Orientador: Lea Rodrigues Simioni, Yoko Oshima Franco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T10:25:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RochaJunior_DimasdosSantos_M.pdf: 1074208 bytes, checksum: 78f54f332c4a0788a9a1522ffdfffefa (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O dimetilaminoetanol (DMAE) é comercializado em vários países como suplemento da dieta, amplificador da cognição e também como matéria-prima de produtos cosméticos. No Brasil, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária aprovou o uso cosmético em 2002, visando a uma ação antienvelhecimento, após a observação do efeito colateral decorrente da administração oral do medicamento Deanol-®: contração involuntária da musculatura do rosto e do pescoço. Pesquisou-se, neste trabalho, a ação do DMAE em preparação isolada do nervo frênico-diafragma de camundongos, utilizando-se técnicas miográfica e eletrofisiológica. DMAE, sob o parâmetro miográfico, mostrou dois efeitos neuromusculares principais, dependentes da concentração: o facilitador da neurotransmissão (1 mg/mL, n = 6 e 4 mg/mL, n = 11) e o bloqueador neuromuscular completo aos 40 minutos (20 mg/mL, n = 4). Em preparações previamente curarizadas (d-Tubocurarina, 10 µg/mL) e sob estímulo direto, o DMAE (8 mg/mL, n = 3) aumentou a amplitude da contração muscular (30%), mostrando uma ação direta sobre a fibra muscular; enquanto sob estímulo indireto, demonstrou não possuir ação anticolinesterásica. O DMAE, sob o parâmetro eletrofisiológico, agiu pré-sinapticamente sobre a terminação nervosa, constatado pelo aumento gradativo dos valores de conteúdo quântico (1 mg/mL, n = 4). As implicações desses resultados são discutidas neste trabalho. / Abstract: The dimethylaminoethanol (DMAE) is commercialized in several countries as diet supplement, amplifier of the cognition and also as substance in the constitution of cosmetic products. In Brazil, the cosmetic use was approved by the Agência Nacional de Vigilância Sanitária, in 2002, aiming at an antiaging action, after the collateral effect from oral Deanol® administration: the involuntary contraction of the face and the neck muscles. The objective of this work was to study the DMAE action in isolated mouse phrenic nerve-diaphragm preparation, using myographical and electrophysiological techniques. DMAE, under myographical parameter, showed two main neuromuscular and concentration-dependents effects: the facilitatory (1 mg/mL, n = 6 and 4 mg/mL, n = 11) and the neuromuscular blocker at 40 min (20 mg/mL, n = 4). In pre-curarized preparations (d-Tubocurarine, 10 µg/mL) and under direct stimuli, DMAE (8 mg/mL, n = 3) increased the amplitude of muscular contraction (30%), showing a direct action on the muscular fiber; whereas under indirect stimuli, showed to have no anticholinesterasic action. DMAE, under electrophysiological parameter did act presynaptically on the nervous terminal by a gradual increase of quantum content values (1 mg/mL, n = 4). The implications of these results are argued in this work. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Humberto do Santo Neto, Maria Julia Marques / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T01:56:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_AirtonJose_M.pdf: 5860113 bytes, checksum: e97b75872efa8bc6a4d1f44339c4a19f (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A Distrofia muscular de Duchenne (DMD) é a forma mais comum e a mais devastadora das distrofias musculares. É causada pela mutação do gene responsável pela expressão da distrofina, uma proteína estrutural do sarcolema, a membrana celular das fibras musculares esqueléticas. A ausência dessa proteína leva a uma instabilidade sarcolemal que termina em necrose da fibra muscular. As fibras necróticas perdem a capacidade regenerativa fazendo com que o tecido muscular seja substituído por tecido fibroso. O comprometimento muscular inicia-se pelos membros inferiores e progride até atingir os músculos respiratórios, o que ocorre geralmente ao redor dos 20 anos de idade, quando os pacientes invariavelmente vão a óbito. Atualmente acredita-se que a cura efetiva da doença poderá ser feita com a terapia gênica que pode ser feita de duas formas. Uma delas consiste em fazer com que as fibras musculares já existentes passem a expressar distrofina e a outra em gerar novas fibras musculares que expressem distrofina. O sucesso dessas terapias depende do restabelecimento funcional das novas fibras musculares e das pré-existentes, cuja inervação deve ter sido perdida durante o momento em que sofreu o primeiro ciclo de degeneração. Por sua vez, a capacidade de reinervação depende exclusivamente da capacidade dos axônios gerarem brotamentos axonais. A simples presença de fibras musculares em degeneração e em regeneração deve atuar como fator estimulador de brotamentos axonais. Entretanto, dados da literatura mostram que em pacientes portadores de DMD, bem como em camundongos da linhagem mdx, o modelo experimental para o estudo da DMD, não ocorre brotamentos axonais. O objetivo deste trabalho foi examinar a capacidade de axônios de camundongos emitirem brotamentos axonais. Foram empregadas duas linhagens de camundongos, mdx e C57BL/10, cada uma delas foi examinada de duas formas: sem nenhum tratamento e com esmagamento do nervo que teve por objetivo induzir a emissão de brotamentos nervosos. Para tal, os animais foram anestesiados com injeção intraperitoneal de virbaxyl/ftancotar e o nervo para o músculo estemomastoideo esquerdo esmagado com pinça de relojoeiro. Oito dias após o esmagamento os animais foram anestesiados, perfundidos com paraformoldeido por via intracardíaca, e os músculos estemomastoídeos direito e esquerdo retirados para marcação dos receptores de acetilcolina e dos axônios pré-terminais e terminais. Isto foi realizado com o uso de a-bungarotoxina conjugada à rodamina e anticorpo monoclonal para filamentos nervosos, respectivamente. Os músculos foram examinados através da microscopia confocal de fluorescência. Nossas observações mostraram que em músculos de camundongos mdx, que não sofreram esmagamento do nervo, portanto que representa o que ocorre durante o curso normal da distrofia muscular, não houve aumento dos brotamentos axonais do tipo nodal, mas houve aumento significativo dos brotamentos extra e intraterminais, comparados aos camundongos C57BL/10. Por sua vez, quando estimulados pelo esmagamento do nervo, os brotamentos do tipo nodal e extraterminal, mas não aqueles intraterminais, estiveram presentes na mesma intensidade dos camundongos não distróficos. Essas observações permitem concluir que, embora durante o curso normal da doença não ocorra brotamento nodal, os axônios dos camundongos mdx são capazes de emitirem brotamentos extra e intraterminais. Considerando-se que a inervação de novas fibras musculares depende mais de brotamentos nodais, os quais podem propagar-se por maiores distâncias dentro de um mesmo músculo, é possível que as novas terapias de transplantes de mioblastos e de células tronco indiferenciadas apresentem menor possibilidade de sucesso que aquelas que consistem na transformação das fibras musculares pré-existentes, que não possuem distrofina em fibras distrofina positivas, já que sua inervação estaria garantida pela presença de brotamentos extraterminais e especialmente intraterminais / Abstract: Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is characterized by deficiency of dystrophin, a component of the muscle fiber membrane. The absence of dystrophin leads to muscle fiber degeneration, resulting in progressive muscle weakness. Cell mediated therapy aimed to restore dystrophin expression by fusing transplanted cells into original dystrophic fibers or by forming new dystrophin positive fibers. Thus, the success of cell therapy depends, among other factors, on muscle fiber reinnervation, which in turn depends on the ability of host axons to sprout. It is accepted that sprouts are induced in the presence of degenerating and regenerating muscle fibers. Since muscle fiber degeneration-regeneration is observed in DMD, as well as in the mdx mice, the animal model of DMD, the frequency of sprouts would be expected to be higher in dystrophic than in normal muscles. However, no