Orientador: Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T20:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_LucianaRegina_D.pdf: 5414614 bytes, checksum: f35e45f7f891a1120abd69e0862a2875 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Contexto: A angiogênese e linfangiogênese são processos em que as células endoteliais se dividem e migram para a formação de novos capilares, dando suporte para a progressão tumoral. A mensuração destes processos pode discriminar diferentes extratos prognósticos no câncer. O valor prognóstico da determinação da angiogênese e linfangiogênese no carcinoma colorretal (CRC) é assunto controverso na literatura. Isto pode ser devido a variações na forma de análise, como local de quantificação dentro da amostra tumoral, escolha do marcador imunoistoquímico e o método de quantificação. No presente trabalho, a angiogênese e linfangiogênese são estudadas através de programas de análise de imagem, comparando métodos de quantificação (densidade microvascular - MVD versus estimativa da área vascular total - TVA), diferentes marcadores imunoistoquímicos (pan-endoteliais versus vasos neoformados) e áreas de análise (campo central da lesão versus periferia versus campo de invasão mais profunda no carcinoma). Objetivos: Comparar esses parâmetros entre adenomas de pacientes sem e com carcinoma na mucosa adjacente; compará-los nos tecidos colorretais não neoplásicos, em adenomas e carcinomas, além de encontrar um meio de quantificação de angiogênese e linfangiogênese que fosse mais fidedigno como fator prognóstico no CRC. Métodos: 60 CRC esporádicos, 30 adenomas e 10 tecidos colorretais não neoplásicos foram submetidos a estudo imunoistoquímico para a detecção dos antígenos CD31, CD34, CD105, VEGF-A, VEGF-C e D2-40. Imagens dos preparados imunoistoquímicos foram capturadas para avaliar a MVD e a TVA em um programa de análise de imagem. Também foram analisadas a porcentagem e a intensidade de expressão protéica de VEGF-A e VEGF-C nas células carcinomatosas. Resultados: A imunocoloração da maioria dos marcadores, bem como a expressão de VEGF-A e VEGF-C, mostraram aumento estatisticamente significante nos adenomas e carcinomas quando comparados com tecido não neoplásico para MVD e TVA nos diversos campos da lesão. Os adenomas de pacientes com carcinoma apresentaram aumento estatisticamente significante na TVA determinada pelo CD105 (p= 0,019) e na MVD determinada pelo D2-40 (p= 0,041), quando comparadas com os adenomas de pacientes sem carcinoma. Dentre os carcinomas, apenas a MVD determinada pelo marcador CD34 no campo central da lesão diferencia-se estatisticamente com a recorrência/metástase (p= 0,04) e a sobrevida (p= 0,02). Conclusões: Os achados apóiam o fato da angiogênese e o aumento da vascularização linfática ocorrer precocemente, ainda nos adenomas. Também corroboram o fato de que angiogênese e aumento da contagem de vasos linfáticos ocorram mais em adenomas de pacientes com carcinomas na mucosa adjacente, possivelmente influenciados por fatores produzidos pelo tumor. A MVD na área central do carcinoma determinada pelo marcador imunoistoquímico CD34 adiciona critério prognóstico, associando-se com recidiva/metástase e sobrevida, enquanto os outros meios de quantificação vascular e de expressão de fatores de crescimento não apresentaram resultados estatisticamente significantes. Este método é um fator prognóstico independente e adicional no CCR / Abstract: Background: Angiogenesis and lymphangiogenesis play an important role in the progression of solid tumors, and its quantification may be associated with prognostic stratification. However, the prognostic value of the assessment of angiogenesis and lymphangiogenesis in colorectal cancer (CRC) is still controversial. This may be due to variations in the methods of analysis, as the precise location of assessment within a tumor sample, the choice of immunohistochemical markers and the quantification system. In the present study, angiogenesis and lymphangiogenesis were assessed using image analysis software, comparing two methods of quantification (microvessel density - MVD versus estimation of the total vascular area - TVA), different immunohistochemical markers (pan-endothelial versus neovessel) and areas of analysis (periphery versus inner portions of the lesion versus the deepest invasion area of carcinoma). Objectives: To compare angiogenic and lymphangiogenic patterns in adenomatous polyps from patients without and with sporadic CRC; to compare angiogenesis and lymphangiogenesis in non neoplasic colorectal tissue, adenomas and cancer, and to search for a reliable approach to quantify angiogenesis and lymphangiogenesis, which could be of clinical value as prognostic factor in CRC. Methods: 60 sporadic CRC, 30 colorectal adenomas and 10 non neoplasic colorectal tissues were submitted to immunohistochemical analysis for CD31, CD34, CD105, VEGF-A, VEGF-C and D2-40. MVD and TVA were determined by digitalizing the immunohistochemical reactions and examining them by computer image analysis. Immunostaining for VEGF-A and VEGF-C was evaluated using a parameter based on the percentage of tumor area stained and staining intensity. Results: Staining for most markers, as well as for VEGF-A and VEGF-C, exhibited significant increase in adenomas and carcinomas, when assessment of MVD and TVA in different tumor fields was compared with non neoplastic colorectal tissues. Adenomas from patients with carcinoma showed significantly higher values of TVA determined by immunostaining for CD105 (p = 0.019) and of lymphatic MVD determined by D2-40 (p = 0.041) when compared with adenomas from patients without cancer. Among patients with CRC, only MVD determined by immunostaining for CD34 in the central areas of the tumor was significantly correlated with recurrence/metastasis (p=0.04) and survival rates (p=0.02). Conclusions: Our results support that angiogenesis and lymphatic vascularization, plays a role in early tumor development at the stage of adenoma formation. The findings further support the notion that neoangiogenesis and elevated lymphatic vessel counts occur in colorectal adenomas from patients with CRC when compared to those without carcinoma, possible under the influence of factors produced by the carcinoma. Our results suggest that MVD determined with staining for CD34 in the inner part of the tumor is more closely related with relapse/metastasis and survival than other means of vascular quantification. The method is an additional prognostic factor in CCR / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores: Marilia de Moraes Castro, Luiza Sumiko Kinoshita / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T04:14:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_FabianoMachado_D.pdf: 4467324 bytes, checksum: 1ebe227a237ea5dc6d9af203a5e3ebbf (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: No Brasil, Apocynaceae está representada por 90 gêneros e cerca de 850 espécies distribuídas em diversas formações vegetais, incluindo o cerrado. Esta família destaca-se por ter grande importância econômica ou medicinal, característica relacionada à presença de vários tipos de estruturas secretoras em suas espécies. Vinculado ao projeto temático BIOTA/FAPESP (proc. nº 00/12469-3) que estudou a morfologia, anatomia, histoquímica e ultra-estrutura de plantas do cerrado do estado de São Paulo, este estudo elegeu Odontadenia lutea (Vell.) Markgr., Secondatia densiflora A.DC. e Temnadenia violacea (Vell.) Miers com o propósito de efetuar um levantamento de tipos de estruturas secretoras em órgãos vegetativos e reprodutivos. Os coléteres ocorrem nos ápices vegetativos e reprodutivos das três espécies estudadas. Coléteres foliares ocupam posição peciolar, interpeciolar e intraestipular; vascularização ocorre no coléter axilar de O. lutea e no coléter marginal distal interpeciolar de T. violacea. Tipos inéditos de coléteres - laminar tripartido e assimétrico - são relatados para os botões florais de O. lutea. A secreção produzida pela epiderme em paliçada do coléter calicinal de O. lutea é heterogênea, sendo sintetizada mucilagem em uma primeira fase e compostos fenólicos em etapa posterior. Idioblastos secretores são estruturas comuns nos órgãos vegetativos e florais de O. lutea e S. densiflora, estando ausentes em T. violacea, sendo encontrados no parênquima fundamental e associados ao floema. No caule secundário de S. densiflora, ocorre uma hipoderme secretora com secreção de aspecto denso semelhante ao dos idioblastos. Os laticíferos são do tipo anastomosado, sendo observados em todos os órgãos estudados. Eles têm diâmetro variável e sua parede é geralmente mais espessa que as das células parenquimáticas. A secreção do laticífero tem aspecto denso, sendo corada pela safranina. Em S. densiflora, os nectários florais têm origem receptacular, são unidos na base e livres na região apical constituindo cinco unidades. O nectário é composto por epiderme coberta por fina cutícula, parênquima nectarífero e feixes vasculares. Na região terminal, os estômatos liberam o néctar para o meio externo. Nas três espécies estudadas, o ginostégio apresenta diferenças morfológicas. Não foi observada adnação entre a cabeça do estilete e conectivo expandido em S. densiflora. O. lutea e T. violacea ocorre adnação da epiderme em paliçada do conectivo com a epiderme em paliçada do anel parenquimático da cabeça do estilete. As estruturas secretoras das três espécies em estudo mostram ser relevantes à taxonomia e podem auxiliar na delimitação de tribos da subfamília Apocynoideae. / Abstract: Apocynaceae is represented in Brazil by 90 genera and approximately 850 species distributed among diverse vegetation formations, including the cerrado. This family has significant economic and medicinal importance that is related to the presence of differents types of secretory structures (glands) among their species. The present study, linked to the thematic project BIOTA/FAPESP entitled "Morphology, anatomy, histochemistry, and ultrastructure of cerrado vegetation in the state of São Paulo, Brazil" (proc nº 00/12469-3), focuses on a survey of the glands found in vegetative and floral organs of Odontadenia lutea (Vell.) Markgr., Secondatia densiflora A.DC., and Temnadenia violacea (Vell.) Miers. The colleters are located on the vegetative and floral apices of the three species studied. Foliar colleters are found on the petiole, as well as the interpetiolar and intra-stipular regions; vascularization is observed in the axial colleter of O. lutea and in the marginal distal interpetiolar colleter of T. violacea. New types of colleters - laminar tripartite and asymmetrical - are observed on the floral buds of O. lutea. The palisade epidermis of the calycine colleter of O. lutea produces a heterogeneous secretion, composed of mucilage and phenolic compounds. The mucilage is synthesized in a primary phase and the phenolic compounds are produced in a second phase. Secretory idioblasts are common structures in vegetative and floral organs of O. lutea and S. densiflora, but absent in T. violacea. These idioblasts are found in fundamental parenchyma and associated with phloem. In secondary stem of S. densiflora, a secretory hypodermis remains as a continuous layer, which is interrupted only by stomatal complex regions, and the secretory cells are filled with dense material. The lactiferous are of the anastomose type, and are observed in all organs studied. They have variable diameters and their walls are generally thicker than those of the parenchyma cells. The secretion of the lactiferous is dense and stains with Safranin. The floral nectaries of S. densiflora originate from the receptacle and are united at the base but free in the apical region, forming five units. The nectary is composed of nectariferous epidermis, nectariferous parenchyma and vascular bundles. The nectar is liberated through stomata found on the terminal region of the nectaries. The gynostegium of the three species studied are morphologically different. Adnation between the style head and the expanded connective is only observed in O. lutea and T. violacea. The secretory structures of the three species examined are taxonomically relevant, and might aid the delimitation of the subfamily Apocynoideae tribes. / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Maria Heloísa de Souza Lima Blotta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T20:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_RosianeMariada_M.pdf: 6290627 bytes, checksum: d2988b9310700896c1ab013ae1e3a509 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM), micose sistêmica causada pelo fungo Paracoccidioides brasiliensis, apresenta um largo espectro de manifestações clínicas e imunológicas, variando de formas benignas e localizadas a quadros graves e disseminados. A forma crônica ou adulta (FA) se caracteriza por lesões localizadas com acometimento da pele, mucosa oral (MO) e pulmões; enquanto a forma aguda ou juvenil (FJ) é mais grave e disseminada com acometimento do fígado, baço e linfonodos (LNs). Nós examinamos a resposta inflamatória/imunológica em lesões de pacientes com formas clínicas distintas da PCM. Foram analisados a expressão de citocinas e o fenótipo das células presentes nos infiltrados de biópsias de mucosa oral de 15 pacientes com a forma adulta e de linfonodos de 15 pacientes com a forma juvenil da PCM por imuno-histoquímica (IHQ) e qPCR. Anticorpos monoclonais ou policlonais foram utilizados para caracterizar o infiltrado celular (CD68, CD15, CD3, CD8, CD56 e FOXP3), citocinas...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic disease caused by the fungus P. brasiliensis, presents with a wide spectrum of clinical and immunological manifestations, varying from benign and localized forms to severe and disseminated forms. The chronic or adult form (AF) is characterized by localized lesions with involvement of the skin, oral mucosa (OM) and lungs. While the acute or juvenile form (JF) is more severe and presents disseminated widespread with the involvement of the liver, spleen and lymph nodes (LNs). In order to examine the inflammatory/immune response in lesions of patients with different clinical forms of PCM, we analyzed the expression of cytokines as well as the phenotype of the cells in the inflammatory infiltrate. Paraffin-embedded OM biopsies from 15 patients with the localized AF of PCM and LN from 15 patients with the JF of PCM were analyzed by immunohistochemistry (IHC) and qPCR. Monoclonal or polyclonal antibodies were used to characterize the cellular infiltrate (CD68, CD15, CD3, CD8, CD56, and FOXP3), cytokines...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Maria Elvira Pizzigatti Corrêa, Cecília Amélia Fazzio Escanhoela / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T05:39:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_TaniaCristinaBenetti_D.pdf: 3640740 bytes, checksum: 3cc935c816cada9809557953ff7cae3e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc) é um processo inflamatório aloimune o qual resulta da resposta celular (células T) do doador contra o receptor em pacientes tratados pelo transplante de células progenitoras hematopoiéticas (TCTH). Os órgãos mais afetados são pele, mucosa oral, glândulas salivares e fígado. O objetivo deste trabalho foi avaliar os achados histopatológicos das glândulas salivares menores (GSM) e fígado dos pacientes afetados pela DECHc, comparando-os entre si, com as amostras destes órgãos de pacientes que não desenvolveram DECHc pós TCTH e com pacientes que não foram tratados pelo TCTH. Amostras de GSM e fígado de pacientes tratados por TCTH mieloablativo, de doadores aparentados com HLA idêntico, entre 1994 e 2006, foram analisadas. Cinquenta e sete pacientes foram selecionados, sendo 36 com DECHc oral e hepática e 21 sem DECH. O diagnóstico de DECHc foi definido por critérios clínicos (extensa/localizada), laboratoriais e de seguimento. Amostras sem alterações de pacientes não transplantados também foram avaliadas (19 de GSM e 20 de fígado). Os espécimes foram corados em hematoxilina e eosina, ácido periódico de Schiff (PAS), Tricrômio de Masson, Reticulina e Perls e tratados pela técnica de imuno-histoquímica para CD45, CD45RO, CD68, CD4, CD8, CD138 e AE1/AE3. Os critérios definidos pela classificação proposta pelo grupo de trabalho em histopatologia da reunião de consenso do National Institutes of Health (NIH) foram empregados para a avaliação de todas as amostras de ambos os órgãos. Nos espécimes corados pelo PAS, foi tomada a medida da área acinar das GSM, em imagens digitalizadas. No fígado de pacientes que desenvolveram DECH, foi observado aumento estatisticamente significante do número de células imunomarcadas para CD8 e CD45RO, quando comparado ao dos outros 2 grupos...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Chronic graft-versus-host disease (cGVHD) is an alloimmune inflammatory process, which results from a donor-origin cellular response (T cells) against host tissues. The organs mostly affected are skin, oral mucosa, salivary glands and liver. The aim of this study was to evaluate the histopathological findings of minor salivary glands (MSG) and liver of patients affected by cGVHD, comparing the findings each other and with those of the patients who did not develop cGVHD after HSCT and patients who were not underwent HSCT. MSG and liver samples from patients who underwent myeloablative HLA-matched HSCT from sibling donors, between 1994 and 2006, were analyzed. Fifty-seven patients were selected, being 36 with oral and hepatic cGVHD and 21 without GVHD. The diagnosis of cGVHD was defined through clinical/ laboratory criteria and follow-up. Samples from non-transplanted patients were also evaluated (19 MSG and 20 liver specimens). The specimens were stained with haematoxylin & eosin, periodic acid-Schiff (PAS), Masson's trichrome, reticulin and Perls, and immunolabeled for CD45, CD45RO, CD68, CD4, CD8, CD138, and AE1/AE3. The criteria defined in the classification proposed by the consensus meeting of the National Institutes of Health were used for the evaluation of all samples of both organs. Digital images of the PAS stained sections were used to estimate the MSG acinar area. In the liver of patients who developed GVHD it was observed a statistically significant increase in the number of CD45RO and CD8 immunostained cells, comparatively with the other 2 groups...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Edgard Graner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:51:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_SabrinaDanielada_M.pdf: 583438 bytes, checksum: cb8d4da55276ed74f695c0b1a0eec406 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientadores: Clarice Weis Arns, Liana M. Cardoso Verinaud / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:24:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_RenataServande_D.pdf: 8139323 bytes, checksum: 5f1811651bc45b3676a6e65c545345ff (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) é o agente etiológico de infecções respiratórias amplamente distribuídas e que produzem perdas importantes na criação comercial de bovinos. A infecção pelo BRSV produz alterações patológicas como bronquiolite e pneumonia intersticial e acomete, sobretudo, animais jovens. A limitada multiplicação do vírus em cultivos celulares e a sua instabilidade, representam dificuldades durante os procedimentos de isolamento do BRSV a partir de amostras clínicas. O presente trabalho teve como objetivo padronizar técnicas rápidas, sensíveis e específicas para a detecção do BRSV, utilizando um isolado brasileiro. Para tanto, foram utilizados camundongos Balb/c como modelo de infecção experimental pelo BRSV, a partir dos quais o vírus foi detectado pelas técnicas de RT-nested-PCR e imuno-histoquímica (IHQ) e os resultados foram comparados com aqueles obtidos em bovinos infectados experimentalmente. A técnica de RT-nested-PCR mostrou-se mais sensível para detecção do BRSV do que a técnica de IHQ, tanto para tecidos murinos quanto bovinos. As técnicas foram utilizadas em tecidos de bovinos suspeitos de infecção por BRSV. Uma destas amostras apresentou resultado positivo no RT-nested-PCR e na IHQ. O seqüenciamento dos produtos de PCR deste vírus detectado foi realizado. Esta nova estirpe, juntamente com a descrita previamente BRSV-25-BR (único isolado presente até então no Brasil), é representante do subgrupo B do BRSV e constitui importante ferramenta para a avaliação do perfil dos isolados brasileiros de BRSV, estimar a origem destes isolados e redefinir as necessidades locais com relação ao conteúdo das vacinas. As técnicas de RTnested- PCR e IHQ padronizadas serão úteis em estudos epidemiológicos bem como, no diagnóstico laboratorial do BRSV no Brasil / Abstract: Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) is the etiologic agent of widely distributed respiratory infections and is responsible for significant economic losses in commercial cattle production. Infection by BRSV produces pathological changes such as bronchiolitis and interstitial pneumonia and affects mainly young animals. The poor growth of the virus in cell cultures and its instability represent difficulties in virus isolation from clinical samples. The aim of the present work was to standardise fast, sensitive and specific methods to detect BRSV, using a Brazilian strain. For this purpose, Balb/c mice were used as experimental model to the BRSV infection, from which the virus was detected by the RT-nested-PCR and immunohistochemistry (IHC) standardised, and the results were compared with experimentally infected calves. RT-nested-PCR was more sensitive in detecting BRSV than IHC, from both mouse and calf tissues. These techniques were also used to screen calves suspected of being infected with BRSV. One of the suspected samples was positive by RTnested- PCR and IHC. Sequencing of the PCR products of this sample was carried out. This new isolate and the previously described BRSV-25-BR strain (the only well-known isolate in Brazil) are belong to subgrupo B and provide an important tool to evaluate the profile and to esteem the origin of Brazilian BRSV isolates and to determine the local necessities about the vaccines content. The standardised RT-nested-PCR and IHC techniques could be useful in the epidemiological studies and laboratory diagnosis of BRSV in Brazil / Doutorado / Microbiologia / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientadores: Marilia de Moraes Castro, Luiza Sumiko Kinoshita / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:47:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Demarco_Diego_M.pdf: 39581027 bytes, checksum: 2cd957132934c14b738b111fdb467a0a (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: De acordo com o conceito vigente, Apocynaceae s.l. é composta por cinco subfamílias. No presente trabalho, foram estudadas duas espécies de Aspidosperma e uma de Blepharodon, que integram, respectivamente, as subfamílias mais basal e mais derivada. As espécies foram anatomicamente investigadas quanto à ocorrência e caracterização de coléteres em órgãos vegetativos e florais, e com relação à estrutura floral, com ênfase nas estruturas secretoras. A ausência de coléteres em órgãos vegetativos e flores de A. australe Müll. Arg. e A. tomentosum Mart. comprovou que esta estrutura não é universal na família. Coléteres foliares e florais foram encontrados em B. bicuspidatum Fourn. Eles variam em número e são polimórficos. Todos os tipos descritos são inéditos para a família. Os foliares ocupam posição interpeciolar e peciolar, têm origens distintas e desenvolvimento assincrônico, são caducos e a fase secretora varia sazonalmente; os florais são alternos às sépalas, formam-se no início do desenvolvimento floral, são persistentes e secretam até a flor estar em pós-antese. A secreção dos coléteres é heterogênea e produzida em uma única fase. Nos foliares, ela é constituída por mucilagem e compostos fenólicos, enquanto nos calicinais é composta por mucilagem, ácidos graxos e compostos fenólicos. Além de proteger os meristemas vegetativos e florais contra o dessecamento, os coléteres têm função de defesa contra fitófagos nos ramos vegetativos e contra fungos nas flores. Apenas duas estruturas secretoras foram encontradas na flor de A. australe: a epiderme da cabeça dos estiletes e os laticíferos, além de tricomas corolinos com estrutura intermediária entre secretores e tectores e um possível obturador placentário. A cabeça dos estiletes é do tipo mais simples presente na família e os laticíferos são articulados anastomosados. Embora as flores possuam aroma, os osmóforos não foram localizados; tecido nectarífero também não foi encontrado. Em B. bicuspidatum, há seis sítios secretores nas flores: a epiderme da ala da antera, a epiderme da cabeça dos estiletes, a epiderme da câmara estigmática, a epiderme da corona estaminal, os coléteres e os laticíferos articulados anastomosados. Com exceção da epiderme da ala da antera, as demais estruturas permanecem secretando até a antese floral. A estrutura floral de A. australe e de B. bicuspidatum é bastante distinta, mas algumas estruturas secretoras de ocorrência universal na família evidenciam a relação das duas espécies, como a epiderme da cabeça dos estiletes e o mesmo tipo de laticífero. A restrita variedade de estruturas secretoras florais de A. australe corrobora a posição basal do gênero na subfamília e na tribo; a grande diversidade de glândulas florais de B. bicuspidatum e sua complexa estrutura floral confirmam sua posição derivada na família e na subfamília / Abstract: The current consensus amongst scientists is that the Apocynaceae s.l. is subdivided into five subfamilies. This paper presents a study of two Aspidosperma species and one Blepharodon species. The Aspidosperma and the Blepharodon belong to the most basal and the most derivative subfamilies respectively. An anatomical study of the species was carried out in order to look into the characterization and occurrence of colleters in vegetative and floral organs. Also, the same study was made in relation to the floral structure, focusing on the secretory structures. The absence of colleters in vegetative organs and flowers of the A. australe Müll. Arg. and the A. tomentosum Mart. proved that this structure is not universal in the family. Foliar and floral colleters were found in the B. bicuspidatum Fourn. They are polymorphic and they vary in number. The described colleters are new in the family. The foliar colleters occupy an interpetiolar position, and they have distinct origins and asynchronous developments. Also, they are deciduous and the secretory phase varies seasonally. The floral colleters alternate with the sepals. They are formed at the beginning of the floral development. They are persistent and they secrete until the flower is in postanthesis. The secretion of the colleters is heterogeneous and it is produced in a single phase. In the foliar colleters, it is made up of the mucilage and the phenolic compounds. But in the calycine, it is composed of the mucilage, fatty acids and phenolic compounds. Besides protecting the vegetative and floral meristems from desiccation, the colleters also protect against phytophagous insects in vegetative branches and against fungi in flowers. Only two secretory structures were found in the A. australe flower: the stylehead epidermis and the laticifers, besides the corolline trichomes with an intermediate structure between glands and tector trichomes, and possibly an obturator from the placenta. The style-head is one of the simplest structures in the family, and the laticifers are unbranched articulated. Although the flowers have an scent, the osmophores were not found, nor was the nectariferous tissue. In the B. bicuspidatum, there are six glands in the flowers: the anther wing epidermis, the style-head epidermis, the stigmatic chamber epidermis, the staminal corona epidermis, the colleters, and the unbranched articulated laticifers. Except for the anther wing epidermis, the other structures continue secreting until the floral anthesis. The floral structure of the A. australe and the B. bicuspidatum is very distinct, but some secretory structures that are universal (in the family) show the relationship between the two species, such as the style-head epidermis and the same type of laticifer. The restricted variety of floral secretory structures of the A. autrale confirm the basal position of the genera in the subfamily and in the tribe, a wide variety of floral glands of the B. bicuspidatum and its complex floral structure confirm its derivative position in the family and subfamily / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T15:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brito_HugoLeitedeFarias_D.pdf: 985712 bytes, checksum: 049c9f97cfac78c5235143ee9925a67f (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A inflamação da vilosidade placentária, ou vilosite, pode ser causada por diversos agentes infecciosos, porém na maioria dos casos a etiologia é desconhecida. As vilosites estão associadas a aborto, malformações fetais, prematuridade e retardo do crescimento intra-uterino, que é a principal manifestação clínica nos casos de etiologia desconhecida. Estes casos têm sido explicados como o resultado de uma reação imune materna contra o tecido placentário ou causados por algum agente infeccioso não identificado e sem manifestação clínica materno-fetal. Não é possível distinguir, ao exame histológico, a vilosite de etiologia desconhecida (VED) de uma vilosite infecciosa, se nesta última não for identificado microorganismos no tecido ou sinais histológicos de infecção, tais como inclusões virais. O aspecto histológico é semelhante em ambos os grupos e na maioria dos casos a reação inflamatória está constituída por linfócitos e histiócitos. A presença de padrões imunofenotípicos específicos nos diferentes tipos de vilosite poderia auxiliar tanto no diagnóstico como na compreensão da patogênese dessas lesões placentárias. Foi estudada a composição do infiltrado inflamatório em 23 placentas com vilosite (oito por T. cruzi, cinco por T. gondii e oito de etiologia desconhecida), duas placentas com intervilosite pelo Paracoccidioides brasiliensis e 8 placentas controles sem inflamação, através da técnica imunoistoquímica avidina-biotina-peroxidase em cortes histológicos de material fixado em formalina e incluido em parafina. Os anticorpos pesquisados foram: UCHL1 (CD45RO), L26 (CD20), CD45RO/0PD4 (CD4), CD8, NK-like, M1 (CD15), Mac 387, HAM 56 (CD68) e proteína S-100. Em todos os casos e nos diferentes tipos de vilosite estudados a reação inflamatória estava predominantemente constituída por linfócitos T do subtipo CD8+ e histiócitos HAM 56+. Também foram identificados, em menor quantidade, linfócitos T CD4+, macrófagos MAC 387+, granulócitos, células S-100 + e escassas células NK. Os linfócitos B estavam ausentes ou eram menos do que 2% das células inflamatórias em todos os casos. Nas placentas com intervilosite por P. brasiliensis o infiltrado era composto por macrófagos Mac 387 + e granulócitos M1+. O estudo da composição do infiltrado inflamatório, por imunoistoquímica, não permite diferenciar VED de vilosite infecciosa. A presença de um mesmo perfil de células inflamatórias em ambos os grupos (infeccioso e VED) favorece a hipótese de que a VED seja causada por algum agente infeccioso não identificado, possivelmente viral. Também é possível que diferentes agentes etiológicos causem inflamação vilositária através do mesmo mecanismo patogênico, o qual envolve uma reação imune celular mediada por linfócitos T CD8+ e histiócitos / Abstract: Villitis is characterized by an inflammatory infiltrate within the villous stroma and can be caused by a large number of infectious agents, although most are of unknown etiology. Villitis, not rarely, is associated with intrauterine fetal death, abortion, malformations and fetal growth retardation. The latter has been the major clinical association of villitis of unknown etiology (VUE). Two hypotheses has been advocated to explain this lesion: a maternal immune attack against fetal tissue or an unidentified infection. Histology alone cannot distinguish VUE from an infectious villitis, unless microorganisms or viral inclusions are found in tissue. Both lesions are characterized by chronic inflammatory cells, mainly lymphocytes and macrophages, in the placental villous stroma. Granulomas and trophoblast damage, very typical of some infectious villitis, can also be a feature of VUE. Therefore, immunohistochemical phenotyping of the inflammatory cells could be of diagnostic value in villitis. There are few immunomorphological studies about the inflammatory cells in infectious villitis as well as in VUE. We studied the inflammatory cells by immunohistochemistry in 23 placentas with villitis (8 cases of Trypanosoma cruzi villitis, 5 cases of Toxoplasma gondii villitis and 8 cases of VUE). Two cases of P. brasiliensis intervillositis and 8 control placentas without inflammation were also analysed. Paraffin sections of all placentas were submitted for immunohistochemistry analysis according the avidin-biotin-peroxidase technique. Antibody panel consisted of UCHL1 (CD45RO), L26 (CD20), CD45RO/OPD4, CD8, NK-like, M1 (CD15), Mac387, HAM 56 (CD68) and S-100 protein. In all cases of villitis (infectious and of unknown etiology) the inflammatory infiltrate consisted mainly of HAM 56+ macrophages and T lymphocytes. Among T cells, CD8+ cells outnumbered CD4+ cells in all placentas. B lymphocytes were absent or very rare (<2%). A small number of Mac 387+ monocytes, NK cells and S-100+ cells were also detected. Paracoccidiodomycosis intervillositis consisted of Mac387+ histiocytes and M1+ granulocytes. Our findings showed that immunohistochemical study of the inflammatory cells cannot distinguish VUE from infectious villitis. The same cellular composition of the inflammatory infiltrate in the two studied groups (VUE and infectious villitis) favors the hypothesis that VUE could result from an infectious cause. In addition, this finding raises the possibility that different etiologic factors acts through a common pathway to cause villitis which is an inflammatory lesion mediated by CD8+ T lymphocytes and macrophages / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores: Pablo Agustin Vargas, Luiz Paulo Kowalski / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-22T08:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gondak_RogeriodeOliveira_D.pdf: 3115921 bytes, checksum: 6a0ba84f4ad5ecaa9e8dbd843e421cf0 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Na infecção pelo HIV, as células dendríticas (CDs) podem desempenhar vários papéis, incluindo a provável captação inicial do HIV, transporte para os linfonodos, e posterior transferência para células T, desempenhando um importante papel no sistema imune. As manifestações orais observadas em pacientes infectados pelo HIV, incluindo aquelas associadas ao HSV-1 podem estar diretamente relacionadas à injúria das CDs. A proposta deste estudo foi identificar e quantificar as CDs intersticiais na língua de pacientes autopsiados com AIDS e portadores de infecção herpética lingual (n=10), pacientes com AIDS e sem lesões linguais (n=10) e pacientes sem AIDS e sem lesões linguais (n=10) por meio de reações imunoistoquímicas. Além disso, investigamos a população de CDs nos linfonodos e tonsilas palatinas de pacientes com AIDS (n=32) e sem AIDS (n=21). Nos tecidos linguais, foram utilizados os anticorpos contra CD1a e CD83 para identificação das CDs e o anticorpo contra HSV-1 para detecção do vírus da herpes simples tipo 1. Nos linfonodos e tonsilas palatinas foi utilizados além dos anticorpos contra CD1a e CD83, o anticorpo contra fator XIIIa. Para a quantificação das CDs nos tecidos linguais foi utilizado análise histomorfométrica convencional e nos tecidos linfóides foi aplicado o método analítico Positive Pixel Count (software Image Scope). Os resultados mostraram uma intensa depleção na população de CDs em tecidos linguais e linfóides de pacientes com AIDS e a infecção lingual pelo HSV-1 não potencializou a redução de CDs / Abstract: During HIV infection, dendritic cells (DCs) may play several roles, including the probable initial uptake of HIV, transport to the lymph nodes, and subsequent transfer to T cells. Oral opportunistic infections observed in HIV-infected patients, including those associated with HSV-1 may be directly related to injury of DCs. The purpose of this study was to identify and quantify the interstitial DCs in the tongue of autopsied patients with AIDS and lingual herpes (n = 10), AIDS patients with normal tongues (n = 10) and non-AIDS patients with normal tongues (n = 10) by immunohistochemistry. Furthermore, we investigated the DCs population in lymph nodes and palatine tonsils of AIDS patients (n = 32) and non-AIDS patients (n = 21). CD1a and CD83 antibodies were carried out to identify DCs in lingual tissues and HSV-1 antibody for detection of herpes simplex virus type 1. In lymphoid tissues, CD1a, CD83 and factor XIIIa antibodies were carried out to identify DCs. Interstitial DCs were measured by conventional histomorphometry whereas the lymphoid DCs were measured by Positive Pixel Count Algorithm method using ImageScope software. The results showed a decreased population of DCs in lingual and lymphoid tissues of AIDS patients independently of the presence of concomitant infection by HSV-1 / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientadores: Luiz Carlos Zeferino, Fernando Carlos de Lander Schmitt / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:21:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dufloth_RozanyMucha_D.pdf: 623963 bytes, checksum: 756d732465da74e705449411420fb717 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: OBJETIVOS: Identificar mutações nos genes BRCA1 e BRCA2 em uma população brasileira com câncer de mama hereditário; analisar a freqüência de polimorfismos nos genes XRCC1, XPD, XRCC3 e RAD51 em um grupo de pacientes brasileiras e sua associação com a susceptibilidade ao câncer de mama; analisar expressão das proteínas p63, CK5 e P-caderina em cânceres de mama familiar e esporádico. MÉTODOS: Este estudo teve componentes do tipo transversal e do tipo caso-controle. Foram constituídos quatro grupos: pacientes com câncer hereditário de mama; pacientes com câncer de mama esporádico; mulheres sem câncer de mama e com história familiar positiva de câncer de mama e/ou ovário; mulheres sem câncer de mama e sem história familiar de câncer de mama e/ou ovário. Foram coletados 10ml de sangue periférico para a realização de técnicas moleculares, nomeadamente Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) e Seqüenciação Direta. Espécimes de câncer de mama, conservados em blocos de parafina, foram selecionados no Laboratório de Patologia do Hospital das Clínicas/Unicamp, Brasil e no Laboratório de Patologia do Hospital São João/Universidade do Porto, Portugal, totalizando 168 casos. Dos blocos doadores foram extraídos cilindros de 2mm de diâmetro e depositados nos blocos de parafina receptores, usando Tissue Microarrayer (Beecher Instrumensts, Silver Spring, Maryland). Nestes cortes foi feita a pesquisa dos marcadores de diferenciação do fenótipo basal/mioepitelial. RESULTADOS: Foram identificadas quatro mutações (13%), sendo uma mutação no gene BRCA1 e três no gene BRCA2. No BRCA1 foi encontrada uma mutação do tipo frameshift. Duas mutações do BRCA2 são tipo nonsense e a outra do tipo unclassified variant. Não houve associação estatisticamente significante entre os alelos e genótipos dos polimorfismos dos genes de reparo do DNA, XRCC1, XPD, XRCC3 e RAD51. O câncer de mama familiar mostrou diferenças estatisticamente significantes do fenótipo imunoistoquímico dos marcadores de células basais/mioepiteliais (P-caderina, p63 and CK5), em relação aos cânceres esporádicos. CONCLUSÃO: Foram identificadas uma mutação no gene BRCA1 e três mutações no gene BRCA2 em mulheres com câncer de mama e história familiar de câncer de mama, o que correspondeu a uma freqüência de 13% (4/31). Não foi observada associação da susceptibilidade ao câncer de mama com os polimorfismos dos genes XRCC1, XPD, XRCC3 e RAD51 em um grupo de pacientes brasileiras. Os marcadores p63, CK5 e P-caderina foram mais freqüentemente expressos no câncer de mama familiar. A melhor caracterização do câncer familiar como entidade biológica distinta do câncer esporádico pode ser uma ferramenta útil para selecionar mulheres que deveriam submeter-se ao rastreamento de mutações nos genes BRCA1 e BRCA2 / Abstract: OBJECTIVE: To identify mutations in BRCA1 and BRCA2 genes in a Brazilian population of women with hereditary breast cancer; to analyze the frequency of polymorphism in genes XRCC1, XPD, XRCC3 e RAD51 in a group of Brazilian patients and its association with breast cancer susceptibility; to analyze the expression of p63, CK5 and P-cadherin proteins in familial and sporadic breast cancers. METHODS: This study was in part transversal and in part crosssectional. The population evaluated in this study comprised four groups of women: patients with sporadic and familial breast cancers, women without breast cancer but with family history, women without breast cancer and without family history. The last group was the control group of this study. From each subject, 10ml of peripheral blood were collected to perform molecular analysis, namely Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) and Direct Sequencing. Paraffin blocks from breast cancer specimens were selected from the Pathology Laboratories from the Hospital das Clínicas/UNICAMP, Brazil and Hospital São João/Universidade do Porto, Portugal, totalising 168 cases. Cylinders with 2mm diameter were extracted from the donnor blocks using the Tissue Microarrayer technique (Beecher Instruments, Silver Spring, Maryland), and were sampled together to construct the receptor paraffin blocks. The analysis of mioepithelial differentiation/histogenesis was performed in these sections. Results analysis was carried out through the Chi-square test. RESULTS: Four mutations were identified: one in BRCA1 and three in BRCA2. A frameshift BRCA1 mutation, two nonsense BRCA2 and one unclassified variant BRCA2 mutation were identified. No statistically significant association between the alleles and genotypes DNA, XRCC1, XPD, XRCC3 and RAD51 polymorphism. Familial breast cancer was statistically different from sporadic cancer in regards of immunohistochemical phenotypes for basal/mioepithelial cell markers (Pcadherin, p63 and CK5). CONCLUSIONS: Thirteen percent of women with breast cancer and family history of breast cancer had at least one BRCA1 gene mutation and three BRCA2 gene mutations. We do not observe any statistical significance difference in the frequency of alleles and genotype of the genes XRCC1, XRCC3, XPD e RAD51 in the group of patients studied. The markers, CK5 e P-cadherin was more frequently in familial breast cancers. The characterization of familial breast cancer as a biological entity distinct from sporadic cancer might be a useful tool to select women that should be screened to BRCA1 and BRCA2 genes mutation triaging / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Tocoginecologia