Le but de cette étude consiste à démontrer l’impact positif d’une supplémentation en glutamine chez des nageurs élites, afin d’améliorer le statut immunitaire et d’évaluer si les changements plasmatiques de la glutamine peuvent expliquer l’incidence d’infections des voies respiratoires (IVRS). En parallèle, ce projet évalue si les apports alimentaires influencent la glutamine plasmatique et l’incidence d’IVRS. L’étude s’est effectuée auprès de 14 athlètes élites (8 hommes, 6 femmes). Chaque athlète a participé aux deux conditions expérimentales : un supplément de glutamine et une solution placebo isocalorique. Les périodes de supplémentation se déroulaient sur sept jours, incluant trois journées consécutives de compétition. Le profil hématologique, après les compétitions, montre qu’un supplément de glutamine n’améliore pas significativement la concentration plasmatique en glutamine ni les niveaux de cytokines comparativement à une solution placebo. Bien que les résultats soient semblables sous les deux conditions, les niveaux post-compétition ont tendance à être supérieurs aux valeurs pré-supplémentation, lorsqu’un apport exogène en glutamine est fourni à l’organisme alors que les concentrations plasmatiques de glutamine tendent à diminuer lorsqu’une solution placebo est administrée (p=0.067). L'incidence d’IVRS ne peut être expliquée par une faible concentration plasmatique de glutamine ni par un apport exogène de glutamine. On observe cependant une augmentation d’IVRS suite aux compétitions, soient de 8 athlètes pour le groupe placebo contre 3 au groupe glutamine. Les athlètes atteints d'IVRS semblent consommer moins d'énergie totale (kcal) et de protéines que les athlètes sains (p=0.060). Les résultats obtenus ne démontrent pas qu’une supplémentation en glutamine améliore le profil immunitaire et ne prévienne l’incidence d’IVRS, mais ils soulèvent l’hypothèse qu’un apport exogène en glutamine stabilise les niveaux plasmatiques de glutamine, permettant aux athlètes de poursuivre leurs entraînements et de récupérer efficacement. / The purposes of this study were to determine the positive impacts of glutamine supplementation upon immune system status and to determine whether changes in plasma glutamine relate to the appearance of upper respiratory tract infections (URTI) in elite swimmers. Furthermore, this study evaluated dietary intakes and its influence on immune parameters and URTI incidence. Fourteen athletes (8 men, 6 women) took part of the study. Each athlete participated in both experimental conditions: glutamine supplement and an isocaloric solution placebo. The supplementation period lasted seven day, including three consecutive competing days. Post competing hematologic profils of swimmers show that glutamine supplement does not significantly improve plasma glutamine neither cytokines levels, compared to a placebo solution. Even if plasma glutamine concentrations are similar with both conditions, the post competiting levels tend to be higher than pre competing values, when glutamine is supplemented. Futhermore, plasma glutamine levels show a decreasing trend under control conditions (p=0.060). In this study, URTI can not be explained by low plasma glutamine or supplemented glutamine. However, URTI incidence is higher after competitions, where 8 athletes showed symptoms (control group) and 3 only in the experimental group. Athletes with URTI seem to consume less energy and proteins than healthy athletes (p=0.060). These data does not suggest that glutamine supplementation improves immune function or prevents URTI in highly trained swimmers during competition. However, results support the hypothesis that exogenous glutamine stabilizes plasma glutamine levels, allowing athletes to tolerate training workload and recover properly.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

