Orientador: Valéria Marçal Félix de Lima / Banca:Juliana Regina Peiró / Banca: Aparecida de Fátima Michelin / Resumo: A Leishmaniose visceral (LV) no Brasil representa um grave problema de saúde pública; portanto, é importante estudar novas alternativas para o tratamento de cães infectados. O imunomodulador agregado de magnésio-amônio fosfolinoleato-palmitoleato anidrido proteína (P-MAPA) melhora a imunocompetência quando o sistema imunológico está comprometido, mas sua dependência de receptores Toll-like (TLRs) e os mecanismos envolvidos na resposta imune ainda não estão claros. Estudou-se a ação in vitro de P-MAPA sobre a expressão de TLR2 e TLR4, espécies reativas de oxigénio (ROS), óxido nítrico (NO) e p38 ativada por mitógeno proteína quinase (p38MAPK) e fosforilação de IKK em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e macrófagos de cães saudáveis e infectados. O PBMC ou macrófagos foram isolados e cultivados com diferentes concentrações de P-MAPA (20,100 e 200 μg/mL) em uma atmosfera húmida, a 37°C com 5% de CO2. A observação revelou que nos macrófagos de cães infectados com Leishmania sp. mostraram uma diminuição em TLR2 em comparação com cães saudáveis e em indução com P-MAPA. ROS foram aumentados em PBMC de cães infectados com Leishmania sp. em comparação com cães saudáveis e P-MAPA melhorou a produção de ROS. A produção de NO foi aumentada no sobrenadante da cultura a partir de macrófagos estimulados por P-MAPA em ambos os grupos de cães saudáveis e infectados com Leishmania sp. O tratamento de macrófagos de cães saudáveis com imunomodulador P-MAPA induziu p38 MAPK e fosforilação de IKK, sugerindo a transdução de sinal por esta via. Estas descobertas sugerem que a P-MAPA tem potencial como uma droga terapêutica no tratamento de leishmaniose visceral canina / Abstract: Visceral leishmaniasis (VL) in Brazil represents a serious public health problem; therefore, it is important to study new alternatives to treat infected dogs. The immunomodulator protein aggregate magnesium-ammonium phospholinoleate-palmitoleate anhydride (P-MAPA) improves immunocompetence when the immune system is impaired, but its dependence on Toll-like receptors (TLRs) and the mechanisms involved in the immune response remain unclear. The in vitro action of P-MAPA on the expression of TLR2 and TLR4, reactive oxygen species (ROS), nitric oxide (NO) and p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) and IKK phosphorylation were studied in mononuclear cells from peripheral blood and macrophages from healthy and Leishmania-infected dogs. The PBMC or macrophages were isolated and cultured with different concentrations of P-MAPA (20,100 and 200 μg/mL) in a humid environment at 37°C with 5% CO2. Observation revealed that Leishmania-infected dogs showed a decrease in TLR2 in macrophages compared with healthy dogs and in induction with P-MAPA. ROS were increased in PBMCs from Leishmania sp.-infected dogs compared with healthy dogs and P-MAPA improved ROS production. NO production was increased in culture supernatant from macrophages stimulated by P-MAPA in both healthy and Leishmania-infected dogs. Treatment of macrophages from healthy dogs with immunomodulatory P-MAPA induced p38 MAPK and IKK phosphorylation, suggesting signal transduction by this pathway. These findings suggest that P-MAPA has potential as a therapeutic drug in the treatment of canine visceral leishmaniasis / Mestre

Orientador: Cáris Maroni Nunes / Banca: Francisco Chiaravalloti Neto / Banca: Márcia Dalastra Laurenti / Banca: Marcelo Vasconcelos Meireles / Banca: Mary Marcondes / Resumo: Leishmaniose visceral é uma doença grave que tem no cão seu principal reservatório doméstico. Algumas lacunas no conhecimento dificultam ainda mais o controle da doença. Com relação ao reservatório canino, a possibilidade de se estabelecer indicadores de infectividade ao vetor, como a carga parasitária, poderia resultar em melhor caracterização de seu papel como fonte de infecção na cadeia epidemiológica. Foram realizados xenodiagnósticos em cães acometidos de leishmaniose visceral, com subsequente avaliação da carga parasitária no hospedeiro e no vetor, utilizando-se flebotomíneos da área urbana de Araçatuba,SP. Após cinco dias do repasto, as fêmeas foram dissecadas e submetidas à avaliação parasitológica por meio da demonstração direta do parasito (DDP) e da contagem em câmara de Neubauer (NC). Fragmento de DNA de cinetoplasto (kDNA) de Leishmania spp. foi amplificado por meio da PCR convencional e em tempo real (qPCR), para quantificação da carga parasitária. Os cães foram avaliados para a presença de sinais clínicos e amostras de sangue, swab conjuntival e de pele foram colhidas e processadas por PCR e qPCR. Os resultados dos métodos diagnósticos utilizados foram correlacionados em modelo de regressão linear e a positividade de felbotomíneos foi corrigida pela positividade natural. Tanto a PCR convencional quanto a qPCR mostraram-se adequadas para a avaliação da infectividade canina. Houve correlação entre a carga de parasitos presentes na pele e no swab conjuntival do cão bem como com a cargas de parasitos dos flebotomíneos. Alguns sinais clínicos dos cães, pela análise de componentes principais (PCA), estiveram relacionados com a maior taxa de infecção dos vetores. / Abstract: Visceral leishmaniasis is a severe disease that has the dog as its main domestic reservoir. Gaps in the knowledge difficult even more the control of this disease. Regarding the canine reservoir, the possibility of establishing infectivity indicators, like the dogs parasite load, could result in better characterization of its role as source of infection in the transmission chain. Xenodiagnosis in dogs with visceral leishmaniasis were performed with subsequent parasite load evaluation of the host and the vectors, using sandflies captured in the urban area of Araçatuba,SP. After five days, the female sand flies were dissected, subjected to parasitological evaluation by the direct demonstration of the parasite (DDP) and by counting in a Neubauer chamber (NC). A kinetoplast DNA fragment of Leishmania spp. was amplified by conventional PCR and by qPCR to check the presence and quantification of Leishmania kDNA. Dogs were assessed for clinical signs and blood, skin and conjunctival swab samples were taken and tested for parasite load. The diagnostic methods tested (NC, PCR and qPCR) were correlated by linear regression and positivity results were corrected by the natural infection rate. Conventional PCR and qPCR proved to be appropriate for evaluating canine infectivity. There was a correlation between the parasite load present in the dog' skin and the conjunctive swab, as well as with the sandflies parasite loads. Principal component analysis revealed that some of the clinical signs shown by the dogs were related to a highest sandfly infection rate. / Doutor

Orientador: Francisco Leydson Formiga Feitosa / Banca: Sara Vilar Dantas Simões / Banca: Luiz Cláudio Nogueira Mendes / Resumo: O objetivo desse trabalho avaliar a ocorrência de mastite em cabras no período pós-parto e monitorar a qualidade colostral e a transferência de imunidade para cabritos que ingeriram colostro e leite de cabras portadoras de mastite. Foram coletadas amostras de secreções lácteas e sangue imediatamente após o parto, bem como às 24 e 48 horas após o parto/nascimento. O exame físico das glândulas mamárias e a avaliação macroscópica das secreções lácteas também foram realizados nesses momentos. A presença de mastite nesse período foi baixa (16,90%), e a forma mais prevalente foi à assintomática. Os Staphylococcus coagulase negativo (SCN) tiveram presentes na maioria dos isolamentos realizados (11/12). O exame físico das glândulas mamárias não revelou grandes alterações ao longo dos momentos avaliados, entretanto o teste de CMT (California Mastitis Test) mostrou-se eficaz para o diagnóstico das mastites assintomáticas no período pós-parto imediato. A contagem de células somáticas foi maior nos animais positivos à lactocultura quando comparados àqueles que tiveram resultado negativo à esse teste. Não houve diferença entre as concentrações de IgG no soro lácteo logo após a parição entre os animais com e sem mastite, entretanto os teores de lactoferrina e albumina estiveram aumentados nas secreções positivas no exame microbiológico em comparação às amostras sem isolamento. Os cabritos alimentados por colostro e leite de cabras, com e sem mastite, não apresentaram falha de transferência de imunidade. As demais frações proteicas avaliadas, não diferiram entre os cabritos alimentados com colostro e leite de cabras com e sem mastite ao longo do experimento. / Abstract: The objective of this work was in addition to avaluate the occurrence of mastitis in goats in the postpartum period as well as monitor the quality and colostral transfer of immunity to goats that ingested colostrum and milk of goats suffering from mastitis. Colostrum and blood samples were collected immediately after delivery, 24 and 48 hours after delivery / birth. Physical examination of the mammary glands and the macroscopic evaluation of mammary secretions were also performed at these times. The presence of mastitis in this period was low (16.90%), and the most prevalent form was asymptomatic. The coagulase negative staphylococcus (CNS) were present in most isolations performed (11/12). Physical examination of mammary glands revealed no major changes over the periods evaluated, however the test of CMT (California Mastitis Test) was effective for the diagnosis of asymptomatic mastitis in the immediate postpartum period. The somatic cell count was higher in the positive lactocultura animals when compared to those who had a negative result on this test. There was no difference between the concentrations of IgG in whey after calving between animals with and without mastitis, however the levels of lactoferrin and albumin were increased secretions in the positive microbiological examination compared to samples without isolation. The kids fed colostrum and milk of goats with and without mastitis, showed no failure of transfer of immunity, as evidenced by concentrations of IgG found. The other protein fractions evaluated, did not differ between goats fed or not fed colostrum and mastitic milk over the periods evaluated / Mestre

Orientador: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Banca: Helder Louvandini / Banca: Paulo Francisco Domingues / Resumo: A proteção conferida pela resposta imunológica de cordeiros, às infecções seriadas com Haemonchus contortus (Hc) e Haemonchus placei (Hp) e desafios, por infecções homólogas e heterólogas, com ambas as espécies, foi avaliada. Quarenta e dois cordeiros, com peso corporal inicial médio de 21,3 kg, foram divididos em sete grupos experimentais. No primeiro grupo, 12 cordeiros receberam infecções seriadas (Is) 12 vezes (três vezes por semana) durante quatro semanas, com 500 larvas infectantes (L3) de H. placei e foram posteriormente desafiados (D), em dose única, com 4000 L3 de H. placei (Grupo IsHp+DHp, n=6) ou com 4000 L3 de H. contortus (Grupo IsHp+DHc, n=6). Os animais do segundo grupo (n=12) foram infectados com H. contortus da mesma maneira que o grupo 1 (500 L3, três vezes por semana) e foram desafiados com 4000 L3 de H. contortus (Grupo IsHc+DHc, n=6) ou com 4000 L3 de H. placei (Grupo IsHc+DHp, n=6). O terceiro grupo foi somente desafiado com 4000 L3 de H. placei (Grupo DHp, n=6), 4000 L3 de H. contortus (Grupo DHc, n=6), ou permaneceram livres de infecções durante todo o período experimental (Grupo Controle, n=6). Análises hematológicas e contagem de ovos por grama de fezes (OPG) foram realizadas semanalmente, o plasma sanguíneo foi armazenado para a realização de análises imunológicas (teste de ELISA). Após a eutanásia dos animais os parasitas foram recuperados, bem como tecido e muco abomasal. Animais que receberam infecções homólogas por H. placei (Grupo IsHp+DHp) apresentaram intensa resposta imune com elevados níveis de imunoglobulinas anti-parasita e número de células inflamatórias na mucosa do abomaso. Em adição, esse grupo (IsHp+DHp) apresentou a menor taxa de estabelecimento de parasitas (2,68% de 4000 L3). Estes resultados podem ser associados às infecções em série, que estimularam uma forte resposta imunológica contra a espécie H. placei, pois ... / Abstract: The protection conffered by serial infections with Haemonchus contortus (Hc) and Haemonchus placei (Hp) was evaluated in lambs. Forty two lambs, with initial average body weight of the 21.3 kg, were divided in three experimental groups. In the first group, 12 lambs was serially infected (Si) 12 times (three times a week) for four weeks, with 500 infective larvae (L3) of H. placei and then challenged (Ch), in a single dose, with 4000 L3 of H. placei (Group SiHp+ChHp, n=6) or with 4000 L3 of H. contortus (Group SiHp+ChHc, n=6). The animals of the second group (n=12) were infected with H. contortus, in the same way that group 1 (500 L3, three times a week) and then challenged with 4000 L3 of H. contortus (Group SiHc+ChHc, n=6) or with 4000 L3 of H. placei (Group SiHc+ChHp, n=6). A third group of lambs was single challenged with 4000 L3 of H. placei (Group ChHp, n=6), 4000 L3 of H. contortus (Group ChHc, n=6), or remained uninfected throughout the trial period (Group Control, n=6). Haematological and fecal eggs counts (FEC) occurred weekely, the blood plasma was stored to immunological exams (ELISA test). After the animals sacrifice, the worms were recoverd, as well as, abomasal tissue and mucus. Animals that received homologous infection with H. placei (Group SiHp+ChHp) presented the most intense immune response and number of inflammatory cells in the abomasal mucosa. In adition, this group (SiHp+ChHp) presented the lowest rate of parasite establishment (2.68% of the 4000 L3). These results can be associated to serial infection that stimulated to strong immune respose against H. placei, which presents lower adaptability to sheep. The opposite was observed in animals that only received the challenge infection, with H. placei (group ChHp), in which the rate of establishment was relatively high (25.3%). However, the animals that received heterologous infection, previously infected serially with H. placei and ... / Mestre

