Resumo não disponível

A endometrite é uma patologia frequente em éguas com eficiência reprodutiva reduzida. A citologia endometrial é um método diagnóstico importante para uma avaliação completa da saúde reprodutiva da égua. Da mesma maneira, o exame de ultrassom para detectar fluido no lúmen uterino, tem sido útil para identificar éguas com problema de limpeza uterina. Os objetivos do presente trabalho foram comparar a avaliação ultrassonografica à avaliação citológica no diagnóstico da inflamação. Foram utilizadas 100 éguas cíclicas, de 3 e 25 anos de idade. As éguas eram examinadas por palpação retal e ultrassonografia a intervalos máximos de 24 horas, com objetivo de avaliar o crescimento folicular e presença de fluido intrauterino. De todas as éguas com folículo maior de 36 mm, e sintomas de estro aptas a serem cobertas, foi colhida uma amostra para citologia endometrial com o auxílio de espéculo e escova cervical. A área de acúmulo de fluido uterino, quando, foi medida utilizando o ultrassom. Caso a altura desta área fosse maior ou igual a 10 mm, era considerado acúmulo de fluido intrauterino. Os dados foram analisados pelo teste Qui-quadrado. Das éguas com fluido uterino antes da cobertura, 14 (14%) apresentaram citologia endometrial positiva, e 6 (6%) tiveram exame negativo. Das éguas que não tinham fluido endometrial, 38 (38%) foram positivas na citologia endometrial, enquanto 42 (42%) das éguas sem líquido no lúmen uterino tiveram citologia negativa (X2 = 4,013). Os 2 métodos utilizados para diagnóstico de endometrite na égua foram discrepantes. A ocorrência de éguas com citologia positiva, sem mostrar acúmulo de fluído intra uterino, sugere que o método de citologia endometrial é mais sensível do que o exame de ultrassom. A presença de FIU com citologia endometrial negativa é atribuída ao edema fisiológico, já que as éguas eram examinadas durante o estro. / Endometritis is a common pathology in horses with reduced reproductive efficiency. The endometrial cytology is an important diagnostic method for a complete evaluation of the mares reproductive health. Likewise the ultrasound examination to detect fluid in the uterine lumen has been useful to identify mares with uterine cleaning problem. The aim of this study was to compare the ultrasonographic evaluation to cytological diagnosis of inflammation. 100 cyclic mares were used, with age range between 3 and 25 years old. Were examined by retal palpation and ultrasonography at intervals of 24 hours between one examination and another in order to evaluate follicular growth and presence of intrauterine fluid. Of all the mares with follicles greater than 36 mm and symptoms of estrus able to be covered an endometrial cytology sample was taken and cervical brush. The area of uterine fluid accumulation if any was measured using ultrasound. If the height of this area was greater than 10 mm would be considered accumulation of intrauterine fluid. Data were analyzed by the Chi-square test. Mares with uterine fluid before mating 14 (14%) had positive endometrial cytology and 6 (6%) had negative test. Of the mares that had no endometrial fluid 38 (38%) were positive in endometrial cytology, while 42 (42%) mares without fluid in the uterine lumen had negative cytology (X2 = 4,013). It was concluded that the two methods used for diagnosis of endometritis in the mare were discrepant. The occurrence of mares with positive cytology, but without showing accumulation of IUF, suggests that the method of endometrial cytology is more accurate than ultrasound examination. In the case of the presence of endometrial cytology with IUF negative, can be credited to physiological edema, since the mares were examined during estrus.

Vários estudos envolvendo a avaliação da função endotelial em pacientes com insuficiência renal terminal (IRT) e em pacientes com diabetes tipo 2 (DM2) têm sido apresentados objetivando um melhor entendimento dos mecanismos fisiopatológicos e das condições que cercam essas patologias. As sessões de hemodiálise (HD) em pacientes com IRT e a microalbuminúria em pacientes com DM2 influenciam as respostas endoteliais e, diante disso, este trabalho constitui-se de dois estudos independentes com ambas as populações, sendo: o Estudo 1 objetivou avaliar a influência de uma sessão de HD na função endotelial venosa e no estresse oxidativo de nove pacientes com IRT comparados a um grupo controle (n=10). A função endotelial foi avaliada pela técnica de Dorsal Hand Vein e o estresse oxidativo pelas medidas de capacidade antioxidante total (TRAP) e de dano oxidativo à proteínas (Carbonilas). Antes da HD, os pacientes apresentaram reduzida venodilatação dependente do endotélio (VDE) na comparação com o controle (65,6 ± 10,5% vs. 109,6 ± 10,8%; P = 0,010). Após a HD houve um aumento na VDE (106,6 ± 15,7%; P = 0,045). A venodilatação independente do endotélio foi similar em todas as comparações realizadas. A HD reduziu o TRAP (402,0 ± 53,5 vs 157,1 ± 28,3 U of Trolox/μL plasma; P = 0,001) e não alterou as carbonilas (P = 0,389). O delta de VDE foi negativamente correlacionado com o delta de TRAP (r = -0,70; P = 0,037). Esses resultados sugerem que a sessão de HD melhora a função endotelial venosa associada a menor redução de antioxidantes. No Estudo 2 foram avaliados 28 pacientes com DM2, subdivididos em grupo normoalbuminúrico (n=16) e microalbuminúrico (n=12), com o objetivo de comparar entre os grupos a função endotelial no leito venoso e arterial. As funções endotelial venosa e arterial foram avaliadas pela técnica de Dorsal Hand Vein (venodilatação) e pela dilatação mediada pelo fluxo (FMD) da artéria braquial através de ultrasonografia de alta resolução, respectivamente. Pacientes microalbuminúricos apresentaram reduzida venodilatação (32,9 ± 17,4% vs. 59,3 ± 26,5%, respectivamente; P = 0,004) e FMD (1,8 ± 0,9% vs. 5,1 ± 2,4, respectivamente; P < 0,001), quando comparados a normoalbuminúricos. A venodilatação se correlacionou negativamente com albuminúria (r = -0,53; P = 0,004) e com HbA1c (r = -0,41; P = 0,032). O mesmo foi observado entre FMD e albuminúria (r = -0,49; P = 0,007) e HbA1c (r = -0,44; P = 0,019). Foi observada uma correlação positiva entre venodilatação e FMD (r = 0,50; P = 0,007). Assim, a função endotelial em ambos os leitos vasculares está prejudicada em pacientes com DM2 e microalbuminúria. Os dois métodos utilizados para avaliação da função endotelial se correlacionaram positivamente. Mesmo em um grupo de pacientes com bom controle metabólico, as respostas de vasodilatação se correlacionaram negativamente com HbA1c. / Several studies were shown, involving endothelial function assessment in patients with endstage renal disease (ESRD) and in patients with type 2 diabetes (T2D), aiming a better understanding of physiopathological mechanisms and conditions surrounding these pathologies. Hemodialysis (HD) sessions in patients with ESRD and microalbuminuria in patients with T2D influence the endothelial responses and, therefore, this work was based on two independent studies, namely: Study 1 aimed at evaluating the influence of an HD session in venous endothelial function and oxidative stress of nine patients with ESRD compared to a control group (n=10). Endothelial function was assessed by dorsal hand vein technique and oxidative stress by total radical trapping antioxidant potential (TRAP) and protein oxidative damage (carbonyls). Before HD, the patients showed a reduced endothelium-dependent venodilation (EDV) compared with controls (65.6 ± 10.5% vs. 109.6 ± 10.8%; P = 0.010). After HD there was an increase in EDV (106.6 ± 15.7%; P = 0.045). The endotheliumindependent venodilation was similar in all comparisons performed. HD decreased TRAP (402.0 ± 53.5 vs 157.1 ± 28.3 U of Trolox/μL plasma; P = 0.001) and did not change the carbonyls (P = 0.389). The delta in EDV was negatively correlated with the delta in TRAP (r = -0.70; P = 0.037). These results suggest that an HD session improves endothelial venous function, in association with an antioxidant effect. In Study 2 28 patients with T2D were evaluated, subdivided into normoalbuminuric (n=16) and microalbuminuric group (n=12), aiming to compare the endothelial function in venous and arterial bed between the groups. Venous and arterial endothelial function were assessed by the dorsal hand vein technique (venodilation) and brachial artery flow-mediated vasodilation (FMD) by high-resolution ultrasonography, respectively. Microalbuminuric patients presented impaired venodilation (32.9 ± 17.4% vs. 59.3 ± 26.5%, respectively; P = 0.004) and FMD (1.8 ± 0.9% vs. 5.1 ± 2.4, respectively; P < 0.001), as compared to normoalbuminuric patients. Venodilation was negatively correlated with microalbuminuria (r = -0.53; P = 0.004) and HbA1c (r = -0.41; P = 0.032). The same was observed between FMD and albuminuria (r = -0.49; P = 0.007) and HbA1c (r = -0.44; P = 0.019). Venodilation was positively correlated with FMD (r = 0.50; P = 0.007). Thus, both venous and arterial endothelial function are impaired in patients with T2D and microalbuminuria. The two methods used for endothelial function evaluation were positively correlated. Even though patients had good metabolic control as a group, vasodilation responses were negatively correlated with HbA1c.

Introdução: o desmame da ventilação mecânica (VM) envolve alterações fisiológicas que acarretam sobrecarga do sistema cardiorrespiratório por mudanças na interação entre paciente e ventilador. O estudo dessas alterações cardiorrespiratórias durante o desmame, à beira de leito, por ecocardiografia, é pouco descrita na literatura e pode ajudar a entender e identificar melhor tais alterações. Objetivos: Analisar alterações da função cardíaca por ecodopplercardiograma, eletrocardiograma (ECG) e demais parâmetros cardiorrespiratórios em pacientes críticos durante o desmame da ventilação mecânica (VM) pela utilização de dois modos de desmame (pressão suporte (PSV) e tubo T-Ayre) e comparar os sub grupos: sucesso versus falha de desmame e cardiopatas versus não cardiopatas. Métodos: Ensaio Clínico Randomizado Cruzado de pacientes em Centro de Terapia Intensiva (CTI), em VM por mais de 48 horas e considerados aptos para o desmame. Foram analisadas as variáveis cardiorrespiratórias, oxigenação, eletrocardiograma e dopplerecocardiograma em situação basal e ao final de 30 minutos de cada método de desmame (PSV e tubo T). Comparações foram feitas entre PSV e tubo T, sucesso e falha do desmame e cardiopatas e não cardiopatas por meio de ANOVA e teste t. O nível de significância foi 0,05. Resultados: Foram avaliados 24 pacientes, com idade média de 53 anos, sendo o desvio padrão de 20, 13 do sexo masculino e 11 do sexo feminino. Do total, 07 pacientes falharam na primeira tentativa de desmame. Pacientes com sucesso no desmame apresentavam níveis de SaO2 e PaO2 estatisticamente maiores. Nos pacientes que falharam no desmame, os achados Dopplerecocardiograficos mostraram aumento significativo do átrio esquerdo (AE), maior espessura das estruturas do VE e valor significativamente menor no tempo de relaxamento isovolumétrico (TRIV). Não houve diferenças entre as medidas ecocardiográficas e nos achados de ECG em PSV e em Tubo T. A comparação entre cardiopatas e não cardiopatas mostrou apenas menores valores de SaO2, PaO2 e de freqüência cardíaca entre os primeiros. Conclusão: As alterações ecodopplercardiográficas foram sugestivas de disfunção diastólica nos pacientes que falharam no desmame da VM, não tendo sido observada disfunção sistólica nem isquemia miocárdica. Os pacientes que tiveram sucesso no desmame mostraram valores de oxigenação significativamente maiores. Não foram observadas alterações eco e eletrocardiográficas comparando PSV com tubo T. Entre os cardiopatas apenas os valores de oxigenação e de freqüência cardíaca foram menores.

Base teórica - A fisiopatologia da reestenose coronária pós angioplastia está relacionada ao aumento da produção de matriz extracelular, proliferação celular e alterações morfológicas da parede do vaso, proporcionadas principalmente por células musculares lisas e macrófagos. Embora as citocinas sejam proteínas fundamentais na regulação destas funções e estejam presentes nas placas reestenóticas, sua exata importância ao longo deste processo permanece indefinida, principalmente pela falta de um método capaz de sua avaliação seqüencial. Neste estudo, testamos a hipótese de que pacientes com reestenose coronária pós-angioplastia apresentam aumento da atividade imunoinflamatória plasmática através da mensuração de marcadores circulantes pelo método de ELISA. Objetivo - Comparar a expressão de interleucina l-beta (IL-1 J3), receptor solúvel da interleucina-2 (rs-IL 2), fator de necrose tumoral alfa (TNFa) e receptores solúveis I e H do fator de necrose tumoral alfa (rs I-TNFa e rs li-TNFa) no sangue periférico de pacientes com lesões reestenóticas, lesões ateroscleróticas primárias e indivíduos normais. Métodos- Foram estudados 11 pacientes com reestenose coronária pós-angioplastia e 10 pacientes com aterosclerose primária encaminhados para cineangiocoronariografia. Dez indivíduos normais sem cardiopatia isquêmica ou fatores de risco foram utilizados como grupo controle. As amostras de sangue foram coletadas imediatamente antes da cineangiocoronariografia, processadas e as concentrações plasmáticas do rs-IL 2, TNFa, rs-1 TNFa, rs-11 TNFa e IL-lf3 analisadas pelo método de ELISA. Os níveis de cada grupo foram comparados por análise de variância (ANOVA), sendo utilizado o método de Scheffé para análise das diferenças entre os subgrupos. Resultados - Não houve diferença quanto à idade, sexo, presença de fatores de risco para cardiopatia isquêmica e aspectos de tratamento entre os dois grupos de pacientes. Os pacientes com reestenose coronária apresentaram cardiopatia isquêmica mais grave, já que tinham maior número de vasos comprometidos e também apresentaram o último episódio de angina há menos tempo do que os pacientes com aterosclerose primária. Os níveis plasmáticos do rs-IL 2 foram significativamente mais elevados nos pacientes com reestenose coronária (1640 ± 576 pg/ml) do que nos nos indivíduos normais (796 ± 470 pg/ml), mas inferiores aqueles dos pacientes com aterosclerose primária (2283 ± 542 pg/ml) (p<0.05). Os níveis dos receptores do TNFa e do TNFa dos pacientes com reestenose coronária (rs-I TNFa=1021 ± 108 pg/ml; rs-II TNFa=2267 ± 447 pg/ml; TNF a=O pg/ml [0-2.8 pg/ml]) não foram diferentes dos indivíduos normais (rs-I TNFa= 888 ± 162 pg/ml; rs-II TNFa=2123 ± 345; TNFa=O pg/ml [0-0.3 pg/ml] ) mas foram significativamente menores do que aqueles dos pacientes com aterosclerose primária (rs-I TNFa= 1223 ± 194 pg/ml; rs-II TNFa= 2958 ± 716 pg/ml; TNFa= 0.65 pg/ml [0-3.0 pg/ml]) (p<0.05 para todas as diferenças). Os níveis de IL-1~ foram indetectáveis em todos os indivíduos. Não houve correlação entre a gravidade da cardiopatia isquêmica, a proximidade da angina ou a idade e os níveis de cada marcador. Conclusões - Os pacientes com reestenose coronária pós-angioplastia apresentam aumento do rs-IL 2, mas não do TNFa ou de seus receptores solúveis quando comparados com indivíduos normais. Os pacientes com aterosclerose primária apresentam aumento de todos estes marcadores quando comparados tanto com indivíduos normais quanto com os pacientes com reestenose coronária. Estes resultados indicam ativação linfocitária moderada nos pacientes com reestenose coronária pós-angioplastia e atividade imunoinflamatória mais intensa nos pacientes com aterosclerose primária. / Background - Overproduction of extracellular matrix, cellular proliferative events and morphologic remodelling of vessel wall, derived mainly from inapropriate activity of smooth muscle cells and macrophages, are key features in the pathophysiology of restenosis post coronary angioplasty. Several cytokines are known to be involved in the regulation of those cell functions but their exact role in the overall process remains to be defined, due to the lack of a method capable of sequential assessment over time. In this study, we sought to investigate the leveis o f circulating markers o f immunoinflamatory activity in patients with restenosis, to test the hypothesis that they are elevated when compared with patients with primary atherosclerosis and healthy volunteers. Objective- To compare the expression of interleukin 2 soluble receptor (sr-IL2), tumour necrosis factor (TNFu), soluble receptor I and II of tumour necrosis factor (sr-I TNFu and sr-II TNFa) and interleukin 1 beta (IL-lP) in periferic blood of patients with restenosis, primary atherosclerosis and healthy volunteers. Methods - Eleven patients with coronary restenosis post angioplasty and 1 O patients with primary atherosclerosis referred for coronary arteriography were studied. Ten normal volunteers without coronary artery disease or risk factors for its presence served as controls. Blood samples were drawn and processed immediately before coronary arteriography and plasmatic concentrations of fí:-IL2, TNFu, sr-I TNFa, sr-II TNFa and IL-1 P were analised by an ELISA method. Results were compared by ANOVA. Results - There were no significant differences in age, sex, risk factors for coronary artery disease and treatment in both groups of patients. The group of patients with coronary restenosis had more vessels involved in angiography and shorter time between the last episode of angina and blood sampling. Plasmatic leveis of sr-IL2 were significantly greater in restenosis patients (1640 ± 576 pg/ml) than normal indiviuals (796 ± 470 pg/ml), but smaller than patients with atherosclerosis (2283 ± 542 pg/ml) (p<0.05). There were no differences between TNFa and its soluble receptors leveis in coronary restenosis patients (sr-I TNFa=1021 ± 108 pg/ml; sr-II TNFa=2267 ± 447 pg/ml; TNFa=O pg/ml [0-2.8 pg/ml]) and normal individuais (sr-I TNFa= 888 ± 162 pg/ml; sr-II TNFa=2123 ± 345; O pg/ml [0-0.3 pg/ml] ) but primary atherosclerosis patients displayed leveis significantly greater than both groups (sr-I TNFa= 1223 ± 194 pg/ml; sr-II TNFa= 2958 ± 716 pg/ml; TNFa= 0.65 pg/ml [0-3.0 pg/ml]). IL-113 leveis were undetectable in all subjects. There was no correlation between the severity of coronary artery disease and time to last episode of angina with the leveis of each cytokine. Conclusions - Coronary restenosis patients present greater leveis of sr-IL2 but not of TNFa or its soluble receptors when compared with normal individuais. Primary atherosclerosis patients present greater leveis of ali this markers when compared Vvith either restenosis patients or normal individuais. These results point to moderate linfocitary activity in coronary restenosis patients and more significant immunoinflammatory activity in patients with primary atherosclerosis.

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No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Andrea Tavares Dantas.pdf: 4721440 bytes, checksum: c08e80fa7b74bfe7b86f6fae8f4db2bd (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / A esclerose sistêmica (ES) é uma doença multissistêmica do tecido conjuntivo, de etiologia desconhecida, caracterizada essencialmente por fibrose progressiva da pele e órgãos internos. Os mecanismos fisiopatogênicos envolvem alterações vasculares e desregulação autoimune, com participação de múltiplas citocinas. Atualmente, as poucas opções de tratamento para a doença, sobretudo para as manifestações inflamatórias e fibróticas, apresentam eficácia limitada. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o perfil de citocinas e quimiocinas produzidas por pacientes com ES e avaliar, in vitro, a resposta ao tratamento com metilprednisolona (MP) e com um novo derivado tiazolidínico LPSF/CR-35. Foram avaliados 67 pacientes com diagnóstico de ES e 64 voluntários saudáveis, pareados por sexo e por idade. Para avaliação da resposta in vitro, foi realizada cultura de células mononucleares do sangue periférico (PBMC). A quantificação de citocinas e quimiocinas no soro e no sobrenadante de culturas foi realizada através de cytometric bead array (CBA) e enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Em comparação com controles saudáveis, pacientes com ES apresentaram níveis séricos aumentados de IFN-γ, TGF-β, CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, os quais foram associados à presença de manifestações clínicas específicas. Descrevemos também, aumento dos níveis séricos de IL-35 e sua associação com a presença de fibrose pulmonar, assim como elevação dos níveis de IL-29/IFN-λ1 e sua correlação com níveis de IFN-λ em pacientes com ES. No intuito de melhor caracterizar a associação entre citocinas e manifestações clínicas, foram mensurados os níveis de citocinas e quimiocinas no sobrenadante das culturas de PBMC não estimuladas e/ou submetidas ao estímulo com anti-CD3/CD28. Observou-se associação entre produção de IL-10 e a extensão do envolvimento cutâneo, IL-2 e dismotilidade esofageana, IL-2 e IL-4 e fibrose pulmonar e IL-4 e IL-10 e a presença de úlceras digitais. Com relação às quimiocinas, foi detectado aumento do nível sérico de CCL5/RANTES em pacientes com fibrose pulmonar. No sobrenadante de cultura de PBMC, verificou-se maior concentração de CCL5/RANTES e de CXCL8/IL-8 em pacientes com úlceras digitais e maior produção de CXCL9/MIG e CXCL10/IP-10 em pacientes com doença precoce. Com o objetivo de verificar a resposta in vitro ao tratamento com corticosteroides, as condições de cultura estimuladas com anti-CD3/CD28 foram tratadas com MP 100μM e, após 48 horas, foi observada significativa redução dos níveis de CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES e CXCL8/IL-8 em pacientes com ES. Nesses mesmos pacientes, as citocinas IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A, TNF e IFN- não sofreram modulação após o tratamento com MP. Por fim, foi avaliada a resposta in vitro ao tratamento com o LPSF/CR-35. O composto inibiu significativamente a produção de IL-4, IL-10, IL-17A, CCL2/MCP-1 e CXCL8/IL-8 e aumentou a de TNF em pacientes com ES. Dessa forma, o presente estudo demonstrou que pacientes com ES apresentam um perfil diferente de produção de citocinas e quimiocinas em comparação com indivíduos saudáveis e esse achado pode ajudar na melhor caracterização dos diversos fenótipos de pacientes. O tratamento da doença permanece um desafio e a avaliação dos efeitos in vitro de novas ou de estabelecidas moléculas fornecem subsídios para o futuro desenvolvimento de ensaios clínicos. / Systemic sclerosis (SSc) is a multisystem connective tissue disease of unknown etiology, characterized primarily by progressive fibrosis of the skin and internal organs. The pathophysiological mechanisms involve vascular abnormalities and autoimmune deregulation, with participation of multiple cytokines. Currently, there are few treatment options for the condition, especially for inflammatory and fibrotic manifestations, and they have limited effectiveness. Thus, the aim of this study was to evaluate the profile of cytokines and chemokines produced by SSc patients and assess the response to in vitro treatment with methylprednisolone (MP) and a novel thiazolidine LPSF/CR-35. We evaluated 67 patients with SSc and 64 healthy volunteers, matched for sex and age. To evaluate the in vitro response to the treatments proposed, culture of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was obtained. Cytokines and chemokines quantification in serum and culture supernatant was performed by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and cytometric bead array (CBA). Compared to healthy controls, SSc patients showed increased serum levels of IFN-γ, TGF-β, CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, which were associated with the presence of specific clinical manifestations. We describe also an increase in serum levels of IL-35 and its association with pulmonary fibrosis, as well as elevation of IL-29/IFN-λ1 levels and its correlation with IFN-λ levels in SSc patients. In order to further characterize the association between cytokines and clinical manifestations, levels of cytokines and chemokines were measured in supernatant of PBMC cultures unstimulated and/or stimulated with anti-CD3/CD28. There were associations between IL-10 production and cutaneous involvement, IL-2 and esophageal dysmotility, IL-2 and IL-4 and lung fibrosis, and IL-4 and IL-10 and digital ulcers. Regarding chemokines, it was detected increased serum CCL5/RANTES level in patients with pulmonary fibrosis. In PBMC culture supernatant, there was a higher concentration of CCL5/RANTES and CXCL8/IL-8 in patients with digital ulcers and an increased production of CXCL9/MIG and CXCL10/IP-10 in patients with early disease. In order to verify the in vitro response to corticosteroid treatment, the culture conditions stimulated with anti-CD3/CD28 were treated with MP 100μM, and after 48 hours, there was significant reduction in the levels of CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES and CXCL8/IL-8 in patients with SSc. In the same patients, the cytokines IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A, TNF and IFN-λ not undergone modulation after treatment with MP. Finally, in vitro response to treatment with LPSF/CR-35 was evaluated. The compound significantly inhibited IL-4, IL-10, IL-17A, CCL2/MCP-1 and CXCL8/IL-8 and increased TNF in SSc patients. Thus, the present study demonstrated that patients with SSc present a different profile of cytokines and chemokines compared to healthy subjects and this finding may help in better characterization of the different phenotypes of patients. The treatment of the disease remains a challenge and assess in vitro effects of new or established molecules provide information for the future development of clinical trials.

Introdução - Diversos estudos têm apontado que uma modulação imunoinflamatória possa desempenhar papel importante na fisiopatologia da insuficiência cardíaca, através da determinação de aumento dos níveis séricos de várias citoquinas em pacientes com a síndrome. No entanto, o sítio da produção aumentada destas moléculas ainda não está claro. Métodos - Foram estudados 18 pacientes com insuficiência cardíaca classe III ou IV com fração de ejecão ≤ 35% (47±11 anos; 14/18 com etiologia não isquêmica) e 7 indivíduos controles (38±9 anos). Foram analisadas as concentrações de TNF-α, seus receptores solúveis I e II, da interleucina 6 e do receptor solúvel da interleucina 2 pelo método de ELISA no sangue periférico e sangue do seio coronário de todos os indivíduos. Resultados - Nos pacientes, as concentrações periféricas do TNF-α, e dos receptores solúveis I e II do TNF-α foram significativamente maiores do que nos indivíduos controles (3,9 ± 2,7 vs. 0,6 ± 1,9 pg/ml, p = 0,009; 1477 ± 489 pg/ml vs. 965 ± 214 pg/ml, p = 0,01; 3149 ± 983 pg/ml vs.1700 ± 526 pg/ml, p = 0,001; respectivamente). Apenas o TNF-α e a interleucina 6 apresentaram maior concentração periférica quando comparada ao sangue do seio coronário (3,9 ± 2,7 vs. 2,7 ± 2,1 pg/ml, p = 0,007 e 4,5 ± 2,8 vs. 3,6 ± 2,8 pg/ml, p = 0,01, respectivamente) em pacientes com insuficiência cardíaca. Além disto, foi observada correlação inversa entre a concentração periférica do TNF-α (r = - 0,5, p = 0,01) e seus receptores solúveis I e II (r = - 0,46, p = 0,02 e r = - 0,59, p = 0,001, respectivamente) e a fração de ejeção, bem como a concentração no seio coronário dos receptores solúveis I e II do TNF-α e a fração de ejeção (r = - 0,46, p= 0,02 e r = - 0,58, p = 0,002, respectivamente). Conclusões - A existência de maiores concentrações de TNF-α e interleucina 6 no sangue periférico do que no seio coronário em pacientes com insuficiência cardíaca sugere que a produção destas citoquinas seja predominantemente periférica. O TNF-α e seus receptores solúveis I e II correlacionaram-se inversamente com a fração de ejeção.

Orientador: Jorge Vega / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T01:34:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Grassi_CeliaReginaBaptista_D.pdf: 7491191 bytes, checksum: 42621d496c1b182927c242174286d9c9 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Esta tese teve como objetivos caracterizar as alterações histológicas e fisiológicas induzidas em plantas de laranja 'Pera¿ e limão 'Galego', inoculadas com isolados fracos (Pera IAC e Isolado 50) e severos (Pera Rio e Barão B) do vírus da tristeza dos citros (CTV); estudar as respostas das plantas à infecção pelo CTV quanto à variação de atividades enzimáticas envolvidas na reação da planta (PAL, CAD, Peroxidases ligadas à parede celular POX-lig); obter dados sobre a localização a nível morfo-histológico de peroxidases ligadas à parede celular; obter dados sobre isoenzimas de peroxidases envolvidas na resposta à infecção pelo CTV; caracterizar a resposta das plantas à infecção pelo CTV quanto a alterações no conteúdo de ácido salicílico total. Para tanto, plantas de laranja 'Pera¿ e limão 'Galego¿ foram inoculadas por união de tecido com borbulhas de plantas infectadas com os isolados do vírus. Como controle foram usadas plantas enxertadas com borbulhas sadias. As plantas foram mantidas em casa de vegetação. Nos experimentos onde determinou-se a atividade das enzimas PAL,CAD e Pox-lig foi verificado, com exceção da enzima CAD, que plantas infectadas pelos isolados severos do CTV apresentaram um aumento significativo na atividade dessas enzimas, enquanto que as plantas infectadas pelos isolados fracos do virus diminuíram a atividade ou não a modificaram. Quando guaiacol e siringaldazina, substratos específicos para determinar a atividade de peroxidases foram usados, observou-se que a atividade de guaiacol peroxidase não apresentou correlação com a severidade do isolado do CTV. As diferenças observadas na atividade de siringaldazina peroxidase foram de tal magnitude que poderiam ser consideradas na prática como um parâmetro na diferenciação entre isolados fracos e severos do CTV. A enzima CAD não foi estimulada pela infecção com os diferentes isolados do CTV, não foram observadas diferenças nas atividades entre a plantas infectadas com vírus e plantas sadias. Assim como na Pox -lig e P AL, o conteúdo de ácido salicilico foi mais elevado somente nas plantas infectadas pelos isolados severos do vírus. Plantas infectadas pelo isolado severo Barão B apresentaram teores de SA duas vezes mais elevados que as plantas sadias e 2,7 e 4,4 vezes o valor de plantas infectadas com os isolados Pera IAC e Galego 50, respectivamente. Nos experimentos de eletroforese as isoperoxidases foram separadas em gel ácido (pH 4,5) e gel alcalino (pH 8,3). Em gel alcalino utilizando carbazole como substrato genérico para peroxidases, observou-se duas bandas peroxidases citoplasmáticas nos materiais infectados com isolados severos, enquanto que com o isolado fraco e plantas sadias apresentaram apenas uma banda. Em pH ácido, utilizando siringaldazina como substrato, apenas uma peroxidase de parede celular foi detectada em plantas infectadas pelos isolados severos do CTV. Plantas sadias e infectadas com isolados fracos do vírus não apresentaram atividade. A análise da atividade de guaiacol peroxidase através de fracionamento por HPLC mostrou que as plantas infectadas com o isolado severo do CTV apresentaram dois picos de atividade, sendo o primeiro aos 16-17 minutos de eluição com atividade em tomo de 0,02 ?Abs / mino e o segundo pico, aos 19,5 mino de eluição, com atividade bem maior, em tomo de 0,09 ?Abs / min. Por outro lado, plantas sadias e plantas infectadas com isolado fraco do vírus apresentaram apenas um pico de atividade aos 20 mino de eluição com atividade ao redor de 0,04 e aos 21 min. de eluição com atividade ao redor de 0,06 ?Abs / min, respectivamente. Nos ensaios de microscopia de fluorescência, plantas de limão' Galego' infectadas pelo isolado severo Barão B apresentaram depressões no xilema que foram visualizadas quando utilizou-se excitação com luz UV (Fig. 13 a). O material apresentou fluorescência amarela com excitação por luz azul (Fig. 13 b). Em plantas sadias e plantas infectadas pelo isolado fraco Galego 50 não foram observadas alterações na fluorescência na região do floema e do câmbio vascular (Fig. 13 c,d, respectivamente). Em plantas de laranja 'Pera' infectadas pelos isolados severos Barão B e Pera Rio, foi observado um acúmulo de material fluorescente verde na região do câmbio vascular. o trabalho permite concluir que a atividade de peroxidase associada à lignificação (Pox-lig) pode ser considerada como um parâmetro bastante significativo para a diferenciação de isolados fracos e severos do CTV. Os isolados severos do vírus causam aumento na atividade de enzimas envolvidas nas reações de defesa das plantas, concomitante com o aumento no teor de SA, que atua como molécula sinalizadora. Plantas infectadas pelos isolados severos apresentam disfunção do floema, na região do câmbio vascular e também o aparecimento de uma proteína com atividade peroxidásica que pode ocorrer através de síntese de novo (ativação gênica) ou por ativação de proteína preexistente / Abstract: The present work had as objective the characterization of physiological and histological alterations induced in 'Pera' sweet orange and 'Mexican' lime plants infected by severe (Pera Rio and Barão B) or mild (pera IAC and Isolado 50) isolates of citrus tristeza virus (CTV). The response of plants to CTV infection was examined in relation to changes in enzymatic activities associated with the reaction of the plant to virus infection: P AL, CAD and cell wall-associated peroxidase (Pox-lig). Also examined were the content of salicylic acid, the histological localization of cell wall-associated peroxidases and their electrophoretic characteristics. All the experiments were conducted in 'Pera' orange and 'Mexican' lime plants, graft-inoculated with the different CTV isolates. As healthy controls, plants graft inoculated with healthy scions were used. The plants were kept in the greenhouse during the experiments. Two enzymes, P AL and cell wall-associated peroxidase, have their activity significantly increased in plants infected by severe CTV isolates. These enzyme activities were reduced or not changed by infections with mild isolates, as compared to healthy controls. This correlation between activity and severity of the virus isolate was not observed when guaiacol was used as generic substrate in the peroxidase assay. However, using syringaldazine as substrate for cell wall-associated peroxidase (Pox-lig), the correlation was evident. The differences in syringaldazine-peroxidase and in P AL activities were of such magnitude that they may be useful as a parameter in differentiating mild and severe isolates. The activity of the enzyme CAD was not changed by CTV infection, whether of severe or mild isolates. Paralleling the activity of Pox-lig, the content of salicylic acid was also increased only in plants infected by severe CTV isolates. 'Pera' oranges infected with the severe isolate "Barão B" had 2,7 and 4,4 times greater content of SA than plants infected with "Pera IAC" or "Galego 50" mild isolates, respectively. Using non-denaturing PAGE electrophoresis at an alkaline pH (pH 8.3) an additional band was detected only in plants infected with severe isolates. At acid pH (pH 4.5) it was possible to detect one band with syringaldazine-peroxidase activity only in plants infected with severe isolates. Separation of isoenzymes by HPLC showed an additional peak of guayacol activity (0.02 ?Abs /min) eluting at 16-17 minutes, which was absent in healthy or mild isolate-infected materiais. At 19.5-21 minutes eluted a peak of greater activity (0.09 ?Abs /min) that was common to infected and healthy materiais. Fluorescence microscopy of stem tips of 'Mexican' lime plants, infected with the severe isolate Barão B, showed depressions in the xylem, visualized using UV excitation light. With blue light excitation it was possible to visualize a yellow fluorescing material within the xylem depressions (Figs. 13 a and b). In healthy or mild isolate (Galego 50) materials, fluorescence alterations were not observed in the cambium zone. In 'Pera' orange plants infected with severe isolates (Barão B and Pera Rio) the accumulation of green-fluorescent material was observed in the cambium zone when UV excitation was used. It may be concluded that peroxidase activity associated with lignification can be considered as a significant parameter to differentiate severe from mild isolates of CTV. Severe isolates of CTV induce increases in enzyme activities involved in plant defense mechanisms, paralleling the increase of salicylic acid content, which functions as signaling molecule. Plants infected by severe isolates show disfunctional phloem and an altered cambium zone. They also show the appearance of a new band with peroxidasic activity that may arise from de novo synthesis (gene activation) or from activation of a pre-existing protein / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Um estudo prévio demonstrou em pacientes com choque séptico a presença de exossomos plasmáticos. Nossa hipótese é que exossomos circulantes poderiam contribuir para a disfunção contrátil da sepse. Foi colhido sangue de 55 pacientes com choque séptico. A incubação de corações isolados com exossomos de pacientes sépticos reduziu significantemente as derivadas da pressão ventricular e aumentou as concentrações de nitrato no miocárdio. A exposição de músculos papilares a exossomos reduziu a tensão desenvolvida. Concluímos que exossomos de pacientes sépticos induzem disfunção inotrópica em corações isolados e músculos papilares, possivelmente contribuindo para a disfunção miocárdica da sepse. / A previous report identified in plasma of septic shock patients the presence of exosomes. We hypothesized that circulating exosomes in sepsis could contribute to inotropic dysfunction. We collected blood samples from 55 patients with septic shock. Incubation of isolated heart preparations with exosomes induced a significant decrease in the derivatives of ventricular pressure and increased myocardial nitrate content. Exposure of isolated rat papillary muscles to exosomes reduced developed tension. We conclude that exosomes from septic patients induce myocardial dysfunction in isolated heart and papillary muscle preparations. Thus, they may contribute to myocardial dysfunction of sepsis.

Tradicionalmente no Rio Grande do Sul a ovinocultura mantinha um foco na produção de lã, onde os índices reprodutivos do rebanho possuíam pouca importância. Atualmente isso tem mudado devido à alta valorização do cordeiro no mercado. Nos sistemas com foco na produção de cordeiros os índices reprodutivos tornam-se chaves para a economicidade da propriedade. Mas, para que isso ocorra de uma maneira sustentável a eficiência reprodutiva dos rebanhos precisa alcançar melhores índices. O aumento na prolificidade através da manipulação da nutrição é um dos fatores que podem contribuir para melhorar esses índices, além de ser uma alternativa “limpa, verde e ética” de produção animal. Com isso, o objetivo deste trabalho foi de melhorar o desempenho reprodutivo de um rebanho de ovelhas Texel, submetidas a uma suplementação pré-encarneiramento. Foram utilizados 91 animais divididos em dois grupos, suplementado (n=46) e controle (n=45), de acordo com o peso e a condição corporal. As ovelhas do grupo experimental receberam um suplemento a base de milho e farelo de soja por sete dias prévios ao encarneiramento. As taxas de prenhez não diferiram entre os grupos (97,8% e 95,5%, respectivamente; P > 0,05) e observou-se uma tendência dos animais do grupo suplementado a conceberem em apenas um serviço (P=0,068). A prolificidade foi maior nas ovelhas suplementadas em comparação às ovelhas do grupo controle (P≤0,05), assim como nas ovelhas em melhor condição corporal que nas ovelhas em pior condição corporal (P≤0,05). Com isso, pode-se concluir que a suplementação pré-encarneiramento por sete dias com milho e farelo de soja aumentou o número de cordeiros nascidos do rebanho em 11%, além de diminuir o número de ovelhas com retorno ao primeiro serviço. / Traditionally in Rio Grande do Sul the sheep industry maintained a focus on wool production, in this systems the reproductive performance of the herd had little importance. Today, it has been changed due to the high value of the lamb in the market. The systems that have focus on the lamb production, reproductive performance become very important to the property´s economy. For this to occur in a sustainable manner, the reproductive efficiency of livestock must achieve better rates. The increase in prolificacy by manipulating nutrition is one of the factors that can contribute to improving these rates, and is an alternative "clean, green and ethical" in animal production. Thus, the objective was to improve the reproductive performance of Texel sheep, subjected to a pre-mating supplementation. In the experiment 91 animals were divided into two groups, control (n=45) and supplemented (n=46) according to their weight and body condition score. Ewes in the experimental group received a supplement based on corn and soybean meal for seven days prior to mating. Pregnancy rates did not differ between groups (97.8% and 95.5%, respectively, P> 0.05) and the group supplemented tended to conceive at the first service (P = 0.068). The prolificacy was higher in sheep supplemented compared to the control group (P≤ 0.05), as well as in ewes in better body condition than in ewes in poorer body condition score (P≤ 0.05). Thus, we can conclude that supplementation pre-mating for seven days with corn and soybean meal increased the number of lambs born by 11%, and reduce the number of ewes that return to first service.