La reconnaissance des antigènes du soi et du non soi par les lymphocytes B et T est à l'origine des maladies auto-immunes et inflammatoires. Les anticorps et les auto-anticorps produits par les plasmocytes dérivés des lymphocytes B sont utiles à des fins diagnostiques, mais contribuent également à la physiopathologie de ces maladies. La déplétion des lymphocytes B au cours des maladies auto-immunes chez l'homme a recentré l'attention sur les rôles des lymphocytes B comme modulateurs de la fonction des lymphocytes T, en plus de leur rôle de cellules productrices d'anticorps. L'utilisation d'anticorps anti-CD20 chez la souris révèle le rôle fondamental des lymphocytes B comme adjuvants cellulaires pour l'activation des lymphocytes T CD4+ in vivo (lymphocytes B effecteurs) mais également le rôle régulateur inattendu d'une sous-population de lymphocytes B spléniques CD1dhighCD5+ qui produit de l'interleukine 10 (lymphocytes B10). Le rôle de ces lymphocytes B effecteurs est montré dans un modèle chez la souris NOD (Non Obese Diabetic) alors que le rôle des lymphocytes B régulateurs est montré dans un modèle murin d'eczéma de contact. Au cours de l'encéphalite auto-immune expérimentale, la déplétion précoce des lymphocytes B aggrave les signes neurologiques tandis que la déplétion tardive des lymphocytes B les améliore, reflétant la dualité fonctionnelle des lymphocytes B au cours des maladies inflammatoires / Autoimmunity results from abnormal B and T cell recognition of self antigens, which leads to autoantibody production in many cases. Autoantibodies produced by B cell-derived plasma cells provide diagnostic markers for autoimmunity, but also contribute significantly to disease pathogenesis. The therapeutic benefit of depleting B cells in mice and humans has refocused attention on B cells and their role in autoimmunity beyond autoantibody production. B cells specifically serveas cellular adjuvants for CD4+ T cell activation, while regulatory B cells, including those that produce IL-10 (B10 cells), function as negative regulators of inflammatory immune responses. The role of effector B cells is shown in the non obese diabetic mouse model (NOD) whereas the role of regulatory B cells is demonstrated in a contact dermatitis model. During experimental autoimmune encephalomyelitis, early B cell depletion makes the disease worst whereas B cell depletion after disease onset improves clinical symptoms, reflecting counter regulatory B cell functions during autoimmunity

Par sa fréquence et sa gravité, le CCR représente un réel problème de santé publique. Avec 37000 nouveaux cas par an et 15% des décès, il constitue la 2ème cause de mortalité par cancer en France. Malgré d'importants progrès thérapeutiques durant cette dernière décennie, il rest un cancer de mauvais pronostic. Des facteurs génétiques et environnementaux ont été impliqués dans la genèse de ce cancer. La caractérisation moléculaire du CCR a permis d'identifier les tumeurs par instabiblité génique, appelées MSI (Microsatelite Instability) possédant des anomalies de réparation d'appariement d'ADN (MMR mismatch repair). Celles-ci sont fréquemment retrouvées (80%) dans les CCRs familiaux et rarement (15%) dans les cancers sporadiques. Les tumeurs avec phénotype MSI sont de bon pronostic. Le rôle possible de l'alimentation et particulièrement celui du fuel énergétique sur la survenue d'anomalies d'appariement d'ADN a été suggéré. De nombreuses hormones et en particulier la leptine ont été rapportées comme facteur de promotion tumorale. De plus, la leptine possède de nombreuses propriétés immunrégulatrices. Son effet sur l'immunité colique tiendrait autant à sa capacité à initier la production de cytokines à partir des cellules épithéliales digestives qu'à sa capacité à contrôler la prolifération des lymphocytes. Nous avons formulé l'hypothèse que la leptine pouvait réguler des fonctions immunes dans le microenvironnement tumoral. L'ensemble de ces données souligne l'importance de l'étude chez l'homme. L'analyse des données prospectives de 171 patients avec CCR permet de noter une surexpression du récepteur de la leptine dans un sous groupe de tumeurs. Les relations entre le récpteur de la leptine et la réponse immunitaire ont été analysées dans le microenvironnement tumoral humain, par des modèles cellulaires in vitro et animaux in vivo. Nous avons découvert que l'effet pro immunitaire de leptine dépendait du niveau d'expression de sonrécepteur et du degré d'instabilité microsatellitaire dans la cellule tumorale. L'expression du récepteur de la leptine pourrait être considérée comme un marqueur pronostique dans le CCR humain / Cancer of the colon and rectum (CRC) is a real challenge in Western countries because of the prevalence, cost and bad prognosis. With they 37,000 new cases