Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-18Bitstream added on 2014-06-13T21:06:07Z : No. of bitstreams: 1 borges_fa_dr_jabo.pdf: 465595 bytes, checksum: 54f3defcb12b86c4f559cfac83cd1c2f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A presente pesquisa teve como objetivo caracterizar e isolar uma estirpe de campo de Haemonchus contortus resistente à ivermectina, avaliar a ação reversora do verapamil, por meio de testes in vitro (migração de larvas em gel de ágar) e in vivo (redução de OPG e necropsias parasitológicas), e realizar a análise de genes relacionados à glicoproteína-P e canais de cloro ativados por glutamato (GP-P e HcGluCL). A estirpe de H. conctortus isolada apresentou elevada resistência à ivermectina, sendo observada eficácia ínfima de 6,59%. O verapamil isoladamente não apresentou efeito nematodicida, porém, em concentrações crescentes, associado à ivermectina (DL50-4,317μmol) proporcionou aumento de eficácia contra a cepa resistente de H. contortus, alcançando o percentual de 94,3% (verapamil 100 mmol). Os resultados do teste anti-helmíntico controlado, em que foram utilizados 42 ovinos experimentalmente infectados com H. contortus resistente à ivermectina, revelaram que o verapamil apresentou uma atividade de reversão parcial significativa (P<0,05) da resistência. Pela análise genotípica efetuada nas sete amostras desta população de H. contortus, submetidas aos diferentes tratamentos com ivermectina, verapamil ou associação entre estas drogas, verificou-se similaridade em relação à glicoproteína-P e pouca semalhança em relação aos canais de cloro ativados por glutamato. / The present work aimed to identify and isolate a field ivermectin-resistant Haemonchus contortus strain, evaluate the effect of verapamil as a P-GP modulator agent by in vitro (agar gel larval migration assay) and in vivo (FECRT and controlled test), and analyze the genes related to the P-glycoprotein (P-GP) and H. contortus glutamate chloride (HcCluCl) chanel expression. The H. contortus field strain isolated was highly resistant to ivermectin, showing only 6.59% of efficacy. Verapamil alone didn’t show any in vitro anthelmintic action but increasing concentrations of this drug associated to ivermectin (LD50-4.317μmol) resulted in higher efficacy, when compared to ivermectin alone, with 94.3% efficacy in the 100 mmol concentration. The results of the anthelmintic controlled test, in wich it was used 42 sheep experimentally infected with the field ivermectin-resistant H. contortus strain, showed a significant (P<0,05) parcial ivermectin resistance reversion by verapamil. The genomic analysis of the seven samples from this H. contortus resistant population submited to diferent treatment with ivermctin, verapamil and the association between theese two drugs, showed similarity in the genes related to the expression of P-GP and high polimorfism related to HcGluCL.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-15Bitstream added on 2014-06-13T19:23:36Z : No. of bitstreams: 1 buzzulini_c_dr_jabo.pdf: 822369 bytes, checksum: bd1f32667ac4aa03e1ed97621b621a55 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Este trabalho objetivou avaliar o efeito do genótipo e da dieta protéica na resistência e no desempenho de cordeiros experimentalmente infectados por Haemonchus contortus. Foram utilizados 24 cordeiros provenientes do cruzamento das raças Dorper x Santa Inês (DSI) e 24 Santa Inês (SI), isentos de nematódeos gastrintestinais, distribuídos em quatro grupos de seis animais. De acordo com o genótipo, os cordeiros foram subdivididos em dois grupos infectados e dois mantidos como controle, recebendo dieta com menor teor (12%) e maior teor de proteína bruta (20%), respectivamente. Os cordeiros infectados artificialmente receberam um inóculo contendo 1.000 larvas infectantes (L3) de H. contortus por dose, duas vezes por semana, durante todo o experimento. Os cordeiros foram mantidos em baias individuais, com controle diário do alimento fornecido e de sobras. Semanalmente, foram realizadas contagens de ovos de nematódeos por grama de fezes (OPG), hemograma, dosagens bioquímicas, além de pesagens individuais. Ao atingirem 35 kg de peso corporal, os cordeiros foram abatidos e necropsiados, objetivando mensurar a carga parasitária, avaliar as características quantitativas das carcaças e qualitativas da carne. O desempenho (consumo de matéria seca, ganho de peso diário, conversão alimentar e eficiência alimentar) foi superior (P<0,05) para o genótipo DSI, para a dieta com teor mais elevado de proteína e para os cordeiros mantidos sem infecção por H. contortus. O efeito do genótipo, da suplementação protéica e da hemoncose também influenciou as principais variáveis hematológicas e bioquímicas, cujos valores foram menores em cordeiros infectados e mantidos com alimentação menos protéica. Contagens médias superiores (P<0,05) de OPG (520,06) e H. contortus (200,38) foram observadas no genótipo DSI. Observou-se influência do genótipo DSI (P<0,05) nos pesos médios... / This work aimed to evaluate the effect of genotype and dietary protein on the resistance and performance of lambs to experimentally infected by Haemonchus contortus. Twenty-four Dorper x Santa Inês (DSI) crossbreed lambs and 24 pure Santa Inês (SI), without gastrointestinal nematodes, were distributed into four groups of six lambs. Within each genotype, the lambs were subdivided into two infected and two control groups, which received a low protein (12%) or high protein diet (20%), respectively. The experimentally infected lambs received inoculate containing 1,000 infecting larvae (L3) of H. contortus per dose, twice weekly, throughout the entire experimental period. The lambs were maintained in individual stalls, with daily control of feed provided and remaining. Weekly, nematode egg per gram of feces (EPG) counts were performed, together with hemograms, biochemical concentrations and individual weighing. Once they achieved 35 kg, the lambs were slaughtered and necropsied to determine the parasite load and evaluate the quantitative characteristics of the carcass and the qualitative characteristics of the meat. For the DSI genotype, the performance (dry material consumption, daily weight gain, feed conversion and feed efficiency) was greater (P<0.05) for the diet containing higher protein content and for lambs not infected by H. contortus. The effect of genotype, dietary protein content and parasitic condition also influenced the principal hematological and biochemical variables, showing lower values in infected lambs and those fed with low protein feed. The highest mean EPG (520.06) and H. contortus (200.38) counts were observed in the DSI genotype (P<0.05). Observation verified the influence of the DSI genotype (P<0.05) on the mean warm and (17.03 kg) cold (16.48 kg) carcass weights and of H. contortus infection on weight-loss due to cooling (6.2%) ...(Complete abstract click electronic access below)

Resumo: A presente pesquisa teve como objetivo caracterizar e isolar uma estirpe de campo de Haemonchus contortus resistente à ivermectina, avaliar a ação reversora do verapamil, por meio de testes in vitro (migração de larvas em gel de ágar) e in vivo (redução de OPG e necropsias parasitológicas), e realizar a análise de genes relacionados à glicoproteína-P e canais de cloro ativados por glutamato (GP-P e HcGluCL). A estirpe de H. conctortus isolada apresentou elevada resistência à ivermectina, sendo observada eficácia ínfima de 6,59%. O verapamil isoladamente não apresentou efeito nematodicida, porém, em concentrações crescentes, associado à ivermectina (DL50-4,317μmol) proporcionou aumento de eficácia contra a cepa resistente de H. contortus, alcançando o percentual de 94,3% (verapamil 100 mmol). Os resultados do teste anti-helmíntico controlado, em que foram utilizados 42 ovinos experimentalmente infectados com H. contortus resistente à ivermectina, revelaram que o verapamil apresentou uma atividade de reversão parcial significativa (P<0,05) da resistência. Pela análise genotípica efetuada nas sete amostras desta população de H. contortus, submetidas aos diferentes tratamentos com ivermectina, verapamil ou associação entre estas drogas, verificou-se similaridade em relação à glicoproteína-P e pouca semalhança em relação aos canais de cloro ativados por glutamato. / Abstract: The present work aimed to identify and isolate a field ivermectin-resistant Haemonchus contortus strain, evaluate the effect of verapamil as a P-GP modulator agent by in vitro (agar gel larval migration assay) and in vivo (FECRT and controlled test), and analyze the genes related to the P-glycoprotein (P-GP) and H. contortus glutamate chloride (HcCluCl) chanel expression. The H. contortus field strain isolated was highly resistant to ivermectin, showing only 6.59% of efficacy. Verapamil alone didn't show any in vitro anthelmintic action but increasing concentrations of this drug associated to ivermectin (LD50-4.317μmol) resulted in higher efficacy, when compared to ivermectin alone, with 94.3% efficacy in the 100 mmol concentration. The results of the anthelmintic controlled test, in wich it was used 42 sheep experimentally infected with the field ivermectin-resistant H. contortus strain, showed a significant (P<0,05) parcial ivermectin resistance reversion by verapamil. The genomic analysis of the seven samples from this H. contortus resistant population submited to diferent treatment with ivermctin, verapamil and the association between theese two drugs, showed similarity in the genes related to the expression of P-GP and high polimorfism related to HcGluCL. / Orientador: Alvimar José da Costa / Coorientador: Marcelo Beltrão Molento / Banca: Giane Serafim da Silva / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Adjair Antonio do Nascimento / Doutor

The aim of this work was to assess the bioactivity of extracts of the tannin-rich plants Acacia mearnsii, Myracrodruon urundeuva, Caesalpinea bracteosa and Leucaena leucocephala against egg and infective larvae stages of Haemonchus contortus. Two in vitro assays were held: an Egg Hatch Assay (EHA) and a Larval Exsheathment Inhibition Assay (LEIA). The EHA consists of the incubation of previously recovered eggs from infected animal\'s faeces in a solution of plant extract for 24 hours and later differentiation between larvae and nonhatched eggs. The concentrations used were 50.00, 25.00, 12.50, 6.25, 3.12, 1.56, 0.78 and 0.39 mg/mL for A. mearnsii; 1.56, 0.78, 0.39, 0.19, 0.09 and 0.04 mg/mL for M. urundeuva; 6.25, 3.12, 1.56, 0.78, 0.39 and 019 mg/mL for C. bracteosa; and 6.25, 3.12 and 1.56 mg/mL for L. leucocephala. The LEIA consists in the artificial exsheathment of infective larvae, obtained by previous coproculture, after a three hour incubation period with plant extract solution in the concentrations 1,200, 600, 300 and 150 \'mü\'g/mL. The 50 and 99 lethal doses (LD) were calculated for both tests. A dose-dependent effect was found in the two tests, except for L. leucocephala in EHA, where it was not possible to calculate DL50 and DL99 with the chosen doses. The DL50 results for EHA were 0.18, 0.32, and 7.20 mg/mL and for DL99 were 4.31, 5.41, and 187.26 mg/mL, respectively for M. urundeuva, C. bracteosa, and A. mearnsii. For LEIA, the DL50 were 0.40, 0.52, 1.24, and 2.24 mg/mL and for DL99 these were 2.37, 2.28, 19.99 and 2.53 x 103 mg/mL respectively for M. urundeuva, A. mearnsii, L. leucocephala and C. bracteosa. The two highest concentrations of A. mearnsii and the three highest for C. bracteosa were effective (more than 90% of bioactivity); the three highest concentrations of M. urundeuva and the 0.78 mg/mL level of C. bracteosa were moderately effective (between 80 and 90% of bioactivity); the concentrations with low effectiveness (between 60 and 80% of bioactivity) were the 12.50 mg/mL (A. mearnsii), 0.19 mg/mL (M. urundeuva), and 0.39 mg/mL (C. bracteosa); all other concentrations were ineffective (less than 60% of bioactivity). For the LEIA, only the highest dose from A. mearnsii and M. urundeuva were effective; the 600 \'mü\'g/mL were moderately effective and all other doses were ineffective. It should be observed that even if the dose is ineffective against exsheathment, some concentrations were able to significantly delay the process. It was observed that the extracts had bioactivity in vitro within the chosen doses against the hatchability of eggs and exsheathment of larvae of H. contortus, except for L. leucocephala, which was not able to block the hatching of eggs / Objetivou-se com o presente trabalho verificar a bioatividade dos extratos das plantas taniníferas Acacia mearnsii, Myracrodruon urundeuva, Caesalpinea bracteosa e Leucaena leucocephala contra os estágios de ovo e de larva L3 infectante de Haemonchus contortus. Para isso, dois ensaios in vitro foram realizados: o Teste da inibição da eclodibilidade dos ovos (TIEO) e o teste da Inibição do desembainhamento larvar (TIDL). O TIEO consiste na incubação de ovos recém recuperados das fezes de animais infectados em solução liquida de extrato de planta por 24 horas e posterior diferenciação entre larvas e ovos não eclodidos. As concentrações utilizadas para A. mearnsii foram de 50,00, 25,00, 12,50, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 e 0,39 mg/mL; 1,56, 0,78, 0,39, 0,19, 0,09 e 0,04 mg/mL para M. urundeuva; 6,25, 3,12, 1,56, 0,78, 0,39 e 0,19 mg/mL para C. bracteosa; e 6,25, 3,12 e 1,56 mg/mL para L. leucocephala. O TIDL consiste no desembainhamento artificial de larvas infectantes, obtidas através de coprocultura, que passaram por período de incubação de três horas em solução liquida de extratos de plantas nas concentrações 1.200, 600, 300 e 150 \'mü\'g/mL. As doses letais (DL) 50 e 99 foram calculadas para ambos testes. Um efeito dose-dependente foi encontrado para os dois testes, exceto para a L. leucocephala no TIEO, onde não foi possível calcular o valor da DL50 e DL99 para o respectivo teste nas doses escolhidas. Os resultados da DL50 para TIEO foram de 0,18, 0,32 e 7,20 mg/mL e da DL99 foram de 4,31, 5,41 e 187,26 mg/mL respectivamente para M. urundeuva, C. bracteosa e A. mearnsii. Para o TIDL, a DL50 foi de 0,40, 0,52, 1,24 e 2,24 mg/mL e da DL99 foi de 