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Efeito dos hormônios gonadais sobre os filamentos intermediários de astrócitos hipocampais, durante o desenvolvimento e o ciclo estral : uma abordagem imunoistoquímicaGehlen, Gunther January 2009 (has links)
O hipocampo compõe uma das estruturas do sistema límbico, suas funções são variadas, tendo seu papel na regulação do comportamento emocional e em processos relacionados com a estocagem de memórias. Apesar de ter pouco ou nenhum papel no controle da função reprodutiva, o hipocampo é ainda assim um alvo sensível aos esteróides gonadais. Filamentos intermediários, como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP) é um eficiente marcador do citoesqueleto de astrócitos e sofrem modificações sob ação de hormônios gonadais. Os objetivos do presente estudo foram mensurar o numero de células imunorretivas à GFAP (GFAP-ir), avaliar a imunorreatividade dos marcadores para filamentos intermediários astrocitários, bem como sua morfologia pelo método de Scholl, a GFAP-ir, no estrato radiatum da região CA1 do hipocampo, de ratos machos e fêmeas durante o desenvolvimento pós-natal. Além disso, também foi investigada a GFAP-ir nas mesmas regiões de fêmeas adultas, tanto em condições fisiológicas de variação hormonal (ao longo do ciclo estral), como em situações suprafisiológicas (reposição hormonal após ovariectomia). Três experimentos foram realizados: no primeiro foram utilizados ratos machos e fêmeas durante o desenvolvimento pós-natal (n = 48), cujas idades foram: 11 dias pós-natal (PN11), 21 (PN21), 31 (PN31) e 45 (PN45). No segundo experimento, utilizou-se ratos Wistar adultos machos e fêmeas nulíparas adultas durante as fases do ciclo estral (diestro, proestro, estro e metaestro; n = 30) para revelar diferenças provocadas pelos hormônios gonadais femininos na composição astrocitária do hipocampo. No terceiro experimento utilizaram-se fêmeas adultas nulíparas submetidas à ovariectomia (OVX) (n = 18) e tratadas com substituição hormonal de benzoato de estradiol adicionado ou não à progesterona. Os dados foram comparados entre os grupos por meio de um teste de análise da variância (ANOVA) de uma via, sendo aplicado o teste post-hoc Bonfferoni. A comparação dos dados de GFAP-ir apresentou diferenças significativas no número de células e na orientação dos prolongamentos. O número de prolongamentos centrais, aumentaram com a idade, sendo mais significativo para as fêmeas (F45xF11, p≤ 0,001, F45xF21, p≤ 0,01 e F45xF31 p≤ 0,01) que nos machos (M45x M21 p≤ 0,05). Já o número de processos laterais mostrou um aumento mais significativo com a idade nos machos (M45XM11, p≤ 0,001; M45XM21, p≤ 0,001 e M45xM31, p≤ 0,01) que nas fêmeas (F45xF11, p≤ 0,01). Havendo ainda diferenças quando analisados a orientação dos processos primários separadamente de suas ramificações. Os ratos machos apresentaram maior GFAP-ir do que as fêmeas em todas as fases do ciclo estral (diestro, proestro, estro e metaestro; p < 0,001), assim como apresentaram mais células que as fêmeas (p<0,001). Para orientação mais uma vez as diferenças ficaram restritas aos machos, tanto para os processos centrais como para os laterais (p<0,001 e p<0,05 respectivamente). Em fêmeas ovariectomizadas, injeções de estradiol provocaram aumento da GFAP-ir (P < 0,001), assim como houve um aumento do numero de células (P < 0,05) enquanto a morfologia não mostrou diferenças entre os grupos. Esses achados sugerem que a GFAP astrocitária pode ser afetada tanto por níveis fisiológicos de hormônios ovarianos quanto por manipulação hormonal destes esteróides, o que pode contribuir para a plasticidade neuro-glial relacionada a atividades locais e integradas destas áreas encefálicas em machos e fêmeas. Esses achados permitem concluir que esta influência hormonal sobre o hipocampo está presente ainda em fases iniciais do desenvolvimento do SN de ratos, apresentando particularidades morfológicas acima de tudo. Além disso, as diferenças de composição astrocitárias encontradas, ao longo do desenvolvimento, provavelmente se relacionam com a interação neurônio-glia em consonância com aspectos comportamentais e ajustes neuroendócrinos pertinentes a cada sexo, e a cada fase de diferenciação do sistema nervoso. / The hippocampus is part of the limbic system, its functions are varied, and their role in the regulation of emotional behavior and in processes related to the memories storage. Despite having little or no role in the control of reproductive function, the hippocampus still a sensitive target to gonadal steroids. Intermediate filaments such as glial fibrillary acidic protein (GFAP) is an efficient marker of the cytoskeleton of astrocytes and the action of gonadal hormones could alter this structure. The objectives of this study were to measure the number of GFAP imunorreactive cells (GFAP-ir), analysing the immunoreactivity the intermediate filaments of astrocyte, and their morphology by the Scholl‟s method, GFAP-ir in the stratum radiatum of the CA1 region from dorsal hippocampus of male and female rats during postnatal development. In addition, we investigated the GFAP-ir in the same regions of adult males and females, these under physiological hormonal changes (during the estrous cycle), as shown by supraphysiological (hormone replacement after ovariectomy). Three experiments were performed: the first was used male and female rats during postnatal development (n = 48), whose ages were 11 days postnatal (PN11), 21 (PN21), 31 (PN31) and 45 ( PN45). In the second experiment, we used adult male Wistar rats and nulliparous adult females during the estrous cycle (diestrus, proestrus, estrus and metestrus, n= 30) to reveal differences caused by female gonadal hormones on the content of astrocytes in the hippocampus. In the third experiment, a nulliparous adult females subjected to ovariectomy (OVX) (n = 18) and treated with hormone replacement therapy of estradiol benzoate added or not with progesterone. Data were compared between groups by means of a test analysis of variance (ANOVA) one-way, and applied post-hoc Bonfferoni‟s test. A comparison of the GFAP-ir showed significant differences in cell number and orientation of the extensions. The number of central extensions, increased with age, being more significant for females (F45xF11, p ≤ 0,001, F45xF21, p ≤ 0,01 and F45xF31 p ≤ 0,01) than in males (M45x M21 p ≤ 0,05). Since the number of lateral processes showed more significantly with age in males (M45XM11, p ≤ 0,001; M45XM21, p ≤ 0,001 and M45xM31, p ≤ 0,01) than in females (F45xF11, p ≤ 0,01). We also found differences when analyzed the orientation of primary processes separately from their branches. Male rats showed higher GFAP-ir than females at all stages of the estrous cycle (diestrus, proestrus, estrus and metestrus, p <0,001) and had more cells than females (p <0,001). About cell orientation, the differences were observed just in males, both for the core processes and to the lateral (p <0,001 and p <0,05 respectively). In ovariectomized females, injections of estradiol benzoate caused an increase in GFAP-ir (P <0,001), as well as an increase in the number of cells (p <0,05), but the morphology did not differ between groups. These findings suggest that the GFAP astrocyte can be affected both by physiological levels of ovarian hormones and on the hormonal manipulation of these steroids, which may contribute to neuro-glial plasticity related to local activities and integrated these brain areas in males and females. These findings show that hormonal influence on the hippocampus were present in early stages of development of the SN of rat, specially in the morphological characteristics. In addition, differences in astrocytic composition found throughout the development, probably were related to the neuron-glia interaction in accordance with aspects of behavioral and neuroendocrine adjustments, specific to each gender, and each stage of differentiation of the nervous system.
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Avaliação histoquimiluminescente de tumores cutâneos utilizando lectinas conjugadas a éster de acridinaLIMA, Luiza Rayanna Amorim de 31 January 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012 / CAPES / Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um método
histoquimiluminescente para avaliação quantitativa da expressão de carboidratos em
tumores cutâneos utilizando lectinas conjugadas a éster de acridina (EA). As lectinas Con
A, PNA e UEA-I foram conjugadas a EA. A atividade hemaglutinante da lectina-EA foi
avaliada e a quimiluminescência quantificada e expressa em Unidades Relativas de Luz
(URL). Biópsias de pele normal e de tumores cutâneos (ceratose actínica,
ceratoacantoma, carcinoma espinocelular e basocelular) foram incubadas com o
conjugado lectina-EA. A emissão de fótons foi quantificada e correlacionada com a
marcação de tecidos normais e transformados. Os tumores cutâneos apresentaram uma
maior expressão de resíduos de Gal-β(1-3)-GalNAc e uma menor expressão de α-Dglicose/
manose e α-L-fucose, evidenciados pelas diferenças nos valores de URL. O
método histoquimiluminescente, utilizando lectinas conjugadas a éster de acridina,
permitiu a avaliação quantitativa direta da expressão de carboidratos em neoplasias de
pele, combinando a especificidade da interação lectina-carboidrato e a sensibilidade dos
ensaios quimiluminescentes, contribuindo para eliminar a subjetividade da avaliação
histoquímica convencional de carboidratos.
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Histoquímica com lectinas de sementes de Cratylia mollis analisando tecidos prostáticos humanosLucena Rosendo de Lima, Amanda 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Câncer de próstata é o tumor maligno de maior incidência em homens idosos nos
países desenvolvidos e a segunda maior causa de morte por câncer. Lectinas, proteínas ou
glicoproteínas, que reconhecem carboidratos livres ou conjugados têm sido estudadas em
inúmeras aplicações e que através da sua capacidade de reconhecimento, têm sido utilizadas
em histoquímica na análise de mudanças na composição e expressão de carboidratos de
glicoconjugados, de superfície celular e citoplasma, em processos de desenvolvimento e
diferenciação celular como na carcinogênese. O objetivo deste trabalho foi avaliar duas
lectinas de sementes de Cratylia mollis (Cramoll 1,4 glicose/manose específica e Cramoll 3
galactose específica) como potenciais marcadores histoquímicos de tecidos prostáticos
humanos e compará-las a lectinas comerciais de especificidades similares, respectivamente
(Con-A e PNA). Cramoll 1,4 e Cramoll 3 foram conjugadas a peroxidase (Cramoll 1,4-HRP e
Cramoll 3-HRP) e cortes (4 μm) de biópsias de próstata (normal - PN, hiperplásicas HBP e
carcimona CaP) foram submetidos ao ensaio histoquímico com as lectinas em estudo.
Ensaios de inibição da ligação lectina-carboidrato foram realizados com os respectivos
açúcares na concentração de 0,3M para controle das marcações. O padrão de reconhecimento
de Con-A e Cramoll 1,4 (15μg/mL) em HBP foi mais intenso que na próstata normal. Essas
lectinas também mostraram diferenças entre HBP e CaP, no qual elas marcaram com
diminuição de intensidade à medida que o grau de malignidade aumentava. PNA e Cramoll 3
(25μg/mL) reconheceram similarmente as células epiteliais em todos os grupos, porém uma
marcação mais intensa foi observada no lúmen das glândulas do CaP. Nenhuma das lectinas
em estudo pode ser empregada como um marcador para corpos amiláceos já que não houve
diferença de marcação entre elas na maioria dos casos. Nossos resultados sugerem que a
glicosilação das proteínas é modificada tanto na HBP quanto no CaP. Assim, lectinas de
sementes de C. mollis (Cramoll 1,4 e 3) apresentam-se como fortes candidatas à ferramentas
em histoquímica para patologias da próstata quando comparadas as lectinas comerciais como
Con-A e PNA
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Avaliação da expressão de CD4, CD25, IL-10, IL-17 E FOXP 3 em cistos radicularesSANTOS, Raphaela Silva Leandro 31 August 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-08-31 / Introdução: Pouco se sabe sobre o papel modulador exercido pelos linfócitos T reguladores (Treg) e pelas diferentes citocinas envolvidas no desenvolvimento e manutenção dos cistos radiculares (CR). Diante disso, o objetivo deste estudo foi avaliar a imuno-expressão dos marcadores CD4, CD25, interleucina-10 (IL-10), interleucina -17 (IL-17) e forkhead box P3 (FoxP3) em CR e associar esses achados com características histológicas dessas lesões. Métodos: Cinquenta e cinco espécimes teciduais de CR foram analisados quanto às suas características histológicas e submetidos à análise imuno-histoquímica utilizando os anticorpos anti-CD4, anti-CD25, anti IL-10, anti-IL-17 and anti-FoxP3. Os resultados da imunoexpressão foram correlacionados com a intensidade do infiltrado inflamatório e a espessura do revestimento epitelial cístico. Resultados: Todos os casos apresentaram marcação positiva para todos os marcadores estudados, mas com intensidades de expressão diferentes. A expressão de CD4, CD25, IL-10 e FoxP3 foi considerada fraca para todos os casos avaliados, enquanto que a IL-17 apresentou expressão forte e foi observada tanto nas células inflamatórias quanto no revestimento epitelial. Não foi observada diferença estatisticamente significante entre os marcadores avaliados e a intensidade do infiltrado inflamatório e a espessura do revestimento epitelial. Foi observada correlação positiva as marcações de IL-17 e FoxP3. Conclusão: Os presentes resultados evidenciaram uma participação menos expressiva de células Treg em cistos radiculares, através da fraca expressão de CD4, CD25, IL-10 e FoxP3, em detrimento de uma presença mais significativa de IL-17. / Introduction: Little is known about T regulatory (Treg) lymphocytes and cytokines modulation in development and maintenance of radicular cysts (RC). In this perspective, the aim of this study was to evaluate immunoexpression of the markers CD4, CD25, interleukin-17 (IL-17) and interleukin-10 (IL-10) and forkhead box P3 (FoxP3) in RC and to correlate these findings with the histological features of these lesions. Methods: Fifty five RC tissue specimens were analyzed for their histological characteristics and submitted to immunohistochemical analysis using anti-CD4, anti-CD25, anti IL-10, anti-IL-17 and anti-FoxP3 antibodies. The results of immunoexpression were correlated with the intensity of the inflammatory infiltrate and thickness of the epithelial lining. Results: All cases were positive to all studied markers, but with different expression intensity. The immunoexpression of CD4, CD25, IL-10 and FoxP3 was weak for all evaluated cases, whereas IL-17 exhibited strong expression in all cases. In addition, IL-17 was expressed in both inflammatory and epithelial cells of cystic lining. No significant differences in the number of positive cells were observed in terms of the intensity of the inflammatory infiltrate or epithelial thickness. It was observed positive correlations between the immunoexpressions of IL- 17 and FoxP3. Conclusion: The present results showed a less expressive participation of Treg cells in radicular cysts due to weak expression of CD4, CD25, IL-10 and FoxP3 in detriment to a more significant presence of IL-17.
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Avaliação das células de Langerhans na língua de pacientes autopsiados com AIDS em estágio avançado / Expression of Langerhans cells in the tongue of autopsied patients with advanced AIDSGondak, Rogério de Oliveira, 1978- 16 August 2018 (has links)
Orientador: Pablo Agustin Vargas / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:11:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2010 / Resumo: A língua de pacientes com AIDS é acometida freqüentemente por infecções oportunistas e neoplasias. O objetivo deste estudo foi quantificar as células de Langerhans (CL) presentes em regiões lesionais e não lesionais na língua de pacientes autopsiados com AIDS em fase avançada, correlacionando a diminuição das CL com a presença de patologias infecciosas em diferentes regiões da língua (anterior, média, posterior e lateral) e comparar estes achados com a língua de pacientes HIV negativos. Foram utilizadas neste trabalho as línguas de 40 pacientes autopsiados com AIDS divididos em 04 grupos (10 com candidose lingual, 10 com herpes lingual, 10 com leucoplasia pilosa oral e 10 sem lesões em língua) e as línguas de 23 pacientes autopsiados (grupo controle) que morreram por outras patologias não associadas à AIDS e que não apresentaram patologias em língua. Realizamos estudo imunoistoquímico com os marcadores HLA-DR, CD1a e CD83 para identificar as CL e quantificá-las por meio de análise histomorfométrica. O índice de positividade foi obtido através da leitura de 7 campos seqüenciados orientados por ocular micrométrica. As células positivas foram contadas para cada um dos anticorpos nas quatro diferentes regiões da língua e os resultados expressos em células positivas por área de epitélio e por comprimento de membrana basal. O anticorpo HLA-DR mostrou a presença média das CL na língua dos pacientes com AIDS (LA=24,28/mm2 e 3,64/mm, LM=24,60/mm2 e 3,68/mm, LP=20,95/mm2 e 3,14/mm, LL=19,84/mm2 e 2,97/mm) e no grupo controle (LA=68,18/mm2 e 10,23/mm, LM=60,73/mm2 e 9,11/mm, LP=62,94/mm2 e 9,44/mm, LL=50,24/mm2 e 7,53/mm). O anticorpo CD1a mostrou a presença média das CL na língua dos pacientes com AIDS (LA=17,30/mm2 e 2,59/mm, LM=21,11/mm2 e 3,16/mm, LP=13,48/mm2 e 2,02/mm, LL=15,55/mm2 e 2,33/mm) e no grupo controle (LA=205,38/mm2 e 30,81/mm, LM=218,36/mm2 e 32,75/mm, LP=167,29/mm2 e 25,09/mm, LL=223,60/mm2 e 33,54/mm). O anticorpo CD83 mostrou a presença média das CL na língua dos pacientes com AIDS (LA=6,19/mm2 e 0,92/mm, LM=6,34/mm2 e 0,95/mm, LP=6,82/mm2 e 1,02/mm, LL=7,14/mm2 e 1,07/mm) e no grupo controle 68,18/mm2 e 10,23/mm, LM=68,46/mm2 e 10,27/mm, LP=69,28/mm2 e 10,39/mm, LL=63,49/mm2 e 9,52/mm), sendo que foram extremamente significantes as diferenças entre ambos os grupos em todas as regiões e anticorpos estudados (p<0,001). Portanto, podemos concluir que as CL estavam degeneradas e diminuídas em número em todas as regiões da língua e em todos os grupos com AIDS em relação ao grupo controle e as lesões infecciosas orais oportunistas não influenciaram na depleção das CL nas línguas / Abstract: The tongues of AIDS patients can be affected by opportunistic infections and neoplasms. Objectives: to quantify and compare the expression of Langerhans cells (LC) in lesional and non lesional areas in the tongue from patients with and without AIDS (control group), using autopsy material. Methods: we analysed the expression of CD1a, HLA-DR and CD83 using immunohistochemistry to identify and quantify LC in the tongues of AIDS patients (n=40), which were divided into 04 groups (10 lingual candidiasis, 10 lingual herpes, 10 oral hairy leukoplakia and 10 none lesions), and 23 tongues from HIV-negative controls. The immunoreactivity rate was obtained after reading at least seven fields sequenced driven ocular micrometer. The positive LC were detected in the lingual surface epithelium in four different regions (anterior, middle, posterior and lateral) and the results expressed as positive cells per area of epithelium and basement membrane length. Results: LC showed the following immunoreactivity for CD1a in the tongue of AIDS patients (LA=17.30/mm2 and 2.59/mm, LM=21.11/mm2 and 3.16/mm, LP=13.48/mm2 and 2.02/mm, LL=15.55/mm2 and 2.33/mm), and in the control group (LA=205.38/mm2 and 30.81/mm, LM=218.36/mm2 and 32.75/mm, LP=167.29/mm2 and 25.09/mm, LL=223.60/mm2 and 33.54/mm); HLA-DR (AIDS patients) (LA=24.28/mm2 and 3.64/mm, LM=24.60/mm2 and 3.68/mm, LP=20.95/mm2 and 3.14/mm, LL=19.84/mm2 and 2.97/mm), and the control group (LA=68.18/mm2 and 10.23/mm, LM=60.73/mm2 and 9.11/mm, LP=62.94/mm2 and 9.44/mm, LL=50.24/mm2 and 7.53/mm); CD83 (AIDS patients) (LA=6.19/mm2 and 0.92/mm, LM=6.34/mm2 and 0.95/mm, LP=6.82/mm2 and 1.02/mm, LL=7.14/mm2 and 1.07/mm), and the control group (LA=68.18/mm2 and 10.23/mm, LM=68.46/mm2 and 10.27/mm, LP=69.28/mm2 and 10.39/mm, LL=63.49/mm2 and 9.52/mm). The statistical analysis identified significant differences in the both groups and in all regions, and among the 3 antibodies (p<0.001). Conclusions: LC were degenerated and reduced in number in all regions of the tongue of AIDS patients in relation to the control group and the depletion of LC in the tongues of AIDS patients is not associated with oral opportunistic infections / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia
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Validação imunofenotipica e ultraestrutural da linhagem de glioma humano NG7Schenka, André Almeida, 1976- 05 August 2018 (has links)
Orientador: Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T04:55:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: Uma nova linhagem de glioma humano, NG97, foi estabelecida por Grippo et al. em 2001 a partir de um astrocitoma grau III (OMS, 2000). Neste primeiro estudo, o cultivo da linhagem revelou a existência de duas subpopulações morfologicamente distintas: uma constituída por células fusiformes/dendríticas e outra, por células pequenas e redondas. A injeção de células NG97 em camundongos nude induziu a formação de um tumor agressivo caracterizado por atipia citológica intensa, proliferação vascular e necrose em pseudopaliçadas (achados sugestivos, mas não diagnósticos de glioblastoma multiforme). O objetivo do presente estudo foi caracterizar os aspectos imunofenotípicos e ultraestruturais desta linhagem celular, utilizando o tumor parental, as células em cultura e o xenotransplante, com o intuito de avaliar sua natureza glial e possíveis diferenciações divergentes. A comprovação de sua natureza glial é de fundamental importância para a caracterização e validação desta linhagem como um modelo de glioma. As células NG97 e o xenotransplante expressaram os principais marcadores neurogliais (GFAP, proteína S-100, NSE e Leu-7) e não apresentaram qualquer expressão aberrante de outros marcadores de histogênese. GFAP foi expressa de maneira similar no tumor parental e nas células em cultura, diminuindo significativamente no xenotransplante. A expressão de NSE era reduzida nas células NG97, em comparação ao tumor parental, sendo substancialmente recuperada no xenotransplante. Esta variabilidade de expressão de GFAP e NSE foi interpretada como um fenômeno de indiferenciação ou, alternativamente, como um fenômeno relacionado a uma possível seleção microambiental de subclones específicos. A proteína S-100 foi expressa de maneira semelhante nos três contextos de análise (tumor original, células de cultura e transplante). A análise ultraestrutural do xenotransplante revelou uma neoplasia altamente indiferenciada compatível com um glioblastoma. Não foram observadas diferenças imunofenotípicas ou ultraestruturais significativas entre as duas subpopulações morfologicamente distintas. Assim, nossos dados demonstram que as células NG97 constituem uma linhagem celular pura, comprometida com o fenótipo glial, que poderá ser útil como um modelo de glioma maligno em estudos direcionados a questões fisiopatológicas, diagnósticas e terapêuticas / Abstract: A human glioma cell line, NG97, was established by Grippo et al. in 2001 from tissue obtained from a grade III astrocytoma (WHO, 2000). In this first study, the cell line grew as two morphologically distinct subpopulations: dendritic/spindle cells and small round cells. The injection of NG97 cells into nude mice induced an aggressive tumor characterized by: severe cytological atypia, vascular proliferation and pseudopalisading necrosis (features which are suggestive but not conclusive for the diagnosis of glioblastoma multiforme). The purpose of the present study was to characterize the immunophenotype and ultrastructural aspects of this cell line, using the parental tumor, cultured cells and the xenotransplant, in order to assess its glial nature and possible divergent differentiation. Proof of glial differentiation is fundamental to the process of characterization and validation of this cell line as a glioma model. NG97 cells and xenotransplant expressed the main neuroglial markers (GFAP, S-100 protein, NSE and Leu-7) and showed no aberrant expression of other histogenetic markers. GFAP was similarly expressed in the parental tumor and in the cells in culture, but decreased in the xenotransplant. NSE expression was reduced in NG97 cells, but substantially recovered in the xenotransplant. This variability in expression of GFAP and NSE was interpreted as either a phenomenon of dedifferentiation or due to microenvironmental selection of specific subclones. S-100 was equally expressed in the three contexts. The xenotransplant¿s ultrastructural features were those of a highly undifferentiated tumor consistent with glioblastoma. No significant immunophenotypic or ultrastructural differences between the two morphologically distinct populations were found. Thus, our data demonstrate that NG97 cells constitute a pure glial-committed cell line, which may prove useful as a malignant glioma model in studies addressing pathophysiological, diagnostic and therapeutic issues / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas
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Expressão da ciclo-oxigenase-2 e do Ki67 em lesões precursoras do cancer do colo uterinoSarian, Luís Otávio Zanatta, 1974- 11 April 2005 (has links)
Orientador: Sophie Françoise Mauricette Derchain / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T06:11:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: Objetivos: Avaliar a expressão da ciclo-oxigenase-2 (COX-2) em lesões escamosas da cérvice uterina e suas relações com a expressão nuclear do Ki67, a detecção do papilomavírus humano (HPV) e com a persistêncialrecorrência de neoplasia intra epitelial cervical (NIC) após conização diatérmica. Sujeitos e métodos: Este foi um estudo de coorte, com análise intermediária em corte transversal, para o qual foram selecionadas mulheres submetidas à conização diatérmica para o tratamento de anormalidades cervicais, entre fevereiro de 2001 e abril 2004. O estudo é apresentado em dois artigos: o primeiro consiste de análise transversal, incluindo os espécimes cirúrgicos de 164 mulheres submetidas à conização. Foram avaliadas a expressão citoplasmática da COX-2 e a expressão nuclear do Ki67, determinadas por imuno-histoquímica, segundo a gravidade da lesão cervical e a detecção do HPV de alto risco oncogênico, realizada através de Captura de Híbridos 11. No segundo artigo, com análise longitudinal, foram incluídas 104 mulheres com NIC, seguidas por até 36 meses após conização diatérmica, para avaliar possíveis relações entre a expressão da COX-2 e Ki67, comprometimento das margens do cone e d_tecção do HPV (durante o seguimento), com a persistêncialrecorrência da NIC. Resultados: No primeiro artigo pode-se observar que não houve diferença na expressão citoplasmática da COX-2 relacionada à gravidade da lesão cervical, à expressão do Ki67 e à detecção do HPV de alto risco. Houve maior expressão de Ki67 nos espécimes com NIC 3. No segundo artigo, 14 casos de recorrência/persistência da NIC foram detectados durante o seguimento. A expressão citoplasmática da COX-2 e a expressão nuclear do Ki67 foram semelhantes nos casos com ou sem recorrêncialpersistência, e apenas a detecção do HPV de alto risco oncogênico durante o seguimento esteve associada ao maior risco de persistêncialrecorrência da NIC (Razão de risco 7,6; Intervalo de confiança 95% 2,1-28,6). Conclusões: A expressão citoplasmática da COX-2 não esteve relacionada à gravidade da lesão cervical, à expressão de Ki67 ou à infecção pelo HPV. As expressões da COX-2 e do Ki-67 não se relacionaram com a persistência/recorrência da NIC em até 36 meses de seguimento / Abstract: Objectives: To assess the expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) in squamous lesions of the uterine cervix and its possible relations to nuclear expression of Ki67, Human papillomavirus (HPV) detection and to the persistence/recurrence of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) after diathermic conization. Subjects and methods: This was a prospective study with intermediate cross-sectional analysis, in which women subjected to diathermic conization due to cervical abnormalities were selected between February 2001 and April 2004. The first article is a cross sectional study, including surgical specimens of 164 women subjected to conization. Cytoplasmic expression of COX-2 and nuclear expression of Ki67, ascertained through immunohistochemistry, was evaluated according to cervicallesion grade and high-risk HPV detection through Hybrid Capture 11. In the second article, 104 women ith CIN were included, followed-up for 36 months after diathermic conization, in order to assess possible relation between COX-2 and Ki67 expression, adjusted by the cone margin status and high-risk HPV detection during follow-up with persistentlrecurrent CIN. Results: Cross-sectional analysis of baseline data disclosed that COX-2 protein expression did not differ in relation to grade of cervical lesion, Ki67 expression and high-risk HPV detection. A higher expression of Ki67 was associated exclusively with CIN 3. In the follow-up series, fourteen cases of recurrentlpersistent CIN were detected after diatherrny conization. Persistence/recurrence of CIN were not related to cytoplasmic COX-2 and nuclear Ki67 expression, but had a positive association with high-risk HPV detection during follow-up (Risk Ratio 7.6; 95% confidence interval 2.1-28.6). Conclusion: The cytoplasmic expression of COX 2 did not correlate with cervical lesion grade, nuclear Ki67 expression and high-risk HPV detection. COX-2 and Ki67 expression was not related to persistence/recurrence of CIN / Doutorado / Tocoginecologia / Doutor em Tocoginecologia
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Investigação do papilomavirus humano (HPV) por imuno-histoquimica e hibridização "in situ" em biopsias endoscopicas de esofagoDias, Christiane Pienna Soares 11 January 1996 (has links)
Orientadores: Miriam A. S. Trevisan, Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T03:49:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1996 / Resumo: O papiloma vírus humano (HPV) tem sido descrito como um fator de risco para o desenvolvimento de lesões benignas e malignas no esôfago, sendo os tipos mais frequentes os HPVs 6, 11, 16, 18, 31, 33 e 35. No presente trabalho, selecionamos 49 casos de biópsias endoscópicas de esôfago coradas por hematoxilina-eosina. que continham graus variados de atipia coilocitótica (coilocitose, discariose, bi ou multinucleação). Esses casos foram submetidos às reações de imuno-histoquímica e hibridização " in situ " com sondas biotiniladas 6/11, 16/18, 31/33/35 (Kit Viratype-DIGENE). Os resultados para os casos estudados foram negativos, com controles positivos de forte sinal, por ambos os métodos. Assim, é possível que as alterações morfológicas do epitélio escamoso do esôfago possam não ser de origem viral e outros fatores devem ser considerados como potencialmente responsáveis por essas alterações / Abstract: Human Papillomavirus has been describe as a risk factor to benign and malign esophageallesions. The HPV s eommons in esophageal epithelium are 6, 11, 16, 18, 31, 33 and 35. We had select fourty nine endoscopie biopsies which histologic analysis had show koilocytotic atypia in different grades. We has use
immunohistochemical and in situ hibridization reactions with commercially biotynilated probes 6/11, 16/18 and 31/33/35 (Viratype probe set.- DIGENE). We couldn't find HPV's antigen or DNA in any fourty nine
samples. Then, our studies suggest other factors to development of esophageal tissues alterations / Doutorado / Doutor em Ciências Médicas
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Analise comparativa das caracteristicas microscopicas da lesão liquenoide na GVHD cronica e no liquen plano de bocaVillar, Cristina Cunha 03 December 2001 (has links)
Orientadores: Maria Leticia Cintra, Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-29T04:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2001 / Resumo: O líquen plano (LP) é uma doença mucocutânea crônica, de causa desconhecida, que freqüentemente afeta a mucosa oral. Histologicamente, o LP apresenta diferentes graus de acantose e atrofia, com desorganização da camada basal e infiltrado inflamatório subepitelial em banda, composto principalmente de linfócitos T. Lesões semelhantes ao líquen plano, chamadas reações liquenóides, podem acometer a mucosa oral. As reações liquenóides podem estar associadas à desordens sistêmicas, como na doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (GVHDc). Os achados histológicos da reação liquenóide associada à GVHDc são semelhantes aos encontrados no LP. O objetivo deste trabalho foi comparar as características microscópicas do LP e da GVHDc em boca. As alterações epiteliais e no tecido conjuntivo foram avaliadas em 40 casos de LP e 31 de GVHDc, assim como a presença de mastócitos, macrófagos e células de Langerhans (CL). As maiores diferenças entre as lesões foram observadas na região da junção epitélio tecido conjuntivo. No LP, o infiltrado inflamatório foi mais intenso, porém a desorganização e vacuolização das células da camada basal foram menos evidentes. Os mastócitos foram mais numerosos no LP, e apresentaram menor quantidade de grânulos quando observados no infiltrado inflamatório. As CL foram mais freqüentes no LP, e os macrófagos na GVHDc. A expressão de laminina foi similar nos dois grupos. Estes resultados mostram que a lesão liquenóide associada a GVHDc difere do LP, particularmente na junção epitélio-tecido conjuntivo. No LP, o infiltrado inflamatório é mais intenso, mas a expressão antigênica, possivelmente menor, gera alterações epiteliais mais discretas / Abstract: Lichen planus (LP) is a chronic mucocutaneous disease of unknown etiology, that frequently affects the oral mucosa. Microscopically, LP is characterized by areas of epithelial acantosis and atrophy, with disorganization of the basal layer, and by a subepithelial band-like mononuclear inflammatory infiltrate. Lichenoid lesion are diseases that present a similar pattern to LP, that can affect the mouth and skin, as Lichenoid lesions may be associated with chronic Graft versus Host Disease (cGVHD). The objective of this work was to compare the microscopic characteristics of LP and those of cGVHD in the oral mucosa. Epithelial and connective tissue alterations were evaluated in 40 cases of LP and in 31 cases of cGVHD, as well as the presence of mast cells, Langerhans cells (CL) and macrophages. The main differences found between the two diseases were at dermal-epithelial junction area. In LP the inflammatory infiltrate was more intense, but disorganization and vacuolization of the epithelial basal cells were less evident. Mast cells were more numerous in lichen planus, and showed less granules when observed in the inflammatory infiltrated. LC were more numerous in lichen planus and macrophages in cGVHD. The laminin expression was similar in both groups. From these observations it was concluded that lichenoid lesions of cGVHD of the oral mucosa differs from LP, particularly at the dermal-epithelial junction region. In LP the inflammatory infiltrate is more intense, but the antigenic expression possibly is less than in cGVHD, causing a more discrete epithelial cells alterations / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia
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Caracteristicas clinico-patologicas e expressão de marcadores de proliferação celular e de miofibroblastos em carcinomas espinocelulares de lingua / Clinicopathologic characteristics, cell proliferation markers and myofibroblast expression in oral squamous cell carcinoma carcinoma of the tongueGueiros, Luiz Alcino Monteiro 12 December 2008 (has links)
Orientador: Marcio Ajudarte Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-12T16:30:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2008 / Resumo: O carcinoma espinocelular oral é a principal neoplasia maligna da boca, sendo a língua o local mais acometido. Recentemente tem sido relatado que tumores deste local apresentam características clínicas e comportamento biológico distintos dos demais tumores orais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar as características clínicas, histopatológicas e expressão de marcadores de proliferação celular e actina de músculo liso (AML) em carcinomas espinocelulares (CECs) de língua. Para tanto, foram retrospectivamente analisados 63 casos de lesões de língua sem tratamento prévio e sem metástase à distância ao diagnóstico. As informações clínicas foram obtidas dos prontuários do Hospital do Câncer A.C. Camargo e as características histopatológicas observadas segundo os critérios de Anneroth e Bryne, sendo feitas reações imunoistoquímicas para Ki-67, mcm-2, geminina e AML. O tumor foi mais prevalente em homens, com 51 casos (80,95%) e apenas 12 em mulheres (19,05%), com idade variando de 31 a 92 anos, e média de 57,6 anos (dp = 11,81). Maior parte dos pacientes era fumante (85,7%) e consumia bebidas alcoólicas regularmente (82,5%). Com relação à gradação histológica, verificou-se que um escore de Anneroth maior que 15 esteve associado a etilismo (p=0,05), tipo de tratamento (p=0,05), tamanho do tumor (p=0,05), presença de êmbolos tumorais em vasos sanguíneos (p=0,003), comprometimento nodal (p=0,05), ruptura de cápsula nodal (p=0,016) e desenvolvimento de metástase à distância (p=0,002). Por outro lado, um escore maior que 12 segundo a gradação de Bryne apresentou associação com ruptura de cápsula (p=0,02) e desenvolvimento de metástase à distância (p=0,002), além de sobrevida global (p=0,03) e sobrevida livre de doença (p=0,05). O Ki-67 se mostrou capaz de prever metástase cervical (p=0,06). A expressão de mcm-2 correlacionou-se com idade (p=0,03) e metástase cervical (p=0,008) e a expressão de geminina com gênero feminino (p=0,02) e presença de invasão neural (p=0,05). Alta expressão de AML no estroma tumoral apresentou associação com estádio N maior ou igual a 1 (p=0,01), estadiamento clínico III e IV (p=0,03) e evolução com metástase nodal após o tratamento (p=0,07). Com base nestes resultados, sugere-se que os critérios de Bryne, associados à utilização de marcadores de proliferação celular e de miofibroblastos, podem ser importantes na avaliação do comportamento biológico de CECs de língua. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the clinical and histopathological features as well as proliferation markers and smooth muscle actin (SMA) immunohistochemical expression in tongue squamous cell carcinomas. Sixty three cases of tongue lesions with no previous treatment and no distant metastasis were selected. Clinical informations were retrieved from the clinical files of A.C. Camargo Cancer Hospital and the tumors were graded according to Anneroth et al. (1987) and Bryne et al. (1992) grading systems. Immunohistochemical reactions to Ki-67, mcm-2, geminin and SMA were performed. A male predilection could be noted since the sample was composed by 51 men (80,95%) and 12 women (19,05%). Age ranged from 31 to 92 years, with a mean age of 57,6 years (sd=11,81) and a median age of 58 years. Most of the patients were smokers (85,7%) and regular consumers of alcoholic beverages (82,5%). A total Anneroth score was related to regular consumption of alcoholic beverages (p=0,05), treatment (p=0,05), tumor size (p=0,05), tumoral embolization of blood vessels (p=0,003), nodal metastasis (p=0,05), nodal capsule rupture (p=0,016) and distant metastasis (p=0,002). On the other hand, total Bryne score above 12 was related to nodal capsule rupture (p=0,02) and distant metastasis (p=0,002), as well as overall survival (p=0,03) and disease-specific survival (p=0,05). Ki-67 was capable of predicting nodal metastasis (p=0,06). Immunohistochemical evaluation of mcm-2 revealed a relation between expression and age (p=0,03) and nodal metastasis (p=0,008). Geminin expression was related to female gender (p=0,02) and neural invasion (p=0,05). High levels of SMA were related to N stage (p=0,01), clinical stage III and IV (p=0,03) and nodal metastasis after treatment (p=0,07). It could be concluded that Bryne score together with proliferation and myofibroblast markers expression can be useful for evaluating the biological behavior of tongue squamous cell carcinomas. / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia
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