Introdução: O carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço avançado é uma doença de difícil tratamento. Apesar dos avanços nas técnicas de diagnóstico e tratamento nos últimos 30 anos não ocorreram ganhos significativos em sobrevida. A falha no tratamento ocorre principalmente pela recidiva locorregional e freqüentemente impede a realização de tratamentos de resgate. Com o desenvolvimento da imunoterapia novas abordagens tem sido descritas para o combate ao câncer. Estudos em animais demonstraram a redução de tumores com a utilização de vacinas de DNA contendo a HSP-65 do Mycobacterium leprae. Neste estudo avaliou-se a utilização desta proteína em pacientes portadores de carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço em estádio avançado e fora de possibilidades terapêutica curativa pelos métodos convencionais. Objetivos: Testar a viabilidade de realização da injeção intratumoral do DNA HSP65 nesse grupo de doentes, avaliar a resposta tumoral através da análise comparativa do volume, pesquisar a transfecção do DNA HSP65 do M. Leprae e verificar se o tratamento realizado apresentou impacto na evolução dos pacientes. Casuística e métodos: Foram incluídos 21 pacientes em três grupos. Cada grupo recebeu diferentes doses da vacina de DNA HSP-65 do Mycobacterium leprae: 150, 600 e 400µg, através de aplicações intratumorais guiadas por ultra-som com Doppler. Foram realizadas tomografias computadorizadas antes e após o tratamento, para avaliação da resposta tumoral através da comparação de volume tumoral. Realizaram-se biópsias antes e após o tratamento, e o material foi submetido a reação em cadeia da polimerase (Rt-PCR) para identificar a transfecção do DNA injetado. Durante o protocolo os pacientes foram acompanhados para observação de eventos adversos que pudessem ser relacionados à medicação. Resultados: Dos 21 pacientes, sete faleceram antes do término do protocolo. Nos 13 pacientes passíveis de análise, ocorreram quatro respostas parciais e estabilidade da lesão em um caso. Em nove casos houve progressão da doença. Dois pacientes encontram-se vivos em seguimento a mais de oitocentos dias do inicio do protocolo. Os eventos adversos ocorridos foram principalmente aumento da dor local e edema. Não foi possível comprovar a transcrição do DNA injetado no Rt-PCR pela ocorrência de um resultado falso positivo. Conclusões: A aplicação foi segura na dose de 400µg por aplicação. Não foi possível comprovar a transfecção de DNA de HSP65. Nos pacientes que apresentaram diminuição do volume tumoral parece ter havido benefício clínico. / Introduction: The squamous cell carcinoma of the head and advanced neck is an disease difficult to treat. Despite the advances in diagnosis and treatment in last the 30 years had not occurred major survival improvements. The treatment failure occurs mainly locorregionaly and recurrences frequently canot be rescued. immunotherapy has had encouraging results in the last years. Studies in animals had demonstrated the reduction of tumors with the DNA vaccine containing HSP-65 of the Mycobacterium leprae. In this study we evaluate the use of this protein in patients with avdanced head and neck carcinoma, stages II and IV without possibilities of curative treatment. Objectives: To test the viability of accomplishment of the intratumoral injection of DNA HSP65 in this group of patients, test its effectiveness through the comparative analysis of the volume, to verify transfeccion of the DNA injected and to see if the carried through treatment presented impact in the evolution of the patients. Patients and methods: 21 patients in 3 groups of doses 150,600 and 400µg of the vaccine of DNA HSP-65 of M leprae, through intratumoral applications guided by USG Doppler repeated 3 times every 21 days. CT scans before and after the treatment had been carried through, for evaluation of the tumoral response through the comparison of tumoral volume. We also did biopsis before and after the treatment, and the material was submitted the Rt-PCR in search of tranfeccion of the injected DNA. During the protocol the patients had been evalueted to rule observe adverse events that could be related to the medication. Results: Of 21 patients, seven died before the end of the protocol. In the 13 suitable for analysis, 4 partial responses and stability of the disese in 1 case had occurred. In 9 cases the tumors progressed. Two patients are still alive, with more than eight hundred days of the beginning of the protocol. The adverse events occurred mainly as an increase of local pain and edema. It was not possible to prove the transcription of the DNA injected in the Rt-PCR because of the occurrence of positive a false result. Conclusions: The application was secure in the dose of 400mcg . We saw reduction of tumoral volume in 5 of the 13 patients suitable for analysis, four partial responses and one stable disease. In the patients who had presented reduction of the tumoral volume there seems to be clinical benefit. It was not possible to prove the transfeccion of the injected DNA.

