Orientador: Sônia Regina Panzarini Barioni / Banca: Roberta Okamoto / Banca: Ana Paula Farnezi Bassi / Banca: Celso Koogi Sonoda / Banca: Letícia Helena Theodoro / Resumo: O sucesso do reimplante dentário, mesmo nos dias atuais, é limitado, pois grande parte dos dentes é perdida devido à reabsorção radicular progressiva, justificando a busca de novas estratégias que possam controlar esse problema. Assim, foi objetivo deste estudo, avaliar por meio de análise histomorfométrica e imunoistoquímica, a ação do laser em baixa intensidade (LLLT) sobre o processo de reparo após reimplante dentário em ratos. Sessenta ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) tiveram seus incisivos superiores direitos extraídos e foram aleatoriamente divididos em seis grupos: C0, C30 e C45 considerados controles, onde o reimplante dentário foi realizado imediatamente, trinta e quarenta e cinco minutos após a exodontia respectivamente, sem nenhum tratamento do ligamento periodontal remanescente e L0, L30 e L45, onde o reimplante foi realizado nos mesmos tempos extra-alveolares dos controles, porém a superfície radicular e alvéolo, com remanescentes do ligamento periodontal, foram tratados com LLLT (Arseneto de Gálio e Alumínio) antes do reimplante. Os animais foram eutanasiados após 60 dias. Os resultados evidenciaram reabsorções radiculares externas por substituição e inflamatória em todos os grupos, não apresentando diferença significativa entre o grupo controle e tratado em cada período de tempo extra-alveolar (P>0,05). A anquilose, porém, foi maior no grupo L30 em comparação com o C30 (P<0,05). Na análise imunoistoquímica houve predominância da proteína RANKL sobre a RANK e OPG no reimplante imediato (p<0,05). No período extra-alveolar de 45 minutos houve predominância da RANK sobre a RANKL (p<0,05). A proteína TRAP foi predominante nos grupos tratados com LLLT no reimplante imediato e com 30 minutos de tempo extra-alveolar (p<0,05). Esses resultados levaram a concluir que o tratamento da superfície radicular e alvéolo com LLLT, nas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The success of the replanted tooth, nowadays, still tends to be limited because great amount of teeth are lost because of progressive root resorption, justifying the search of new strategies that can control this problem. This study investigates by histomorphometric and immunohistochemical analysis the of low-level laser terapy (LLLT) influence on in the control of root resorption on the healing process after tooth replantation. Sixty Wistar rats were submitted to extraction of their upper right incisor and randomly were allocated to one of six experimental groups. The groups: C0, C30 and C45 had been considered controls, where the teeth were replanted immediately, thirty and forty five minutes after the tooth extraction respectively, without any treatment of the remaining periodontal ligament. In the groups L0, L30 and L45, the teeth were replanted immediately, thirty and forty five minutes after tooth extraction respectively; however the root surface and dental sockets with remainders of the periodontal ligament had been treated with LLLT (gallium-aluminium-arsinide). The animals were euthanasied after 60 days. The comparative analysis did not reveal statistically significant differences in external root resorption (P>0.05) between the treatment modalities when used for tooth replantation in each extra-alveolar period, but anchylosis was bigger in L30 (P<0.05) comparing to C30. Immunohistochemical analysis showed predominant expression of RANKL on RANK and OPG in the immediate replant (p<0.05). At 45 minutes extra-alveolar time, there was predominant expression of RANKL on RANK (p<0.05). TRAP protein showed predominant expression in the LLLT groups in immediate replant and 30 minutes extra-alveolar time (P<0.05). These results suggest that the treatment of root surface and dental sockets with LLLT, in this study specification, were not able to prevent root resorption in tooth... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: O aumento da glândula prostática canina com o envelhecimento pode ser decorrente de uma proliferação excessiva do estroma e epitélio acinar, uma diminuição na taxa de apoptose, entre outros. Esses processos celulares são mediados por hormônios, fatores de crescimento e proteínas, dentre elas podemos citar as proteínas CYR61 e p-ERK1/2 e os fatores de crescimento EGF, TGF- e EGFr. Próstatas originadas de 29 cães, com pesos variando entre 6 a 40 kg, foram retiradas, lavadas e pesadas e o volume medido, os valores variaram em 3,8 a 130 g e 2,4 a 90 cm3 respectivamente. Dos fragmentos avaliados 55,17% apresentaram diagnóstico de HPB-ep e 5,75% apresentaram diagnóstico normal. Exames de IHQ foram realizados e para a proteína CYR61 houve uma forte imunorreatividade nas FML, MLA e núcleo das células epiteliais dos fragmentos avaliados. Houve diferenças estatísticas entre grupos de HPB quanto a fração da área de marcação, no exame de W.B. a proteína teve como peso molecular médio 37,72 kDa. Quanto ao EGF houve uma predominância de marcação na FML e núcleo das células epiteliais, os pesos moleculares médio deste fator de crescimento foi de 47,03 e 41,65 kDa nos fragmentos prostáticos avaliados. O TGF- teve imunorreatividade nas FML e citoplasma das células epiteliais, e no exame de W.B. houve 2 bandas de pesos moleculares médios de 52,23 e 38,88 kDa. O receptor de membrana EGFr apresentou imunorreatividade nas FML e núcleo das células epiteliais, no W.B. houve apenas uma banda visível de peso molecular médio de 48,49 kDa. A proteína p-ERK1/2 esteve predominante nas FML e núcleo das células e no W.B. apresentou 3 bandas de pesos moleculares médios de 42,61; 39,56 e 37,26 kDa. Houve correlação positiva entre as proteínas e os fatores de crescimento. / Abstract: The canine prostate gland enlargement also aging could be resulting of excessive stroma and acinar epithelium proliferation, reduced apoptosis, among other. These cellular mechanisms are mediated by hormones, growth factors and proteins, like the proteins CYR61 and p-ERK1/2 and the growth factors EGF, TGF- e EGFr. Prostate from 29 dogs, weighing 6 to 40 kg, were collected, washed, wheighed and volume was measured, with average from 3,8 to 130 g and 2,4 to 90 cm3 respectively. Approximately 55,17% of samples were diagnosed with HPB-ep and 5,75% were normal. IHQ exams were accomplished and high CYR61 immunoreactivity in SMF, ASM and epithelial cells nucleus was observed. There were statistical differences between BHP groups related to immunoreactivity area, by means of W. B. and the mean molecular weight was 37,72 kDa. By analyzing EGF, immunoreactivity in SMF epithelial cells nucleus was prevalent, the mean molecular weights was 47,03 41,65 kDa. TGF- presented immunoreactivity in SMF and epithelial cells cytoplasm and W.B. showed two bands with mean weight 52,23 and 38,88 kDa. The EGFr membrane receptor presented immunoreactivity in SMF and epithelial cells nucleus, W.B. showed only one visible band with mean molecular weight 48,49 kDa. The p-ERK1/2 protein was prevalent in SMF and cell nucleus, W.B. showed three bands with mean molecular weights 42, 61; 39,56 and 37,26 kDa. There was positive correlation between proteins and growth factors. / Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Coorientadora: Renée Laufer Amorin / Coorientador: José Félix Pérez Gutiérrez / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Eugênio Gonçalves de Araújo / Banca: Sebastião Roberto Taboga / Doutor

Orientador: Tereza Cristina Cardoso da Silva / Banca: José Antônio Jerez / Banca: Iveraldo dos Santos Dutra / Resumo: O Complexo de Enterite de Perus (PEC) tem sido incriminado como uma das maiores causas de perdas econômicas em outros países. Neste estudo, foi demonstrado causando diarréia, perda de peso e na maioria das vezes alta mortalidade em perus acometidos de enterite com 30-120 dias de idade de uma determinada região produtora no Brasil. A RT-PCR foi aplicada em suspensões de intestinos (SI) (n=2), respectivos conteúdos intestinais (CI) (n=2), bursa de Fabrícius (BF), fezes (F) (n=5) e swabs cloacais (SC) (n=44), para amplificar a região conservada 3'UTR e gene do nucleocapsídeo de TCoV. Os exames de histopatologia e imunohistoquímica direta foram realizados para detectar o antígeno TCoV a partir de lâminas de intestinos e bursas infectados. Todos os resultados obtidos nos tecidos marcados, revelaram lesões sugestivas de terem sido causadas pela infecção por TCoV. A marcação positiva da imunohistoquímica direta estava presente em todas as lâminas de intestinos, entretanto, todas as BF analisadas foram negativas. Os achados de RT-PCR foram positivos para TCoV em todas as amostras de fezes e 27,27% das amostras de SC foram positivas para a região 3'UTR e região TCoV nucleocapsídeo. As amostras de soro (n=200), foram positivas para TCoV, com títulos variando de 2.0Log a 8.0Log usando o ELISA comercial IDEEX para IBV. Finalmente, o melhor material de campo para o diagnóstico de TCoV foram as fezes (F) e/ou suspensão de intestinos (SI), resultando na primeira descrição de perus com quadro agudo de enterite acometidos por coronavirus Grupo 3 no Brasil. / Abstract: The Poult Enteritis Complex (PEC) has been incriminated as the major cause of losses in other countries, and especially, in this study, was described causing diarrhea, weight gain and most of the time, high mortality. In this study, it was performed the turkey coronavirus (TCoV) detection from 30-120 day old affected poults from a particular producer region in Brazil. The RT-PCR was applied in intestines suspensions (IS) (n=2), respective intestines contents (IC) (n=2), bursa of Fabrícius (BF), faecal droppings (FD) (n=5) and cloacal swabs (CS) (n=44) to amplify the 3þUTR conserved region and TCoV nucleocapsid gene. The histopathological and direct immunohistochemical examinations were performed to detect the TCoV antigen from infected intestine and bursa slides. All results obtained from stained tissues, revealed lesions described to be caused by TCoV infection. The direct immunohistochemical positive signal was present in all intestine slides, however all BF analysed were negative. RT-PCRs findings were positive for TCoV in all FD samples, and 27,27% of CS analysed were positive for 3þUTR and TCoV nucleocapsid region. The sera samples (n=200) were positive for TCoV, with titers range from d 2.0Log to 8.0Log using the IDEEX commercial ELISA for IBV. Finally, the best field material for TCoV diagnosis was FD and/or intestine suspensions (IS), resulting in a first describe of TCoV affecting poults in Brazil. / Mestre

Orientadora: Mirela Tinucci Costa / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Renée laufer Amorim / Resumo: O carcinoma de células escamosas é uma neoplasia maligna que emerge dos queratinócitos e corresponde a aproximadamente 5% dos tumores cutâneos dos cães. Os tumores de células basais são compostos quase exclusivamente por células basais e apresentam uma incidência de 4 a 12% entre as neoplasias cutâneas caninas. O carcinoma de células escamosas e o tumor de células basais são neoplasias comumente registradas na clínica de pequenos animais. As caderinas compreendem uma classe de moléculas de adesão celular expressas na superfície de todas as camadas epidérmicas. A E-caderina é a principal caderina envolvida na adesão celular epitelial. A redução de sua expressão está envolvida com a progressão de alguns tipos de câncer, principalmente os carcinomas, seu poder metastático, e ainda na definição do prognóstico. Não há muitos estudos na veterinária com relação à expressão dessas moléculas em tumores. O fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) é um potente mitógeno para células endoteliais e sua expressão tem sido relacionada com o aumento da angiogênese tumoral. O VEGF além de estimular a angiogênese, produz colagenase e outras enzimas degradativas que facilitam a saída das células neoplásicas para a circulação, além de estimularem o crescimento das células tumorais. O objetivo desse estudo foi avaliar a expressão da E-caderina e do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) em tecidos caninos histologicamente classificados como carcinoma de células escamosas e tumor de células basais, buscando-se uma correlação com o grau histológico desses tumores. A expressão normal e reduzida da Ecaderina apresentou diferenças significativas comparando-se o tumor de células basais com o carcinoma de células escamosas quando avaliada pelo teste de Fisher...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The squamous cell carcinoma (SCC) is a malignant epithelial neoplasm of keratinocytes and accounts for about 5% of the canine skin neoplasms The basal cells tumors (BCT) are made up almost entirely of basal cells and accounts for 4 to 12% of the canine skin neoplasms. Squamous cell carcinoma and basal cell tumor are neoplasms commonly seen in the Small Animal Practice. The cadherins are a group of cellular adhesion molecules that are expressed on the surface of all epidermic layer. The Ecadherin is the main cadherin involved in epithelial cellular adhesion; the decrease in its expression is related to the progression of some types of cancer, specially carcinomas, to its metastatic characteristics, and to the prognosis. There are few studies in Veterinary Medicine researching the expression of this molecule in canine tumors. The vascular endothelial growth factor (VEGF) is a potent mitogen to endothelial cells and its expression has been correlated with increased tumoral angiogenesis. Besides stimulating angiogenesis, VEGF produces colagenase and other enzymes thus helping neoplastic cells scape into the vascular system and stimulating tumoral cell growth. The goal of this study was to evaluate E-cadherin's and vascular endothelial growth factor expression in canine tissues that were classified as squamous cell carcinoma or basal cell tumor, and to find a correlation with the histological grade of the tumors. Both normal and decreased expression of E-cadherin had significant differences when comparing squamous cell carcinoma to basal cell tumor using the Fisher test (P=0,0039). Also, in some samples the more differentiated neoplastic cells had a higher intensity of color than the less differentiated...(Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Orientador: José Luiz Laus / Banca: Aline Adriana Bolzan / Banca: Fabrício Villela Mamede / Banca: Delphim da Graça Macoris / Banca: Márcia Rita Fernandes Machado / Resumo: Estudaram-se os efeitos do BandVet® na reparação corneal em cães após ceratectomia superficial. Utilizaram-se 16 cães adultos, sem raça definida, machos ou fêmeas, sendo oito tratados com o BandVet® (BV) e os demais, com cloreto de sódio a 0,9%, (CO) subdivididos em grupos para avaliação clínica diária durante os 3, 7, 14 e 28 dias de pós-operatório. Foram atribuídos escores para a avaliação clínica quanto ao blefarospasmo, congestão conjuntival, vascularização, pigmentação e edema corneais. Encontraram-se blefarospasmo e fotofobia nos períodos iniciais de pósoperatório. Houve diferença significativa quanto à congestão conjuntival e secreção ocular aos sete dias de pós-operatório. A vascularização manteve-se constante desde os períodos iniciais, desaparecendo no período final, apenas no grupo tratado. O edema corneal esteve sempre presente em ambos os grupos, diferindo estatisticamente aos 14 dias de pós-operatório. Ao término dos períodos, os olhos ceratectomizados foram enucleados e as córneas submetidas a estudo morfométrico (contagem de células inflamatórias, contagem de pontos de colágeno, contagem de fibroblastos e mensuração da espessura do epitélio e estroma corneais), histoquímico (Alcian Blue pH 1.0 e Alcian Blue pH 2.5), de análise digital (avaliação cromática tridimensional de superfície) e imunoistoquímico (expressão da fibronectina e da tenascina). Relativamente à contagem das células inflamatórias, observou-se maior quantitativo nos animais do grupo BV, durante os quatro períodos avaliados. Relativamente aos pontos de colágeno, observou-se nas córneas dos animais do grupo BV, um maior número de pontos nos quatro períodos avaliados, havendo diferença estatística, comparativamente aos valores das áreas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The effects of Bandvet® on corneal repair was studied after superficial keratectomy. Sixteen adult cross-breed dogs were used, being eight treated with Bandvet® (BV) and eight with saline 0.9% (CO). Daily clinical evaluations were accomplished 3, 7, 14 and 28 days in the post-operative period. Blepharospasm, conjuntival congestion, ocular discharge, photofobia, vascularization, pigmentation, and corneal edema were assessed by means of clinical scores. Blepharospasm and photofobia were noted at early stages of the post-operative period. Conjunctival congestion and ocular discharge changed significantly at day 7 of the post-operative period. Vascularization advanced axially in a constant manner in the early post-operative periods, disappearing in the late stages, only in the treated group. Corneal edema was observed in all time points in both of groups, changing significantly at day 14 of the postoperative period. At the completion of the study, keratectomized eyes were enucleated and corneas submitted to morphometrical evaluation (inflammatory cell count, collagen patches count, fibroblast count, and corneal epithelium and stromal thickness measurement) histochemistry (Alcian Blue pH 1.0 and Alcian Blue pH 2.5), digital analysis (tridimensional chromatic evaluation of the surface), and immunohistochemistry (fibronectin and tenascin labeling). During the 4 time points evaluated, inflammatory cell count was increased in the BV group. An enhanced number of collagen patches were observed in the corneas of the animals of the BV group, in the four time points evaluated, being significant in comparison to values observed in the transitional areas (P = 0.040). A higher fibroblast count was noted in the BV group at days 3, 14, 28, and 28. At day 7, however, the CO group showed higher... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: O propósito deste trabalho foi avaliar a influência da reutilização de fresas de alta resistência sobre o aquecimento ósseo, a viabilidade celular imediata e a deformação das fresas após osteotomia para implantes em tíbias de coelhos. Para isso, foram utilizados 12 coelhos machos brancos (Oryctolagus cunilicus, Nova Zelândia), que foram submetidos a 200 sequências de fresagens para implantes na cortical superior de suas tíbias. Foram estabelecidos 6 grupos (G1 a G6) que correspondiam ao número de osteotomias realizadas por cada fresa (0, 10, 20, 30, 40 e 50). Cada leito cirúrgico recebia a seguinte sequência de fresagem: fresa tipo lança e helicoidais de 2,0mm, 2,8mm, 3,0mm e 3.15mm. As áreas osteotomizadas foram coletadas para análise imunoistoquímica, as oscilações térmicas foram quantificadas e as fresas utilizadas receberam análise por microscopia eletrônica de varredura. Nos resultados, houve uma correlação alta entre a porcentagem de deformação e o número de reutilização de cada fresa (Coeficiente de Correlação de Pearson r = 0,984). Observou-se também que as fresas do tipo lança apresentaram maior deformação após o uso do que as fresas helicoidais (proporção de 2:1). Não houve correlação estatística significativa entre aumento da reutilização da fresa e aquecimento ósseo (p > 0,05). No entanto, observouse que a oscilação térmica durante a fresagem da lança é maior que as demais fresagens (proporção de 3:1). Na análise imunoistoquímica, observou-se um equilíbrio fisiológico da expressão das proteínas Osteoprotegerina e RANKL em todos os grupos, no entanto, houve maior expressão de todas as proteínas no Grupo 6. De acordo com a metodologia aplicada, foi possível concluir que as fresas avaliadas não causam aquecimento ósseo significativo em até 50 reutilizações, no entanto, causam maior trauma tecidual na 50ª fresagem... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this study was evaluate the influence of high resistence drill reuse over bone heating, immediate bone-cell viability and drills wear after implant osteotomies in rabbit tibias. Therefore, 12 male white rabbits (Oryctolagus cunilicus, New Zealand) received 200 implant sequential osteotomies over the superior cortical of their tibia. Six groups were established (G1 to G6), according to the number of osteotomy of each drill (0, 10, 20, 30, 40 and 50). The implant sequence of drills was: spear drill, 2,0mm, 2.8mm, 3.0mm and 3.15mm helicoidal drills. The receptor-beds were collected to imunohistochemistry, the thermal changes were quantified and the drills received scanning electron microscopy analysis. In the results, a great correlation degree between drill wear and number of osteotomies was observed (Pearson's Correlation Coefficient r = 0,984). Another result was that spear drill have more deformation than helicoidal drills (2:1 proportion). The bone heating analysis concluded that there was no statistical siginificance between number of osteotomy and bone heating (p > 0,05). However, the thermal changes during spear drilling was greater than during helicoidal drillings (3:1 proportion). Imunohistochemistry results showed a physiological balance of Osteoprotegerin and RANKL immunolabeling in all groups, however there was a greater immunolabeling of all proteins in the last group. According to this metodology, the conclusion is that the tested drills do not caused significant bone heating after 50 reuses, however, they caused more tissue trauma at 50th osteotomy. So, the studied system must be reused for 40 times, and the spier drill must be substituted after 20 osteotomies. / Orientador: Luiz Antonio Salata / Coorientador: Osvaldo Magro Filho / Banca: Márcio de Moraes / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Mestre

Orientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Roberta Okamoto / Banca: Élio Hitoshi Shinohara / Banca: Oswaldo Bergamaschi / Banca: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Resumo: O presente estudo teve por finalidade analisar as respostas teciduais do tecido subcutâneo na presença de transplante homógeno de células de medula óssea, por meio dos estudos histológico e imunoistoquímico das proteínas Cbfa1/Runx2 e osteocalcina. A metodologia utilizada nesse estudo envolve processamento em tecido descalcificado e neste caso, possibilitando cortes com menor espessura, para análise das características morfológicas das células presentes no tecido formado ao redor do enxerto e mesmo a resposta inflamatória do tecido subcutâneo ao material enxertado. Como complementação realizou-se o processamento em tecidos calcificados, após a injeção de fluorocromos, a calceína aos 10 dias e a alizarina aos 20 dias possibilitando a análise do processo de deposição de cálcio ao redor do material enxertado no tecido subcutâneo. Com a análise histológica, verificou-se que o enxerto de medula óssea isoladamente foi incorporado ao tecido subcutâneo, sendo que no período de 20 dias são observadas algumas estruturas semelhantes a tecido ósseo, pois apresentam-se morfologicamente, como tecido calcificado. Com o objetivo de caracterizar o tecido medular implantado no tecido conjuntivo subcutâneo, foi observada imunomarcação positiva contra Cbfa1/Runx2 e contra osteoclacina. Os resultados sugerem que a presença da medula óssea junto ao osso cortical, quando transplantada em seres de mesma espécie, em tecido subcutâneo, favoreceu a osteogênese pelo processo de osteoindução. / Abstract: The purpose of this study was to analyze the cellular response to the subcutaneous tissue in a presence of autolougous bone marrow cells transplantation, through the histological and imunohistochemic study of Cbfa1/Runx2 and osteocalcin proteins. The methodology uses the decalcified tissue processing, and in this case, provides thinnest slices cuts for the morphological analyses and inflammatory responses of the cells around the graft in the subcutaneous tissue. As an extra study, was evaluated the calcified tissues after the fluorochroms injection, calcein in the tenth day and alizarin in the twentieth day, given the possibility to analyze the calcium deposition process around the graft in the subcutaneous tissue. Through the histological analyses it was possible to verify that the bone marrow was well accepted by the connective tissue, at the twentieth day it was possible to see some structures similar to bone, because it was morphologically similar to calcified tissue. With the objective to characterize the bone marrow implanted in the conjunctive subcutaneous tissue, positive results against Cbfa1/Runx2 and osteocalcin was observed. The results suggest that the presence of the bone marrow next to the cortical bone, when grafted in beings of same species, in subcutaneous tissue, it favored osteogneses for the osteoinduction process. / Doutor