Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-02-09T03:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 336845.pdf: 2500814 bytes, checksum: bdc73a1fa1628408797b008bd069564e (MD5) Previous issue date: 2015 / A manutenção das concentrações homeostáticas de glicose no sangue é essencial para o bem-estar de todo o organismo. Após efetiva absorção intestinal de glicose, as células ß pancreáticas secretam insulina em resposta às concentrações glicêmicas elevadas para o controle da sua captação, utilização e armazenamento dos nutrientes celulares. Defeitos na ação e/ou na secreção de insulina podem levar à hiperglicemia, característica da diabetes melito. A diabetes melito é uma patologia complexa e multifatorial de elevada morbidade e mortalidade e, por esse motivo, é considerada uma epidemia, caracterizando um problema de saúde pública mundial. Muitas plantas são conhecidas na medicina popular de diferentes culturas pelas propriedades hipoglicemiantes e tem um uso crescente no tratamento da diabetes. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo caracterizar o efeito de alguns compostos naturais selecionados na absorção intestinal de glicose, assim como caracterizar o efeito e as vias de sinalização da teobromina e do ácido cafeico na homeostasia da glicose. Tanto a teobromina quanto o ácido cafeico foram avaliados quanto às atividades antihiperglicêmica e/ou hipoglicemiante na curva de tolerância à glicose, o conteúdo de glicogênio hepático e muscular, a inibição das enzimas a-glicosidases e a propriedade anti-glicação. Além disso, foram avaliados a atividade anti lipidêmica e o mecanismo de ação da teobromina na captação de glicose em músculo sóleo, assim como o efeito em ratos resistentes à insulina e o mecanismo de ação do ácido cafeico na captação de cálcio em ilhotas pancreáticas isoladas. Para tanto, foram utilizados ratos Wistar machos entre 50-55 dias de idade. Para os estudos in situ, o intestino foi exposto e dividido em 4 segmentos, nos quais foram adicionados solução de glicose, florizina, inibidor do transportador de glicose dependente de sódio (SGLT1), e/ou o composto a ser testado e, após 30 min, a concentração de glicose foi medida em cada segmento. Para a realização da curva de tolerância à glicose as coletas de sangue, para determinação da glicose e insulina sérica, foram realizadas nos tempos zero, 15, 30, 60, 120 e 180 minutos após uma sobrecarga de glicose de 4mg/kg. Nos ensaios para a determinação do conteúdo de glicogênio os tecidos foram retirados dos animais 3 h após os tratamentos. As atividades das dissacaridases intestinais e a propriedade anti-glicação foram realizadas in vitro. A captação de 14C-glicose foi estudada após a incubação do músculo sóleo com a teobromina, na presença ou ausência de inibidores. A avaliação do efeito da teobromina em ratos resistentes à insulina foi realizada in vivo, em um tratamento de 5 dias. As ilhotas pancreáticas foram isoladas e incubadas com 45Ca2+ e ácido cafeico, na presença ou não de diferentes inibidores e ativadores de canais e vias de sinalização intracelular. Entre as substâncias testadas, miricitrina, quercetina, catequina, naringenina, ácido cafeico, rutina e fukugetina reduziram significativamente a captação de glicose via o transportador SGLT1, atividade avaliada na presença de florizina. Além disso, tanto a teobromina, quanto o ácido cafeico reduziram significativamente a glicemia de ratos normais em estado hiperglicêmico. Adicionalmente, observou-se um aumento no conteúdo de glicogênio no músculo sóleo e fígado após o tratamento com teobromina. O ácido cafeico reduziu a atividade da maltase e sacarase e, assim como a teobromina, preveniu a glicação. A teobromina estimulou a captação de glicose no músculo sóleo através de uma via de sinalização semelhante à da insulina, principalmente, estimulando a translocação e síntese proteica do GLUT4. O ácido cafeico estimulou a captação de cálcio em ilhotas pancreáticas isoladas, atuando como um potencial agente secretagogo de insulina. Desta forma, apoiado nos resultados obtidos neste trabalho, propõe-se que alguns compostos naturais como a miricitrina, quercetina, catequina, naringenina, rutina e fukugetina, presentes em muitas plantas, regulem a absorção de glicose, atuando em um alvo intestinal, o SGLT1. Além disso, a teobromina e o ácido cafeico, aqui estudados, podem regular a homeostasia da glicose. Os mecanismos pelo qual a teobromina atua envolvem a utilização de glicose pelos tecidos periféricos, assim como melhora no estado de resistência à insulina e a inibição da glicação de proteínas. Enquanto que os mecanismos do ácido cafeico parecem envolver a inibição da absorção intestinal da glicose, o estímulo da secreção de insulina e a inibição da glicação. Estes resultados sugerem que estes dois compostos podem ser responsáveis por muitos dos múltiplos mecanismos de ação de Ilex paraguariensis (IP) para regular a homeostasia da glicose e contribuir para a prevenção das complicações da diabetes.<br> / Abstract : Effect and signaling pathways of compounds present in the Ilex paraguariensis St. Hill. involved in glucose homeostasisThe maintenance of the homeostatic blood glucose concentrations is crucial to the well-being of the whole organism. After Effective intestinal absorption of glucose, the pancreatic ß cells secrete insulin in response to elevated glucose concentrations for controlling the uptake, use and storage of cellular nutrients. Defects in action and/or secretion of insulin may lead to hyperglycemia, which characterizes diabetes mellitus. Diabetes mellitus is a complex and multifactorial disease with high morbidity and mortality, therefore is considered epidemic causing a public health problem worldwide. Many plants are known in folk medicine of different cultures for their hypoglycemic properties and show an increasing use in the treatment of diabetes. Therefore, the aim of this study was to characterize the effect of some selected natural compounds in the intestinal absorption of glucose, as well as to characterize the effect and signaling pathways of theobromine and caffeic acid in glucose homeostasis. Theobromine and caffeic acid were evaluated for antihyperglycemic and /or hypoglycemic activities in the curve of glucose tolerance, the hepatic glycogen content and muscle, inhibition of the enzymes a-glucosidases and anti-glycation property. In addition, was studied the antilipidemic activity and the mechanism of action of theobromine in glucose uptake in soleus muscle, as well as the effect on insulin resistant rats and the mechanism of action of caffeic acid on calcium uptake in rat isolated pancreatic islets. Wistar male rats with 50-55 days of age were used. For the in situ studies, the intestine was exposed and divided into four segments, which each segment was uploaded with glucose solution, phlorizin and/or compounds and, after 30 min, the glucose concentration was measured into the respective intestinal segment. To glycemia determination, the blood samples were collected at zero, 15, 30, 60, 120 and 180 min in glucose tolerance curve. Tissues were removed from animals 3 h after oral administration of treatments to determine glycogen content. The intestinal disaccharidases activities and anti-glycation property were performed in vitro. The glucose uptake was studied after incubation of the soleus muscle with theobromine, in the presence or not of different inhibitors and of 14C-glucose. The evaluation of the effect of theobromine in insulin resistant rats was performed in vivo on a treatment of 5 days. The pancreatic islets were isolated and incubated with 45Ca2+ and caffeic acid in the presence or absence of various inhibitors or activators. Among the substances assayed, myricitrin, quercetin, catechin, naringenin, caffeic acid, rutin and fukugetin significantly reduced the glucose uptake by affecting the SGLT1 transporter activity measured in the presence of phlorizin. Furthermore, both theobromine, as caffeic acid significantly reduced plasma glucose in normal rats hyperglycemic state and caffeic acid stimulated insulin secretion. Additionally, it was observed an increase on glycogen content in muscle and liver after treatment with theobromine. The caffeic acid reduced the activity of maltase and sucrase and, like theobromine, prevented glycation. Theobromine stimulated glucose uptake in soleus muscle via signaling pathway similar to that of insulin, mainly by stimulating protein synthesis and translocation of GLUT4. The caffeic acid stimulated calcium uptake in isolated pancreatic islets, as a potential insulin secretagogue agent. Thus, supported by the results of this study, it is proposed that some natural compounds like myricitrin, quercetin, catechin, naringenin, caffeic acid, rutin and fukugetin are able to regulate glucose absorption by acting in an intestinal target, SGLT1. Moreover, theobromine and caffeic acid are able to regulate glucose homeostasis. The mechanisms by which theobromine acts involving the use of glucose by peripheral tissues, and improvement in insulin resistant state and the inhibition of protein glycation. While the mechanisms of caffeic acid involve the inhibition of intestinal absorption of glucose, stimulation of insulin secretion and inhibition of glycation. These results suggest that these two compounds may be responsible for many of the multiple Ilex paraguariensis (IP) mechanisms of action to regulate glucose homeostasis and contribute to the prevention of complications of diabetes.