O carcinoma epidermoide da cabeça e pescoço (CECP) tem alta prevalência mundial, alta morbimortalidade e impacto negativo na saúde individual e pública. Apresenta como principais fatores de risco o tabagismo, etilismo e infecção pelo Papilomavírus humano (HPV). A glutationa S-transferase pi (GSTPI) é uma enzima de detoxificação de carcinógenos com expressão aumentada em alguns tipos de câncer e parece associar-se a pior resposta terapêutica. Estudamos a expressão da GSTPI e a influência dos fatores de risco tabagismo, etilismo e HPV em amostras de tecido tumoral e margens não tumorais de portadores de CECP. Os dados foram obtidos do projeto temático Genoma do Câncer de Cabeça e Pescoço (GENCAPO). Os pacientes foram caracterizados: não tabagistas e não etilistas (NTNE) e tabagistas e etilistas (TE) e posteriormente pareados, perfazendo um total de 47 pares. O pareamento baseou-se em idade, sítio tumoral, estadiamento TNM, grau de diferenciação tumoral e variantes morfológicas. As amostras foram coradas por imuno-histoquímica para GSTPI e a presença de imunomarcação semiquantificada em escores de 0 a 3 (0: 0 a 10%; 1: de 10% a 30%; 2: de 31% a 60%: 3: para > 60%). Os dados foram analisados pelo teste de McNemar, Fisher, a sobrevida pela curva de Kaplan-Meier e teste de long rank. Houve expressão do biomarcador no tumor independente do hábito tabágico ou etílico. A expressão de GSTPI na margem do tumor foi maior no grupo TE (p=0,004). Não houve associação entre a marcação de GSTPI nas amostras de pacientes NTNE e TE em relação à positividade para HPV. Não houve óbitos no grupo NTNE com baixa imunomarcação no tumor, o que inviabilizou as análises de sobrevida neste grupo. Não houve diferença de sobrevida conforme a imunomarcação para GSTPI em margem de tumor (p=0.538). Este estudo demonstra que a marcação de GSTPI em CECP está presente no tumor independente do hábito. Na margem do tumor, os fatores de risco tabagismo e etilismo associam-se a maior presença do biomarcador, sugerindo o papel da GSTPI na tentativa de eliminação destas toxinas / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) presents a high prevalence worldwide, high mortality and negative impact on individual and public health. Its main risk factors are tobacco, alcohol consumers and human papillomavirus infection (HPV). The pi glutathione S-transferase (GSTPI) is a carcinogen-detoxifying enzyme with increases expression in some kinds of cancer and it seems to worsen the therapy response. We studied the expression of GSTPI in tumors samples and the influence of risk factors; tobacco, alcohol and HPV. The data were obtained from Genome Head and Neck Cancer Thematic Project (GENCAPO). Patients were divided in two groups: non smokers and non drinkers (NSND) and smokers and drinkers (SD) and then selected in 47 pairs based on age, sex, tumor site, TNM staging, degree of tumor differentiation and morphological variants. Each pair was previously tested for HPV in GENCAPO project. Samples were stained by immunohistochemistry for GSTPI and analyzed by semi-quantitative method for scores from 0 to 3 according to immunostaning (0: 0 to 10%; 1: 10% to 30%; 2: 31% to 60% : 3: to > 60%). Data were analyzed using McNemar test, Fisher and for survival analysis by the Kaplan-Meier curve and long rank test. The biomarker expression in the tumor was present in both groups independently of smoking and drinking habits. The GSTPI expression in tumor margin was higher in SD group (p = 0.004). There was no association between GSTPI expression and positivity for HPV in both groups. There were no deaths in NSND group presenting low tumor GSTPI expression, which prevented the survival analysis in this group. The survival rate was similar in both groups according to GSTPI immunostaining in tumor margin (p = 0.538). This study showed that the GSTPI biomarker in HNSCC was present independently of the smoking and drinking habit or positivity to HPV. Tobacco and alcohol consumption were associated with greater biomarker expression in the tumor margin, suggesting that GSTPI may modulate the elimination of these toxins

O carcinoma de cabeça e pescoço é uma neoplasia maligna de origem epitelial que resulta em aproximadamente 500.000 novos casos por ano ao redor do mundo. Diversos estudos têm sido conduzidos de maneira a elucidar os mecanismos de proliferação e invasão desta doença, sendo a via de sinalização Akt/mTOR e proteínas relacionadas, apontada como uma das principais vias envolvidas em sua progressão. Sabe-se que células neoplásicas, bem como células de diferentes tecidos, podem ter seu comportamento modificado após terem sido irradiadas com laser em baixa intensidade (LLLT). Porém, os mecanismos de atuação da luz laser de baixa potência sobre estas células permanecem ainda não completamente esclarecidos. Portanto, o objetivo deste estudo foi o de analisar a viabilidade celular e expressão das proteínas Akt, pAkt, Hsp90, S6, pS6 e Ciclina D1 em duas linhagens celulares de carcinoma de boca (SCC9 e SCC25), bem como em uma linhagem de queratinócitos orais humanos com displasia (DOK) após irradiação com laser em baixa intensidade. O laser utilizado foi um diodo semicondutor de arseneto de Gálio e Alumínio (GaAlAs) operando nos comprimentos de onda vermelho (660nm) e infravermelho (780nm), com potência fixa em 40mW e três densidades de energia para cada comprimento de onda disponível: 2.05J/cm², 3.07J/cm² e 6.15J/cm². A análise de apoptose foi realizada por meio do teste de TUNEL e a expressão proteica foi obtida com imunofluorescência e western blotting. Após análise estatística por meio do método ANOVA dois critérios e testes de Tukey ou teste T de estudante, todos com nível de significância de 5%, pôde-se concluir que a LLLT induziu comportamentos distintos em cada uma das linhagens celulares utilizadas. Foi notado aumento, bem como diminuição da viabilidade celular, dependendo do comprimento de onda utilizado e das células irradiadas. A densidade de energia de 2.05J/cm² foi a que produziu efeitos mais significativos em SCC9. Para a linhagem celular SCC25, a dose mais relevante foi a de 3.07J/cm², enquanto que para a linhagem DOK, a dose de 6.15J/cm² causou efeitos mais proeminentes. Estas respectivas doses foram escolhidas para cada uma das linhagens para dar continuidade aos experimentos de Western Blotting e Imunofluorescência. Dentre os resultados mais relevantes obtidos com estas técnicas, pode-se citar a variação dos níveis de pS6 e Ciclina D1 para a linhagem DOK em determinados períodos. Já a linhagem SCC9 apresentou variação dos níveis de pAkt e Ciclina D1 nos períodos estudados. A linhagem SCC25 também teve as expressões de pAkt, pS6 e Ciclina D1 modificadas por LLLT. De maneira interessante, o aparecimento ou manutenção de uma isoforma de Hsp90 foi encontrado em SCC9 e SCC25 após irradiação laser. Por fim, a indução de apoptose foi detectada na linhagem SCC25. Em conclusão, pode-se dizer que a LLLT, como empregada neste estudo, foi capaz de aumentar a expressão de proteínas relacionadas à progressão e invasão em todas as linhagens estudadas. Além disso, a irradiação laser foi única, apesar de ter causado efeitos prolongados, algumas vezes até o último período estudado. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is an epithelial malignant neoplasm that accounts for approximately 500.000 new cases yearly around the world. Several studies have been conducted to elucidate the mechanisms of proliferation and invasion of this lesion, whereas the Akt/mTOR signaling pathway with its related proteins is being pointed out as one of the main pathways involved in HNSCC`s progression. Neoplastic cells, as well as cells that originate from different tissues may have their behavior modified by low level laser therapy (LLLT); however, the mechanisms through which the low level laser light interacts with these cells remain poorly understood. Thus, this study sought to evaluate the cell viability and the expression levels of Akt, pAkt, Hsp90, S6, pS6 and Cyclin D1 proteins in two oral squamous cell carcinoma cell lineages (SCC9 and SCC25) and in one oral dysplastic human keratinocyte cell line (DOK) after they had been treated with LLLT. The laser device was a semiconductor diode of Gallium and Aluminum Arsenate (GaAlAs), operating with wavelengths of 660nm (red) and 780nm (infrared), with a fixed power of 40mW and giving three different energy densities: 2.05J/cm², 3.07J/cm² and 6.15J/cm². Apoptosis was analyzed through TUNEL test and the protein expression was accessed with Immunofluorescence and Western blotting. After statistical analysis through two-way ANOVA and Tukey or Student`s T test, all of them with a level of significance of 5%, it was concluded that LLLT induced distinct behaviors to each of the studied cell lines. Increases and inhibitions in cell viabilities were detected depending on the wavelength and also on the irradiated cell line. The energy density of 2.05J/cm² produced the most significant findings over SCC9. On the other hand, in SCC25 the most relevant results were detected with 3.07J/cm², while the most prominent findings were seen with 6.15J/cm² when the cell line DOK was evaluated. In that way, these respective doses were chosen for each cell line to continue with Western blotting and Immunofluorescence. Among the most relevant findings, the variation of pS6 and Cyclin D1 levels can be cited for DOK in some evaluated periods. SCC9 presented both pAkt and Cyclin D1 variations in the studied periods. Besides that, SCC25 also had pAkt, pS6 and Cyclin D1 levels modified by LLLT. Interestingly, the appearance and maintenance of an Hsp90 isoform was found in SCC9 and SCC25 after laser irradiation. Moreover, the induction of apoptosis was detected for the SCC25 cell line. Finally, the LLLT employed herein was able to enhance the expression of proteins related to progression and invasion in all of the studied cell lines. In addition, there was a single laser irradiation, although it caused prolonged effects, sometimes through the latest evaluated period.

Les Papillomavirus Humains (HPV) sont responsables de près de 100% des cancers du col utérin. Récemment, ces HPV sont apparus comme étant aussi la cause de certaines tumeurs des voies aérodigestives supérieures, et particulièrement des carcinomes épidermoïdes de l’oropharynx. En France, la proportion des tumeurs oropharyngées HPV-induites est mal connue, notamment parce que le dépistage viral n’est pas recommandé. De plus, il est difficile d’évaluer la proportion de tumeurs HPV positives dans les tumorothèques car les échantillons tumoraux sont fixés dans du formol puis inclus en paraffine (FFIP), ce qui complexifie les techniques de détection. Nous avons, au cours de nos travaux, testé une méthode de détection des HPV à haut risque oncogène indiquée pour le traitement des frottis en phase liquide. Nous l’avons mise à l’épreuve sur des prélèvements FFIP et comparée à la technique de référence qu’est la PCR (Polymerase Chain Reaction) suivie d’une électrophorèse sur gel. Nos résultats indiquent que cette technique est applicable aux prélèvements tissulaires et apparaît même comme étant plus sensible. En France, deux tiers des patients atteints de tumeurs des VADS sont pris en charge à des stades tardifs. Ceci s’explique en partie par l’absence de dépistage organisé de ces cancers. Nous avons donc mené une étude prospective sur des patients atteints d’une tumeur des VADS afin de tester le frottis oral comme technique de dépistage des cancers mais également des infections par les HPV. Nos résultats indiquent que le frottis a une spécificité proche de celle de la biopsie (94,4%) pour le dépistage des cancers des VADS, mais une moindre sensibilité (66,7%). Cette étude nous a permis de mettre en évidence une tumeur HPV-induite dans 12,2% des cas. Parmi eux, nous avons détecté grâce à un frottis buccal (en zone saine) une infection par un HPV à haut risque oncogène dans 53,3% des cas. L’OMS a classé les HPV comme agents carcinogènes depuis 1995, et a établi que les patientes ayant développé un cancer du col utérin avaient un risque 6 fois plus élevé de développer une autre tumeur HPV-induite. Dans ce contexte, nous avons prévu une étude prospective multi-centrique visant à dépister une infection orale par un HPV oncogène chez des patientes porteuses d’une lésion pré-néoplasique ou néoplasique du col utérin. Le taux de co-infection des deux sites anatomiques est inconnu chez les femmes infectées au niveau génital. Dans la mesure où l’infection orale pourrait être à l’origine d’une seconde localisation tumorale, il semble important d’en connaître la proportion afin de proposer par la suite un suivi particulier aux populations « à risque ». Au-delà des traitements des cancers avérés se pose la question de la vaccination préventive, qui existe contre les HPV 16 et 18 dans la prévention des cancers du col utérin. Le type 16 étant retrouvé dans 90% des tumeurs épidermoïdes de l’oropharynx HPV-induites, l’extension des recommandations vaccinales apparaît comme une nouvelle question de santé publique / The Human Papillomavirus (HPV) are involved in almost 100% of cervical cancers. Recently, HPVs have been recognized as the cause of tumors of the upper aerodigestive tract, especially of squamous cell carcinoma of the oropharynx. In France, the proportion of oropharyngeal HPV-related tumors is unknown, partly because viral testing is not in guidelines. Moreover, assess the proportion of HPV-positive tumors in tumor banks is difficult because the tumor samples were fixed in formalin and embedded in paraffin (FFPE), which complicates detection techniques. We tested a high risk HPV detection method, indicated for liquid based pap smear, on FFPE samples. We compared this technique to the gold-standard : PCR (Polymerase Chain Reaction) followed by electrophoresis. Our results indicate that this technique is applicable to FFPE samples and even appears to be more sensitive. The majority of French patients (2/3) with head and neck consult with an advanced stage of disease. This is explained in part by the lack of organized screening of these cancers, contrary to breast, prostate, cervical, or colorectal cancers. But an early treatment is essential to increase the survival rate. We therefore conducted a prospective study on patients with head and neck tumors to test the oral brushing as screening cancer and HPV detection. We found tumor and/or dystrophic cells in 97.8% of patients with biopsy, and in 88.9% of patients by brushing. Compared with biopsy, our results suggested that smear has similar specificity for HPV detection in tumors (94.4%), but lower sensitivity (66.7%). This study has shown an HPV-related tumor in 12.2% of cases. Among them, we detected by brushing (in healthy area) an oral infection by high-risk HPV in 53.3% of cases. WHO has classified HPV as carcinogenic agents since 1995, and determined that patients who developed cervical cancer are six-times more likely to develop another HPV-related tumor. In this context, we have planned a multicenter prospective study to detect oral HPV infection in patients with a pre-neoplastic or neoplastic lesion of the cervix. Co-infection rate of the two anatomical sites is unknown in women infected with genital level. Insofar oral infection could be the cause of a second tumor location, it seems important to know how much women are co-infected to propose thereafter a special monitoring. The preventive vaccination, which exists against HPV 16 and 18 in the prevention of cervical cancer, is a future perspective. Because HPV 16 is found in 90% of HPV-related squamous cell carcinoma of the oropharynx, extending vaccine recommendations emerge as a new public health issue