2,37, 2,28, 19,99 e 2,53 x 103 mg/mL respectivamente para M. urundeuva, A. mearnsii, L. leucocephala e C. bracteosa. Para o TIEO, as duas maiores concentrações de A. mearnsii e as três maiores de C. bracteosa foram efetivas (mais de 90% de bioatividade); as três maiores concentrações de M. urundeuva e a 0,78 mg/mL de C. bracteosa foram moderadamente efetivas (entre 80 e 90% de bioatividade); as concentrações de pouca efetividade (entre 60 e 80% de bioatividade) foram a 12,50 mg/mL (A. mearnsii), 0,19 mg/mL (M. urundeuva), e 0,39 mg/mL (C. bracteosa); as demais concentrações foram consideradas ineficientes (menos de 60% de bioatividade). Para o TIDL, apenas a maior concentração de A. mearnsii e M. urundeuva foram efetivas; a concentração de 600 \'mü\'g/mL de M. urundeuva foi moderadamente efetiva; todas as outras concentrações foram ineficientes. Entretanto, deve-se observar que apesar de ineficientes em bloquear o desembainhamento, algumas concentrações atrasaram significativamente o desembainhamento das larvas, sendo esse um resultado de interesse. Assim, foi observado que os extratos, excetuando o extrato de L. leucocephala quanto a eclodibilidade, possuem bioatividade in vitro nas doses utilizadas contra a eclosão dos ovos e contra o desembainhamento das larvas de H. contortus

A bananeira é cultivada pelo homem há pelo menos 6.500 anos. O início desse processo foi marcado pela manifestação espontânea dos fenômenos de partenocarpia, hibridização, poliploidia e pela sua combinação, gerando diferentes cultivares, cujos clones foram selecionados por agricultores primitivos e se disseminaram pelos trópicos, exclusivamente pela ação humana. A banana é hoje a principal fruta cultivada no mundo, existindo farta documentação sobre a utilização dos resíduos da cultura para alimentação de animais e sobre o uso medicamentoso de diferentes partes da planta. No âmbito da Medicina Veterinária, folhas, inflorescências masculinas, pseudocaules e rizomas já foram testados in vitro e in vivo para avaliação de seu efeito anti-helmíntico. Entretanto, em escala comercial, toda essa biomassa deve permanecer no bananal, para cobertura e fertilização do solo, inviabilizando seu aproveitamento como forragem. Por outro lado, no momento da colheita, os cachos de bananas são levados para unidades de triagem denominadas &ldquo;packing-houses&rdquo;, onde as frutas são selecionadas e acondicionadas para expedição, restando os engaços ou pedúnculos dos cachos de bananas disponíveis para o aproveitamento na alimentação animal, com o benefício adicional potencial de controlar infecções verminóticas. O presente trabalho demonstrou que o extrato dos engaços do cultivar &ldquo;Nanica&rdquo;, Subgrupo Cavendish AAA, inibiu significativamente a eclosão in vitro de ovos de Haemonchus contortus, da mesma forma que extratos de folhas e pseudocaules. Transpondo esse achado para um modelo in vivo, 24 cordeiros inteiros, &#8542; Dorper, foram experimentalmente infectados com larvas de Haemonchus contortus e alocados em blocos a cada um de quatro tratamentos, de acordo com as contagens de ovos nas fezes. Os ovinos receberam, conforme o grupo, 0% (controle), 10%, 20% ou 30% de engaços frescos de bananeira picados, calculados em matéria seca, sendo a dieta complementada com feno de braquiária ad libitum e sal mineral. Os animais foram tratados durante 14 dias consecutivos. Glucose de milho e melaço de cana de açúcar foram utilizados para melhorar a aceitação dos engaços pelos animais. Verificou-se um aumento significativo da oviposição em todos os grupos tratados na primeira semana de tratamento, fato possivelmente relacionado com um dos efeitos farmacológicos da bananeira, que promove elevação da serotonina e, por consequência, aumenta a taxa de reprodução dos nematódeos. Na segunda semana obteve-se redução significativa das contagens de ovos nas fezes, sem diferença estatística entre os grupos tratados, sugerindo que o uso continuado dos engaços de bananeira na alimentação pode promover um controle das infecções helmínticas em ruminantes. Demonstrou-se ainda que os taninos condensados exercem papel marginal quando a bananeira é testada in vitro, pois, nesse caso, a adição de polivinilpolipirrolidona, substância capaz de precipitar e suprimir a atividade desses taninos, proporcionou o mesmo grau de inibição da eclosão de ovos de Haemonchus contortus que os extratos puros. Embora relatos recentes tenham sugerido a presença de alcalóides e saponinas na bananeira, tais compostos não foram identificados nas amostras estudadas. Observou-se, todavia, a presença de siringina, um fenilpropanóide, cuja via metabólica engloba as defesas bioquímicas dos cultivares de bananas contra infecções por nematódeos parasitos de plantas. Não obstante, a presença de catecolaminas e ação antiparasitária de esteróis e triterpenos sugerem fortemente que a bananeira atua como um fitocomplexo quando fornecida aos ruminantes como alimento e tratamento contra endoparasitos. / The banana plant has been cultivated by men for at least 6,500 years. The beginning of this process was marked by the spontaneous occurrence of the phenomena of partenocarpy, hybridization, polyploidy and their combination, generating different cultivars, which clones were selected by primitive farmers and were disseminated throughout the tropics, by exclusive human action. Nowadays bananas are the main fruit crop cultivated in the world, and there is plenty documentation regarding the use of crop residues to feed animals and concerning the medicinal use of different parts of the plant. In the field of Veterinary Medicine, leaves, masculine inflorescences, pseudostems and rhizomes have been tested both in vitro and in vivo for the evaluation of their anthelminthic effect. However, in commercial scale, all this biomass has to be kept in the plantation, to cover and fertilize the soil, frustrating its use as forage. On the other hand, at the moment of harvesting, banana bunches are carried to screening facilities called &ldquo;packing-houses&rdquo;, where the fruits are selected and boxed for shipment, leaving the stalks or peduncles of the bunches available to be used as animal fodder, with the potential additional benefit of controlling worm infections. The current work has shown that the extract of the cultivar &ldquo;Nanica&rdquo;, Subgroup Cavendish AAA, has significantly inhibited the in vitro eclosion of Haemonchus contortus eggs, in the same manner as extracts of leaves and pseudostems. Transposing this finding to an in vivo model, 24 non-castrated &#8542; Dorper lambs were experimentally infected with Haemonchus contortus larvae and allocated in blocks to each of four treatments, according to their faecal egg counts. The sheep were fed, according to the group, 0% (control), 10%, 20% or 30% fresh chopped banana plant stalks, calculated as dry matter, while the diet was complemented with Brachiaria hay ad libitum and mineral salt. The animals were treated during 14 consecutive days. Maize glucose and sugar cane molasses were used to improve the acceptance of the stalks by the lambs. There was a significant increase of the oviposition in all treated groups during the first week of treatment, fact possibly related to one of the pharmacological effects of the banana, which promotes an increase of serotonin levels, consequently enhancing the reproductive tax of the nematodes. On the second week a significant reduction of the faecal egg counts was noted, without statistical difference between the treated groups, suggesting the continuous use of the banana plant stalks as feed may promote a control of helminthic infections in ruminants. It was further shown that condensed tannins play a marginal role when the banana plant is tested in vitro, because the addition of polyvinylpolypyrrolidone, a substance capable of precipitating and supressing the activity of these tannins, resulted in the same level of Haemonchus contortus egg hatch inhibition obtained with the pure extracts. In spite of recent reports suggesting the presence of alkaloids and saponins in the banana plant, these compounds were not detected in any of the samples tested. Otherwise, screening identified syringing, a phenylpropanoid, which metabolic pathway comprises the biochemical defences of the banana cultivars against infections by nematode plant parasites. The presence of catecholamines and the anti-parasitic action of sterols and triterpenes strongly suggest the banana plant acts as a phytocomplex when administered to ruminants as feed and treatment against endoparasites.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:47:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marlus_Linecio.pdf: 917351 bytes, checksum: 53a4b9401537148311b995466de2ad88 (MD5) Previous issue date: 2013-07-04 / The study aimed to evaluate the effect of alcoholic extract of propolis in evaluation nematode infections in female sheep Santa Ines, naturally infected, which had an average weight of 21.73 kg and age of 2 years. The experimental design was a complete randomized block design with four treatments, four blocks and two replications, with one sheep per experimental unit, totaling 32 animals. Four treatments were carried individual orally at single doses, the first treatment was administered 10 ml of water as a control (reference), treatment 2 used 10 ml of 70 ° alcohol INPM (70% w / w); treatment was 3 to 5 mL dose of alcoholic extract of propolis (EAP) to 30% and 4 treatment dose was 10 ml of alcoholic extract of propolis (EAP) to 30%. It was observed that the count of eggs per gram of feces (EPG) counts and larvae of the genera Haemonchus sp and Trichostrongylus sp were reduced with the use of two doses of the EAP to 30%, 5 mL and 10 mL, but the dose of 10 mL of EAP presents significant result from the 1st day to the OPG and on day 21 for the genus Haemonchus sp, the dose 5 and 10 mL of EAP are suitable for genus Trichostrongylus sp the 7th day and the OPG on the 3rd, 7th and 21th day. Based on the results, it is concluded that the oral use of alcoholic extract of propolis is an alternative to control worms in sheep / Na maioria dos países, está se tornando proibido o uso de hormônios, agrotóxicos e antibióticos nos alimentos. Desta forma, os consumidores exigem cada vez mais alimentos naturais e de melhor qualidade. O estudo teve como objetivo avaliar o efeito do extrato alcoólico da própolis na avaliação de verminoses em ovinos. O delineamento experimental utilizado foi de blocos completos casualizados, com quatro tratamentos, quatro blocos e duas repetições, com um ovino por unidade experimental, totalizando 32 animais. Foram realizados quatro tratamentos, individuais, por via oral, em dose única. O tratamento 1 consistiu em 10 mL de água como controle (referência); o tratamento 2 foi de 10 mL de álcool (70% p/p); o tratamento 3, 0,2 mL por quilo de extrato alcoólico de própolis (EAP) a 30%; e o tratamento 4, 0,4 mL por quilo (EAP) a 30%. Os resultados foram avaliados pela contagem de ovos por gramas de fezes (OPG) e coprocultura, com contagem de larvas. Observou-se que a contagem de OPG e a contagem de larvas dos gêneros Haemonchus sp e Trichostrongylus sp foram reduzidas com a utilização das duas dosagens do EAP a 30%, 5 mL e 10 mL, porém a dose de 10 mL do EAP apresenta resultado significativo desde o 1º dia para o OPG e no 21º dia para o gênero Haemonchus SP. As doses de 5 e 10 mL de EAP são adequadas para o gênero Trichostrongylus sp no 7º dia e para o OPG no 3º, 7º e 21º dia. Com base nos resultados, conclui-se que a utilização oral do EAP é uma alternativa no controle de verminoses em ovinos

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_marina_cunha_sinott.pdf: 651389 bytes, checksum: a3911bf52b78e4b6458a51e537e40ea0 (MD5) Previous issue date: 2012-05-14 / Parasitic infections are the major cause of losses in livestock, particularly those involving sheep. Multidrug resistance makes the problem even more worrying because in addition to pathogens, parasites do not appear more susceptible to the active principles. Currently, for the progress to occur in sheep farming, there must be a need to seek alternatives that reduce the dependence on the success of the activity to the emergence of a molecule that makes a lack reduced, selective toxicity, and high degree of effectiveness in combating infestation. This context has led to studies in order to investigate the behavior of strains Bacillusspp, when in contact with eggs and young larvae of the forms tricostrongilídeo Haemonchuscontortus, which is undoubtedly the most pathogenic for sheep that are raised in the field. It was verified through in vitro tests, which B. circulans showed an 80.9% reduction in the number of larvae when compared to control groups. This reduction was also observed in the tests made in vivo, as well as the residual capacity of the agent through tests performed with Bacillus transformed and expressing the GFP gene. / As parasitoses que acometem ovinos são a maior fonte de prejuízos na pecuária. Devido aos tratamentos inadequados dessa enfermidade, os parasitos não se mostram mais suscetíveis aos princípios ativos químicos atuais. Para que ocorram progressos na pecuária ovina, há a necessidade de buscar alternativas que visem reduzir a dependência do sucesso da atividade ao surgimento de uma molécula que apresente carência reduzida, toxicidade seletiva com alto grau de eficácia no combate à infestação parasitária. O presente estudo avaliou a toxicidade de cepas de Bacillus spp. para ovos e formas jovens de larvas do tricostrongilídeo Haemonchus contortus. Através de testes in vitro utilizando uma suspensão esporotoxina contendo 2 x 108 UFC/mL foi possível verificar que os Bacillus thuringiensis var osvaldocruzi, Bacillus circulans, B. thuringiensis var israelensis, B. thuringiensis var kurstaki demonstraram ação larvicida com uma redução de 81; 80; 79 e 76% respectivamente no número de larvas. Nos testes in vivo, realizados com B. circulans em ovinos, observou-se atividade larvicida similar (80%) ao in vitro e esta atividade permaneceu por até sete dias após sua administração. Estes resultados sugerem que os Bacillus estudados são uma alternativa promissora no controle de helmintos em ovinos.