Orientador: Carlos Alberto de Magalhães Lopes / Banca: Silvio Luis de Oliveira / Banca: Vidal Haddad Junior / Banca: Mônica Valdyrce dos Anjos Lopes Ferreira / Banca: Itamar Alves Martins / Resumo: Nossos estudos objetivaram caracterizar as respostas imune inata e específica induzidas pelas peçonhas do muco e do ferrão do bagre Cathorops agassizii . A coleta dos espécimes foi realizada no complexo Baía-Estuário de Santos e São Vicente, localizado no litoral sul do Estado de São Paulo. As peçonhas (do Muco e do Ferrão) apresentaram perfil eletroforético similar entre si. Induzida a inflamação aguda em um modelo experimental murino, as peçonhas apresentaram igualmente a capacidade de induzir aumento da permeabilidade vascular e também edema de pata. A detecção de Leucotrieno B4 e Prostaglandina E2 no lavado da cavidade peritoneal dos camundongos injetados, com ambas as peçonhas, corroboram esta hipótese. Nossos resultados através da microscopia intravital mostraram que as peçonhas induzem um grande número de leucócitos rolantes nas vênulas pós-capilares com focos de extravasamento leucocitário, principalmente de neutrófilos seguido pelo influxo de macrófagos. Além disso, a peçonha do Ferrão induziu uma resolução mais rápida do influxo leucocitário ao contrário da peçonha do Muco que manteve o infiltrado macrofágico por até 7 dias. De maneira interessante, somente a citocina IL-6 foi detectada no lavado peritoneal induzida principalmente pela peçonha do Muco e as quimiocinas KC e MCP-1, por ambas as peçonhas, expressando naquele momento, a participação destes mediadores no recrutamento de neutrófilos e macrófagos para o sítio da lesão. As peçonhas foram eficazes ao induzir uma produção primária e secundária de anticorpos das classes IgM e IgG anti-venenos. Observamos ainda, uma especificidade dos anticorpos produzidos para os componentes das próprias peçonhas e também uma reatividade antigênica cruzada entre elas. / Abstract: Our studies aimed to characterize the innate and specific immune responses induced by poisons of the mucus and sting of the catfish Cathorops agassizii. The collection of specimens was accomplished in the complex Bay-Estuary System of Santos and São Vicente located in the south coast of the São Paulo State. Poisons of the Mucus and Sting presented similarities in their electrophorectical profiles. In basis of an Induced process of inflammation throughout an experimental murine model, both poisons equally showed the capacity to increase the vascular permeability and also paw edema. The Leucotrien B4'S and Prostaglandine E2 detection in washings of mice peritoneal cavity injected with both poisons corroborates this hypothesis. Our results through an intravital microscopy procedure also showed that the poisons induced a great number of rolling leukocytes in the post-capillary venules with focus on the leukocyte overflow mainly neutrophiles followed by macrophage influx. Besides, the sting poison Sting induced a faster resolution of the leukocyte influx, as well as, the Mucus poison unlike maintained a macrophage infiltrated for up to 7 days. In an interesting way, only the cytokine IL-6 was detected in peritoneal washings induced mainly by the Mucus poison although Quimiokinins KC and MCP-1 were for both poisons, expressing on that moment the participation of these mediators in the neutrophile and macrophage recruitment for the lesion site. The poisons were also effective in the induction of a primary and secondary production of IgM and IgG classes of antibodies. In this research we still observed a specificity of the antibodies produced for the components of the own poisons and also a crossed antigenic reactivity among them. / Doutor