INTRODUÇÃO: O esvaziamento cervical é parte importante do tratamento das neoplasias de cabeça e pescoço, exercendo também função de estadiamento, ao quantificar os linfonodos e verificar seu grau de acometimento pela doença. Neste estudo a quantidade de linfonodos em espécimes de esvaziamento cervical radical modificado realizados em uma série de cadáveres não formolizados foi avaliada, procurando definir parâmetros que determinem o número mínimo desejável de linfonodos em um esvaziamento cervical efetuado na prática clínica, bem como o número de linfonodos em cada nível do esvaziamento cervical. O trabalho busca também verificar se existe relação entre o número de linfonodos nos espécimes de esvaziamento cervical radical modificado e dados demográficos e antropométricos do cadáver. MÉTODOS: Estudo anatômico transversal com a realização de dissecções em 28 cadáveres não formolizados do Serviço de Verificação de Óbitos da Capital, reproduzindose a técnica de esvaziamento cervical radical modificado bilateralmente, com a retirada do tecido fibroadiposo que contém os linfonodos cervicais profundos, nível por nível, segundo a divisão e limites anatômicos preconizadas pela American Head and Neck Society e pela American Academy of Otolaryngology-Head and Neck Surgery. Os espécimes foram dissecados manualmente a fresco, pelo mesmo patologista, com separação dos linfonodos encontrados e colocação em cassetes e armazenados em frascos separados para cada nível, contendo solução de formalina tamponada a 10%. O tecido adiposo remanescente também foi incluído para avaliação posterior. A análise das lâminas coradas por hematoxilina e eosina teve a finalidade de confirmar os linfonodos dissecados manualmente e avaliar a presença de linfonodos microscópicos. RESULTADOS: A amostra analisada foi constituída por 28 cadáveres, sendo 18 (64,3%) do sexo masculino e com média de idade de 67,4 ± 10,3 anos. Quinze indivíduos foram classificados como brancos (53,6%), 12 negros/pardos (42,9%) e um amarelo (3,6%), apresentando peso médio de 59,6 ± 13,3 kg, altura média de 164 ± 9,1 cm e índice de massa corpórea (IMC) médio de 22,0 ± 3,9 kg/m2. A média do número de linfonodos encontrados nos diferentes níveis dos 56 esvaziamentos cervicais radicais modificados realizados foram: nível IA - 1,5 (IC 95%: 1,1 - 1,8), nível IB - 2,5 (IC 95%: 2,1 - 2,9), nível IIA - 7,2 (IC 95%: 6,0 - 8,5), nível IIB - 6,5 (IC 95%: 5,5 - 7,4), nível III - 6,6 (IC 95%: 5,7 - 7,4), nível IV - 8,6 (IC 95%: 7,1 - 10,1), nível V - 11 (IC 95%: 9,2 - 12,7), totalizando 43,8 linfonodos (IC 95%: 40,3- 47,4). O número de linfonodos no nível IV à esquerda apresentou maior média em indivíduos do sexo masculino em relação aos do sexo feminino (11,9 X 7,2; p=0,040 - teste de Mann-Whitney), além de ter mostrado correlação positiva com a altura (r=+ 0,396, p=0,037 - teste de correlação de Spearman). A quantidade de linfonodos no nível V à direita, e quando considerada nos dois lados do pescoço em conjunto, também teve correlação positiva com o peso (r=+ 0,417, p=0,027 e r=+ 0,278, p=0,038; respectivamente, teste de correlação de Spearman) e o IMC (r=+0,456, p=0,015 e r=+0,317, p=0,021; respectivamente, teste de correlação de Spearman) do indivíduo. O número total de linfonodos de cada esvaziamento apresentou correlação negativa com a idade (r=-0,358, p=0,007 - teste de correlação de Spearman). Não houve diferenças em relação à raça dos indivíduos. CONCLUSÕES: A análise dos dados encontrados permite delinear um parâmetro em relação ao número mínimo recomendável de linfonodos a ser recuperado em um espécime de esvaziamento cervical radical modificado, bem como em cada nível deste esvaziamento, efetuado na prática clínica. Houve associação do número de linfonodos identificados nos espécimes de esvaziamento cervical radical modificado, em algumas situações, com o sexo, altura, idade, peso e índice de massa corpórea do cadáver / INTRODUCTION: Neck dissection is an important part of the treatment of head and neck neoplasms and also perform a staging function, by quantifying the lymph nodes and verifying their degree of involvement by the disease. In this study the amount of lymph nodes in modified radical neck dissection specimens conducted in a series of non-preserved cadavers was accessed, trying to define parameters which determine the minimum desired number of lymph nodes in a neck dissection performed in clinical practice, as well as the number of lymph nodes in each level of the neck dissection. The study also seeks to determine whether there is a relationship between the number of lymph nodes in the specimens of modified radical neck dissection and demographic and anthropometric data of the cadaver. METHODS: Cross-sectional anatomical study conducted in 28 non-preserved cadavers dissected in the Serviço de Verificação de Óbitos of the University of São Paulo, reproducing the modified radical neck dissection technique bilaterally, with the removal of fibroadipose tissue that contains the deep cervical lymph nodes, level by level, according to the division and anatomical limits recommended by the American Head and Neck Society and the American Academy of Otolaryngology-Head and Neck Surgery. Specimens were manually dissected by the same pathologist, with separation of the lymph nodes, which were placed in cassettes and stored in separate vials for each level, containing phosphate buffered formalin 10% solution. The remaining fat tissue was also included for further evaluation. The analysis of the slides stained with hematoxylin and eosin aimed to confirm manually dissected lymph nodes and to determine the presence of microscopic lymph nodes. RESULTS: There were 28 cadavers; 18 (64.3%) were male and the mean age was 67.4 ± 10.3 years. Fifteen subjects were classified as caucasian (53.6%), 12 afrodescendants (42.9%) and one asian (3.6%), with average weight of 59.6 ± 13.3 kg, mean height of 164 ± 9.1 cm and mean body mass index (BMI) of 22.0 ± 3.9 kg/m2. The average number of lymph nodes found in the levels of the 56 modified radical neck dissections performed were: level IA - 1.5 (95% CI: 1.1 - 1.8), level IB - 2.5 (95% CI: 2.1 - 2.9), level IIA - 7.2 (95% CI: 6.0 - 8.5), IIB level - 6.5 (95% CI: 5.5 - 7.4), level III - 6.6 (95% CI: 5.7 - 7.4), level IV - 8.6 (95% CI: 7.1 - 10.1), level V - 11 (95% CI: 9.2 - 12.7), totalizing 43.8 lymph nodes (95% CI: 40.3 - 47.4). The number of lymph nodes in the left side level IV was higher in males compared to females (11.9 X 7.2; P=0.040 - Mann-Whitney´s test), and correlated positive with height (r=+ 0.396, P=0.037 - Spearman´s correlation test). The amount of lymph nodes in the right side level V, and also when considered both sides of the neck, had positive correlation with the weight (r=+ 0.417 P=0.027 e r=+ 0.278, P=0.038; respectively, Spearman´s correlation test) and BMI (r=+ 0.456, P=0.015 e r=+0.317, P=0.021; respectively, Spearman´s correlation test) of the individual. The total number of lymph nodes in each neck dissection had a negative correlation with age (r=-0.358, P=0.007 - Spearman´s correlation test). There were no differences in relation to the race of individuals. CONCLUSIONS: The results defined a parameter in relation to the minimum recommended number of lymph nodes to be recovered in a modified radical neck dissection specimen, as well as on each level of this dissection, performed in clinical practice. There was association among the number of lymph nodes identified in specimens of modified radical neck dissection and some demographic and antropometric features: sex, height, age, weight and body mass index of the cadaver

INTRODUÇÃO: Alterações genéticas múltiplas são comuns durante a carcinogênese e, nesse panorama, o gene supressor tumoral TP53 é um dos mais associados à transformação maligna. Recentemente, dois genes similares ao TP53, foram identificados, o TP73 e o TP63. O TP63 situa-se no cromossomo 3q e tem papel comprovado no desenvolvimento epidérmico, sendo detectado em vários tecidos humanos. Inúmeros trabalhos relacionaram a expressão da proteína p63 com carcinomas do trato aerodigestivo superior. OBJETIVOS: O presente estudo objetivou avaliar a expressão Imunoistoquímica da proteína p63 e seu valor prognóstico nos carcinomas epidermóides da laringe. CASUÍSTICA E MÉTODOS: Foram estudados retrospectivamente 127 pacientes submetidos a laringectomia total no Instituto Nacional de Câncer, Rio de Janeiro, entre 1998 e 2000. Houve 111 doentes masculinos e 16 femininos, 69 brancos e 58 não-brancos, com idade entre 36 a 93 anos, média de 59 e mediana de 58 anos. Dezenove tumores eram glóticos, 16 supraglóticos e 92 acometiam mais de um local, correspondendo a 15%, 13% e 72% respectivamente. Quanto ao estadiamento clínico, dois casos eram do estádio I (1,6%), 21 do II (16,5%), 82 do III (64,6%) e 22 do IV (17,3%). Noventa e seis pacientes (75,6%) receberam radioterapia complementar. A técnica imunoistoquímica, com anticorpos monoclonais do clone 4A4, foi utilizada para estudar a expressão da p63. O percentual de células imunocoradas positivamente foi estimado conforme os seguintes escores: 0: ausência de imunocoloração; 1: imunocoloração em < 30% das células neoplásicas; 2: imunocoloração em > 30% e < 70% das células neoplásicas; e 3: imunocoloração em > 70% das células neoplásicas. Foram observados 62 casos do escore 3 (+++), 60 do escore 2 (++), 4 do 1 (+) e 1 caso sem expressão (0), correspondendo respectivamente a 48,8%, 47,2%, 3,1% e 0,8% da amostra. Através de análises uni e multivariadas, a imunoexpressão da proteína p63 e os outros fatores de provável impacto prognóstico foram avaliados quanto ao grau de associação aos eventos recidiva e óbito. RESULTADOS: A análise multivariada identificou a imunoexpressão da proteína p63 e o envolvimento da hipofaringe como preditivas para ocorrência de recidiva e óbito pelo carcinoma. A sobrevida global foi de 73,9% em 24 meses e de 59,5% em 60 meses. A sobrevida livre de recorrência foi de 77,2% e 75,1%, e a sobrevida relacionada ao óbito pelo carcinoma foi de 79% e 67% em 24 e 60 meses respectivamente. CONCLUSÕES: Apenas a recidiva associou-se estatisticamente à expressão da proteína p63. A p63 se mostrou altamente expressa nos carcinomas epidermóides de laringe e, apesar dos poucos casos com expressão reduzida, a hipoexpressão da p63 foi preditiva de um pior prognóstico nesses doentes. / INTRODUCTION: Multiple genetic changes are common during carcinogenesis and, in this scene, the gene TP53 is one of the most associated with malignant transformation. Recently, two related genes to the TP53, were identified, the TP73 and TP63. The TP63 stands on the chromosome 3q and has a proven role in the epidermal development, being detected in several human tissues. Many work linked the expression of p63 protein with carcinomas of the upper aero-digestive tract. OBJECTIVE: The objective of this study was to evaluate the immunohistochemical expression of p63 protein and its prognostic value in squamous cell carcinomas of the larynx. CASUISTRY AND METHODS: The p63 expression has been examined in 127 patients who were submitted to total laryngectomy, with or without adjuvant radiotherapy, in the Brazilian National Cancer Institute, between 1998 and 2000. There were 111 male patients and 16 female, 69 white and 58 non-white, aged between 36 to 93 years, average 59 and median of 58 years. Nineteen tumors were glottic, 16 supraglottic and 92 affected more than one place, corresponding to 15%, 13% and 72% respectively. As to the clinical staging, two cases were stage I (1.6%), 21 of the II (16.5%), 82 of the III (64.6%) and 22 of the IV (17.3%). Ninety-six patients (75.6%) received complementary radiotherapy. The immunohistochemical technique with the use of monoclonal antibodies of clone 4A4, has been used to study the expression of p63. The percentage of positive cells was estimated as the following scores: 0: no immunostaining; 1: immunostaining in <30% of neoplastics cells; 2: immunostaining in >30% and <70% of neoplastics cells; And 3: immunostaining in >70% of neoplastics cells. Sixty two cases were observed in score three, 60 in score two 4 in score one (+) and 1 case without expression (0), corresponding respectively to 48.8%, 47.2%, 3.1% and 0.8% of the sample. Through uni and multivariate analysis, the immunoexpression of p63 protein and the other factors likely to impact prognosis were evaluated on the degree of association to recurrence and death. RESULTS: The multivariate analysis identified the immunoexpression of protein p63 and the involvement of the hypopharynx as statistically significant for the risk of recurrence and death by cancer. The overall survival was 73.9% in 24 months and 59.5% at 60 months. CONCLUSIONS: The disease-free survival was 77.2% and 75.1%, and the disease-specific survival was 79% and 67% at 24 and 60 months respectively. The p63 protein was highly expressed in squamous cell laryngeal carcinomas. In spite of few cases with reduced expression, p63 protein underexpression was statistically associated to the recurrence and may have a negative impact upon prognosis.

O câncer tem sido considerado uma doença de países desenvolvidos e em desenvolvimento, sendo que a maior parte do ônus global do câncer é observada nos países em desenvolvimento, convertendo-se em um evidente problema de saúde pública mundial. Devido a sua alta incidência, prevalência e mortalidade, o câncer de cabeça e pescoço, é considerado um dos principais tumores no Brasil e no mundo, sendo o câncer bucal um dos tipos mais incidentes, correspondendo a 10% de todos os tumores malignos, com aproximadamente 390.000 novos casos a cada ano. As taxas de incidências variam conforme as regiões do Brasil, tendo a região sudeste e sul as maiores taxas de incidência do mundo, sendo a região sudeste responsável por 42% do número total de casos o Brasil. Os fatores de risco são tabagismo, alcoolismo, hábitos alimentares, radiação solar, vírus, idade, sexo, irritação mecânica/química, nível socioeconômico além de fatores genéticos. Embasados neste contexto, o objetivo deste estudo foi verificar a prevalência, perfil clínico e epidemiológico do câncer bucal e de cabeça e pescoço de pacientes registrados no Hospital Estadual de Bauru/SP, um hospital público no interior do estado de São Paulo, através de revisão de prontuários no período de junho de 2008 à janeiro de 2011, apresentando dados como: localidade, idade, sexo, etnia, prevalência da região anatômica, sintomas, tipo de encaminhamento, tipo histológico, estadiamento, fatores de risco, tratamento, índice de óbito, sobrevida e se o paciente tinha familiares. Foram analisados 177 prontuários, sendo 54% (96) dos pacientes provenientes de Bauru/Sp. Do total de pacientes, 156(88,14%) eram do gênero masculino e 21 (11,86%) do gênero feminino, com médias de idade respectivamente de 60,2 anos e 54,0 anos. Houve predomínio de indivíduos brancos com 141 (80,20%) casos. As regiões anatômicas mais acometidas foram a hipofaringe com 34(19,20%) casos e a língua com 30(16,95%) casos. Os sintomas relatados foram emagrecimento, dor, disfagia, disfonia, rouquidão, otalgia, hemorragia oral, trismo, xerostomia, necrose e odor fétido, os quais ocorreram associados ou isolados. Apenas 1 (0,06) paciente foi encaminhado pelo dentista, e quanto a diferenciação histológica, houve predomínio de carcinoma espinocelular com 98,30% dos pacientes. Foi constatado o câncer em grau III e IV (avançado) em 114 (64,40%) pacientes, com metástase em 45,20% (80) dos casos totais. Ficou evidenciado o consumo associado do fumo e álcool em 76 (42,94%) dos prontuários. Os tratamentos predominantes foram a quimioterapia isolada ou associada à radioterapia, considerada predominante devido ao avanço da doença. Do número total de casos, 83 (46,89%) pacientes foram à óbito com sobrevida média de 1,05 anos. Fundamentados em nossos resultados, ao aumento da expectativa de vida, do envelhecimento da população e da elevada magnitude do problema, sugerimos reavaliar medidas de promoção e prevenção de saúde a população e profissionais de saúde sobre o autoexame bucal e redução do consumo de fatores de risco. Programas educacionais para populações de alto risco com auxílio das Políticas Públicas de Saúde do município em meios de comunicação acessíveis as classes menos favorecidas, podem ser fundamentais para atenuar o número de casos novos de câncer. / Cancer has been considered a disease of developed and developing countries, because of the greater part of the global cancer burden be observed in developing countries, becoming evident at a public health problem worldwide. Because of its high incidence, prevalence and mortality, cancer of the head and neck, is considered one of the main tumors in Brazil and worldwide, and oral cancer one of the most insidious types, corresponding to 10% of all malignant tumors, with approximately 390,000 new cases each year. The incidence rates vary according to region of Brazil, with the southeastern and southern highest incidence rates in the world, being the southeast accounted for 42% of the total number of cases in Brazil. The risk factors are smoking, alcohol, diet, radiation, viruses, age, gender, mechanical irritation / chemical, socioeconomic status as well as genetic factors. Grounded in this context, the aim of this study was to determine the prevalence, clinical and epidemiological profile of oral cancer and head and neck patients enrolled in the State Hospital of Bauru / SP, a public hospital in the state of São Paulo, by reviewing medical records from June 2008 to January 2011, presenting data such as location, age, gender, ethnicity, prevalence of anatomic, symptoms, type of referral, histological type, staging, risk factors, treatment, mortality was , survival and whether the patient had family. 177 records were analyzed, 54% (96) of the patients from Bauru / Sp. Of all patients, 156 (88.14%) were male and 21 (11.86%) females, with a mean age of 60.2 years respectively and 54.0 years. There was a predominance of white individuals with 141 (80.20%) cases. The anatomical regions most affected were the hypopharynx with 34 (19.20%) cases and the tongue with 30 (16.95%) cases. Reported symptoms were weight loss, pain, dysphagia, dysphonia, hoarseness, earache, oral bleeding, trismus, xerostomia, necrosis and foul odor, which occurred isolated or associated. Only 1 (0.06) patient was referred by the dentist, and the histologic differentiation predominated squamous cell carcinoma with 98.30% of the patients. Cancer was found in grade III and IV (advanced) in 114 (64.40%) patients with metastasis in 80 (45.20%) of the total cases. Evidenced the associated consumption of tobacco and alcohol in 76 (42.94%) of the charts. The treatments were predominant chemotherapy alone or combined with radiotherapy, considered predominantly due to disease progression. Of the total cases, 83 (46.89%) patients died at the median survival of 1.05 years. Based on our results, the increase in life expectancy, an aging population and the high magnitude of the problem, we suggest reevaluate measures to promote prevention and population health and health professionals about oral self-examination and reduction of risk factors . Educational programs for high-risk populations with the aid of Public Health Policies of the municipality in media accessible to the lower classes, can be critical to mitigate the number of new cancer cases.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:55:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 REBECCA FEILENBERGER DE OLIVEIRA MARTINS.pdf: 257286 bytes, checksum: 6e70b855d3a684a4e0a5686321976b67 (MD5) Previous issue date: 2006-08-08 / The present study had the objective of verifying if the treatment with ionizing rays given to patients with head and neck cancer could provoke medium-term changes in bone density of jaws. The sample covered twelve patients in treatment at the Radioteraphy Service of Araújo Jorge Hospital, in Goiânia city, Goiás, in the period of April of 2005 to January of 2006. To evaluate the risk factors associated to bone changes, the amostral population answered partly open questionnaires about their medical and oral health. The patients were submitted to oral clinic examinations and then directed to computerized tomography in the region of maxilla and mandible. All of them had malignant tumors of orophaynx and, after tomographies, were treated from injuries and lymphatic nodules with association of radio and chemotherapy. The radiation doses of the external beam ranged from 5000 to 7000 rad, in accordance with the staging of injury. After 127 to 266 days of the therapy with ionizing radiation, the sample was sent to a second computerized tomography exam in the region of jaws. The results of this inquiry had demonstrated that, in this interval of time, radiotherapy did not unchain qualitative alterations in the jaw bones that could be identificated. So, dental procedures or orthopedic and traumatologic surgeries, in mediumterm, are not contraindicated to patients treated with radiotherapy. / O presente estudo teve como objetivo verificar se o tratamento com raios ionizantes ministrado a pacientes com câncer de cabeça e pescoço poderia desencadear alterações na densidade óssea dos maxilares, a médio prazo. A amostra incluiu doze pacientes em tratamento junto ao Serviço de Radioterapia do Hospital Araújo Jorge, na cidade de Goiânia, Goiás, no período de abril de 2005 a janeiro de 2006. Para avaliar os fatores de risco associados às alterações ósseas, a população amostral respondeu a questionários semi-abertos sobre sua saúde médica e odontológica. Os pacientes foram submetidos a exames clínicos bucais e então encaminhados para exames de tomografia computadorizada na região de maxila e mandíbula. Todos possuíam tumores malignos de orofaringe e, após as tomografias, foram tratados das lesões e dos nódulos linfáticos com associação de rádio e quimioterapia. A dose de radiação do feixe externo oscilou entre 5000 e 7000 rads, de acordo com o estadiamento da lesão. Transcorridos de 127 a 266 dias da terapia por radiação ionizante, a amostra foi encaminhada para um segundo exame de tomografia computadorizada na região dos maxilares. Os resultados desta investigação demonstraram que, nesse intervalo de tempo, a radioterapia não desencadeou alterações qualitativas nos ossos maxilares passíveis de identificação. Nesse sentido, procedimentos odontológicos ou cirurgias ortopédicas e traumatológicas, a médio prazo, não estão contra-indicados a pacientes tratados com radioterapia.

Introdução: O câncer de cabeça e pescoço acomete diversas estruturas do trato aerodigestivo superior e seu tratamento pode ser multimodal ou exclusivo envolvendo cirurgia (CR), radioterapia (RDT) e quimioterapia (QT). O câncer assim como seu tratamento pode levar a diversas alterações funcionais, entre elas a limitação na abertura da boca, o trismo. Esta complicação geralmente afeta hábitos de vida diária, como alimentação e higiene oral. Assim, pode haver significativo impacto na qualidade de vida. Objetivos: Avaliar pacientes com câncer de cabeça e pescoço submetidos a tratamento cirúrgico e/ou radioquimioterápico quanto à presença de trismo, identificar a prevalência de trismo e características comuns para o seu desenvolvimento nestes pacientes, além do seu impacto na qualidade de vida. Material e Método: Estudo descritivo que avaliou pacientes do A.C. Camargo Cancer Center, tratados por câncer de cabeça e pescoço. A avaliação foi composta de anamnese, medida de máxima abertura vertical (MAV) bucal com um paquímetro, avaliação da dor pela Escala Visual Analógica (EVA) e avaliação da qualidade de vida pelo questionário de qualidade de vida da Universidade de Washington. Foram incluídos no estudo 313 participantes entre 19 e 89 anos, de ambos os sexos, diagnosticados e tratados por câncer de boca, orofaringe, seios paranasais ou nasofaringe. Foram excluídos aqueles que apresentavam recidivas ou comorbidades não controladas. Resultados: A prevalência do trismo na amostra estudada foi de 30%. O maior número de indivíduos com trismo esteve presente nos grupos que apresentavam tumores em estádio clínico mais avançado (T3, 37%; T4, 55%) que realizaram tratamento curativo combinado (CR+RDT+QT, 43%; CR+RDT, 39%; RDT+QT, 39%), e que necessitaram de sonda de alimentação enteral por mais tempo (Com trismo, Média = 71 dias; Sem trismo, Média = 44 dias). Estes dados foram significativos na análise multivariada. O trismo não apresentou relação significativa com a idade (p=0,26) ou gênero (p=0,13) dos indivíduos, localização do tumor (p=0,139), dose total (p=0,92) e modalidade da RDT (p=0,078). A necessidade de realização de reconstrução cirúrgica (p=0,0032) e a realização de fisioterapia para tratamento do trismo (p=0,0394) foram variáveis que também apresentaram significativa relação com o trismo. Pacientes que apresentaram trismo tinham significativamente pior qualidade de vida. Conclusão: Fatores relacionados ao tumor, assim como seu tratamento apresentaram papel significativo no desenvolvimento do trismo. Esta é uma complicação que afeta quase 1/3 dos pacientes tratados por câncer de cabeça e pescoço e compromete signficativamente a qualidade de vida / Introduction: Head and neck cancer (HNC) affects several structures the upper aerodigestive tract and its treatment can be uni or multimodal. It may involve surgery (S), radiotherapy (RT) and chemotherapy (CT). Cancer and its treatment can lead to several functional changes, including limitation of mouth opening, diagnosed as trismus. This complication usually affects daily living habits, such as food intake and oral hygiene. Thus, there may be a significant impact on quality of life. Purpose: To evaluate patients with HNC who underwent surgery and / or chemoradiotherapy for the presence of trismus, indentify characteristics associated with this complication and its impact on quality of life. Materials and Methods: This is a descriptive study assessing trismus in HNC patients treated at A. C. Camargo Cancer Center. The evaluations consisted of an interview, measurement of mouth opening with a caliper, pain assessment by visual analogue scale (VAS) and quality of life evaluation with the University of Washington Quality of Life Questionnaire. The study included 313 participants aged 19-89 years, of both genders, diagnosed and treated for cancer of the mouth, oropharynx, paranasal sinuses or nasopharynx. Patients who had relapses or uncontrolled comorbidities were not considered eligible for the study. Results: The prevalence of trismus in the sample was 30%. Trismus was more frequent in the groups that had more advanced clinical stage (37%, T3; 55%, T4), who underwent combined curative treatment (S + RT + CT, 43%; S + RT, 39%; RT + CT, 39%), and those who required enteral feeding tube for longer periods (with trismus, Mean = 71 days; No trismus, Mean = 44 days). These data were confirmed by multivariate analysis. No relationship was found between the presence of trismus and age (p = 0.26) or gender (p = 0.13), tumor location (p = 0.139), total dose (p = 0.92) and modality of RT (p = 0.078). The presence of trismus was correlated with surgical reconstruction (p = 0.0032) and physical therapy to treat trismus (p = 0.0394). Patients with trismus had significantly worse quality of life (UW composite scores) (p=0.021). Conclusion: Factors related to the tumor, as well as their treatment had a significant role in the development of trismus. This sequelae occurs in one third of the treated head and neck cancer patients and significantly impact quality of life

A programação epigenética do genoma por metilação do DNA, modificação das histonas e remodelamento da cromatina é crucial para o desenvolvimento e o crescimento normal dos mamíferos e alterações nesses mecanismos contribuem diretamente para a transformação maligna. Em função do papel relevante da metilação do DNA na carcinogênese, da importância e da necessidade de identificação de marcadores moleculares em tumores de cabeça e pescoço e dos resultados já obtidos pelo grupo, o presente trabalho teve por objetivo geral investigar o perfil de metilação de ilhas CpG em carcinomas primários de cabeça e pescoço (CECP), bem como identificar e iniciar estudos funcionais de biomarcadores candidatos para diagnóstico e prognóstico desses tumores. Alguns genes previamente descritos com padrões anormais de metilação em neoplasias humanas (CDH1, CDH13, DAPK, CDKN2A, RASSF1A, SOCS3 e TIMP3), além de outros dois genes (MX1 e SLC15A3) identificados em nosso estudo anterior, foram analisados em amostras normais e margens cirúrgicas de CECP por meio da técnica de pirosequencimento de DNA após tratamento com bissulfito de sódio. As análises estatísticas não mostraram diferenças significativas para a maioria dos genes analisados, com exceção do gene SLC15A3, que apresentou diferença significativa (p<0,05) entre tumores e amostras de sangue de doadores saudáveis. Diferentemente, os resultados obtidos com a metodologia de PCR-MSP em nosso trabalho anterior mostraram que o gene MX1 está metilado em CECP. Os estudos funcionais do MX1, por RNA de interferência, ensaios de migração e citometria de fluxo mostraram que seu produto contribui para migração e proliferação celular, e talvez para resistência à apoptose. Os resultados sugeriram que o nível de expressão do MX1 pode ser um preditor do potencial metastático em carcinoma epidermóide / The genome epigenetic programming by DNA methylation, histone modification and chromatin remodeling is crucial for normal growth and development in mammals and changes in these mechanisms contributes directly to malignant transformation. Regarding the role of DNA methylation in carcinogenesis, the importance and necessity for the identification of molecular markers in head and neck tumors, and the results already obtained by the group, this study was aimed at investigating the methylation profile of CpG islands in primary head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC), and to identify and initiate functional studies of candidate biomarkers for diagnosis and prognosis of these tumors. Therefore, some genes previously described with abnormal methylation pattern in humans tumors (CDH1, CDH13, DAPK, CDKN2A, RASSF1A, and TIMP3 SOCS3), and two other genes (MX1 and SLC15A3) identified in our previous study were analyzed in normal samples, surgical margins, and in HNSCC by pyrosequencing after sodium bisulfite treatment. The statistical analysis showed no significant differences for most of analyzed genes, except for the SLC15A3, which showed significant difference (p <0.05) between tumors and blood samples from healthy donors. However, our earlier results showed a higher frequency of MX1 hypermethylation in primary HNSCC using the PCR-MSP methodology. To gain a better understanding of the role MX1 in cancer biology we investigated whether a downregulation of MX1 by interference RNA contribute to apoptosis resistance and cell migration during cancer development. Wound healing and flow cytometry assays were performed to determine changes in cell motility, death and cell cycle in SCC cells. The results indicated that low levels of MX1 could regulate the cell cycle, increase proliferation, and enhance tumor cell migration in HNSCC cell lines, but it might not contribute to apoptosis resistance. It also suggests that the level of MX1 expression may be a predictor of metastatic potential in HNSCC