each year and 15% of mortality it is currently the 2nd cause of cancer death in France. Despite significant advances in diagnosis and treatment over the past decade, it remains with bad prognosis. Genetic and environmental factors were involved in the genesis of this cancer. Molecular characterization of CRC leaded to the identification of gene instability (MSI) in tumors with mismatch repair (MMR) abnormalities. This is found frequently (80%) the CRC hereditary no polyposis colon cancer family (HNPCC) and rarely (15%) in sporadic cancers. Those tumors with MSI phenotype are considered to be of good prognosis. The possible role of food and particulary energy balance on the occurrence of MMR abnormalities has been suggested. Several hormones including leptin have been reported to promote tumour growth. In addition, leptin may regulate immune response tin GIT. Its pro immunogenic effect results from cytokines production by gastrointestinal epithelial cells as well as its ability to control the proliferation of lymphocytes. We hypothesised that leptin might regulate anti tumour immune response. The analysis of prospective data from 171 patients with CRC showed that overexpression of leptin receptor in subset of tumours. Relationships between leptin recptor and tumour immune response have been studied in the tumour microenvironment in human tissues, and in culture cells in vitro as well as in animal models in vivo. Results showed intensity of immune response was depended on the level of leptin receptor expression and MSI in colon tumour cells. Thus leptin receptor expression may be considered as a prognostic marker in colon and rectal cancer in human

Le syndrome de Gougerot-Sjögren (SGS) est une maladie auto-immune systémique. Il se caractérise principalement par une infiltration lymphocytaire des glandes salivaires (GS) et lacrymales responsable d’une sécheresse buccale et oculaire. Par ailleurs,les Toll-like récepteurs (TLR) endosomaux – notamment le TLR9 qui reconnait l’acide désoxyribonucléique (ADN) microbien mais aussi, dans certaines conditions, l’ADN du soi –s’avèrent être importants pour l’activation des lymphocytes B (LB) lors du lupus, une maladie proche du SGS. Nos travaux montrent que la stimulation du TLR9 chez les LB transitionnels,des LB immatures fraichement émigrés de la moelle osseuse, favorise leur différenciation selon la voie des LB de la zone marginale, et entraine la sécrétion d’auto-anticorps. L’analyse des LB infiltrant les GS lors du SGS révèle que ce phénomène pourrait être impliqué dans la physiopathologie de cette maladie. De plus, nous montrons que LL37, un peptide produit dans les GS, pourrait participer à l’activation du TLR9 des LB transitionnels. Enfin, nous avons mis en évidence une inattendue expression du TLR9 à la surface des LB. Si l’étude des conséquences fonctionnelles de cette localisation reste à poursuivre, elle semble avoir un effet négatif sur la stimulation du TLR9 endosomal. En conclusion, ces résultats suggèrent que leTLR9 puisse être une nouvelle cible thérapeutique lors du SGS. / Primary Sjögren’s syndrome (pSS) is a systemic autoimmune disease. It is mainly characterized by B cell and T cell infiltration in lacrimal and salivary glands (SG) responsible for eye and mouth dryness. In addition, endosomal Toll-like receptors (TLR) – especially TLR9 which recognizes microbial deoxyribonucleic acid (DNA) and also, under certain conditions, self DNA – are important for B cell activation during lupus, a disease close topSS. Our work shows that TLR9 stimulation on transitional B cells, immature B cells freshly emigrated from bone marrow, promotes their differentiation into marginal zone B cell pathway and drives to auto-antibodies production. Analysis of infiltrating B cells in pSS SG reveals that this phenomenon might be involved in the pathogenesis of the disease.Furthermore, we show that LL37, a peptide produced in the SG, could participate in TLR9activation of transitional B cells. Finally, we demonstrated an unexpected TLR9 expression on B cell surface. If the functional consequences of this localization remain to be more precisely evaluated, it seems that cell surface TLR9 has a negative effect on endosomal TLR9 stimulation. In conclusion, these results suggest TLR9 could be a new therapeutic target incase of pSS.

La truite arc-en-ciel (Oncorhynchus mykiss), espèce d'élevage majeure en Europe et notamment en France, est l'une des espèces de poisson les mieux connues dans un grand nombre de domaines, y compris l'immunologie. Les virus qui l'infectent ont aussi été bien caractérisés, en particulier deux Novirhabdovirus, le virus de la septicémie hémorragique virale (VSHV) et le virus de la nécrose hématopoïétique infectieuse (VNHI), tous deux connus pour provoquer des pertes importantes dans les élevages aquacoles. Quelques travaux, conduits notamment à l'INRA, ont mis en évidence l'existence d'une variabilité génétique de la résistance à ces infections chez la truite (Quillet et al., 2007). Une approche combinant analyse génétique et étude des réponses cellulaires a été développée pour tenter de mieux caractériser la réponse de la truite contre le VSHV. L'objectif est de développer des outils d'amélioration de la santé dans les élevages piscicoles et de mieux comprendre les mécanismes de résistance antivirale chez les vertébrés. Tout d'abord, une démarche de cartographie de QTL (quantitative trait locus) a permis de détecter un QTL majeur de résistance au VSHV dans la région télomérique du groupe de liaison 31 de la truite arc-en-ciel. Ce QTL contrôle la survie des poissons et la croissance in vitro du virus sur explants de nageoire (VREFT), ce qui suggère fortement l'implication de mécanismes innés dans la résistance. Le QTL est retrouvé dans des croisements impliquant des reproducteurs de résistance variée, et peut expliquer jusqu'à 65% (survie) et 49% (VREFT) de la variance phénotypique observée. Enfin, l'effet du QTL est conservé quel que soit le mode d'infection employé (balnéation ou injection intrapéritonéale), suggérant que la résistance n'est pas liée à des particularités des tissus superficiels (peau, mucus), premiers sites de contact entre le virus et son hôte. En parallèle, des lignées cellulaires ont été dérivées à partir d'ovaires de truites appartenant à des lignées isogéniques présentant des niveaux de résistance variable à l'infection par le VSHV. Une corrélation remarquable est observée entre la résistance à l'infection des lignées cellulaires et la survie des poissons dont elles sont issues, confirmant définitivement le rôle déterminant de mécanismes innés dans la résistance. Ce modèle cellulaire a également permis de montrer que le contrôle précoce de la prolifération virale était une étape clé de la résistance. Le parallélisme entre résistance in vitro et in vivo semble conservé lors de l'infection par un second rhabdovirus, le VNHI, bien qu'aucune corrélation dans la résistance à ces deux infections n'ait été observée dans cette étude. Par ailleurs, le QTL à effet fort identifié pour la résistance au VSHV ne joue pas un rôle majeur dans la variabilité de résistance au VNHI. Ceci suggère que, même si ils concourent à l'activation de voies de signalisation communes, les facteurs clés de la résistance aux deux virus sont différents, et leur expression contrôlée par des zones génomiques distinctes. Les résultats obtenus dans cette étude ont permis de démontrer sans équivoque le rôle clé des mécanismes innés dans la résistance de la truite à l'un de ses principaux virus, et l'existence d'une forte variabilité génétique sous-tendant l'expression des facteurs impliqués. En proposant des bases nouvelles pour aborder l'analyse des interactions hôte-virus chez la truite, ils ouvrent la voie à la découverte de mécanismes potentiellement nouveaux dans la réponse des poissons à ces infections et à une meilleure compréhension de ces mécanismes chez les vertébrés. / The rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) is one of most significant fish model in many scientific fields, including immunology. Due to its importance in aquaculture, viruses that can infect this species have been well characterized. Two well-known Novirhabdoviruses, the viral haemorrhagic septicemia virus (VHSV) and the infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) cause serious damage in fish farms and represent a significant threat for aquaculture in a number of countries. Our laboratories have previously reported a wide range of susceptibility to these infections in rainbow trout depending on the host genetic background (Quillet et al., 2007). In this work, we undertook a dual approach to better characterize the antiviral response in fish. A without a priori approach led to the detection of a major QTL (quantitative trait locus) for resistance to VHSV in the telomeric region of the rainbow trout linkage group 31. This QTL controls both fish survival and viral replication in excised fin tissue (VREFT), suggesting the involvement of innate mechanisms in the resistance, and can explain up to 65% (survival) and 49% (VREFT) of the observed phenotypic variation. Additionally, this major locus was retrieved in a number of genetic backgrounds, and regardless of the infection route (waterborne infection or injection), suggesting that the virus entry in fish is not the main factor of resistance. In parallel, cell lines were derived from ovaries of several rainbow trout isogenic lines with various levels of susceptibility to infection with VHSV. Resistance of cell lines to infection by the virus was remarkably correlated with the survival of fish from which they were derived, confirming the importance of innate factors for the resistance. This model also showed that the early stage response is critical for the cellular fate after infection. The parallelism between resistance in vitro and in vivo has finally been observed after infection by a second rhabdovirus, IHNV, although no correlation in resistance to these two viruses could be detected. Moreover, no major QTL for IHNV resistance was found in the region of the VHSV QTL. This observation suggests that the key factors of resistance are different, even if they contribute to the activation of common signaling pathways. The expression of these factors is in any case controlled by distinct regions of the genome. Our work demonstrates a strong genetic determinism of resistance to a major virus in rainbow trout, based on innate mechanisms. We believe that these results pave the way for the discovery of new host response mechanisms against viruses, leading to a better understanding of antiviral immunity in vertebrates.

Les maladies cardiovasculaires (MCV) sont des affections immuno-inflammatoires chroniques qui sont liées à de nombreux facteurs de risque. Les défensines et les cathélicidines sont des peptides antimicrobiens considérés comme des effecteurs clés de l'immunité innée, mais aussi des réponses inflammatoires. Il a été postulé que ces peptides sont impliqués dans le développement de l'athérosclérose. Afin de vérifier cette hypothèse, nous avons étudié l'expression des gènes de la cathélicidine LL-37 et des défensines-a DEFA1-3 dans les cellules mononuclées du sang périphérique (PBMCs) dans la cohorte Stanislas. Nous avons démontré que l'expression des ARNm de ces gènes est significativement corrélée avec les indicateurs de risque des MCV, à savoir l'obésité, la pression artérielle, les taux circulants des triglycérides et du glucose, l'hypo-HDL-C et les leucocytes. De plus, des taux élevés des ARNm de ces gènes sont associés au syndrome métabolique. Nous avons aussi démontré que l'expression des gènes des DEFA1-3 et de LL-37 est corrélée avec celle du récepteur chimio-attractant FPR et que le génotype TT du polymorphisme FPR1 c.32C>T est associé à une diminution des taux circulants de la E-sélectine, suggérant que ces peptides pourraient agir via FPR et que le polymorphisme c.32C>T affecte la fonction endothéliale. Enfin, nos études in vitro ont montré que l'expression des gènes des DEFA1-3 et de CRAMP, cathélicidine de la souris, est modulée par le glucose et l'insuline, respectivement dans les neutrophiles HL-60 et les adipocytes 3T3-L1. L'ensemble de ces études suggère que les DEFA1-3 et LL-37 pourraient constituer un lien entre le système immunitaire inné et le risque des MCV et du syndrome métabolique. / Multiple risk factors for atherosclerosis and cardiovascular diseases (CVD) act in a synergistic way through inflammatory pathways. Most of CVD risk factors stimulate the release of inflammatory mediators. Defensins and cathelicidins are antimicrobial peptides (AMPs) produced mainly by inflammatory cells. Beside their role in host defense, AMPs are also considered as effectors of inflammatory responses. They have been suggested to play a role in atherosclerosis. To verify this hypothesis, we studied a-defensins DEFA1-3 and cathelicidin LL-37 in a sample of the STANISLAS cohort. We demonstrated that mRNA levels of LL-37 and DEFA1-3 genes in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of studied subjects are significantly correlated with indicators of obesity, blood pressure, circulating triglycerides and fasting glucose levels, hypo-HDL-C, and leukocytes counts suggesting a role of these genes in CVD. Further analysis revealed that high expression of these genes might be associated with metabolic syndrome. We also showed that expression of LL-37 and DEFA1-3 genes was positively associated with that of FPR receptor gene and that the TT genotype of FPR1 c.32C>T/I11T polymorphism was significantly associated with decreased levels of soluble E-selectin suggesting that these peptides may act through this receptor and such a polymorphism may has an impact on endothelial cells function. In an in vitro model, we found that glucose and insulin modulate the expression of DEFA1-3 and CRAMP cathelicidin genes in human HL-60 neutrophils and mouse 3T3-L1 adipocytes cell lines, respectively. Together, our studies demonstrated that DEFA1-3 and LL-37 could be a potential link between innate immunity and CVD and metabolic syndrome.

L'électrochimiothérapie est un traitement anticancéreux utilisé en routine en Europe dans près de 130 centres de traitement du cancer. Le taux de réponse objective atteint 85 % pour le traitment de tumeurs cutanées et sous-cutanées et des études sont en cours afin d'appliquer ce traitement à des tumeurs profondes. Au cours de ce doctorat, les méchanismes sous-jacents à cette excellente efficacité antitumorale ont été étudiés. Dans un premier temps, l'objectif a été d'évaluer la capacité de l'électrochimiothérapie à induire la mort des cellules souches cancéreuses, considérées comme les racines du cancer. Ensuite, les mécanismes immunologiques à l'origine du développement d'une immunité antitumorale mise en place par le traitement ont été investigués. Cependant, malgré le haut taux de réponse observé, l'électrochimiothérapie reste un traitement local qui n'induit pas de réponse antitumorale à distance, sur les tumeurs non-traitées. Afin de pallier à cette absence d'activité systémique, une collaboration a été mise en place avec une entreprise innovante de biotechnologies, INVECTYS, dans le but de développer une stratégie de vaccination à ADN ciblant la télomérase et basée sur l'électrogènetransfert. Il est attendu que la combinaison de cette immunothérapie avec un traitement local par électrochimiothérapie, détruise non seulement la tumeur primaire, dont les cellules souches cancéreuses, mais également les cellules cancéreuses circulantes et les métastases. / Electrochemotherapy is an anticancer treatment used in routine in Europe in 130 cancer treatment centers. The objective response rate reaches 85 % for the treatment of cutaneous and subcutaneous tumors and studies are ongoing to spread the use of electrochemotherapy to deep-seated tumors. In the frame of this doctorate, the mechanisms underlying this excellent antitumor efficiency were investigated. First, the goal was to evaluate the ability of electrochemotherapy to induce the death of cancer stem cells, considered as the roots of cancer. Second, the immunological mechanisms responsible for the development of antitumor immune responses following the treatment were investigated. However, although a very high response rate is observed, electrochemotherapy remains a local treatment which does not induce antitumor responses in distant non-treated nodules. In order to circumvent this lack of systemic activity, a collaborative project was initiated with an innovating biotech company, INVECTYS, in order to develop a DNA vaccination strategy targeting the telomerase and based on electrogenetransfer. It is expected that the combination of this immunotherapy with a local treatment by electrochemotherapy could destroy not only the primary tumor, including cancer stem cells, but also circulating cancer cells and metastases.

Le rôle central de la voie mTOR (mammalian Target Of Rapamycin) dans l’homéostasie cellulaire suscite un réel intérêt dans de nombreux domaines thérapeutiques. Les inhibiteurs de mTOR (mTORi) sont utilisés en prévention du rejet de greffe par leur action d’inhibition de l’activation lymphocytaire T et l’induction de lymphocytes T régulateurs (Treg). En cancérologie, les mTORi sont utilisés pour leur action anti-proliférative et anti-angiogénique. Cependant, l’efficacité clinique de ces traitements reste modeste. Bien que des mécanismes de résistance aux mTORi intrinsèques à la cellule tumorale ont été identifiés, leur impact sur le système immunitaire émerge comme un facteur essentiel dans leur efficacité. Notre hypothèse est donc que l’efficacité anti-tumorale des mTORi serait également liée à la modulation de l’immunité anti-tumorale induite par ces traitements.Nous avons réalisé un immunomonitoring, du taux de Treg et de la réponse lymphocytaire Th1 anti-tumorale au sein d’une cohorte prospective de patients atteints de cancer rénal métastatique traités par éverolimus (mTORi).Nous avons observé une augmentation des Treg et de leur fonction suppressive à partir du 2ème mois de traitement dans la quasi-totalité des patients. Paradoxalement, une augmentation des réponses Th1 anti-tumorales a également été observée chez ces patients. Au moment de la progression tumorale, la majorité des patients ont présenté une forte augmentation des Treg associée à une perte de la réponse Th1. Ainsi, nous avons pu définir différents profils immunitaires basés sur la modulation de ces deux paramètres. Les patients présentant une diminution précoce des Treg associée à une augmentation de la réponse Th1 avaient une meilleure survie sans progression par rapport aux autres patients (13.2 vs 4 mois p= 0.02). De façon consistante, cette immunomodulation a été confirmée chez des patients atteints de tumeur neuroendocrine traités par éverolimus. De plus, l’impact du traitement sur les Treg et la réponse Th1 n’était pas influencé par la pharmacocinétique du médicament. Par la suite, nous avons étudié in vivo, chez des souris porteuses de différentes tumeurs, l’impact des mTORi sur la réponse immunitaire anti-tumorale. Comme chez les patients, nous avons observé une augmentation des Treg chez les souris traitées par mTORi. Ainsi, l’utilisation d’anticorps déplétants les Treg ou de souris transgéniques ont permis de démontrer le rôle délétère des Treg sur l’efficacité anti-tumorale des mTORi. Ces résultats suggèrent fortement que les mTORi ont un double effet sur le système immunitaire dans un contexte tumoral, un premier néfaste par l’induction d’un environnement immunosuppresseur et le second positif par l’augmentation d’une réponse Th1 anti-tumorale.Dans un deuxième travail, nous avons exploré l’effet positif des mTORi sur le système immunitaire afin d’optimiser les immunothérapies anti-tumorales. Nous avons montré que l’administration de temsirolimus (mTORi) améliore l’efficacité anti-tumorale d’un vaccin thérapeutique chez la souris. L’effet synergique de cette combinaison était lié à une augmentation de l’infiltration tumorale des LT CD8 anti-tumoraux de phénotype centro-mémoire. L’efficacité de cette combinaison a été nettement améliorée par l’addition d’un antagoniste de CCR4 permettant d’éliminer les Treg induits par le temsirolimus.En conclusion, les mTORi demeurent une stratégie prometteuse en cancérologie malgré la réduction de leur utilisation due à l’arrivée des nouvelles immunothérapies, comme les checkpoints inhibiteurs (notamment dans le cancer du rein) et d’autres thérapies ciblées (inhibiteurs de cycline dans le cancer du sein). En revanche, le futur développement des mTORi devra s’appuyer sur des biomarqueurs prenant en compte l’impact de ces traitements sur le système immunitaire et sur des combinaisons thérapeutiques notamment avec les immunothérapies / The key role of the mTOR (mammalian Target of Rapamycin) pathway in cellular homeostasis raises a real interest in many therapeutics areas. Inhibitors of mTOR (mTORi) are used for graft rejection prevention to inhibit the T lymphocyte (LT) activation and induce regulatory T cells (LTreg). In cancerology, they are used for their antiproliferative and antiangiogenic actions. However, the clinical efficacy of those treatments is low. Although several mTORi resistance mechanisms linked to the tumor cell have been identified, their impact on the immune system appears as a key factor in their efficiency. Thus, our hypothesis is that the clinical efficacy of mTORi could also be dependent of an anti-tumoral immunity modulation resulting from those treatments.We performed an immunomonitoring of the Treg rate and the tumor specific Th1 anti-tumor response among a prospective cohort of patients with a metastatic renal carcinoma treated by everolimus (mTORi). We observed that the Treg rate and the suppressive function increase after the second month of treatment for almost all the patients. Paradoxically, an increase of the Th1 anti-tumoral response has also been observed for these patients. At disease progression, a majority of the patients has shown an important increase of Treg with a decrease of the Th1 response. Thus, we have been able to define different immune profiles based on the modulation of these two parameters. Progression free survival of patients with an earlier decrease of Treg and an increase of Th1 response was significantly longer compared to other patients (13.2 vs 4 months p=0.02). This immunomodulation has been consistently confirmed with patients affected by neuroendocrine tumor and treated with everolimus. The treatment impact on Treg and the Th1 response was not related to the pharmacokinetic of the drug. Thereafter, we have studied in vivo the impact of mTORi on the anti-tumoral immune response with mice affected by different tumors. We have observed the same increase of Treg in mice treated with mTORi as the increase observed in the patients. Thus, using antibodies depleting the Treg or transgenic mice allowed us to confirm the deleterious role of Treg on the anti-tumor mTORi efficacy. Those results strongly suggest that mTORi have a double effect on the immune system, a harmful impact by the induction of an immunosuppressive environment and a positive impact by the increase of the anti-tumor Th1 response.In a second time, we have studied the positive effect of mTORi on the immune system in order to optimize the anti-tumoral immunotherapies. We have shown that the administration of temsirolimus (mTORi) improves the anti-tumoral efficiency of a therapeutic vaccination on mice. Indeed, the synergic effect of this combination is tied with an augmentation of tumor infiltrate anti-tumor T CD8 with a central memory phenotype. The efficiency of this combination has been greatly improved by the addition of an antagonist CCR4 allowing the elimination of Treg generated by temsirolimus.In conclusion, mTORi remain a promising strategy in cancerology even if their use is likely to be reduced as new immunotherapies such as checkpoint inhibitors (renal carcinoma) or other targeted therapies (cycline dependent kinase inhibitors in breast cancer) appeared. In the future, the development of mTORi must integrate biomarkers taking into account the impact of these treatments on the immune system, and therapeutic combination such as the immunotherapy

La sécurité juridique recherchée par le droit OHADA à travers les actes uniformes est mise à rude épreuve. Dans le recouvrement des créances, matière qui fait partie du droit des affaires tel que défini par le Traité de Port Louis, la protection des personnes garantes et l’imparfaite adéquation des sûretés réelles, n’assurent pas aux créanciers une situation confortable dans la prévention de l’impayé. En outre, les défauts substantiels du droit et la grande considération de la personne du débiteur soit par des mesures compassionnelles, soit par des considérations tirées de l’intérêt général, s’ajoutent aux obstacles matériels pour conduire les procédures individuelles d’exécution sur les voies de l’ineffectivité. Par ailleurs, et alors qu’elles ont fait l’objet d’une récente réforme saluée par les praticiens, les procédures collectives restent handicapées par une inconséquente gestion du temps. Toutefois, en repensant la théorie des garanties personnelles et en prenant en compte la situation des créanciers modestes d’une part, et en réduisant les obstacles juridiques tout en opérant une meilleure intégration du titre exécutoire d’autre part, le droit OHADA du recouvrement des créances pourrait entrevoir des lendemains meilleurs. C’est tout l’objet de la présente étude qui appelle à une refonte d’envergure de la doctrine de la protection de la personne du débiteur. / The OHADA law on juridical security through uniform acts has seriously been tested. Notably in the matter of debts recovery, which is part of the business law as defined by the Port Louis Treaty. The guarantors’ protection as well as the imperfect adequacy of the real securities, do not guarantee the creditors a comfortable position in regards to liabilities. Moreover, the numerous deficiencies of the law and the interest shown to the borrower through compassionate measures or by considerations of each party’s general interest, are also issues that are added to the already existing material obstacles that are hindering the execution of individual enforcement proceedings. Moreover, and while they have been the subject of a recent reform praised by practitioners, collective procedures remain ineffective due to an inconsistent time management. However, by reorganizing the theory of personal guarantees and taking into account the situation of small creditors on the one hand, and the reduction of legal obstacles and a better integration of the enforcement order on the other hand, the OHADA law on debt recovery could know a better future. This is the focus of this study which calls for a major overhaul of the debtor's protection doctrine.