Orientador: Marcio Antonio Brunetto / Coorientador: Aulus Cavalieri Carciofi / Banca: Helio Jose Montassier / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Resumo: Acredita-se que as frações ativas de mananoproteinas (FAM), obtidas a partir da extração e fracionamento da parede celular de leveduras (Saccharomyces cerevisiae) possam modular de forma benéfica o sistema imune. Este estudo avaliou os efeitos imunológicos das FAM em cães adultos e idosos. Foram empregadas três dietas extrusadas, isonutritivas com inclusão de 0% (T0); 0,04% (T400) e 0,08% de FAM (T800). No total, foram utilizados 36 cães da raça beagle. Os tratamentos resultaram da combinação de idade (adultos e idosos) e dieta (T0, T400 e T800), gerando seis tratamentos experimentais. Para cada dieta foram utilizados seis cães adultos (4,0±2,0 anos) e seis cães idosos (11,0±1,0 anos). O experimento seguiu delineamento em blocos, com três blocos de 12 cães (seis adultos e seis idosos, dois cães por idade e dieta). Nos dias zero, 14 e 28, amostras de sangue foram coletadas para fenotipagem dos leucócitos sanguíneos e ensaio de fagocitose. Nos dias zero e 28 foram realizados: hemogramas, análises bioquímicas, teste de linfoproliferação, produção de intermediários reativos do oxigênio (H2O2) e nitrogênio (NO), avaliação da concentração de imunoglobulina A fecal e teste de hipersensibilidade cutânea tardia (DTH). Os dados foram submetidos à análise de variância com medidas repetidas no tempo, exceto o DTH, no qual se analisou separadamente cada tempo do período experimental. As médias foram comparadas pelo teste de Tukey (p≤0,05). A FAM mostrou-se segura nos teores e períodos estudados. Aos 28 dias, cães adultos alimentados com a dieta T400 em relação à T0 apresentaram contagens mais elevadas de linfócitos totais (p<0,05). Ao analisar a fenotipagem dos leucócitos sanguíneos demonstrou-se que, mais especificamente, o consumo de 0,04% de FAM pelos cães adultos elevou a contagem de linfócitos T totais (p=0,05). Independente da idade, neutrófilos de cães alimentados com T400, em relação à dieta ... / Abstract: It is believed that the active fractions mananoproteínas (AFM), obtained from the extraction and fractionation of cell wall of yeast (Saccharomyces cerevisiae), may beneficially modulate the immune system. This study evaluated the immunological effects of FAM in adults or elderly dogs. Three extruded diets with isonutritives including 0% (T0); 0.04% (T400) and 0.08% of AFM (T800) were used. In total, 36 beagle dogs were used. The treatments resulted from the combination of age (adults and elderly) and diet (T0, T400 and T800), generating six experimental treatments. For each diet six adult dogs (4.0 ± 2.0 years) and six elderly dogs (11.0 ± 1.0 years) were used. The experiment was randomized complete block design with three blocks of 12 dogs (six older and six adults, two dogs by age and diet). At zero, 14 and 28 days, blood samples were collected for phenotyping of blood leukocytes and evaluation of phagocytic activity. In zero and 28 days, hemogram, biochemical analysis, lymphocyte proliferation, production of hydrogen peroxide (H2O2), nitric oxide (NO), evaluation of the concentration of fecal immunoglobulin A and delayed test hypersensitivity (DTH) were performed. Data were subjected to analysis of variance with repeated measures, except DTH, in which we analyzed separately each time the trial period. Means were compared by Tukey test (p≤0.05). The AFM was safe in the levels and periods. At 28 days, adult dogs fed the diet T400 relative to T0 had higher counts of total lymphocytes (p<0.05). By analyzing the phenotype of the blood leucocytes was shown that, more specifically, adult dogs consuming 0.04% of the AFM increased the amount of total T-lymphocytes (p=0.05). Regardless of age, neutrophils from dogs fed T400, relative to T0 diet, tended to produce more H2O2 (p=0.09). Higher percentage of phagocytic activity of neutrophils were observed in adult dogs fed on T400 compared to the T800 diet (p<0.05). The skin response ... / Mestre

Orientador: Fabiana Pilarski / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Róberson Sakabe / Resumo: Mananoligossacarídeo na alimentação pode melhorar a imunidade, crescimento e saúde de peixes cultivados. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de níveis de MOS (0,0 g Kg-1; 2,0 g kg-1; 4,0 g kg-1; 8,0 g kg-1; 10,0 g kg-1; 15,0 g kg-1) na dieta de tilápia-do-Nilo sobre os parâmetros hematológicos e imunológicos, desempenho produtivo, digestibilidade de proteína e resistência à bactéria L. garvieae, após 45 dias. 576 tilápias (127,3±4,79 g e 18,7±0,27 cm), distribuídas em 24 caixas (310 L) com aeração e renovação constante de água (6 tratamentos e 4 repetições) foram alimentadas com as dietas-teste extrusadas. Aos 0, 7, 15, 30 e 45 dias após a alimentação, foi coletado sangue, destinado à realização de análises hematológicas e imunológicas. O consumo das dietas foi registrado semanalmente e aos 45 dias, os peixes foram pesados e medidos para obtenção de parâmetros de desempenho. Após 45 dias, as mesmas dietas, acrescidas de marcador e peletizadas foram oferecidas aos peixes e as fezes coletadas para determinar o coeficiente de digestibilidade de proteína. Nas mesmas condições, com 168 tilápias (125,3±5,09 g e 17,6±0,33 cm) e após 7, 15, 30 e 45 dias de alimentação realizaram-se desafios por co-habitação com L. garvieae, avaliando-se a taxa de mortalidade, durante 15 dias. Os grupos alimentados com o prebiótico não apresentaram melhora significativa em relação ao grupo controle nas variáveis imunológicas, hematológicas e digestibilidade de proteína. O mesmo ocorreu com o desafio bacteriano. Entretanto, a inclusão de 2,0, 4,0 e 8,0 g Kg-1 de MOS na dieta melhorou os valores de ganho de pesos dos animais. Como conclusão, a inclusão de MOS não afetou a hematologia, imunidade, digestibilidade de proteína e resistência bacteriana. Mas, a inclusão de 2,0, 4,0 e 8,0 g Kg-1 do prebiótico na dieta melhorou o ganho de peso da tilápia-do-Nilo / Abstract: Manann oligosaccharide in feed can improve immunity, growth and health of farmed fish. Thus, the objective of this study was evaluate the influence of MOS levels (0.0 g Kg-1; 2.0 g kg-1; 4.0 g kg-1; 8.0 g kg-1; 10.0 g kg-1; 15.0 g kg-1) in the diet of Nile Tilapia in hematological and immunological parameters, production performance, digestibility of protein and resisting bacteria L. garvieae, after 45 days. 576 tilapias (127.3 ± 4.79 g and 18.7 ± 0.27 cm), distributed in 24 fiberglass tank (310 L) with aeration and constant renewal of water (6 treatments and 4 replications) it was fed with diets-extruded test. In time 0, 7, 15, 30 and 45 days after feeding, it was collected blood for hematological and immunological analyses. The consumption of diets was registered weekly and in the period 45 days the fish was weighed and measured to obtain performance parameters. After 45 days, the same diets, added marker and pelletized, were offered to fish and the faeces was collected to determine protein digestibility coefficient. Under the same conditions, with 168 Nile tilapia (125.3 ± 5.09 g and 0.33 ± 17.6 cm) and after 7, 15, 30 and 45 days it was made challenges by cohabitation with L. garvieae, evaluating the mortality rate during 15 days. The groups fed with prebiotic didn't show significant improvement as compared to the control group on variables, immunological, hematological and protein digestibility. The same occurred with the bacterial challenge. However, the inclusion of 2.0, 4.0 and 8.0 g Kg-1 of MOS in the diet improved the gain of weight of animals. As a conclusion, the inclusion of MOS not affected the hematology, immunity, protein digestibility and bacterial resistance. But, the inclusion of 2.0, 4.0 and 8.0 g Kg-1 of the prebiotic on diet improved weight gain of Nile tilapia / Mestre

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Carlos Alberto de Oliveira / Banca: Alexandre Batista Duarte / Banca: José Carlos Rebuglio Vellosa / Banca: José Maurício Sforcin / Resumo: esporotricose é uma micose subcutânea causada pelo fungo dimórfico Sporothrix schenckii, apresentando em geral, lesões cutâneas com proliferação via vasos linfáticos especialmente em pacientes imunocomprometidos, o que pode levar a doença sistêmica. Os macrófagos têm um papel importante na resposta imune inata contra diversos patógenos e dependendo do estimulo recebido podem ser polarizados em M1 e M2, os quais apresentam propriedades distintas, sendo que os primeiros possuem atividades proinflamatórias e o segundo anti-inflamatória. Desta forma, o objetivo do trabalho foi verificar a participação das populações de macrófagos M1 e M2 através da avaliação das citocinas IL-12, IL-23, IL-10 e TGF-β, da produção de NO e da atividade da enzima arginase, juntamente com a avaliação fenotípica dessas populações durante todo período experimental. Os resultados revelaram que as células do exsudato peritoneal dos camundongos dos grupos infectados quando desafiadas ex vivo com o exoantígeno e o extrato lipídico foram capazes de levar a produção de IL-12, IL-10 e TGF- β durante todo o período experimental. A produção de IL-23 ocorreu na 2ª e 4ª semana mediante o desafio com o exoantígeno e em todo período experimental com o EL. A fenotipagem revelou a presença de macrófagos tanto M1 quanto M2 durante todo o período experimental, com aumento da expressão do receptor CD206 (M2) no período tardio da infecção, o que explica a produção dos mediadores tanto inflamatórios (IL-12 e IL-23) quanto anti-inflamatórios (IL-10 e TGF- β) encontrados durante toda a cinética. Além das citocinas também foi observada a produção de óxido nítrico e a atividade da enzima arginase. Desta forma os resultados encontrados evidenciam a participação dos macrófagos M1 e M2 durante a esporotricose, uma vez que os M1... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sporotrichosis is a subcutaneous mycosis caused by the dimorphic fungus, Sporothrix schenckii, generally presenting skin lesions with spread via lymphatic vessels, especially in immunocompromised patients, what can lead to systemic disease. Macrophages play an important role in innate immune response against various pathogens and, depending on the eliciting signals, macrophage can be polarized in M1 and M2, which presents distinct proprieties, so macrophage activation can be either proinflammatory or antiinflammatory. Thereby, the aim of this study was to evaluate the role of macrophage populations M1 and M2, through the evaluation of IL-12, IL-23, IL-10 and TGF-β, NO production and activity of the enzyme arginase, along with phenotypic evaluation of these populations throughout the experimental period. The results showed that peritoneal exudate cells of infected mice groups, when challenged ex vivo with exoantigen and lipid extract, were able to lead to production of IL-12, IL- 10 and TGF-β throughout the experimental period. The production of IL-23 occurred in the 2nd and 4th week through the challenge with exoantigen and throughout the experimental period with the lipid extract. Phenotyping revealed the presence of both macrophages, M1 and M2, throughout the experimental period, with increased expression of the receptor CD206 (M2) in the late infection period, which could explain the production of proinflammatory (IL-12 and IL-23) and anti-inflammatory (IL-10 and TGF-β) mediators found throughout the kinetic, and the nitric oxide production and activity of the arginase enzyme. M1 macrophages are important during sporotrichosis, they have microbicidal activity and are responsible for releasing inflammatory mediators in an attempt to eliminate the fungus Sporothrix schenckii, while the M2 found during... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria José Tavares Ranzani de Paiva / Banca: Carlos Massatoshi Ishikawa / Banca: Flávio Ruas de Moraes / Resumo: Este estudo teve por objetivo avaliar o desempenho zootécnico, a composição corporal, o perfil hematológico, a resposta imune inata, a taxa de sobrevivência frente à infecção experimental com Aeromonas hydrophila e confirmar a presença do probiótico no intestino de tilápia-do-nilo, Oreochromis niloticus, alimentados com adição na ração dos prebióticos: Actigen® mananoligossacarídeo - MOS (P1) e a alga marinha Kappaphycus alvarezii (P2), além do probiótico PAS-TR® composto por Bacillus cereus e Bacillus subtilis (P). Os aditivos foram testados separadamente e em associação (S1 = PAS-TR® + MOS e S2 = PAS-TR® + K. alvarezii). Sendo um grupo alimentado com dieta controle (C). O experimento foi dividido em duas etapas. Na primeira 240 juvenis, com peso médio inicial de 8,86±3,22g, distribuídos aleatoriamente em 6 tratamentos e 4 repetições foram alimentados durante 63 dias com as rações específicas de cada tratamento, para avaliação de desempenho, e coleta de material para as análises propostas. Na segunda etapa, 180 animais foram infectados experimentalmente com Aeromonas hydrophila, após 21 de alimentação teste. O tempo de observação da mortalidade foi de 15 dias pós-inoculação. Não foram encontradas diferenças estatísticas (p>0,05) no desempenho zootécnico, na composição corporal, nas variáveis hematológicas e imunológicas. Foi possível recuperar as bactérias probióticas no trato intestinal dos exemplares alimentados com as dietas adicionadas de probiótico. Os peixes tratados apresentaram melhores índices de sobrevivência (p<0,05) em comparação ao grupo controle quando desafiados com A. hydrophila / Abstract: This study aimed to evaluate the growth performance, corporal composition, haematological parameters, innate immune response, resistance against the experimental infection with Aeromonas hydrophila and confirm the presence of probiotic bacteria in the intestines of Nile tilapia, Oreochromis niloticus, fed with addition of prebiotics Actigen® MOS - MOS (P1), Kappaphycus alvarezii seaweed (P2), and PAS-TR® probiotic composed of Bacillus cereus and Bacillus subtilis (P). The additives were tested separately and in combination (S1 = PAS-TR® + MOS and S2 = PAS-TR® + K. alvarezii). One group was fed with control diet (C). The experiment was divided into two stages. In the first stage, 240 juveniles, with initial average weight of 8.86 ± 3.22g, distributed in a completely randomized design of 6 treatments and 4 replications were fed with the specific diets for 63 days. In the second stage, the feeding period was 21 days and the 180 animals were experimentally infected with Aeromonas hydrophila on the 22nd day. The observation of mortality rates period was 15 days post-infection. There were no statistical differences (p> 0.05) on performance, corporal composition, haematological and immunological parameters. It was possible to recover the probiotic bacteria in the intestinal tract of exemplary fed with diets containing added probiotics. The fish treated with immunostimulants presented better survival rates (p <0.05) compared to the control group when challenged with A. hydrophila, confirming the feasibility of including these in the diet / Mestre

Orientador: Jairo Aparecido Ayres / Banca: Ilda de Godoy / Banca: Helena Keico Sato / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as salas de vacinas na rede básica do município de Marília quanto a suas estruturas e processos. Trata-se de um estudo exploratório, observacional, transversal, descritivo com abordagem quantitativa. Foram avaliadas 41 salas de vacinas, sendo 12 unidades básicas de saúde e 29 unidades de saúde da família. Para coleta de dados utilizou-se o instrumento de supervisão em sala de vacinação padronizado pelo Ministério da Saúde, e, foram analisados pelo Programa de Avaliação do Instrumento de Supervisão em Sala de Vacinação disponibilizado pelo Programa Nacional de Imunização (PNI). Vários pontos críticos foram apontados nesta avaliação, estando estes relacionados principalmente com os aspectos gerais da sala de vacina que recebeu conceito regular. Foi atribuído conceito bom ao sistema de rede de frio, vigilância epidemiológica e educação em saúde. O conceito ideal foi atribuído aos procedimentos técnicos, sistema de informação, eventos adversos e imunobiológicos especiais. Em relação aos dados é importante esclarecer que mesmo conceituados dessa forma, pontos críticos foram identificados e merecem atenção especial. Porém, estes não foram suficientemente relevantes para alterar o determinado conceito. Pelos resultados encontrados enfatiza-se que a supervisão proposta pelo PNI visa identificar itens necessários a serem contemplados de acordo com normas propostas. Concluiu-se, pelos dados analisados que há necessidade de se implantar de forma sistemática a atividade de supervisão, monitoramento e avaliação nas salas de vacinas. Além disso, organizar estratégias de educação permanente que provavelmente proporcionarão o desenvolvimento técnico e científico dos profissionais, facilitando assim, a implementação de atividades de promoção à saúde junto à comunidade, com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to assess the vaccination rooms in the basic healthcare units from Marília city concerning their facilities and procedures. It's an investigative, observational, transversal and descriptive study with quantitative approach. 41 vaccination rooms were assessed, from which 12 were basic healthcare units and 29 family healthcare units. The standardized instrument of inspection of the Health Ministry was used to collect the data and they were analysed by the Assessmennt Program of the Inspection Instrumeent in Vaccination Room dispensed by the Immunization National Program (PNI). Several weak points were pointed out at this assessment, mostly issues related to the general aspects of the vaccination rooms, which were assessed as regular. The cold chain, the epidemiologic vigilance and the education on health were assessed as good. Eventually, the technical procedures, the information system, adverse events and special imonobiologics were assessed as ideal. It's important to clear out that these data, even assessed this way, have weak points and deserve special attention. However, the weak points were not relevant enough to alter the assessment granted. The results found emphasize that the inspection proposed by the PNI aims to identify items which require to be contemplated according to the proposed norms. From the analysed data, it was concluded that it's necessary to systematically carry out inspection, monitoring and assessment activities in the vaccination rooms. In addition, there's a need to organize strategies of permanent education which will probably provide the technical and scientifical development of the professionals, thus, making it easier to carry out activities to promote health inside the community with the goal of causing individual changes, aiming the maintenance of the control of imunopredictable diseases in all the society. / Mestre