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos. / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:35:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 224317.pdf: 734501 bytes, checksum: d726c56d487f25c927fdf04011fbe267 (MD5) / Os polihidroxialcanoatos (PHA's) são substâncias naturais acumulados no interior das células como forma de reserva de carbono e energia em condições particulares de crescimento. Há um significativo interesse no estudo dos PHA's devido a seu valor comercial como termoplástico biodegradável sendo uma potencial alternativa para substituição da utilização dos plásticos derivados do petróleo. O poli[3-hidroxibutirato] é o PHA mais bem caracterizado e diversas bactérias são capazes de sintetizá-lo, porém, este biopolímero não apresenta propriedades industriais interessantes (duro e quebradiço). A incorporação de monômeros de valerato e produção do copolímero poli[3-hidroxibutirato-co-3-hidroxivalerato] (P[3HB-co-3HV]), resulta na formação de um polímero com características industriais mais interessantes. O precursor das unidades de valerato mais empregado é o ácido propiônico e este é adicionado ao meio de cultivo a fim de se produzir o copolímero. Entretanto, grande parte do ácido propiônico não é incorporado na forma de valerato, visto que este é utilizado em outras vias metabólicas. Com a finalidade de aumentar a conversão de ácido propiônico em valerato, foi estudado o efeito da adição de suplementos (azeite de oliva e ácido acético) e de um inibidor enzimático (ácido itacônico) na incorporação de valerato no copolímero P[3HB-co-3HV]. Foi utilizada para produção de P[3HB-co-3HV] a bactéria Escherichia coli JM101, abrigando os genes de biossíntese de PHA's de Ralstonia eutropha (plasmídio pBHR68). Os cultivos foram realizados em agitador orbital por 48 horas a temperatura de 37ºC e agitação de 150 rpm em meio Luria Bertani contendo 20 g. L-1 de glicose, 100mg.L-1 de ampicilina com ou sem a adição de ácido propiônico, suplementos ou inibidor. Os resultados mostram que a E.coli JM101 recombinante, contendo os genes de biossíntese de PHA's de R. eutropha acumulou 61% de PHB. Na presença de ácido propiônico, foi acumulado 8,4% de PHA, com 20% de valerato incorporado no copolímero P[3HB-co-3HV]. Quando azeite de oliva foi utilizado como suplemento, a biomassa celular e o acúmulo de polímero aumentaram em 49% e 82% respectivamente, porém a porcentagem de valerato incorporada no polímero diminuiu. A adição de ácido acético no meio de cultivo diminuiu drasticamente a biomassa e o acúmulo de polímero não pode ser detectado. Nos cultivos onde se empregou o ácido itacônico como inibidor químico da enzima propionil-CoA carboxilase (PCC), principal enzima atuante no catabolismo do ácido propiônico, o crescimento bacteriano diminuiu e não se teve acúmulo de PHA. Os resultados sugerem que os ácidos: propiônico, acético e itacônico, são tóxicos para E. coli JM101. No entanto, o ácido propiônico ainda continua sendo o principal precursor das unidades de valerato no copolímero.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2013-07-16T04:08:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Esta dissertação tem por objetivo o desenvolvimento de um modelo matemático dinâmico capaz de representar uma situação fisiológica humana normal, que possa ser usado no estudo de situações fisiológicas especiais. Este modelo matemático considera o transporte da oxihemoglobina, do oxigênio e da glicose como metabólitos do processo de oxigenação e o fornecimento de energia para o tecido em resposta as alterações do fluxo sanguíneo cerebral e suas concentrações de alimentação. Os capilares são distribuídos em uma estrutura de forma homogênea, onde tem-se um capilar cilíndrico central rodeado por uma região de tecido cilíndrico. Para o capilar é considerado um perfil de difusão axial e radial com convecção para os metabólitos e a reação que ocorre entre a hemoglobina e o oxigênio. Para o tecido é considerado um perfil de difusão axial e radial sem convecção com reação metabólica de consumo de oxigênio e de glicose. A cinética de reação entre a oxihemoglobina e o oxigênio no capilar foi extraída do trabalho de Andreazza (2003) e a cinética de reação entre o oxigênio e a glicose no tecido é calculada através de um balanço estequiométrico do oxigênio com a glicose e do dióxido de carbono com a água. O modelo foi discretizado pelo método das linhas, aplicando-se a discretização espacial pelo método das diferenças finitas. Os termos convectivos são discretizados por diferenças finitas explícitas do tipo regressiva, centrais ou simétricas. A validação do modelo matemático é dada pela comparação com dados da literatura que mostram adequado o comportamento dinâmico dos perfis dos metabólitos. / This work aims to develop a dynamic mathematical model to represent a normal human physiological circumstances, that can be used in the study of special physiological situations. This mathematical model considers the transport of oxyhemoglobin, oxygen and glucose metabolites such as the process of oxygen and the energy supply to the tissue in response to modifications in cerebral blood flow and the feed concentrations. The capillaries are distributed in a homogeneous structure, that is, they have a cylindrical central capillary surrounded by a cylindrical region of tissue. For the capillary is considered an axial and radial diffusion profile with convection for the metabolites and the reaction that occurs between hemoglobin and oxygen. For the tissue is considered an axial and radial diffusion profile without convection reaction with metabolic consumption of oxygen and glucose. The kinetics of the reaction between oxyhemoglobin and oxygen in the capillary was obtained from the work of Andreazza (2003) and the kinetics of reaction between oxygen and glucose in tissue is calculated using a stoichiometric balance of oxygen and glucose and carbon dioxide with water. The model was discretized by the method of lines, applying the spatial discretization by the finite difference method. The convective terms are discretized by finite differences explicit type backward, central or symmetrical. The validation of the mathematical model is done by comparison with literature data that show the proper behavior of the dynamic profiles of metabolites.