axonal sprouts have been observed in muscles of DMD and mdx mice. In the present, we investigated whether intramuscular nerve bundles and motor terminals of mdx mice keep their ability to sprout after a nerve crush lesion. The sternomastoid muscles of adult (5-6 months) mdx mice (n=5) and C57Bl/10 controls (n=5) had their acetylcholine receptors and nerve terminals labelled with rhodamine-alpha-bungarotoxin and anti-neurofilament-IGgfluorescein, respectively, for confocal microscopy observation. Additional mdx (n=5) and C57Bl/10 (n=5) had the nerve to the left STN muscle crushed and 8 days later AChRs and nerve terminals were labelled and viewed the same way. Nerve terminal distribution in the mdx was seen as thin filaments with bulbs at their tips, which were in apposition to fainter central areas in the islands of receptors, being suggested that they represent intra-terminal sprouts, seen in about 90% of the endplates viewed of normal and crushed mdx mice. In crushed-mdx mice, extra-terminal sprouts were seen in 73%, while in crushed controls sprouts were present in about 41 % of the endplates. In conclusion, these findings demonstrate that mdx nerve terminals are able to sprout when a second stimulus, such as nerve lesion (in addition to muscle degeneration-regeneration) is present and this response can be of major relevance to the success of cell mediated-therapy to treat DMD / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Lea Rodrigues Simioni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:22:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_CarolineRibeirodeBorja_D.pdf: 22434258 bytes, checksum: 1032d29d7d3da47c988623e5cd6780bc (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Os efeitos neuromusculares do veneno de Bothrops neuwiedi pauloensis foram estudados através de preparações biventer cervicis de pintainho e nervo frênico-diafragma de camundongo. Em preparação de ave, o veneno produziu bloqueio irreversível e dependente da concentração das contrações musculares em resposta à estimulação elétrica indireta. Com 1-20 µgde veneno/ml, as respostas ao KCI (13,4 mM) foram parcialmente ou completamente inibidas, enquanto que as respostas à ACh (110 M)não foram afetadas. Com 50 µg/ml,as respostas à ACh, ao KCI e à estimulação direta foram inibidas. O veneno induziu também contraturas dependentes da concentração a partir de 10 µg/ml. À 20-24°C, o veneno (50 µg/ml)produziu somente um bloqueio parcial (30,7 ± 8,0%, média ± SEM; p < 0,05; n = 3) após 120 min sem afetar as respostas à ACh e ao KCI. Em preparação de camundongo, 50 µg de veneno/ml causaram bloqueio total das respostas à estimulação indireta e direta, e, quando o Ca2+(1,8 mM) da solução nutritiva foi substituído pelo sr2+ (4.0 mM), somente um bloqueio parcial da resposta à estimulação indireta foi obtido (40.3 ±7.8%; P < 0,05; n = 3) após 120 min de incubação. Estes resultados indicam que o veneno de B. n. pauloensis é neurotóxico, atua preferencialmente em sítios pré-sinápticos, e que sua atividade farmacológica está relacionada a sua atividade enzimática. O veneno foi fracionado por HPLC de exclusão molecular e sua atividade neuromuscular foi recuperada no primeiro, segundo e terceiro picos (pico 1, pico 2 e pico 3, respectivamente) do perfil cromatográfico. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Snakes of the genus Bothrops are the most important cause of snakebites in Brazil. The main complications in lethal cases are acute renal failure, shock, acute respiratory failure and sepsis. The neuromuscular effects of Bothrops neuwiedi pauloensis (jararaca-pintada) venom were studied in chick biventer cervicis and mouse phrenic nerve-diaphragm preparations. In chick preparations, venom concentrations of 5-50 µg/ml produced an initial inhibition and a secondary augmentation of the twitches evoked indirectly followed by a progressive concentration-dependent and irreversible neuromuscular blockade. At venom concentrations of 1-20 µg/ml, the responses to KCI (13.4 mM) were partially or completely inhibited whereas those to acetylcholine (110 µg/Mw) ere unaffected. At venom concentrations higher than 50 µg/ml, there was pronounced muscle contracture with inhibition of the responses to acetylcholine, KCI and direct stimulation. At 20-24°C, the venom (50 µg/ml)produced only partial neuromuscular blockade (30.7± 8.0% blockade, mean:t SEM; p < 0.05; n = 3) atter 120 min and the initial inhibition and the secondary augmentation of the twitch responses caused by the venom were prolonged and pronounced and the response to KCI was unaltered. In mouse preparation, At 20 µg/ml,the venom irreversibly inhibited (60 ±10% inhibition, mean ± SEM; p< 0.05; n = 6) indirectly evoked twitches. At 50 µg/ml, the venom blocked the indirectly (n = 5) and directly (n = 6) evoked twitches in mouse hemidiaphragms. In the absence of Ca2+, at 50 µg/ml,only partiaI blockade (40.3v ± 7.8% inhibition; p < 0.05; n = 3) was observed atter a 120 min incubation.These results indicated that B. n. pauloensís venom was neurotoxic, acting primarily at presynaptic sites, and that enzymatic activity could be involved in that pharmacological action. The venom was fractionated by HPLC molecular exclusion (Protein Pack 300SW column). The neuromuscular activity of the venom was recovered in the first, second and third peaks (peak 1, peak 2 and peak 3, respectively) of the elution profile.Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientadores: Lea Rodrigues Simioni, Stephen Hyslo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:34:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DalBelo_CharistonAndre_D.pdf: 2559941 bytes, checksum: cef748cf80569cf363755443847527ff (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O veneno da serpente elapídica Micrurus dumerilii carinicauda apresenta uma ação neurotóxica caracterizada por bloqueio da resposta contrátil em preparação de ave e mamíferos in vitro (SERAFIM et al., 2002). Através de cromatografia em HPLC de coluna fase reversa o veneno foi fracionado e dentre os 22 picos obtidos foram caracterizados bioquímica e farmacologicamente somente aqueles que exibiram atividade neurotóxica do tipo bloqueadora neuromuscular. Assim, os picos que exibiram atividade neurotóxica foram a PLA2 MiDCAI correspondente ao pico 16 e duas isoformas (as subfrações F6 e F7) correspondentes aos picos 6 e 7 e que determinaram bloqueio neuromuscular em preparações de camundongo. A PLA2 MiDCAI, que possui massa molecular de 15.552 Da e um pI de 7.8 compartilha uma alta homologia com outras PLA2 neurotóxicas MICNI A (77,68%) e B (73,12%) do veneno da serpente (Naja nigricollis). Em preparação músculo biventer cevicis de pintainho MiDCAI (2.4 µM) induziu 50% bloqueio em 30 ± 5 min inibindo completamente a resposta contrátil a estímulos indiretos em 120 min de observação. Além disso, as contraturas determinadas pelo carbacol (8 mM) e KCl (20 mM) em preparação biventer cervicis de pintainho permaneceram inalteradas na vigência do bloqueio neuromuscular completo, sugerindo uma ação do tipo pré-sináptica. Na preparação nervo frênico-diafragma de camundongo MiDCAI (0.6, 1.2, 2.4 µM) induziu alteração trifásica na resposta contrátil. Além disso, o registro intracelular dos potenciais de placa terminal em miniatura (PPTM) e potenciais de placa terminal (PPT) mostrou também que a MiDCAI causou uma alteração trifásica na freqüência dos PPTM além de aumentar o conteúdo quântico do controle para 386 ± 12% aos 10 min de incubação (n=14, p<0.05). O registro extracelular do potencial de ação composto do nervo ciático de camundongo mostrou que esta neurotoxina induz um aumento na amplitude desses potenciais (30 ± 9%, 0.6 µM, p<0.05) semelhante ao induzido pela 3,4-diaminopiridina (3,4-DAP) 10 µM. Também ficou claro que o efeito facilitador induzido por esta PLA2 esteja relacionado ao bloqueio de canais de potássio como demonstrado pelo bloqueio de 31 ± 1% (2.4 µM, p<0.05) das correntes de potássio evocadas em neurônios do gânglio da raiz dorsal usando-se a técnica de patch-clamp. Já as subfrações ativas F6 e F7 possuem um peso molecular de aproximadamente 14 kDa como ficou demonstrado pela eletroforese em gel de poliacrilamida a 12,5 %. Em preparações neuromusculares de camundongo estas duas isoformas induziram bloqueio neuromuscular irreversível a estímulos elétricos indiretos. Assim, um bloqueio de 50% da resposta contrátil foi obtido em aproximadamente 18 min quando estas toxinas foram ensaiadas a 5 µg/ml promovendo bloqueio completo em aproximadamente 55 min. Sucessivas lavagens da preparação e a adição de neostigmina (6 µM) e 3,4-DAP (10 µM) foram ineficazes em reverter o bloqueio neuromuscular instalado. Também não houve alteração da resposta aos estímulos diretos nem redução da polaridade da membrana da fibra muscular quando estas toxinas foram ensaiadas na concentração de 5 mg/ml. Em conclusão, a PLA2 MiDCAI é uma nova neurotoxina pré-sináptica que induz alteração trifásica em preparações neuromusculares de camundongo promovendo uma facilitação inicial e fugaz possivelmente causada pelo bloqueio de canais de potássio no terminal nervoso motor. Já, as características bioquímicas assim como os efeitos neuromusculares desencadeados pelas subfrações F6 e F7 sugerem se tratar de duas isoformas curaremiméticas ou do tipo a-neurotoxinas, como demonstrado para outros venenos elapídicos / Abstract: We have isolated a new PLA2 (MiDCAI) and two curaremimetic isoforms (F6 and F7) from the venom of Micrurus dumerilii carinicauda. With a molecular mass of 15.552 Da, MiDCA1 shared high sequence homology with MICNI A and B from Naja nigricollis venom showing a sequential and structural homology of 77.68 and 73.12%, respectively. Pharmacological tests showed a concentration dependent effect on nerve evoked twitches in both mammal and avian preparations. On mouse phrenic-nerve diaphragm preparation MiDCAI (2.4 mM; n=6) caused triphasic changes in twitch tension. On chick preparations complete blockade of the twitches occurred after 120 min (2.4 mM; n=6, p<0.05), while contractures elicited by exogenous applied carbachol (8 mM) and KCl (20 mM) remained unaltered. Intracellular recordings of endplate potentials (EPPs) and miniature endplate potentials (MEPPs) from mouse diaphragm preparations revealed that MiDCAI increased quantal content to 386 ± 12% of control after 10 min, (n=14; p<0.05) and caused a triphasic change in the frequency of MEPPs. Extracellular recordings of mouse sciatic-nerve compound action potentials revealed that MiDCAI increased the amplitude of compound action potentials (30 ± 9%, 0.6 µM, p<0.05). Potassium currents elicited in freshly dissociated DRG neurones were significantly blocked by 31 ± 1% (p<0.05) of control by the addition of 2.4 µM into the recording chamber. In addition, isoforms F6 and F7 exhibit a molecular mass of aproximatelly14 kDa demonstrated by polyacrilamide gel electrophoresis. These isoforms (5 µg/ml) induced 50% blockade of indirect stimulation in phrenic nerve-diaphragm preparation, in approximately 18 min and complete blockade in 55 min. Nor successive washes nor neostigmine (6 mM) or 3,4-DAP (10 µM) were able to reverse the blockade. In addition, there is no depolarisation of muscle fibber when these isoforms were assayed at 5 µg/ml. In conclusion, MiDCAI is a new presynaptic PLA2 that produce triphasic alterations in mammal neuromuscular preparations and the falicitatory actions are possibly caused by blockade of an as yet unknown class of nerve-terminal potassium channels. The two isoforms F6 and F7 need further evaluation but the biochemical and pharmacological results obtained suggest certain similarity with other curariform neurotoxins or a-neurotoxins / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientadores: Lea Rodrigues Simioni, Stephen Hyslo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T04:47:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_CarolineRibeirodeBorja_M.pdf: 5449096 bytes, checksum: 7eb8220b0b381160bd94216b8f82b5fd (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi comparar a neurotoxicidade de dezesseis lotes de venenos de B. neuwiedi, sendo sete procedentes de São Paulo, oito do Rio Grande do Sul e um de Minas Gerais, visando verificar a existência de um lote de veneno mais ativo, do qual se isolaria parcialmente o componente neurotóxico. Para