Made available in DSpace on 2016-05-17T16:51:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-13. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-17T16:54:16Z : No. of bitstreams: 1 000864272_20160704.pdf: 706780 bytes, checksum: 4d6888c37d677fae1dd7bf418a013985 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-25T13:17:41Z: 000864272_20160704.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-25T13:18:48Z : No. of bitstreams: 1 000864272.pdf: 941126 bytes, checksum: 0602961cda7c25695afee5dc324562ba (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The progression of the canine visceral leishmaniasis (CVL) is related to the immune response profile. The effective cellular immunity is related to the predominance of Th1 cytokines such as TNF-α and the disease is related to an exacerbated humoral immune response, with the predominance of Th2 cytokines such as IL-10 and TGF-β. TLR-2 is an important receptor of the innate immunity involved in the induction of the cytokines production and the activation of iNOS in visceral leishmaniasis. To understand how the skin may become a permissive microenvironment for the multiplication of this parasite, the expression of genes encoding to TLR-2, to the iNOS enzyme and to the cytokines IL-10, TNF-α and TGF-β was evaluated in skin of dogs naturally affected by CVL and were then was related to the parasite load of this tissue. We observed that the skin of dogs naturally affected by visceral leishmaniasis has a mixed Th1/Th2 immune response profile, with an increased expression of TLR-2, IL-10 and TNF-α that correlates to the increasing of the parasitic load in this tissue, giving these mediators an important role in the pathogenesis of CVL

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Estudos epidemiológicos e moleculares têm sugerido que o HPV é o principal fator de risco para o desenvolvimento de lesões malignas na cérvice uterina. E, sendo o número de infecções extremamente maior do que o número de casos de câncer cervical, este fato nos leva à investigação de outros fatores associados, como por exemplo, a predisposição imunológica do hospedeiro. Este estudo tem como objetivo avaliar a associação dos polimorfismos (-1082A/G) e (-308 A/G), localizados nos genes da IL-10 e TNF-α, respectivamente, com a infecção genital pelo Papilomavírus Humano (HPV), incluindo os tipos oncogênicos HPV-16, 18 e 31, visto que, estas citocinas são moléculas importantes na resposta imune contra infecções virais. Trata-se de um estudo de casos e controles. O grupo controle foi composto por 211 mulheres, que apresentavam resultado negativo para infecção genital por HPV, identificada através da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e exame citopatológico sem alterações. Já os casos, corresponderam a 84 mulheres com infecção genital por HPV e resultado anatomopatológico alterado. A técnica de amplificação refratária de mutações (ARMS-PCR) foi utilizada para a identificação dos polimorfismos. Regressão logística múltipla foi utilizada para verificar a associação das variáveis estudadas com o desfecho (infecção genital pelo HPV).O cálculo de Equilíbrio de Hardy-Weinberg foi utilizado para verificar se as freqüências alélicas e gentotípicas observadas estão de acordo com as esperadas na população em estudo. Para os resultados de IL-10, a freqüência genotípica observada nos casos foi de 11,9% (AA), 28,6% (AG) e 59,5% (GG); a freqüência alélica foi de 26,0% para A e 74,0% para G. No grupo controle, a freqüência genotípica encontrada foi 22,8% (AA), 48,8% (AG) e 28,4% (GG); a freqüência alélica foi de 47,0% para A e 53,0% para G. Houve diferença significativa entre os grupos estudados, tanto para a freqüência alélica quanto para a genotípica (p<0,0001). Entre as mulheres com infecção, encontramos associação das lesões intraepiteliais escamosas de baixo grau (LGSIL) com o genótipo GG (p=0,02). As variáveis idade (RC=4,70; IC95%: 2,61-8,40), co-infecção por HIV (RC=11,21; IC95%:1,002-125,33) e o genótipo GG (RC=4,22; IC95%: 1,84-9,61) permaneceram independentemente associados ao desfecho (infecção genital pelo HPV). Para TNF-α, a homozigosidade do alelo G (genótipo GG) foi encontrada em maior freqüência nos casos (36,9%), seguido por 35,7% do genótipo AA e 27,4% do genótipo AG. Houve diferença significativa entre os grupos estudados, tanto para a freqüência alélica (p<0,0002) quanto para a genotípica: AA (p=0,03), AG e GG (p<0,0001). Analisando a associação com lesões cervicais e tipos oncogênicos, encontramos associação entre o genótipo GG e LGSIL (p<0,01). O genótipo GG está associado ao tipo oncogênico HPV-16 (p<0,05), e à co-infecção pelo vírus HIV (p<0,001). As variáveis idade (RC=3,46; IC95%: 1,89-6,33), os genótipos AG (RC=9,21; IC95%: 4,29-19,75) e AA (RC=2,73; IC95%: 1,25-6,00) permaneceram independentemente associados ao desfecho (infecção genital pelo HPV). Com estes resultados, é possível sugerir que a predisposição determinada geneticamente para a produção de altos níveis de IL-10 e TNF-α parece estar associada à infecção genital pelo HPV, mostrando a importância da resposta imunológica do hospedeiro no processo de infecção e na progressão das lesões cervicais geradas pelo Papilomavírus Humano. / Molecular and epidemiological studies have suggested that HPV is the most important risk factor for the development of malignant lesions in the uterine cervix. The fact that the number of HPV infections is extremely greater than the number of cervical cancer cases leads us to the investigation of other risk factors, such as the predisposition of the host immune. The present study aimed to evaluate the influence of genetic polymorphisms (-1082A/G) and (-308A/G), located in the genes of IL-10 and TNF-α, respectively, with the genital HPV infection, including oncogenic HPV-16, 18 and 31, since these cytokines are important molecules in the immune response against viral infections. This is a case-control study. The control group was composed by 211 women, who have tested negative for HPV genital infection by the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique, and who had normal cytologic results. Cases were 84 women with HPV genital infection and abnormal anatomopathological results. The technique of amplification refractory mutation system (ARMS-PCR) was used to identify the polymorphisms. Multiple logistic regression was used to verify the association between the study factors and the outcome (genital infection by HPV). The Hardy-Weinberg equilibrium was used to verify whether the observed allelic and genotypic frequencies were according with the expected in the studied population. For the results of IL-10, the genotypic frequencies observed in the group of women with infection was 11.9% (AA), 28,6% (AG) and 59.5% (GG), the allelic frequency was 26.0% for 74.0% for A and G. In the control group, the frequency was found genotypical 22.8% (AA), 48.8% (AG) and 28.4% (GG), the allelic frequency was 47.0% to 53.0% for A and G. There were significant differences between groups, both for the allelic frequency as for the genotypic (p<0.0001). Among women with infection, we found association of injuries LGSIL with the GG genotype (p=0021). The variables age (OR=4.70; 95%IC: 2.61-8.40), HIV co-infection (OR=11.21; 95%IC: 1.002-125,33), and genotype GG (OR=4.22; 95%IC: 1.84-9.61) remained independently associated to the outcome (genital HPV infection). For TNF-α analysis, the genotypic frequencies observed in the group of patients was 22.0% (AA), 69.0% (AG) and 8.0% (GG), the allelic frequency was 57.0% and 43.0% for A to G. In the control group, the frequency genotype was found 35.0% (AA), 27.0% (AG) and 36.0% (GG), the allelic frequency was 49.0% for A and 51.0% for G. There were significant differences between groups, both for the allelic frequency (p<0.0002) and to the genotypic: AA (p=0.03), AG e GG (p<0.0001). Analysing the association with cervical lesions and with high-risk type, there was found a significant association, between the genotype GG and LGSIL (p<0.01). The genotype GG is associated with the HPV-16 infection (p<0.05) and with the HIV virus co-infection (p<0001). The variables age (OR=3.46; 95%IC: 1.89-6.33), genotypes AG (OR=9.21; 95%IC: 4.29-19.75) and AA (OR=2.73; 95%IC: 1.25- 6.00) remained independently associated to the outcome (genital HPV infection). The results suggest that the genetically determined predisposition to produce high levels of IL- 10 and TNF-α may be related to the genital HPV infection showing the importance of the host immune response in the progression of cervical lesions caused by the Human Papillomavirus.

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Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-11-06T15:56:00Z No. of bitstreams: 1 claudia_j_f_covas_ioc_bcm_0023_2010.pdf: 6745296 bytes, checksum: cb60c41970a2659edc6c7fd4600969bf (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-06T15:56:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 claudia_j_f_covas_ioc_bcm_0023_2010.pdf: 6745296 bytes, checksum: cb60c41970a2659edc6c7fd4600969bf (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório Interdisciplinar em Pesquisas Médicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose tegumentar Americana (LTA) representa um conjunto de doenças com características clínicas e imunopatológicas distintas, cuja evolução depende, pelo menos em parte, de fatores relacionados à resposta imune do hospedeiro. A imunopatogênese da leishmaniose mucosa (LM), causadas principalmente pela L. braziliensis, é dependente de uma intensa resposta celular do tipo 1, dirigida peincipalmente pela elevada secreção das citocinas IFN-γ e TNF, que apresentam expressão aumentada em presença de IL-12. Por outro lado, várias evidências apontam que a IL-10 é a principal citocina envolvida na regulação da resposta imune em pacientes com leishmaniose, geralmente suprimindo a imunidade mediada por células. Estudos recentes vêm demonstrando que a susceptibilidade ou resistência a dor do hospedeiro a patógenos intracelulares, bem como a gravidade a várias doenças infecciosas podem ser associados com polimorfismos em genes de citocinas. Assim, com o propósito de estabelecer marcadores que possuam ter influência genética na evolução clínica da LTA, o presente trabalho teve como objetivo avaliar as freqüências dos SNPs nos genes da IL-10 -819C>T, IL-12 -1188ª>C 3’UTR, MIF -173G>C e TNF -308G>A em pacientes com histórico de LTA e controles saudáveis. Além diss, buscou-se analisar a associação dos genótipos com a produção das citocinas IL-10, IL-12p70, MIF e TNF nas diferentes formas clínicas da LTA e nos controles saudáveis.. No que se refere aos SNPs IL-10 -819 e IL-12 +1188 não foi observada uma associação dos mesmos com a LTA per se, no entanto, os SNP MIF -17 e TNF -308 sugerem risco à doença: MIF -173GC (OR=0,04; p=0,04) e TNF – 308AA (OR=3,92; p=0,0001). Nenhum dos SNPs estudados apresentou relação com a progressão para a LM, considerada a forma mais grave da LTA. Em relação à dosagem das citocinas IL-10, IL-12, MIF e TNF os indivíduos controles apresentaram níveis menores do que os pacientes com LTA (p<0,05). Na comparação da produção das citocinas entre pacientes com LC e LM, apenas para IL-10 foram observadas diferenças entre as duas formas clínicas, LC (média: 779,4±541,8 pg/mL; mediana= 615 pg/mL; n=52) mais elevados do que na LM (média: 117,5±55,36 pg/mL; mediana=113 pg/mL; n=14). Na análise da produção das citocinas em relação aos diferentes genótipos apenas para o SNP MIF -173 no grupo controle, o genótipo GG (média= 13886±7674 pg/mL; mediana= 14496 pg/mL; n=10) foi associado com altos níveis de MIF (p<0,05). Em relação à produção das citocinas nas CMSP frente aos diferentes antígenos nenhuma diferença foi encontrada para os diferentes genótipos dos SNPs IL-10 -819 e TNF -308. Em conclusão, os resultados descritos nesse trabalho permitiram que fossem gerados dados importantes sobre a influência da genética do hospedeiro na LTA, principalmente para os SNPs MIF – 173G>C e TNF – 308G>A, e sinaliza a relevância da continuidade de estudos dessa natureza para ampliar o nosso entendimento sobre a dinâmica da doença no Brasil no contexto genético do hospedeiro

Obesidade é uma doença multifatorial relacionada com desenvolvimento de patologias como hipertensão arterial, doença arterial coronariana, diabetes tipo 2 e certos tipos de câncer. Estruturas do sistema nervoso central, especialmente o hipotálamo, estão envolvidas no controle do apetite. A estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) é uma técnica de estimulação cerebral não invasiva representando um recurso promissor no tratamento da compulsão alimentar e alterações metabólicas, uma vez que promove neuroplasticidade em vias envolvidas com comportamento alimentar. Portanto, o objetivo desta dissertação foi avaliar os efeitos da exposição à ETCC em ratos submetidos à modelo de obesidade. Todos os procedimentos foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA/HCPA:110455). Quarenta ratos Wistar machos foram divididos em 4 grupos: dieta padrão+sham ETCC, dieta padrão+ETCC, dieta hipercalórica+sham ETCC, dieta hipercalórica+ ETCC. Após 40 dias de exposição à dieta hipercalórica e previamente a exposição ao tratamento ETCC, os ratos foram expostos ao teste de campo aberto (OF, do inglês Open Field) para avaliar atividade exploratória e locomotora e ao teste de labirinto em cruz elevado (EPM, do inglês Elevated Plus Maze) para avaliar comportamento do tipo ansioso. Após 24h dos testes comportamentais, teve inicio a exposição ao tratamento repetido com ETCC bicefálico 20 minutos/dia/8 dias com intensidade de 0,5 mA no tratamento ativo ou exposição aos eletrodos desligados nos animais sham. Vinte e quatro horas após a última sessão de ETCC foram repetidos os testes comportamentais (OF e EPM) e 48h o teste do alimento palatável (PFT, do inglês Palatable Food Test) foi realizado. Para os ensaios bioquímicos, os ratos foram mortos 24 horas após a PFT. Os níveis de fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF, do inglês Brain-derived neurotrophic factor), interleucina 10 (IL-10), interleucina 1 beta (IL-1β), e o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α, do inglês Tumor Necrosis Factor-Alpha) no córtex foram determinados por ELISA (do inglês, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Delta de peso, índice de Lee, peso dos tecidos, níveis de citocinas e BDNF foram analisados por ANOVA de uma via. Foi empregado o teste de Kruskal-Wallis para análise dos dados do OF, EPM e PFT entre os grupos e para análise dos dados pré-tratamento e pós-tratamento foi empregado o teste de Wilcoxon. Diferenças foram consideradas significantes com um P <0,05. Nossos resultados demonstram que o tratamento com ETCC bicefálica reduz a compulsão por alimento palatável em ratos obesos após o jejum e reverte o aumento do Índice de Lee e do peso do tecido adiposo visceral nestes animais. Além disso, verificou-se que a exposição à dieta hipercalórica diminui os níveis de BDNF e IL-10 em cortex. Por outro lado. ETCC bicefálica diminui os níveis de IL-1β e TNF-α em córtex de animais obesos. A exposição à dieta hipercalórica teve efeito ansiolítico que foi revertido pelo tratamento com ETCC. Portanto, a exposição a tratamento repetido com ETCC parece atuar em vias envolvidas em comportamento alimentar modulando alterações neuroplásticas características da obesidade. / Obesity is a multifactorial disease related to development of diseases such as hypertension, coronary artery disease, type 2 diabetes and certain types of cancers. Structures of the central nervous system, particularly the hypothalamus, are involved in food intake control. The transcranial direct current stimulation (tDCS) is a promising non-invasive brain stimulation technique in the treatment of binge eating and metabolic disorders, since it promotes neuroplasticity pathways involved with feeding behavior. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effects of exposure to tDCS in rats subjected to obesity model. All procedures were approved by the Ethics Committee on Animal Use (CEUA / HCPA: number 110455). Forty male Wistar rats were divided into 4 groups: standard diet + sham tDCS (SDS), standard diet + tDCS (SDT), hypercaloric diet + sham tDCS (HDS) and hypercaloric diet + tDCS (HDT). Forty days after exposure to hypercaloric diet and previously exposure to the tDCS treatment, rats were exposed to the open field test (OF) to evaluate locomotor and exploratory activities and to elevated plus maze test (EPM) to assess anxiety-like behavior. Twenty-four hours after the behavioral tests, the repeated bicephalic tDCS treatment was started, 20-minute/day for 8 days, using 0,5mA of intensity in the active treatment or exposure to electrodes turned off in sham animals. Twenty-four hours after the last tDCS session the behavioral tests (OF and EPM) were repeated and the 48 hours before the palatable food test (PFT) was performed. For biochemical assays, the rats were killed 24 hours after the (PFT). Brain-derived neurotrophic factor (BDNF), interleukin 10 (IL-10), interleukin 1 beta (IL-1β), and tumor Necrosis Factor-Alpha (TNF-α) levels in the cortex were determined by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay test (ELISA). Delta weight, Lee index, tissue weight, cytokines and BDNF levels were analyzed by one-way ANOVA. It was employed a Kruskal-Wallis test for analysis of the data of the OF, EPM and PFT between the groups and to analyze the data pre-treatment and post-treatment was used Wilcoxon test. Significance diference was defined at P <0.05. Our results demonstrate that bicephalic tDCS treatment reduces the food craving in obese animals after fasting and it reverts the increased Lee index and the weight of visceral adipose tissue in these animals. Furthermore, it was found that exposure to hypercaloric diet decreases BDNF and IL-10 in the cortex. On the other hand, bicephalic tDCS treatment reduces IL-1β levels and TNF-α in the cortex. Exposure to hypercaloric diet had anxiolytic effect that was reversed by treatment with tDCS. Therefore, exposure to repeated treatment with tDCS appears to act in pathways related to eating behavior modulating changes neuroplastic obesity features.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-19Bitstream added on 2014-06-13T21:05:33Z : No. of bitstreams: 1 rivasgutierrez_jc_dr_arafo.pdf: 816322 bytes, checksum: ec255883d6c0c6ef8ebbe4d64cd79b98 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os macrófagos constituem uma população celular do sistema imune. Estas células podem ser ativadas por uma variedade de estímulos e suas principais funções incluem a fagocitose de partículas estranhas, apresentação de antígenos, produção de citocinas e compostos intermediários do nitrogênio (NO) e do oxigênio (H202). Os cimentos endodônticos são capazes de promover uma estimulação do sistema imune. Neste estudo, foram analisados os níveis de quantificação das citocinas, além do mediador óxido nítrico, como uma medida de estimulação de macrófagos peritoneais de camundongos. Através de análise estatística dos dados, foram observados os níveis de citotoxicidade dos macrófagos de camundongos estimulados pelos diferentes cimentos endodônticos, meio RPMI-1640 (grupo controle -) e LPS (grupo controle +). Os diferentes cimentos testados apresentaram concentrações com diferentes citotoxicidades: Sealapex 35ug/ml, Polímero de Mamona 8,75 ug/ml, do Epiphany 17,5 ug/ml, do Epiphany + Primer 17,5 ug/ml, do Primer 35 ug/ml, do EndoRez 17,5 ug/ml e do AH Plus 70 ug/ml. Após a adequação das concentrações viáveis dos cimentos testados conclui-se que o material que mais estimulou a liberação de NO foi Primer, seguido do Endorez, AH Plus, Ephiphany, Sealapex, Epiphany + Primer. O Polímero de Mamona foi o que estimulou a uma menor produção de NO. Em relação à produção de TNF-alfa o material que estimulou maior produção foi o Primer, seguido de Epiphany, AH Plus, Epiphany + Primer, Sealapex e Polímero de Mamona. O EndoRez não foi capaz de estimular a produção de TNF-alfa. Nenhum dos cimentos testados induziu à liberação de IFN-y, sugerindo que outro mediadores tais como IL-1 e IL-12 possam estar envolvidos na liberação de NO observada no presente estudo. / It was evaluated the citotoxicity of the sealers, Sealapex, Polímero de Mamona, Epiphany, EndoRez and AH Plus in relation to the release of Nitric Oxide, Tumor Necrotic Factor-Alpha and Interferon Gamma in murine cells culture. After the ideal concentration was found, according to MTT test, it was conduded that the sealers with higher release were Polímero de Mamona, EndoRez, Epiphany + Primer, Epiphany, Primer do Epiphany = Sealapex and AH Plus. All sealers reached lower levels of citotoxicity than control.

Estudos epidemiológicos e moleculares têm sugerido que o HPV é o principal fator de risco para o desenvolvimento de lesões malignas na cérvice uterina. E, sendo o número de infecções extremamente maior do que o número de casos de câncer cervical, este fato nos leva à investigação de outros fatores associados, como por exemplo, a predisposição imunológica do hospedeiro. Este estudo tem como objetivo avaliar a associação dos polimorfismos (-1082A/G) e (-308 A/G), localizados nos genes da IL-10 e TNF-α, respectivamente, com a infecção genital pelo Papilomavírus Humano (HPV), incluindo os tipos oncogênicos HPV-16, 18 e 31, visto que, estas citocinas são moléculas importantes na resposta imune contra infecções virais. Trata-se de um estudo de casos e controles. O grupo controle foi composto por 211 mulheres, que apresentavam resultado negativo para infecção genital por HPV, identificada através da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e exame citopatológico sem alterações. Já os casos, corresponderam a 84 mulheres com infecção genital por HPV e resultado anatomopatológico alterado. A técnica de amplificação refratária de mutações (ARMS-PCR) foi utilizada para a identificação dos polimorfismos. Regressão logística múltipla foi utilizada para verificar a associação das variáveis estudadas com o desfecho (infecção genital pelo HPV).O cálculo de Equilíbrio de Hardy-Weinberg foi utilizado para verificar se as freqüências alélicas e gentotípicas observadas estão de acordo com as esperadas na população em estudo. Para os resultados de IL-10, a freqüência genotípica observada nos casos foi de 11,9% (AA), 28,6% (AG) e 59,5% (GG); a freqüência alélica foi de 26,0% para A e 74,0% para G. No grupo controle, a freqüência genotípica encontrada foi 22,8% (AA), 48,8% (AG) e 28,4% (GG); a freqüência alélica foi de 47,0% para A e 53,0% para G. Houve diferença significativa entre os grupos estudados, tanto para a freqüência alélica quanto para a genotípica (p<0,0001). Entre as mulheres com infecção, encontramos associação das lesões intraepiteliais escamosas de baixo grau (LGSIL) com o genótipo GG (p=0,02). As variáveis idade (RC=4,70; IC95%: 2,61-8,40), co-infecção por HIV (RC=11,21; IC95%:1,002-125,33) e o genótipo GG (RC=4,22; IC95%: 1,84-9,61) permaneceram independentemente associados ao desfecho (infecção genital pelo HPV). Para TNF-α, a homozigosidade do alelo G (genótipo GG) foi encontrada em maior freqüência nos casos (36,9%), seguido por 35,7% do genótipo AA e 27,4% do genótipo AG. Houve diferença significativa entre os grupos estudados, tanto para a freqüência alélica (p<0,0002) quanto para a genotípica: AA (p=0,03), AG e GG (p<0,0001). Analisando a associação com lesões cervicais e tipos oncogênicos, encontramos associação entre o genótipo GG e LGSIL (p<0,01). O genótipo GG está associado ao tipo oncogênico HPV-16 (p<0,05), e à co-infecção pelo vírus HIV (p<0,001). As variáveis idade (RC=3,46; IC95%: 1,89-6,33), os genótipos AG (RC=9,21; IC95%: 4,29-19,75) e AA (RC=2,73; IC95%: 1,25-6,00) permaneceram independentemente associados ao desfecho (infecção genital pelo HPV). Com estes resultados, é possível sugerir que a predisposição determinada geneticamente para a produção de altos níveis de IL-10 e TNF-α parece estar associada à infecção genital pelo HPV, mostrando a importância da resposta imunológica do hospedeiro no processo de infecção e na progressão das lesões cervicais geradas pelo Papilomavírus Humano. / Molecular and epidemiological studies have suggested that HPV is the most important risk factor for the development of malignant lesions in the uterine cervix. The fact that the number of HPV infections is extremely greater than the number of cervical cancer cases leads us to the investigation of other risk factors, such as the predisposition of the host immune. The present study aimed to evaluate the influence of genetic polymorphisms (-1082A/G) and (-308A/G), located in the genes of IL-10 and TNF-α, respectively, with the genital HPV infection, including oncogenic HPV-16, 18 and 31, since these cytokines are important molecules in the immune response against viral infections. This is a case-control study. The control group was composed by 211 women, who have tested negative for HPV genital infection by the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique, and who had normal cytologic results. Cases were 84 women with HPV genital infection and abnormal anatomopathological results. The technique of amplification refractory mutation system (ARMS-PCR) was used to identify the polymorphisms. Multiple logistic regression was used to verify the association between the study factors and the outcome (genital infection by HPV). The Hardy-Weinberg equilibrium was used to verify whether the observed allelic and genotypic frequencies were according with the expected in the studied population. For the results of IL-10, the genotypic frequencies observed in the group of women with infection was 11.9% (AA), 28,6% (AG) and 59.5% (GG), the allelic frequency was 26.0% for 74.0% for A and G. In the control group, the frequency was found genotypical 22.8% (AA), 48.8% (AG) and 28.4% (GG), the allelic frequency was 47.0% to 53.0% for A and G. There were significant differences between groups, both for the allelic frequency as for the genotypic (p<0.0001). Among women with infection, we found association of injuries LGSIL with the GG genotype (p=0021). The variables age (OR=4.70; 95%IC: 2.61-8.40), HIV co-infection (OR=11.21; 95%IC: 1.002-125,33), and genotype GG (OR=4.22; 95%IC: 1.84-9.61) remained independently associated to the outcome (genital HPV infection). For TNF-α analysis, the genotypic frequencies observed in the group of patients was 22.0% (AA), 69.0% (AG) and 8.0% (GG), the allelic frequency was 57.0% and 43.0% for A to G. In the control group, the frequency genotype was found 35.0% (AA), 27.0% (AG) and 36.0% (GG), the allelic frequency was 49.0% for A and 51.0% for G. There were significant differences between groups, both for the allelic frequency (p<0.0002) and to the genotypic: AA (p=0.03), AG e GG (p<0.0001). Analysing the association with cervical lesions and with high-risk type, there was found a significant association, between the genotype GG and LGSIL (p<0.01). The genotype GG is associated with the HPV-16 infection (p<0.05) and with the HIV virus co-infection (p<0001). The variables age (OR=3.46; 95%IC: 1.89-6.33), genotypes AG (OR=9.21; 95%IC: 4.29-19.75) and AA (OR=2.73; 95%IC: 1.25- 6.00) remained independently associated to the outcome (genital HPV infection). The results suggest that the genetically determined predisposition to produce high levels of IL- 10 and TNF-α may be related to the genital HPV infection showing the importance of the host immune response in the progression of cervical lesions caused by the Human Papillomavirus.

A apoptose é um importante fator no crescimento do câncer de mama, tendo sido relacionada a progressão tumoral. Por outro lado, o fator de necrose tumoral alfa (TNF-&#945;) que é uma citocina mediadora da apoptose é reconhecida por ter citotoxicidade contra células malignas destes tumores. Neste estudo, a presença de células apoptóticas em tumores graus I, II e III foi investigada e comparada com outros fatores prognósticos estabelecidos do câncer de mama. A detecção in situ da apoptose em células tumorais foi investigada pelo método TUNEL e a produção de TNF-&#945;, proliferação celular, receptores hormonais, expressão dos genes c-erbB-2 e p53 foram analisados utilizando-se procedimento imunoistoquímico. Nossos dados demonstraram que alto índice apoptótico esta relacionado a maiores níveis de proliferação, a expressão de p53, a tumores pouco diferenciados e a negatividade para receptores hormonais. Entretanto, quando analisados somente em tumores grau III, pacientes com história clínica de recidiva e metástase apresentaram menores níveis de apoptose, maiores índices prolifertivos e menor expressão de TNF-&#945; no infiltrado associado ao tumor. Estes achados indicam que em tumores grau III o número de células em apoptose está diretamente relacionado a um comportamento tumoral agressivo. Adicionalmente, foi observado maior expressão de TNF-&#945; no infiltrado inflamatório associado ao tumor e maior índice apoptótico pode estar relacionado a ausência de expansão ganglionar e recidiva do câncer de mama. / Tumor necrosis factor alpha (TNF-&#945;) is a cytokine recognized as an important mediator of apoptosis process and also showed citotoxicity against breast malignant tumor cells. In the present study, the presence of tumor apoptotic cells was investigated in grade I, II and III invasive breast cancer and compared with another prognostic factors. In situ detection of tumor apoptotic cells was investigated by direct immuno-peroxidase of digoxigenin-labeled genomic DNA. The production of TNF&#945;, tumor cell proliferation, hormonal receptor, c-erbB-2 and p53 was investigated using immuhistochemical procedure. Our data demonstrated that patients with high apoptotic rate correlates with higher levels of cell proliferation, positive p53 expression, negative hormonal expression and high grade breast cancer. Otherwise patients with a clinical history of cancer recurrence and metastasis presented a lower number of cancer apoptotic cells, higher tumor proliferation rate and lower expression of TNF-&#945; by inflammatory cells than that observed among patients diagnosed with the same histopathological type of breast cancer but with absence of tumor recurrence and metastasis. Taken together the results suggested that the rate of apoptosis reflect degrees of histological breast cancer and correlates with another prognostic factors. In addition, it is also possible that TNF-&#945; produced by tumorassociated inflammatory cells play an important role in the control of apoptosis of breast cancer cells and clinical behavior.

Orientador:Caris Maroni Nunes / Co-orientador:Valéria Marçal Félix de Lima / Banca:Gisele Fabrino Machado / Banca:Marcia Dalastra Laurenti / Resumo:A progressão da leishmaniose visceral canina (LVC) depende do perfil da resposta imune, sendo que a imunidade celular efetiva está relacionada à predominância de citocinas Th1, como o TNF-α, e o desenvolvimento da doença está mais relacionado à resposta imune humoral exacerbada, com predominância de citocinas Th2, como a IL-10 e o TGF-β. O TLR-2, por sua vez, é um receptor da imunidade inata que tem importante papel na leishmaniose visceral por participar na indução da produção de citocinas e ativação da iNOS. Para entender como a pele pode se tornar um microambiente permissivo à multiplicação do parasita, a expressão dos genes que codificam o TLR-2, a enzima iNOS e as citocinas IL-10, TNF-α e TGF-β foi avaliada na pele de cães naturalmente acometidos por LVC e relacionada à carga parasitária deste tecido, em comparação a cães não infectados. Observou-se que a pele de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral apresenta perfil misto Th1/Th2 de resposta imune, com aumento da expressão do TLR-2, da IL-10 e do TNF-α, aumento este que se correlaciona com o aumento da carga parasitária neste tecido, atribuindo a estes mediadores um papel importante na patogênese da LVC / Abstract:The progression of the canine visceral leishmaniasis (CVL) is related to the immune response profile. The effective cellular immunity is related to the predominance of Th1 cytokines such as TNF-α and the disease is related to an exacerbated humoral immune response, with the predominance of Th2 cytokines such as IL-10 and TGF-β. TLR-2 is an important receptor of the innate immunity involved in the induction of the cytokines production and the activation of iNOS in visceral leishmaniasis. To understand how the skin may become a permissive microenvironment for the multiplication of this parasite, the expression of genes encoding to TLR-2, to the iNOS enzyme and to the cytokines IL-10, TNF-α and TGF-β was evaluated in skin of dogs naturally affected by CVL and were then was related to the parasite load of this tissue. We observed that the skin of dogs naturally affected by visceral leishmaniasis has a mixed Th1/Th2 immune response profile, with an increased expression of TLR-2, IL-10 and TNF-α that correlates to the increasing of the parasitic load in this tissue, giving these mediators an important role in the pathogenesis of CVL / Mestre