Orientadora : Profª Drª Juliana Geremias Chichorro / Coorientadora : Profª Drª Janaina Menezes Zanoveli / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 24/07/2017 / Inclui referências : f. 53-74 / Resumo: Dor e ansiedade são sintomas frequentes em pacientescom câncer de cabeça e pescoço. O anticonvulsivante pregabalina possui indicação terapêutica para o tratamento da dor e,embora já tenha sido observado em estudos pré-clínicos e clínicos que o tratamento com a pregabalina apresenta efeito ansiolítico, não há estudos onde foi avaliado o efeito do tratamento com pregabalina na ansiedade relacionada à dor no câncer, mais especificamente câncer orofacial.Assim, oobjetivo desse estudo foiinvestigara relação entre dor e ansiedade em ratos com carcinoma facial, bem como avaliar a influência do tratamento com pregabalina nesses dois aspectos. O carcinoma facial foi induzido pela inoculação de células tumorais Walker-256 na área direita de inserção das vibrissas em ratos machos. A hiperalgesia mecânica facial e o comportamento do tipo ansioso foram avaliados no terceiro e sexto diasapós a inoculação das células tumorais através dos filamentos de Von Frey (VF), e pelos testes do labirinto em cruz elevado (LCE) e transição claro-escuro (TCE), respectivamente. Foi avaliado no sexto dia o comportamentode grooming espontâneo facial e o teste de preferência condicionado ao lugar (CPP) como medidas de dor não evocadas. O efeito do tratamento com pregabalina (30 mg/kg, v.o.) foi avaliado no sexto dia após a inoculação das células tumorais nos testes do VF, LCE, TCE, campo aberto, grooming espontâneo e CPP. Nossos resultados demonstraram que os animais com tumor desenvolvem hiperalgesia mecânica facial no terceiro dia, e esta semanteve até o sexto dia, entretanto o comportamento do tipo ansioso só foi detectado no sexto dia e apenas nos animais hiperalgésicos.O tratamento com pregabalina foi capaz de reduzir a hiperalgesia mecânica facial e o comportamento do tipo ansioso no grupo tumor no sexto dia após a inoculação das células tumorais. Ademais, o tratamento foi capaz de reduzir o grooming facial espontâneo e de induzir CPP seis dias após a inoculação das células tumorais. Todas essas alterações comportamentais foram específicasao tratamento, uma vez que não foi observado alteração na atividade locomotora dos animais. Tendo em vistaqueo comportamento do tipo ansioso foi detectado após o estabelecimento das alterações sensoriais na face e, em apenas nos animais com tumor hiperalgésicos, nossos dados sugerem que a ansiedade é posterior ao desenvolvimento da dor e que a pregabalinapode representar uma opção terapêutica promissora no tratamento da dor e ansiedade associadas aocâncerna região orofacial. Palavras-chave: hiperalgesia mecânica, dor espontânea, câncer orofacial, anticonvulsivante, pregabalina, ratos. / Abstract: Pain and anxiety are frequent symptoms in head and neck cancer patients. The anticonvulsant pregabalin has a therapeutic indication for the treatment of pain and, although pre-clinical and clinical studies have shown that treatment with pregabalin has an anxiolytic effect, there areno studies evaluating the effect of pregabalin treatment on anxiety related to cancer pain, more specifically orofacial cancer.Thus, the aim of this study was to investigate the relationship between pain and anxiety in rats with facial carcinoma, as the influence of pregabalin treatment in both aspects. The facial carcinoma was induced by subcutaneous inoculation of Walker-256 tumor cells in the right vibrissa pad of male Wistar rats.Thefacial mechanical hyperalgesiaand anxiety-like behavior was assessed onday 3 and 6post tumorinoculation, using Von Freyfilaments (VF),elevated plus maze (EPM) and light-dark transition (LDT)tests, respectively. Spontaneous facial grooming and conditioned place preference (CPP) were assessed as non-evoked pain measurements 6 days after tumor cells inoculation. The effect of pregabalin treatment (30 mg/kg, p.o.) was evaluatedon day 6 post tumor cells inoculation on VF, EPM, LDT, open field, spontaneous grooming,and CPP tests.Our results demonstrated that tumor-bearing rats developed facial mechanical hyperalgesia starting 3 days post tumor induction, which was also significant on day 6, but the anxiety-like behavior was detected only inhyperalgesictumor-bearing rats and only six days after tumor cells inoculation. Pregabalin treatment reduced both facial mechanical hyperalgesia and the anxiety-like behavior in tumor group on day 6post tumor inoculation. In addition, pregabalin treatment was able to reduce the spontaneous facial grooming and to induceCPP6 days after tumor inoculation.All behavioral changes were specific to treatment, since no alteration in the locomotor activity of the animals was observed.Considering that anxiety-like behavior was detected after the onset of facial sensorial alterations, and only in hyperalgesic tumor-bearing rats, our data suggest that anxiety is subsequent to the development of pain, and pregabalin mayrepresent a promising therapeutic option for pain and anxiety control in orofacial cancer patients. Keywords: Mechanical hyperalgesia, spontaneous pain, orofacial cancer, anticonvulsant, pregabalin, rats.

Nos últimos 50 anos houve uma redução significativa na fertilidade de animais selvagens. Estudos revelam que as alterações morfológicas e fisiológicas sobre os órgãos reprodutivos de animais e também de seres humanos podem ser conseqüência da exposição a contaminantes ambientais. Vários pesticidas presentes no ambiente têm sido apontados como substâncias capazes de afetar o sistema endócrino, incluindo efeitos sobre a reprodução (COLBORN et al., 1993). Inúmeros fatores contribuem para que o Brasil seja um dos maiores consumidores de pesticidas do mundo. E, neste país, os herbicidas são os pesticidas líderes em vendas. O Roundup® é o herbicida mais utilizado, sendo comercializado em preparação contendo 36% de glifosato e 18% de polioxietilenamida (POEA) (ANVISA, 2002a e 2002b). Estudos de toxicidade reprodutiva realizados com o glifosato técnico referem a possibilidade de efeito sobre o sistema reprodutivo (WHO, 1994). Entretanto a literatura carece de estudos sobre os efeitos do POEA e dos produtos comerciais que o contém associado ao glifosato (DALLEGRAVE, 2002). Sendo assim, o presente trabalho objetivou verificar a influência do herbicida glifosato-Roundup® sobre a fertilidade e o desenvolvimento de ratos Wistar e a possibilidade deste desregular o sistema endócrino. Foram avaliados os efeitos do herbicida glifosato Roundup (lote BS 1096/98) sobre a reprodução de ratos Wistar, incluindo os efeitos teratogênicos (segmento II), sobre fertilidade e performance reprodutiva de machos e fêmeas (segmento I) e sobre animais expostos pré e perinatalmente (segmento III). As concentrações desejadas foram elaboradas mediante adição de água destilada. As progenitoras do ensaio de teratogenicidade foram tratadas, por via oral, com 500, 750 ou 1000mg/kg de glifosato (Roundup) ou água destilada (10ml/kg), do 6° ao 15° dia de gestação. Os animais da geração paterna (segmento I) foram tratados diariamente, por via oral, com 50, 150 ou 450mg/kg de glifosato (Roundup) ou água destilada (10ml/kg). Os machos foram tratados por 70 dias no pré-acasalamento e por 15 dias consecutivos na fase de acasalamento. As fêmeas foram tratadas por 15 dias no pré-acasalamento, de 1 a 15 dias na fase de acasalamento, por 21 a 23 dias durante a gestação, e aquelas que foram deixadas parir, por mais 21 dias referente ao período de lactação. A segunda geração (segmento III) foi exposta apenas durante a gestação e a lactação (fêmeas do segmento I). Os resultados do ensaio de teratogênese mostraram sinais de toxicidade materna com 50% de letalidade para as fêmeas tratadas com 1000mg/kg e sinais de retardo de desenvolvimento do esqueleto dos fetos. Os machos da geração paterna mostraram sinais de toxicidade sistêmica, com aumento na massa relativa de fígado e rins, acompanhado de alterações histopatológicas, e de toxicidade reprodutiva, caracterizada por alterações histopatológicas nos testículos, redução na concentração de espermatozóides, na produção diária de espermatozóides, na concentração de testosterona e aumento no percentual de espermatozóides anormais. As fêmeas da geração paterna não apresentaram sinais de toxicidade sistêmica e/ou reprodutiva nas variáveis avaliadas. Os machos expostos durante as fases pré e perinatal manifestaram sinais de toxicidade reprodutiva, caracterizados por alterações histopatológicas nos testículos, como degeneração das espermátides em ambas as fases, aumento no percentual de espermatozóides anormais na puberdade e redução na concentração de espermatozóides na fase adulta. As fêmeas expostas durante as fases pré e perinatal não apresentaram sinais de toxicidade sistêmica e/ou reprodutiva nas variáveis avaliadas, como também a prole das mesmas não manifestou alterações de desenvolvimento ponderal ou geral. Este estudo revelou que o herbicida glifosato-Roundup provocou um retardo no desenvolvimento esquelético dos fetos expostos durante a fase de organogênese. Afetou ainda o sistema reprodutivo masculino de indivíduos tratados na fase adulta e expostos durante as fases pré e perinatal, interferindo nas variáveis de fertilidade masculina em puberdade e fase adulta. Também houve sinais de toxicidade sistêmica nas fêmeas do ensaio de teratogênese (segmento II) e nos machos do ensaio de fertilidade e performance reprodutiva (segmento I), em doses muito inferiores aquelas referidas na literatura (WHO, 1994) para o glifosato grau técnico. Conclui-se que o glifosato-Roundup manifestou maior grau de toxicidade sistêmica, reprodutiva masculina e de desenvolvimento esquelético fetal, do que o referido na literatura para o glifosato grau técnico. E, frente à toxicidade reprodutiva masculina evidenciada neste estudo, pode-se sugerir que o glifosato- Roundup® manifestou efeitos de modulação endócrina e conseqüentemente, potencial desregulador endócrino.

Este estudo teve como objetivo comparar a saúde bucal de pacientes, portadores de problemas respiratórios que se tratavam com medicações alopáticas e homeopáticas, no mínimo por dois anos. Foram examinados 90 pacientes com idades de 6 a 14 anos, emparelhados por sexo e idade, representando um estudo analítico observacional, semelhante aos de caso-controle. Os índices utilizados para avaliar a saúde bucal foram: CPO-S e ceo-s (Índices de superfícies cariadas, perdidas e obturadas), IP (Índice de placa), IG (Índice gengival) e, ainda, VFS (Velocidade do fluxo salivar) e CTS (Capacidade tampão salivar). Foi realizado um questionário sobre os hábitos de higiene, alimentação e condição geral de saúde, assim como sobre as condições socioeconômicas das famílias. Os Graus de instrução dos responsáveis (P= 0,007), a Escola do tipo particular (P< 0,000) em que os participantes estudavam mostraram-se associados, significativamente, ao grupo que utilizava Homeopatia, mas a Renda familiar não apresentou diferença entre os dois grupos (P=0,456). Este grupo mostrou-se, também, estatisticamente mais saudável quanto aos índices de saúde bucal (CPO-S, ceo-s, IP e IG, com P<0,05) em análises bivariadas pelos testes “t” de Student e U de Mann Whitney. A Velocidade do fluxo salivar foi significativamente maior apenas pelo teste U de Mann Whitney (P= 0,015). Ao serem comparados por testes multivariados, em que a variável Grau de instrução dos pais foi controlada, as diferenças significativas entre os tratamentos se mantiveram para todas as variáveis com exceção do CPO-S. A análise de regressão logística que foi usada para comparar os tratamentos quanto ao Perfil de saúde bucal, variável criada a partir das variáveis CPO-S, ceo-s, IP e IG, evidenciou que o tratamento homeopático é fator de proteção à saúde bucal (Odds Ratio=28,02). Quando na comparação foram associadas as variáveis, Grau de instrução dos pais apresentou Odds Ratio=23,26 e ao incluir o tipo de escola em que os pacientes estudavam o Odds Ratio foi de 19,23, todos valores sendo significativos. Através das análises realizadas, não se encontraram semelhanças quanto à saúde bucal dos dois grupos examinados, tendo o grupo homeopatizado melhor condição bucal. Novos estudos são recomendados, procurando comparar estes tratamentos em outros grupos.

A transferência de material genético para dentro das células de um indivíduo com o objetivo de conferir um benefício terapêutico ao corrigir uma anormalidade ou proporcionar às células uma nova função constitui a essência da terapia gênica. Seu princípio baseia-se no entendimento de que algumas doenças são causadas por defeitos em um ou mais genes, levando à produção descontrolada ou à supressão de uma proteína essencial para o funcionamento das células. Doenças monogênicas (como os erros inatos do metabolismo), câncer, doenças cardiovasculares, desordens neurodegenerativas e doenças adquiridas (infecciosas, por exemplo) são alvos da terapia gênica. Na terapia gênica, o agente terapêutico em questão é o material genético de interesse. Tanto os elementos regulatórios quanto o gene de interesse são clonados em um plasmídio de expressão, que é, então, utilizado para a construção de vetores de transferência virais e não virais. Bicamadas lipídicas microscópicas denominadas lipossomos são vetores não virais comumente utilizados. Este trabalho teve como objetivo iniciar uma adaptação das abordagens da farmacologia ao estudo de vetores não virais em terapia gênica e padronizar a detecção da green fluorescent protein (GFP) por espectrofotometria de fluorescência, determinando o tempo de expressão máxima dessa proteína em cultura de células HepG2 e obtendo-se, assim, um método quantitativo para avaliação da eficiência de transfecção de vetores e parâmetros de tempo para futura detecção da GFP in vivo. É possível traçar paralelos entre a farmacoterapia e a terapia gênica. A comparação entre as composições de formulações farmacêuticas e de vetores de transferência leva-nos a pensar que o gene de interesse corresponderia à pró-droga, enquanto a proteína expressa equivaleria à droga, uma vez que se constitui no componente terapeuticamente ativo. Os demais elementos presentes nos plasmídios, como os promotores e sítios de poliadenilação, corresponderiam aos excipientes e o vetor de transferência como um todo equivaleria à formulação farmacêutica. A detecção da GFP expressa por células HepG2 transfectadas pelo plasmídio pTracer associado a LipofectamineTM2000 mostrou-se semi-quantitativamente possível por espectrofotometria de fluorescência. O tempo de expressão máxima desta proteína neste estudo foi 48 horas, sendo este também o tempo máximo de análise. É necessário, portanto, que os tempos de análise da expressão protéica sejam expandidos. A adaptação de abordagens farmacológicas pode contribuir para o aprimoramento técnico necessário para que a terapia gênica torne-se uma forma de tratamento amplamente difundida.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-08-23T16:23:05Z No. of bitstreams: 1 2016_GeorgeArthurAlvesRabelo.pdf: 3681140 bytes, checksum: 734e54ffbdff298a5309f20a29ba37cb (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-10-06T17:19:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_GeorgeArthurAlvesRabelo.pdf: 3681140 bytes, checksum: 734e54ffbdff298a5309f20a29ba37cb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T17:19:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_GeorgeArthurAlvesRabelo.pdf: 3681140 bytes, checksum: 734e54ffbdff298a5309f20a29ba37cb (MD5) / No presente trabalho, a hibridização molecular é empregada no intuito de desenvolver moléculas híbridas com grande potencial farmacológico. Especificamente, o trabalho é baseado na conjugação de núcleos naftoquinônicos, triazólicos e chalcônicos em uma mesma molécula. Existem inúmeros trabalhos na literatura que citam as diversas atividades biológicas (antibacteriana, antiviral, antiprotozoária, anticâncer, antifúngica, dentre outras) dos três núcleos. Não existem trabalhos na literatura, no momento, que apresentem moléculas formadas pelos três núcleos em questão. O procedimento experimental se baseou em conjugar os grupos gradativamente. Dois procedimentos gerais foram propostos. O primeiro se fundamenta na síntese de uma azido-naftoquinona e de diferentes propargiloxi-chalconas, as quais são conjugadas em uma mesma molécula por meio da reação click (CuAAC) através da formação do anel triazólico. O segundo se fundamenta na síntese de uma propargiloxi-naftoquinona e de diferentes azido-chalconas, as quais também são conjugadas em uma mesma molécula, por meio da reação click (CuAAC), formando-se, assim, o anel triazólico. As moléculas propostas foram sintetizadas e caracterizadas com sucesso. Estudos de suas atividades biológicas serão um próximo passo da concretização do trabalho como um todo. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In this study, molecular hybridization is employed in order to develop hybrid molecules with great pharmacological potential. Specifically, the work is based on the combination of naphthoquinone, triazoles and chalcones cores in the same molecule. There are several studies in the literature mentioning the various biological activities (antibacterial, antiviral, anti-protozoan, anti-cancer, anti-fungal, among others) of the three cores. There are no studies in the literature, at this time, reporting molecules formed by all of the three cores. The experimental procedure was based on combining the groups gradually. Two general procedures were explored. The first is based on the synthesis of an azido-naphthoquinone and several propargyloxy-chalcones which are combined in the same molecule by the click reaction (CuAAC) through formation of the triazole ring. The second is based on the synthesis of a propargyloxy-naphthoquinone and several azido-chalcones which are also combined in the same molecule by the click reaction (CuAAC), thus forming the triazole ring. The proposed molecules were successfully synthesized and characterized. Studies of their biological activities will be the next step of the present work.

Orientador : Beatriz Stringhetti Ferreira Cury / Banca: Ana Doris de Castro / Banca: Maria Palmira Daflon Gremião / Banca: Priscyla Daniely Marcato Gaspari / Banca: Flávia Chiva Carvalho / Resumo: A alta amilose, um amido modificado com alto teor de amilose (70%), que demonstrou em diversos estudos ser um material promissor para o controle da liberação de diferentes fármacos. A habilidade da alta amilose em formar complexos de inclusão e a elevada resistência enzimática foi explorada para a obtenção de sistemas de liberação controlada de fármacos com intuito vetorizar a liberação do fármaco no intestino, através da digestão pela enzima pancreatina. Diferentes complexos foram produzidos e a influencia da proporção fármaco: polímero, temperatura, e a presença de ácido palmítico foram avaliados através da caracterização dos complexos pelas análises de DSC, difração de Raios-X, distribuição granulométrica, RMN e determinação da capacidade de absorção de líquido. O desempenho como sistemas de liberação controlada de fármacos foi avaliado através da determinação da liberação in vitro dos fármacos nimesulida (NMS) e praziquantel (PZQ) em diferentes meios, simulando as diferentes regiões do trato gastrintestinal (TGI). A metodologia para a obtenção dos complexos mostrou-se eficiente com rendimento superior a 57% e teor de fármaco complexado de até 68,16%. Os dados de DSC, difração de Raios-X e RMN relevaram a interação entre fármaco e polímero, bem como a formação dos complexos de inclusão com estruturas semi-cristalinas associadas a formação de complexos do tipo II, de elevada resistência enzimática. A maior cristalinidade e a presença de fármacos próximos à superfície dos complexos promoveram redução da capacidade de absorção de líquido. A inclusão dos fármacos nos complexos permitiu a redução de suas taxas de liberação nos meios sem enzima (ácido, pH 1,2 e tampão fosfato pH 6,9). A adição da enzima pancreatina promoveu significativa aceleração das taxas de liberação dos fármacos (NMS e PZQ) demostrando a degradabilidade desses complexos. A maior ... / Abstract:High amylose, one modified starch with high content of amylose (70%) is a promising material for controlling the delivery of different drugs. The ability of the high amylose to form inclusion complexes with high enzymatic resistance was exploited for obtaining controlled drugs delivery systems for targeting the drug release in the intestine by digestion with pancreatin enzyme. Different complexes were produced and the influence of the ratio drug: polymer, temperature and the presence of palmitic acid were evaluated through the characterization of the complexes by DSC, X-ray diffraction, particle size distribution, NMR and liquid uptake analysis. The performance of these complexes as controlled drug delivery systems was evaluated by determining the in vitro release of nimesulide (NMS) and praziquantel (PZQ) in different media, simulating the different regions of the gastrointestinal (GI) tract. The methodology to obtain the complex has been successful with a yield over 57% and the content of drug complexation until 68.16%. The DSC, diffraction of X-rays and NMR data showed the interaction between drug and polymer as well as the formation of inclusion complexes with semi-crystalline structures which were related to the formation of type II complexes with high enzymatic resistance. The higher crystallinity and the presence of drugs near to the complexes surface promoted the reduction of liquid uptake ability. The inclusion of drugs in complex allowed the reduction of their rates of release in the acid media (pH 1.2) and phosphate buffer (pH 6.9). The addition of pancreatin enzyme caused a significant acceleration of the rate of release of drugs (NMS and PZQ) showing the degradability of these complexes. The higher crystallinity of PZQ1:30AG60°C complex showed its highest enzymatic resistance providing the release of PZQ during 240min, while the complexes with NMS and PZQ 1:5AG90°C complex released the drug in 60min. The release data in media... / Doutor

Orientador: Leila Aparecida Chiavacc / Banca: Renata Cristina Kiatkoski Kaminski / Banca: Vera Lúcia Borges Isaac / Resumo: O objetivo deste trabalho foi estudar a possibilidade de utilizar as matrizes híbridas como formadores de filme como uma nova plataforma de tecnologia para a liberação controlada de fármacos e/ou para o tratamento de feridas. Filmes a base de materiais híbridos orgânico-inorgânicos do tipo siloxano-polióxido etileno (PEO) e siloxano-polióxido propileno (POP) obtidos pelo processo de sol-gel, contendo longas ou curtas cadeias poliméricas foram preparados. Primeiramente, foram realizadas as caracterizações mecânicas que nos deram suporte para propor o uso deste material como um formador de filme devido às suas propriedades, tais como: atratividade estética por ser capaz de formar filmes finos e transparentes; curto tempo de formação do filme; e também bons resultados de resistência à tração e alongamento até a ruptura, que revelaram que o material apresenta características mecânicas adequadas para o uso proposto. Análise do material revelaram boa adesividade em pele de porco, substrato este utilizado em uma série de testes em substituição à pele humana por semelhanças fisiológicas, reforçando assim sua adequação para ser utilizado na pele. As análises de permeabilidade ao vapor de água (MVTR) e perda de água por transpiração transepidérmica (TEWL) mostraram que este material possui propriedade oclusivas que o faz capaz de hidratar o estrato córneo. Essa hidratação possivelmente favorece o entumescimento do filme formado, o que facilitaria a liberação de fármacos nele incorporados. Além disso, os resultados de TEWL mostram que o material permite a permeação da água através das matrizes testadas de no mínimo 60% de vapor de água, o que previne a maceração, irritação, vermelhidão e sensibilidade da pele. Confirmando esta constatação, não foi observado após 24 horas de uso vermelhidão ou aumento de oxihemoglobina na pele em teste...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this work was to study the suitability of the use of hybrid matrixes as film formers as new platform of technology for drug controlled release and / or an option for wound management. Siloxane-poly (ethylene oxide) (PEO) and Siloxane-poly(propylene oxide) (POP) hybrids obtained by the sol-gel process and containing short and long polymeric chains were prepared. First it was performed the mechanical characterization that gave us support to propose the use of these material as film former due to its properties like: cosmetical attractiveness for being able to form thin and transparent films; short time to dry into films; also suitable values of tensile strength and elongation at break that shows resistance of the material for wearing purpose. The hybrids showed good bioadhesivity in ear pig skin, substrate commonly used in substitution of human skin due to their physiological similarity, reinforcing its suitability to be used in the skin. Also the analysis of Water Vapor Permeability (WVP) and Transepidermal Water Loss (TEWL) showed that this material has occlusive properties enough to moisturize the stratum corneum enabling the swelling of the film formed enhancing this way the release of the drugs loaded. Also the TEWL results shows that the material allows the permeability in all the products tested of at least 60% of the water vapor, what can prevent maceration, irritation, redness and sensibility in the skin. Regarding this observation, also after 24h of use no redness or increase of oxyhemoglobin was detected in the DRS test, showing no skin irritation was caused in the use of the films formed by the hybrid matrixes. "In vitro" toxicological test showed no cytotoxicity effect. The results obtained demonstrated an excellent set of properties that permit the use of these hybrid matrixes as film former devices / Mestre

Há inúmeras hipóteses para explicar o fenômeno de tolerância de primeira passagem no labirinto em cruz elevado e algumas delas são relacionadas ao aprendizado e memória, logo, a redução do tempo de primeira passagem para 1 minuto ou a administração de drogas amnésicas antes da primeira passagem previne a perda do efeito ansiolítico na segunda passagem. Entretanto, a administração de drogas pré-treinamento pode induzir o erro e nenhum estudo utilizou-se de drogas que melhorem a memória. Deste modo, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da anfetamina (1.0-3.0 mg/kg) ou pentilenotetrazol (30.0 mg/kg) sobre o efeito do diazepam (2.5 mg/kg) na segunda passagem do labirinto em cruz elevado, em camundongos expostos a uma primeira passagem com tempo de 1 minuto. Camundongos foram submetidos a uma primeira passagem de 1 minuto ao labirinto em cruz elevado retirados e tratados imediatamente com salina, anfetamina ou pentilenotetrazol, e 48 horas depois, passaram uma segunda vez pelo labirinto em cruz elevado. Os animais foram tratados com salina ou diazepam 30 minutos antes da segunda passagem. Os resultados mostraram que salina e anfetamina 1.0 mg/kg pós-primeira passagem não induziram tolerância de primeira passagem. Entretanto, anfetamina 2.0 e 3.0 mg/kg e pentilenotetrazol 30 mg/kg induziram a tolerância de primeira passagem, mesmo com a diminuição de tempo da primeira passagem para 1 minuto.Além disso, os dados não são devidos a exposição de um novo ambiente na primeira passagem ou ao tratamento da anfetamina, pois, camundongos expostos à caixa de locomoção na primeira sessão e imediatamente após tratados com anfetamina mostraram efeito ansiolítico do diazepam no labirinto em cruz elevado 48 horas depois. Resumindo, os dados suportam a hipótese de que a memória está envolvida na perda de efeito ansiolítico do diazepam na segunda passagem pelo labirinto em cruz elevado.

Orientador : Prof. Dr. Claudio da Cunha / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 22/01/2015 / Inclui referências / Resumo: A esquizofrenia é um transtorno mental tipicamente caracterizado pelo quadro psicótico representado por delírios e alucinações. Sua causa está associada ao aumento da dopamina (DA) mesolímbica e da expressão de receptores D2 estriatais, os quais constituem o principal alvo terapêutico do tratamento com antipsicóticos. Os antipsicóticos típicos são muito efetivos na redução dos sintomas psicóticos, porém apresentam efeitos amnésicos significativos que dificultam a adesão dos pacientes ao tratamento. Por esta razão, a compreensão dos mecanismos pelos quais os antipsicóticos típicos atuam na produção dos seus efeitos pode favorecer a descoberta de alvos terapêuticos mais efetivos no tratamento dessa doença. Nesta tese, investigamos o papel dos receptores dopaminérgicos D2 pré- e pós-sinápticos do DLS no aprendizado e memória de respostas condicionadas de esquiva (CAR); e o papel dos autoreceptores D2 na regulação da neurotransmissão dopaminérgica mesolímbica. A administração de uma dose pré- e pós-sináptica, mas não pré-sináptica, do antipsicótico típico sulpiride foi amnésica sobre CAR. Esse efeito foi revertido pela infusão intra-DLS do agonista D2 quimpirole em uma dose que não afetou o aprendizado e memória de CAR per se. Esses resultados mostram que o bloqueio de receptores D2 pós-sinápticos no DLS é necessário e suficiente para produzir os efeitos amnésicos dos antipsicóticos típicos. No segundo estudo, a técnica de amperometria de potencial fixo foi utilizada para evocar a liberação de DA no NAc para avaliar os mecanismos de inibição de liberação de DA e a dessensibilização de curto-prazo de autoreceptores D2 em um modelo animal de esquizofrenia. As doses sistêmicas pré- e pré- e pós-sináptica de sulpiride bloquearam a inibição da liberação de DA. A infusão intra-NAc de quimpirole não afetou a inibição de liberação de DA per se, mas reverteu o aumento da DA extracelular induzido por sulpiride. Por outro lado, a dessensibilização de curto-prazo induzida pelo aumento de DA eletricamente evocada não foi afetada por sulpiride ou quimpirole. Portanto, a ativação de autoreceptores D2 inibe a liberação de DA, mas não afeta a dessensibilização de curto-prazo desses receptores. Esses resultados auxiliam no entendimento de como antipsicóticos atuam nos receptores D2 pré e pós-sinápticos estriatais na produção dos seus efeitos terapêuticos e adversos. / Abstract: Schizophrenia is a mental disorder typically characterized by psychotic symptoms such as delusions and hallucinations. Its etiology is associated to increased mesolimbic dopamine (DA) and striatal D2 receptors, which are the main target of antipsychotics treatment. Typical antipsychotics are effective in alleviate psychotic symptoms, but usually present amnestic side effects that difficult schizophrenic patients adherence to treatment. Hence, understanding how typical antipsychotics promote their effects may help discovery of new and more effective treatments. Here, we investigated the role of DLS pre- and postsynaptic D2 dopaminergic receptors in conditioned avoidance response (CAR) learning and memory; and the role of NAc presynaptic D2 receptors in the regulation of the mesolimbic dopaminergic neurotransmission. Systemic administration of pre- and postsynaptic, but not presynaptic, dose of the typical antipsychotic sulpiride was amnestic over CAR. Such effect was reverted by intra-DLS infusion of the D2 agonist quinpirole in a dose that did not affect CAR learning and memory per se. These results show that blockade of postsynaptic D2 receptors in the DLS is necessary and sufficient to produce the amnestic effect of typical antipsychotics. In the second study, fixed potential amperometry was used to electrically evoke DA release in the NAc to evaluate the mechanisms of DA release inhibition and D2 autoreceptors short-term desensitization in a schizophrenia animal model. Systemic presynaptic and pre- and postsynaptic doses of sulpiride blocked DA release inhibition. Intra-NAc quinpirole did not affect DA release inhibition per se, but reverted the increased extracellular DA induced by sulpiride. On the other hand, D2 autoreceptor short-term desensitization induced by electrically evoked DA was not affected by sulpiride or quinpirole. Therefore, activation of D2 autoreceptors regulates DA release from presynaptic terminals but does not induce short-term desensitization of D2 autoreceptors. Results presented in this thesis help understanding how antipsychotics act on pre- and postsynaptic striatal D2 receptors to yield their therapeutics and adverse effects.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:19:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FARRAPO_Aline_2011.pdf: 1714211 bytes, checksum: b6842ea645ee1031e3f35aaa53459539 (MD5) Previous issue date: 2011-03-31 / Financiadora de Estudos e Projetos / Currently, thanks to the high due technological development, a new class of systems has been explored for drug delivery systems, or controlled release of drugs. These systems have great importance as a rare drug in an aqueous solution or in the conventional way can achieve the target concentrations appropriate to achieve the desired therapeutic efficacy, for this reason, in recent years a new pharmacological concept was developed through the preparation of biologically active systems with the use of molecular aggregates. Among the delivery systems most studied, we highlight the liposomes, micelles, polymeric nanoparticles, dendrimers and carbon nanotubes. In this work we immobilized Aloin (barbaloin), component present in Aloe vera, which has healing activity, in nanostructured films, using the technique of self-assembly layer by layer ( LbL). To obtain the ultrathin films for the process Layer-by-Layer, Aloin (barbaloin) was incorporated into dipalmitoyl phosphatidyl glycerol (DPPG) liposomes and self-assembled with polyelectrolytes to development of a drug controlled release system of the adhesive type (patches). The film growth and its ability to release the Aloin were monitored using UV-visible and fluorescence spectroscopy. The films showed linear growth, indicating that the same amount of material was absorbed in each deposition step. Aloin release from the LbL films made with DPPG liposomes showed constant for 12 hours. This possibility of release through a long time course is promising for medical applications using patches. / Este trabalho apresenta a fabricação e a caracterização de filmes nanoestruturados, obtidos através da técnica de automontagem camada por camada (do inglês layer-by-layer, LbL), utilizando a incorporação de extratos de Aloe Vera em lipossomos, no desenvolvimento de sistemas de liberação modificada de fármacos (drug delivery). Foram confeccionados lipossomos a partir dos fosfolipídios DPPG (Dipalmitoil fosfatidil glicerol) e POPG (Palmitoil fosfatidil glicerol) na incorporação do extrato bruto de Aloe Vera, e de um de seus princípios ativos a Aloína. A escolha destes fosfolipídios baseou-se no fato de sua temperaturas de transição de fase serem próximas da temperatura do corpo humano, condição necessária para a construção do sistema de drug-delivery, especificamente como adesivo (patch). Filmes dos lipossomos confeccionados, juntamente com o polieletrólito poli(etileno imina), PEI, foram fabricados e caracterizados por espectroscopia Uv-vis. Através de espectroscopia de fluorescência, avaliou-se a eficácia do processo de incorporação dos extratos na estrutura do lipossomo, a imobilização destes em forma de filme, bem como a determinação da eficiência na liberação controlada destes extratos quando imobilizados. Os filmes fabricados com os três sistemas, Aloína, Aloína em lipossomos DPPG e Aloína em lipossomo POPG apresentaram crescimento. A liberação foi avaliada nas soluções e nos filmes, onde as soluções apresentaram uma taxa de decaimento com tempo menor, enquanto que, quando imobilizados nos filmes a taxa foi maior, o que justifica o uso de filmes LbL para sistema de liberação modificada.