There is a pressing need to develop strategies to reduce the emergence of macrocyclic lactone anthelmintic resistance in sheep flocks. Management practices aimed at maintaining anthelmintic susceptible nematodes in refugia while achieving a satisfactory level of production may prove to be useful. However, sensitive molecular tests are required to monitor the subtle effects of these practices on the frequency of resistance alleles within nematode populations. To-date, conventional studies of candidate genes coding for the known methods of action of macrocyclic lactone anthelmintics have produced a complex picture, highlighting the relevance of different approaches to the identification of resistance markers. This thesis describes the development of a single nematode parent genetic crossing method and discusses its application to identify molecular markers for anthelmintic resistance. Parasitological and molecular verification of successful inbreeding of the MHco3 strain of H. contortus derived from the progeny of a genetic cross between single nematode parents is described. The single parent genetic crossing method has enabled the production of diverse inbred lines of the MHco3 H. contortus and may prove useful for genome assembly, or for the development of a genetic map. The study has afforded insights to the biology of H. contortus and effects of host immunity on nematode parasites. New information is presented concerning the period during which adult female nematodes continue to shed fertilised eggs after removal of males, the development of unfertilised H. contortus eggs, and the population genetics of mixed infections of two different strains of H. contortus. Novel backcrossing experiments initially between a macrocyclic lactone resistant (MHco4 or MHco10) and a susceptible (MHco3) strain of H. contortus and then between ivermectin treated backcross generations and the parental susceptible strain are described. The resources provided by these experiments should enable comparative genomic analysis and conventional molecular biology to identify resistance genes derived from the parental resistant strains in fourth backcross generations that are the same as a parent ivermectin susceptible population, apart from the presence of alleles linked to anthelmintic resistance, derived from parent resistant strains.

Orientador: Alvimar José da Costa / Coorientador: Carolina Buzzulini / Banca: Fernando de Almeida Borges / Banca: Carlos Noriyuki Kaneto / Resumo: O sistema de criação conjunta ovinos/bovinos, visando melhor aproveitamento da pastagem, provendo diversificação lucrativa, pode deparar com problemas graves nas propriedades rurais, tais como as parasitoses. Dentre as mais importantes, destaca-se a hemoncose. As espécies Haemonchus placei e Haemonchus contortus são comumente encontradas parasitando bovinos e ovinos, respectivamente. A infecção de bovinos por H. contortus constitui, ainda, uma incógnita na literatura, sobretudo a brasileira. Este helminto tem sido descrito parasitando principalmente ovinos e caprinos. As espécies mais citadas parasitando bovinos são H. placei e H. similis. Portanto, objetivou-se no presente estudo avaliar a infectividade de H. contortus para bovinos e comparar sua patogenicidade à de H. placei. Para tal, foram utilizados 10 bezerros, criados e mantidos sem contato com helmintos, assim distribuídos: GI - dois bezerros não inoculados (controle), GII - quatro bezerros inoculados com larvas infectantes (L3) de H. contortus e GIII - quatro bezerros infectados com larvas (L3) de H. placei. Cada bovino recebeu 10.000 L3, de acordo com o grupo experimental, em dose única. Exames coproparasitológicos (McMaster e coproculturas) foram realizados diariamente após o 60 dia da inoculação, objetivando estabelecer o período pré-patente. Foram colhidas, semanalmente, amostras de sangue para hemogramas e dosagens bioquímicas. Decorridos 42 dias pós-infecção, os 10 bovinos foram eutanasiados e necropsiados, sendo colhido "in totum" todos os exemplares de Haemonchus. Nos abomasos foram realizados estudos anátomo-histopatológicos. O período pré patente para H. contortus foi de 20 dias e para H. placei foi de 27 dias. Dentre os parâmetros hematológicos, apenas as quantificações de hemácias apresentaram diferenças significativas (P<0,05), entre os grupos. As concentrações séricas médias de proteínas totais, albumina, ureia ... / Abstract: The ovine/bovine joint breeding system, which aims for a better use of pastures, providing profitable diversification, can face severe problems in rural properties, such as parasites, amongst which Haemonchus infections stand out. H. placei and H. contortus species are commonly found parasitizing cattle and sheep, respectively. Bovine infections by H. contortus still persist as an unknown possibility in literature, especially in Brazil. Such helminth has been described parasitizing sheep and goats, while the main species cited as parasites of bovines are H. placei and H. similis. Therefore, the present study aimed to evaluate infectivity of H. contortus for bovines and compare its pathogenicity to that of H. placei. To achieve this goal, 10 calves were utilized, all created and maintained free of any contact with helminths, distributed as follows: GI - two non-inoculated calves (control group); GII - four animals inoculated with infecting larvae (L3) of H. contortus; and GIII - four bovines infected with larvae (L3) of H. placei. Each inoculated calf received 10,000 L3, according to its experimental group, in a single dose. Coproparasitological exams (McMaster and coprocultures) were performed daily, starting at the 6th post-inoculation day, seeking to establish prepatent periods. Blood samples, for cell counts and biochemical dosages, were collected on a weekly basis. 42 days after infection of experimental animals, all 10 calves were euthanized and necropsied, for subsequent "in totum" collection of all Haemonchus specimens. Anatomical and histopathological examinations were performed on all abomasums. Prepatent period for H. contortus was 20 days, and 27 days for H. placei. Amongst hematological parameters, only erythrocyte counts presented significant differences (P < 0.05) between experimental groups. Average serum concentrations of total proteins, albumin, urea, creatinin, AST and GGT presented significant ... / Mestre

Orientador: Ana Carolina de Souza Chagas / Coorientador: Cintia Hiromi Okino / Banca: Maria Cristina de Sena Oliveira / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Resumo: Tendo em vista o impacto da infecção por Haemonchus contortus na ovinocultura, é crescente o número de estudos acerca da resistência a esse parasita, sendo essencial a compreensão dos mecanismos imunes diretamente relacionados. A resposta a infecções por helmintos é predominantemente de perfil Th2, embora o conjunto de mecanismos imunes que conferem resistência aos ovinos não sejam completamente elucidado. O presente estudo objetivou avaliar as respostas imunes locais (abomaso) associados à resistência à infecção por H. contortus em cordeiros Morada Nova, raça considerada resistente. Um rebanho composto por 287 ovinos foi fenotipado, por meio de contagens de ovos nas fezes, volume globular e peso corporal, após dois desafios parasitários com 4000 L3. Os 20 extremos de infecção (10 mais resistentes e 10 mais susceptíveis) foram submetidos a um terceiro desafio e abatidos sete dias após. Foram quantificados, por RT-qPCR, os níveis de expressão de 22 genes associados às respostas imunes, em abomaso e linfonodos abomasais. Além disso, eosinófilos e mastócitos foram quantificados, e os níveis de IgG e IgA no muco abomasal mensurados. Genes relacionados à resposta inata (TLR2 e CFI) foram superiormente expressos na região pilórica dos animais resistentes. Esses animais também apresentaram, na região fúndica, IL33 (promotor da polarização Th2) e MS4A2 (receptor de IgE) em níveis superiores aos verificados nos susceptíveis. Marcadores pró-infl... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Considering the impact of Haemonchus contortus infection on sheep breeding, there is an increasing number of studies addressing host resistance against to this parasite, and the understanding of directly related immune mechanisms is essential. The response to helminth infections is predominantly Th2- polarized, although the immune mechanisms that confer resistance to sheep are not fully elucidated. The present study aimed to evaluate the local immune responses (abomasum) associated with resistance to H. contortus infection in Morada Nova lambs, a breed considered resistant. A 287 sheep flock was phenotyped, by means of fecal egg counts, packed cell volume and body weight, after two parasitic challenges with 4000 L3. The 20 extremes of infection (10 most resistant and 10 most susceptible) were submitted to a third challenge and slaughtered seven days later. 22 immune-related genes were quantified (RT-qPCR) in abomasum and abomasal lymph nodes. In addition, abomasal eosinophils and mast cells were quantified, and IgG and IgA levels were measured (ELISA) in abomasal mucus. Genes related to innate response (TLR2 and CFI) were superiorly expressed in the pyloric region of the resistant animals. IL33 (Th2 polarization promoter) and MS4A2 (IgE receptor) were also at higher levels in this group. Proinflammatory cytokines (TNFα and IL1β) were superiorly expressed in the fundic region of the susceptible group, which also had IL4 (Th2 response) superiorly expressed in their abomasal lym... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre