Microrganismos do gênero Clostridium, particularmente Clostridium petfringens, permanecem como um grave problema na avicultura mundial, do ponta de vista de saúde animal, de saúde pública tanto quanto econômico. O Clostridiurn perfrngens é considerado um habitante comensal do trato intestinal de frangos de corte, no entanto, quando submetidos a alteraçóes na dieta ou mesmo então após a abolição de determinados promotores de crescimento pela Comissão das Comunidades da União Européia, o controle da população microbiana tornou-se reduzido. Uma dieta rica em grãos. trigo, cevada, e arroz aumentam a viscosidade intestinal através do aumento da produção de muco, como conseqüência do aumento de retenção de água no Iúmem intestinal e pela ausência de enzimas capazes de agir sobre os produtos da digestão destes carboidratos. De fato, o aumento do crescimento microbiano comprometem as funçóes da mucosa intestinal. A partir destes fatores, o presente trabalho tem como objetivo quantificar Clostridium perfrngens em duas diferentes dietas com e sem promotor de crescimento, utilizando um método analítico alternativo em dois segmentos do trato intestinal de frangos de corte. Para avaliar este método foi proposto a inclusão de alguns critérios de verificação do protocolo de validação para métodos microbiológicos alternativos, métodos quantitativos, referenciados na NordVal Validation (2005). Para avaliar o efeito das dietas foram analisadas 73 aves quanto a presença de Clostridium periringens pelo método bacteriológico convencional segundo MAPA e BAM adaptados de acordo com a natureza da amostra no laboratório do CDPA-UFRGS pelo seguinte protocolo: l g de inóculo de raspado de ileo e 1 g de conteúdo cecal acondicionados em 9 mL de água peptonada tamponada 0,1%, diluição 1:10, homogenizados e diluídos até a diluição 10º , posteriormente mantidos em banho-maria a 80°C durante 10 minutos seguido de refrigeração em água a 20°C. aliquotas de 1 mL eram inoculadas em ágar TSC e incubados a 37" C por 24 horas. Foram analisados 4 tratamentos: T1- dieta vegetal com promotor de crescimento, T2- dieta vegetal sem promotor de crescimento, T3- dieta vegetal milho e soja mais produtos de origem animal com promotor de crescimento e T4- dieta vegetal milho soja mais produtos de origem animal sem promotor de crescimento. A dieta do tratamento 3 obteve menor quantificação para Clostridium perfrngens nas diferentes idades de coleta. Algumas combinações de amostras intestinais diferiram com maior destaque. As amostras 26, 28, 42 e 48 são consideradas significativas com valores menores que o nível de 10% de significância (<0,10) - para interações triplices utiliza-se um nível de significância maior. Podemos considerar que a partir do 16" dia de idade iniciou a multiplicação de Clostridium perfringens no trato intestinal das aves e a partir do 25º dia de idade ocorreu uma redução mais significativa no ceco e íleo. Os ensaios para verificação do limite de detecção do método usado para ileo e ceco demonstraram um intervalo de detecção entre >40 células e c421 células por mL. Desta forma o método demonstrou um limite de detecçáo por perda de recuperação de células nas matrizes de ceco indicando que os resultados são quantitativamente maiores nas amostras. Possivelmente fatores interferentes tais como, analíticos, redução de ph, ácidos graxos de cadeia curta, exposição ao oxigênio podem ter interferido sob a recuperação das células. / Microorganism of the genus Clostridium particularly Clostridium perfringens, rernain a serious problern to the world's poultry industry, in aspects not only of animal and hurnan health but alço econornical. Clostridium perfringens considered a co mensal inhabitant of the intestinal tract of broiler chickens, however when subjected to diet alterations or even after elimination of certain growth prornoters by the Cornmission of the European Cornmunities, the control of the rnicrobial population has become reduced. A diet rich in grains such as wheat, barley and rice, increase the intestinal viscosity through increasing the production of mucous as a consequence of water retention in the intestinal lumen and the absence of enzyrnes capable of acting upon the products of the digestion of these carbohydrates. In fact, microbial growth affects the intestinal rnucous function. Based on these factors the following study has the objective to analyze the influente of two diets with or without growth prornoters under the evaluation of a new method for the isolation and quantification of Clostridium perfringens in two segrnents of the gastrointestinal tract of broiler chickens. To evaluate this method there were proposed the inclusion of some verification criteria for the validation protocol in alternative rnicrobiological methods, quantitative rnethods referred to in NordVal Validation (2005). To evaluate the effect of the diets, 73 birds were analyzed as to the presence of Clostridium perfrngens using the conventional bacteriological method according to MAPA and BAM adapted to the type of sample in the CDPAIUFRGS laboratory using the following protocol: l g of scraped inoculurn of the ileurn and 1 g of cecurn content suspended in 9 rnL of peptonated and parnptonated water at 0,1%, dilution 1:10, homogenized and diluted to 10". later maintained in a hot water bath of 80°C during 10 rninutes followed by refrigeration in water at 20°C, samples of 1 mL were suspended in agar TSC and incubated at 37" C for 24 hours. Four different treatments were analyzed: TI- vegetable diet with a growth promoter, T2- vegetable diet without a growth promoter, T3- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products and a growth promoter and T4- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products without a growth promoter. The diet of treatment 3 obtained the lowest quantification for Clostridium perfrngens at different collection times. Some combinations of ileum samples had outstanding differences. Samples 26,28, 42 and 48 are considered significant with values lower than the 10% level of significance (>0,10) -for the triple interactions a greater level of significance is utilized. We may consider that from the 16th day of development the multiplication of Clostridium perfringens began, in the gastrointestinal tract of the chickens and from the 25th day of development there occurred a more significant reduction in the ileum and cecum. The practices to verify the limit of detection of the method used for the ileum and cecum demonstrated an interval of detection between >40 cells and c421 cells per mL. As such, the method showed a limit of detection per loss of cell recuperation in the cecum matrix indicating results that are quantitatively greater in the samples. Possibly, interfering factors such as analyiical, reduction of ph, short-chain fatty acids, exposure to oxygen could have interfered with the recuperation of cells.