Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-15Bitstream added on 2014-06-13T19:56:59Z : No. of bitstreams: 1 000748693.pdf: 2194323 bytes, checksum: 02886527a75b634177bba3e9ae53c91b (MD5) / A incidência do adenocarcinoma do colo do útero (AC) está aumentando em muitos países. A associação entre a infecção pelo Papillomavirus Humano (HPV) e o AC ainda permanece incerta. A imunoistoquímica pode auxiliar no diagnóstico nos casos duvidosos, pois algumas condições benignas reativas podem mimetizar processos neoplásicos. Marcadores como bcl-2, Ki-67 e proteína p16INK4A (p16) já foram descritos para ajudar nas dúvidas relacionadas ao epitélio glandular cervical. Trabalhos recentes demonstraram a importância da adição da marcação da proteína Ciclina D1 ao painel imunoistoquímico. A Ciclina D1 é uma proteína sensor chave e integrador dos sinais extracelulares nas células em início até meados da fase G1 do ciclo celular, sendo importante na regulação da proliferação e diferenciação celular. Foram estudados 74 casos de biópsias com diagnóstico de adenocarcinoma de colo do útero, sendo 24 de adenocarcinoma cervical in situ e 50 de adenocarcinoma cervical invasor. No grupo controle, foram incluídas 79 biópsias de colo do útero que continham endocérvice normal ou em condições benignas reativas. A pesquisa de HPV nas biópsias foi realizada pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os primers específicos (MY09/11 e GP5+/GP6+) e a genotipagem foi realizada empregando-se a técnica de PCR Multiplex utilizando primers específicos para os genótipos 6, 16, 18 e 33. A imunoistoquímica foi realizada nos 74 casos com diagnóstico de adenocarcinoma cervical (tipo in situ e invasor) para os marcadores Ciclina D1, proteína p16, Ki-67 e bcl-2 e em 79 casos controle para a Ciclina D1. O DNAHPV foi observado em 100% dos casos de adenocarcinoma cervical. O genótipo mais frequente foi o HPV18. A Ciclina D1 se apresentou negativa nos casos da doença e positiva nos casos benignos e reativos. O painel imunoistoquímico associando Ciclina D1, p16 e Ki-67 pode ser ferramenta útil na... / The incidence of cervical adenocarcinoma (AC) is increasing in many countries. The association between Human Papillomavirus (HPV) infection and the AC remains uncertain. Immunohistochemistry may help in the diagnosis in doubtful cases, because some benign reactive conditions can mimic neoplastic processes. Markers such as bcl-2, Ki-67 and protein p16INK4A (p16) have been described to assist with questions related to cervical glandular epithelium. Recent studies have shown the importance of adding protein labeling Cyclin D1 into immunohistochemical panel. The Cyclin D1 protein is a key sensor and integrator of extracellular signals into cells in early to mid G1 phase of the cell cycle, which is important in the regulation of cell proliferation and differentiation. We studied 74 patients with biopsy diagnosis of adenocarcinoma of the cervix, 24 of cervical adenocarcinoma in situ and 50 invasive cervical adenocarcinoma, The control group included 79 cervical biopsies containing endocervix normal or benign reactive conditions. The research of HPV in biopsies was performed by the polymerase chain reaction (PCR) using specific primers (MY9/11 and GP5 + / GP6 +) and genotyping was carried out using the Multiplex PCR using primers specific for genotypes 6, 16, 18 and 33. Immunohistochemistry was performed in 74 cases diagnosed with cervical adenocarcinoma (type in situ and invasive) for markers Cyclin D1, p16, Ki-67 and bcl-2, and 79 cases control for Cyclin D1. The HPV DNA was observed in 100% of cases of cervical adenocarcinoma. The most common genotype was HPV18. The Cyclin D1 was found negative in cases of illness and positive in benign and reactive samples. The immunohistochemical panel associating Cyclin D1, p16 and Ki-67 may be useful tool in the characterization and diagnosis of cervical adenocarcinoma

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:08:38Z : No. of bitstreams: 1 nunes_et_me_rcla.pdf: 1014029 bytes, checksum: 950755006ea9299ef56aac556c21f073 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As glândulas salivares dos carrapatos são órgãos importantes na transmissão de patógenos a seus hospedeiros, entretanto, o conhecimento das mudanças morfofisiológicas que nelas ocorrem durante o período de alimentação são limitados. Neste trabalho estudou-se as glândulas salivares de fêmeas de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus por meio de técnicas de morfologia, histoquímica e citoquímica de luz e ultra-estrutural em fêmeas em dois diferentes estágios de alimentação (inicial: 24 a 48 horas de infestação, peso inferior a 0,03g e semiingurgitado: 4 a 5 dias de infestação, peso entre 0,13g e 0,25g), de modo a verificar as mudanças que ocorreriam no tecido glandular neste período e identificar quando teria início o processo de degeneração, além de estabelecer que tipo de morte celular estaria envolvida. As glândulas salivares das fêmeas em início de alimentação mostraram suas células fortemente positivas para ATPase e eficientes na exclusão de corante vital, estando portanto, ativas ou apenas em início de degeneração. Os núcleos, de maneira geral, apresentaram-se preservados, sendo assim, descartada a ocorrência de morte celular neste estágio. A localização da fosfatase ácida demonstrou a participação desta enzima na atividade metabólica destes órgãos, regulando o processo secretor e degradando proteínas. Fêmeas no estágio semiingurgitado apresentaram glândulas com características de degeneração, como perda das especializações de membrana, presença de figuras mielínicas, vacúolos autofágicos, lisossomos, além de alterações nucleares como condensação e marginalização cromatínica, formação de blebs e chegando à fragmentação nuclear. À medida que o processo de alimentação avançou, houve aumento da enzima fosfatase ácida, entretanto, os ácinos mantiveram-se fortemente ATPase positivos. / The ticks salivary glands are important organs to the pathogens transmission to their hosts, however, the knowledge regarding the morphophysiological changes which occur in these structures during the feeding period are limited. In this work, the salivary glands of the Rhipicephalus (Boophilus) microplus female ticks were studied, using morphological,histochemical and ultrastructural citochemistry techniques in individuals at two different feeding stages (initial: 24-48 hours of attachment; weigh lower than 0.03g, and semi-engorged : 4-5 days of attachment; weigh around 0.13 and 0.25g ), in attempt to verifying the changes that would occur in the glandular tissue at this feeding period and identifying when the degeneration process would start, besides establishing which cell death type would be involved. The salivary glands from females at beginning of feeding showed their cells strongly positive to ATPase and efficient for the vital stain exclusion, being thus, active or at initial stages of degeneration. The nuclei, in a general way, present themselves preserved, being thus discarded the signs of the apoptosis occurrence in this stage. The acid phosphatase localization demonstrated this enzyme participation in the metabolic activity of these organs, regulating the secretory process and degrading proteins. Females at semi-engorged stage showed glands with degenerative characteristics, as loss of membrane especialization, presence of mielinic figures, autophagic vacuoles, lysosomes, besides nuclear alterations as chromatin condensation and marginalization, blebs formation and nuclear fragmentation. As the feeding process progressed, there was a acid phosphatase enzyme increase, however, the acini maintained strongly ATPase- positive. The results here obtained showed that the R. (B.) microplus salivary glands in females at... (Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:11:24Z : No. of bitstreams: 1 tiosso_cf_me_jabo.pdf: 436744 bytes, checksum: 79836ae4ce26da0a2ba481a0fe57e375 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O estudo dos tumores mamários em cadelas revela-se como um excelente modelo para a investigação das neoplasias mamárias em mulheres e tanto no homem quanto nos animais a resposta imune pode interferir no desenvolvimento de neoplasias. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia e estimulação do sistema imune celular em tumores mamários de fêmeas caninas por meio da expressão de CD4, CD8, CD4+CD25+ (Foxp3), CD28, CD152 e CD56 (NK). A avaliação da expressão desses marcadores foi avaliada por imunoistoquimica, utilizando-se o método estreptoavidina-biotina-peroxidase. Para a realização desse estudo foram coletadas 20 amostras de tumores mamários de fêmeas caninas e essas divididas de acordo com a classificação histopatológica em 2 grupos: 10 carcinomas simples e 10 carcinomas complexos. Em relação aos resultados não se observou diferenças quanto à quantificação das células imunomarcadas quando comparadas segundo o tipo tumoral. No caso dos carcinomas simples evidenciou-se diferença entre a quantificação das células imunomarcadas (P< 0,05) pelo anticorpo CD28 (p=0,03) e Foxp3 (p=0,01) sendo menores que todas as demais marcações. Já para os carcinomas complexos houve diferença entre a quantificação das células imunomarcadas (P= 0,05) pelo anticorpo CD-152 que apresentou valor maior que as demais marcações com exceção do CD8. Os marcadores CD28, CD56 e Foxp3 foram menores que o CD8 (p=0,01) sendo o Foxp3 menor que todos os outros marcadores. No presente estudo observou-se que existe um controle negativo do sistema imune em ambos os casos, porém esse controle negativo foi mais evidente no carcinoma complexo / The mammary tumor study in female dogs is revealed as an excellent model for the investigation of breast tumors in humans. On both species, the immune system can interfere on neoplasia progression. The aim of this study was to evaluate the immunolocalization and quantification of CD4, CD8, CD4+CD25+ (Foxp3), CD28, CD152 and NK in tumour lymphocyte infiltration, to evaluate the efficacy of stimulation and immune system defense in canine mammary carcinoma. The expression of these markers using immunohistochemistry was made by streptoavidin-biotin peroxidase method. The tissues were collected from twenty mammary carcinomas, subdivided in ten simple carcinomas and ten complex carcinomas of twenty female dogs. This study identified no significant differences on quantification of positive cellular staining in simple carcinoma compared with complex carcinoma. The samples of simple carcinoma resulted significant differences on positive staining between the antibodies CD28 (p=0,03) and Foxp3 (p=0,01) and these markers revealed less quantitative staining compared with the others markers (CD4, CD8, CD152 and NK). The samples of complex carcinoma resulted significant differences on cellular staining quantification by the antibody CD152 (p<0,05) compared with the others markers (CD4, Foxp3, CD28, and NK) with exception when compared with CD8. The immune quantification of positive cellular staining about the markers CD28, CD56 and Foxp3 were smaller than CD8 (p=0,01), and the Foxp3 was smallest than those others markers. It was concluded that exist a negative control of immune system to complex and simple mammary carcinoma, but, this negative control was more significant in female dogs with complex mammary carcinoma

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-20Bitstream added on 2014-06-13T20:11:29Z : No. of bitstreams: 1 vitaliano_sn_me_jabo.pdf: 2132952 bytes, checksum: f71337d8a4f675ed29371324f60f293f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho objetivou estudar a susceptibilidade do carcará (Caracara plancus) frente à infecção experimental pela amostra ME49 de Toxoplasma gondii pela observação da sintomatologia clínica, análise dos parâmetros hematológicos, estudo da cinética de anticorpos IgG anti-T. gondii, e constatação da presença do parasito nos diversos tecidos utilizando a imunoistoquímica, imunofluorescência direta em tecidos, bioensaio em camundongos e PCR. Sete carcarás soronegativos para anticorpos anti-T. gondii foram separados em dois grupos: G1 (grupo infectado - 5 aves) e G2 (grupo controle - 2 aves). As aves do grupo G1 foram alimentadas durante três dias consecutivos com roedores Calomys callosus previamente infectados com T. gondii e as aves do grupo G2 foram alimentadas com roedores não infectados. As aves infectadas não apresentaram sintomas clínicos de toxoplasmose, tampouco alterações nos parâmetros hematológicos. Todas as aves infectadas soroconverteram. A soroconversão das aves experimentalmente infectadas ocorreu a partir do sétimo dia pós-infecção, os picos iniciais na produção de anticorpos IgG anti-T. gondii ocorreram entre 15 e 30 dias pós-infecção sendo que em seguida houve uma tendência de queda dos títulos de anticorpos. No momento da necropsia não foram encontradas lesões sugestivas da infecção por T. gondii. Não foi observado no exame histopatológico a presença do parasito nos diversos tecidos amostrados das aves infectadas, entretanto em uma das aves do grupo não infectado e sorologicamente negativa para anticorpos anti-T. gondii, foi encontrado um cisto tecidual na musculatura. Pelas técnicas de imunoistoquímica e imunofluorescência direta em tecidos o parasito foi encontrado em pequeno número em diversos tecidos, porém tanto nas aves do grupo infectado quanto nas aves do grupo controle. Utilizando o bioensaio em camundongos... / The present study aimed to evaluate the susceptibility of crested caracara (Caracara plancus) to experimental infection with ME49 strain of Toxoplasma gondii, through clinical symptoms, hematological parameter analysis, kinetics of specific IgG antibodies to T. gondii, and parasite detection by immunohistochemistry, direct immunofluorescence, bioassay, and PCR. Seven crested caracara, seronegative to T. gondii antibodies, were separated into two groups: G1 (infected group - 5 birds), and G2 (control group - 2 birds). G1 birds were fed during three successive days with Calomys callosus previously infected with T. gondii, and G2 birds were fed with non-infected rodents. The infected birds did not present clinical symptoms, nor significant changes in hematological parameters. All infected birds had antibody titers to T. gondii. IgG antibodies to T. gondii were first detected at 7 dpi, with production peaks between 15 and 30 dpi, which were followed by a sharp decrease in detectable antibodies. No gross lesions sugestive of T. gondii infection were observed. By histopatological examination, it was not possible to observe the presence of the parasite in the infected birds' organs, however, in one bird of the control group, a T. gondii tissue cyst was visualized in muscle. By immunohistochemistry and direct immunofluorescence, the parasite was found in small number in different organs, although in animals from both groups. The presence of T. gondii was confirmed in heart samples of two bioassayed birds, both from the infected group. In this study, the experimentally infected crested caracaras did not show clinical symptoms, alteration on hematological parameters and the parasite was found in small numbers in the organs of the birds, for these reasons the crested caracara were resistant to T. gondii infection.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-02Bitstream added on 2014-06-13T19:09:58Z : No. of bitstreams: 1 leite_jhac_me_jabo.pdf: 489211 bytes, checksum: 6748aff2b7e521597743026dd45035c5 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo teve por objetivo correlacionar as alterações laboratoriais, histopatológicas e a presença de linfócitos T CD3+ e linfócitos B CD79+, com a presença de Leishmania sp no tecido renal de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral. Para tanto foi utilizado um grupo (G1) constituído por 24 animais com formas amastigotas de Leishmania sp. no tecido renal, e outro (G2) composto por 43 cães sem evidências imuno-histoquímicas da presença do parasito nos rins. A prevalência de doença renal na população estudada foi de 100% nos animais de G1 e 56,09% de G2. Todos os cães de G1 e 53,6% dos cães de G2 possuíam relação proteína/creatinina urinária (P/C U) maior que 0,5, evidenciando-se uma correlação positiva entre a ocorrência de proteinúria intensa e a presença de Leishmania sp. no tecido renal (p<0,001). Todos os cães de G1 e 88,4% dos cães de G2 apresentavam alterações glomerulares, sendo que a presença do parasito nos rins esteve correlacionada com uma maior prevalência e intensidade das lesões (p<0,001). Imunomarcações para linfócitos T CD3+ foram observadas em 100% dos cães do grupo 1 e 97,7% do grupo 2, havendo uma correlação entre a presença de formas amastigotas no tecido renal e a intensidade do infiltrado inflamatório (p<0,0005). Imunomarcações para linfócitos B CD79+ foram observadas em todos os cães do grupo 1 e em 55,8% do grupo 2 (p < 0,0001). Nos cães com parasitos no tecido renal observou-se uma maior intensidade do infiltrado de linfócitos B (p<0,0001). A presença de Leishmania sp, linfócitos T CD3+ e de linfócitos B CD79+ nos rins de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral confirmam a participação do parasita, da imunidade celular e da imunidade humoral na patogênese da lesão renal / The aim of this study was to correlate the laboratory and histopathological changes and the presence of CD3+T and CD79+ B cells with the presence of Leishmania sp in the renal tissue of dogs naturally affected by visceral leishmaniasis. For this purpose two groups were used: G1 with 24 dogs with amastigotes of Leishmania sp. in the renal tissue, and G2 consisting of 43 dogs with no immunohistochemical evidence of the presence of the parasite in the kidneys. The prevalence of renal disease in the population studied was 100% in G1 and 56.1% in G2. All dogs from G1 and 53.6% of the dogs from G2 had urine protein/creatinine ratio (U/PC) > 0.5, demonstrating a positive correlation between the occurrence of severe proteinuria and the presence of Leishmania sp. in renal tissue (p <0.001). All dogs from G1 and 88.4% of the dogs from G2 had glomerular lesions, and the presence of the parasite in the kidney was correlated with a higher prevalence and intensity of the lesions (p <0.001). Immunostaining for CD3+ T cells were observed in 100% of the dogs from G1 and in 97.7% of G2. There was a correlation between the presence of amastigotes in renal tissue and the intensity of the inflammatory infiltrate (p <0.0005). Immunostaining for CD79+ B cells were observed in all dogs from G1 and in 55.8% of the dogs from G2 (p <0.0001). Dogs with parasites in the renal tissue presented a greater intensity of B cells infiltrate (p <0.0001). The presence of Leishmania sp, CD3+ T cells and CD79+ B cells in the kidney of dogs naturally affected by visceral leishmaniasis confirmed the participation of the parasite, cellular immunity and humoral immunity in the pathogenesis of renal injury

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-12-02T15:05:49Z No. of bitstreams: 1 2014_MarciaCristinaOliveiradaRocha.pdf: 4612464 bytes, checksum: a165c67c0f9b900d45eb357bc3724bff (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-12-02T15:16:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_MarciaCristinaOliveiradaRocha.pdf: 4612464 bytes, checksum: a165c67c0f9b900d45eb357bc3724bff (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-02T15:16:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_MarciaCristinaOliveiradaRocha.pdf: 4612464 bytes, checksum: a165c67c0f9b900d45eb357bc3724bff (MD5) / O câncer de mama é o principal fator de morte nos países desenvolvidos e está em segundo lugar nos países em desenvolvimento, sendo o mais comum entre as mulheres. Com o aumento da incidência do câncer de mama e suas limitações terapêuticas, faz-se necessário uma busca por alternativas. Assim, a nanobiotecnologia está a progredir rapidamente, de modo a contribuir na resolução das limitações observadas na terapia convencional. O citrato de ródio II [Rh2(H2cit)4], um composto metálico, descrito como um análogo a cisplatina pertencente à família dos carboxilatos de ródio, apresentou atividade antitumoral em carcinoma ascítico de Ehrlich, entretanto possui sua atividade limitada devido à sua toxicidade. Portanto, a associação do citrato de ródio (II) a nanopartículas magnéticas [Magh-Rh2(H2cit)4], representa uma estratégia terapêutica que pode reduzir a toxicidade do citrato de ródio e, assim, melhorar sua ação terapêutica. Um dos fatores relacionados à progressão desta doença relaciona-se ao processo de degradação da matriz extracelular. Células tumorais tem a habilidade de obter as condições necessárias para crescer e sobreviver, promovendo processos de degradação de proteínas da matriz extracelular, como a laminina e fibronectina. O objetivo deste trabalho foi verificar se os tratamentos com Rh2(H2cit)4, Magh-Cit e Magh-Rh2(H2cit)4possuem alguma influência na modulação da expressão das proteínas laminina e fibronectina. Foram injetadas células da linhagem de carcinoma mamário 4T1 para o estabelecimento do tumor na mama de camundongos BALB/c fêmeas. Após 14 dias, os animais foram tratados com Rh2(H2cit)4 livre (8 mg/kg), Magh-Rh2(H2cit)4 (8 mg/kg de citrato de ródio e 216 mg/kg de ferro) e nanopartículas de maghemita (Magh-Cit) (216 mg/kg de ferro), por administração intratumoral. Os tratamentos foram realizados a cada dois dias, totalizando cinco aplicações. Os pesos dos animais não foram alterados com os tratamentos. Nos parâmetros bioquímicos houve uma redução significativa de transaminase pirúvica nos animais controle com tumor e tratados com Magh-Rh2(H2cit)4. Nos parâmetros hematológicos foi observada uma redução do volume plaquetário médio nos animais tratados com Magh-Cit e Magh-Rh2(H2cit)4 e um aumento significativo na contagem de leucócitos nos tratamentos com Magh-Cit e Rh2(H2cit)4. Não foram observadas diferenças significativas no volume e peso do tumor. Quanto à genotoxicidade, foi observado um aumento significativo da fragmentação do DNA e um aumento na proporção de células que se encontravam na fase G1 dos animais com tumor que não receberam tratamento. A expressão das proteínas laminina e fibronectina, foi analisada por imunohistoquímica e não foram observadas diferenças significativas entre os grupos. Os genes codificantes de laminina e fibronectina analisados por RTq-PCR, não apresentaram amplificação, possivelmente por ter uma baixa quantidade de transcritos, portanto, não sendo possível sua detecção. Os tratamentos não produziram uma redução significativa no tumor. Acredita-se que com o ajuste adequado da dose, essas composições podem apresentar um potencial terapêutico para o câncer de mama. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Breast cancer is the leading factor of death in developed countries and is on the second place in developing countries, and the most common among women. To the increased incidence of breast cancer and its therapeutic limitations it is necessary a search for alternatives. Thus, nanobiotechnology is progressing rapidly in order to solve these limitations of conventional therapy. The rhodium (II) citrate [Rh2(H2cit)4], a metal compound, described as a cisplatin analogue belonging to the family of the carboxylates of rhodium showed antitumor activity in Ehrlich ascites breast carcinoma, however, it has limited activity due to its toxicity. Therefore, the association of rhodium (II) citrate with magnetic nanoparticles [Magh-Rh2(H2cit)4] could represent a therapeutic strategy that can reduce the toxicity of rhodium citrate and improve a therapeutic action. One of the factors related to the progression of this disease is the process of extracellular matrix degradation. Tumor cells have the ability to obtain the necessary conditions for growth and survival, promoting the degradation processes of extracellular matrix proteins, such as laminin and fibronectin. The objective of this study was to determine if the treatments with, Rh2(H2cit)4, Magh-Cit and Magh-Rh2(H2cit)4 have some influence in modulating the expression of laminin and fibronectin proteins. 4T1 mammary carcinoma cells were used for establishing the tumor breast in BALB/c mice. After 14 days, animals were treated with free rhodium (II) citrate, rhodium (II) citrate loaded maghemite nanoparticles and maghemita nanoparticles by intratumoral administration. Treatments were carried out every two days, a total of five applications. The animal weights were not changed with the treatments. Biochemical parameters had a significant reduction of pyruvic transaminase in control animals with tumor and treated with Magh-Rh2(H2cit)4. Hematological parameters has a reduction in mean platelet volume in animals treated with Magh-Cit and Magh-Rh2(H2cit)4 and a significant increase in leukocytes count in the treatments with Magh-Cit and Rh2(H2cit)4 was observed. No significant differences in the volume and weight of tumors were observed. About genotoxicity, there were a significant increase in DNA fragmentation and an increase in the proportion of cells that were in the G1 phase of the non-treated animals. The expression of laminin and fibronectin proteins was analyzed by immunohistochemistry and no significant differences were observed between groups. The laminin and fibronectin genes, analyzed by RTq-PCR, showed no amplification, possibly by having low amount of these transcripts, so it was not possible to detect. The treatment did not produce a significant reduction in the tumor. It is believed that with appropriate dose adjustment, these compositions may have a therapeutic potential for breast cancer.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Carolina Campos (carolinacamposmaia@gmail.com) on 2009-11-13T19:56:50Z No. of bitstreams: 1 Sinthia Maria Benigno Puttini.pdf: 862377 bytes, checksum: e105e0b4c7b45b25d93c695e82404996 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2009-11-15T16:25:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Sinthia Maria Benigno Puttini.pdf: 862377 bytes, checksum: e105e0b4c7b45b25d93c695e82404996 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-11-15T16:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sinthia Maria Benigno Puttini.pdf: 862377 bytes, checksum: e105e0b4c7b45b25d93c695e82404996 (MD5) Previous issue date: 2006 / As telas de polipropileno (PP) e politetrafluoretileno expandido (PTFEe) representam os biomateriais mais comumente utilizados no reparo de hérnias da parede abdominal. O implante de próteses modifica o processo de cicatrização. Além dos mecanismos celulares, vários mediadores químicos estão envolvidos no processo de reparo tecidual. Apesar da resposta inflamatória desencadeadas pela presença de telas implantadas no espaço intraperitoneal já ter sido descrita, mediadores químicos envolvidos neste processo ainda não foram demonstrados. O objetivo do estudo foi avaliar a resposta inflamatória desencadeada pela presença destes biomateriais cirurgicamente implantados no espaço intraperitoneal de camundongos. Foram utilizados 32 camundongos isogênicos machos, distribuídos em 2 grupos: PP (implante de telas de PP) e PTFEe (implante de telas de PTFEe) e sacrificados no 5º, 10º, 20º e 30º dia de pós-operatório (DPO). Os fragmentos retirados foram preparados para análise histopatológica utilizando coloração Hematoxilina/Eosina e imunohistoquímica para demonstração de óxido nítrico sintase induzida (iNOS), superóxido dismutase 1 (SOD1), ciclooxigenase 2 (COX2), fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e inteleucina 8 (IL-8). As telas de PP determinaram reação cicatricial, com total integração da tela aos tecidos adjacentes, enquanto as telas de PTFEe determinaram intensa reação tipo corpo estranho, com encapsulamento da tela pelo tecido conjuntivo e células gigantes distribuídas em torno da tela. A reação inflamatória foi mais intensa no grupo PP nos parâmetros: neoformação vascular, edema, necrose e fibrose. A migração celular de macrófagos e polimorfonucleares foi mais intensa no grupo PTFEe com 5 dias e 10 dias respectivamente, mas com 30 dias, a presença destas células foi mais intensa no grupo PP. A expressão das enzimas iNOS, SOD1, COX-2 e das citocinas TNF-α e IL-8 foi mais intensa no grupo PP em relação ao grupo PTFEe. As enzimas e citocinas estudadas estiveram presentes mesmo após 30 dias. A expressão de enzimas pró-inflamatórias no processo de cicatrização decorrente da presença de biomateriais sugere a presença de substâncias agressoras como radicais livres de oxigênio, óxido nítrico e prostaglandinas que podem estar envolvidos nas complicações relacionadas ao uso de telas. A forte presença das citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-8) com 30 dias sugere que o processo de inflamação persiste cronicamente e difere de acordo com o material implantado. Considerando os parâmetros utilizados neste estudo, a resposta inflamatória desencadeada pelas telas de polipropileno cirurgicamente implantadas no espaço intraperitoneal de camundongos foi mais intensa que as telas de politetrafluoretileno expandido. __________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Polypropylene and expanded polytetrafluoroethylene meshes represent the two most common biomaterials used in the repair of abdominal wall hernias. Prosthesis implanted into abdominal wall modify the scarring process. Beyond cellular mechanisms, chemical mediators are involved in the normal repair process. Although the inflammatory response to these biomaterials had been described, chemical mediators involved in this process have not been demonstrated yet. The aim of this study was to evaluate the inflammatory response to these biomaterials implanted into the abdominal wall of mice. Thirty two isogenic male mice were used, divided into two groups: PP (polypropylene mesh) and PTFEe (expanded polytetrafluoroethylene mesh). Each group of 4 animals were killed with 5, 10, 20 and 30 days after operation. Specimens of prosthesis and attached neoformed tissue were prepared for light microscopy using haematoxylin-eosin stain and immunohistochemical to identify the inducible nitric oxide synthase (iNOS), superoxide dismutase type 1 (SOD1), cyclooxigenase-2 (COX-2), tumor necrosis factor alfa (TNF-α) and interleukin 8 (IL-8). The PP group showed total integration of the mesh to the tissue, occupying all the internodal spaces while the PTFEe group showed foreign body reaction with gigantic cells and the mesh appeared to be encapsulated by connective tissue. The inflammatory response was significantly more strong in the PP group about angiogenesis, edema, necrosis and fibrosis. The macrophage and polymorphonuclear migration was bigger in the PTFEe group with 5 and 10 days after operation, but with 30 days these cells were more pronounced in the PP group. iNOS, SOD1, COX-2, TNF-α and IL-8 were more pronounced in the PP group. The enzymes and citokines studied were expressed even after 30 days of the operation. The presence of pro-inflammatory enzymes in the scarring process to biomaterials suggest the presence of agressive substances like reactive oxygen species, nitric oxide and prostaglandins that may be involved in the complications related to meshes. The strong presence of pro-inflammatory cytokines with 30 days after operation suggests that the inflammatory process persist chronically and is different according to the implanted material. In this study, the inflammatory response to polypropylene mesh implanted into the abdominal wall of mice was greater than that associated with PTFEe implantation.

Orientadores: Patricia Sabino de Matos, Konradin Metze / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T07:31:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_RitadeCassia_D.pdf: 3204202 bytes, checksum: 19b68934360416ff1710b9848a450ced (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O diagnóstico diferencial entre algumas lesões da tireóide é, muitas vezes, difícil de ser determinado, mesmo diante de diversas amostras de tecido. O propósito deste estudo foi o de investigar até que ponto a análise de textura da cromatina em cortes histológicos de rotina contribui para o diagnóstico diferencial entre lesões foliculares da glândula tireóide. Entraram no estudo cortes histológicos corados com hematoxilina-eosina de 12 nódulos adenomatosos hiperplásicos (NA), 18 adenomas foliculares (AF), 24 carcinomas foliculares mínimamente invasores (CFMI) e 22 variantes foliculares do carcinoma papilífero (VFCP). As amostras de tecido utilizadas foram analisadas morfologicamente por meio de estudo histológico e estudo imunoistoquímico pela expressão de diferentes proteínas ou marcadores. Os marcadores utilizados foram HBME-1, CK-19 e galectina-3. Em cada caso 100 núcleos foram aleatoriamente escolhidos, digitalizados e segmentados. A estrutura dos núcleos foi descrita por morfometria, densitometria e por variáveis derivadas da matriz de co-ocorrência. Sexo, idade do paciente e metástases foram informações pesquisadas. Os resultados da análise de imagem computadorizada foram comparados com aqueles obtidos por meio de estudo imunoistoquímico, na distinção das lesões foliculares benignas e malignas da tireóide. Os dados foram comparados por análise de variância (nível de significância p<0,05). As amostras sugerem que o HBME-1 foi um marcador mais sensível quanto à malignidade. Entretanto, o uso dos três marcadores, num painel, pode ser útil em casos específicos, como por exemplo, na diferenciação de lesões foliculares, com referência especial à variante folicular do carcinoma papilífero. Dados descritos como fatores prognósticos, nas lesões foliculares malignas, não se mostraram significantes para discriminar o carcinoma folicular da variante folicular do carcinoma papilífero. As variáveis de morfometria não apresentaram grande valor discriminante, exceto, pelo P5FF4 (quinto percentil do fator de forma) que estabeleceu diferenças significantes entre AF e VFCP e entre CFMI e VFCP. Variáveis densitométricas demonstraram diferenças significantes entre NA e AF, NA e CFMI, AF e VFCP, AF e CFMI e entre CFMI e VFCP. Variáveis derivadas da matriz de co-ocorrência demonstraram diferenças entre os subgrupos, mas somente o P5Energy (quinto percentil da variável ?energia?), demonstrou diferença entre AF e CFMI. Ainda a variável r2Mink (grau de aproximação da dimensão fractal de Minkowski) diferenciou lesões benignas de malignas (NA e CFMI, NA e VFCP, AF e CFMI, AF e VFCP). A análise de textura pôde auxiliar na discriminação entre lesões benignas e malignas da tireóide principalmente quando se tratava da discriminação entre NA ou AF e VFCP, na qual a análise histológica, baseada em características nucleares pode trazer grandes dificuldades. Por outro lado, o diagnóstico entre AF e CFMI é difícil e não se baseia em características nucleares, mas no achado de invasão capsular ou vascular. Entretanto, nestes casos, as variáveis 'energia' e r2Mink, contribuíram para o diagnóstico diferencial. Portanto, a análise de imagem computadorizada pode ser considerada como uma ferramenta que auxilia no diagnóstico diferencial de lesões foliculares da tireóide, somando-se à interpretação morfológica e imunoistoquímica / Abstract: The differential diagnosis between some thyroid lesions is often difficult to determine, even with permanent sections. The purpose of this study was to find out if chromatin texture analysis contributes to the differential diagnosis of thyroid follicular lesions. We selected slides stained with H-E (hematoxilin-eosin) of 12 hyperplastic adenomatous nodules (AN), 18 follicular adenomas (FA), 24 minimally invasive follicular carcinomas (MIFC) and 22 follicular variants of papillary carcinomas (FVPC). A total of 100 nuclei of each case were digitalized and segmented. The utility of a combination of immunostaining including galectin-3, HBME-1 and CK-19 in the routine differentiation of the histologies of thyroid malignancies was evaluated. The nuclei structure was described by morfometry, densitometry and by variables derived by co-occurrence matrix. Sex, age of the patient and metastasis were clinical and morphologic parameters searched in this study. These data, described as prognostic factors for follicular malignant tumors, were compared by variance analysis (significance value p<0,05) and did not differentiate significantly among the groups. The best marker, in terms of sensitivity and specificity, was HBME-1. The combination CK-19, HBME-1 and galectin-3, in a panel, may be useful in specific cases, for example, for differentiate folicullar lesions, with special reference for folicullar variant of papillary carcinoma. Morphometric variables did not show significant discriminant value, except, the P5FF4 (5th percentile of the form factor) which demonstrated significant differences between FA and FVPC and between MIFC and FVPC. Densitometric variables demonstrated significant differences between AN and FA, AN and MIFC, FA and FVPC, FA and MIFC and even between MIFC and FVPC. The variables derived from co-occurrence matrix demonstrated differences among the sub- groups, but only P5 Energy (fifth percent of energy variable) showed significant differences between FA and MIFC. Also, the variable r2Mink (Goodnesss of fit of the Minkowski - fractal dimension) was able to differentiate benign and malignant lesions such as: AN and MIFC, AN and FVPC, FA and MIFC, FA and FVPC. Texture analysis may help to differentiate benign and malignant follicular lesions of the thyroid, specially when one is trying to differentiate AN or FA and FVPC. In this situation the histological analysis based on nuclear characteristics may not be definitive; owing to the fact that all the nuclear criteria may not be always present in most cases. On the other hand, the differential diagnosis of FA and MIFC is difficult and it is not based on nuclear characteristics, but on the finding of capsular or vascular invasion. However, in these cases, the variables energy and r2Mink contributed to the differential diagnosis. Therefore, the computerized image analysis may be considered as a tool that helps the differential diagnosis of follicular thyroid lesions, added to the morphological and immunohistochemical analysis / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Fabio Ramoa Pires / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T12:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romanach_MarioJose_M.pdf: 13585930 bytes, checksum: 1f4259a1bbb4368dbbba0d6f8a98f50f (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) é a neoplasia maligna mais comum da boca, possuindo diversas variantes clinicopatológicas incomuns, incluindo o carcinoma de células fusiformes (CCF), que diferem quanto ao comportamento clínico, critérios diagnósticos e prognóstico. Os objetivos deste estudo foram analisar a expressão imunohistoquímica de marcadores epiteliais no CCF de cabeça e pescoço, avaliando sua importância diagnóstica, comparar os achados histopatológicos e imunohistoquímicos do CCF de cabeça e pescoço com os CECs convencionais da cavidade oral e definir um perfil sócio-demográfico e clinicopatológico do CCF oral. Para isso, foram analisados ao todo 20 casos de CECs: 10 casos de CCF, e 10 casos de CECs orais convencionais como controle, sendo 5 casos de CECs bem diferenciados e 5 casos de CECs pouco diferenciados. A metodologia incluiu avaliação de todos os casos em microscopia óptica em cortes corados em hematoxilina e eosina e reações imunohistoquímicas para anticorpos contra citoqueratinas, vimentina, desmina, actina músculoespecífica, actina de músculo liso, proteína S100, EMA, p53 e ki-67, usando a técnica da peroxidase. Os achados morfológicos dos CCFs estudados mostraram maior proximidade entre estes tumores e os CECs pouco diferenciados e a expressão imunohistoquímica das citoqueratinas AE1/AE3, 6, 8 e 14 e de EMA nos componentes carcinomatoso e fusocelular do CCF mostrou-se útil como auxiliar em seu diagnóstico final. Ainda, os CCFs apresentaram índices de expressão de p53 e de Ki-67 superiores àqueles encontrados nos CECs bem diferenciados. O CCF oral apresentou predileção por homens na 6ª década de vida, manifestando-se através de úlceras infiltrativas ou lesões polipóides ulceradas, usualmente dolorosas, localizadas preferencialmente no rebordo alveolar e lábios / Abstract: Squamous cell carcinoma (SCC) is the most common malignant oral tumor and several uncommon clinicopathological variants, including spindle cell carcinoma (SpCC), which differ on clinical behaviour, diagnostic criteria and prognosis, have been described. The aims of this study were to analyze the immunohistochemical expression of epithelial markers on head and neck SpCC, evaluating their diagnostic relevance, to compare the histopathological and immunohistochemical features of head and neck SpCC and conventional oral SCC, and to define a socio-demographic and clinicopathological profile of oral SpCC. Material included a total of 20 cases, including 10 cases of head and neck SpCC, and 10 cases of oral SCC used as controls (5 well-differentiated SCC and 5 poorly-differentiated SCC). Methods included evaluation of hematoxilin and eosinstained histological slides from all cases through optic microscopy and immunohistochemical reactions for antibodies against cytokeratins, vimentin, desmin, smooth-muscle actin, muscle-specific actin, S-100 protein, EMA, p53 and ki-67, using the peroxidase technique. Morphological features of SpCC showed similarities to the features from poorly differentiated SSC and immunohistochemical expression of the cytokeratins AE1/AE3, 6, 8 and 14, and EMA on both carcinomatous and spindle cell components of the tumor, proved to be useful as an auxiliary tool on final diagnosis. In addition, SpCC presented higher p53 and ki-67 expression indexes when compared to well-differentiated SCC. Oral SpCC showed predilection for males on their 6th decade of life, presenting clinically either as painful infiltrative ulcers or ulcerated exophytic polypoid masses, preferally located on the alveolar mucosa and lips / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientador: Marcio Ajudarte Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T15:19:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_LucielmaSalmitoSoares_D.pdf: 2009810 bytes, checksum: e857bd28ac572f1423b462c29e7a2583 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) bucal recorre em cerca de 30% dos casos. O reconhecimento de fatores prognósticos confiáveis pode resultar na predição do comportamento tumoral e prevenção de falhas no tratamento. O objetivo deste estudo foi analisar a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e imunohistoquímicas em casos de CEC bucal com recidiva local precoce. Desta forma, 69 casos de carcinoma bucal sem tratamento prévio para tumores de cabeça e pescoço foram selecionados, sendo que 23 apresentaram recidiva precoce e 46 sem recidiva. Informações clínicas foram obtidas dos prontuários e as características histopatológicas foram avaliadas de acordo com os sistemas de gradação de Anneroth et al. (1987) e Bryne et al. (1992). Reações imunohistoquímicas foram feitas para FAS e ErbB2. Nossos resultados mostraram uma predileção pelo gênero masculino (89,85%) com idade média de 55,5 anos. Apesar de não ser estatisticamente significante, observou-se um risco relativo de 2,62 e 2,89 para que usuários de fumo e o álcool desenvolvam recidiva local, respectivamente. Notou-se relação estatisticamente significante entre o tratamento apenas cirúrgico e o desenvolvimento de recidivas (p = 0,03). A soma dos escores de Anneroth et al. (1987) maior que 15 foi estatisticamente associada à recidiva (p = 0,03). Menor expressão de FAS e maior expressão de ErbB2 citoplasmático foram estatisticamente associadas à recidiva tumoral (p = 0,01). Estiveram associados à pior sobrevida: o uso de álcool (p = 0,0028), e piores escores obtidos nos parâmetros queratinização (p < 0,0001), padrão de invasão (p < 0,0001) e inflamação (p < 0,0001) segundo Anneroth et al. (1987). A maior expressão de FAS esteve também significativamente associada à maior sobrevida global dos pacientes (p = 0,0002). Apesar de não estatisticamente significante, FAS foi correlacionada com a queratinização (p = 0,08) e de forma significante estatisticamente, a queratinização relacionou-se com ErbB2 expresso em membrana (p = 0,0006). De acordo com os nossos resultados, sugerimos a utilização do sistema de Anneroth et al. (1987), bem como o estudo imunohistoquímico com os marcadores FAS e ErbB2 para melhor compreensão do comportamento dos CECs bucais / Abstract: Oral squamous cell carcinoma (SCC) recurs locally in about 30% of cases. The recognition of reliable factors may result in the tumor behavior prediction and prevent treatment failures. The purpose of this study was to evaluate the correlation among clinical, histopathological and immunohistochemical features in oral SCC with early local recurrence. Sixty-nine cases of oral SCC without previous treatment for head and neck tumors were selected, being: 23 cases with early local recurrence and 46 cases without recurrence. Clinical data were obtained from the medical records and the histopathological features were assessed according Anneroth¿s and Bryne¿s histological grading of malignancy. Immunohistochemical reactions for FAS and ErbB2 were performed. Our results showed a male predilection (89.85%), with a mean age of 55.5 years. Although there were no statistical differences, relative risks of 2.62 and 2.89 were observed for smokers and alcohol drinkers have local recurrence, respectively. Significant differences were observed between surgical treatment and local recurrence (p = 0.03). The sum of the Anneroth¿s histological grading degrees exceeding 15 was statistically associated to local recurrence (p = 0.03). Lower FAS and more cytoplasmic ErbB2 expression were statistically correlated to local recurrence (p = 0.01). An association between overall survival and alcohol use was observed (p = 0.0028). The parameters keratinization (p < 0.0001), mode of invasion (p < 0.0001) and lymphoplasmocytic infiltration (p < 0.0001) according Anneroth¿s histological grading were related to overall survival. More FAS expression was also associated with better overall patients survival (p = 0.0002). Although there was no statistical difference, FAS was related to keratinization (p = 0.08), similar but statistically, keratinization was associated with membrane ErbB2 expression (p = 0.0006). According our results, we suggest the use of Anneroth¿s histological grading system as well as the immunohistochemical markers FAS and ErbB2, for best comprehension of OSCC¿s behavior / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia