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Micropartículas contendo óleo de cymbopogon citratus: desenvolvimento, validação de método analítico e preliminar de estabilidadeWeisheimer, Vanessa January 2008 (has links)
Considerando a atividade antifúngica demonstrada, o óleo de Cymbopogon citratus apresenta-se como uma promissora matéria-prima no desenvolvimento de produtos farmacêuticos. Para a utilização em formulações, é necessário que se verifique a qualidade do óleo, determinada pelo teor de citral, seu componente majoritário. Além disso, cuidados relacionados à sua estabilidade devem ser considerados. Na busca por método alternativo à técnica de cromatografia a gás, comumente utilizada para óleos voláteis, um dos objetivos deste trabalho foi desenvolver e validar método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para quantificar o citral presente no óleo de C. citratus, na forma de seus isômeros geométricos, o neral e o geranial. Em virtude da volatilidade e suscetibilidade à degradação apresentadas pelo óleo de C. citratus, foram preparadas micropartículas contendo essa substância, a fim de melhorar sua estabilidade. Foram avaliadas duas técnicas de preparação, a secagem por aspersão e a precipitação, além de dois materiais encapsulantes, a beta-ciclodextrina e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina. As micropartículas preparadas foram caracterizadas em relação ao teor de umidade, rendimento, porcentagem de inclusão, espectrofotometria na região do infravermelho e a morfologia foi avaliada por microscopia eletrônica de varreduta. Para determinar os teores de neral e geranial presentes nas micropartículas, método por CLAE foi validado. As micropartículas foram incorporadas em emulsões não-iônicas e géis hidrofílicos e estas formulações foram avaliadas quanto às suas propriedades físico-químicas e em relação a sua estabilidade. Os teores de neral e gernanial foram determinados utilizando-se método por CLAE adapatado do método descrito para as micropartículas. / Considering the antifungal activity demonstrated the oil of Cymbopogon citratus presents as a promising raw material for the development of pharmaceutical products. For use in pharmaceutical formulations, it is necessary to verify the quality of the oil, determined by the citral content, its major compound. Moreover, precautions related to its stability should be considered. In the search for alternative method to the technique of gas chromatography, commonly used for volatile oils, one of the purposes of this work was to develop and to validate analytical method by high performance liquid chromatography for quantitation of the citral contents in the C. citratus oil, as its geometric isomers, neral and geranial. Because of the volatility and susceptibility to degradation presented by C. citratus oil, microparticles containing this oil were prepared in order to improve its stability. Two techniques of preparations were evaluated; spraydrying and precipitation, and also two materials of encapsulation, betacyclodextrin and hydroxypropyl-beta-cyclodextrin were tested. The microparticles were characterized by their content of water, yielding, percentage of inclusion, infrared spectroscopy (IV), and the morphology was evaluated by scanning electronic microscopy (SEM). For the determination of neral and geranial contents present into microparticles an HPLC method was validated. The microparticles were incorporated in nonionic emulsions (NIE) and hydrophilic gels (HG), and physico-chemical properties as well as stability of these formulations were evaluated. The neral and geranial contents were determined using the HPLC method adapted from that described for the microparticles.
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Nanoencapsulated Eucalyptus staigeriana essential oil for use as a food preservative / Ãleo essencial de Eucalyptus staigeriana nanoencapsulado para utilizaÃÃo como conservante em alimentosEmanuele Duarte Herculano 21 March 2014 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / In this study, the Eucalyptus staigeriana essential oil (ESO) was nanoencapsulated and determined the bactericidal effect of its active principle against two strains of pathogenic mircrorganisms, as a preliminary study for use in food preservation. The process occurred by forming a nanoemulsion and spray-drying, using the cashew gum (CG) as encapsulating material. The nanoparticles were characterized by analysis of particle size distribution, zeta potential, absorption spectroscopy in the infrared Fourier transform spectroscopy (FTIR), thermal analysis (TGA/DSC), in vitro release kinetics, gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) and stability of the encapsulated. Was also determined the Minimum Bactericidal Concentration (MBC) of nanoparticles, essential oil, and cashew gum to evaluate its antimicrobial activity against Listeria monocytogenes ATCC 19115 (Gram-positive) and Salmonella Enteritidis IAL 1132 (Gram-negative). The nanoparticles had size ranging from 27.70  3.42 nm to 432.67  41.47 nm in accordance with the formulation, and negatively charged surface. The presence of ESO in the nanoparticles is observed through changes in peak resolutions of the spectra obtained by FT-IR. Thermal analysis showed the main events of mass loss of the samples associated with the degradation of CG. The content of ESO nanoencapsulated varied between 4.76% and 7.12%. The increase in the proportion of CG favored the rapid release of oil in water due to the increased hydrophilic character, and enhance the ability of the nanoparticles to retain the ESO in the polymeric shell during the 365 days. The results for MBC indicated a bactericidal action of the nanoencapsulated oil, and pure oil more efficient in Gram-positive. However, the nanoparticles showed better results against Gram-negative bacteria, due to a possible synergistic effect between the CG and ESO. / Neste trabalho, o Ãleo essencial de Eucalyptus staigeriana (OES) foi nanoencapsulado e determinado o efeito bactericida de seu princÃpio ativo contra duas cepas de mircrorganismos patogÃnicos, como um estudo preliminar para utilizaÃÃo na conservaÃÃo de alimentos. O processo ocorreu atravÃs da formaÃÃo de uma nanoemulsÃo e secagem em spray-drying utilizando a goma de cajueiro (GC) como material encapsulante. As nanopartÃculas foram caracterizadas atravÃs das anÃlises de tamanho e distribuiÃÃo de partÃcula, potencial zeta, espectroscopia de absorÃÃo na regiÃo do infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), anÃlise tÃrmica (TGA/DSC), cinÃtica de liberaÃÃo in vitro, cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM) e estabilidade do encapsulado. Foi tambÃm determinada a ConcentraÃÃo Bactericida MÃnima (CBM) das nanopartÃculas, do Ãleo essencial e da goma de cajueiro para avaliar sua aÃÃo antimicrobiana contra Listeria monocytogenes ATCC 19115 (Gram-positiva) e Salmonella Enteritidis IAL 1132 (Gram-negativa). As nanopartÃculas apresentaram tamanho que variaram de 27,70  3,42 nm a 432,67  41,47 nm, de acordo com a formulaÃÃo, e a superfÃcie carregada negativamente. A presenÃa do OES nas nanopartÃculas à observada atravÃs de modificaÃÃes nas resoluÃÃes de pico dos espectros obtidos por FTIR. A anÃlise tÃrmica evidenciou os principais eventos de perda de massa das amostras associados à degradaÃÃo de GC. O teor de OES nanoencapsulado variou entre 4,76 % e 7,12 %. O aumento na proporÃÃo de GC favoreceu a uma rÃpida liberaÃÃo do Ãleo em Ãgua devido ao aumento do carÃter hidrofÃlico, alÃm de aumentar a capacidade das nanopartÃculas em reter o OES no invÃlucro polimÃrico no decorrer dos 365 dias. Os resultados para CBM indicaram uma aÃÃo bactericida do Ãleo nanoencapsulado e do Ãleo puro mais eficiente na bactÃria Gram-positiva. No entanto, as nanopartÃculas mostraram um resultado melhor contra a bactÃria Gram-negativa, devido a um possÃvel efeito sinÃrgico entre a GC e o OES.
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Chemical and biological study of Bauhinia pulchella Benth / Estudo quÃmico e biolÃgico de Bauhinia pulchella BenthJarbas Lima de Carvalho 08 December 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / This present work reports the chemical and biological analysis of the stem and leaves from Bauhinia pulchella. In this study, the ethanol extract from stems was obtained by maceration, subjected to chromatographic fractionation, leading to isolation of three flavonoids: (+)-3â,4â-dihydroxyphenyl-chroman-7-ol (BP-2), (-)-fisetinidol (BP-3) and (+)-epicatechin (BP-4); a mixture of triterpenes taraxerone and β-amyrenone (BP-1); a mixture of steroids sitosterol and stigmasterol (BP-5); and a bibenzyl named 2-hydroxy-3â,5â-dimethoxybibenzyl (BP-6). It is notewhorthy to mention that BP-1 and BP-4 substances are unprecedented in the genus, while BP-2 is unpublished. Chemical structures of secondary metabolites obtained were elucidated by 1H and 13C NMR; IR and MS associated with comparison of data described in the literature. Chemical composition of the essential oil from leaves of B. pulchella, obtained by hydrodistillation, was determined and quantified by gas chromatography-mass spectroscopy (GC/MS) and gas chromatography-flame ionization detector (GC/FID), which identified 95,68% of all constituents. α-pinene (23.89%); caryophyllene oxide (22.43%) and β-pinene (12.19%) were the major components. The essential oil was tested against Aedes aegypti larvae and showed LC50 value of 105.93  1.48 μg/mL. The cytotoxic activity of essential oil was evaluated on human tumor cell lines (HL-60; MCF-7; NCI-H292 and HEP-2) was evaluated, showing IC50 values with confidence intervals of 9.941 (8.238 to 12.00), 53.05 (41.39 to 67.99), 48.98 (44.22 to 54.25) and 50.42 (42.47 to 59.87) μg/mL, respectively and the cell line HL-60 the most sensitive among the cells tested. This is the first report of the chemical study of Bauhinia pulchella, as well the investigation of larvicidal activity and cytotoxicity of the essential oil from its leaves. / O presente trabalho relata o estudo quÃmico e biolÃgico do caule e das folhas de Bauhinia pulchella. Nesse estudo, o extrato etanÃlico do caule, obtido por maceraÃÃo, foi submetido a fracionamento cromatogrÃfico levando ao isolamento de trÃs flavonoides (+)-3â-4âdiidroxifenil-cromano-7-ol (BP-2), (-)-fisetinidol (BP-3) e (+)-epicatequina (BP-4); da mistura de triterpenos taraxerona e β-amirenona (BP-1); da mistura de esteroides sitosterol e estigmasterol (BP-5) e de um bibenzil denominado 2-hidrÃxi-3â-5â-dimetoxibibenzila (BP-6). Cabe ressaltar que as substÃncias BP-1 e BP-4 sÃo inÃditas no gÃnero, enquanto BP-2 à inÃdita na literatura. As estruturas dos metabÃlitos secundÃrios isolados foram elucidadas por RMN 1H e 13C; IV e EM, juntamente com a comparaÃÃo com os dados descritos na literatura. A composiÃÃo quÃmica do Ãleo essencial das folhas de B. pulchella, obtido por hidrodestilaÃÃo, foi determinada e quantificada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) e detector de ionizaÃÃo por chama (CG-DIC), sendo, portanto, identificados 95,68% dos seus constituintes: α-pineno (23,89%), Ãxido de cariofileno (22,43%) e β-pineno (12,19%) foram os constituintes majoritÃrios. O Ãleo essencial teve sua atividade larvicida sobre Aedes aegypti avaliada, sendo obtido um valor de CL50 igual a 105,93  1,48 μg/mL. O poder citotÃxico do Ãleo essencial foi avaliado sobre as linhagens tumorais humanas HL-60, MCF-7, NCI-H292 e HEP-2, sendo obtidos valores de CI50 e intervalos de confianÃa iguais a 9,941 (8,238 a 12,00); 53,05 (41,39 a 67,99); 48,98 (44,22 a 54,25) e 50,42 (42,47 a 59,87) μg/mL, respectivamente, sendo a linhagem celular HL-60 a mais sensÃvel dentre as cÃlulas testadas. Este à o primeiro relato do estudo quÃmico de Bauhinia pulchella, bem como da investigaÃÃo da atividade larvicida e citotÃxica do Ãleo essencial de suas folhas.
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Ecophysiology and alecrim pimenta productivity at conditions of Massif BaturitÃ, CearÃ. / Ecofisiologia e produtividade de alecrim pimenta nas condiÃÃes edafoclimÃticas do MaciÃo de BaturitÃ, CearÃMaria da SaÃde de Sousa Ribeiro 20 February 2015 (has links)
The medicinal plants are included within the wide diversity of the MaciÃo de Baturità ecosytem and they are an important component of traditional medicine of this region. However, scientific information that may contribute to the increase in the cultivation of these plants are still rare, particularly at conditions of the State of CearÃ. The overall objective of this project is to evaluate the development and the production of alecrim pimenta (Lippia origanoides) at conditions of MaciÃo de BaturitÃ, CearÃ. Two experiments were conducted, the first during the dry season of 2013 (August to November) and the second during the rainy season of 2014 (February to May). The experiment was corned out in completely randomized design with split plots, being the plots defined by two seasons (drought and rainy), the subplot formed by light conditions (greenhouse and full sun), and the subsubplots formed by four evaluation times (0, 40, 80 and 120 days after transplanting). Five replications were used, each one represented by a pot of 20 L containing a plant. The following variables were evaluated: leaf area, plant height, stem diameter, dry matter production, leaf gas exchange, chlorophyll content, mineral nutrients, organic solutes, and essential oils. The alecrim pimenta grows well in the Baturità region, with yields of biomass and essential oil similar to those observed in other studies. The cultivation in greenhouse (50% of solar radiation) changed the pattern of development of alecrim pimenta, resulting in plants with better overall appearance, taller, with larger leaves, higher specific leaf area, less developed root system, and lower root/shoot ratio, regardless of the season of cultivation. The production of dry biomass of leaves and total did not differ between the two environments (light conditions) after 120 days cultivation, regardless of the period of year. During the drought season there was a strong influence of the light condition on stomatal conductance and transpiration, with the values being lower in full sun environment, suggesting stomatal sensitivity to climate conditions in this species. Plants grown in greenhouse showed, in general, higher levels of nutrients and nitrogen compounds (N-aminossolÃveis), compared to plants under full sunlight, regardless of the cropping season. / Dentre os vegetais que compÃem ampla diversidade do MaciÃo de Baturità se inserem as plantas medicinais, sendo estas, principais componentes da medicina tradicional. No entanto, informaÃÃes cientÃficas que possam contribuir para o incremento do cultivo dessas plantas ainda sÃo raras, particularmente nas condiÃÃes edafoclimÃticas do Estado do CearÃ. Objetivou-se com o presente trabalho, avaliar o desenvolvimento e o potencial produtivo do alecrim pimenta (Lippia origanoides) nas condiÃÃes edafoclimÃticas do MaciÃo de BaturitÃ, CearÃ. Foram realizados dois experimentos, sendo o primeiro durante o perÃodo seco de 2013 (agosto a novembro) e o segundo durante o perÃodo chuvoso de 2014 (fevereiro a maio). O experimento foi conduzido seguindo um delineamento inteiramente casualizados com parcelas subsubdivididas, sendo as parcelas definidas pelas duas estaÃÃes (seca e chuvosa), as subparcelas formadas pelas condiÃÃes de luminosidade (telado e pleno sol), e as subsubparcelas pelas quatro Ãpocas de avaliaÃÃo (0, 40, 80 e 120 dias apÃs o transplantio). Foram utilizadas cinco repetiÃÃes, sendo cada repetiÃÃo representada por um vaso de 20 litros contendo uma planta. Foram avaliadas as seguintes variÃveis: Ãrea foliar, altura da planta, diÃmetro do caule, massa seca dos diferentes ÃrgÃos vegetais, trocas gasosas, teores de clorofila, teores de minerais, solutos orgÃnicos e rendimento do Ãleo essencial. O alecrim pimenta desenvolveu-se bem na regiÃo do MaciÃo de BaturitÃ, com produtividades de biomassa e de Ãleo essencial similares Ãs observadas em outros estudos. O cultivo em telado alterou o padrÃo de desenvolvimento do alecrim pimenta, resultando em plantas com melhor aparÃncia geral, mais altas, com folhas maiores, maior Ãrea foliar especÃfica, menor desenvolvimento do sistema radicular e menor relaÃÃo raiz/parte aÃrea, independentemente da Ãpoca de cultivo. A produÃÃo de massa seca de folhas e total nÃo diferiu entre os dois ambientes apÃs 120 dias de cultivo, independentemente do perÃodo do ano. Houve forte influÃncia do ambiente de cultivo no perÃodo seco, sobre a condutÃncia estomÃtica e a transpiraÃÃo, com os valores sendo menores no ambiente a pleno sol, sugerindo a sensibilidade estomÃtica da espÃcie Ãs condiÃÃes atmosfÃricas do perÃodo. As plantas cultivadas em telado apresentaram, de forma geral, maiores teores de nutrientes minerais e de compostos nitrogenados (N-aminossolÃveis), em comparaÃÃo Ãs plantas submetidas a pleno sol, independente do Ãpoca de cultivo.
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Caracterização farmacognóstica da droga e do extrato fluído de limoeiro-bravo - Siparuna apiosyce (Martius) A. D.C. / Pharmacognosy od Siparuna apiosyce (Martius) A. DC (´limoeiro-bravo´) - plant drug and fluid extractDominique Corinne Hermine Fischer 09 September 1997 (has links)
Siparuna apiosyce (Mart.) A. DC, espécie vegetal aromática da família Monimiaceae Jussieu, encontrada no sudeste brasileiro, conhecida vulgarmente como \"limão-bravo\", é planta medicinal de uso popular. As folhas são empregadas em problemas gástricos e respiratórios. A espécie consta na primeira edição da Farmacopéia Brasileira, sob a denominação \"limoeiro-bravo\", sendo-considerada a folha, como parte usada. Efetuou-se análise macro e miscroscópica de folha e de caule para fins de identificação da droga inteira, em análises de rotina. O estudo microscópico incluiu folha, na forma pulverizada. Empregaram-se as técnicas usuais de análise. Elaboraram-se desenhos esquemáticos e em detalhe das estruturas microscópicas. As descrições são, igualmente, acompanhadas de fotografias e de fotomicrografias. Efetuou-se análise comparativa de folha e desta em mistura com caule, na proporção naturalmente encontrada no vegetal, tendo-se realizado a determinação de parâmetros físico e químico, abordagem fitoquímica e estudo cromatográfico em camada delgada de ambos. Realizou-se avaliação da atividade antimicrobiana dos extratos fluidos frente a Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans. Foi determinado o teor de óleo essencial presente em folha e em fruto da espécie. Considerando a comercialização da droga, na forma de extrato fluido, estes foram preparados, pelo processo de percolação fracionada (processo \"C\"), segundo a Farmacopéia Brasileira II, a partir das partes aéreas, anteriormente referidas. Efetuou-se a determinação comparativa, para ambos os extratos fluidos, de parâmetros físicos e químico e análise cromatográfica em camada delgada. Para o estudo químico foram elaborados os extratos hexânico, diclorometânico e etanólico, com vistas ao isolamento de componentes de folha e caule. Com o resíduo etanólico efetuou-se processo de extração de alcalóides. O resíduo hexânico e o resíduo bruto de alcalóides foram submetidos à separação por coluna cromatográfica. As frações resultantes foram cromatografadas em camada delgada, tendo sido reunidas aquelas de comportamento cromatográfico semelhante. Posteriormente, efetuaram-se procedimentos específicos para o isolamento de compostos. Entre os vários componentes obtidos, dois foram identificados, por via espectral, tendo sido o estigmasterol e o alcalóide noraporfínico asimilobina. Espectros das substâncias (I.V., RMN 1H, RMN 13C, RMN 13C - DEPT 135º e HETCOR) acompanham o trabalho. / Siparuna apiosyce (Mart.) A. DC., an aromatic medicinal specie of southest Brazil, commonly known as \"limão - bravo\", is traditionally used to treat gastric and pulmonary diseases. The leaves are included in the first edition of the Brazilian Pharmacopeia and officially named \"limoeiro-bravo\". Macro and microscopical descriptions and analysis were made, concerning leaves and twigs. It was performed by usual techniques. Photographies (macro and microscopical analysis) and drawings follow the descriptions. Comparative assays were made considering leaves and twigs with leaves. The author determined physical and chemical parameters, followed by phytochemical screening and thin layer chromatography profile. The respective fluid extrats were prepared by fractionated percolation, as directed under second edition of the Brazilian Pharmacopeia. Physical and chemical parameters and antimicrobial activity of fluid extract. were determined. Essential oil content of leaf and fruit were obtained. Twigs and leaves were extracted by percolation and successively with n-hexane, dichlorometane and ethanol. Extraction procedures for alkaloidal content was performed, with the ethanolic residue, by traditional methods. The hexanic residue and the concentrated alkaloidal phase were submitted to chromatographic column techniques. Specific procedures were applyed for the component isolation. Two compounds were identified by spectrometric determination: stigmasterol and the noraporphine asimilobine alkaloid. This work include RMN 1H, RMN 13C,DEPT 1350and HETCOR spectra.
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Estudo do perfil genético de pacientes com Neoplasias Mieloproliferativas (NMP) cromossomo Filadélfia negativo / Study of genetic profile of patients with Philadelphia-negative Myeloproliferative Neoplasms (MPN)Mariana Marchiani 26 February 2016 (has links)
As neoplasias mieloproliferativas (NMPs) Filadelfia negativo como a policitemia vera (PV), trombocitemia essencial (TE) e mielofibrose primária (MFP) são desordens clonais da célula tronco hematopoiética caracterizadas pela produção excessiva de células mielóides diferenciadas. Este fenômeno ocorre devido à uma mutação somática (JAK2V617F) que ativa a via JAK-STAT de transdução de forma constitutiva. Esta mutação é mais frequente na PV, ocorrendo em 95% dos casos, e em 50% dos casos de TE e MFP. Outro defeito genético que ocorre é a mutação no receptor de trombopoetina, MPL. As mutações em MPL podem ser germinativas ou somáticas e menos de 10% dos pacientes com TE e MFP apresentam essa alteração genética. Entretanto, grande parte dos pacientes com TE e MFP que não apresentam mutação em JAK2V617F ou MPL podem apresentar mutações somáticas no gene CALR. Em adição às mutações somáticas que causam mieloproliferação, outras alterações genéticas em genes que funcionam como reguladores epigenéticos são encontrados nas NMPs nos genes TET2, IDH1, IDH2 e ASLX1. Objetivo: Estabelecer um perfil genético em pacientes com NMP através da avaliação de mutações nos genes JAK2, CALR, MPL, IDH1, IDH2, TET2 e ASXL1 assim como estabelecer uma correlação laboratorial destas na PV, TE e MFP. Casuística e Métodos: Foram utilizadas amostras de sangue periférico de 104 pacientes que foram enviadas para o Laboratório de Biologia Tumoral do Serviço de Hematologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo para avaliação diagnóstica. Quinze dos 104 pacientes são de pacientes com PV (14,4%), 20/104 (19,2%) com MFP, 20/104 (19,2%) com TE e 49/104 (47,1%) com outras doenças hemtológicas. Foi feita a avaliação da prevalência de mutações somáticas, seja por sequenciamento ou análise de fragmentos, nos genes JAK2 (exon 12 e Y931C), MPL, IDH1, IDH2, CALR, TET2 e ASXL1. PCR-RFLP foi realizada para identificação de mutações em JAK2V617F. Resultados: A mutação JAK2V617F foi observada em 30 (28,8%) pacientes (12 PV, 11 TE e 7 MFP), a mutação JAK2 exon 12 foi observada em apenas um (0,96%) paciente com PV, mutação JAK2Y931C em 4 (3,8%) pacientes (1 PV, 2 TE e 1 MFP) e 8 (7,7%) pacientes apresentaram mutações em CALR (3 TE e 5 MFP). Mutações nos genes epigenéticos como IDH1 foram observadas em 9 (8,7%) pacientes (2 TE, 2 MFP, 1 SMD, e 4 pacientes com suspeita de NMP), mutações em IDH2 estão presentes em 5 (4,8%) pacientes (2 TE, 1 SMD/leucemia e 4 pacientes com suspeita de NMP), mutações em ASXL1 foram identificadas em 13 (12,5%) pacientes (1 PV, 3 TE, 2 MFP, 3 SMD/leucemias e 4 com suspeita de NMP) e finalmente, mutações em TET2 foram encontradas em 33 (31,7%) pacientes (3 PV, 5 TE, 4 MFP, 8 SMD/leucemias e 13 pacientes com suspeita de NMP). Além disso, no caso da PV, os pacientes que apresentam mutações em JAK2V617F apresentam valores aumentados de plaquetas (mediana de 5,41 x 105/mm3 plaquetas) em relação aos pacientes sem a mutação (mediana de 2,06 x 105/mm3 plaquetas), com diferença estatística (p=0,031). Pacientes do mesmo grupo que apresentam mutações em TET2 apresentam, opostamente aos com mutações em JAK2V617F, menores valores de plaquetas (mediana de 1,75 x105/mm3 plaquetas) em relação aos pacientes sem mutações no gene TET2 (mediana de 5,41 x 105/mm3 plaquetas), com diferença estatística (p=0,048). No caso da MFP, os pacientes que apresentam mutações em JAK2V617F apresentam valores maiores de leucócitos (mediana de 1,09 x104/mm3 leucócitos) do que os pacientes que não apresentam a mutação (mediana de 6,99 x103/mm3 leucócitos) com diferença estatística (p=0,046), já os pacientes que apresentam mutações no gene ASXL1 apresentam valores menores de hemácias (mediana de 2,43 x106/mm3 hemácias) em relação aos pacientes que não apresentam mutação (mediana de 3,71 x106/mm3 hemácias) com diferença estatística (p=0,042). Conclusão: O trabalho permitiu fornecer um perfil genético dos pacientes com NMP estudados. Além disso, é possível observar que algumas mutações epigenéticas podem influenciar em diferenças clínicas / Myeloproliferative neoplasms (MPNs) Philadelphia (Ph) chromosome negative, such as polycythemia vera (PV), essential thrombocythemia (ET) and primary myelofibrosis (PMF) are clonal disorders of hematopoietic stem cell characterized by increased proliferation of differentiated myeloid cells. This phenomenon occurs due somatic mutation (JAK2V617F) that constitutively stimulates the JAK-STAT signaling pathway. This mutation is more frequent in PV, around 95%, and between 50% in ET and PMF. Other genetic aberration can be observed in the thrombopoietin (TPO) receptor MPL. Mutations in MPL can be in the germline line or somatic and less than 10% of patients with TE or PMF would harbor this genetic alteration. Otherwise, patients with TE or PMF without JAK2V617F or MPL mutation could present somatic mutations in calreticulin (CALR). In addition to somatic mutations that cause myeloproliferation, other genetic alterations that function as epigenetic regulators were identified in genes as TET2, IDH1, IDH2 e ASLX1 in MPN. Objective: Establish genetic profile in patients with diagnosis of PV, ET, and PMF through genetic alterations in the following genes: JAK2, MPL, CALR, IDH1, IDH2, TET2 e ASXL1, and correlate those alterations with demographic characteristic of the study population. Casuistic and Methods: Peripheral blood samples from 104 patients referred to the Tumor Biology Laboratory of the Department of Hematology of Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo for diagnostic investigation were analyzed. Fifteen out 104 samples were from PV patients (14.4%), 20/104 (19.2%) in PMF, 20/104 (19.2%) in ET and 49/104 (47.1%) with other hematologic diseases. Identification of somatic mutations was made, either by direct sequencing or fragment analysis in JAK2 (exon 12 and Y931C), MPL, IDH1, IDH2, CALR, TET2 and ASXL1. PCR-RFLP was performed to identify JAK2V617F mutation. Results: JAK2V617F mutation was observed in 30 (28.8%) patients (12 PV, 11 ET and 7 PMF), JAK2 exon 12 in only one (0.96%) patient with PV, JAK2Y931C in 4 (3.8%) patients (1 PV, 2 ET and 1 PMF), and 8 patients (7.7%) presented CALR mutation (3 ET and 5 PMF). Mutations in the epigenetic genes as IDH1 were observed in 9 (8.7%) patients (2 ET, 2 PMF, 1 MDS and 4 patients with suspected MPN), IDH2 mutations were present in 5 (4.8%) patients (2 ET, 1 MDS/leukemia, and 4 patients with suspected MPN), ASLX1 mutations were identified in 13 (12.5%) patients (1 PV, 3 ET, 2 PMF, 3 MDS/leukemia and 4 with suspected MPN) and finally, TET2 mutations were present in 33 (31.7%) patients (3 PV, 5 ET, 4 PMF, 8 MDS/leukemia, and 13 with suspected MPN). In addition, patients with PV who harbor JAK2V617F have increased platelet counts (median 5.41 x 105/mm3 platelets) compared to those without the mutation (median 2.06 x 105/mm3 platelets, p=0.031). Patients in the same group with TET2 mutation, as opposed to those with JAK2V617F, presented low platelets counts (median of 1.75 x 105/mm3 platelets) compared to those without TET2 mutation (median 5.41 x 105/mm3 platelets, p=0.048). Presence of JAK2V617F in patients diagnosed with PMF have a greater number of leukocytes (median 1.09 x104/mm3 leukocytes) when compared to patients without the mutation (median 6.99 x 103/mm3 leukocytes, p=0.046). Patients with PMF who presented mutations in ASXL1 gene have a lower number of red blood cells (median of 2.43 x 106/mm3) compared to patients without mutations in the same gene (median 3.71 x 106/mm3, p=0.042). Conclusion: The present study allows us to provide a genetic profile of patients with MPN. Furthermore, it is possible to observe that some epigenetic mutations could influence in some clinical differences
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Micropartículas contendo óleo de cymbopogon citratus: desenvolvimento, validação de método analítico e preliminar de estabilidadeWeisheimer, Vanessa January 2008 (has links)
Considerando a atividade antifúngica demonstrada, o óleo de Cymbopogon citratus apresenta-se como uma promissora matéria-prima no desenvolvimento de produtos farmacêuticos. Para a utilização em formulações, é necessário que se verifique a qualidade do óleo, determinada pelo teor de citral, seu componente majoritário. Além disso, cuidados relacionados à sua estabilidade devem ser considerados. Na busca por método alternativo à técnica de cromatografia a gás, comumente utilizada para óleos voláteis, um dos objetivos deste trabalho foi desenvolver e validar método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para quantificar o citral presente no óleo de C. citratus, na forma de seus isômeros geométricos, o neral e o geranial. Em virtude da volatilidade e suscetibilidade à degradação apresentadas pelo óleo de C. citratus, foram preparadas micropartículas contendo essa substância, a fim de melhorar sua estabilidade. Foram avaliadas duas técnicas de preparação, a secagem por aspersão e a precipitação, além de dois materiais encapsulantes, a beta-ciclodextrina e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina. As micropartículas preparadas foram caracterizadas em relação ao teor de umidade, rendimento, porcentagem de inclusão, espectrofotometria na região do infravermelho e a morfologia foi avaliada por microscopia eletrônica de varreduta. Para determinar os teores de neral e geranial presentes nas micropartículas, método por CLAE foi validado. As micropartículas foram incorporadas em emulsões não-iônicas e géis hidrofílicos e estas formulações foram avaliadas quanto às suas propriedades físico-químicas e em relação a sua estabilidade. Os teores de neral e gernanial foram determinados utilizando-se método por CLAE adapatado do método descrito para as micropartículas. / Considering the antifungal activity demonstrated the oil of Cymbopogon citratus presents as a promising raw material for the development of pharmaceutical products. For use in pharmaceutical formulations, it is necessary to verify the quality of the oil, determined by the citral content, its major compound. Moreover, precautions related to its stability should be considered. In the search for alternative method to the technique of gas chromatography, commonly used for volatile oils, one of the purposes of this work was to develop and to validate analytical method by high performance liquid chromatography for quantitation of the citral contents in the C. citratus oil, as its geometric isomers, neral and geranial. Because of the volatility and susceptibility to degradation presented by C. citratus oil, microparticles containing this oil were prepared in order to improve its stability. Two techniques of preparations were evaluated; spraydrying and precipitation, and also two materials of encapsulation, betacyclodextrin and hydroxypropyl-beta-cyclodextrin were tested. The microparticles were characterized by their content of water, yielding, percentage of inclusion, infrared spectroscopy (IV), and the morphology was evaluated by scanning electronic microscopy (SEM). For the determination of neral and geranial contents present into microparticles an HPLC method was validated. The microparticles were incorporated in nonionic emulsions (NIE) and hydrophilic gels (HG), and physico-chemical properties as well as stability of these formulations were evaluated. The neral and geranial contents were determined using the HPLC method adapted from that described for the microparticles.
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Desenvolvimento de formulação nanoestruturada contendo óleo essencial de Rosmarinus officinalis L. Para o tratamento tópico do herpesZibetti, Fiorella Mollo 11 January 2018 (has links)
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FIORELLA ZIBETTI.pdf: 1848554 bytes, checksum: a4058071f9ee8b5dc5ab5c3abb07a729 (MD5) / O óleo essencial de Rosmarinus officinalis (OERo) possui atividade anti- herpética in vitro. Entretanto, os constituintes químicos estão sujeitos à degradação por oxidação ou volatilização. Desta forma, surge a necessidade de desenvolvimento de sistemas carreadores para este ativo vegetal. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver nanoemulsões contendo OERo, comparando dois métodos de baixo aporte energético, titulação à frio e inversão de fases, quanto à estabilidade, teor do marcador químico, perfil de liberação in vitro, permeação e retenção cutânea in vitro e atividade anti-herpética in vitro. O OERo, utilizado nesse estudo, apresentou como constituinte majoritário o eucaliptol (27,9%), descrito na literatura por inibir o vírus Herpes simplex. As nanoemulsões e seus respectivos hidrogéis foram desenvolvidos e conservados em temperatura ambiente por 60 dias. Todas as formulações mantiveram-se estáveis durante o período estudado, apresentando tamanho de gotícula inferior a 200nm. Nenhum dos parâmetros avaliados apresentou diferença significativa entre os métodos utilizados, com exceção do teor, que foi menor em T0 nas nanoemulsões produzidas com aquecimento. Aas formulações apresentaram cerca de 60% de liberação do óleo em 150 minutos em ensaio in vitro. No estudo de permeação/retenção cutânea in vitro foi possível detectar o eucaliptol, por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, no meio de lavagem (~32%), estrato córneo (~12%) e meio receptor (~56%), não sendo observado na epiderme e derme. Para avaliação da atividade anti-herpética, as nanoemulsões apresentaram índice de inibição viral superior a 98,2% (HSV-1) e 99,5% (HSV- 2), apresentando maior especificidade pelo sorotipo 2. As diferentes metodologias não impactaram significativamente na atividade anti-herpética. Dessa forma, conclui-se que ambos os métodos são capazes de preparar nanoemulsões com características semelhantes e estudos in vivo serão necessários para melhor entendimento da atividade do óleo / The essential oil of Rosmarinus officinalis (OERo) has anti-herpetic activity in vitro. However, the chemical constituents are subject to degradation by oxidation or volatilization. Thus, indicating a need to develop carriers systems for this plant active.The aim of the present work was to develop nanoemulsions containing OERo, comparing two low energy methods, cold titration and phase inversion, in terms of stability, chemical marker content, in vitro release profile, in vitro skin permeation and retention, and anti-herpetic activity in vitro. The OERo used in this study presented as main constituent eucalyptol (27.9%), which was described in the literature for inhibiting the Herpes simplex virus. Nanoemulsions and their respective hydrogels were developed by two different methodologies and stored at room temperature for 60 days. All formulations remained stable during the study period, with particle size smaller than 200nm. None of the parameters evaluated showed a significant difference between the methods used, except for the chemical marker content, which was lower in T0 for the nanoemulsions prepared with heating. The in vitro release profile of the formulations showed 60% oil release in 150 minutes. In the in vitro skin permeation / retention study, it was possible to detect eucalyptol, by High Performance Liquid Chromatography, in washing liquid (~32%), stratum corneum (~12%) and receiving liquid (~56%), but none was detected in epidermis and dermis. In order to evaluate the anti-herpetic activity, the nanoemulsions showed a viral inhibition index higher than 98.2% (HSV-1) and 99.5% (HSV-2), presenting a better specificity for serotype 2. Despite the loss of volatile constituents of the oil by heating, the different methodologies did not significantly impact the antiherpetic activity. Thus, it could be concluded that both low-energy methods are able to prepare nanoemulsions with similar characteristics and it is necessary further studies to better understand the oil activity
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Atividade do óleo essencial de frutos de Schinus terebinthifolius raddi (anacardiaceae) em Tetranychus urticae koch (Acari: Tetranychidae) e Rhyzopherta dominica fabricius (Coleoptera: Bostrichidae) / Activity of the essential oil of fruit Schinus terebinthifolius raddi (anacardiaceae) in Tetranychus urticae koch (Acari: Tetranychidae) and Rhyzopherta dominica fabricius (Coleoptera: Bostrichidae)NASCIMENTO, Aline Fonseca do 01 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The search for new biologically active compounds to arthropods seems to have an important role in integrated pest management. Schinus terebinthifolius, popularly known as pepper tree is a kind of abundance in Pernambuco and due to their biological properties is widely used in folk medicine. This study aimed to determine the chemical constituents of essential oils of ripe fruits (OORF) and unripe (OOUF) mastic and evaluate the potential acaricide and insecticide through lethal and sublethal effects on Tetranychus urticae and Rhyzopherta dominica . Analyzed by GC / MS revealed the limonene as the main constituent in both oils (OOUF = 44,1 ± 1,3%; OORF = 31,8 ± 1,2%). The residual contact and fumigant action of these oils on T. uticae revealed OOUF the most active in fumigation (LC50 = 1,46 μL / L of air), while OEFM was more active in the tests of the contact petri dishes closed and opened petri dishes (LC50 μL/L/cm² = 3,04) and did not differ statiscally from eugenol. These oils exhibited significant repellent activity against T. urticae compared with eugenol. For R. dominica fumigation test showed no statistical difference between the two oils, but both were more effective in the exposure period of 72h. Limonene the main constituent of OOUF and OORF, showed the same level of toxicity compared to the essential oils. Tests with blends prepared with the major and minor constituents of these oils indicated that limonene is the major contributor to toxicity obtained for OOUF and OORF. The OOUF was repellent to 25, 35 and 45 μL/2g) and the oil of OORF proved attractive in the lower concentration tested (15 μL/2g) and repellent at the highest (30 and 50 μL/2g). / A busca por novos compostos biologicamente ativos aos artrópodes tem um papel importante no manejo integrado de pragas. Schinus terebinthifolius, conhecida popularmente como aroeira é uma espécie de grande abundância o estado de Pernambuco e, devido as suas propriedades químicas e biológicas, é amplamente utilizada na medicina popular. Este trabalho tem por objetivo determinar os constituintes químicos de óleos essenciais dos frutos maduros (OEFM) e imaturos (OEFI) de aroeira e indicar o potencial acaricida e inseticida, a partir dos efeitos letais e subletais, sobre Tetranychus urticae Koch (Acari: Tetranychidae) e Rhyzopherta dominica Fabr. (Coleoptera: Bostrichidae). A análise realizada por GC/EM revelou o limoneno como constituinte majoritário em ambos os óleos (OEFI = 44,1 ± 1,3%; OEFM = 31,8 ± 1,2%). A ação fumigante e contato residual desses óleos sobre T. urticae revelou que o OEFI foi mais ativo por fumigação (LC50 = 1,46 μL/L de ar), enquanto que o OEFM foi mais ativo nos testes de contato com placas fechadas do que placas abertas (LC50 = 3,04 μL/L/cm2) e não diferiram estatisticamente do eugenol. Estes óleos exibiram significante atividade repelente a T. urticae comparados com o eugenol. Para R. dominica no teste de fumigação não houve diferença estatística entre os óleos, mas ambos se mostraram mais eficazes no período de exposição de 72h. O limoneno, principal constituinte dos OEFI e OEFM, apresentou o mesmo nível de toxicidade quando comparado aos óleos essenciais. Testes com blendas preparadas com os constituintes principais e minoritários desses óleos indicaram que o limoneno foi o composto que mais contribuiu para a toxicidade obtida para o OEFI e o OEFM. O OEFI foi repelente a 25, 35 e 45 μL/2g) e o OEFM se mostrou atraente na menor concentração (15 μL/2g) e repelente nas mais altas (30 e 50 μL/2g).
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Toxicidade de óleos essenciais sobre Tyrophagus putrescentiae (Schrank) e Suidasia pontifica Oudemans (Acari : Astigmata) / Toxicity of plant essential oils toTyrophagus putrescentiae(Schrank) and Suidasia pontifica Oudemans (Acari : Astigmata)ASSIS, Carla Patrícia Oliveira de 01 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use plant-derived essential oils are an alternative for mite control, such as the Tyrophagus putrescentiae (Schrank) and Suidasia pontifica Oudemans, in confined environment. The toxicity of essential oils from Cinnamomum zeylanicum, Eugenia uniflora, Eugenia uvalha, Melaleuca leucadendra, Piper marginatum and Schinus terebinthifolius was compared, through fumigation tests, to that from phosphine, product usually applied in warehouses. Mites were enclosed in screened small cages, allowing ventilation but not mites escaping. The cages were transferred to fumigation glass chambers with 2L capacity. The oils were applied in filter paper straps and fixed at the interior of the chambers. The glass chambers were closed and held in incubator chambers. Mite mortality was assessed after 48 hours of exposure. The mortality data were submitted to normality test and homocedasticity, and the means compared by the Tukey’s test at 5%. The oils from C. zeylanicum, S. terebinthifolius and E. uvalha were the most toxic. The CL50 and CL90 estimates were established for these oils and the eugenol through Probit analysis. The estimates indicated the eugenol as the most toxic treatment towards T. putrescentiae, LC50and LC90 equal to 0.23 μL/L and 14,51 μL/L of air, respectively. For S. pontifica, the LC50 estimate showed the eugenol as the most toxic treatment towards it with an LC50 estimate of 0.57μL/L of air. However, S. terebinthifolius was the most toxic treatment regarding the LC90 estimate, which was 23.48 μL/L of air. / O uso de óleos essenciais de plantas é uma alternativa ao controle de ácaros, como Tyrophagus putrescentiae (Schrank) e Suidasia pontifica Oudemans, em ambientes fechados. A toxicidade dos óleos de folhas de Cinnamomum zeylanicum (Blume.), Eugenia uniflora (Berg.), Eugenia uvalha (Cambess.), Melaleuca leucadendra L., Piper marginatum (Jacq.) e Schinus terebinthifolius foi comparada a fosfina, produto normalmente utilizado em armazéns, através de testes de fumigação. Os ácaros foram colocados em gaiola telada, que permitia a passagem do ar, mas retinha os ácaros em seu interior. As gaiolas foram transferidas para câmaras de fumigação, com capacidade para 2L. Os óleos foram aplicados em tiras de papel de filtro e fixados na parte interna das câmaras. Estas foram fechadas e colocadas em incubadora. A mortalidade dos ácaros foi avaliada após 48 horas. Os dados foram submetidos ao teste de normalidade e homoscedasticidade, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%. Os óleos de C. zeylanicum, S. terebinthifolius e E. uvalha foram os mais tóxicos. Para estes e o eugenol, foramestabelecidas as CL50 e CL90 através da análise de Probit. As estimativas das curvas de concentração resposta indicaram eugenol como mais tóxico a T. putrescentiae, com CL50 e CL90 de 0,23 μL/ L e 14,51 μL/ L de ar, respectivamente. Para S. pontifica, a estimativa da CL50também indicou eugenol como mais tóxico, com CL50 de 0,57 μL/ L de ar, no entanto a estimativa da CL90 indicou S. terebinthifolius como mais tóxico, com CL90 de 23,48 μL/ L de ar.
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