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-27Bitstream added on 2014-06-13T20:13:53Z : No. of bitstreams: 1 agostinho_mr_me_botib.pdf: 487460 bytes, checksum: e3edd62113cd3612c5b439f526eb253b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A utilização de técnicas não invasivas, de baixo custo e inócuas ao indi-víduo proporcionam um grande desafio para o estudo do trato gastrintestinal. Métodos biomagnéticos como a BAC trazem todas essas vantagens e incluem a possibilidade de expansão para novos estudos, arranjos instrumentais e mo-delos biológicos. A consolidação dessa técnica nos últimos anos permitiu a ampliação dos estudos na área farmacêutica, avaliações após alterações nas condições fisiológicas e mesmo após administração de drogas, fornecendo subsídios para uma melhor interpretação dos parâmetros motores do trato gas-trintestinal. As imagens de traçadores e marcadores magnéticos no trato gas-trintestinal proporcionadas pela BAC foi um importante aspecto explorado, no entanto, houve a necessidade de aperfeiçoar a instrumentação para obter me-lhores e também novos resultados. A proposta de implementação de algumas melhorias nesta instrumentação através de implementação de novo arranjo de bobina excitadora, cancelamento de ruído respiratório e nova eletrônica de de-tecção permitiram que os dados in vitro e in vivo refletiram numa melhor quali-dade de sinais e imagens obtidos por este técnica. A BAC multi-sensores é uma ferramenta valiosa com vasta aplicabilidade para aplicação em tecnologia farmacêutica e em fisiologia do trato gastrintestinal / The use of non-invasive techniques, at low cost and harmless to the indi-vidual, provides a great challenge for the study of the gastrointestinal tract. Biomagnetic methods such as the BAC have all these advantages and also include the possibility of expanding to new studies, to instrumental ar-rangements and to biological models. The consolidation of this technique in re-cent years allowed the extension of studies in the pharmaceutical field, after rating changes in physiological conditions and even after drug administration, supporting a better interpretation of the motor parameters of the gastrointestinal tract. The images of tracers and magnetic markers in the gastrointestinal tract offered by the BAC was an important aspect explored. However, there was a necessity of improving the equipment in order to obtain new and better re-sults. The proposal to implement some improvements in this equipment through implementation of the new exciter coil arrangement, the cancellation of the noise of breathing, and the new electronics of detection have allowed that the data in vitro and in vivo reflected a better quality of signals and images obtained by this technique. The BAC multi-sensors is a valuable tool with wide applica-bility to pharmaceutical technology and physiology of the gastrointestinal tract

Orientadora : Profa. Dra. Marilis Dallarmi Miguel / Coorientador : Prof. Dr. Obdulio Gomes Miguel e Profa.Dra. Deise Prehs Montrucchio / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 09/06/2017 / Inclui referências : f. 118-133 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi realizar isolamento de compostos e avaliação do potencial biológico e farmacológico da espécie Buddleja stachyoides Cham. & Schltdl. (Scrophulariaceae), conhecida popularmente como verbasco ou barbasco, encontrada, principalmente, na região sul do Brasil, é usada na medicina tradicional como anti-hemorroidal, antitussígena, analgésica, sudorífera, emoliente e antireumática. Foram isolados compostos das frações hexânica das raízes e acetato de etila das partes aéreas. O método analítico de quantificação do marcador verbascosídeo foi validado, utilizando-se o extrato bruto das partes aéreas. As atividades larvicida sobre Aedes aegypti e alelopática sobre a germinação e crescimento de Lactuca sativa L. e Allium cepa L. foram avaliadas com extratos brutos e frações das partes aéreas e raízes. O potencial antioxidante dos extratos brutos foi avaliado através dos ensaios de captura dos ânions superóxido e óxido nítrico. As atividades farmacológicas antinociceptiva, anti-inflamatória, gastroprotetora, motilidade gastrointestinal e a toxicidade subcrônica foram avaliadas com o extrato bruto das partes aéreas em camundongos Swiss. O composto isolado da fração hexânica das raízes foi identificado como ácido triacontanoico e a mistura de isômeros isolada da fração acetato de etila das partes aéreas foi identificado como martinosídeo (trans e cis). Os extratos brutos das partes aéreas e raízes foram capazes de capturar o ânion superóxido e mais eficazes na inibição do radical óxido nítrico do que o padrão ácido gálico. Algumas frações e extratos brutos apresentaram efeitos inibitórios e estimulantes na germinação e crescimento de Lactuca sativa L. e Allium cepa L. e toxicidade sobre as larvas de Aedes aegypti. O extrato bruto das partes aéreas, nas doses de 600 e 900 mg/kg, apresentou efeito anti-inflamatório em 3 e 4 horas no teste de edema de pata induzido por carragenina e diminuição da migração de leucócitos na cavidade peritonial no teste de peritonite induzida por carragenina. Nos testes antinociceptivos, formalina e ácido acético, o extrato bruto apresentou potencial analgésico nas doses de 600 e 900 mg/kg e demonstrou significativo efeito protetor sobre a úlcera gástrica induzida por etanol acidificado. Não teve ação sobre a motilidade gastrointestinal. O extrato na dose de 900 mg/kg apresentou baixa toxicidade no teste subcrônico avaliado em camundongos fêmeas. Estes efeitos podem estar relacionados aos compostos fenilpropanoides, que possuem propriedades antioxidantes e são capazes de inibir enzimas e mediadores inflamatórios. Devido ao potencial farmacológico e antioxidante observado para a espécie Buddleja stachyoides Cham. & Schltdl, torna-se interessante a realização de testes para comprovar sua segurança e eficácia, para futuro desenvolvimento de um fitoterápico. Palavras-chave: Aedes aegypti. Antioxidante. Anti-inflamatório. Antinociceptivo. Gastroprotetor. Motilidade gastrointestinal. / Abstract: The objective of this work was to isolate compounds and evaluate the biological and pharmacological potential of Buddleja stachyoides Cham. & Schlitdl. (Scrophulariaceae), popularly known as mullein or barbasco, found mainly in southern Brazil, is used in traditional medicine as anti-hemorrhoidal, antitussive, analgesic, sudorific, emollient and antirheumatic. Compounds of the hexane fractions of the roots and ethyl acetate of the aerial