Orientador: Gilberto De Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T23:11:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bittencourt_SamaraFavi_M.pdf: 4331032 bytes, checksum: 1687850fe4ff2a1bcd7253f2eaecb782 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: O presente estudo tem como objetivo o desenvolvimento de um método rápido, sensível e específico para quantificação de propiltiouracil em plasma humano utilizando metiltiouracil como padrão interno. O analito e o padrão interno foram extraídos do plasma por uma extração líquido-líquido utilizando um solvente orgânico, acetato de etila. Os extratos foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem (CLAE-EM/EM). A cromatografia foi realizada utilizando uma coluna Phenomenex Gemini C18 5 µm (4,6 mm x 150 mm id) e uma fase móvel constituída por metanol/água/acetonitrila (40/40/20 v/v/v) + 0,1% de ácido fórmico. Para propiltiouracil e metiltiouracil os parâmetros otimizados do potencial de decluster, energia de colisão e potencial de saída da célula de colisão foram, -60 V, -26 eV e -5 V, respectivamente. O método teve um tempo de corrida cromatográfica de 2,5 minutos e uma curva de calibração linear no intervalo de 20-5000 ng/mL. O limite de quantificação foi de 20 ng/mL. Os testes de estabilidade não indicaram nenhuma degradação significativa. Este método de CLAE-EM/EM foi utilizado para avaliar a bioequivalência de duas formulações de comprimidos de 100 mg de propiltiouracil em voluntários saudáveis de ambos os sexos sob jejum e sob estado alimentado. A média com intervalo de confiança de 90% para teste e referência foi sem e com alimentos respectivamente, 109,28% (103,63-115,25%) e 115,60% (109,03-122,58%) para Cmax, 103,31% (100,74-105,96 %) e 103,40% (101,03-105,84) para ASClast. Conclusão: Este método oferece vantagens em relação aos descritos na literatura, tanto em termos de uma extração líquido-líquido simples sem processos de limpeza, bem como um tempo de execução mais rápido, 2,5 minutos. O limite inferior de quantificação de 20 ng/mL é adequado para estudos farmacocinéticos. Os resultados de desempenho do ensaio indicam que o método é preciso e exato para determinação de propiltiouracil em plasma humano. A formulação teste sem e com alimentos foi bioequivalente a formulação de referência. A administração de alimentos aumentou o Tmax e diminuiu a biodisponibilidade, Cmax e ASC / Abstract: A rapid, sensitive and specific method for quantifying propylthiouracil in human plasma using methylthiouracil as the internal standard is described. The analyte and the internal standard were extracted from plasma by liquid-liquid extraction using an organic solvent, ethyl acetate. The extracts were analyzed by high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Chromatography was performed using a Phenomenex Gemini C18 5µm analytical column (4.6 mm x 150mm i.d.) and a mobile phase consisting of methanol/water/acetonitrile (40/40/20 v/v/v) + 0.1% of formic acid. For propylthiouracil and methylthiouracil, the optimized parameters of the declustering potential, collision energy and collision exit potential were -60 V, -26 eV and -5 V, respectively. The method had a chromatographic run time of 2.5 minutes and a linear calibration curve over the range 20-5000 ng/mL. The limit of quantification was 20 ng/mL. The stability tests indicated no significant degradation. This HPLC-MS/MS procedure was used to assess the bioequivalence of two propylthiouracil 100 mg tablet formulations in healthy volunteers of both sexes in fasted and fed state. The mean and 90% confidence interval of test and reference was in fasted and fed state respectively, 109.28% (103.63-115.25%) and 115.60% (109.03-122.58%) for Cmax, 103.31% (100.74-105.96%) and 103.40% (101.03-105.84) for AUClast. Conclusion: This method offers advantages over those previously reported, in terms of both a simple liquid¿liquid extraction without clean-up procedures, as well as a faster run time, 2.5 minutes. The lower limit of quantification of 20 ng/mL is suited for pharmacokinetic studies. The assay performance results indicate that the method is precise and accurate for the determination of the propylthiouracil in human plasma. The test formulation without and with food was bioequivalent to reference formulation. Food administration increased the Tmax and decreased the bioavailability, Cmax and AUC / Mestrado / Farmacologia / Mestra em Farmacologia

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / A pesar que se sabe de la existencia de importantes diferencias interindividuales en la respuesta a la mayoría de los medicamentos que se utilizan en terapéutica humana, y que justifica los distintos esquemas posológicos utilizados en diferentes poblaciones de pacientes, todavía no es posible conocer completamente sus causas. Respecto a estas diferencias interindividuales se sabe que aproximadamente el 99,9% de la secuencia del ADN de dos individuos diferentes es la misma y que una proporción significativa de las diferencias encontradas en los individuos, es decir, sus diferencias fenotípicas y/o susceptibilidades a ciertas enfermedades, radica en el 0,1% de variación; a este tipo de variaciones genéticas se les conoce como polimorfismos genéticos, los cuales representan diferentes formas en las secuencias de ADN. En el presente trabajo se analizaron seis polimorfismos de los cuales uno no fue posible llevar a cabo, de estos cinco polimorfismos restantes, se estudió la frecuencia de UGT1A1*28 (uno de los cinco mencionados) en un sub-grupo de la población general chilena, y los mismos cinco polimorfismos anteriores se analizaron en 15 pacientes con cáncer testicular que fueron tratados con el esquema Etopósido y Cisplatino (EP), mediante PCR-RFLP, SSCP y tiempo real. Los genotipos fueron estudiados en relación a toxicidad y efectividad en los pacientes con objeto de evaluar la respuesta terapéutica a la quimioterapia. Junto a esto, se analizó el perfil de toxicidad del esquema específico EP y se evaluó la existencia de relación entre genotipo y reacción adversa mediante chi-cuadrado. Finalmente, se realizó una comparación de toxicidad entre los esquemas EP y PEB (Etopósido, Cisplatino y Bleomicina) que corresponden a quince y diecinueve pacientes respectivamente. El estudio fue realizado considerando todas las normativas éticas y clínicas aplicables, incluyendo las Buenas Prácticas Clínicas, la Ley de deberes y derechos de los pacientes y la Declaración de Helsinki. De acuerdo a lo anterior, los voluntarios de la población general y los pacientes debieron firmar un consentimiento informado de acuerdo al protocolo aprobado por los comités de ética del Servicio de Salud Metropolitano Norte (SSMN) y de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. Los resultados mostraron que la población chilena posee semejanza a la población española o alemana en cuanto a frecuencias para el alelo (TA)7 (31%) y (TA)6 (68,9%). Estos valores son considerablemente diferentes comparado con población asiática. En cuanto a la eficacia del tratamiento, todos los pacientes presentaron buena respuesta al tratamiento, a excepción de tres casos con DHL alta y uno con β-HCG alta en que costó llegar a valores clínicamente aceptables. Sólo un paciente presentó recidivas, diagnosticado con seminoma clásico, y que había sido sometido a cuatro ciclos de quimioterapia con buena respuesta y marcadores tumorales dentro de rangos normales, para el que finalmente se decidió realizar cuatro ciclos de cisplatino, vinblastina e ifosfamida. La toxicidad del tratamiento Etopósido y Cisplatino (EP) mostró que las reacciones adversas (RAMs) más frecuentes fueron los vómitos, náuseas, neutropenia y anemia. Estas últimas dos RAMs junto con la leucopenia, linfocitopenia, trombocitopenia y toxicidad hematológica dejan de manifiesto a las reacciones de tipo hematológicas como las de mayor consideración tanto en frecuencia como en gravedad. En este respecto se encontró que el grado de náusea que puede presentar un paciente se relaciona con el genotipo presente para el alelo MDR1 3435. Finalmente en la comparación del esquema EP vs PEB se observó que el esquema EP resulta ser más propenso a producir diarrea, cefalea, alopecia y reacciones dermatológicas que el esquema PEB. Por otra parte, el esquema EP presentó menor ocurrencia de efectos adversos tales como anemia, leucopenia, linfocitopenia, neutropenia, neutropenia febril, neurotoxicidad y trombocitopenia que el esquema PEB. En conclusión se observó que no existe asociación estadísticamente significativa entre el grado de las reacciones adversas analizadas y los polimorfismos CYP3A4*1B, CY3A5*3, UGT1A1*28 y MDR1 3435, a excepción de náuseas que se observó se encontraron asociadas con MDR1 3435. Este estudio resulta una investigación preliminar para establecer la necesidad de aumentar el número de pacientes analizados para estudios futuros con el fin de apreciar relaciones que pudieran haber sido más sutiles / Genetic variants in related proteins with etoposide pharmacokinetics and its influence in therapeutic response to patients with testicular cancer. Despite to know the existence of important interindividual differences, in response to the drugs used in human therapeutic, the ones that justify different posologic schemes used in different patients, it is not yet possible to completely understand the causes of this. Regarding these interindividual differences, it is know that about 99,9% of the DNA sequence of two different individuals; a significant proportion of the found differences come from phenotype and/or susceptibilities to certain diseases. This variation lies in 0, 1%, known as genetic polymorphisms, which represents different shapes in the DNA sequence. In this investigation, there were six polymorphisms analyzed, one of them was not possible to carry out. From the remaining five polymorphisms, the frequency of UGT1A1 * 28 was analyzed in a sub-group of the Chilean population. These five polymorphisms were analyzed in 15 patients with testicular cancer, who were treated with etoposide and cisplatin scheme (EP), using PCR-RFLP, SSCP in real time. The genotypes were studied in relation to toxicity and effectiveness in patients in order to assess the therapeutic response to chemotherapy. Alongside this, the toxicity profile of the specific scheme EP is analyzed and the existence of relationship between genotype and adverse reaction was assessed using chi-square. Finally, a comparison of toxicity between EP and PEB schemes (etoposide, cisplatin and bleomycin) corresponding to fifteen and nineteen patients was performed, respectively. The study was conducted considering all applicable ethical standards and clinics, including Good Clinical Practices, the duties and rights of patients and the Declaration of Helsinki. In relation to the last, the volunteers from the general population and patients had to sign a consent form approved by the ethical committee from the North Metropolitan Health Service (SSMN) and the Medicine Faculty, University of Chile. The results showed that the Chilean population has resemblance to Spanish or German population regarding frequencies for allele (TA) 7 (31%) and (TA) 6 (68.9%). These values are significantly different compared to Asian population. As for the effectiveness of treatment, all patients had good response to treatment, except for three cases with high DHL and one high β-HCG in which cost reach clinically acceptable values. Only one patient had recurrences diagnosed with classic seminoma, and had been subjected to four cycles of chemotherapy with good response and tumor markers within normal ranges, for which finally decided to four cycles of cisplatin, vinblastine and ifosfamide. Treatment toxicity Etoposide and Cisplatin (EP) showed that the most common adverse reactions (ADRs) were: vomiting, nausea, neutropenia and anemia. These last two RAMs with leukopenia, lymphocytopenia, thrombocytopenia and hematologic toxicity leave apparent hematological reactions, such as further consideration both in frequency and severity. In this regard, it was found that the degree of nausea that a patient may present is related to the present MDR1 genotype for the 3435 allele. Finally, in comparison to EP scheme PEB it was observed that EP scheme is more likely to produce: diarrhea, headache, alopecia and skin reactions scheme PEB. Moreover, the EP scheme had lower occurrence of adverse effects such as anemia, leukopenia, lymphopenia, neutropenia, febrile neutropenia, thrombocytopenia, neurotoxicity that scheme PEB. In conclusion, it was found that there is no statistically significant association between the degree of adverse reactions analyzed and CYP3A4 * 1B, CY3A5 * 3, UGT1A1 * 28 and MDR1 3435 polymorphisms, except for nausea which was observed were found associated with MDR1 3435. This study is a preliminary investigation to establish the need to increase the number of patients analyzed for future studies in order to assess relationships that may have been more subtle

Orientador: Daniela Ponce / Resumo: Introdução: O controle da infecção no ambiente de terapia intensiva por patógenos hospitalares, frequentemente, inclui a utilização de vancomicina. Ressalta-se que profundas alterações ocorrem na farmacocinética dos antimicrobianos prescritos aos pacientes criticamente doentes e que os diferentes métodos dialíticos podem removê-los parcial ou totalmente. Objetivo: Avaliar a redução do antimicrobiano vancomicina por diferentes métodos de diálise em pacientes com lesão renal aguda (LRA) associada à sepse e identificar as variáveis associadas a concentrações terapêuticas. Metodologia: Estudo transversal que avaliou pacientes sépticos com LRA em hemodiálise convencional intermitente (HDI) ou hemodiálise prolongada (HDP) e em tratamento com vancomicina internados em Unidade de Terapia Intensivas (UTI) do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP. Foram colhidas amostras seriadas de sangue no início da terapia dialítica, após 2 e 4 horas do tratamento e ao final da terapia. A concentração sérica de vancomicina foi aferida por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) ou por Imunoensaio enzimático homogêneo (Enzyme Multiplied Immunoassay Technique - EMIT). A partir desses dados foi realizado avaliação farmacocinética e Modelagem PK/PD. Resultados: De março de 2015 a agosto de 2017 foram incluídos 27 pacientes tratados por HDI, 17 por HDP 6h e 11 por HDP 10h. O volume de distribuição, assim como o tempo de meia vida e clearence dialítico da vancomicina fo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Infection control in the intensive care environment by hospital pathogens often includes the use of vancomycin. It is noteworthy that profound changes occur in the pharmacokinetics of antimicrobials prescribed to critical patients and that different dialytic methods may partially or totally remove them. Objective: To evaluate the reduction of antimicrobial vancomycin by different dialysis methods in patients with AKI associated with sepsis and to identify the variables associated with its therapeutic level. Methodology: A cross-sectional study evaluating septic patients with AKI on intermittent conventional hemodialysis (IHD) and prolonged hemodialysis (PHD) and vancomycin treatment in intensive care unit (ICU) of Clinics Hospital of the Faculty of Medicine of Botucatu - UNESP. Serial blood samples were collected at the start of dialysis therapy after 2 and 4 hours of treatment and at the end of therapy. The serum level of vancomycin was measured by high performance liquid chromatography (HPLC) or by Enzyme Multiplied Immunoassay Technique (EMIT). From these data, pharmacokinetic evaluation and PK / PD modeling were performed. Results: From March 2015 to August 2017, 27 patients treated for IHD, 17 for PHD 6h and 11 for PHD 10h were included. The volume of distribution was higher in the groups PHD 6h and PHD 10h (p <0.001), as well as half-life (p <0.001) and dialytic clearance of vancomycin (p <0.001). The reduction of vancomycin after 2 hours of therapy was 26... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Magíster en farmacología / Este proyecto de Tesis tipo Actividad Formativa Equivalente (AFE) comprendió la participación en un estudio clínico comparativo de Biodisponibilidad Bioequivalencia (BD/BE) in vivo entre dos formulaciones de Zopiclona, el objetivo general fue adquirir competencias en la elaboración y ejecución de ensayos clínicos. El estudio se desarrolló en Innolab, Organización de Investigación por Contrato (OIC) certificada, con un sistema de aseguramiento de la calidad implementado. Antes de iniciar la participación en las actividades del estudio se realizó la acreditación en “Protección de Participantes Humanos en la Investigación” y buenas prácticas clínicas (GCP). El protocolo del estudio se elaboró siguiendo las recomendaciones de la Norma Técnica Nº 57 para la regulación de la ejecución de estudios clínicos con fármacos en humanos, y los lineamientos GCP-ICH E6; fue aprobado sin modificaciones por el Instituto de Salud Pública (ISP) y el Comité de Ética en Investigación (CEI). El diseño de estudio, la metodología, el análisis estadístico a emplear y los criterios de BE especificados en el protocolo, se propusieron basados en guías nacionales e internacionales (G-BIOF 01, G-FDA). El Estudio se ejecutó cumpliendo con el protocolo; se respetaron los principios éticos de la investigación en humanos garantizando el bienestar de los voluntarios; y se emplearon GCP asegurando la fiabilidad de los resultados. Estuvo dividido en tres etapas: clínica, analítica y estadística; una vez concluidas se realizó un Informe Final de Resultados que fue presentado al ISP mediante el formulario BIOF 03 y un Informe de Finalización de estudio presentado al CEI. Toda la información del Estudio se registró en el Archivo Carpeta Maestra y estuvo disponible para auditorías. El ensayo fue cruzado, aleatorizado, dos periodos, dos secuencias, dosis única en ayuno, wash out 7 días, en 30 sujetos sanos. Los niveles plasmáticos de Zopiclona se midieron mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución con detección de Masa Tándem (LC-MS-MS). Para evaluar BE se determinaron los Intervalos de Confianza (IC) 90% para la razón de las medias de los parámetros farmacocinéticos logarítmicamente transformados concentración plasmática máxima (Cmáx), área bajo la curva de concentraciones plasmáticas hasta 24 horas (ABC0–24) y hasta tiempo infinito (ABC0→∞), del producto Test B respecto al Referente A; los límites preestablecidos de BE fueron: 80% a 125%. Todos los intervalos estuvieron dentro de los límites. Se concluyó que el medicamento Test era bioequivalente con el Referente. / This Equivalent Formative Activity (EFA) thesis project involved participation in a comparative Bioavailability/bioequivalence (BA/BE) in vivo clinical study between two formulations of Zopiclone, the aim was to acquire skills in developing and conducting clinical trials. The study was performed at Innolab, Contract Research Organization (CRO) certified with a implemented quality assurance system. Previously, starting activities a "Protecting Human Research Participants” and Good Clinical Practice (GCP) accreditation certificates were obtained. The study protocol was developed following recommendations of “Norma Técnica Nº 57”, the regulation for the execution of clinical studies with drugs in humans and the GCP-ICH E6 guidelines; it was approved without modifications by the “Instituto de Salud Pública” (ISP) and The Ethics Committee (CEI). The study design, the methodology, the statistical analysis to be used and the BE criteria were specified in the protocol based on national and international guidelines (G-BIOF 01, G-FDA). The study was conducting according to the protocol; the ethical principles of human research were respected and GCP were used to ensuring volunteers well-being and results reliability. It was conducted through three phases: clinical, analytical and statistical. After finishing each one a Final Results Report was submitted to the ISP through the BIOF 03 form, and a Final Study Report submitted to the CEI. All the study information was recorded in the Master Folder File and was available for inspections. The study was crossover, randomized, two periods, two sequences, single dose in fasting conditions, wash out 7 days, in 30 healthy volunteers. Plasma levels of Zopiclone were determined by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry (LC-MS-MS). To evaluate BE the 90% Confidence Interval (CI) was determined for the ratio of the mean to the logarithmically transformed pharmacokinetic parameters maximum plasma concentration (Cmáx), area under the curve from time zero to 24 hours (AUC0→24) and until infinity (AUC0→∞), of the Test product B respect to Referential product A, the predetermined limits of BE were: 80 % to 125%. All CIs were within limits. As conclusion the Test product was bioequivalent with the Referent.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Actualmente los antimicrobianos disponibles para el tratamiento de cuadros respiratorios en perros son limitados y requieren terapias prolongadas. En el presente estudio se estudiaron distintos parámetros farmacocinéticos de florfenicol y florfenicol amina en perros, luego de la administración de 10 mg/Kg del fármaco por vía subcutánea. Los resultados obtenidos para florfenicol fueron los siguientes: concentración máxima (Cmax) de 1,58 ± 0,38μg/mL, tiempo en que se alcanzó la concentración máxima (Tmax) 3 ± 1,15 h, clearance (Cl) 1,01 ± 0,13 L/Kg/h, vida media (t½) 13,12 ± 3,10 h y volumen de distribución (Vd) 19,02 ± 3,87L/Kg entre otros valores. En cuanto a los parámetros registrados para florfenicol amina son los siguientes: concentración máxima (Cmax) de 1,57 ± 0,36μg/mL, tiempo en que se alcanzó la concentración máxima (Tmax) 3 ± 1,15 h, clearance (Cl) 0,50 ± 0,21L/Kg/h, vida media (t½) 5,35 ± 1,82h y volumen de distribución (Vd) 4,22 ± 2,97L/Kg entre otros. Debido a que las concentraciones de florfenicol obtenidas en este estudio son más altas que las Concentraciones Mínimas Inhibitorias de las bacterias que afectan al sistema respiratorio de los animales, florfenicol podría ser una herramienta terapéutica para el tratamiento de patologías en perros. / Currently antimicrobials available for the treatment of respiratory tract diseases in dogs are limited and require prolonged therapy. In the present study, we examined various pharmacokinetic parameters of florfenicol and florfenicol amine in dogs after administration of 10 mg / kg of the drug for subcutaneous via.The results obtained for florfenicol were: maximum concentration (Cmax) 1.58 ± 0.38 μg/mL,peak concentration time (Tmax) was 3 ± 1.15 h, clearance (Cl)1.01 ± 0.13 L/Kg/h, half-life (t½)13.12 ± 3.10 h and volume of distribution (Vd) 19.02 ± 3.87L/Kg betweenother values. Regarding the parameters recorded for florfenicol amine are: maximum concentration (Cmax) 1.57 ± 0.36 μg/mL,peak concentration time (Tmax) was 3 ± 1.15 h, clearance (Cl) 0.50 ± 0.21 L/Kg/h, half-life (t½) 5.35 ± 1.82h and volume of distribution (Vd) 4.22 ± 2.97 L/Kg. Because florfenicol concentrations obtained in this study are higher than the minimum inhibitory concentration of bacteria that affect the respiratory system of animals, florfenicol could be a therapeutic tool for the treatment of these pathologies in dog.

El presente trabajo se realizó con el propósito de evaluar la influencia de cuatro tipos de materiales de empaque que son empleados regularmente para tabletas, sobre una formulación de lamivudina 150 mg tabletas recubiertas obtenida por compresión directa. Para realizar este estudio se elaboró un lote piloto de lamivudina 150 mg tabletas recubiertas, luego se acondicionó en cuatro tipos de materiales de empaque: PVC/Aluminio, PVC/PVDC / Aluminio, Aclar / Aluminio y Alupol / Alupol, y fueron sometidos a un estudio de estabilidad acelerada de seis meses, a condiciones de temperatura y humedad recomendadas para el Perú según the United States Pharmacopeia 27 (USP 27). Para determinar el material de empaque adecuado se realizaron los respectivos ensayos fisicoquímicos durante el estudio de estabilidad. Al final del estudio, todos los materiales de empaque evaluados garantizaron la calidad del producto. A continuación, se realizó el análisis económico de cada material de empaque empleado, para establecer cuál permite ahorrar costos sin afectar la calidad de producto final. Finalmente considerando los aspectos de calidad, logísticos, costos y marketing, se concluye que el PVC es el material de empaque mas adecuado para el producto de manera integral. / The aim of this the present study was to evaluate the influence of four different primary package materials that are used regularly for tablets, over a formulation by direct compression of lamivudine 150 mg coated tablet. The pilot-size batch was packed in the next primary package material used in this study: PVC (polyvinyl chloride) / Aluminum, PVC/PVdC (polyvinylidene chloride) / Aluminum, PVC/PCTFE (Polychlorotrifluoroethylene) / Aluminum and polyethylene aluminum foil “Alupol/Alupol”. At last these product were include in an accelerated stability study during six months to conditions of recommended temperature and humidity for Peru (zone IV) according to the United States Pharmacopeia 27 (USP27). In order to determine the material of suitable packing parameters test were developed during the stability study. At the end of the study, all the evaluated materials of packing guarantee the quality of the product. Then the economic analysis of each material of used packing was achieved, to establish which material allows to save costs without affecting the quality of the product. Finally considering the aspects of quality, logistic, cost and marketing, it is concluded that the PVC is the material of suitable packaging but for the product of integral way.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Actualmente, el tratamiento de elección para la demodicosis canina generalizada (DCG) es ivermectina (IVM) 1% en dosis de 600 µg/Kg pv/día vía oral. Sin embargo, la aparición de signos de toxicidad y el uso extraetiqueta de este fármaco en perros, sugieren la necesidad de disminuir la dosis pero manteniendo la eficacia de la terapia. El objetivo de este estudio fue describir los parámetros farmacocinéticos de IVM en dosis única de 400 µg/Kg pv, vía oral en perros. Se utilizaron 4 perros de 28,75 ± 8,9 kg de peso (promedio ± DE). Se obtuvieron muestras de sangre pre y post tratamiento hasta el día 40. IVM fue cuantificada a partir de plasma, mediante cromatografía líquida de alto rendimiento con detección de fluorescencia (HPLC-FLUOR). La concentración máxima (Cmáx) fue de 184,95 ± 23,1 ng/ml y se obtuvo en un tiempo (Tmáx) de 6,48 ± 3,8 hrs. (0,27 ± 0,16 días). La constante de eliminación (λ) y la vida media de eliminación (T1/2) fueron de 0,138 ± 0,037 y 5,344 ±1,704 días, respectivamente. El área bajo la curva final (ABCfinal) obtenida fue de 359,67 ± 80,388 ng/día/ml y el ABC∞ (área bajo la curva hasta el infinito) fue 410,04 ± 126,725 ng/día/ml. El clearence (CL) fue de 1,042 ± 0,290 ml/kg/día y el volumen de distribución fue de 7,675 ± 1,671 Lt/kg. Ningún individuo tratado presentó signos de toxicidad durante el estudio. Estos resultados sugieren que una dosis de 400 µg/Kg es segura de utilizar, pero debe ser analizada en forma conjunta con estudios de eficacia clínica para ser propuesto como una alternativa terapéutica segura contra la demodicosis canina

A venlafaxina é um fármaco usado no tratamento da depressão e dos transtornos de ansiedade generalizada. É disponível na clínica na forma de mistura racêmica dos enantiômeros S-(+) e R-(-) em formulação de liberação controlada. O enantiômero S-(+) inibe a recaptação da serotonina, enquanto o enantiômero R-(-) inibe a recaptação da serotonina e da norepinefrina. A venlafaxina é biotransformada pelo CYP2D6 e CYP2C19 em seu principal metabólito, O-desmetilvenlafaxina, o qual apresenta atividade farmacológica semelhante à venlafaxina. Outros metabólitos da venlafaxina, dependentes do CYP3A4, incluem a N-desmetilvenlafaxina e a N,O-di-desmetilvenlafaxina. A absorção e a distribuição da venlafaxina são moduladas pela ação da glicoproteina-P. O nifedipino, um fármaco da classe dos inibidores dos canais de cálcio, é descrito como inibidor da glicoproteina-P. O presente estudo investiga a influência do nifedipino na disposição cinética e no metabolismo da venlafaxina em voluntários sadios caracterizados como portadores de atividade normal do CYP3A (omeprazol como fármaco marcador) e fenotipados como metabolizadores rápidos do CYP2C19 (omeprazol como fármaco marcador) e do CYP2D6 (metoprolol como fármaco marcador). Os voluntários investigados receberam, em estudo cruzado e randomizado, dose única oral de 150 mg de venlafaxina racêmica (Fase 1) e 40 mg de nifedipino associada com dose única oral de 150 mg de venlafaxina racêmica (Fase 2). Foram coletadas amostras seriadas de sangue até 72 horas após a administração dos fármacos para o estudo farmacocinético. As concentrações plasmáticas dos enantiômeros da venlafaxina e de seus metabólitos foram determinadas por LC-MS/MS utilizando a coluna Chirobiotic V com fase móvel constituída de mistura de metanol: solução aquosa de acetato de amônio 15 mmol/L pH 6,0 (80:20, v/v). A farmacocinética da venlafaxina mostrou-se enantiosseletiva com acúmulo plasmático (AUC 526,0 vs 195,7 ng.h/mL) e menores valores de clearance (Cl/f 142,67 vs 408,01 L/h) para o enantiômero S-(+). A disposição cinética do metabólito ativo O-desmetilvenlafaxina apresentou enantiosseletividade apenas no parâmetro concentração plasmática máxima com observação de maiores valores para o enantiômero R-(-) (Cmax 69,33 vs 56,94 ng/mL). A disposição cinética da N,O-di-desmetilvenlafaxina também mostrou-se enantiosseletiva apenas para o parâmetro concentração plasmática máxima, mas com observação de maiores valores para o enantiômero S-(+) (Cmax 7,08 vs 4,61 ng/mL). A administração de dose única oral de 40 mg de nifedipino não alterou a farmacocinética de ambos os enantiômeros da venlafaxina e de seus metabólitos O-desmetilvenlafaxina e N,O-di-desmetilvenlafaxina, seja utilizando teste estatístico não paramétrico (teste de Wilcoxon para dados pareados, p < 0,05), seja avaliando o IC 90% das razões das médias geométricas de AUC e Cmax (Fase 2/Fase 1). Os dados obtidos evidenciam que o nifedipino na dose de 40 mg não age como um inibidor da P-gp / Venlafaxine is a drug used to treat depression and generalized anxiety disorders. It is available in clinical practice in the form of a racemic mixture of S-(+) and R-(-) enantiomers, in controlled release formulation. The S-(+) enantiomer inhibits the reuptake of serotonin, while the R-(-) enantiomer inhibits the reuptake of both serotonin and norepinephrine. Venlafaxine is biotransformed by CYP2D6 and CYP2C19 in its major metabolite, O-desmethylvenlafaxine, which has similar pharmacological activity when compared to venlafaxine. Other metabolites of venlafaxine, dependent of CYP3A4, include N-desmethylvenlafaxine and N, O-di-desmethylvenlafaxine. The absorption and distribution of venlafaxine are modulated by the action of P-glycoprotein. Nifedipine, a calcium channel blocker drug, is described as an inhibitor of P-glycoprotein. The present study investigates the influence of nifedipine on the kinetic disposition of venlafaxine enantiomers and its metabolites in healthy volunteers characterized as having normal activity of CYP3A (omeprazole as a probe drug) and phenotyped as rapid metabolizers of CYP2C19 (omeprazole as a probe drug) and CYP2D6 (metoprolol as a probe drug). The enrolled volunteers received, in a randomized, two-way study, a single 150 mg oral dose of racemic venlafaxine (Phase 1) and 40 mg oral dose of nifedipine associated with a single 150 mg oral dose of racemic venlafaxine (Phase 2). Serial blood samples were collected until 72 hours after drug administration to the pharmacokinetic study. Plasma concentrations of venlafaxine enantiomers and its metabolites were determined by LC-MS/MS using a Chirobiotic V column and a mobile phase constituted of methanol: aqueous 15 mmol/L ammonium acetate solution pH 6.0 (80:20, v/v). The venlafaxine pharmacokinetics is enantioselective with plasma accumulation (AUC 526.0 vs 195.7 ng h/mL) and lower clearance values (CL/f 142.67 vs 408.01 L/h) for the S-(+) enantiomer. The kinetic disposition of the active metabolite O-desmethylvenlafaxine exhibits enantioselectivity only in the maximum plasma concentration parameter with higher values for the R-(-) enantiomer (Cmax 69.33 vs 56.94 ng/mL). The kinetic disposition of N,O-di-desmethylvenlafaxine is also enantioselective only for the maximum plasma concentration parameter, but with higher values for the S-(+) enantiomer (Cmax 7.08 vs 4.61 ng/ml). Administration of a 40 mg single oral dose of nifedipine do not alter the pharmacokinetics of both enantiomers of venlafaxine and its metabolites O-desmethylvenlafaxine and N,O-di-desmethylvenlafaxine, using non-parametric statistical test (Wilcoxon test for paired data, p <0.05), or evaluating the 90% CI of the AUC and Cmax geometric mean ratios (Phase 2/Phase 1). The obtained data show that nifedipine in a 40 mg oral dose does not act as a P-gp inhibitor.

O citalopram (CITA), inibidor seletivo da recaptação da serotonina, é disponível na clínica como mistura racêmica dos enantiômeros (+)-(S) e (-)-(R) ou como enantiômero puro (+)-(S)-CITA. O CITA é metabolizado pelo CYP2C19, CYP2D6 e CYP3A ao desmetilcitalopram (DCITA) e pelo CYP2D6 ao didesmetilcitalopram. O estudo investiga a influência de inibidores enzimáticos no metabolismo enantiosseletivo do CITA em ratos e em voluntários sadios. Os ratos machos Wistar (n=6 para cada grupo) foram tratados com dose única de 20 mg/Kg de CITA (grupo controle) ou pré-tratados com 80 mg/Kg de quinidina (grupo quinidina), 10 mg/Kg de fluvoxamina (grupo fluvoxamina) ou 50 mg/Kg de cetoconazol (grupo cetoconazol). As amostras de sangue foram colhidas dos ratos até 20 h após a administração do CITA. Os voluntários sadios fenotipados como metabolizadores extensivos (EM) do CYP2C19 (omeprazol como fármaco marcador), EM do CYP2D6 (debrisoquina como fármaco marcador) e com atividade normal do CYP3A (midazolam como fármaco marcador) receberam dose única p.o. de 20 mg de CITA racêmico associado ou não ao omeprazol (20 mg/dia durante 18 dias). Os enantiômeros do CITA e do DCITA foram analisados no sistema LC-MS/MS, com a coluna quiral Chiralcel OD-R e fase móvel constituída por acetonitrila:metanol:água (30:30:40 v/v/v) contendo 0,05 % de dietilamina. O método foi linear no intervalo de concentrações de 0,1 20 ng de cada enantiômero do CITA e DCITA/mL de plasma humano e de de 0,1 500 ng de cada enantiômero do CITA e DCITA/mL de plasma de rato. Os coeficientes de variação obtidos nos estudos da precisão e a inexatidão foram inferiores a 15 % para plasma humano e plasma de ratos. A disposição cinética do CITA é enantiosseletiva nos ratos dos grupos controle (razão de AUCS/R de 0,4), quinidina (razão de AUCS/R de 0,5) e cetoconazol (razão de AUCS/R de 0,8). A inibição do CYP2D pela quinidina resultou em inibição do metabolismo do CITA e do DCITA de maneira não enantiosseletiva. A inibição do CYP2C pela fluvoxamina e do CYP3A pelo cetoconazol resultou em inibição somente do metabolismo do (+)-(S)-CITA. A disposição cinética do CITA em voluntários sadios é enantiosseletiva na ausência de tratamento com o omeprazol com observação de maior proporção plasmática do enantiômero (-)-(R)-CITA. A razão de AUCS/R obtida para o CITA foi de 0,56 e para o metabólito DCITA foi de 1,06. A administração de CITA racêmico a voluntários sadios em tratamento com o omeprazol exibe perda da enantiosseletividade na farmacocinética do CITA. A razão de AUCS/R foi de 0,96 para o CITA e de 0,92 para o DCITA. A administração de omeprazol em doses múltiplas a voluntários sadios inibe de maneira enantiosseletiva o metabolismo do eutômero (+)-(S)-CITA com aumento das concentrações plasmáticas em aproximadamente 140%. / Citalopram (CITA), a selective serotonin reuptake inhibitor, is available for clinical use as a racemic mixture of the (+)-(S) and (-)-(R) enantiomers or as the pure (+)-(S)-CITA enantiomer. CITA is metabolized by CYP2C19, CYP2D6 and CYP3A to demethylcitalopram (DCITA) and by CYP2D6 to didemethylcitalopram. The present study investigated the influence of enzyme inhibitors on the enantioselective metabolism of CITA in rats and healthy volunteers. Male Wistar rats (n=6 for each group) received a single dose of 20 mg/kg CITA (control group) or were pretreated with 80 mg/kg quinidine (quinidine group), 10 mg/kg fluvoxamine (fluvoxamine group), or 50 mg/kg ketoconazole (ketoconazole group). Blood samples were collected from the animals up to 20 h after the administration of CITA. Healthy volunteers phenotyped as extensive metabolizers of CYP2C19 (omeprazole as marker drug) and of CYP2D6 (debrisoquine as marker drug) and those with normal CYP3A activity (midazolam as marker drug) received a single oral dose of 20 mg racemic CITA combined or not with omeprazole (20 mg/day for 18 days). The CITA and DCITA enantiomers were analyzed by LC-MS/MS using a Chiralcel OD-R chiral column and a mobile phase of acetonitrile:methanol:water (30:30:40, v/v/v) containing 0.05% diethylamine. The method was linear in the concentration range of 0.1-20 ng of each CITA and DCITA enantiomer/mL human plasma and of 0.1-500 ng of each CITA and DCITA enantiomer/mL rat plasma. Accuracy and precision were below the acceptance limits of 15% for human and rat plasma. The kinetic disposition of CITA was enantioselective in rats of the control (AUCS/R ratio = 0.4), quinidine (AUCS/R ratio = 0.5) and ketoconazole (AUCS/R ratio = 0.8) groups. The inhibition of CYP2D by quinidine resulted in the non-enantioselective inhibition of the metabolism of CITA and DCITA. The inhibition of CYP2C by fluvoxamine and of CYP3A by ketoconazole only inhibited the metabolism of (+)-(S)-CITA. The kinetic disposition of CITA in healthy volunteers was enantioselective in the absence of treatment with omeprazole, with the observation of a higher plasma proportion of the (-)-(R)-CITA enantiomer. The AUCS/R ratio was 0.56 for CITA and 1.06 for the DCITA metabolite. The administration of racemic CITA to healthy volunteers treated with omeprazole showed a loss of enantioselectivity in the pharmacokinetics of CITA. The AUCS/R ratio was 0.96 for CITA and 0.92 for DCITA. The administration of multiple doses of omeprazole to healthy volunteers enantioselectively inhibited the metabolism of the (+)-(S)-CITA eutomer, with an approximately 140% increase of plasma concentrations

O nebivolol, um fármaco com quatro centros quirais, está disponível na clínica como mistura racêmica dos isômeros d-nebivolol (SRRR) e l-nebivolol (RSSS). A atividade -adrenérgica do nebivolol reside no isômero d-nebivolol, enquanto o l-nebivolol promove a liberação de óxido nítrico das células endoteliais. O nebivolol é eliminado por metabolismo dependente do CYP2D6. O estudo avalia a farmacocinética e a relação farmacocinética-farmacodinâmica (PK-PD) dos isômeros do nebivolol em voluntários sadios. Foram investigados 15 voluntários sadios (10 homens e 5 mulheres) fenotipados com metoprolol como metabolizadores extensivos (EM, n=13) ou metabolizadores lentos para o CYP2D6 (PM, n=2). Os voluntários sadios foram tratados com dose única oral de 10 mg de nebivolol racêmico. As amostras seriadas de sangue foram coletadas até 48 h após a administração do fármaco. Os isômeros do nebivolol foram resolvidos na coluna Chirobiotic® V e analisados nas amostras de plasma empregando LC-MS/MS. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados por modelo bicompartimental com lag time, empregando o programa WinNonLin. A farmacodinâmica do nebivolol foi avaliada empregando como parâmetro a variação da frequência cardíaca entre os períodos final e anterior ao teste de esforço isométrico durante 2 min utilizando o handgrip a 30% da contratilidade voluntária máxima. A análise PK-PD relacionando o efeito na variação da frequência cardíaca induzida pelo exercício isométrico com as concentrações plasmáticas do isômero d-nebivolol foi avaliada empregando o modelo Emax sigmóide inibitório. A disposição cinética do nebivolol é enantiosseletiva nos voluntários sadios EM, com razões isoméricas de AUCl/ AUCd de 1,41. Os valores de concentração plasmática máxima (1,46 vs 0,79 ng/mL), área sob a curva concentração plasmática versus tempo (6,45 vs 3,99 ng.h/mL), clearance aparente (774,51 vs 1252,70 L/h) e volume de distribuição aparente (10936 vs 19082 L) mostram diferenças com significância estatística (Teste de Wilcoxon, p<0,05) entre os isômeros l-nebivolol e d-nebivolol para os voluntários sadios EM. A disposição cinética do nebivolol não é enantiosseletiva nos voluntários sadios PM investigados, com razões isoméricas de AUCl/AUCd de 0,93 e 0,98. Os valores de clearance aparente obtidos para os voluntários PM (87-350 vs 81-344 L/h, respectivamente para o l-nebivolol e d-nebivolol) são menores do que para os EM (775 vs 1253 L/h). O modelo Emax sigmóide inibitório descreveu a análise PK-PD relacionando o efeito na variação da frequência cardíaca induzida pelo exercício isométrico com as concentrações plasmáticas do isômero d-nebivolol em voluntários sadios EM com valores de Emax de 4,47 bpm (IC 95% 1,37-7,57) e de EC50 de 222,16 pg/mL (IC 95% 96,29-540,60 pg/mL). / Nebivolol is a drug with four chiral centers. It is administered in clinical practice as a racemic mixture of the isomers d-nebivolol (SRRR) and l-nebivolol (RSSS). The - blocking activity of nebivolol is attributed to d-nebivolol, whereas l-nebivolol promotes the release of nitric oxide from endothelial cells. Nebivolol is eliminated by metabolism dependent on CYP2D6. The present study evaluates the pharmacokinetic and pharmacokinetic-pharmacodynamic (PK-PD) of nebivolol isomers in healthy volunteers (10 men and 5 women) phenotyped with metoprolol as extensive metabolisers (EM, n=13) or poor metabolisers for CYP2D6. The healthy volunteers receveid a single oral dose of 10mg of racemic nebivolol. Serial blood samples were collected from 0 to 48 h after the administration of nebivolol. The isomers of nebivolol were analyzed by LC-MS-MS on a Chirobiotic® V column and the pharmacokinetic parameters (bicompartment model, micro, lag time, first order) were calculated by the software Winnonlin. The pharmacodynamic of nebivolol was evaluated using the variation of heart rate as parameter between the end and one minute before the handgrip exercise. Thus, the patients were oriented to conduct the isometric exercise with handgrip for 2 min at 30% of their maximum voluntary contractility. The PK-PD analysis relating the effect on the variation of heart rate induced by the isometric exercise and the plasma concentrations of the isomer d-nebivolol were evaluated using the Inhibitory effect sigmoid Emax model. The kinetic disposition of nebivolol is enantioselective on healthy volunteers EM, with isomeric ratios of AUCl/ AUCd of 0,93 e 0,98. The values of maximum plasma concentration (1,46 vs 0,79 ng/mL), area under the concentration time curve (6,45 vs 3,99 ng.h/mL), apparent clearance(774,51 vs 1252,70 L/h) and volume of distribution (10936 vs 19082 L) show statistically significant differences (p<0.05, Wilcoxon test) between the isomers l-nebivolol and d-nebivolol for the healthy volunteers EM. The kinetic disposition of nebivolol is not enantioselective on the healthy volunteers PM investigated, with isomeric ratios of AUCl/ AUCd of 1,07. The values of apparent clearance obtained for the volunteers pm (87-350 vs 81-344 L/h, respectively to l-nebivolol and d-nebivolol) are smaller than that for EM (775 vs 1253 L/h). The Inhibitory effect sigmoid Emax model described the PK-PD analysis described the effect on the variation of heart rate induced by handgrip isometric exercise with the plasma concentrations of the isomer d-nebivolol in healthy volunteers EM with Emax values of 4,47 bpm (IC 95% 1,37-7,57) and EC50 of 222,16 pg/mL (IC 95% 96,29-540,60 pg/mL).