysis of variance, followed by Dunnett´s test. The evaluation of the lung wet weight/body weight ratio (LW/BW), the lung wet/dry weight ratio (W/D), histology and upshot were performed by an analysis of variance (ANOVA). The findings were significant at the 0.05 level. The clinical signs significantly changed in the 2, 2.5 and 3 fold BV groups. The hematocrit reduction was significant in the six study groups, corroborating the method effectiveness to promote hemodilution. The laboratorial blood exams significantly changed from 1 fold BV group. The PE was clearly identified by the gravimetric and histological assessment in the 2.5 and 3 fold BV. The respiratory arrest was observed in the 1.5, 2, 2.5 and 3 fold BV groups. The volume of 3 fold BV was lethal to all animals of the group. This animal model was easily performed ...

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cinnamaldehyde, a natural compound frequently present in cosmetic formulations, induces skin irritation when topically applied, but the mechanism by which cinnamaldehyde produces such skin reactions is unclear. Here, we showed that cinnamaldehyde induced ear edema in mice (1-6 μg/ear) with a maximum effect with 4 μg/ear (Emax of 0.18 ± 0.02 mm and an ED50 value of 2.0 (1.1- 3.4 μg/ear). Cinnamaldehyde can induce leukocyte infiltration detected by an increase in MPO activity and confirmed by histological analyses. The edema and cellular infiltration evoked by 4 μg/ear of cinnamaldehyde was prevented through topical application of ruthenium red, a non selective TRP antagonist or by camphor and HC030031, two TRPA1 receptor antagonists. In contrast, the edema and the leukocyte infiltration was unaffected by the TRPV1 receptor antagonist SB366791. Cinnamaldehydeinduced edema but not cellular infiltration was also prevented though topical application of the tachykinin NK1 antagonist aprepitant, indicating a neuropeptides release phenomenon in this process. Also, we observed that repeated topical applications of cinnamaldehyde (4 μg/ear) did not induced sensitization/desensitization alterations. Interestingly, the TRPV1 antagonist, capsaicin, repeated treatment abrogated its edematogenic response, confirming the desensitization process and decrease partially the cinnamaldehyde induced edema, suggesting the involvement of capsaicin-sensitive fibers and additional targets in cinnamaldehyde response. The present results demonstrated that cinnamaldehyde induces mouse skin inflammation through a mechanism involved the TRPA1 receptor activation and subsequent leukocyte infiltration. In addition, evidence supports the assumption that the tachykinin NK1 receptor is involved in these inflammatory responses. / O cinamaldeído é um composto natural frequentemente encontrado em formulações cosméticas, capaz de induzir irritação na pele quando aplicado topicamente, porém o mecanismo pelo qual o cinamaldeído produz estas reações ainda é desconhecido. Neste trabalho demonstramos que o cinamaldeído foi capaz de induzir edema de orelha em camundongos (1-6 μg/orelha) com um efeito máximo obtido com a dose de 4 μg/orelha (Emax de 0,18 ± 0,02 mm e um DE50 de 2,0 (1,1- 3,4) μg/orelha). O cinamaldeído foi capaz ainda de induzir infiltração leucocitária detectada por um aumento na atividade da MPO e confirmada por análise histológica. O edema e a infiltração leucocitária iniciados após aplicação tópica de 4 μg/orelha de cinamaldeído foi prevenido pela aplicação tópica de vermelho de rutênio, um antagonista TRP não seletivo, e por cânfora e HC030031, dois antagonistas seletivos TRPA1. Por outro lado, a aplicação de SB366791, um antagonista seletivo TRPV1, não alterou o edema nem a infiltração leucocitária. Ainda, o edema induzido pelo cinamaldeído foi prevenido pela aplicação tópica de aprepitant, um antagonista seletivo do receptor NK1 para taquicininas, sugerindo que a liberação de neuropeptídeos esteja envolvida neste processo. Também foi observado que a aplicação tópica repetida de cinamaldeído 4 μg/orelha não foi capaz de induzir processos de ensibilização/dessensibilização. No entanto, o tratamento repetidocom o antagonista TRPV1, capsaicina, aboliu o edema induzido pela própria capsaicina, confirmando a ocorrência de dessensibilização, e diminuiu parcialmente o edema induzido pelo cinamaldeído sugerindo o envolvimento de fibras sensíveis a capsaicina, além de outras vias, neste processo. Os resultados demonstram que o cinamaldeído induz um processo inflamatório na pele através de um mecanismo que envolve a ativação do receptor TRPA1 e consequente infiltração leucocitária.

Tabernaemontana catharinensis A. DC (Apocynaceae family) is popularly known as cobrina and used on leaf infusions form as an anti-inflammatory, antidote to snake bites, against insect bites, among other applications. These effects are due to a diversity of chemical constituents already identified in several parts of the plant. However, no study was performed to confirm its topical anti-inflammatory activity in inflammatory skin diseases. All procedures were approved by Ethics Committee for Animal Research of the Federal University of Santa Maria (Process number 23081.018655/2014-91 and 5199270616/2016). To evaluate this effect, were performed acute irritant contact dermatitis (ICD) models induced by cinnamadehyde (4 μg/ear), capsaicin (200 μg/ear), arachidonic acid (200 μg/ear), phenol (10% v/v/ear) and croton oil (1000 μg/ear) and a chronic ICD model induced by croton oil repeated applications using male Swiss mice (25-30g). We assessed: 1) The topical effect of T. catharinensis leaves crude extract (CETc) (0.0001-10 μg/ear) on acute ICD models induced by different irritant agents; 2) The topical effect of CETc isolated fractions (dichloromethane, n-butanol and ethyl acetate) (0.0001-10 μg/ear) and CETc gel formulations (0.001-3%; 0.15g/ear) in an acute ICD model induced by croton oil; 3) The topical effect of CETc repeated treatment (10 μg/ear) in a chronic ICD model croton oil-induced. These effects were evaluated through inflammatory parameters as ear edema and polymorphonuclear cells infiltration. Moreover, we assessed the CETc topical effect on pro-inflammatory cytokines (MIP-2, IL-1β and TNF-α), the NF-κB transcription pathway and glucocorticoid receptor involvement on its anti-inflammatory effect, as well as the toxicity development by CETc repeated (14 days) topical treatment. The CETc inhibited the acute ear edema induced by cinnamaldehyde, capsaicin, arachidonic acid, phenol and croton oil with an inhibitory dose 50% (ID50) of 0.061 (0.02-0.2); 0.37 (0.21-0.67); 0.002 (0.0008-0.003); 0.0009 (0.0005-0.002) and 0.006 (0.003-0.013) μg/ear, respectively, and a maximum inhibition (Imáx) of 100% (10 μg/ear) in the ICD model induced by cinnamaldehyde, arachidonic acid, phenol and croton oil and 75±6% (10 μg/ear) in the ICD induced by capsaicin. CETc (0.0001-10 μg/ear) significantly reduced the polymorphonuclear cells infiltration (verified by myeloperoxidase - MPO activity and histological analysis), as well as pro-inflammatory cytokines levels (MIP-2, IL-1β and TNF-α) induced by all irritant agents evaluated. The dichloromethane, n-butanol and ethyl acetate fractions decreased the ear edema with an ID50 of 0.061 (0.03-0.136); 0.002 (0.0006-0.005) and 0.001 (0.0004-0.004) μg/ear and an Imáx of 85±4%, 83±6% e 86±6% (10 μg/ear), respectively, while the CETc gel formulation reduced the ear edema in 96±3% (3%; 0.15 g/ear). Furthermore, all these treatments decreased the polymorphonuclear cells infiltration. The CETc (10 μg/ear) repeated application also reduced the ear edema induced by croton oil multiple administration from 1st day of treatment, with an Imáx de 66±6% (9th day of experiment) even as the polymorphonuclear cells infiltration. The CETc topical treatment reduced all inflammatory parameters evaluated by glucocorticoid receptor-dependent mechanism, but NF-κB transcription pathway-independent, without causing adverse effects, since the CETc repeated treatment did not alter behavioral and biochemical parameters evaluated. Our study suggests that formulations containing T. catharinensis can be effective as a topical anti-inflammatory to treating of ICD. / Tabernaemontana catharinensis A. DC (família Apocynaceae) é popularmente conhecida como cobrina e utilizada na forma de infusão das folhas como anti-inflamatório, antídoto para mordeduras de cobras, contra picadas de insetos, entre outras aplicações. Estes efeitos são decorrentes de uma diversidade de constituintes químicos já identificados nas diversas partes da planta. Entretanto, nenhum estudo foi realizado a fim de comprovar sua atividade anti-inflamatória tópica em doenças inflamatórias cutâneas. Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Universidade Federal de Santa Maria (Processo número 23081.018655/2014-91 e 5199270616/2016). Para avaliar estes efeitos, foram realizados modelos agudos de dermatite de contato irritante (DCI) induzido por cinamaldeído (4 μg/orelha), capsaicina (200 μg/orelha), ácido araquidônico (2000 μg/orelha), fenol (10% v/v/orelha) e óleo de cróton (1000 μg/orelha) e, um modelo crônico induzido pela aplicação tópica repetida de óleo de cróton utilizando camundongos Swiss machos (25-30g). Avaliamos: 1) o efeito tópico do extrato bruto das folhas (0,0001-10 μg/orelha) de T. catharinensis (EBTc) no modelo agudo de DCI induzido por diferentes agentes irritantes; 2) o efeito tópico das frações isoladas (diclorometano, n-butanol e acetato de etila) do EBTc (0,0001-10 μg/orelha) e formulações em gel do EBTc (0,001-3%; 0,15 g/orelha) em um modelo agudo de DCI induzido por óleo de cróton; 3) o efeito do tratamento repetido com o EBTc (10 μg/orelha) em um modelo crônico de DCI induzido por óleo de cróton. Estes efeitos foram avaliados sobre parâmetros inflamatórios como edema de orelha e infiltração de células polimorfonucleares. Além disso, avaliamos o efeito tópico do EBTc sobre os níveis de citocinas pró-inflamatórias (MIP-2, IL-1β e TNF-α), o envolvimento da via de transcrição do NF-κB e do receptor de glicocorticoide no seu efeito anti-inflamatório, bem como o desenvolvimento de toxicidade pelo tratamento tópico repetido (14 dias) do EBTc. O EBTc inibiu o edema de orelha agudo induzido por cinamaldeído, capsaicina, ácido araquidônico, fenol e óleo de cróton com dose inibitória 50% (DI50) de 0,061 (0,02-0,2); 0,37 (0,21-0,67); 0,002 (0,0008-0,003); 0,0009 (0,0005-0,002) e 0,006 (0,003-0,013) μg/orelha, respectivamente, e uma inibição máxima (Imáx) de 100% (10 μg/orelha) no modelo de DCI induzido por cinamaldeído, ácido araquidônico, fenol e óleo de cróton e 75±6% (10 μg/orelha) na DCI induzida por capsaicina. EBTc (0,0001-10 μg/orelha) reduziu significativamente a infiltração de células polimorfonucleares (verificados através da atividade da mieloperoxidase-MPO e análise histológica), bem com os níveis de citocinas pró-inflamatórias (MIP-2, IL-1β e TNF-α) induzidos por todos os agentes irritantes avaliados. As frações diclorometano, n-butanol e acetato de etila reduziram o edema de orelha com uma DI50 de 0,061 (0,03-0,136); 0,002 (0,0006-0,005) e 0,001 (0,0004-0,004) μg/orelha e uma Imáx de 85±4%, 83±6% e 86±6% (10 μg/orelha), respectivamente, enquanto a formulação em gel de EBTc reduziu o edema de orelha em 96±3% (3%; 0,15 g/orelha). Ainda, todos esses tratamentos reduziram a infiltração de células polimorfonucleares. A aplicação repetida de EBTc (10 μg/orelha) também reduziu o edema de orelha induzido pela administração repetida de óleo de cróton a partir do 1º dia de tratamento, com Imáx de 66±6% (9º dia de experimento), assim como a infiltração de células polimorfonucleares. O tratamento tópico com EBTc reduziu todos os parâmetros inflamatórios avaliados por um mecanismo dependente do receptor de glicocorticoide, mas independente da via de transcrição NF-κB, sem causar efeitos adversos, uma vez que o tratamento repetido com EBTc não alterou parâmetros comportamentais e bioquímicos avaliados. Nosso estudo sugere que formulações contendo T. catharinensis podem ser eficazes como um anti-inflamatório tópico para o tratamento da DCI.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Polyamines (putrescine, spermidine and spermine) are aliphatic amines produced by the action of ornithine descarboxylase (ODC), a rate-limiting and protein kinease C (PKC)-regulated step in polyamine synthesis. Since the levels of polyamines were found to be high in synovial fluid of arthritic patients, the aim of the present study was to identify the role of peripherally produced polyamines in the model of inflammatory pain induced by adjuvant arthritis. The subcutaneous injection of complete Freund s adjuvant (CFA, 50 μL/paw) caused the development of mechanical allodynia and edema. Moreover, it increased ODC expression and activity as well as PKC activation. The previous administration of the selective ODC inhibitor DFMO (10 μmol/paw) was capable of preventing the development of allodynia and edema as well as the increase in ODC activity produced by CFA injection. Furthermore, the previous administration of the PKC inhibitor GF109203X (1 nmol/paw) reduced allodynia and the increase of ODC activity in animals injected with CFA. Accordingly with the synthesis inhibition, we have observed that subcutaneous injection of putrescine (10 μmol/paw), spermidine (3-10 μmol/paw) or spermine (0.3-3 μmol/paw) into the rat paw also caused mechanical allodynia and edema. The present results suggest that endogenously synthesized polyamines are involved in the development of nociception and edema caused by the adjuvant. Moreover, the polyamine production in inflammatory site seems to be related with the increase in ODC activity stimulated by PKC activation. Thus, the control of polyamine synthesis and action could be an interesting target to control inflammatory pain. / Poliaminas (putrescina, espermidina e espermina) são aminas alifáticas produzidas pela ação da ornitina descarboxilase (ODC), enzima limitante e proteína quinase C (PKC), passo regulatório da síntese de poliaminas. Desde que níveis elevados de poliaminas foram encontrados no fluído sinovial em pacientes com artrite, o objetivo do presente estudo foi investigar a produção de poliaminas perifericamente em modelo de dor inflamatória induzido por CFA. A injeção subcutânea do adjuvante completo de Freund (CFA, 50 μL/pata) causou o desenvolvimento de alodínia mecânica e edema, bem como um aumento na expressão e atividade da ODC e na ativação da PKC. A administração prévia do inibidor seletivo da ODC, o DMFO (10 μmol/pata), foi capaz de prevenir o desenvolvimento da alodínia e edema, bem como o aumento da atividade produzida pela injeção de CFA. Além disso, a pré-administração do inibidor da PKC o GF109203 (1 nmol/pata), reduziu a alodínia e o aumento da atividade da ODC em animais injetados com CFA. De acordo com a inibição da síntese, também observamos que a injeção subcutânea de putrescina (10 μmol/pata), espermidina (3-10 μmol/pata) ou espermina (0,3-3 μmol/pata) na pata de ratos desenvolveu alodínia mecânica e edema. O presente estudo sugere que as poliaminas sintetizadas endogenamente estão envolvidas no desenvolvimento da nocicepção e edema causado pelo CFA. Além disso, as poliaminas produzidas nos sítios de inflamação estão relacionadas com o aumento na atividade da ODC estimulada pela ativação da PKC. Assim, o controle da síntese das poliaminas e função poderia ser um interessante alvo para o controle da dor inflamatória.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA14MA140.pdf: 91454 bytes, checksum: d7f6d38c8c463559f1c52096a57acd9b (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / We describe the epidemiological, clinical signs and lesions of four outbreaks of acute pulmonary edema and emphysema in cattle (EEPAB) in the states of Santa Catarina and Paraná and its experimental reproduction of disease. Spontaneous disease occurred after transfer of mature cattle grazing and dry for another young and flourishing. All affected cattle were cows of the Dutch and Swiss brown races. The main clinical signs were dyspnea , labored abdominal breathing with the neck extended and mouth open and some had subcutaneous emphysema , besides the decrease in milk production and slow recovery or death . Necropsy findings were restricted to the lung which had dark red color, not collapsed, glossy and hipercriptante with marked interlobular emphysema. Histological lesions in the lung consisted mainly of alveolar and interlobular emphysema interspersed with areas of congestion and edema, hyaline degeneration of the wall of alveoli and infiltration of macrophages and eosinophils , moderate , diffuse . The experimental reproduction of the disease was performed in a beef with administration of 0.7 mg / kg / BW of L - Tryptophan orally in a single dose. The animal died on the seventh day of the experiment. The clinical signs and lesions were similar to those observed in naturally occurring disease / Descrevem-se os dados epidemiológicos, sinais clínicos e lesões de quatro surtos da doença do edema e enfisema pulmonar agudo de bovinos (EEPAB) nos estados de Santa Catarina e Paraná e sua reprodução experimental. A doença espontânea ocorreu após transferência de bovinos de pastagem madura e seca para outra jovem e viçosa. Todos os bovinos afetados eram vacas das raças holandês e pardo suíço. Os principais sinais clínicos foram dispnéia, respiração abdominal dificultosa com o pescoço estendido e boca aberta e alguns apresentavam enfisema subcutâneo, além de queda na produção de leite e morte ou recuperação lenta. Os achados de necropsia foram restritos ao pulmão o qual tinha coloração vermelho escuro, não colabado, de aspecto brilhante e hipercriptante com enfisema interlobular acentuado. As lesões histológicas no pulmão consistiam principalmente de enfisema alveolar e interlobular intercalado por áreas de congestão e edema, degeneração hialina da parede de alvéolos e infiltrado de macrófagos e eosinófilos, moderado, difuso. A reprodução experimental da doença foi realizada em um bovino, com administração de 0,7mg/kg/PV de L-Triptofano por via oral em dose única. O animal morreu no sétimo dia de experimento. Os sinais clínicos e lesões foram idênticos aos observados na doença espontânea

Submitted by Henrique Hessel Gaeta null (henriquehg@gmail.com) on 2018-04-10T18:24:06Z No. of bitstreams: 1 GaetaHH_TESEvF.pdf: 14579852 bytes, checksum: 747f9ee69906717d6131a1a1b8429cd4 (MD5) / Rejected by Disleide Silvia Valerio Gounella null (disleide@clp.unesp.br), reason: Boa tarde. Fazer as seguintes modificações e inclusões: - O título do arquivo tem que estar com o mesmo nome do título do trabalho defendido; - Acertar o nome do Orientador que está repetido; - Modificar a área de pesquisa, pois a citada não existe no programa de pós-graduação; - Incluir a área de conhecimento. - Colocar as palavras chaves em inglês, mesmo que o termo se repita. Qualquer dúvida, entre em contato. Abs. Disleide Silvia Valerio Gounella Bibliotecária CLP - São Vicente Fone: (13)3569-7154 Mailto: disleide@clp.unesp.br skype: disleidesilviavaleriogounella on 2018-04-10T19:56:17Z (GMT) / Submitted by Henrique Hessel Gaeta null (henriquehg@gmail.com) on 2018-04-10T20:29:36Z No. of bitstreams: 1 Avaliação de compostos polifenólicos nos efeitos induzidos pela sPLA2 de veneno cortálico e botrópico.pdf: 14579852 bytes, checksum: 747f9ee69906717d6131a1a1b8429cd4 (MD5) / Rejected by Disleide Silvia Valerio Gounella null (disleide@clp.unesp.br), reason: Boa tarde. Favor alterar o nome do arquivo Tese.pdf para o título do trabalho. abs. Disleide on 2018-04-11T18:14:56Z (GMT) / Submitted by Henrique Hessel Gaeta null (henriquehg@gmail.com) on 2018-04-11T19:48:02Z No. of bitstreams: 1 Avaliação de compostos polifenólicos nos efeitos induzidos pela sPLA2 de veneno cortálico e botrópico.pdf: 14579852 bytes, checksum: 747f9ee69906717d6131a1a1b8429cd4 (MD5) / Approved for entry into archive by Disleide Silvia Valerio Gounella null (disleide@clp.unesp.br) on 2018-04-11T20:17:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gaeta_hh_me_svic.pdf: 14579852 bytes, checksum: 747f9ee69906717d6131a1a1b8429cd4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-11T20:17:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gaeta_hh_me_svic.pdf: 14579852 bytes, checksum: 747f9ee69906717d6131a1a1b8429cd4 (MD5) Previous issue date: 2018-03-08 / A explosão respiratória está fortemente associada ao processo inflamatório, uma vez que diversos compostos antioxidantes estão envolvidos na potencialização ou neutralização deste processo. Diversos peróxidos inorgânicos e orgânicos são produzidos durante esse processo, como os hidroperóxidos de lipídio. Hidroperóxidos de lipídio são estáveis, extremamente reativos e podem induzir a apoptose celular. Tais lipídios modificados podem ser produzidos durante o processo inflamatório induzido pelas fosfolipases A2 (PLA2) que constituem o veneno de serpentes, que possui como consequência de sua atividade catalítica a produção de ácido araquidônico pela quebra de fosfolipídios de membrana, e estes então seriam oxidados por espécies reativas de oxigênio (ROS), formando os hidroperóxidos araquidônicos, que agravam o quadro inflamatório. Deste modo, nesse trabalho avaliamos o efeito protetor de compostos polifenólicos e extratos ricos em tais compostos de diferentes espécies vegetais no curso da inflamação e miotoxidade e no efeito inflamatório pró-oxidante induzido pela PLA2 purificada de veneno crotálico e botrópico. Nossos resultados mostraram que diversos compostos polifenólicos são capazes de diminuir os efeitos provocados pela PLA2, interagindo diretamente, inibindo a enzima e possivelmente atuando na captura de ROS. / Respiratory burst is strongly associated with inflammatory process, since several antioxidant compounds are involved in potentiation or neutralization of this process. Various inorganic and organic peroxides are produced during this process such as lipid hydroperoxides. Lipid hydroperoxides are stable, highly reactive and can induce cellular apoptosis. Such modified lipids can be produced during the inflammatory process induced by phospholipases A2 (PLA2) which are present in snake venom, and produces, because of its catalytic activity, arachidonic acid by the breakdown of membrane phospholipids, and these would then be oxidized by reactive oxygen species (ROS), forming the arachidonic hydroperoxides, which aggravates inflammation. Thus, in this work we evaluated the protective effect of polyphenolic compounds and extracts rich in such compounds of different plant species throughout the inflammation and myotoxicity and in pro-oxidant effect induced by PLA2 purified from bothrops and crotalus venom. Our results showed that polyphenolic compounds can decrease effects caused by PLA2, by directly interaction, inhibiting the enzyme and possible acting to capture ROS.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandoRFS2.pdf: 536272 bytes, checksum: 3a3c1cb63097447c30d5446bdc4b166a (MD5) Previous issue date: 2005-07-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The Iota, Kappa and Lambda commercial carrageenans are rarely pure and normally contain varying amounts of the other types of carrageenans. The exact amount of impurity depends on the seaweed source and extraction procedure. Then, different analysis methods have been applied for determination of the main constituents of carrageenans because these three carrageenans are extensively used in food, cosmetic and pharmaceutical industry. The electrophoresis of these compounds proved that the carrageenans are constituted by sulfated polysaccharides. These compounds were characterized by colorimetric methods and was observed that the Lambda carrageenan shown the greater value (33.38%) of sulfate. These polymers were examined by means of 13C NMR spectroscopy and infrared spectra. The polysaccharides consisted mainly of units alternating of sulfated galactoses and anhydrogalactoses. The aim of the study was also to test the inflammatory action of these different polysaccharides. A suitable model of inflammation is acute sterile inflammation of the rat hind limb induced by carrageenan. Paw edema was induced by injecting carrageenans (κ, ι and λ) in saline into the hind paw of a male Wistar rats (175–200 g). The pathway to acute inflammation by carrageenan (kappa, iota and lambda) were expressed as time-edema dependence and measured by paw edema volume. For this purpose, was used an apparatus (pakymeter), which makes it possible to measure the inflammation (swelling of the rat foot) with sufficient accuracy. The results showed that κ-carrageenan (1%) have an edema of 3.7 mm and the paw edema increase was time and dose dependent; the ι-carrageenan (0.2%) caused an edema of 4 mm and the λ-carrageenan (1%) caused an edema of 3.6 mm. Other model was used in this study based in the inflammation of pleura for comparatives studies. Injection of carrageenans into the pleural cavity of rat induced an acute inflammatory response characterized by fluid accumulation in the pleural cavity, a large number of neutrophils and raised NO production. The levels of NO were measured by Griess reactive. The ι-carrageenan caused the greater inflammation, because it has high concentration of nitrite/nitrate (63.478 nmoles/rat), exudato volume (1.52 ml) and PMNs (4902 x 103 cells). Quantitative evaluation of inflammations of rats is a useful and important parameter for the evaluation of the efficacy of anti-inflammatory drugs / As carragenanas comerciais Iota, Kappa e Lambda s?o raramente puras e, normalmente, apresentam v?rios outros tipos de pol?meros. A quantidade exata de impurezas depende do m?todo de extra??o e da alga utilizada. Logo, diferentes m?todos t?m sido utilizados para a determina??o do conte?do das carragenanas, tento em vista que elas s?o extensivamente usadas nas ind?strias aliment?cia, de cosm?ticos e farmac?utica. A eletroforese desses compostos provou que eles s?o constitu?dos de polissacar?deos sulfatados. Estes compostos foram caracterizados por m?todos colorim?tricos e foi observado que a carragenana Lambda possui o maior teor de sulfato (33,38%). Esses pol?meros foram analisados por espectroscopias de IV e 13C RNM. Estes polissacar?deos consistem principalmente de unidades alternadas de galactose e anidrogalactose sulfatadas. Foi poss?vel avaliar a a??o inflamat?ria desses diferentes compostos atrav?s de um modelo cl?ssico de inflama??o, que ? o de inflama??o aguda, na pata de ratos, induzida por carragenanas. O edema plantar foi induzido pela inje??o das carragenanas (κ, ι e λ) na pata direita de ratos machos da ra?a Wistar (175-200g). A inflama??o aguda induzida por carragenanas foi expressa pela rela??o tempo-edema e medida pelo volume do edema plantar. Para isto, foi utilizado um paqu?metro, que confere mais precis?o a mensura??o da inflama??o (incha?o na pata do rato). Os resultados mostraram que a carragenana Kappa (1%) induz um edema de 3,7mm e o aumento de volume do edema ? tempo e dose-dependente; a Iota (0,2%) provoca um edema de 4mm; e a Lambda (1%) um edema de 3,6mm. O outro modelo usado neste estudo comparativo ? baseado na inflama??o da pleura (pleurisia). A inje??o de carragenanas na cavidade pleural dos ratos induz uma resposta inflamat?ria aguda caracterizada pelo acumulo de l?quido na cavidade pleural, um grande n?mero de neutr?filos e aumento na produ??o de NO. A carragenana Iota provocou a inflama??o intensa, o que pode ser comprovado pela verifica??o do volume do exudato (1,52 ml), o teor de nitrato/nitrito (63,478 nmol/rato) e a contagem de leuc?citos polimorfonucleares - PMN (4902 x 103 c?lulas). A avalia??o quantitativa da inflama??o em ratos ? um par?metro importante para a avalia??o da efic?cia de drogas antiinflamat?rias

Orientador: Fausto Viterbo / Banca: Paulo do Nascimento Junior / Banca: Luis Vicente Garcia / Resumo: Foi descrito um modelo experimental de estudo de infusão rápida de cristaloide em ratos, discutindo-se os resultados clínicos, laboratoriais e histológicos obtidos com a administração de diferentes volumes. Utilizou-se 56 ratos machos da linhagem Wistar com peso médio de 318 g (± 4), divididos aleatoriamente em sete grupos de oito animais. Os animais dos grupos 1 ao 6 receberam solução de Ringer com lactato por via intravenosa, de maneira rápida (25 ml/min), no volume correspondente a 50%, 100%, 150%, 200%, 250% e 300% da volemia (V), respectivamente, formando os grupos de estudo. Os ratos do grupo 0 foram operados da mesma forma, mas não receberam o cristaloide, constituindo o grupo controle (SHAM). A avaliação laboratorial do sangue e dos sinais clínicos foram realizados em dois tempos (antes e dez minutos após a infusão líquida). A avaliação gravimétrica do edema pulmonar (EP) foi feita com o pulmão esquerdo e a histológica com o pulmão direito, ambos extraídos após eutanásia. As variáveis que apresentavam dois tempos foram analisadas através da diferença entre os momentos, comparando com o grupo controle por uma análise de variância, seguido do teste de Dunnet. As análises do índice pulmonar (IP), seco-úmido (ISU), histologia e desfecho foram realizadas utilizando uma análise de variância (ANOVA). O nível de significância foi fixado em 5%. Os sinais clínicos apresentaram alteração significativa a partir da hidratação com volume correspondente a 2 vezes a V. A queda na taxa de hematócrito foi significativa nos 6 grupos de estudo, confirmando a eficácia do método na promoção de hemodiluição. Os exames laboratoriais de sangue apresentaram-se alterados a partir da infusão de volume igual à V. O EP foi bem caracterizado pelo método gravimétrico e histológico após infusão de líquido de 2,5 vezes a V. A parada respiratória foi observada a partir da hidratação ... / Abstract: It was described an animal model study of crystalloid rapid infusion in rats, discussing the clinical, laboratorial and histological results acquired with the administration of various amounts. Fifty six male Wistar rats were used with a medium weight of 318 (± 4) grams, divided randomly in seven groups of eight animals. The rats of groups 1 to 6 received lactated Ringer's solution intravenously, in a rapid way (25 ml/min), in the amount of 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 and 3 fold its blood volume (BV), respectively, composing the study groups. The rats of group 0 were submitted to surgery the same way, but did not receive the crystalloid, composing the control group (SHAM). The laboratorial evaluation of blood and the clinical signs were made in two times (before and ten minutes after the fluid infusion). The gravimetric assessment of pulmonary edema (PE) was made with the left lung and the histological assessment with the right lung, both extracted after euthanasia. The data with two distinct times were analyzed through the difference between the moments, comparing to the control group with an analysis of variance, followed by Dunnett's test. The evaluation of the lung wet weight/body weight ratio (LW/BW), the lung wet/dry weight ratio (W/D), histology and upshot were performed by an analysis of variance (ANOVA). The findings were significant at the 0.05 level. The clinical signs significantly changed in the 2, 2.5 and 3 fold BV groups. The hematocrit reduction was significant in the six study groups, corroborating the method effectiveness to promote hemodilution. The laboratorial blood exams significantly changed from 1 fold BV group. The PE was clearly identified by the gravimetric and histological assessment in the 2.5 and 3 fold BV. The respiratory arrest was observed in the 1.5, 2, 2.5 and 3 fold BV groups. The volume of 3 fold BV was lethal to all animals of the group. This animal model was easily performed ... / Mestre

A doença do edema afeta os leitões desmamados e é causada por cepas de Escherichia coli adaptadas ao hospedeiro e produtoras da toxina Stx2e. A doença do edema é caracterizada por edema de pálpebras, ataxia, pedalagem, dificuldade locomotora, e morte súbita. No presente estudo foram avaliadas 158 cepas de E. coli positivas para presença do gene codificador da toxina Stx2e isoladas de 62 animais provenientes de 13 granjas localizadas nos Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás e Minas Gerais. As cepas foram submetidas a determinação do perfil de resistência, caracterização dos genes de virulência, determinação do grupo filogenético, expressão da toxina em cultivos de célula Vero, caracterização genotípica através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e polimorfismo do comprimento de fragmentos amplificados com uma única enzima (SE-AFLP). Dentre as 158 cepas stx2e+ foram identificadas 83,5% (132/158) apresentando resistência a três classes de antimicrobianos ou mais. Altos níveis de resistência forma identificados contra tetraciclina, sulfonamidas e florfenicol. A frequência dos genes de virulência associados a doença do edema como a fímbria F18, por exemplo, foi baixa em relação a outros estudos. Todas as 158 cepas testadas apresentaram a expressão da toxina e efeito citotóxico em células Vero. A caracterização dos grupos filogenéticos permitiu a distribuição das cepas nos quatro grupos descritos a seguir: grupo A 27,2% (43/158), grupo B1 3,8% (6/158), grupo B2 39,2% (62/158) e grupo D 29,8% (47/158). As cepas foram caracterizadas através da PFGE e do SE-AFLP e ambas as técnicas apresentaram altos índices discriminatórios (0,98 e 0,99 respectivamente). A associação mais frequente nas duas técnicas genotípicas foi observada em relação ao animal e a granja de origem. Apesar de pertencerem a um patotipo definido (STEC) e de serem altamente especializadas em relação ao hospedeiro, o suíno, foi observada uma grande variabilidade genética e de perfis de resistência entre as cepas de E. coli estudadas. / Edema disease affects weaning piglets and is caused by a host adapted Escherichia coli and producer of Stx2e toxin. The edema disease is characterized by swollen eyelids, ataxia, recumbence, convulsions, paralysis, or sudden death. In the present study were evaluated 158 E. coli strains Stx2e toxin gene positive isolated from 62 animals, from 13 swine herds located at Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás and Minas Gerais States. Strains were submitted to resistance profile determination, virulence genes detection, phylogenetic group characterization, toxin expression in Vero cell culture, genotypic characterization through pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and single enzyme amplified fragments length polymorphism (SEAFLP). Among the 158 strains stx2e+ were identified 83.5% (132/158) resistant to more than three or more classes of antimicrobials, High levels of resistance were found against tetracycline, sulfonamide and florfenicol. The frequency of virulence genes associated to edema disease as F18 fimbriae, for example, was low in relation to other studies. All 158 tested strains presented Stx2e toxin expression and cytotoxic effect in Vero cell culture. The characterization of phylogenetic groups permitted the distribution of strains in four groups described as follow: group A 27.2% (43/158), group B1 3.8% (6/158), group B2 39.2% (62/158) and group D 29.8% (47/158). The strains were characterized through PFGE and the SE-AFLP, and both techniques presented high discriminatory index (0.98 and 0.99 respectively). The association more frequently in both techniques was observed in relation to animal and herd origin. Despite to belong to one defined pathotype (STEC) and to be highly specialized in relation to host, the swine, it was observed a high variability of genetic and resistance profile among tested E. coli.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / No presente estudo avaliou-se os efeitos dos antidepressivos, amitriptilina (amt), clomipramina (clm) e maprotilina (mpt) em reaÃÃes inflamatÃrias. Ratos machos Wistar, 150-200g, foram divididos em cinco grupos (n=6), em experimentos de edema de pata (EP) e migraÃÃo de neutrÃfilos (MN) em bolsas de ar subcutÃnea. Amt, mpt (v.o.) e clm (i.p),10, 30 e 90mg/kg, foram administradas previamente ao estÃmulo inflamatÃrio (EI), carragenina (Cg-500 Â g/pata), fMLP (10â6M) ou dextran (Dx-300 Âg/pata). O edema foi aferido por hidropletismometria (Ugo Basile 7140), imediatamente antes (âtempo zeroâ) e 1, 2, 3 e 4h apÃs a aplicaÃÃo de Cg ou Dx. O aumento no volume da pata (volume do edema) foi calculado pela diferenÃa do volume apÃs a injeÃÃo do EI. Os dados demonstraram uma inibiÃÃo dose-dependente nos edemas de pata induzidos por Cg e Dx, na presenÃa dos antidepressivos. Amt, na maior dose, inibiu o EP induzido por Cg em 51,34% (p<0,05), e em 49% (p<0,05) o EP induzido por Dx. Clm, na maior e menor doses, reduziu o EP da Cg em 100% (p<0,001) e 42,45% (p<0,05), respectivamente, e em 97,26% (p<0,001) e 36% (p<0,05) o EP do Dx, respectivamente. A mpt inibiu o EP por Cg, em 60,9% (p<0,05) para a maior dose, e em 57,49% (p<0,01) e 34,42% (p<0,05) nas duas maiores doses, em ordem decrescente, no EP por Dx. Adicionalmente, amt e clm inibiram de forma dose-dependente a MN, na sexta hora, apÃs administraÃÃo de Cg. Amt na maior dose inibiu a MN induzida por Cg em 49,19% (p<0,05) e em 96,31% (p<0,001) a MN induzida por fMLP. A mpt (40 mg/kg, i.p.) inibiu a MN por Cg em 49,26% (p<0,001), e em 92,38% (p<0,001) a migraÃÃo induzida por fMLP. Do mesmo modo, a clm nas doses de 90. 30 e 10 mg/kg (i.p.), inibiu a MN por Cg em 76,46% (p<0,001), 64,4% (p<0,01) e 49,13% (p<0,05), respectivamente, e em 100% (p<0,001) a MN induzida por fMLP, na maior dose. Na avaliaÃÃo do efeito dos AD na degranulaÃÃo de mastÃcitos, observamos que a clm (90 mg/kg/i.p.) e a mpt (40 mg/kg/i.p.) reverteram em 100% a degranulaÃÃo induzida pelo composto 48/80. Amt (90 mg/kg/v.o.) tambÃm reverteu significativamente a degranulaÃÃo de mastÃcitos, alcanÃando 90,19% (p<0,001) de inibiÃÃo. Tais dados sugerem que amt, clm e mpt possuem significativa atividade antiinflamatÃria evidenciada por seus efeitos inibitÃrios na MN e edema / In the present study it was evaluated the effects of antidepressants amitriptiline (amt), clormipramine (clm) and maprotiline (mpt) in the inflammatory reaction. Male Wistar rats, 150-200g, were divided into five groups (n=6) in experiments of hind paw edema (HE) and neutrophils migration (NM) in subcutaneous air pouches. Amt, mpt (v.o.) and clm (i,p), 10, 30 and 90 mg/kg, were administrated before the inflammatory stimulus carragenin (Cg-500 Âg/paw), fMLP (10 â6M) or dextran (Dx-300 Âg/paw). Paw edema was measured with a hydroplethysmometer (Hugo Basile 7140 Plethysmometer) immediately before ( time equal zero ) and 1, 2, 3 and 4 h after the Cg or Dx challenges. The increase in paw volume (edema volume) was obtained by subtracting the paw volume measured before stimulus injection. The results demonstrate that the antidepressants induce a dose dependent reduction in the HE induced by Cg and Dx. Amt in largest dose used, inhibited the Cg-induced HE by 51,34% (p< 0,05), and the Dx-induced HE by 49% (p<0,05). Clm, in biggest and smallest dose, inhibited Cg-induced HE by 100% (p<0,001) and 42,45% (p< 0,05), respectively, and by 97,26% (p< 0,001) and 36% (p<0,05) the Dx-induced HE, respectively. The largest dose of mpt inhibited the Cg-induced HE by 60,9% (p<0,05) and at the two greatest dose, in decreasing order, inhibited the Dx-induced HE, by 57,49% (p<0,01) and 34,42% (p<0,05), respectively. Additionally, amt e clm inhibited the MN in a dose-dependently manner, in the sixth hour after Cg administration. Amt in largest dose (90 mg/kg/v.o.) inhibited the Cg-induced NM by 49,19% (p<0,05) and by 96,31% (p<0,001) the fMLP-induced NM. The mpt (40 mg/kg/i.p.) inhibited the Cg-induced NM by 49,26% (p<0,001), and by 92,38% (p<0,001) the fMLP-induced NM. In the same way, clm at the dose 90, 30 e 10 mg/kg (i.p.) inhibited Cg-induced NM by 76,46% (p< 0.001), 64,4% (p<0,01) and 49,13% (p<0,05), respectively, but the fMLP-induced NM was inhibited just by the biggest dose by 100% (p<0,001). We observed that clm (90 mg/kg/i.p.) and the mpt (40 mg/kg/i.p) completely reverted the mast cell degranulation induced by the compound 48/80. Amt (90 mg/kg/v.o.) also significantly reverted the mast cell degranulation by 90,19% (p<0,001). These data suggest that amt, clm e mpt have a significant antiinflammatory activity demonstrated by their inhibitory effects on NM and edema