Made available in DSpace on 2014-06-12T18:04:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2522_1.pdf: 1713378 bytes, checksum: 2b00f976bf674c57f36a2b2b613b085b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / No contexto regional, se objetiva atender à necessidade de se valorizar o bagaço de cana-de-açúcar como biomassa vegetal. O bagaço é um resíduo originado das indústrias de álcool e açúcar e disponível abundantemente. A disponibilidade deste recurso renovável como matéria-prima de baixo custo, aliada à viabilização de sua valorização via processos químicos e bioquímicos, é a base de iniciativas técnico-científicas que possam tornar reais a produção de produtos químicos de alto valor agregado (polióis, ácidos orgânicos) a partir dos carboidratos da celulose e hemicelulose. Perspectivas atuais apontam os reatores descontínuos de leito de lama como potencialmente adequados aos processamentos dessa matéria-prima, através de oxidação catalítica de seus componentes (carboidratos). Neste trabalho desenvolveu-se estudos de oxidação catalítica da glicose obtida do bagaço de cana-de-açúcar, com vistas á sua valorização química. Para tanto, foi utilizado como matéria-prima bagaço pré-tratado por explosão a vapor. Primeiramente, procedeu-se a uma hidrólise enzimática do mesmo, previamente submetidos a três condições: bagaço prétratado natural (não lavado), bagaço lavado com água destilada e bagaço lavado com solução de NaOH a 1%. Em cada uma dessas condições variou-se ainda a granulometria do bagaço pré-tratado (estado natural e moído a 20 Mesh) e a proporção das enzimas utilizadas na hidrólise (23,4% de uma mistura endoglicanases/celobiohidrolases-5,3% de β-Glicosidase; 23,4% da mistura endoglicanases/celobiohidrolases-0% de β-Glicosidase e 11,7% da mistura endoglicanases/celobiohidrolases-5,3% de β-Glicosidase), em relação á massa de bagaço prétratada. Uma solução de glicose pura foi oxidada cataliticamente com O2, utilizando-se catalisador de Pd suportado em alumina em reator batelada de vidro. Da mesma forma, procurou-se oxidar no mesmo reator uma mistura de um dos hidrolisados obtidos na etapa de hidrolise enzimática do bagaço pré-tratado. O bagaço pré-tratado lavado com solução de NaOH a 1% e sem moagem apresentou maior rendimento glicosídico nas 3 proporções de enzimas utilizadas atingindo 0,35g, 0,42g e 0,41g de glicose por grama do bagaço pré-tratado. A oxidação da solução pura de glicose alcançou uma conversão máxima de 41% e com seletividade máxima inferior a 50% em relação a ácido glicônico. O reator batelada de vidro mostrou-se inadequado para se proceder à oxidação do hidrolisado enzimático

Orientadores: Graciliano de Oliveira Neto, Lauro Tatsuo Kubota / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T07:40:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RoverJunior_Laercio_D.pdf: 3024594 bytes, checksum: 130d8e93666adacafebc78e6202f2d96 (MD5) Previous issue date: 1999 / Doutorado

Orientador: Elias Basile Tambourgi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T10:06:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cassiano_DouglasAlves_M.pdf: 1741880 bytes, checksum: 543cbb5c9581218ee8521a364ec9b998 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: No presente trabalho são apresentados estudos sistemáticos da influência conjunta que alguns parâmetros exercem sobre a transferência de massa entre as fases de um sistema de extração líquido-líquido com micelas reversas entre as fases de um sistema de extração e re-extração, para fins de caracterização, modelagem local e otimização. Como o sistema é intrinsecamente multivariável, uma aproximação por modelagem mecanística ou fenomenológica seria de grande complexidade, e, até o presente momento a literatura sobre o assunto é ínfima; além de não explicar o sistema como um todo no concernente à transferência de massa. Assim a proposta adotada é a construção de modelos matemáticos empíricos que combinem dados experimentais e artifícios estatísticos tais como o método de análise por superfície de resposta, afim de suplantar a escassez de dados e também pelo mesmo constituir uma metodologia rápida e prática na solução de sistemas de engenharia e projeto / Abstract: In this work, systematic studies are performed on the influence certain parameters have on mass transfer between the phases of a reversed micellar liquid-liquid extraction system, concerning forward and to achieve optimal mass transfer conditions, under a certain region. The system characteristics is to have a couple of variables having synergetic influence on mass transfer; so a phenomelogical approach would be of great complexity. The evidence of this fact is that few literature exists in this field, and the previous studies are not overviewening nor describing the mass transfer process of the system effectively. Facing these facts, the construction of mathematical models combining experimental data and statistical artifices such as response method would fit the multivariable requests of the system concerning mass transfer explanation. This approach also constitute a fast and practical methodology for solving the engineering and project requirements for the system / Mestrado / Sistemas de Processos Quimicos e Informatica / Mestre em Engenharia Química