parts were isolated. The analytical method of quantification of the verbascoside marker was validated, using the crude extract of the aerial parts. The larvicidal activities against Aedes aegypti and allelopathic on the germination and growth of Lactuca sativa L. and Allium cepa L. were evaluated with crude extracts and fractions of the aerial parts and roots. The antioxidant potential of the crude extracts was evaluated through the superoxide anion and nitric oxide capture assays. The antinociceptive, anti-inflammatory, gastroprotective, gastrointestinal motile and subchronic toxicity activities were evaluated with the crude extract of the aerial parts in Swiss mice. The compound isolated from the hexane fraction of the roots was identified as triacontanoic acid and the mixture of isomers isolated from the ethyl acetate fraction of the aerial parts was identified as martynoside (trans and cis). The crude extracts of the aerial parts and roots were able to capture the superoxide anion and more effective in inhibiting the nitric oxide radical than the standard gallic acid. Some crude fractions and extracts had inhibitory and stimulating effects on the germination and growth of Lactuca sativa L. and Allium cepa L. and toxicity against Aedes aegypti larvae. The crude extract of the aerial parts, at doses of 600 and 900 mg/kg, showed anti-inflammatory effect in 3 and 4 hours in the paw edema test induced by carrageenan and decreased leukocyte migration in the peritoneal cavity in the induced peritonitis test by carrageenan. In the antinociceptive, formalin and acetic acid tests, crude extract showed analgesic potential at doses of 600 and 900 mg/kg and showed a significant protective effect on gastric ulcers induced by acidified ethanol. It had no action on gastrointestinal motility. The extract at the dose of 900 mg/kg showed low toxicity in the subchronic test evaluated in female mice. These effects may be related to phenylpropanoid compounds, which have antioxidant properties and are capable of inhibiting inflammatory enzymes and mediators. Due to the pharmacological and antioxidant potential observed for the species Buddleja stachyoides Cham. & Schltdl, it is interesting to carry out tests to prove its safety and efficacy, for the future development of a herbal medicine. Key-words: Aedes aegypti. Antioxidant. Anti-inflammatory. Antinociceptive. Gastroprotective. Gastrointestinal motility.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-10-29Bitstream added on 2014-06-13T18:50:09Z : No. of bitstreams: 1 ietsugu_mv_me_botib.pdf: 756059 bytes, checksum: 60c01e8df811ca3a5b1305a1cde4cbc5 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Distribuição intragástrica de uma refeição (DIR) e esvaziamento gástrico regional são parâmetros importantes que podem estar associados a alterações na motilidade gástrica. No entanto, não há um consenso sobre o tipo de segmentação e o volume da refeição para se avaliar a DIR e o esvaziamento regional. O objetivo desse estudo foi avaliar a DIR de refeições-teste com 60 ml e 180 ml, utilizando três formas diferentes de segmentação gástrica. Doze voluntários saudáveis foram avaliados, randomicamente, duas vezes pela cintilografia, ingerindo 60 ml e 180 ml de iogurte acrescido de 2 mCi de 99mTc-Estanho Coloidal. Cada medida durou 18 minutos com aquisição de 1 Hz e todos os dados analisados em ambiente MatLab (Mathworks Inc.). A segmentação proximal-distal utilizou regiões de interesse (ROIs), onde o contorno do estômago total obtido após a ingestão de 180 ml foi movido e ajustado às outras imagens. A análise de freqüência e amplitude foi realizada empregando Transformada Rápida de Fourier (FFT) e área sob a curva (AUC), respectivamente. Nossos resultados indicam que há diferenças significativas, na distribuição intragástrica de uma refeição semi-líquida, quando se ingere um volume pequeno (60 ml) ou moderado (180 ml). Outra constatação importante é que a distribuição de uma refeição entre os compartimentos proximal e distal foi fortemente influenciada pelo modo como o estômago foi dividido. Os padrões de freqüência dominante variaram de acordo com a segmentação, independente do volume da refeição escolhido. Esse trabalho proporcionou avanços metodológicos ao comparar a influência da segmentação gástrica sobre a distribuição intragástrica de refeições com volumes distintos. As discrepâncias entre as segmentações mostram que os resultados de uma pesquisa e/ou diagnóstico podem ser profundamente influenciados pelo tipo... / Intragastric distribution of a meal (IDM) and regional emptying are important parameters that can be associated to alterations in the gastric motility. However, there is a lack of consensus about proximal-distal segmentation and volume of the test meal to evaluate IDM and the regional emptying. The aim of this study was to evaluate IDM with 60 ml and 180 ml, using three different gastric segmentations. Twelve healthy volunteers were assessed, randomly, twice in scintigraphy. The test meal consisted of 60 ml and 180 ml of yogurt to which has added 2 mCi 99mTc-tin colloid. Anterior dynamic (64 · 64 pixels) frames of 1 s were acquired for 18 min and all data were analyzed in MatLab (Mathworks Inc.). The proximal-distal segmentations used regions of interest (ROI), where the outline of the total stomach obtained after the ingestion of 180 ml was moved and fitting to all images. Frequency and amplitude was analyzed using Transformed Fast of Fourier (FFT) and area under the curve (AUC), respectively. Our results indicate significant differences, in the intragastric distribution of a semi-liquid meal, when a small (60 ml) or moderate (180 ml) volume is ingested. An important finding of this study was that IDM between the proximal and distal compartments was influenced strongly by the way as the stomach was divided. The patterns of dominant frequency varied in agreement with the segmentation adopted, independent of the volume of the meal. This work provided methodological progresses when comparing the influence of the gastric segmentation on the intragastric distribution of meals with different volumes. The discrepancies among the segmentations show that the results of a research and/or diagnosis can be deeply influenced by the segmentation adopted, in other words, as the proximal area increases, larger the amount of meal that is kept in the proximal region. In summary, gastrointestinal... (Complete abstract click electronic access below)

Microrganismos do gênero Clostridium, particularmente Clostridium petfringens, permanecem como um grave problema na avicultura mundial, do ponta de vista de saúde animal, de saúde pública tanto quanto econômico. O Clostridiurn perfrngens é considerado um habitante comensal do trato intestinal de frangos de corte, no entanto, quando submetidos a alteraçóes na dieta ou mesmo então após a abolição de determinados promotores de crescimento pela Comissão das Comunidades da União Européia, o controle da população microbiana tornou-se reduzido. Uma dieta rica em grãos. trigo, cevada, e arroz aumentam a viscosidade intestinal através do aumento da produção de muco, como conseqüência do aumento de retenção de água no Iúmem intestinal e pela ausência de enzimas capazes de agir sobre os produtos da digestão destes carboidratos. De fato, o aumento do crescimento microbiano comprometem as funçóes da mucosa intestinal. A partir destes fatores, o presente trabalho tem como objetivo quantificar Clostridium perfrngens em duas diferentes dietas com e sem promotor de crescimento, utilizando um método analítico alternativo em dois segmentos do trato intestinal de frangos de corte. Para avaliar este método foi proposto a inclusão de alguns critérios de verificação do protocolo de validação para métodos microbiológicos alternativos, métodos quantitativos, referenciados na NordVal Validation (2005). Para avaliar o efeito das dietas foram analisadas 73 aves quanto a presença de Clostridium periringens pelo método bacteriológico convencional segundo MAPA e BAM adaptados de acordo com a natureza da amostra no laboratório do CDPA-UFRGS pelo seguinte protocolo: l g de inóculo de raspado de ileo e 1 g de conteúdo cecal acondicionados em 9 mL de água peptonada tamponada 0,1%, diluição 1:10, homogenizados e diluídos até a diluição 10º , posteriormente mantidos em banho-maria a 80°C durante 10 minutos seguido de refrigeração em água a 20°C. aliquotas de 1 mL eram inoculadas em ágar TSC e incubados a 37" C por 24 horas. Foram analisados 4 tratamentos: T1- dieta vegetal com promotor de crescimento, T2- dieta vegetal sem promotor de crescimento, T3- dieta vegetal milho e soja mais produtos de origem animal com promotor de crescimento e T4- dieta vegetal milho soja mais produtos de origem animal sem promotor de crescimento. A dieta do tratamento 3 obteve menor quantificação para Clostridium perfrngens nas diferentes idades de coleta. Algumas combinações de amostras intestinais diferiram com maior destaque. As amostras 26, 28, 42 e 48 são consideradas significativas com valores menores que o nível de 10% de significância (<0,10) - para interações triplices utiliza-se um nível de significância maior. Podemos considerar que a partir do 16" dia de idade iniciou a multiplicação de Clostridium perfringens no trato intestinal das aves e a partir do 25º dia de idade ocorreu uma redução mais significativa no ceco e íleo. Os ensaios para verificação do limite de detecção do método usado para ileo e ceco demonstraram um intervalo de detecção entre >40 células e c421 células por mL. Desta forma o método demonstrou um limite de detecçáo por perda de recuperação de células nas matrizes de ceco indicando que os resultados são quantitativamente maiores nas amostras. Possivelmente fatores interferentes tais como, analíticos, redução de ph, ácidos graxos de cadeia curta, exposição ao oxigênio podem ter interferido sob a recuperação das células. / Microorganism of the genus Clostridium particularly Clostridium perfringens, rernain a serious problern to the world's poultry industry, in aspects not only of animal and hurnan health but alço econornical. Clostridium perfringens considered a co mensal inhabitant of the intestinal tract of broiler chickens, however when subjected to diet alterations or even after elimination of certain growth prornoters by the Cornmission of the European Cornmunities, the control of the rnicrobial population has become reduced. A diet rich in grains such as wheat, barley and rice, increase the intestinal viscosity through increasing the production of mucous as a consequence of water retention in the intestinal lumen and the absence of enzyrnes capable of acting upon the products of the digestion of these carbohydrates. In fact, microbial growth affects the intestinal rnucous function. Based on these factors the following study has the objective to analyze the influente of two diets with or without growth prornoters under the evaluation of a new method for the isolation and quantification of Clostridium perfringens in two segrnents of the gastrointestinal tract of broiler chickens. To evaluate this method there were proposed the inclusion of some verification criteria for the validation protocol in alternative rnicrobiological methods, quantitative rnethods referred to in NordVal Validation (2005). To evaluate the effect of the diets, 73 birds were analyzed as to the presence of Clostridium perfrngens using the conventional bacteriological method according to MAPA and BAM adapted to the type of sample in the CDPAIUFRGS laboratory using the following protocol: l g of scraped inoculurn of the ileurn and 1 g of cecurn content suspended in 9 rnL of peptonated and parnptonated water at 0,1%, dilution 1:10, homogenized and diluted to 10". later maintained in a hot water bath of 80°C during 10 rninutes followed by refrigeration in water at 20°C, samples of 1 mL were suspended in agar TSC and incubated at 37" C for 24 hours. Four different treatments were analyzed: TI- vegetable diet with a growth promoter, T2- vegetable diet without a growth promoter, T3- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products and a growth promoter and T4- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products without a growth promoter. The diet of treatment 3 obtained the lowest quantification for Clostridium perfrngens at different collection times. Some combinations of ileum samples had outstanding differences. Samples 26,28, 42 and 48 are considered significant with values lower than the 10% level of significance (>0,10) -for the triple interactions a greater level of significance is utilized. We may consider that from the 16th day of development the multiplication of Clostridium perfringens began, in the gastrointestinal tract of the chickens and from the 25th day of development there occurred a more significant reduction in the ileum and cecum. The practices to verify the limit of detection of the method used for the ileum and cecum demonstrated an interval of detection between >40 cells and c421 cells per mL. As such, the method showed a limit of detection per loss of cell recuperation in the cecum matrix indicating results that are quantitatively greater in the samples. Possibly, interfering factors such as analyiical, reduction of ph, short-chain fatty acids, exposure to oxygen could have interfered with the recuperation of cells.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-10-31T11:53:56Z No. of bitstreams: 1 2013_ThaisAlvesCostaLamounier.pdf: 11004578 bytes, checksum: 32671399d4110aa92de56af574a0a267 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-11-04T10:30:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_ThaisAlvesCostaLamounier.pdf: 11004578 bytes, checksum: 32671399d4110aa92de56af574a0a267 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-04T10:30:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_ThaisAlvesCostaLamounier.pdf: 11004578 bytes, checksum: 32671399d4110aa92de56af574a0a267 (MD5) / Os Norovírus (NV) são responsáveis pela maioria das gastroenterites humanas não bacterianas em todo o mundo. Devido ao fato das estirpes de NV humanos não possuírem a capacidade de replicação em culturas celulares, a utilização de Virus like particles (VLPs) na compreensão dos fatores imunológicos e físico-químicos torna-se uma boa alternativa para o estudo do genogrupo II genótipo 4 que é considerado o mais prevalente e está associado à epidemia global. O objetivo deste estudo foi produzir VLP de NV variante 2006b e selecionar anticorpos monoclonais humanos a partir de biblioteca apresentada em fagos após a purificação das proteínas. A maior vantagem em utilizar a técnica de Phage Display é a possibilidade da seleção de fragmentos de anticorpos monoclonais totalmente humanos que podem ser utilizados em ensaios clínicos. Foram comparados os métodos de purificação de cloreto de césio (CsCl) e cromatografia de troca iônica, sendo que esta última apresentou um melhor rendimento no que diz respeito à quantidade e pureza das proteínas de capsídeo obtidas. Dos 58 clones analisados após 4 ciclos de seleção utilizando VLP de NV como antígeno, dez foram analisados com Sfi I e BstO I com relação ao perfil e diversidade. Porém, as possíveis recombinações existentes determinaram a esperada diminuição da diversidade da biblioteca ao longo dos ciclos de seleção apesar dos Fabs reconhecerem especificamente o antígeno diferentemente da diversidade inicial, ou seja, na construção da biblioteca. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Norovirus (NV) are responsible for most human nonbacterial gastroenterites worldwide. Because human strains of NV do not have the ability to replicate in cell cultures, the use of virus-like particles (VLPs) in understanding the immunological and physicochemical aspects becomes a good alternative for the study of genogroup II genotype 4, which is considered the most prevalent and is associated with the global epidemic. The aim of this study was to produce VLPs NV 2006b variant and select human monoclonal antibodies from phage-displayed library after purification of proteins. The major advantage in using the technique of phage display is the possibility of selecting fragments of fully human monoclonal antibodies that can be used in clinical trials. The methods of purification of cesium chloride (CsCl) and ion exchange chromatography were compared and the latter had a better performance as regards the amount and purity of the capsid proteins obtained. Of the 58 clones analyzed after 4 cycles of selection using the NV VLP as antigen, ten were analyzed with Sfi I and BstO I with respect to the profile and diversity. However, the possible existing recombinations led to an expected decrease of the library’s diversity during the selection cycles, though Fabs specifically recognized the antigen differently from the initial variety, that is on the construction of the library.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, 2013. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2013-12-09T22:48:05Z No. of bitstreams: 1 2013_DanielaMoniciDaSilva.pdf: 806308 bytes, checksum: 3c0bfe94bf1e72870e993e4e6f323d0e (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2013-12-10T10:38:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_DanielaMoniciDaSilva.pdf: 806308 bytes, checksum: 3c0bfe94bf1e72870e993e4e6f323d0e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-10T10:38:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_DanielaMoniciDaSilva.pdf: 806308 bytes, checksum: 3c0bfe94bf1e72870e993e4e6f323d0e (MD5) / Todas as crianças são esperadas pela família com muita ansiedade e é do desejo de todos que seja uma criança perfeita. Quando a família se depara com uma criança que apresenta malformação congênita, fica claro o estresse e o medo dos pais. A criança com malformação no trato gastrintestinal, na maioria das vezes, necessita de cirurgia imediata para a confecção de um estoma, aumentando ainda mais o estresse da família. Faz-se necessário, neste momento, uma equipe capacitada para lidar com esta situação, e, principalmente um enfermeiro capacitado para acolher, orientar e educar em saúde esta família. O principal objetivo do estudo foi caracterizar a assistência de enfermagem à criança com estomia no trato digestório. Trata-se de um estudo transversal, descritivo e exploratório de abordagem qualitativa. A pesquisa foi realizada em dois hospitais da Secretaria do Estado de Saúde do Distrito Federal, onde há a especialidade de cirurgia pediátrica, responsável por operar as crianças de 0 a 12 anos para a confecção de um estoma no trato digestório nos anos de 2011 e 2012. A coleta de dados foi realizada em prontuário e também por meio de entrevista semiestruturada realizada com pais e/ou responsáveis e enfermeiros, após a aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa da Secretaria do Estado de Saúde do Distrito Federal - FEPECS. A análise dos dados foi realizada utilizando a análise de conteúdo na modalidade temática de Bardin. Foram entrevistados 20 pais e/ou responsáveis e 10 enfermeiros. Após a análise dos dados coletados com os pais surgiram três categorias: conhecimento acerca de um estoma, cuidados com o estoma em casa e acompanhamento ambulatorial. Por meio dos dados coletados com os enfermeiros surgiram duas categorias: cuidados com a criança estomizada e Sistematização da Assistência de Enfermagem. Verificou-se, com esse estudo, que a maioria das crianças estomizadas no trato gastrintestinal no Distrito Federal é gastrostomizada principalmente por distúrbio de deglutição por neuropatia. A criança estomizada necessita de uma atenção diferenciada dos profissionais de saúde, principalmente do enfermeiro, que tem por papel a educação em saúde e a orientação para os cuidados a serem realizados em casa após a alta hospitalar. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / All children are expected by the family with great anxiety and everyone desires it to be a perfect child. When the family faces a child presenting a congenital malformation, stress and fear of the parents are clear. The child with malformation in the gastrointestinal system, most of the times, needs an immediate surgery in order to confect a stoma, raising even more the stress of the family. At this time, it is necessary to have an able team to handle with such situation, and mainly, a trained nurse to welcome, guide and educate this family about health. The main objective of the study was to characterize the nursing assistance to the child with stoma in the digestive system. It is regarding a transversal study, descriptive and exploratory of qualitative approach. The research was performed in two hospital of the Federal District Health State Secretary, where there is the pediatric surgery specialty, accountable for operating 0 to 12 years old children to the confection of a stoma in the digestive system during the years of 2011 and 2012. The data collection was performed in handbooks and through semi-structured interview conducted with parents and/or responsible and nurses, after the approval of the Federal District Health State Secretary Ethics Committee – FEPECS. The data analysis was performed through content analysis on the Bardin thematic modality. 20 parents and/or responsible and 10 nurses were interviewed. After the collected data analysis with the parents, three categories arose: knowledge regarding a stoma, care with stoma at home and ambulatory follow-up; and, through the collected data with the nurses two categories arose: care with the child with a stoma and Systematization of the Assistance of Nursing. It has been verified with this study that most of the children with stoma in the gastrointestinal system in the Federal District is gastrotomized, mainly for swallowing disturbance for neuropathy. The child with a stoma needs a distinguished attention from health professionals, mainly from the nurse, whose role is the health education and guidance towards the care to be performed at home after being discharged. _____________________________________________________________________________ RESUMEN / Todos los niños son esperados por la familia con mucha ansiedad y el deseo de todos es que sea un niño perfecto. Cuando la familia se depara con un niño que presenta malformación congénita, el estrés y el miedo de los padres se quedan claro. El niño con malformación en el aparato gastrointestinal, en la mayoría de las veces, necesita de cirugía inmediata para la confección de un estoma, aumentando aún más el estrés de la familia. Es necesario en ese momento un equipo entrenado para encargarse de la situación, y, principalmente un enfermero entrenado para acoger, orientar y educar en salud esa familia. El principal objetivo del estudio fue caracterizar la asistencia de enfermería al niño con estoma en el aparato digestivo. Es un estudio transversal, descriptivo y exploratorio de abordaje cualitativo. La investigación fue realizada en dos hospitales de la Secretaria del Estado de Salud del Districto Federal, donde hay la especialidad de cirugía pediátrica, responsable por operar los niños desde 0 hasta 12 años para la confección de un estoma en el aparato digestivo en los años de 2011 y 2012. La colecta de datos fue realizada en prontuario y también a través de entrevista semi-estructurada realizada con padres y/o responsables y enfermeros, después de la aprobación del Comité de Ética de la Secretaria del Estado de Salud del Districto Federal – FEPECS. La análisis de los datos fue realizada a través del contenido en la modalidad temática de Bardin. Fueron entrevistados 20 padres y/o responsables y 10 enfermeros. Después de la análisis de los datos colectados con los padres sugieran tres categorías: conocimiento acerca de un estoma, cuidados con el estoma en casa y acompañamiento ambulatorial; y; a través de los datos colectados con los enfermeros surgieron dos categorías: cuidados con el niño con estoma y Sistematización de la Asistencia de Enfermería. Se comprobó con ese estudio que la mayoría de los niños con estoma en el aparato gastrointestinal en el Districto Federal es gastrotomizada, principalmente por disturbio de deglución por neuropatía. El niño con estoma necesita de una atención diferenciada de los profesionales de la salud, principalmente del enfermero, que tiene por papel la educación en salud y la orientación para los cuidados que se realizarán en casa después del alta hospitalaria.

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Apesar da reconhecida eficácia da escleroterapia e da ligadura elástica no controle de hemorragia por varizes, os resultados do tratamento endoscópico em pacientes Child-Pugh classe C continuam pobres. O objetivo deste estudo retrospectivo foi descrever os resultados da injeção do adesivo tecidual N-butil-2-cianoacrilato no controle de episódios agudos de ruptura de varizes esofágicas em pacientes classe C Child-Pugh. PACIENTES E MÉTODOS: Estudo retrospectivo realizado em um único centro. De setembro de 2004 a janeiro de 2010, 63 pacientes cirróticos classe C de Child-Pugh foram admitidos na sala de emergência com episódio de hemorragia por varizes de esôfago. Todos foram tratados por injeção de cianoacrilato. Os pacientes foram divididos em dois grupos: Child-Pugh classe C com pontuações de 10 a 13 (Grupo I) e pacientes com escores de 14 ou 15 (Grupo II). As variáveis estudadas foram falha em controlar o sangramento (até cinco dias) e incapacidade de evitar ressangramento e mortalidade. Os dados foram analisados pelo teste do qui-quadrado. RESULTADOS: Sessenta e três pacientes foram incluídos no estudo, 50 do sexo masculino e 13 do sexo feminino, com idade média de 49 anos, faixa de 22-74. Os pacientes dos dois grupos (Grupo I = 50 pacientes e Grupo II = 13 pacientes) tinham características semelhantes. Quase 75% dos pacientes tiveram sucesso em controlar o sangramento nos primeiros cinco dias. Não houve diferença entre os grupos. Tampouco se evidenciou diferença estatística entre os grupos em relação às taxas de mortalidade até cinco dias (Grupo I = 20%; Grupo II = 38,5%). Trinta e quatro (54%) dos 63 pacientes apresentaram-se livres de sangramento até seis semanas, com diferenças estatisticamente significativas entre os dois grupos (Grupo I = 32 de 50, 64%; Grupo II = dois de 13, 15,4%; p < 0,001). A taxa de mortalidade global foi de 44,4 %, com diferença importante entre os dois grupos (Grupo I = 17 de 50, 34%; Grupo II = 11 de 13, 84,6%, p < 0,001). CONCLUSÃO: Estes resultados suportam a visão de que a injeção de cianoacrilato é uma boa opção no controle do sangramento por varizes esofágicas em pacientes Child-Pugh classe C. Além disso, os resultados sugerem que, para pacientes Child-Pugh classe C com pontuação baixa (10-13), a injeção de cianoacrilato pode ser considerada tratamento de primeira linha / BACKGROUND AND STUDY AIMS: Despite the recognized efficacy of sclerotherapy and elastic band ligation in controlling variceal hemorrhage, the results of endoscopic treatment in Child-Pugh class C patients remain poor. The aim of this retrospective study was to describe the results of the injection of tissue adhesive N-butyl-2-cyanoacrylate in controlling acute episodes of rupturing of esophageal varices in Child-Pugh class C patients. PATIENTS AND METHODS: Retrospective study carried out in a single center. From September 2004 to January 2010, 63 Child-Pugh class C cirrhotic patients were admitted to the emergency room with an acute episode of esophageal variceal bleeding. They were all treated by injection of cyanoacrylate. The patients were divided in two groups: Child-Pugh class C scores from 10 to 13 (Group I) and patients scoring 14 or 15 (Group II). Studied variables were initial failure in control bleeding (five days), failure to prevent re-bleeding and mortality. Data was analyzed by chi-square test. RESULTS: Sixty three patients were included in the study, 50 male and 13 female, mean age 49 years, range 22-74. The patients in the two groups (Group I = 50 patients and Group B = 13 patients) had similar characteristics. Almost 75% of the patients had success in controlling the bleeding in the first five days, with no difference between the groups. Neither there were no statistically differences between the groups related to the mortality rates until five days either (Group I = 20 %; Group II = 38,5 %). Thirty four (54%) of the 63 patients were found free of bleeding until six weeks, with statistically differences between the two groups (Group I = 32 of 50, 64%; Group II = two of 13, 15,4%; p < 0,001). The overall mortality rate was 44,4%, with important difference between the two groups (Group I=seventeen of 50, 34 %; Group II = 11 of 13, 84,6%; p<0,001). CONCLUSION: These findings support the view that cyanoacrylate injection is a good option to control esophageal variceal bleeding in Child-Pugh class C patients. Furthermore, the results suggest that for patients Child-Pugh class C with low score (10-13), cyanoacrylate injection may be considered first line treatment

Microrganismos do gênero Clostridium, particularmente Clostridium petfringens, permanecem como um grave problema na avicultura mundial, do ponta de vista de saúde animal, de saúde pública tanto quanto econômico. O Clostridiurn perfrngens é considerado um habitante comensal do trato intestinal de frangos de corte, no entanto, quando submetidos a alteraçóes na dieta ou mesmo então após a abolição de determinados promotores de crescimento pela Comissão das Comunidades da União Européia, o controle da população microbiana tornou-se reduzido. Uma dieta rica em grãos. trigo, cevada, e arroz aumentam a viscosidade intestinal através do aumento da produção de muco, como conseqüência do aumento de retenção de água no Iúmem intestinal e pela ausência de enzimas capazes de agir sobre os produtos da digestão destes carboidratos. De fato, o aumento do crescimento microbiano comprometem as funçóes da mucosa intestinal. A partir destes fatores, o presente trabalho tem como objetivo quantificar Clostridium perfrngens em duas diferentes dietas com e sem promotor de crescimento, utilizando um método analítico alternativo em dois segmentos do trato intestinal de frangos de corte. Para avaliar este método foi proposto a inclusão de alguns critérios de verificação do protocolo de validação para métodos microbiológicos alternativos, métodos quantitativos, referenciados na NordVal Validation (2005). Para avaliar o efeito das dietas foram analisadas 73 aves quanto a presença de Clostridium periringens pelo método bacteriológico convencional segundo MAPA e BAM adaptados de acordo com a natureza da amostra no laboratório do CDPA-UFRGS pelo seguinte protocolo: l g de inóculo de raspado de ileo e 1 g de conteúdo cecal acondicionados em 9 mL de água peptonada tamponada 0,1%, diluição 1:10, homogenizados e diluídos até a diluição 10º , posteriormente mantidos em banho-maria a 80°C durante 10 minutos seguido de refrigeração em água a 20°C. aliquotas de 1 mL eram inoculadas em ágar TSC e incubados a 37" C por 24 horas. Foram analisados 4 tratamentos: T1- dieta vegetal com promotor de crescimento, T2- dieta vegetal sem promotor de crescimento, T3- dieta vegetal milho e soja mais produtos de origem animal com promotor de crescimento e T4- dieta vegetal milho soja mais produtos de origem animal sem promotor de crescimento. A dieta do tratamento 3 obteve menor quantificação para Clostridium perfrngens nas diferentes idades de coleta. Algumas combinações de amostras intestinais diferiram com maior destaque. As amostras 26, 28, 42 e 48 são consideradas significativas com valores menores que o nível de 10% de significância (<0,10) - para interações triplices utiliza-se um nível de significância maior. Podemos considerar que a partir do 16" dia de idade iniciou a multiplicação de Clostridium perfringens no trato intestinal das aves e a partir do 25º dia de idade ocorreu uma redução mais significativa no ceco e íleo. Os ensaios para verificação do limite de detecção do método usado para ileo e ceco demonstraram um intervalo de detecção entre >40 células e c421 células por mL. Desta forma o método demonstrou um limite de detecçáo por perda de recuperação de células nas matrizes de ceco indicando que os resultados são quantitativamente maiores nas amostras. Possivelmente fatores interferentes tais como, analíticos, redução de ph, ácidos graxos de cadeia curta, exposição ao oxigênio podem ter interferido sob a recuperação das células. / Microorganism of the genus Clostridium particularly Clostridium perfringens, rernain a serious problern to the world's poultry industry, in aspects not only of animal and hurnan health but alço econornical. Clostridium perfringens considered a co mensal inhabitant of the intestinal tract of broiler chickens, however when subjected to diet alterations or even after elimination of certain growth prornoters by the Cornmission of the European Cornmunities, the control of the rnicrobial population has become reduced. A diet rich in grains such as wheat, barley and rice, increase the intestinal viscosity through increasing the production of mucous as a consequence of water retention in the intestinal lumen and the absence of enzyrnes capable of acting upon the products of the digestion of these carbohydrates. In fact, microbial growth affects the intestinal rnucous function. Based on these factors the following study has the objective to analyze the influente of two diets with or without growth prornoters under the evaluation of a new method for the isolation and quantification of Clostridium perfringens in two segrnents of the gastrointestinal tract of broiler chickens. To evaluate this method there were proposed the inclusion of some verification criteria for the validation protocol in alternative rnicrobiological methods, quantitative rnethods referred to in NordVal Validation (2005). To evaluate the effect of the diets, 73 birds were analyzed as to the presence of Clostridium perfrngens using the conventional bacteriological method according to MAPA and BAM adapted to the type of sample in the CDPAIUFRGS laboratory using the following protocol: l g of scraped inoculurn of the ileurn and 1 g of cecurn content suspended in 9 rnL of peptonated and parnptonated water at 0,1%, dilution 1:10, homogenized and diluted to 10". later maintained in a hot water bath of 80°C during 10 rninutes followed by refrigeration in water at 20°C, samples of 1 mL were suspended in agar TSC and incubated at 37" C for 24 hours. Four different treatments were analyzed: TI- vegetable diet with a growth promoter, T2- vegetable diet without a growth promoter, T3- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products and a growth promoter and T4- vegetable diet of corn and soy beans with animal originated products without a growth promoter. The diet of treatment 3 obtained the lowest quantification for Clostridium perfrngens at different collection times. Some combinations of ileum samples had outstanding differences. Samples 26,28, 42 and 48 are considered significant with values lower than the 10% level of significance (>0,10) -for the triple interactions a greater level of significance is utilized. We may consider that from the 16th day of development the multiplication of Clostridium perfringens began, in the gastrointestinal tract of the chickens and from the 25th day of development there occurred a more significant reduction in the ileum and cecum. The practices to verify the limit of detection of the method used for the ileum and cecum demonstrated an interval of detection between >40 cells and c421 cells per mL. As such, the method showed a limit of detection per loss of cell recuperation in the cecum matrix indicating results that are quantitatively greater in the samples. Possibly, interfering factors such as analyiical, reduction of ph, short-chain fatty acids, exposure to oxygen could have interfered with the recuperation of cells.

Orientador: Maria Aparecida Mesquita / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:20:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lorena_SoniaLeticiaSilva_D.pdf: 25510314 bytes, checksum: b90e7068a4c7191c3dbdc76ea4624958 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: os objetivos deste estudo foram investigar, em um grupo de pacientes com dispepsia funcional do tipo dismotilidade, o esvaziamento e a distribuição intragástrica de uma dieta sólida, o trânsito intestinal pela determinação do tempo de trânsito orocecal, e a função autonômica simpática e parassimpática, avaliando ainda a influência do gênero nestes parâmetros. Além disso, foi investigada uma possível correlação entre as anormalidades motoras encontradas nestes pacientes com a presença de alterações da função do sistema nervoso autonômico, com os distúrbios do humor, e com a infecção pela bactéria Helicobacter pylori. Foram estudados vinte e três pacientes com dispepsia funcional (17 do sexo feminino) que tinham com sintoma predominante a plenitude gástrica pós-prandial. O estudo do esvaziamento gástrico e da distribuição intragástrica da dieta sólida padronizada foi realizado pela cintilografia, e o estudo do tempo de trânsito orocecal foi realizado pelo teste do 'H IND. 2¿ no ar expirado, após ingestão de lactulose. A função autonômica foi avaliada através de testes de reflexos cardiovasculares padronizados e da análise da variabilidade da freqüência cardíaca em 24 horas. A pesquisa da infecção da mucosa gástrica pelo Helicobacter pylori foi realizada através do exame histológico, do teste da uréase e do teste respiratório com uréia marcada com 'C ANTPOT. 14¿... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The aims of this study were to investigate the gastric emptying and intragastric distribution of a solid meal, the orocecal transit time, and the function of the autonomic nervous system in patients with dysmotility like functional dyspepsia, and the influence of gender on these parameters. In addition, a possible association between the motor abnormalities observed in these patients with the presence of autonomic dysfunction, humor alterations and H. pylori infection was also assessed. Twenty-three patients with functional dyspepsia (female sex: 17) all complaining of epigastric fullness were studied. Total and compartmental gastric emptynig of a solid meal were assessed by gastric emptying scintigraphy. Orocecal transit time was measured by the lactulose hydrogen breath test. The sympathetic and parasympathetic autonomic function was assessed by analysis of 24-hr heart rate variability and a baterry of standardized cardiovascular reflex tests. The presence of H. pylori in dyspeptic patients was assessed by histological examination, the urease test, and the C urea breath test. The presence of anxiety and depression was assessed by the Hospital Anxiety and Depression (HAD) scale. Delayed gastric emptying was related to female sex, while the abnormalities of intragastric meal distribution were observed in both men and women with functional dyspepsia. There was no evidence of gender influence in both orocecal transit time and autonomic function. Seventeen (73%) patients had anxiety evaluated by the HAD scale. Anxiety was significantly correlated to greater meal retention in the gastric compartment in dyspeptic patients (p=0.04). In conclusion, our results showed that delayed gastric emptying occurs only in a subgroup of functional dyspepsia patients, even among those characterized by the predominant sympton of epigastric fullness, indicating that other factors, such as the abnormalities of intragastric meal distribution, play an important role in the production of dysmotility symptoms. Our study showed that prolonged gastric emptying in patients with functional dyspepsia is related to the female sex, while the abnormalities of the meal intragastric distribution appear to occur in dyspepetic males and females. Anxiety is frequent in functional dyspepsia and seems to be related to abnormal antral retention of food in these patients. Despite our findings of impaired efferent vagal function in a subgroup of dyspeptic patients, the analysis of our data did not reach statistical significance to confirm the hypothesis that the autonomic dysfunction is the mediating factor between anxiety and the observed gastric motor abnormalities in these patients / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica