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Isolamento de plastídios do endosperma de sementes em desenvolvimento de pinhão manso (Jatropha curcas L.) / Isolation of plastids from developing endosperm of seeds of Jatropha (Jatropha curcas L.)

Pinheiro, Camila Barbosa January 2010 (has links)
PINHEIRO, C. B. Isolamento de plastídios do endosperma de sementes em desenvolvimento de pinhão manso (Jatropha curcas L.). 2010. 103 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2010. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-10-31T19:24:09Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_cbpinheiro.pdf: 4619196 bytes, checksum: 9c3f62aee9c581ca0c832ec34ef6dab5 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-16T17:02:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_cbpinheiro.pdf: 4619196 bytes, checksum: 9c3f62aee9c581ca0c832ec34ef6dab5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-16T17:02:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_cbpinheiro.pdf: 4619196 bytes, checksum: 9c3f62aee9c581ca0c832ec34ef6dab5 (MD5) Previous issue date: 2010 / Jatropha (Jatropha curcas L.), belonging to the Euphorbiaceae family, is an oilseed plant with great potential for biofuel production because of the richness of lipids in their seeds. It also presents toxicity due to the presence of phorbol esters. In this context, the objective of this study is the isolation of plastids, the site of synthesis of fatty acids and phorbol esters, present in the endosperm of developing seeds of J. curcas. Preliminary experiments by testing morphology, histology and histochemistry was performed to determine the stage of seed development most suitable for the isolation of plastids present in the endosperm. These analyzes revealed that the deposition of lipids and proteins in the endosperm starts around the 30th DAA. The isolation of plastids, the endosperm of the seeds in this stage was performed by gradient centrifugation PBF-Percoll discontinuous (10%, 22%, 35%). The enriched fractions of plastids has been obtained from the band formed in the interface layer of 22-35%. Analysis by scanning electron microscopy and transmission were performed to confirm the efficiency of the protocol employed in the purification of the plastids. Two-dimensional maps have been laid, the "spots" detected in the same will be identified by mass spectrometry, which will allow the identification of the plastid proteins involved in the synthesis of fatty acids and phorbol esters in the endosperm of seeds J. curcas. / O pinhão manso (Jatropha curcas L.), pertencente à família Euphorbiaceae, é uma planta oleaginosa com grande potencial para a produção de biocombustível devido à riqueza de lipídios em suas sementes. Ele também apresenta toxicidade devido à presença de ésteres de forbol. Nesse contexto, o objetivo deste estudo é realizar o isolamento de plastídios, local de síntese de ácidos graxos e de ésteres de forbol, presentes no endosperma de sementes em desenvolvimento de J. curcas. Experimentos preliminares através de análises morfológica, histológica e histoquímica foram realizados para determinação do estágio do desenvolvimento da semente mais adequado para o isolamento de plastídios presentes no endosperma. Estas análises revelaram que a deposição de lipídios e proteínas no endosperma se inicia por volta do 30o DAA. O isolamento de plastídios, do endosperma de sementes nesse estágio foi realizado por centrifugação em gradiente descontínuo de PBF-Percoll (10%, 22%, 35%). A fração enriquecida de plastídios foi obtida a partir da banda formada na interface da camada de 22-35%. Análises por microscopia eletrônica de varredura e de transmissão foram realizadas para confirmar a eficiência do protocolo empregado na purificação dos plastídios. Mapas bidimensionais foram estabelecidos, os “spots” detectados nos mesmos serão identificados por espectrometria de massa, o que possibilitará a identificação das proteínas plastidiais envolvidas na síntese dos ácidos graxos e dos ésteres de forbol no endosperma de sementes de J. curcas.
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Reparação óssea em alvéolos de ratas ovarectomizadas após implante com biovidro : análise histomorfométrica e imunoistoquímica /

Azenha, Marcelo Rodrigues. January 2013 (has links)
Orientador: Osvaldo Magro Filho / Banca: Celso Kooji Sonoda / Banca: Sonia Regina Panzarini Barioni / Banca: Luiz Guilherme Brentegani / Banca: Osny Ferreira Júnior / Resumo: Objetivos: Avaliar o processo de reparo alveolar em ratas ovarectomizadas após implante com Biosilicato cristalino. Materiais e Métodos: Sessenta ratas foram divididas em quatro grupos (n = 15) de acordo com o tratamento: Grupo 1- ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com coágulo; Grupo 2-ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino; Grupo 3-ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com coágulo; e Grupo 4- ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino. Após 7, 14 e 28 dias os animais foram sacrificados e análises histomorfométricas (histologia e histometria) e imunoistoquímicas (Osteopontina e Osteocalcina) foram realizadas. A comparação dos resultados foi realizada utilizando o programa estatístico Assistat 2013 para Windows através da Análise de Variância e teste de Mann-Whitney, com resultados significantes sendo encontrados quando p≤0.05. Resultados: No período de 7 dias, os Grupos 1 e 3 apresentaram resultados superiores e estatisticamente maiores do que os Grupos 2 e 4 (p<0.05) quanto à formação óssea. Após o período de 14 dias as diferenças estatísticas mantiveram-se, com os Grupos 1 e 3 apresentando diferença estatisticamente significante maiores aos Grupos 2 e 4 (p<0.05). Aos 28 dias, a diferença estatística significativa permaneceu entre os mesmo Grupos estudados, sendo que nos grupos implantados com o Biosilicato cerca de 60% do alvéolo já havia sido preenchido por osso novo. A imunoistoquímica revelou expressão das proteínas Osteocalcina e Osteopontina, principalmente nos animais submetidos à cirurgia de ovarectomia. Conclusões: Os Grupos 1 e 3 foram os que apresentaram os melhores resultados durante todo o estudo, com o Biosilicato cristalino apresentando resultado favorável na reparação... / Abstract: Objectives: To evaluate the process of alveolar repair in ovariectomized rats after implantation with Biosilicate. Materials and Methods: Sixty rats were divided into four groups (n = 15) according to treatment: Group 1 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with blood clot; Group 2 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with crystalline Biosilicate; Group 3 - ovariectomized rats with alveoli filled with blood clot; Group 4 - ovariectomized rats with alveoli filled with crystalline Biosilicate. After 7, 14 and 28 days the animals were sacrificed and histomorphometric analysis (histology and histometric) and immunohistochemical (Osteopontin and Osteocalcin) were measured . The comparison of the results was performed using the statistical program Assistat 2013 for Windows by Analysis of Variance and Mann-Whitney tests, with significant results being found when p ≤ 0:05 . Results: During the 7- day period, Groups 1 and 3 showed better and significantly higher results in bone formation than Groups 2 and 4 (p<0.05). After 14 days the statistical differences remained between Groups 1 and 3 and Groups 2 and 4 (p<0,05). At 28 days, the statically difference remained significant between the same Groups, while the groups implanted with Biosilicate presented about 60% of the socket filled by new bone. Immunohistochemistry revealed expression of proteins osteocalcin and osteopontin, especially in animals subjected to ovariectomy surgery. Conclusions: Groups 1 and 3 were those with the best results throughout the study, with the crystalline Biosilicate presenting favorable result in bone repair without bioglass resorption. The immunohistochemical analysis showed that animals subjected to ovariectomy had a higher signaling in Ostecalcina and Osteopontin proteins / Doutor
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Estudo dos pólipos endometriais pela imunoexpressão das proteinas p53 e PTEN

Abrão, Féres January 2016 (has links)
Orientador: Rogerio Dias / Resumo: Objetivo: Avaliar os pólipos endometriais pela imunoexpressão das proteínas p53 e PTEN como fatores preditivos para riscos de pré-malignidade e malignidade. Pacientes e Métodos: Estudo transversal com amostra por conveniência, cujos dados foram obtidos através de consultas aos prontuários no período de janeiro de 2010 a dezembro 2014 de pacientes com diagnóstico de pólipos endometriais, submetidas a histeroscopias diagnósticas e cirúrgicas/polipectomia no Setor de Endoscopia Ginecológica e Planejamento Familiar da Disciplina de Ginecologia da Faculdade de Medicina de Botucatu (UNESP) e da Clínica "Abrão" de Marília. Os pólipos endometriais foram encaminhados, em bloco de parafina, à Consultoria em Patologia Dr Carlos Bacchi para avaliação imunoistoquímica, identificando os marcadores p53 e PTEN. Todas as pacientes realizaram, previamente, ultrassonografia transvaginal e histeroscopia diagnóstica. O grupo estudado constituiu-se de 159 pacientes (n=159) com diagnóstico de pólipo confirmado pelo exame anátomo patológico. Grupo amostral: as pacientes foram divididas em 2 (dois) grupos, assim denominados: Grupo A=120 (pacientes com pólipos endometriais sem atipias) e Grupo B=39 (pacientes com pólipos endometriais com atipias). O Grupo A foi subdividido em 4 subgrupos, assim denominados: A1- imunoistoquímico p53 negativo e PTEN positivo; A2- imunoistoquímico p53 positivo e PTEN positivo; A3- imunoistoquímico p53 negativo e PTEN negativo e A4- imunoistoquímico p53 positivo e PTEN ne... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: Evaluate the endometrial polyps by immune expression of p53 protein and PTEN as predictive factors for pre malignancy and malignancy risks. Patients and Methods: Transversal study with samples by convenience whose data were obtained by consulting the medical charts from January 2010 to December 2014 of patients diagnosed with endometrial polyps, submitted to a diagnostic and surgical hysteroscopy/polypectomy in the Gynaecological Endoscopy and Familiar Planning Division of the Gynaecology Discipline at Medical School of Botucatu (UNESP) and "Abrão" Clinic of Marília. The endometrial polyps, in paraffin blocks, were sent to Doctor Carlos Bacchi Pathology Advisory for immune hystochemical assessment, identifying the markers p 53 and PTEN. Previously, transvaginal ultrasonography and diagnostic hysteroscopy were done in all the patients. The studied group was made up of 159 patients (n=159) with confirmed diagnosis of polyps by anatomical pathological examination. Sample group: the patients were divided into 2 groups: Group A=120 (patients with endometrial polyps without atypias) and Group B = 39 (patients with endometrial polyps with atypias). Group A was subdivided into 4 sub groups: A1- immune hystochemical p53 negative and PTEN positive; A2- immune hystochemical p53 positive and PTEN positive; A3- immune hystochemical p53 negative and PTEN negative and A4- immune hystochemical p53 positive and PTEN negative. Group B was subdivided into 4 sub groups: B1- immune hys... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Estudo morfológico e histoquímico do tubo digestivo de eleuteroembriões e larvas de Leporinus obtusidens (Valenciennes, 1836)

Chedid, Renata Alari [UNESP] 27 January 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-27Bitstream added on 2014-06-13T18:08:08Z : No. of bitstreams: 1 chedid_ra_me_jabo.pdf: 1366238 bytes, checksum: 21a6e3e47bfbdb87f49b7e199bfd5d21 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Leporinus obtusidens apresenta características zootécnicas interessantes e promissoras para o cultivo em piscicultura. Na maioria das espécies cultivadas, as larvas, ao iniciarem a alimentação exógena, são organismos cujo desenvolvimento ainda não se completou, razão pela qual os órgãos digestivos não estão totalmente definidos e o conteúdo enzimático ainda é deficiente. As pesquisas com larvas de peixes apontam para a alimentação como o fator de maior importância a ser considerado durante o desenvolvimento inicial, pois os organismos estão na fase de diferenciação estrutural e funcional do sistema digestório. Assim o objetivo deste trabalho foi analisar as características histológicas e histoquímicas do tudo digestivo de Leporinus obtusidens nas fases iniciais do desenvolvimento. As amostras foram fixadas em solução de Karnovsky e processadas para análises histológicas e histoquímicas. A eclosão dos eleuteroembriões de L. obtusidens ocorreu às 15 horas após a fertilização (28°C) e as reservas de vitelo foram observadas até 120 horas após a eclosão (HAE). A boca sofreu modificações na posição, passando de ventral para subterminal. Com relação ao esôfago, foi possível observar as primeiras células caliciformes com 48 HAE e a partir de 64 HAE intensa positividade ao PAS e ao AB. A partir de 30 HAE foi possível observar o primórdio do estômago, caracterizado pela substituição do epitélio esofágico estratificado por epitélio gástrico simples, com presença de poucas células caliciformes. Com 96 HAE foi observada intensa reação ao PAS no epitélio de revestimento do estômago, o que indica funcionalidade do órgão. Quanto ao intestino, foi observado um desenvolvimento lento, as primeiras células caliciformes foram observadas com 96 HAE. Os cecos pilóricos foram evidenciados... / Leporinus obtusidens husbandry has characteristics very interesting and promising for cultivation in aquaculture programs. Most of the cultivated species, the larvae begin to feed exogenously, are organisms whose metamorphosis is not complete, which is why the digestive organs are not fully defined and the enzyme content is still deficient. The studies with fish larvae feeding point to as the most important factor to be considered during early development, because the organisms are in the process of structural and functional differentiation of the digestive system. Thus the objective of this study was to analyze the histological and histochemical features of digestive L. obtusidens in all stages of development. Samples were collected in the Hydrobiology and Aquaculture Station of Companhia Energetica de São Paulo (CESP) Jupiá, SP. The samples were fixed in Karnovsky solution, processed for histological and immunohistochemical analysis. The outbreak of eleuteroembryo L. obtusidens occurred approximately 15 hours after fertilization (28 ° C) and the yolk reserves were observed up to 120 HAE. The mouth has undergone successive changes during development, the ventral position to the subterminal position. With regard to the esophagus, it was possible to observe the first goblet cells with 48 HAE and and starting at 64 HAE intense positivity to PAS and AB. From 30 HAE was possible to observe the beginnings of the stomach, characterized only by the substitution of an esophageal epithelium stratified by gastric epithelium simple with cuboidal cells, with little presence of goblet cells. Was observed with 96 HAE intense reaction to PAS in the epithelium lining of the stomach, indicating functionality of the organ. As the intestine, we observed a slow development, the first goblet cells were observed... (Complete abstract click electronic access below)
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Identificação de genes diferencialmente expressos no endométrio de mulheres durante o ciclo menstrual / Identification of genes differencially expressed in women endometrium during the menstrual cycle

Otsuka, Audrey Yumi [UNIFESP] January 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / As variações fisiológicas dos hormônios sexuais ao longo do ciclo menstrual promovem alterações histomorfológicas e funcionais no endométrio. Para melhor entender as variações de expressão genética responsáveis por tais eventos, motivamo-nos a avaliar as eventuais variações na expressão gênica nas fases proliferativa e secretora do ciclo menstrual. Para tanto, estudamos o endométrio normal de 24 pacientes submetidas à histerectomia por causas benignas. Retiraram-se fragmentos do endométrio para extração de RNA, os quais foram imediatamente acondicionados em gelo seco para futura utilização. As amostras foram submetidas a ensaios do tipo cDNA microarray em lâminas contendo 10.000 genes. A análise da expressão diferencial foi realizada pelo software SAM e os resultados confirmados, individualmente, por PCR em tempo real para RNA mensageiro, além de imunohistoquímica para a correta confirmação em nível protéico. Dos 10.000 genes estudados, obtivemos um total de 1127 genes diferencialmente expressos. Dentre estes, 364 genes estavam superexpressos na fase proliferativa e 763 genes tinham seu RNA mensageiro em maior quantidade na fase secretora. A fase secretora apresentou-se, do ponto de vista de variedade de expressão gênica, como uma fase marcadamente mais rica, em especial quando analisamos os genes envolvidos na resposta imune, e os genes que respondem aos hormônios tireoideanos, bem como aqueles envolvidos no metabolismo de cálcio. / In order to further comprehend the genetic events underlying the endometrial steroids response we undertook a 10.000 genes microarray analysis between human normal endometrium in the proliferative and secretory phases of the menstrual cycle. We selected 24 patients out of 72 women who were diagnosed as having uterine leiomyomata. Neither patient had received any hormonal treatment during the six months previously the diagnosis of leiomyomata, endometrial fragments were divided in proliferative and secretory after histological analysis. Total RNA was extracted from samples by using prior to reverse transcription, two pools of RNA were obtained by mixing 3 µg of total RNA from each individual case in two separated tubes representing endometrial tissues in proliferative (group 1) and secretory phase (group 2). These two pools were then hybridized two times each to four CodeLink UniSet Human I Bioarrays (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ). After analysing the results by the SAM software 1127 genes were found differentially expressed between secretory and proliferative phases when a 2,5 difference was used as a cut-off criteria. 364 genes were up-regulated in the proliferative phase and 763 genes were up-regulated in the secretory phase. Among them, genes involved in immune response, thyroid and calcium metabolism were found differentially expressed specially in the secretory phase. It is hypothesize that overexpression of calcium related, thyroid and immune responsive genes might be one of the hallmarks of the second phase of menstrual cycle. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Avaliação da detecção de antígenos NS1 e anticorpos IgM em amostras biológicas de vísceras in natura de pacientes que evoluíram para óbito por suspeita de dengue / Evaluation of NS1 antigen and IgM antibodies detection in biological samples of in natura vicera of patients who progressed to death due to suspicion of dengue

Roque, Cássia Rodrigues 24 February 2017 (has links)
ROQUE, C. R. Avaliação da detecção de antígenos NS1 e anticorpos IgM em amostras biológicas de vísceras in natura de pacientes que evoluíram para óbito por suspeita de dengue. 2017. 69 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by PPG Patologia (pgpatol@ufc.br) on 2017-08-07T12:11:59Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_crroque.pdf: 1123935 bytes, checksum: ea84be3a53ebfef0abfedabd1942a936 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-07T12:54:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_crroque.pdf: 1123935 bytes, checksum: ea84be3a53ebfef0abfedabd1942a936 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-07T12:54:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_crroque.pdf: 1123935 bytes, checksum: ea84be3a53ebfef0abfedabd1942a936 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Dengue is caused by an arbovirus of the Flaviviridae family, genus Flavivirus. Cases of infection with fatal evolution began to be reported from the introduction of DENV-2 in the state of Ceará in 1994. The study of these cases is necessary to know the causes that contribute to the death and the post-mortem diagnosis of dengue can contribute. The objective of the work was to evaluate the detection of NS1 antigen and IgM antibodies for the diagnosis of dengue in biological samples of fresh viscera collected from patients who died. A total of 109 patients were included from 2013 and 2014 whose samples were sent to LACEN/CE to perform laboratory tests to confirm death due to suspected dengue and they had at least one positive result or reagent in samples of viscera in formaldehyde, blood (serum) and/or CSF in the exams IgM ELISA, NS1 ELISA, RT-PCR, and Immunohistochemistry. The mean age of the patients was 33.46 ± 21.18 (5 days to 95 years old). The IgM ELISA in the blood showed a positivity of 21.1%; in the CSF showed a positivity of 22.0%; in the viscera showed a positivity of 16.5%. Of the positive IgM samples in viscera, 75.0% were also CSF positive IgM, and 78.3% of positive IgM samples in viscera were also positive IgM in the blood. There were more NS1 positive samples in the blood than in the CSF and in viscera. CSF and blood were the samples with the highest positivity of IgM antibodies. However, IgM antibody detection was also possible in samples of fresh viscera. The immunohistochemistry technique in preserved formalin material showed a higher positivity for the detection of dengue antigens, but it was also possible to detect NS1 antigen in fresh viscera samples. The detection of IgM antibody and NS1 antigen in the fresh viscera samples helped to improve the post-mortem diagnosis of dengue and it should be considered as another approach in the diagnosis of fatal dengue. / A dengue é causada por um arbovírus da família Flaviviridae, gênero Flavivirus. A partir da introdução do DENV-2 no Ceará, em 1994, casos de infecção com evolução fatal começaram a ser reportados. O estudo desses casos é necessário para que se conheçam as causas que contribuem para o óbito e o diagnóstico da dengue pos-mortem pode contribuir. O objetivo do trabalho foi avaliar a detecção de antígeno NS1 e de anticorpos IgM para diagnóstico de dengue em amostras biológicas de vísceras in natura, coletadas de pacientes que evoluíram para óbito. Foram incluídos 109 pacientes, dos anos de 2013 e 2014, cujas amostras foram encaminhadas ao LACEN/CE para realização de exames laboratoriais para confirmação de óbito por suspeita de dengue e que apresentaram pelo menos um resultado positivo ou reagente em amostras de vísceras em formol, sangue (soro) e/ou líquor nos exames: ELISA IgM, ELISA NS1, RT-PCR, e Imunohistoquímica. A média de idade dos pacientes foi de 33,46 ± 21,18 (5 dias a 95 anos). O ELISA IgM no sangue apresentou uma positividade de 21,1%; no líquor apresentou uma positividade de 22,0%; nas vísceras apresentou uma positividade de 16,5%. Das amostras de IgM positivo em vísceras, 75,0% foram também IgM positivo no líquor e 78,3% das amostras de IgM positivo em vísceras foram também IgM positivo no sangue. Houve mais amostras de NS1 positivo no sangue do que no líquor e vísceras. As amostras onde houve maior positividade de anticorpos IgM foram líquor e sangue, entretanto a detecção de anticorpo IgM também foi possível em amostras de vísceras in natura. A técnica de imunohistoquímica, em material de vísceras conservadas em formol, apresentou uma maior positividade para a detecção de antígenos de dengue, mas também foi possível detectar antígeno NS1 em amostras de vísceras in natura. A detecção de anticorpo IgM e de antígeno NS1 nas amostras de vísceras in natura contribuiu para melhorar o diagnóstico de dengue post-mortem, devendo ser considerada como mais uma abordagem no diagnóstico de casos fatais de dengue.
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Características Imuno-histoquímicas das Lesões de Hanseníase em Pacientes Com Helmintos Intestinais.

FERREIRA, C. B. 24 August 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-29T15:34:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_5803_.pdf: 3089075 bytes, checksum: be1ff97146f6a0c59966259bec896a4d (MD5) Previous issue date: 2012-08-24 / Introdução: Acredita-se que a imunomodulação determinada pelos nematóides intestinais pode intervir na evolução e na progressão de outras doenças infecciosas, dentre elas a hanseníase. Objetivo: O estudo analisa a presença dos marcadores anti-CD4, anti-CD8, anti-CD20, anti-CD138, anti-TIA-1e anti-FOXP3 em amostras de biópsias de lesões de pacientes com o diagnóstico clínico e histopatológico de hanseníase, com e sem helmintíase, a fim de determinar a influência das helmintíases intestinais no sistema imune. Pacientes e métodos: O estudo foi realizado através da análise retrospectiva de prontuários de pacientes atendidos no Serviço de dermatologia do Hospital Universitário Cassiano Antônio Moraes (HUCAM), no período de 01/1995 a 01/2010, com o diagnóstico de hanseníase e que, após a suspeita clínica, foram submetidos à biópsia e ao exame anátomo-patológico de lesão suspeita na pele, e que realizaram exame parasitológico de fezes. Quando identificado um caso de hanseníase, confirmado clinica e histopatologicamente, foram anotados dados referentes ao paciente: idade, sexo, forma clínica da doença, diagnóstico histopatológico, a presença ou ausência de verminose, e a espécie envolvida. Após, foram separados os blocos de parafina das biópsias das lesões cutâneas dos pacientes, os quais posteriormente foram submetidos ao exame imuno-histoquímico para a pesquisa de marcadores CD4, CD8, CD20, CD138, TIA-1, e FOXP3. Resultados: Dos 53 hansenianos analisados, observou-se discreto predomínio do sexo feminino e das formas paucibacilares. Outro achado foi a concentração dos casos paucibacilares nos pacientes do sexo feminino e dos multibacilares no sexo masculino, a mediana de idade foi de 43 anos. Embora sem significância estatística, as verminoses intestinais tiveram ligeiro predomínio nas formas multibacilares, sendo o helminto mais envolvido o Ascaris lumbricoides. As frequências de células FOXP3+ e CD20+ foram maiores entre os hansenianos paucibacilares em relação aos multibacilares, sendo as células CD20+ significativamente mais elevadas nos pacientes multibacilares com helmintos intestinais, quando comparados com os pacientes sem helmintos (p=0,005). Conclusão: O estudo demonstrou frequência significativa do sexo feminino nas formas paucibacilares da hanseníase, além de ligeiro predomínio, embora sem significância estatística, de helmintos nas formas multibacilares da doença com células CD20+, significativamente mais elevadas nos multibacilares com helmintos intestinais. Palavras-chave: Hanseníase; Helmintos; Imuno-histoquímica; Imunologia
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Reparação óssea em alvéolos de ratas ovarectomizadas após implante com biovidro: análise histomorfométrica e imunoistoquímica

Azenha, Marcelo Rodrigues [UNESP] 09 September 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-09Bitstream added on 2015-05-14T16:58:45Z : No. of bitstreams: 1 000821898.pdf: 1301763 bytes, checksum: d28b4fd5d34abcdbe6e39a7e3297aee3 (MD5) / Objetivos: Avaliar o processo de reparo alveolar em ratas ovarectomizadas após implante com Biosilicato cristalino. Materiais e Métodos: Sessenta ratas foram divididas em quatro grupos (n = 15) de acordo com o tratamento: Grupo 1- ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com coágulo; Grupo 2-ratas submetidas à cirurgia sham com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino; Grupo 3-ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com coágulo; e Grupo 4- ratas ovarectomizadas com alvéolos preenchidos com Biosilicato cristalino. Após 7, 14 e 28 dias os animais foram sacrificados e análises histomorfométricas (histologia e histometria) e imunoistoquímicas (Osteopontina e Osteocalcina) foram realizadas. A comparação dos resultados foi realizada utilizando o programa estatístico Assistat 2013 para Windows através da Análise de Variância e teste de Mann-Whitney, com resultados significantes sendo encontrados quando p≤0.05. Resultados: No período de 7 dias, os Grupos 1 e 3 apresentaram resultados superiores e estatisticamente maiores do que os Grupos 2 e 4 (p<0.05) quanto à formação óssea. Após o período de 14 dias as diferenças estatísticas mantiveram-se, com os Grupos 1 e 3 apresentando diferença estatisticamente significante maiores aos Grupos 2 e 4 (p<0.05). Aos 28 dias, a diferença estatística significativa permaneceu entre os mesmo Grupos estudados, sendo que nos grupos implantados com o Biosilicato cerca de 60% do alvéolo já havia sido preenchido por osso novo. A imunoistoquímica revelou expressão das proteínas Osteocalcina e Osteopontina, principalmente nos animais submetidos à cirurgia de ovarectomia. Conclusões: Os Grupos 1 e 3 foram os que apresentaram os melhores resultados durante todo o estudo, com o Biosilicato cristalino apresentando resultado favorável na reparação... / Objectives: To evaluate the process of alveolar repair in ovariectomized rats after implantation with Biosilicate. Materials and Methods: Sixty rats were divided into four groups (n = 15) according to treatment: Group 1 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with blood clot; Group 2 - rats underwent sham surgery with alveoli filled with crystalline Biosilicate; Group 3 - ovariectomized rats with alveoli filled with blood clot; Group 4 - ovariectomized rats with alveoli filled with crystalline Biosilicate. After 7, 14 and 28 days the animals were sacrificed and histomorphometric analysis (histology and histometric) and immunohistochemical (Osteopontin and Osteocalcin) were measured . The comparison of the results was performed using the statistical program Assistat 2013 for Windows by Analysis of Variance and Mann-Whitney tests, with significant results being found when p ≤ 0:05 . Results: During the 7- day period, Groups 1 and 3 showed better and significantly higher results in bone formation than Groups 2 and 4 (p<0.05). After 14 days the statistical differences remained between Groups 1 and 3 and Groups 2 and 4 (p<0,05). At 28 days, the statically difference remained significant between the same Groups, while the groups implanted with Biosilicate presented about 60% of the socket filled by new bone. Immunohistochemistry revealed expression of proteins osteocalcin and osteopontin, especially in animals subjected to ovariectomy surgery. Conclusions: Groups 1 and 3 were those with the best results throughout the study, with the crystalline Biosilicate presenting favorable result in bone repair without bioglass resorption. The immunohistochemical analysis showed that animals subjected to ovariectomy had a higher signaling in Ostecalcina and Osteopontin proteins
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Lectinas de Cratylia mollis como ferramentas e biomarcadores no diagnóstico do câncer de próstata e colo uterino

LIMA, Amanda Lucena Rosendo de 31 January 2013 (has links)
Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-17T15:11:48Z No. of bitstreams: 2 Tese Doutorado Amanda Lucena Rosendo de Lima.pdf: 3032907 bytes, checksum: ea9ba2473dcf60494dff5524bb19ece0 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T15:11:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese Doutorado Amanda Lucena Rosendo de Lima.pdf: 3032907 bytes, checksum: ea9ba2473dcf60494dff5524bb19ece0 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / Lectinas constituem um largo grupo de proteínas ou glicoproteínas que compartilham a propriedade de reconhecer e interagir com glicanos, os quais estão envolvidos nos processos de desenvolvimento e diferenciação celular de neoplasias. O câncer de próstata (CaP) e de colo uterino são tumores malignos de alta incidência em homens e mulheres, respectivamente, e por isso têm sido alvo de inúmeras pesquisas científicas. O objetivo do nosso trabalho foi investigar a capacidade das lectinas de sementes de Cratylia mollis interagirem com o glicocódigo tecidual e sérico de pacientes com patologias prostáticas e de colo uterino. Para o conhecimento da identidade sacarídica dos glicoconjugados celulares foi utilizada a histoquímica com lectinas, as quais conjugadas à peroxidase foram aplicadas em cortes de biópsias de próstata e colo uterino. Para purificação e caracterização parcial de glicoproteínas dos soros de pacientes com alterações prostáticas e indivíduos sadios, a cromatografia de afinidade com Cramoll-1,4 imobilizada e SDS-PAGE foram utilizadas. A histoquímica mostrou que as lectinas de C. mollis ligam-se diferentemente aos glicoconjugados expostos pelas células prostáticas (normal, hiperplasia benigna prostática e câncer de próstata) e do colo do útero (normal, neoplasia intra-epitelial cervical III e carcinoma celular escamoso). Através da cromatografia de afinidade com Cramoll-1,4 imobilizada, os soros de indivíduos normais, com hiperplasia benigna prostática e em diferentes estágios do CaP apresentaram expressão diferencial de glicoproteínas. Os resultados obtidos sugerem que as lectinas de Cratyia mollis são efetivos biomarcadores histoquímicos dos processos de diferenciação celular anormal nos tecidos prostáticos e cervicais uterinos. Essas lectinas também mostraram ser ferramentas para identificar o padrão de expressão de glicoproteínas durante os processos de desenvolvimento patológico prostático.
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Avaliação da expressão e atividade de GNT-V durante a evolução de lesões em tecidos uterinos humanos

MOURA, Raphael Douglas da Silva 31 March 2015 (has links)
Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-01-27T17:58:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO E ATIVIDADE DE GNT-V DURANTE A EVOLUÇÃO DE LESÕES EM TECIDOS UTERINOS HUMA.pdf: 2696690 bytes, checksum: cb85eb0e45860779176c13e2803e7f08 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-27T17:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO E ATIVIDADE DE GNT-V DURANTE A EVOLUÇÃO DE LESÕES EM TECIDOS UTERINOS HUMA.pdf: 2696690 bytes, checksum: cb85eb0e45860779176c13e2803e7f08 (MD5) Previous issue date: 2015-03-31 / O câncer do colo do útero é o quarto tipo de câncer mais comum entre as mulheres. A superfície externa das células de mamíferos é composta de um glicocálix. Lectinas têm sido empregadas como sondas histoquímicas na avaliação da formação dessa estrutura de glicanos que é sintetizada por glicosiltransferases. Entre elas a N-acetil-glicosaminiltransferase V (GnT-V) atua na formação de uma ramificação de glicanos inserindo um resíduo de N-acetilglicosamina através de uma ligação β1,6 a uma manose, formando uma estrutura tetraantenária. Dessa forma este trabalho teve como objetivo avaliar a expressão da GnT-V durante a progressão de lesões do colo uterino (Neoplasia intraepitelial cervical (NIC) graus I, II e III e carcinoma de células escamosas (CCE)) utilizando imunohistoquímica contra MGAT5 e histoquímica com lectinas. Foram avaliadas 75 amostras (normal=15, NIC 1=15, NIC 2=15, NIC 3=15 e CCE=15). Os resultados mostraram que a GnT-V não apresentou diferenças significativas de expressão entre os diferentes diagnósticos, sendo majoritariamente classificada como de baixa expressão. L-PHA mostrou que 93,3% das amostras normais, 88,9% dos NICs e 60% dos CCE apresentaram alta expressão de ramificação do tipo β1,6. Foi observada uma maior expressão na região basal do epitélio escamoso normal, sendo a marcação de membrana e citoplasma. No carcinoma também observou-se uma marcação nuclear heterogênea e não significativa. DSA não mostrou diferenças significativas de marcação nos tecidos normais e transformados (NICs e CCE), porém tal diferença foi evidenciada pela PWM. Os resultados não demonstraram uma relação direta entre a expressão da GnT-V e as cadeias de polilactosamina (PoliLacNAc) nos tecidos do colo uterino humano, contudo eles revelaram uma significativa associação entre as PoliLacNAc e os diagnósticos das NICs e do CCE da cérvice. / Uterus colon cancer is the fourth type of cancer most common among women. Mamalian cell surface present a glycocalix. Lectins have been used as histochemistry probes to the evaluation of glycans structure which are synthesized by glycosyltransferases. One of them is the N-Acetyl-glucosaminyltransferase V (GnT-V) which catalyzes the formation of branching glycans adding residues of N-Acetyl-glucosamine via a β-1,6 bond with a mannose. This action results in a glycan with a tetraantenary structure. The present work aimed to evaluate the expression of GnT-V during the progression of uterus colon lesions (cervical intraepithelial neoplasias (CIN) grades I, II and III and squamous cell carcinoma, SCC) using immunohistochemistry agains MGAT5 and lectin histochemistry. Seventy five samples (normal=15, CIN 1=15, CIN 2=15, CIN 3=15 and SCC=15) were analyzed. GnT-V did not presented significative difference among all diagnosis being predominantly classified as of low expression. L-PHA lectin evidenced that 93.3% of normal samples, 88.9% of CINs and 60% of SCC presented a high expression of branching of β-1,6 bond. In normal squamous epithelium this expression was predominantly observed in the cytoplasm and membrane of its basal cell while in SCC it was observed in the nucleous with a heterogeneous pattern. DSA did not showed significtive differences in the staining of normal and transformed tissues (CIN and SCC), however this difference was evidenced by PWM. The results did not showed a relation between GnT-V expression and polilactosamine (PolyLacNAc) chains in human uterus colon tissues but they revealed a significant association between PolyLacNAc and transformed tissues of uterus colon (CIN and SCC).

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