Orientador: Telma Teixeira Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T20:58:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bim_MonicaAndrea_M.pdf: 4401190 bytes, checksum: 58cf555e454e041ffe09f9a7a32378ae (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A xilana, a qual é hidrolisada pela xilanase, é um abundante biopolímero encontrado no tecido de vegetais como constituinte principal da parede celular. Muitas das xilanases comercialmente disponíveis são produzidas por fungos com atividade ótima a pHs ácidos ou neutros e a temperaturas abaixo de 45°C. Existem várias aplicações para a xilanase, mas o seu maior potencial de uso é na industria de papel e celulose nos processos de branqueamento da polpa. Deste modo, xilanases ativas em condições alcalinas são potencialmente úteis nos processos de branqueamento de polpa de papel sem necessidade de mudanças no pH do processo e com a vantagem de diminuir a quantidade de componentes organoclorados nos efluentes das indústrias de papel. As duas motivações principais deste trabalho foram: primeiro, utilizar sistema de duas fases aquosas (SDFA) para extrair e purificar a xilanase do caldo de fermentação, produzido por Bacillus pumilus, pois o uso de SDFA pode ser uma alternativa mais econômica e de fácil operação, para purificação de bioprodutos, visto que as etapas de extração e purificação representam até 80% do custo destes bioprodutos. Segundo, aplicar a xilanase no branqueamento da polpa kraft de eucalipto visando a redução de organoclorados no efluente das indústrias de papel e celulose ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Xylan, a group of heteropolysaccharides, is an abundant biopolymer found in plant tissues as major component of cell wall, which is hydrolysed by xylanase. Several of the xylanases commercially available produced by fungi are active at neutral or acidic pH and their optimum temperature is below 45°C. Various applications for xylanases in bioconversion and food industries have been suggested and one of the major potential applications of xylanases involves the pulp and paper industry. This way, enzymes which are active at alkaline conditions have great potential in bleaching process without any need for changes in pH and with the advantage in lowering the release of polluting organic chlorine compounds. The two main motivations of this work was: first, to extract and to purify the enzyme from the crude fermentation broth, produced by Bacillus pumilus, using aqueous two phase systems (ATPS). Second, application ofxylanase ftom crude fermentation broth at hardwood kraft pulp bleaching. The enzyme from crude fermentation broth was extracted by partitioning in ATPS composed of phosphate and polyethyleneglycol (pEG). The effect of tie-line length, PEG molecular weight and NaCl and phosphate concentrations upon the purification factors and yields of xylanase were investigated by statistical design. The best system studied was that one containing 22% PEG6000, 10%¿K IND. 2¿¿HP¿O IND. 4¿ and 12% NaCl with a purification factor of 40 and 97% yield of enzyme activity ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Engenharia Química

Orientador : Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Benedet_HonorioDomingos_M.pdf: 2373078 bytes, checksum: 4e69ab4e795b7da8160087e01884d976 (MD5) Previous issue date: 1980 / Resumo: As enzimas coagulantes do Mucor miehei, Endothia parasitica e renina foram estudadas para determinarmos se havia ou não diferenças de ação sobre a caseína ácida e suas frações a, ß e K. Através da diferenciação de enzimas coagulantes em meio gel de agar-caseína, as três apresentaram zonas de difusão bastante diferentes, mostrando, portanto, que suas características físicas são diferentes. Após incubação das mesmas com o substrato, observamos visualmente que a caseína ácida e suas frações a e 3, aparentemente não sofreram alterações, enquanto que a fração K apresentou - floculação bastante intensa com todas as enzimas, deduzindo-se que, aparentemente, tenham as mesmas características. A caseína ácida e suas frações a, ß e K, após o tratamento referido no parágrafo anterior, foram liofilizadas e submetidas a eletroforese em gel de poliacrilamida em presença de íons dodecil sulfato de sódio (SDS) e mercaptoetanol, mostrando-nos que as bandas de proteína da fração K, de peso molecular entre 17.000 e 30.000, foram hidrolisadas pelas três enzimas em bandas de peso molecular 8.000 e 14.000. No caso da fração a , a banda de proteína de peso molecular 34.000 foi hidrolisada por todas as enzimas em bandas de peso molecular 29.000. A enzima da Endothia parasitica hidrolisou também as bandas de proteína de peso molecular 16.000, 22.000 e as situadas entre 34.000 e 91.000, inclusive. Quanto à fração ß, nenhuma das enzimas a hidrolisou. A fração K, após tratamento a diversas temperaturas, incubada com a enzima coagulante do Mucor miehei, foi submetida a eletroforese como citado anteriormente, apresentando diferenças em relação à fração K não aquecida, ou seja, observamos que a não aquecida foi hidrolisada, enquanto que a aquecida, praticamente nada sofreu, concluindo-se que a mesma tenha sido desnaturada. / Abstract: Calf rennin and coagulating enzymes from Mucor miehei, Endothia parasitica were used in tests to compare their actions upon acid casein and its fractions a, ß and K. The three coagulating enzymes showed distinct diffusion bands in casein-agar gel which indicated that they have different physical properties. Incubation of whole acid casein and its fractions a, ß and K with the three different coagulating enzymes showed that only with the K fraction was there an intense floculation and this occurs similary with all three enzymes. After the incubation the treated protein preparations were lyophilized and submitted to gel electrophoresis in poliacrylamide in the presence of sodium dodecyl sulfate and mercaptoethanol. The results indicated that the K fraction of molecular weight from 17,000 to 30,000 was hydrolyzed by the three coagulating enzymes giving rise to bands of molecular weight of 8,000 and 14,000. In the case of the a fraction, all the three enzymes hydrolyzed the 34,000 molecular weight bands to 29,000 molecular weight bands. Furthermore, the enzyme from Endothia parasítica also hydrolyzed the bands of molecular weight of 16,000 and 22,000 and the ones from 34,000 to 91,000. None of the coagulating enzymes hydrolyzed the ß fraction. In the experiment to check the effect of heating upon the K fraction before being treated by the coagulating enzyme from Mucor miehei , it was found that, after heating, the hydrolysis did not occur, suggesting that denaturation of the K fraction protein inhibited the enzyme action. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Jaime Aparecido Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T13:37:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiHipolitoJunior_Oswaldo_D.pdf: 1420721 bytes, checksum: 62ff337856139b0f0560de7c8a51e1f7 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Pesquisou-se o efeito da radiação X sobre a atividade da Glucose-6-fosfato-desidrogenase (G6PD) e da Superóxido-dismutase (SOD) em cristalinos de ratos Wistar, usando-se o método analítico da redução NADP+ na determinação da atividade da G6PD, e a eletroforese em gels de poliacrilamida para a separação isoenzimática da G6PD e da SOD. Os animais receberam uma dose de 10,26 R em cada olho, e foram sacrificados nos tempos de 6, 12, 24, 48 e 96 horas após a irradiação, juntamente com os ratos controle. No tempo de 48 horas, os animais apresentaram uma diminuição na atividade da G6PD da ordem de 28,45% em relação aos controles, estatisticamente significativa ao nível de 5% de probabilidade. Nos outros tempos, não foram observadas variações significativas em relação ao controle. Também no tempo de 48 horas, foram detectadas quatro isoenzimas da G6PD nos cristalinos controle e apenas duas nos cristalinos irradiados. Quanto à SOD, foram encontradas três isoenzimas tanto no material irradiado como no controle, no tempo de 48 horas, não se detectando diferenças de atividade entre os dois grupos / Abstract: The effects of x-rays upon the enzymes G6PD and SOD was investigated in the crystalline lens of Wistar rats, employing the analytical method of NADP+ reduction to determine the activity of G¨PD, and electrophoresis in polyacrylamide gel for the analysis of G6PD and SOD isoenzymes. Control and experimental animals wich received 10.26R in each eye, were killed 6, 12, 24, 48 and 96 hrs after the irradiation. Irradiated rats, later 48 hrs, presented a 28,45% decreased of G6PD activity, statiscally significant at 5% level. During the other periods no significant variations occured in comparion with controls. During the period of 48 hrs four isoenzymes of G6PG were detected in the control crystalline lens only two from the irradiated rats. Three isoenzymes of SOD were found either in the control and irradiated crystalline lens in the 48 hrs period, with similar activities in both groups / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências

Orientador: Fernanda Ramos Gadelha, Sarah Monte Alegre / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:55:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_MariaFernandaCastioni_M.pdf: 3658329 bytes, checksum: 103f7e9293b496d330ec2c6204037760 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Estima-se que existam de 18 a 24 milhões de portadores de doença de Chagas (DCR) no continente americano, entre os quais 5 a 6 milhões encontram-se no Brasil. Até o momento não foi descoberta a cura para a doença e no Brasil são registrados seis mil óbitos por ano relacionados à doença. Na evolução da DCR são descritas duas fases distintas: aguda e crônica. A denervação autonômica é fato bastante estudado e acredita-se que essa denervação esteja relacionada com as alterações no metabolismo dos hidratos de carbono, que são caracterizadas por recuperação deficiente dos níveis glicêmicos após a administração oral e intravenosa de glicose. Com base nesses dados, o presente estudo teve por objetivo avaliar os níveis glicêmicos e insulinêmicos em pacientes chagásicos crônicos, submetidos aos testes de tolerância à glicose oral (TTGO) e intravenosa (TTGIV), comparando-se os resultados a um grupo controle. O aumento das espécies reativas de oxigênio (EROs) apresenta um papel importante nas reações inflamatórias. Considerando a resposta do hospedeiro à infecção do T. cruzi, os níveis de duas enzimas antioxidantes catalase e glutationa redutase também foram determinados nos dois grupos. Não foram detectadas diferenças significativas entre os dois grupos tanto nos testes de tolerância a glicose com relação aos níveis plasmáticos de glicose, insulina e peptídeo C, assim como nas áreas sob as curvas desses parâmetros, quanto nas dosagens de catalase e glutationa redutase. Pode-se especular que os níveis de insulina e peptídeo C poderiam apresentar significância se esses parâmetros fossem avaliados nas diferentes formas da doença, já que na fase aguda o processo inflamatório é intenso / Abstract: It has been estimated that 18-24 million people in the American continent have Chagas' disease (DCR) and that 5-6 million live in Brazil. Up to now the cure for this disease has not been discovered and in Brazil occurs 6 thousand deaths / year related to this disease. In the evolution of DCR two phases are described: acute and chronic. The autonomic denervation is well studied. It is believed that this denervation is related to alterations in carbohydrate metabolism that is characterized by a deficient recovery in the glicemic levels after oral and intravenous administration of glucose. Based on these facts, the aim of this study was to evaluate the glicemic and insulinemic levels in chronic Chagas' disease patients, submitted to an oral (TTGO) and intravenous (TTGIV) glucose tolerance test, compared to a control group. The increase in the reactive oxygen species (ROS) has an important role in infIammatory reactions. Regarding the behavior ofthe host when infected with T. cruzi, the levels of two antioxidants enzymes ( catalase and glutathione reductase) were determined in both groups. No significant differences were observed in the two groups considering the glucose testes regarding the plasmatic levels of glucose, insulin and peptid C, and the area above the curve in ali parameters assayed and also in the catalase and glutathione reductase determinations. One hypothesis to explain these observations is that the insulin and peptid C levels may be significant if these parameters were evaluated in the different forros of the disease, since in the acute forro the infIammatory process is intense / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:14:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4313_1.pdf: 4415707 bytes, checksum: 77682bd2005ccebe78c5e5cf87c30582 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Na elaboração de materiais nanoestruturados, a anodização do alumínio para obtenção de membranas de alumina anódica auto-organizadas tem se revelado ferramenta útil. Elas apresentam elevado grau de ordenamento que se configuram em arranjo de células hexagonais, com poros centrais e individualizados, não interconectados. Este trabalho propôs-se empregar as membranas como parte de um compósito nanoestruturado com vistas ao seu emprego como matriz para imobilização de proteínas. As membranas foram sintetizadas pela anodização de fitas de alumínio de alta pureza, verificando-se que para sua obtenção com alto padrão de organização era necessário um controle rígido do acabamento superficial do alumínio e da temperatura de anodização. O polimento eletroquímico, em uma mistura de ácido perclórico/etanol, foi superior ao químico em relação ao desbastamento da superfície, dando um aspecto espelhado à fita de alumínio (eletrodo). Filmes com bom ordenamento foram obtidos empregando-se eletrodos polidos eletroquimicamente e anodizados a baixas temperaturas. Nanocompósitos de membranas de alumina anódica com polianilina (PANI) e polietilenimina (PEI) foram sintetizados e a eles foram covalentemente imobilizadas duas enzimas importantes biotecnologicamente: peroxidase e tripsina. O compósito com PANI foi obtido tratando-se a membrana com permanganato de potássio, com vistas a depositar o dióxido de manganês sobre sua superfície, que serviu como agente oxidante na polimerização da anilina sobre a superfície da membrana. Ao microscópio eletrônico de varredura observou-se que a síntese deste polímero não obstruiu os poros da membrana. Peroxidase foi imobilizada ao compósito via glutaraldeído. O derivado da imobilização manteve suas propriedades catalíticas e apresentou-se razoavelmente estável ao reuso, bem como quando ensaiado em um sistema em fluxo. Outra funcionalização da membrana foi realizada com PEI, polímero altamente catiônico contendo aminas primárias, secundárias e terciárias, bastante utilizado na imobilização de proteínas devido às suas propriedades hidrofílicas e de fisissorção. Este processo foi conseguido fazendo-se passar pelos poros da membrana uma solução de PEI e em seguida tratando-se a mesma com glutaraldeído. Avaliou-se a porosidade do compósito resultante através de micrografias eletrônicas de varredura e observou-se que a grande maioria dos poros havia sido bloqueada pela presença do polímero e este formou uma camada sobre a superfície da membrana. O compósito alumina anódica/PEI fixou a tripsina de forma que ela permaneceu cataliticamente ativa. Também se apresentou estável ao uso em fluxo e em batelada. Observou-se que quanto maior o diâmetro do poro maiofoi a atividade enzimática encontrada da tripsina. Também foi constatado que a membrana sem funcionalização fixou a tripsina, contudo a lixiviação da mesma foi evidente, demonstrando a importância do polímero para uma imobilização efetiva desta proteína

Ingeniero Civil en Biotecnología / El presente trabajo tuvo por objetivo realizar la adición del extremo polipeptídico WP4, de alta hidrofobicidad a tres enzimas recombinantes xilanasa, cutinasa y celulasa, bajo la hipótesis de aumentar su tiempo de adsorción en Cromatografía de Interacción Hidrofóbica, para optimizar su purificación utilizando dicha técnica. Para luego, estudiar el efecto de la adición de este extremo en su producción, recuperación, actividad y comparar estos parámetros con los obtenidos en las enzimas recombinantes con distintos extremos polipeptídicos adicionados en trabajos anteriores (Xil-(YP)2Y, Xil-Y3 y Xil-(YP)3; Cut-(WP)2, Cut-(YP)3 y Cut-Y3 y Cel-(WP)2, Cel-(WP)2, Cel-(YP)2Y, Cel-(YP)3 y Cel-Y3). Utilizando como templado el gen wt en cada una de las enzimas, se obtuvieron resultados positivos para cutinasa y celulasa, quedando las enzimas recombinantes Cut-wp4 y Cel-WP4. En el caso de xilanasa, no se obtuvo amplificación a ninguna temperatura en la reacción de PCR, por lo cual, no se logró sintetizar la enzima con el extremo polipeptídico WP4, posiblemente por la formación de hairpin y autoalineamiento de los partidores sense y antisense para la síntesis de xilanasa-WP4. Para el caso de la enzima celulasa se realizaron los análisis de actividad y cantidad de proteína producida para todas las variantes y se comparó estos resultados con la enzima nativa. Se observa que las enzimas mutadas, con excepción de la variable cel-YP2Y, presentaron el mismo comportamiento que la endoglucanasa nativa, donde la mayor actividad celulolítica, se obtiene en el medio extracelular. En el caso de cel-YP2Y, se sospecha quela baja actividad presentada en el medio extracelular se debió a la baja producción de enzima. Pero no se puede descarta que el extremo YP2Y afecta negativamente la migración de la misma al medio extracelular ya que es en este caso donde se encontró más actividad en el medio periplasmático y en el lavado con TES. Del estudio se concluyó que las endoglucanasas modificadas con extremos hidrofóbicos son activas. Los extremos polipeptídicos Cel-Y3, Cel-YP2Y, Cel-YP3, Cel-WP4 presentan valores superiores al 87% de actividad específica residual con respecto a la nativa. En el caso de cel-WP4 la actividad específica en el medio extracelular es un 74% de la enzima nativa. A partir de lo anterior se puede decir que el criterio cuantitativo de que el extremo de una hidrofobicidad mayor a 500 afecta de mayor manera la actividad de la enzima, resultó ser correcto en este estudio, ya que para el caso de Cel-WP4 que posee una hidrofobicidad de 878, la actividad específica fue solo de un 74% respecto a la enzima nativa. Y como criterio cualitativo se comprobó que no es necesaria la presencia del aminoácido Prolina (P) en el extremo, para que la enzima se activa.

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