Las terapias utilizadas actualmente para el tratamiento de infecciones fúngicas invasoras causadas por hongos filamentosos oportunistas están lejos de ser las óptimas. Estas infecciones se clasifican según su localización anatomoclínica en superficiales, cutáneas, subcutáneas y sistémicas. El objetivo de la presente tesis es contribuir al desarrollo experimental de nuevos tratamientos o a la mejora de los tratamientos ya existentes de un tipo de micosis subcutánea, la cromoblastomicosis, y de micosis sistémicas tales como las feohifomicosis y la aspergilosis. Para ello, se han realizado estudios in vitro e in vivo en modelos animales adecuados que han permitido comprobar la eficacia de diferentes fármacos. / The conventional antifungal therapies commonly used for the treatment of fungal infections due to filamentous fungi are far to be the optimal. These infections can be classified according to their anatomical location in superficial, cutaneous, subcutaneous and systemic. The main objective of this thesis was to evaluate both in vitro and in murine models, the efficacy of new therapeutical strategies against a subcutaneous infection such as chromoblastomycosis, and systemic infections such as phaeohyphomycoses and aspergillosis. Posaconazole was the most effective drug in treating experimental infections caused by dematiaceous fungi, i.e. chromoblastomycoses caused by Fonsecaea pedrosoi or Cladophialophora carrionii, and systemic phaeohypomycoses caused by Fonsecaea monophora or Exophiala spp. Anidulafungin, alone and in combination with voriconazole, showed a high efficacy in the treatment of aspergillosis caused by emerging species of the genus Aspergillus, such as Aspergillus flavus and Aspergillus niger.

Se realizó el aislamiento de hongos filamentosos en una planta forrajera del país Calamagrostis nitidula Pilger, hierba anual que pertenece a la familia Poaceae. Las Poaceas presentan un 14 % de lignina, este polímero tiene un alto grado de resistencia al ataque microbiano y es considerado un componente anti-calidad por su impacto negativo en la disponibilidad nutricional de la planta, debido a que la lignina disminuye la accesibilidad de los polisacáridos estructurales y otros componentes de la pared celular. El aislamiento de los hongos se realizó en medio mínimo Czapeck teniendo a la lignina como única fuente de carbono en un 0.2% estos caldos fueron inoculados con fracciones de Calamagrostis nitidula Pilger, posteriormente estos hongos fueron aislados en Agar papa dextrosa (APD) e identificados según sus características morfológicas y microscópicas. Se aislaron e identificaron los siguientes géneros: Alternaria, Ulocladium, Trichoderma, Cephalosporium, Fusarium, Helicomyces, Mucor y Aspergillus, este último fue identificado como Aspergillus melleus Yukawa y resultó ser la única cepa capaz de degradar la lignina. Se determinó cualitativamente y cuantitativamente la capacidad de degradación de la lignina inoculando cada cepa en tubos con caldo Czapeck, con 0.2% lignina y 1% glucosa, la coloración inicial de este caldo fue de color café, al cabo de 7 días se leyó al espectrofotómetro en una longitud de onda de 560 nm. De todas las cepas fúngicas aisladas únicamente la cepa PD5F identificada como Aspergillus melleus Yukawa fue capaz de virar el medio del color café a amarillo (prueba cualitativa) degradando un 80 % de la lignina (prueba cuantitativa). / Fungi were isolated from a forage grass Calamagrostis nitidula Pilger, an annual plant belonging to the Poaceae family. Members of the Poaceae family have 14 per cent of lignin, a polymer highly resistant to the microbial attack, and considered as an anti-quality component by its negative impact to the nutritional readiness. Lignin diminishes the accessibility to the structural polysaccharides and other components of the cell wall. The isolation of the fungi was carried out in Czapeck minimum medium; containing 0.2 % lignin as the only carbon source, these broths were inoculated with fractions of Calamagrostis nitidula Pilger. Then fungi were isolated in the culture medium APD and identified according to their morphological and microscopic characteristics. The following genus were isolated and identified: Alternaria, Ulocladium, Trichoderma, Cephalosporium, Helicomyces Mucor and Aspergillus. The last one was identified as Aspergillus melleus Yukawa because was able to degrade the lignin. The capacity of lignin degradation was determined qualitatively and quantitative inoculating each strain in test tubes containing Czapeck broth, lignin 0.2% and glucose to 1%, the starting color of this broth was brown, after 15 days, it was read to the spectrophotometer at 560 nm. Of all the strains isolated, only the strain PD5F identified as Aspergillus melleus Yukawa was able to turn the medium starting color (brown) to yellow (qualitative test), degrading 80% of the lignin (quantitative test).

Las especies del género Schistocerca conocida comúnmente como “langosta”, constituye una plaga que ocasiona grandes pérdidas económicas en la agricultura. En el Perú, Schistocerca piceifrons peruviana L.A. conocida como la langosta migratoria causa severos daños en las zonas donde vive permanentemente (Ayacucho, Huancavelica, Apurimac y Cusco). El objetivo de este trabajo fue aislar y determinar la capacidad entomocida de Beauveria sp. sobre Schistocerca piceifrons peruviana Lynch Arribalzaga 1903. Se aislaron y caracterizaron morfológicamente 4 cepas de Beauveria sp. ABvPr11, ABvPr8, ABvPr3 y ABvSr4; y se evaluó su capacidad entomocida en Schistocerca piceifrons peruviana L.A. Las cepas ABvPr11, ABvPr3 y ABvSr4 presentaron colonias con micelios blancos de aspecto algodonoso, esporulación de color crema, de aspecto pulverulento, formación de sinemas, pigmentos de color amarillo difusibles en el medio. Al microscopio las células conidioforas tienden a formar racimos densos, las conidias son hialinas, ovoides, globosas y unicelulares. Al evaluar la capacidad entomocida de las 4 cepas de Beauveria sp en la langosta, se encontró que utilizando soluciones de 108 conidias/mL, el porcentaje de mortalidad fue del 100% en todas las cepas; el tiempo que se necesitó para eliminar el 100% de las langostas, para ABvPr11, ABvPr8, ABvSr4 y ABvPr3 fue de 12, 14 y 16 días respectivamente. Al décimo día se observó diferencias significativas respecto a la mortalidad, entre la cepa ABvPr11(90%) y la cepas ABvSr4(74%), ABvPr8(72%) y ABvPr3(64.6%). Posteriormente se determinó el tiempo de letalidad al 50% (TL50) de la población de langostas, con un intervalo de 8.38 a 9,16 días y el tiempo de letalidad al 80% (TL80) fue de 9,6 a 11,5 días. La cepa ABvPr11 presentó mayor actividad biocida para el control de Schistocerca piceifrons peruviana L.A. / Species of genre Schistocerca, commonly known as “locust,” is a plague that causes great economical losses in agriculture. In Peru, Schistocerca piceifrons peruviana L.A., also known as migratory locust, causes severe damage in the regions where it lives (Ayacucho, Huancavelica, Apurimac, and Cusco). The goal of this work was to isolate and determine the entomicidal capability of Beauveria spp. on Schistocerca piceifrons peruviana Lynch Arribalzaga 1903. Isolation and morphological characterization four strains of Beauveria spp. ABvPr11, ABvPr8, ABvPr3, and ABvSr4 were possible; and evaluated their entomicidal capability on Schistocerca piceifrons peruviana L.A. The ABvPr11, ABvPr3, and ABvSr4 strains showed colonies with white cotton-like mycelia, beige dust-like spores production, sinema formation and diffusion of yellow pigments in the medium. In the case of the ABvPr8 strain, mycelia appearance was also cotton-like but not all over the surface. The conidiogenous cells tend to form dense clusters; conidias are hyaline, one-celled between globose and ovoid shape as observed in the microscope. While evaluating the entomicidal activity of the four strains on the locust it was found that using solutions of 108 conidias/mL mortality percentage was 100% for all the strains. For ABvPr11, ABvPr8, ABvSr4 y ABvPr3 strains, needed times in eliminating 100% locust were 12, 14, 14 y 16 days respectively. In the tenth day significant differences were shown with regard to the mortality between ABvPr11(90%) and ABvSr4 (74%), ABvPr8 (72%), ABvPr3 (64.6%) strains. Lately, lethalithy time was determinated for the 50% (TL50) of the locust population: ranging from 8.38 to 9,16 days. Lethality time for the 80% (TL80) ranged from 9,6 to 11,5 days. The ABvPr11 strain presented the greatest biocidal activity for the Schistocerca piceifrons peruviana L.A control.

Los hongos anamórficos son un vasto grupo dentro del reino Fungi, caracterizado por reproducirse asexualmente. Aunque la mayoría de ellos son saprófitos, un gran número de especies atacan plantas y animales, incluido el ser humano. Con el fin de contribuir al conocimiento de la diversidad y distribución geográfica de los hongos anamórficos, en la presente tesis se realizó una caracterización fenotípica y molecular de aislamientos ambientales y clínicos de estos hongos. Mediante un estudio de taxonomía polifásica que incluyó morfología, fisiología y análisis de secuencias de ADN, se propusieron los siguientes nuevos taxones: Cladorrhinum flexuosum, C. microsclerotigenum, Fibulochlamys chilensis, Ramophialophora humicola, Sporothrix brunneoviolacea, S. dimorphospora y Leptodiscella brevicatenata, todos ellos aislados desde muestras ambientales, principalmente de suelo. Un estudio filogenético de cepas clínicas del género Sporothrix reveló por primera vez la presencia de S. globosa, una especie recientemente descrita, en México, América Central (Guatemala) y América del Sur (Colombia). / Anamorphic fungi (those reproducing asexually) are a big part of kingdom Fungi. Most of them occur as saprobes in nature, but numerous species are pathogenic to plants and animals including man. With the aim of contributing to the knowledge of the diversity and distribution of anamorphic fungi, we performed a phenotypic and molecular characterization of environmental and clinical isolates of these fungi. Based on a polyphasic taxonomy approach which included morphology, physiology and DNA sequence analyses we described the following new taxa: Cladorrhinum flexuosum, C. microsclerotigenum, Fibulochlamys chilensis, Ramophialophora humicola, Sporothrix brunneoviolacea, S. dimorphospora and Leptodiscella brevicatenata, most of which were isolated from soil. A phylogenetic study of clinical isolates of the genus Sporothrix revealed the presence of the recently described pathogen S. globosa in Mexico, Central (Guatemala) and South America (Colombia) for the first time.

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Los objetivos principales de este trabajo de tesis doctoral fueron: aportar datos sobre i) la diversidad de hongos Trichomycetes en la República Argentina, ii) la resistencia de estos hongos frente a diferentes condiciones, iii) la transmisión del inóculo entre los individuos, iv) la variación de la presencia de estos hongos a lo largo del año en distintos ambientes, y v) la relación existente entre los hongos y sus hospedadores. Los estudios realizados sobre la diversidad de Trichomycetes principalmente en larvas de mosquitos, simúlidos y quironómidos, permitieron describir dentro del orden Harpellales, 5 nuevas especies (Austrosmittium sp. 1, Austrosmittium sp. 2, Smittium sp. 1, Smittium sp. 2 y Legeriomyces sp.) y reportar 12 especies que previamente habían sido descritas. Además, se citaron 4 especies que podrían representar nuevas especies de Trichomycetes, sin embargo el material recolectado fue insuficiente para realizar una diagnosis completa. A su vez, se registró la presencia de Amoebidium parasiticum y Paramoebidium sp., ambos pertenecientes al Orden Amoebidiales. En el presente estudio se relevaron diversas regiones de Argentina, abarcando las provincias de Buenos Aires, Córdoba, La Rioja, Neuquén y San Luis. De las especies que habían sido descritas previamente, algunas resultaron el primer registro para la República Argentina, e incluso algunas representaron el primer registro para la región Neotropical. Se evaluó bajo condiciones de laboratorio la resistencia de las tricosporas del harpélido Smittium culisetae, frente a diferentes condiciones de temperatura, pH y salinidad. Las tricosporas lograron resistir temperaturas entre -4 y 37ºC, sin perder la capacidad de infectar larvas. La viabilidad de las tricosporas que fueron expuestas a valores de pH entre 3.6 y 10 no se vio modificada, por lo que lograron resistir e infectar larvas luego de haber sido mantenidas bajo estas condiciones por más de 30 días. Las suspensiones de tricosporas a las que se le agregaron concentraciones de hasta 35 ppm de NaCl lograron resistir por más de 30 días. A su vez, las tricosporas lograron resistir durante el mismo período cuando fueron almacenadas en diluciones de agua marina de hasta el 50%. Sin embargo, las tricosporas que fueron sometidas a desecación no lograron resistir este efecto. Los datos obtenidos a partir de estos ensayos, permitieron concluir que las tricosporas mantuvieron su capacidad de infectar larvas aún cuando fueron expuestas por varios meses a un amplio rango de estas condiciones, por lo que podrían resistir en el ambiente incluso en ausencia de los hospedadores. Sin embargo, estas esporas no fueron capaces de sobrevivir luego de que fueron sometidas a condiciones de deshidratación. Poco se conoce sobre la transmisión de estos hongos por parte de los hospedadores adultos. En los culícidos, se desconoce el mecanismo de transmisión de estos hongos, y no es sabido como pueden colonizar nuevos ambientes acuáticos. A pesar de haber evaluado algunas posibles vías de transmisión en hospedadores culícidos en laboratorio, no se ha podido dilucidar aún como ocurre este mecanismo en estos hospedadores. Solo se observaron unas pocas tricosporas en el tubo digestivo de hembras adultas de Ae. aegypti. Se evaluó la variación en la prevalencia de los hongos Harpellales a lo largo del año en diferentes ambientes. Los resultados obtenidos en este estudio, como así también los resultados obtenidos de los estudios realizados en el laboratorio sobre la resistencia de las tricosporas, permitieron demostrar que las condiciones ambientales tendrían poca influencia sobre la presencia de estos hongos. La deshidratación del ambiente tiene un efecto negativo sobre la viabilidad de estos hongos, por lo que luego de que un ambiente sufre desecación, debe ser colonizado nuevamente. Se comparó el tamaño y la fecundidad de las hembras adultas del culícido Ae. aegypti que fueron criadas a partir de larvas infectadas con el hongo Sm. culisetae, con respecto a hembras adultas que habían sido criadas libres de Trichomycetes. A su vez, se evaluó si las hembras criadas a partir de bajos niveles de alimento se veían beneficiadas por la presencia de Sm. culisetae. No existieron diferencias significativas en la fecundidad de las hembras adultas criadas en presencia o ausencia fúngica. De esta manera, se podría inferir que el hongo no le aporta ningún beneficio a las hembras de mosquitos criadas con bajos niveles de alimento, ya que estas tuvieron un tamaño menor, y por ende una menor fecundidad que las hembras criadas con altos niveles de alimento.

Los objetivos del presente trabajo fueron: • Producir Ramnosidasa alcalina de Verticillum tenerum en medios con harina de soja y triptona como fuente de carbono y energía y fuente de nitrógeno respectivamente. • Buscar condiciones de cultivo que maximicen la producción de enzima. • Purificar parcialmente la enzima a partir del sobrenadante de los cultivos. • Determinar parámetros de la enzima tales como pH óptimo, estabilidad térmica, etc.

Información extraída del <a href="http://www.cindefi.org.ar/?page_id=61&language=es">sitio web del CINDEFI</a>

Los hongos silvestres comestibles: HSC, son uno de los grupos más importantes de PFNM. Son recolectados para alimentación y beneficio económico en más de 80 países en todo el mundo. El comercio de exportación está regulado por una demanda en fuerte expansión por parte de Europa y Japón. Esta expansión es positiva para comerciantes y recolectores locales, ya que proporciona ingresos económicos importantes en áreas donde las posibilidades de ganar dinero son limitadas

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo / La frecuencia de síntomas debido al ataque de hongos de la madera de la vid, ha aumentado significativamente en todo el mundo durante la última década. Las especies fungosas de la familia Botryosphaeriaceae provocan la muerte parcial de la planta, disminuyendo la productividad y la rentabilidad del cultivo. Una de las especies presentes en Chile es Diplodia mutila, asociada principalmente a la enfermedad del brazo muerto de la vid. El objetivo de esta investigación fue evaluar la susceptibilidad de sarmientos de cultivares de vid vinífera (Cabernet Franc, Malbec, Merlot, Sauvignon Blanc y Syrah) y de mesa (Crimson Seedless, Flame Seedless, Red Globe y Thompson Seedless) a D. mutila. Para ello, se realizó un ensayo “in vivo” usando sarmientos de un año, los cuales fueron inoculados con discos de agar con micelio de D. mutila, en el sector medio del entrenudo después de producir una herida. Los sarmientos fueron mantenidos en una cámara de crecimiento durante cuatro a seis semanas, en oscuridad, a una humedad relativa del 95% y a una temperatura de 25°C. Se consideraron 10 repeticiones por cultivar y al término del período de incubación, se evaluó la longitud de la lesión necrótica en forma independiente, en los cultivares viníferos de los de mesa. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas al comparar la susceptibilidad de los cultivares viníferos y de mesa investigados, los que en su totalidad fueron susceptibles al patógeno. / The frequency of symptoms associated to fungal attack on grapevine trunk, increased significantly worldwide during the last decade. Fungal species belonging to the Botryosphaeriaceae family are responsible for the death of part of the plant, reducing productivity and profitability of this crop. Diplodia mutila is one of the species associated to the dead arm disease of grapevine in Chile. The objective of this research was to evaluate the susceptibility of vine shoots of wine grape cultivars (Cabernet Franc, Malbec, Merlot, Sauvignon Blanc and Syrah) and table grapes (Crimson Seedless, Flame Seedless, Red Globe and Thompson Seedless) to D. mutila. In vivo trials were performed using one year old vine shoots, inoculated with mycelia disks of D. mutila between the internode after performing a wound. The shoots were kept during four to six weeks in a growth chamber, in the dark, at 95% relative humidity and at 25 ° C. Ten replicates per cultivar were considered, where necrotic lesion length was evaluated. No significant differences were observed on susceptibility among wine and table grape cultivars, being all susceptible to the pathogen.