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:13:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339054.pdf: 1298700 bytes, checksum: 58ce48b4d8a780863e42ff7b9368aadc (MD5) Previous issue date: 2015 / Glioblastomas multiformes (GBM) são tumores sólidos de origem glial classificados como nível IV pela OMS, considerados altamente invasivos e possuem alta taxa proliferativa. Células de glioma possuem metabolismo energético diferencial que consiste na tendência em utilizar a glicose para formação de ATP via glicólise anaeróbica, mesmo em presença de oxigênio, característica conhecida como efeito Warburg. A preferência pela quebra da glicose como fonte energética se caracteriza como uma adaptação metabólica que pode beneficiar o crescimento e expansão do tumor. As células de gliomas podem liberar glutamato em altas concentrações. A diminuição da oferta de glicose pode sensibilizar as células de gliomas, pois muitos tumores não possuem mecanismos protetores eficientes para metabolização de substratos alternativos. A Carmustina (BCNU) e a Temozolomida (TMZ) fazem parte de uma classe de fármacos citotóxicos conhecidos como alquilantes de ADN, e são substâncias utilizadas em quimioterapia para tumores cerebrais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do tratamento de restrição de glicose conjugado ao uso de quimioterápicos na indução de morte celular, formação de EROs, liberação de glutamato, migração e morfologia celular em células de linhagem primária de GBM in vitro, derivadas de ressecção cirúrgica e nomeadas GBM1 pelo grupo de pesquisa. O tratamento de restrição teve duração de 24 horas, e após esse período foram aplicados os quimioterápicos TMZ e BCNU na concentração de 400 µM, por mais 24 horas. Os dados obtidos mostraram que a privação de glicose diminui a viabilidade destas células e, quando em conjunto com os quimioterápicos, foi possível notar uma sensibilização das células à ação dos fármacos. A formação de EROs no tratamento de 48 horas acompanha a diminuição da viabilidade e, nas primeiras horas (2, 4 e 6 horas),foi verificada diminuição nas concentrações de espécies reativas nos tratamentos de restrição em conjunto com BCNU. As taxas de liberação de glutamato não apresentaram modificações importantes. O tratamento diminuiu a migração celular e mostrou modificações na morfologia celular. A privação de glicose é uma possibilidade de tratamento alternativo não tóxico, e mostrou ter ação positiva contra as células GBM1.<br> / Abstract : Glioblastoma multiforme (GBM) are solid tumors of glial origin classified as level IV by WHO, considered highly invasive and with high proliferative rate. Glioma cells exhibit differential energy metabolism, with tendency to use glucose for ATP production through glycolysis, even in the presence of oxygen, a characteristic known as the Warburg Effect. This metabolic adaptation benefits the tumor growth and expansion. Glioma cells also have the characteristic of releasing high concentrations of glutamate. Decreased of glucose energy can sensitize gliomas cells because many tumors have no effective protective mechanisms for metabolizing alternative substrates. Carmustine (BCNU) and Temozolomide (TMZ) are cytotoxic drugs known as DNA alkylating agents, usually used in chemotherapy for brain tumors. The objective of this study was to evaluate the treatment effect of glucose restriction combined to chemotherapy in the induction of cell death, ROS formation, glutamate release, migration and cell morphology in primary cell line GBM vitro derived resection surgical and named GBM1 by the research group. Restriction treatment lasted for 24 hours and, after this period, TMZ and BCNU were applied at a concentration of 400 µM, for 24 hours. Data showed that glucose deprivation decreases cell viability and, with chemotherapy, was possible to notice a sensitizing cells to the drugs. ROS formation after 48 hour treatment follow viability?s decline. After early hours (2, 4 and 6 hours), was observed decrease in concentrations of reactive species in restriction combination with BCNU treatment. Glutamate release rates showed no significant changes. Treatment decreased cell migration and showed cells morphology changes. Glucose deprivation is a possibility of non-toxic and alternative treatment, capable to increase cellular sensitivity to the chemotherapy and shown to have positive action against GBM1 cells.

A diabetes melito é caracterizada por um grupo de distúrbios metabólicos resultantes de defeitos na secreção de insulina, na ação da insulina ou em ambos. A hiperglicemia crônica da diabetes está associada a danos a longo prazo a diversos órgãos, principalmente olhos, rins, nervos, coração e vasos sangüíneos, e estas complicações possuem uma relação direta com um desequilíbrio redox nestes órgãos. Diferentes substâncias tem sido experimentadas como estratégias para a prevenção das complicações da diabetes, especialmente substâncias com potencial antioxidante, como a dehidroepiandrosterona (DHEA). A DHEA é um hormônio esteróide endógeno envolvido em diversas funções biológicas, mas seus efeitos sobre o metabolismo muscular e sobre a função renal na diabetes ainda não estão completamente claros. Este estudo teve como objetivo estudar os efeitos do tratamento crônico com DHEA, em ratos controles e diabéticos, sobre alguns parâmetros metabólicos, funcionais e do estresse oxidativo no músculo esquelético e nos rins, por meio da análise do metabolismo da glicose, da expressão da Akt e do GLUT4, do peróxido de hidrogênio e dos níveis de tiorredoxina (Trx) no músculo esquelético; bem como a análise da função renal, do metabolismo da glicose, da expressão do Fator Transformador de Crescimento β1 (TGF-β1) urinário e dos níveis de glutationa no tecido renal. Ratos diabéticos foram tratados com injeções subcutâneas de DHEA na dose de 10 mg/kg diluída em óleo, uma vez por semana, por cinco semanas. Os resultados mostraram que houve uma diminuição na glicose plasmática, provavelmente ligada a um aumento na oxidação da glicose no tecido muscular, ou ao aumento da captação por outros tecidos. Apesar do aumento na expressão do GLUT4 no músculo dos ratos tratados com DHEA, somente os animais controles apresentaram maior captação de glicose, mostrando que o GLUT4 pode estar presente em maior quantidade, mas não estar ativo nos ratos diabéticos tratados com DHEA. Os baixos níveis da Akt e da Trx nos diabéticos foram reduzidos ainda mais com o tratamento com DHEA, indicando um ambiente favorável ao desequilíbrio redox no músculo. Os ratos diabéticos tratados com DHEA apresentaram níveis de creatinina plasmática mais elevados e o clearance de creatinina foi menor. A captação e a oxidação de glicose foram menores na medula renal dos ratos diabéticos tratados com DHEA. O TGF-β1 urinário e os níveis de glutationa total foram maiores nos ratos diabéticos tratados com DHEA. O tratamento com DHEA parece ser prejudicial para o tecido renal, já que reduziu a taxa de filtração glomerular, diminuiu o metabolismo na medula renal e aumentou a expressão do TGF-β1 urinário, e a resposta compensatória do sistema da glutationa, provavelmente através de um mecanismo envolvendo um efeito pró-oxidante ou prófibrótico deste esteróide ou de algum de seus derivados. Embora tenha ocorrido uma redução na glicemia, e este poderia ser um efeito favorável, foram observados diversos efeitos prejudiciais, como a redução na Akt e na Trx no músculo, a redução no metabolismo e na função renal, o aumento no TGF-β1 urinário e a geração de um ambiente mais favorável ao desequilíbrio redox nestes tecidos. Desta forma, mais estudos são necessários para se obter uma melhor compreensão dos efeitos deste hormônio na diabetes. / Diabetes mellitus is characterized by a group of metabolic disorders resulting from defects in insulin secretion, insulin action or both. The chronic hyperglycemia of diabetes is associated with long-term damage to various organs, especially eyes, kidneys, nerves, heart and blood vessels, and these complications have a direct relationship with a redox imbalance in these organs. Different substances have been tried as a strategy for preventing complications of diabetes, especially substances with antioxidant potential, such as dehydroepiandrosterone (DHEA). DHEA is an endogenous steroid hormone involved in a number of biological functions, but its effects on muscle metabolism and on renal function in diabetes are not yet fully understood. The aim of this study is to assess the effect of chronic DHEA treatment in diabetic and control rats on some metabolic and funcional parameters and on oxidative stress in skeletal muscle and kidneys, through the analysis of glucose metabolism, the expression of Akt and GLUT4, hydrogen peroxide and the levels of thioredoxin (Trx) in skeletal muscle, as well as analysis of renal function, glucose metabolism, the expression of urinary Transforming Growth Factor β1 (TGF-β1) and the levels of total glutathione in renal tissue. Diabetic rats were treated with subcutaneous injections of a 10 mg/kg dose of DHEA diluted in oil, once a week for five weeks. The results showed a decrease in plasma glucose, probably linked to an increase in glucose oxidation in muscle tissue, or increased uptake by other tissues. Despite the increased expression of GLUT4 in the muscle of DHEA treated rats, only the control animals showed greater glucose uptake, showing that GLUT4 may be present in higher quantity, but not be active in diabetic rats treated with DHEA. Low levels of Akt and Trx in diabetics were reduced further by treatment with DHEA, indicating a favorable environment to redox imbalance in the muscle. Diabetic rats treated with DHEA had significantly higher plasma creatinine and creatinine clearance was lower. The glucose uptake and oxidation were lower in the renal medulla of diabetic rats treated with DHEA. Urinary TGF-β1 and levels of total glutathione were higher in diabetic rats treated with DHEA. Treatment with DHEA appears to be detrimental to the renal tissue, since it reduced the glomerular filtration rate, decreased metabolism in the renal medulla and increased the expression of urinary TGF-β1 and the compensatory response of the glutathione system, probably through a mechanism involving a pro-oxidant or a pro-fibrotic effect of this steroid or any of its derivatives. Although a reduction in blood glucose occurs, and this could be a favorable effect, were observed several harmful effects such as reduction in Akt and Trx in the muscle, the reduction in metabolism and kidney function, increase in urinary TGF-β1 and generating an environment more conducive to redox imbalance in these tissues. Thus, further studies are needed to gain a better understanding of the effects of this hormone in diabetes.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-09Bitstream added on 2014-08-13T17:59:44Z : No. of bitstreams: 1 000775511_20141010.pdf: 204024 bytes, checksum: 118fb2ed709928e63e53309bacbfb9c0 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da densidade nutricional e da suplementação de cromo nas concentrações séricas de glicose, insulina, ácidos graxos não esterificados (AGNE) e IGF-1, em vacas 3/4 Holandês/Gir lactantes. Foram utilizadas 18 vacas (76 ± 2 dias pós-parto) alojadas em dois piquetes com disponibilidade ad libitum de silagem de milho e água. As vacas foram estratificadas de acordo com ordem de parição (primíparas e multíparas) e produção de leite, distribuídas aleatoriamente em três tratamentos no d0 do experimento: 1) CON: dieta visando atender 100% dos requerimentos de mantença e lactação, sem suplementação de cromo (n=5); 2) BPSC: dieta visando atender 100% do requerimento de lactação e 160% do requerimento de mantença, sem suplementação de cromo (n=6) e 3) BPCC: dieta visando atender 100% do requerimento de lactação e 160% do requerimento de mantença, com suplementação de cromo (n=6; 2,5g de KemTRACETM Propionato de Cromo 0,4% - Kemin Industries, Inc, misturado em 97,5g de fubá de milho/animal/dia). Amostras de sangue foram colhidas semanalmente para determinação das concentrações séricas de glicose, insulina e AGNE durante 210 dias. Foi realizado TTG a cada 42 dias com infusão de 0,5 gramas de glicose/kg de PC com -15, 0, 10, 20, 30 45, 60, 90 e 120 minutos referente ao inicio da infusão, e aspiração folicular para determinação da qualidade oocitária e produção de embriões. Não foi detectada alteração (P = 0,74) no peso corporal (PC), vacas do grupo BPSC e BPCC tiveram maior (P = 0,02) ganho de ECC quando comparados ao grupo CON. Não houve diferença (P = 0,92) na produção de leite entre os grupos. Animais do grupo CON apresentaram maior (P = 0,04) ... / The objective of this study was to evaluate the influence of energy density of the diet and chromium supplementation on serum concentrations of glucose, insulin, non-esterified fatty acids (NEFA) and IGF-1 in lactating dairy cows. Eighteen crossbred Holstein x Gir (DIM 76 ± 2) cows were allocated in two drylot pens and receiving free-choice of corn silage and water, they were separately by parturition (primiparous x multiparous) and milk yield, and randomly assigned to one of three treatments on d0 of the experiment: 1) CON: diet formulated to reach 100% of maintenance and lactation requirement, without chromium supplementation (n=5); 2) BPSC: diet formulated to reach 100% and 160% of the requirements for lactation and maintenance, respectively, without chromium supplementation (n=6); 3) BPCC: diet formulated to meet 100% and 160% of the requirements for lactation and maintenance requirements, respectively, with chromium supplementation (n=6; 2,5g of KemTRACETM Chromium Propionate 0,4% - Kemin Industries, Inc. - added in 97,5g of corn meal/animal/day). Blood samples were collected weekly for serum glucose, insulin and NEFA concentrations during the experiment (d0 to d210). Glucose Tolerance Tests (GTT) were performed each 42 days (d0, d42, d84, d126, d168, d210). During each GTT cows were infused (i.v.) with 0.5g of glucose/kg of body weight. Blood samples were collected at -15, 0, 10, 20, 30, 45, 60, 90 and 120 min relative to infusion. Ovarian pick-up was performed for oocyte quality and embryo production evaluation. There was no difference (P=0.74) in body weight during the study. Cows from the BPSC and BPCC groups had greater (P=0.02) Body Condition Score gain when compared to cows from the CON group. There was no...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-06Bitstream added on 2014-11-10T11:57:27Z : No. of bitstreams: 1 000790893.pdf: 3580842 bytes, checksum: 8e21b24ec71bb11cfd19592e7dce78a6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O intuito desta pesquisa foi caracterizar eletrodos quimicamente modificados (EQM) pela formação de monocamadas auto-organizadas (SAM) com os tióis (11- mercaptoundecil)-N’,N’’,N’’’-trimetilamônio e 6-(ferrocenil)hexanotiol sobre a superfície do eletrodo de ouro. E, ainda, verificar seu comportamento de transferência eletrônica com solução de hexacianoferrato(II) e (III) e sua aplicação como biossensor para glicose. As monocamadas auto-organizadas vêm sendo comumente usadas devido ao seu comportamento homogêneo, o que confere ao eletrodo maior sensibilidade e reprodutibilidade, tornando-se possível desenvolver eletrodos para vários fins e aplicações. Neste trabalho, foram estudadas as monocamadas formadas a partir dos tióis (11-mercaptoundecil)-N’,N’’,N’’’- trimetilamônio e 6-(ferrocenil)hexanotiol. A caracterização eletroquímica e morfológica das monocamadas auto-organizadas foi realizada através da voltametria cíclica e microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. Foi notado que as monocamadas mistas na proporção (1:2) apresentaram maior efeito catalítico, uma vez que se obtiveram maiores sinais analíticos, através do incremento das correntes anódicas e catódicas. A viabilidade da molécula de hexacianoferrato (III) foi verificada através da troca iônica destas moléculas eletroativas com as monocamadas auto-organizadas. Para a aplicação dos eletrodos modificados com monocamadas como biossensor para glicose, optou-se pela modificação na proporção (1:2) de (11-mercaptoundecil)-N’,N’’,N’’’-trimetilamônio e 6- (ferrocenil)hexanotiol, respectivamente, assim como a utilização do mediador hexacianoferrato pré-concentrado por troca iônica durante 2 horas, em virtude que, neste tempo ocorreu uma maior concentração de espécies eletroativas sobre a superfície do ouro, tendo como favorecido o processo de transferência eletrônica. A construção do biossensor .. / The purpose of this research was to characterize chemically modified electrodes (CME) by the formation of self-assembled monolayers (SAMs) with thiols (11- mercaptoundecyl)-N’,N’’,N’’’trimethylammonium and 6-(ferrocenyl)hexanethiol on the surface of gold electrode. And also verify their behavior of electron transfer in solution with hexacyanoferrate (II) and (III) and its application as a biosensor for glucose. The self-assembled monolayers have been commonly used due to its homogenous, which gives the electrode higher sensitivity and reproducibility, becoming possible to develop electrodes for various purposes and applications. In this research, it was studied the monolayers formed from the thiols (11-mercaptoundecyl)- N’,N’’,N’’’trimethylammonium and 6-(ferrocenyl)hexanethiol. Electrochemical and morphological characterization of self-assembled monolayers were performed using cyclic voltammetry and scanning electron microscopy, respectively. The electrochemical characterization of the different SAMs under study occurred in a solution of 0.10 mol L-1 hexacyanoferrate(II) and (III) potassium, verifying the electronic transfer mechanisms involved. It was noted that the self assembled monolayers in proportion (1:2) showed higher catalytic effect, since obtained higher analytical signals by increasing the anodic and cathodic currents. The viability of the hexacyanoferrate (III) molecule was verified by ion exchange these electroactive molecules with self-assembled monolayers. For the application of electrodes modified with monolayers as a biosensor for glucose, we opted for the change in the ratio (1:2) of (11-mercaptoundecyl)-N’,N’’,N’’’trimethylammonium and 6- (ferrocenyl)hexanethiol, respectively, as well as the use of pre-concentrated by ion exchange mediator hexacyanoferrate for 2 hours, because that, this time there was a greater concentration of electroactive species on the surface of gold having favore / FAPESP: 12/21703-7

Dissertação (mestrado)-Universidade Federal do Parana

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-09-17Bitstream added on 2014-06-13T20:30:47Z : No. of bitstreams: 1 silva_lp_me_botfmvz.pdf: 1073062 bytes, checksum: eca597baa08356d4ddc32b535181e725 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A mortalidade em cordeiros tem sido considerada um dos principais fatores de prejuízos econômicos e biológicos dentro da ovinocultura mundial. De nada adianta um rigoroso controle sanitário, nutricional e reprodutivo se os índices de mortalidade neonatal não forem aceitáveis. Sabe-se que o escore de Apgar tem sido utilizado de forma muito eficaz, para indicar a condição do neonato no pós-parto imediato em humanos, desde a década de 50 e ainda hoje é amplamente utilizado nas maternidades do mundo todo. A concentração sérica de lactato sérico tem se mostrado um importante indicador sobre o grau de hipóxia tecidual e por isso, um fator prognóstico relevante. Assim, o presente estudo objetivou a avaliação clínica dos neonatos ovinos pelo escore de Apgar modificado, a mensuração das concentrações séricas de lactato e da glicemia, bem como a possível correlação entre os dados obtidos ou mortalidade neonatal. Portanto, realizou-se a avaliação clínica pelo escore de Apgar modificado, o peso corporal, a a glicemia e a concentração sérica de lactato, em 42 neonatos da espécie ovina, mestiços, nascidos de parto eutócico e distócico em sistema de pastejo intensivo, em dois momentos M1 (cinco minutos após o nascimento) e M2 (60 minutos após). Foram observadas correlações positivas entre a frequência cardíaca e a concentração de lactato no momento M2, frequência cardíaca e peso corporal no momento M1, frequência respiratória e a glicemia e entre a frequência respiratória e o lactato, ambos no momento M1. Uma correlação negativa foi notada entre escore de Apgar e glicemia em ambos os momentos. Além disso, notou-se diferença estatística entre os fatores frequência respiratória (P=0,012), peso corpóreo (P=0,0003) e glicemia (P=0,0003) quando comparou-se os cordeiros nascidos de partos uníparos e pluríparos / The mortality rate has had a negative financial and biological impact on the sheep industry worldwide. It is useless to have strict sanitary, nutritional and reproductive control if the mortality rate among newborn animals is still unacceptably high. The Apgar score has been used in maternity hospitals all over the world since the 50’s and it has proved to be extremely efficient once it shows the conditions of newborn babies. The serial concentration of lactate has proved to be an important indicator and it has become a relevant prognostic factor. Therefore, this study aimed at measuring the serial lactate concentrations as well as blood glucose levels by using the modified Apgar score throughout the clinical evaluation of sheep, this study also took into account the relationship between the collected data and newborn mortality. Moreover, the serial concentration of lactate, blood glucose levels and clinical evaluations were analyzed in 42 neonate crossbreed sheep that were born from eutocic and dystocic birth; such animals were being raised under an intensive grazing system and the data was collected in different stages; M1 (five minutes after birth) and M2 (60 minutes after birth). The study found a positive relationship between heart rate and lactate concentration at stage M2, heart rate versus body weight at stage M1, breathing rate and lactate, both at stage M1. There was a negative relationship between the Apgar score and blood glucose levels in both stages ( M1 and M2). Furthermore, contrasting uniparous and multiparous birth, the study found statistic differences between breathing rate (P=0,012), weight (P=0,0003) and blood glucose levels(P=0,0003)

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:33:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP