A DoenÃa de Parkinson (DP) à o segundo distÃrbio neurodegenerativo mais comum sendo caracterizado pela depleÃÃo dopaminÃrgica na via nigroestriatal. O tratamento farmacolÃgico da DP à meramento paliativo alÃm de apresentar um perfil de reaÃÃes adversas incapacitante. A neuroinflamaÃÃo e o estresse oxidativo (EO) estÃo envolvidos na fisiopatologia da DP sendo alvos importantes para tratamentos por meio da neuroproteÃÃo. A Myracrodroun urundeuva (MU) tem uso secular e bastante difundido no nordeste brasileiro por suas propriedades antiinflamatÃrias e antioxidantes marcantes. Nesta pesquisa, avaliamos o efeito dos extratos hidralcoÃlicos lÃquido (EHAMU: 5, 10, 20 e 40mg/kg) e seco (ESMU:10 e 20 mg/kg) da MU por 15 dias, via oral, no modelo experimental de DP induzido pela injeÃÃo estriatal unilateral de 6-Hidroxidopamina. No teste do campo aberto nÃo foi observa qualquer alteraÃÃo na movimentaÃÃo animal, nÃo obstante, no teste do Rota Rod foi observado uma melhora na coordenaÃÃo motora nos animais submetidos à lesÃo estriatal e tratados com EHAMU nas doses de 10, 20 e 40 mg/kg e com ESMU nas doses de 10 e 20 mg/kg. No teste rotacional induzido por apomorfina, o EHAMU e o ESMU na dose de 20mg/kg reduziram 77,8% e 86,2%, respectivamente o nÃmero de rotaÃÃes contralaterais em animais com lesÃo estriatal unilateral, na mesma dose os extratos lÃquido e seco conseguiram reverter a depleÃÃo dopaminÃrgica estriatal em 71,7% e 100% respectivamente indicando um Ãtimo efeito neuroprotetor da planta, que foi confirmado pela coloraÃÃo de Nissl e pela imunhistoquÃmica para Tirosina hidroxilase realizadas no tecido do estriado lesionado. O efeito antioxidante da droga foi evidenciado no teste in vitro do DPPH onde o extrato seco na concentraÃÃo de 25μg/ml teve efeito similar ao controle (vitamina E). Observamos que o efeito antioxidante dos extratos testados nÃo està relacionado com a capacidade de seqÃestrar radiacais superÃxido pelo teste in vitro da superÃxido dismutase. O potencial anti-inflamatÃrio e antinociceptivo dos extratos tambÃm foram observados com clareza nos modelos de edema de pata induzido por carragenina e Hargreaves, respectivamente com resultados significativos nas doses de 10 e 20mg/kg. Para verificar o mecanimso de neuroproteÃÃo do EHAMU (20 e 40mg/kg, v.o â 15 dias) tambÃm avaliamos sua aÃÃo sobre a neuroinflamaÃÃo por meio de imunohistoquÃmica para COX-2, iNOS, TNF-α no cÃrtex, estriado e regiÃes CA1, CA3 e Giro parahipocampal do hipocampo onde observamos, com exceÃÃo da regiÃo CA1, uma diminuiÃÃo siginificativa da marcaÃÃo tecidual para estes marcadores de inflamaÃÃo indicando um mecanimso de neuroproteÃÃo tanto para os neurÃnios dopaminÃrgicos estriatais como para os neurÃnios corticais e hipocampais envolvidos na demÃncia apresentada pelos pacientes com a doenÃa em estÃgios mais evoluÃdos. No tecido estriatal verificamos ainda, nos animais tratados com o EHAMU (20 e 40mg/kg, v.o â 15 dias) diminuiÃÃo drÃstica na marcaÃÃo para o fator de transcriÃÃo NF-κB. Observamos que o EHAMU na dose de 40mg/kg diminui a ativaÃÃo microglial por meio da diminuiÃÃo acentuada da marcaÃÃo para o OX-42 asssim como a diminuiÃÃo da astrogliose observadas pela marcaÃÃo insipiente de GFAP no estriado submetido à lesÃo. A MU representa, portanto uma opÃÃo viÃvel e eficiente de neuroptoteÃÃo, apresentando resultados que encorajam os estudos clÃnicos para que uma nova estratÃrgia terapÃutica emirja nÃo como mero paliativo, mas como uma terapia que diminÃa ou, pelo menos, torne mais lenta a progressÃo da doenÃa.

nÃo hà / The present study evaluated the anticancer activity of sesquiterpene lactone 15-deoxygoyazensolido. Citotoxic activity was initially evaluated by the MTT assay, where 15-deoxygoyazensolido showed IC50 < 4 &#956;g/mL in all tested cell lines, varying from 0,09 to 0,56 &#956;g/mL. This activity was confirmed by Trypan Blue assay, which 15-deoxygoyazensolido showed activity at 0,25, 0,5 and 1 &#956;g/mL after 24h exposition in HL-60 cells. Afterwards, it was reveled by incorporation test of BrdU that citotoxic activity of 15-deoxygoyazensolido is related to inhibition of DNA synthesis. Besides, on the assays for induction of cellular apoptosis showed morphological alterations, DNA fragmentation, mitochondria depolarization, maintaining membrane integrity, typical apoptosis sight. The in vivo activity of 15-deoxygoyazensolido was evaluated using sarmoca 180 tumor in mice and Walker 256 tumor in rats. The sesquiterpene lactone inhibited tumor growth in a dose-dependent manner, but it was not capable to increase mice survival. The administration of 15-deoxygoyazensolido at dose 10 mg/m2/day inhibited 49,39% of solid Sarcoma 180 tumor development in transplanted mice. The histophatological assay in mice organs reveled moderate liver toxicity but these effects are considered reversible. The administration of sesquiterpene lactone inhibited Walker 256 tumor development at doses 5 e 10 mg/kg/day in transplanted rats about 34,05 e 38,80 % respectively. Concerning allergenic properties, it was not detected anti-lactone IgE antibody synthesis in swiss mice immunized with 100 &#956;g of 15-deoxygoyazensolido. The results show that 15-deoxigoiazensolido has a potent anticancer activity, being apoptosis the mechanism of action which takes tumor cells to death. / O presente estudo procurou avaliar a atividade anticÃncer da lactona sesquiterpÃnica 15-deoxigoiazensolido. A atividade citotÃxica foi inicialmente avaliada pelo mÃtodo do MTT, onde o 15-deoxigoiazensolido obteve uma IC50 < 4 &#956;g/mL em todas as linhagens testadas variando de 0,09 a 0,56 &#956;g/mL. Essa atividade foi confirmada pelo mÃtodo do Azul de Tripan, no qual o 15-deoxigoiazensolido mostrou atividade nas doses de 0,25, 0,5 e 1 &#956;g/mL apÃs exposiÃÃo por 24 h na linhagem HL-60. Em seguida, foi revelado pelo teste de incorporaÃÃo do Brdu que a atividade citotÃxica do 15-deoxigoiazensolido està relacionada com a inibiÃÃo da sÃntese de DNA. AlÃm disso, os ensaios que avaliam a induÃÃo de morte celular mostraram alteraÃÃes morfolÃgicas, fragmentaÃÃo do DNA, despolarizaÃÃo da mitocÃndria e manutenÃÃo da integridade da membrana celular, caracterÃsticas do processo de apoptose. A atividade in vivo do 15-deoxigoiazensolido foi avaliado utilizando-se o sarcoma 180 em camundongos e Walker 256 em ratos. A lactona sesquiterpÃnica inibiu o crescimento do volume tumoral do sarcoma 180 de maneira dose dependente, mas nÃo foi capaz de aumentar a sobrevida dos animais. A administraÃÃo do 15-deoxigoiazensolido na dose de 10 mg/m2/dia inibiu 49,39 % do desenvolvimento do tumor sÃlido em camundongos transplantados com Sarcoma 180. A anÃlise histopatolÃgica nos ÃrgÃos dos camundongos revelou que houve moderada toxicidade no fÃgado, mas os efeitos sÃo passiveis de reversibilidade. A administraÃÃo da lactona sesquiterpÃnica nas doses de 5 e 10 mg/kg/dia em ratos transplantados com o tumor de Walker 256 inibiu seu desenvolvimento em cerca de 34,05 e 38,80 % respectivamente. Em relaÃÃo ao seu potencial alergÃnico, nÃo foi detectado sÃntese de anticorpos IgE anti-lactona em camundongos Swiss. Os resultados mostram que o 15-deoxigoiazensolido tem potente atividade anticÃncer, sendo a apoptose o mecanismo de aÃÃo que leva as cÃlulas tumorais à morte.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-11Bitstream added on 2014-06-13T18:26:28Z : No. of bitstreams: 1 nascimento_tb_me_botib.pdf: 563358 bytes, checksum: f368726d0ce2a3b729d717d9b8eed2e9 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O estresse é entendido como um processo complexo e multidimensional, cuja resposta adaptativa é vista como um processo dinâmico no qual mecanismos fisiológicos do indivíduo mudam continuamente para ajustarem-se ao ambiente. Esse fator pode contribuir para alterações na função cardíaca, associada, ou não, ao trânsito de Ca2+ e a alteração vascular devido ao aumento da atividade da via l-arginina/óxido nítrico. A obesidade é uma doença complexa, caracterizada pelo acúmulo excessivo de tecido adiposo, levando a disfunções cardíacas e vasculares, que podem estar envolvidas com alteração no fluxo de Ca2+ e comprometimento da resposta vasodilatadora. O estresse é considerado um fator ambiental, portanto, responsável por alterações no balanço energético e peso corpóreo, uma vez que o peso corpóreo é a interação entre fatores genéticos e ambientais. Devido à escassez de estudos que avaliam o estresse crônico e dieta hipercalórica nas alterações cardiovasculares, e considerando a hipótese de que esta associação é capaz de atenuar o desenvolvimento da obesidade e intensificar as alterações cardiovasculares, o objetivo do presente trabalho foi confirmar essa hipótese em animais submetidos à dieta hipercalórica e ao estresse crônico. Ratos machos Wistar, divididos em quatro grupos: DN: dieta normocalórica; DN/Es: dieta normocalórica e submetidos ao estresse crônico; DH: dieta hipercalórica; DH/Es: dieta hipercalórica e submetidos ao estresse crônico, foram avaliados quanto aos perfis nutricionais, metabólicos e a remodelação cardiovascular. Os dados demonstraram que o estresse crônico impediu o desenvolvimento da obesidade, e em oposição à hipótese, o estresse crônico melhorou a função cardíaca e vascular, independente do tipo de dieta utilizada / The stress is a complex and multidimensional process, the adaptive response is a dynamic process, in which individual physiologic mechanisms change to adjust to the environment, that causes alteration in the cardiac function, involved, or not, with Ca2+ flux and vascular alterations due to the increase of the l-arginine/nitric oxide pathway activity. The obesity is a complex disease, characterized by the excess of adipose tissue that causes cardiac and vascular dysfunction, involved with Ca2+ flux alterations and injury the vasodilating response. The stress is considered an environmental factor, therefore, it is responsible for the energetic balance alterations and weight gain, once the body weight is an interaction between genetic and environmental factors. There are few studies about chronic stress associated with the hypercaloric diet that evaluate the cardiovascular alterations, and considering the idea that this association can decrease the obesity development and increase the cardiovascular alterations, the aim of this research was evaluate the cardiovascular alterations and the obesity development in animals submitted to the hypercaloric diet and chronic stress. Male Wistar rats were separated into four groups: DN: standard diet; DN/Es: standard diet and chronic stress; DH: hypercaloric diet; DH/Es: hypercaloric diet and chronic stress were evaluated in relation to the nutritional and metabolic profile and cardiovascular remodellating. The data show that the chronic stress inhibited the obesity development, and different of the initial idea, the chronic stress improved the cardiac and vascular function, in both diets

O citocromo P450 (CYP450) e suas isoformas podem ser reguladas por compostos exogenos, endogenos e patologias. O Diabetes Mellitus (DM) e uma sindrome de etiologia multipla, decorrente da incapacidade da insulina em exercer adequadamente sua acao, sendo capaz de alterar a atividade do CYP450. Este estudo avalia a influencia do DM na atividade das isoformas CYP2D6 e CYP3A4 utilizando como marcadores de atividade o metoprolol (MET) e o midazolam (MDZ) respectivamente. Ratos machos Wistar, 200-250 g, foram tratados com dose unica, por via oral 20 mg/Kg para MET e 15 mg/Kg para MDZ. O DM foi induzido por estreptozotocina (50 mg/Kg) por via intravenosa. Midazolam, metoprolol e alfa-hidroximetoprolol foram analisados em plasma por cromatografia liquida de ultraperformance (coluna XR-ODS 100 mm x 3,0 mm) acoplada a espectrometro de massas. O preparo das amostras foi realizado por extracao liquido-liquido. A analise farmacocinetica do MDZ em ratos mostrou reducao significativa (54,01 vs 12,24 L/h/kg) no clearance dos animais diabeticos em relacao ao controle e aumento significativo (402,66 vs 1742,6 h.ng/mL) do AUC0- ‡ no grupo diabetico quando comparado com o controle. O DM modificou o AUC0- ‡ do MET no grupo diabetico em relacao ao controle (998,09 vs 348,45 h.ng/mL) acompanhado de reducao significativa do clearance no grupo diabetico (46,85 vs 17,80 L/h/kg). Desde que nao foi observada qualquer alteracao na farmacocinetica do alfa-hidroximetoprolol, o aumento do AUC0- ‡ do MET pode ser devido a inibicao de outra via de metabolizacao pelo DM, como comprovado pela alteracao na via do CYP3A. A analise dos dados sugere que o DM inibe a atividade do CYP3A4 e nao exerce influencia sobre a atividade do CYP2D6 / Cytochrome P450 (CYP450) and its isoforms can be regulated by exogenous and endogenous compounds and also diseases. Diabetes Mellitus (DM) is a multiple etiology syndrome resulting from a lack or inability of insulin to properly exercise its action, that can modify the CYP450 activity. This research evaluates the influence of DM on CYP2D6 and CYP3A4 isoforms activity employing metoprolol (MET) and midazolam (MDZ) as probe drugs. Male Wistar rats 200-250g, were treated with single oral dose of 20mg/kg for MET and 15 mg/kg for MDZ. Diabetes mellitus was induced by streptozotocin (50mg/kg) intravenously administered. Midazolam, metoprolol and alpha-hydroxymetoprolol were analyzed in plasma by ultraperformance liquid chromatography (column XR-ODS) coupled to a mass spectrometer. The sample preparation was perfomed using liquid-liquid extraction. Pharmacokinetics of MDZ in rats showed a significant decrease (54,01 vs 12,24 L/h/kg) of total clearance in the diabetic animals compared to control group and a significant increase (402.66 vs 1742.6 h.ng/mL) AUC0- ‡ in the diabetic group compared with the control. The DM altered the AUC0- ‡ of MET in the diabetic group compared to control (998.09 vs 348.45 h.ng/mL) followed by a significant decrease in clearance in the diabetic group (46.85 vs 17.80 L/h/kg). Since no changes in alpha- hydroxymetoprolol pharmacokinetics was observed, the increase in MET AUC0- ‡ can be explained by DM inhibition of other MET metabolization pathways. Data analysis suggests that DM inhibits CYP3A4 activity and had no effect on CYP2D6 activity / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-02-25T17:18:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5) PDF - Camilla Aquino Azevedo de Lucena.pdf: 2741876 bytes, checksum: a08dcc542ad13293807b17d3b9a600df (MD5) / Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-03-09T12:34:51Z No. of bitstreams: 1 PDF - Camilla Aquino Azevedo de Lucena.pdf: 2741876 bytes, checksum: a08dcc542ad13293807b17d3b9a600df (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-03-09T12:38:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Camilla Aquino Azevedo de Lucena.pdf: 2741876 bytes, checksum: a08dcc542ad13293807b17d3b9a600df (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-09T12:38:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Camilla Aquino Azevedo de Lucena.pdf: 2741876 bytes, checksum: a08dcc542ad13293807b17d3b9a600df (MD5) Previous issue date: 2014-09-08 / Biodegradable films prepared from biopolymers such as polysaccharides, proteins, lipids or combinations of those components have received great interest in recent years. Xylan is the major hemicellulose in the plant kingdom and it accounts for onethird of renewable biomass available on earth. The aim of this work was to develop and characterize biodegradable films of xylan from corn cobs with potential use as transdermal formulations. Films were produced by casting the film-forming dispersions with different concentrations of xylan and glycerol. In addition, the gelatin was incorporated to xylan films. According to macroscopic characterization, three films were selected to evaluate the thickness, solubility, biodegradability, opacity, water content and microscopic morphology of the films. The best formulation was selected to study the incorporation of the drug (drug content and release profile). The results show that the macroscopic aspect of xylan/gelatin films was better than films containing only xylan, probably due the high solubility of the gelatin in the films. The increase in the polysaccharide concentration affected the films solubility, opacity, water content and thickness of films. The drug content was 87.88% and the drug release occurred mainly in the first 4h, followed by a slow release until the end of the study. / Filmes biodegradáveis desenvolvidos a partir de biopolímeros como polissacarídeos, proteínas, lipídeos ou através da combinação destes polímeros tem recebido grande interesse nos últimos anos. A xilana é a principal hemicelulose presente no reino vegetal e é responsável por um terço da biomassa renovável disponível na terra. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e caracterizar filmes biodegradáveis à base xilana de sabugo de milho com potencial uso em formulações transdérmicas. Os filmes foram produzidos através da secagem das dispersões filmogênicas com diferentes concentrações de xilana e glicerol. Adicionalmente, a gelatina foi incorporada aos filmes. De acordo com a caracterização macroscópica foram escolhidas três formulações para caracterização de espessura, solubilidade, biodegradabilidade, opacidade, conteúdo de água e análise microscópica. Com base nestes resultados foi escolhido o filme para os estudos de incorporação do fármaco (teor e perfil de liberação). Os resultados mostraram que o aspecto macroscópico dos filmes de xilana/gelatina foi melhor que o dos filmes de xilana, isso ocorreu provavelmente devido à alta solubilidade da gelatina. O aumento da concentração de xilana afetou a solubilidade, conteúdo de água, espessura e opacidade dos filmes. O teor de diclofenaco sódico presente no filme foi de 87,88% e a liberação do fármaco se deu principalmente nas primeiras 4 horas, seguida de uma liberação lenta até o final do estudo.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-30T15:22:16Z No. of bitstreams: 2 Melo, Ariane Carla Campos de-2013-dissertação.pdf: 4034937 bytes, checksum: 463f8b0f4d2e9a65e273d336d96f0691 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-30T15:24:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Melo, Ariane Carla Campos de-2013-dissertação.pdf: 4034937 bytes, checksum: 463f8b0f4d2e9a65e273d336d96f0691 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-30T15:24:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Melo, Ariane Carla Campos de-2013-dissertação.pdf: 4034937 bytes, checksum: 463f8b0f4d2e9a65e273d336d96f0691 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-08-02 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Lamivudine and Efavirenz are anti-HIV drug largely used as, respectively a non-nucleoside and a nucleoside reverse transcriptase inhibitor as part of antiretroviral therapies. During the tests to obtain co-crystals of efavirenz with lamivudine it was obtained a novel crystalline phase, the polymorph of the hydrochloride salt of lamivudine. The structural and conformational analysis of this crystal modification showed that this keeps similarities, in intramolecular and intermolecular level, respectively with lamivudine hydrochloride and lamivudine hydrochloride monohydrate. Based on the intermolecular analysis and packing efficiency is expected that the polymorph of the hydrochloride salt of lamivudine is more soluble than the anhydrous phase. There are few reports on efavirenz solid state structures and behaviors. Crystal engineering strategies have not been well-exploited for this drug. In this sense, we delineate our synthesis strategy from the structural comparison and possibility of formation of intermolecular interactions patterns similar to those observed in the cocrystal of efavirenz and 4,4’-bipyridine. Two 4,4’-bipyridine-like compounds whose heterocycles are spaced by either an ethylene and an ethane moiety were cocrystallized together with efavirenz into solid state forms isostructural with respect to that of the drug cocrystal with 4,4’-bipyridine. The formation of a three-molecule entity based mainly on the hydrogen bonding donation from two efavirenz molecules to both pyridyl nitrogens of each coformer unit was kept in the three efavirenz cocrystals. The introduction of spacer groups in the coformers has altered the pattern of weak non-classical hydrogen bonds of the type C— H· · ·O. This intriduction was also related to the formation of a π-π stacking interaction between pyridyl rings of the ethane-spaced conformer. Furthermore, a polymorphic form of efavirenz with only one molecule in the asymmetric unit is reported for the first time here. This polymorph crystallizes in the monoclinic system and space group C2, strictly similar to form / Lamivudina e Efavirenz são fármacos anti-VIH utilizados respectivamente como um inibidor não nucleosídeo da transcriptase reversa e inibidor nucleosídeo da transcriptase reversa como parte de terapias anti-retrovirais. Durante os ensaios destinados a obtenção dos co-cristais de efavirenz com lamivudina obteve-se uma fase cristalina inédita, o polimorfo do cloridrato de lamivudina. As análises conformacionais e estruturais desta modificação cristalina revelaram que a mesma guarda semelhanças em nível intramolecular e intermolecular, respectivamente com o cloridrato de lamivudina e com o cloridrato monohidratado de lamivudina. Baseada na análise intermolecular e na eficiência do empacotamento espera-se que o polimorfo do cloridrato de lamivudina seja mais solúvel que a fase anidra. Existem poucos registros de comportamento e estruturas da fase sólida do efavirenz. Estratégias de engenharia de cristais não têm sido bem exploradas com esse fármaco. Nesse sentindo, delineamos nossa estratégia de síntese a partir da comparação estrutural e possibilidade de formação de padrões de interações intermoleculares similares àquelas observadas no cocristal de efavirenz com 4,4’ - bipiridina. Dois compostos semelhantes a 4,4’- bipiridina, BPE e BPA, cujos heterociclos são respectivamente separados por um grupo etileno respectivamente e um grupo etano cristalizaram com o efavirenz em formas sólidas isoestruturais aquela obtida com a 4,4’- bipiridina. A formação de uma entidade tri-molecular baseada principalmente em doações de ligações de hidrogênio de duas moléculas de efavirenz para ambos os nitrogênios piridinícos de cada unidade do co-cristalizante foi mantida nos três cocristais de efavirenz. A introdução de grupos espaçadores nos co-cristais alterou o padrão das ligações de hidrogênio do tipo C—H· · ·O. A introdução destes grupos também está relacionada com a formação de interações do tipo π-π entre os anéis de piridil do cocristalizante espaçado com etano. Além disso, uma forma polimórfica do fármaco efavirenz com apenas uma molécula na unidade assimétrica é relatada pela primeira vez aqui. Este polimorfo, forma V, cristaliza no sistema monoclínico e grupo espacial C2, e estritamente similar à forma V.

Resumo: O estresse é entendido como um processo complexo e multidimensional, cuja resposta adaptativa é vista como um processo dinâmico no qual mecanismos fisiológicos do indivíduo mudam continuamente para ajustarem-se ao ambiente. Esse fator pode contribuir para alterações na função cardíaca, associada, ou não, ao trânsito de Ca2+ e a alteração vascular devido ao aumento da atividade da via l-arginina/óxido nítrico. A obesidade é uma doença complexa, caracterizada pelo acúmulo excessivo de tecido adiposo, levando a disfunções cardíacas e vasculares, que podem estar envolvidas com alteração no fluxo de Ca2+ e comprometimento da resposta vasodilatadora. O estresse é considerado um fator ambiental, portanto, responsável por alterações no balanço energético e peso corpóreo, uma vez que o peso corpóreo é a interação entre fatores genéticos e ambientais. Devido à escassez de estudos que avaliam o estresse crônico e dieta hipercalórica nas alterações cardiovasculares, e considerando a hipótese de que esta associação é capaz de atenuar o desenvolvimento da obesidade e intensificar as alterações cardiovasculares, o objetivo do presente trabalho foi confirmar essa hipótese em animais submetidos à dieta hipercalórica e ao estresse crônico. Ratos machos Wistar, divididos em quatro grupos: DN: dieta normocalórica; DN/Es: dieta normocalórica e submetidos ao estresse crônico; DH: dieta hipercalórica; DH/Es: dieta hipercalórica e submetidos ao estresse crônico, foram avaliados quanto aos perfis nutricionais, metabólicos e a remodelação cardiovascular. Os dados demonstraram que o estresse crônico impediu o desenvolvimento da obesidade, e em oposição à hipótese, o estresse crônico melhorou a função cardíaca e vascular, independente do tipo de dieta utilizada / Abstract: The stress is a complex and multidimensional process, the adaptive response is a dynamic process, in which individual physiologic mechanisms change to adjust to the environment, that causes alteration in the cardiac function, involved, or not, with Ca2+ flux and vascular alterations due to the increase of the l-arginine/nitric oxide pathway activity. The obesity is a complex disease, characterized by the excess of adipose tissue that causes cardiac and vascular dysfunction, involved with Ca2+ flux alterations and injury the vasodilating response. The stress is considered an environmental factor, therefore, it is responsible for the energetic balance alterations and weight gain, once the body weight is an interaction between genetic and environmental factors. There are few studies about chronic stress associated with the hypercaloric diet that evaluate the cardiovascular alterations, and considering the idea that this association can decrease the obesity development and increase the cardiovascular alterations, the aim of this research was evaluate the cardiovascular alterations and the obesity development in animals submitted to the hypercaloric diet and chronic stress. Male Wistar rats were separated into four groups: DN: standard diet; DN/Es: standard diet and chronic stress; DH: hypercaloric diet; DH/Es: hypercaloric diet and chronic stress were evaluated in relation to the nutritional and metabolic profile and cardiovascular remodellating. The data show that the chronic stress inhibited the obesity development, and different of the initial idea, the chronic stress improved the cardiac and vascular function, in both diets / Orientador: Sandra Cordellini / Coorientador: Antônio Carlos Cicogna / Banca: Rita de Cássia Aleixo Tostes Passaglia / Banca: André Sampaio Pupo / Mestre

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Nor-&#946;-lapachone (N&#946;L), a derivative compound obtained from nor-lapachol, is an important anti-cancer prototype. This semisynthetic naphthoquinone has been described as cytotoxic agent against several cancer cell lines. Regrettably, the use of this molecule has been limited due to the poor lipid solubility of compounds from the quinone class. In order to overcome this difficulty, we propose the synthesis of poly (lactide-co-glycolide) (PLGA) microparticles for N&#946;L delivery. In this work, we characterize N&#946;L-loaded microcapsules fabricated using the emulsification/solvent extraction technique. Features such as surface morphology, particle size distribution, zeta potential, optical absorption, Raman and Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy, thermal analysis data, drug encapsulation efficiency, drug release kinetics and in vitro cytotoxicity were obtained. The microcapsules thus obtained showed appropriate morphological features (regular spherical shape, smooth surface and absence of pores). The presence of the compound inside the microcapsule was confirmed by Raman spectroscopy, and their release showed a biphasic profile. The first phase of the biphasic profile was due to dispersion of drug into the microcapsule surfaces. Quantum DFT calculations were also performed to estimate typical interaction energies between a single N&#946;L molecule and the surface of the microparticles, with predicted binding energies varying from 6 kcal/mol to 52 kcal/mol. Spherical microcapsules with size of 1.03  0.46 &#956;m were produced with encapsulation efficiency of approximately 19%. The N&#946;L-loaded PLGA microcapsules exhibited a pronounced initial burst release. After in vitro treatment with PLGA microcapsules loaded with N&#946;L, it can be seen the incorporation of the microcapsules in the first hour. The cytotoxic activity of N&#946;L against a set of cancer cell lines was investigated. In particular, the use of N&#946;L against prostate PC3M cells was more effective when delivered in PLGA microcapsules compared to the free drug. In vivo assay, Sarcoma 180, reduces tumor weight approximately 37% in treated group with microcapsules loaded with N&#946;L compared to negative control, without significant commitments in biochemical and hematological biomarkers. There was no free N&#946;L absorption by the intraperitoneal route for the group treated with the free drug. These results suggest that PLGA microcapsules loaded with N&#946;L can be used as an alternative delivery system to N&#946;L administration at the prostate cancer therapy. / Nor-&#946;-lapachona (N&#946;L), uma naftoquinona semissintÃtica derivada do nor-lapachol, à um importante protÃtipo anticÃncer descrito como agente citotÃxico contra diferentes tipos de cÃlulas neoplÃsicas. Entretanto, o seu uso tem sido limitado devido à sua baixa lipossolubilidade caracterÃstica de compostos da classe das quinona. A fim de impulsionar sua utilizaÃÃo como agente terapÃutico, foi proposta a preparaÃÃo de micropartÃculas de PLGA (poli-Ãcido lÃctico-co-Ãcido glicÃlido) como sistema de entrega de N&#946;L. Neste trabalho, caracterizamos as microcÃpsulas produzidas pela tÃcnica de emulsificaÃÃo e extraÃÃo por solvente, carregadas com N&#946;L. CaracterÃsticas como morfologia de superfÃcie, distribuiÃÃo de tamanho de partÃcula, potencial zeta, absorÃÃo Ãptica, espectroscopia Raman e infravermelho com transformada de Fourier (FT-IR), dados de anÃlise tÃrmica, eficiÃncia de encapsulaÃÃo, cinÃtica de liberaÃÃo do fÃrmaco e citotoxicidade foram obtidas. As microcÃpsulas assim obtidas apresentaram caracterÃsticas morfolÃgicas adequadas (forma esfÃrica regular, superfÃcie lisa e ausÃncia de poros em sua superfÃcie). A presenÃa de N&#946;L nas microcÃpsulas foi confirmada por espectroscopia Raman e a sua liberaÃÃo apresentou um perfil bifÃsico, sendo que a primeira fase deste perfil corresponde à dispersÃo do fÃrmaco nas superfÃcies de microcÃpsulas. CÃlculos DFT tambÃm foram realizados para estimar as energias de interacÃÃo normal entre um Ãnico N&#946;L molÃcula e a superfÃcie das micropartÃculas, com energias de ligaÃÃo previstos variando de 6 kcal / mol a 52 kcal / mol. MicrocÃpsulas esfÃricas com um tamanho de 1,03  0,46 &#956;m foram produzidas com uma eficiÃncia de encapsulamento de aproximadamente 19% e uma rÃpida liberaÃÃo do conteÃdo encapsulado nas primeiras horas. ApÃs tratamento in vitro com microcÃpsulas de PLGA carregadas com N&#946;L, pode-se observar a incorporaÃÃo das microcÃpsulas na primeira hora. A atividade citotÃxica de microcÃpsulas de N&#946;L contra um painel de linhagens de cÃlulas neoplÃsicas foi investigada. Em particular, a utilizaÃÃo de microcÃpsula contendo N&#946;L contra cÃlulas tumorais de prÃstata da linhagem PC3M mostrou-se mais citotÃxica sendo entregue em microcÃpsulas de PLGA quando comparada com a molÃcula livre. Estudo in vivo em modelo murino, Sarcoma 180, apresenta uma reduÃÃo de aproximadamente 37% do peso do tumor no grupo tratado com microcÃpsulas de N&#946;L comparado ao controle negativo, sem relevantes comprometimentos nos marcadores bioquÃmicos e hematolÃgicos. NÃo houve absorÃÃo de N&#946;L livre por via intraperitoneal pelo grupo tratado com a droga livre. Tais resultados nos sugerem que as microcÃpsulas de PLGA carregadas com N&#946;L podem ser utilizadas como sistema de entrega alternativo na administraÃÃo N&#946;L no tratamento do cÃncer da prÃstata.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A trans-desidrocrotonina (t-DCTN) Ã o principal composto diterpenÃide presente no extrato da casca do caule de Croton cajucara (Euphorbiaceae). Este diterpeno possui um amplo espectro de atividades farmacolÃgicas que inclui antiinflamatÃria, antinociceptiva, e efeitos hipoglicemiante e hipolipidÃmico. SubstÃncias com esse perfil farmacolÃgico sÃo comumente associadas a efeitos deletÃrios sobre o fÃgado. Tendo em vista que estudos in vitro e in vivo mostraram uma hepatotoxicidade da t-DCTN, o presente estudo objetivou analisar em maior profundidade o seu potencial em causar dano hepÃtico e, entÃo, buscar estratÃgias farmacolÃgicas para mitigar tal toxicidade. Desta forma, os experimentos iniciais foram direcionados para observaÃÃo do dano hepÃtico em camundongos que receberam, por gavagem, uma Ãnica (aguda) ou repetidas administraÃÃes de t-DCTN, em doses que variam de 10 a 300 mg/kg. A segunda sÃrie de experiÃncias foi projetada para avaliar os efeitos do (i) prÃ-condicionamento com a menor dose de t-DCTN (10 mg/kg) ou etanol (1 g/kg), e do (ii) prÃ-tratamento com Vitamina E ou N-acetilcisteÃna (NAC) no dano hepÃtico associado a altas doses de t-DCTN em camundongos. Um possÃvel envolvimento de NO tambÃm foi verificado no efeito prÃ-condicionante de t-DCTN e/ou Etanol. t-DCTN em doses mais altas (100 e 300 mg/kg, v.o.) causou dano hepÃtico severo, comprovado por aumentos significativos (p <0,001) nos nÃveis sÃricos de ALT e AST e por alteraÃÃes histopatolÃgicas, quando administrada isolada ou repetidamente. Em contraste, as doses de 10 e 30 mg/kg nÃo promoveram alteraÃÃes significantes, sugerindo que a toxicidade da t-DCTN Ã dose dependente. O prÃ-condicionamento farmacolÃgico com t-DCTN (10 mg/kg, v.o.) e Etanol (1 g/kg, v.o.) atenuaram significativamente (p <0,001) a hepatotoxicidade associada a alta dose (100 mg/kg) de t-DCTN, como comprovado pela reduÃÃo na atividade das transaminases sÃricas, como tambÃm nas lesÃes hepÃticas. A suplementaÃÃo em camundongos com L-arginina, um substrato para geraÃÃo de NO, preveniu parcialmente o efeito hepatotÃxico da t-DCTN, possivelmente devido a um aumento na microcirculaÃÃo hepÃtica. Adicionalmente, o prÃ-tratamento com Vitamina E, mas nÃo com NAC, reduziu efetivamente os efeitos hepatotÃxicos de t-DCTN, comprovado pela diminuiÃÃo dos nÃveis sÃricos de ALT e AST, de TBARS hepÃtico e das alteraÃÃes histolÃgicas. Isto sugere que Vitamina E protege contra o aumento da peroxidaÃÃo lipÃdica hepÃtica promovido por alta dose de t-DCTN. Paradoxalmente, comparada a outros hepatotoxicantes relatados na literatura, a t-DCTN aumenta os nÃveis de glutationa hepÃtica que pode ser uma conseqÃÃncia do estresse oxidativo prolongado. Em conjunto, estes resultados confirmam as observaÃÃes anteriores sobre o potencial hepatotÃxico da t-DCTN e sugerem que um aumento no estresse oxidativo e na peroxidaÃÃo lipÃdica das membranas dos hepatÃcitos contribui para o dano hepÃtico desse diterpeno. A suplementaÃÃo com Vitamina E, um antioxidante lipossolÃvel, ou o prÃ-condicionamento com doses menores de t-DCTN ou etanol poderiam ser profilaticamente Ãtil para superar os efeitos hepatotÃxicos de t-DCTN / The trans-dehydrocrotonin (t-DCTN) is a major diterpenoid compound present in bark extracts of Croton cajucara (Euphorbiaceae) stem. This diterpene possesses a wide spectrum of pharmacological activity that include anti-inflammatory, antinociceptive, hypoglycemic and antihyperlipidemic effects. Deleterious effects on liver are not uncommon with substances having this pharmacological profile. Keeping in view the reported hepatotoxicity of t-DCTN in vitro and in vivo, the present study was carried out to analyse in greater depth its potential to cause hepatic damage and then to seek pharmacological strategies to mitigate such a toxicity. Accordingly, our initial experiments were aimed to observe the hepatic damage in mice that received the single (acute) or repeated administrations of t-DCTN by oral gavage, at doses ranging from 10 to 300 mg/kg. The second series of experiments were designed to evaluate the effects of (i) pre-conditioning with a smaller dose t-DCTN or ethanol, and (ii) pre-treatments with Vitamin E or NAC on high-dose -associated hepatic injury in mice. A possible involvement of NO was also verified on the pre-conditioning effects of t-DCTN and or Ethanol. t-DCTN at higher doses (100 e 300 mg/kg, v.o.) caused severe hepatic damage as evidenced by significant (p<0,001) increases in the serum levels of ALT and AST and histopathological alterations, whether administered singly or repeatedly. In contrast, at the doses of 10 e 30 mg/kg, there were no significant alterations suggesting that the toxicity is a dose-related one. Pharmacological pre-conditioning with t-DCTN (10 mg/kg, p.o.) e Ethanol (1 g/kg, p.o.) significantly (p<0,001) attenuated the high-dose t-DCTN (100 mg/kg) -associated hepatotoxicity, as evidenced by reductions in serum enzyme activities as well as the hepatic lesions. In mice supplemented with L-arginine, the substrate for NO generation only partially prevented the hepatotoxic effect of t-DCTN most possibly due to an improved hepatic microcirculation. Additionally, pre-treatment with Vitamin E but not the NAC effectively reduced hepatotoxic effect of t-DCTN, evidenced by diminished serum levels of ALT, AST and hepatic TBARS and histological alterations. This suggests that Vitamine E protects against the increased hepatic lipid peroxidation promoted by high-dose t-DCTN. Paradoxically, compared to other hepatotoxicants reported in literature, t-DCTN enhanced the hepatic glutathione levels, which may be a consequence of prolonged oxidative stress. Taken together, these results confirm the earlier observations on the hepatotoxic potential of t-DCTN and suggest that an increased oxidative stress and lipid peroxidation of hepatocyte membranes contributes to hepatic damage. Supplementation with liposoluble antioxidant Vitamina E, or prÃ-conditioning with smaller doses of t-DCTN or ethanol might be useful prophylactically to overcome hepatotoxic effects of t-DCTN

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / No presente estudo avaliou-se os efeitos dos antidepressivos, amitriptilina (amt), clomipramina (clm) e maprotilina (mpt) em reaÃÃes inflamatÃrias. Ratos machos Wistar, 150-200g, foram divididos em cinco grupos (n=6), em experimentos de edema de pata (EP) e migraÃÃo de neutrÃfilos (MN) em bolsas de ar subcutÃnea. Amt, mpt (v.o.) e clm (i.p),10, 30 e 90mg/kg, foram administradas previamente ao estÃmulo inflamatÃrio (EI), carragenina (Cg-500 Â g/pata), fMLP (10â6M) ou dextran (Dx-300 Âg/pata). O edema foi aferido por hidropletismometria (Ugo Basile 7140), imediatamente antes (âtempo zeroâ) e 1, 2, 3 e 4h apÃs a aplicaÃÃo de Cg ou Dx. O aumento no volume da pata (volume do edema) foi calculado pela diferenÃa do volume apÃs a injeÃÃo do EI. Os dados demonstraram uma inibiÃÃo dose-dependente nos edemas de pata induzidos por Cg e Dx, na presenÃa dos antidepressivos. Amt, na maior dose, inibiu o EP induzido por Cg em 51,34% (p<0,05), e em 49% (p<0,05) o EP induzido por Dx. Clm, na maior e menor doses, reduziu o EP da Cg em 100% (p<0,001) e 42,45% (p<0,05), respectivamente, e em 97,26% (p<0,001) e 36% (p<0,05) o EP do Dx, respectivamente. A mpt inibiu o EP por Cg, em 60,9% (p<0,05) para a maior dose, e em 57,49% (p<0,01) e 34,42% (p<0,05) nas duas maiores doses, em ordem decrescente, no EP por Dx. Adicionalmente, amt e clm inibiram de forma dose-dependente a MN, na sexta hora, apÃs administraÃÃo de Cg. Amt na maior dose inibiu a MN induzida por Cg em 49,19% (p<0,05) e em 96,31% (p<0,001) a MN induzida por fMLP. A mpt (40 mg/kg, i.p.) inibiu a MN por Cg em 49,26% (p<0,001), e em 92,38% (p<0,001) a migraÃÃo induzida por fMLP. Do mesmo modo, a clm nas doses de 90. 30 e 10 mg/kg (i.p.), inibiu a MN por Cg em 76,46% (p<0,001), 64,4% (p<0,01) e 49,13% (p<0,05), respectivamente, e em 100% (p<0,001) a MN induzida por fMLP, na maior dose. Na avaliaÃÃo do efeito dos AD na degranulaÃÃo de mastÃcitos, observamos que a clm (90 mg/kg/i.p.) e a mpt (40 mg/kg/i.p.) reverteram em 100% a degranulaÃÃo induzida pelo composto 48/80. Amt (90 mg/kg/v.o.) tambÃm reverteu significativamente a degranulaÃÃo de mastÃcitos, alcanÃando 90,19% (p<0,001) de inibiÃÃo. Tais dados sugerem que amt, clm e mpt possuem significativa atividade antiinflamatÃria evidenciada por seus efeitos inibitÃrios na MN e edema / In the present study it was evaluated the effects of antidepressants amitriptiline (amt), clormipramine (clm) and maprotiline (mpt) in the inflammatory reaction. Male Wistar rats, 150-200g, were divided into five groups (n=6) in experiments of hind paw edema (HE) and neutrophils migration (NM) in subcutaneous air pouches. Amt, mpt (v.o.) and clm (i,p), 10, 30 and 90 mg/kg, were administrated before the inflammatory stimulus carragenin (Cg-500 Âg/paw), fMLP (10 â6M) or dextran (Dx-300 Âg/paw). Paw edema was measured with a hydroplethysmometer (Hugo Basile 7140 Plethysmometer) immediately before ( time equal zero ) and 1, 2, 3 and 4 h after the Cg or Dx challenges. The increase in paw volume (edema volume) was obtained by subtracting the paw volume measured before stimulus injection. The results demonstrate that the antidepressants induce a dose dependent reduction in the HE induced by Cg and Dx. Amt in largest dose used, inhibited the Cg-induced HE by 51,34% (p< 0,05), and the Dx-induced HE by 49% (p<0,05). Clm, in biggest and smallest dose, inhibited Cg-induced HE by 100% (p<0,001) and 42,45% (p< 0,05), respectively, and by 97,26% (p< 0,001) and 36% (p<0,05) the Dx-induced HE, respectively. The largest dose of mpt inhibited the Cg-induced HE by 60,9% (p<0,05) and at the two greatest dose, in decreasing order, inhibited the Dx-induced HE, by 57,49% (p<0,01) and 34,42% (p<0,05), respectively. Additionally, amt e clm inhibited the MN in a dose-dependently manner, in the sixth hour after Cg administration. Amt in largest dose (90 mg/kg/v.o.) inhibited the Cg-induced NM by 49,19% (p<0,05) and by 96,31% (p<0,001) the fMLP-induced NM. The mpt (40 mg/kg/i.p.) inhibited the Cg-induced NM by 49,26% (p<0,001), and by 92,38% (p<0,001) the fMLP-induced NM. In the same way, clm at the dose 90, 30 e 10 mg/kg (i.p.) inhibited Cg-induced NM by 76,46% (p< 0.001), 64,4% (p<0,01) and 49,13% (p<0,05), respectively, but the fMLP-induced NM was inhibited just by the biggest dose by 100% (p<0,001). We observed that clm (90 mg/kg/i.p.) and the mpt (40 mg/kg/i.p) completely reverted the mast cell degranulation induced by the compound 48/80. Amt (90 mg/kg/v.o.) also significantly reverted the mast cell degranulation by 90,19% (p<0,001). These data suggest that amt, clm e mpt have a significant antiinflammatory activity demonstrated by their inhibitory effects on NM and edema