avaliar a atividade neurotóxica dos vários venenos estudados, foi realizado um 'screening', utiljzando-se a preparação biventer cervicis de pintainho sob estimulação elétrica indireta. Avaliou-se também o efeito do veneno mais ativo sobre o músculo de ave sob estimulação elétrica direta, bem como sobre a preparação nervo frênico-diafragma de camundongo submetida a estimulação direta e indireta. Nesses casos a preparação foi previamente curarizada. Os diversos lotes de veneno foram comparados também por meio de eletroforese (PAGE-básica). O lote que apresentou efeito neuromuscular mais acentuado foi fracionado por meio de cromatografia líquida. Realizou-se, em seguida, o ensaio das frações resultantes nas preparações neuromu..sculares de ave e camundongo. Os venenos de B. neuwiedi exibiram diferenças notáveis quanto a sua atividade bloqueadora neuromuscular e, de modo geral, os venenos procedentes do Estado de São Paulo e o de Minas Gerais mostraram-se mais ativos que as amostras oriundas do Rio Grande do Sul. Apesar da diversidade demonstrada (2 o que indicou sua miotoxicidade. Quatorze entre os dezesseis lotes preservaram a resposta contraturante à ACh em doses inferiores a 50 ~g/ml (10 e 20 ~g/ml), ainda que na eminência do bloqueio, indicando a integridade dos receptores nicotínicos pós-sinápticos. Os padrões eletroforéticos de 5 entre os 6 venenos mais ativos apresentaram uma banda de caráter básico que não estava presente nos demais venenos. O veneno mais potente também foi eficaz em inibir a resposta contrátil a estímulo elétrico direto e indireto do músculo de camundongo, bem como a contração a estímulo elétrico direto em músculo de ave. Seu efeito bloqueador foi significantemente diminuído a 24°C ou na ausência de cálcio; nessa condição, não houve inibição da resposta ao 1<. Sob estimulação indireta, a preparação de pintainho foi mais sensível à ação do veneno do que a de camundongo; na exposição à estimulação direta, observou-se o inverso. Após o fracionamento, a atividade neuromuscular foi recuperada nos picos 2 e 3 do perfil cromatográfico. Essas frações causaram bloqueio mais intenso do que o produzido pelo veneno bruto, com total manutenção da resposta ao agonista. Enquanto o pico 2 bloqueou totalmente a contratura à adição de 1<, o pico 3 causou somente uma inibição parcial da mesma, sugerindo que a miotoxicidade esteja mais concentrada no pico 2. Em temperatura ambiente (24°C), a atividade neuromuscular de ambas as frações ativas foi reduzida e seu efeito inibidor sobre a resposta ao ~ foi abolida. Os resultados apresentados corroboram as suposições de que o veneno de B. neuwiedi age preferencialmente em sítios pré-sinápticos, além de possuir atividade sobre a membrana muscular, e que essas ações estão relacionadas com sua atividade enzimática. Sugere-se ainda que essas ações podem variar de acordo com a procedência do veneno e que são devidas a componente( s) neurotóxico(s) e/ou miotóxico(s) / Abstract: The venoms showed notable differences regarding their neuromuscular The objective of this research was to compare the neurotoxicity of B. neuwiedi venoms from São Paulo, Rio Grande do Sul and Minas Gerais States, aiming to the partia I isolation of the neurotoxic component from the more active crude venom. To evaluate the neurotoxic activity of the studied venoms we carried out a screening using the indirectly stimulated chick biventer cervicis preparation. We evaluated also the effect of. the more active venom on directly stimulated chick muscle and on the directly and indirectly stimulated mouse phrenic nerve diaphragm preparation. In these cases, the muscle was previally curarized. The various crude venoms were also compared by electrophoresis. The more active venom was fractionated by molecular exclusion. Afterwards, we carried out the assay of the resulting fractions in chick biventer cervicis preparation. blocking activity and the venoms from São Paulo and Minas Gerais States were more active than those from Rio Grande do Sul. In spite of the evident diversity (2 90% of blockade at 20 llg/ml), ali the venoms induced dose-dependent and irreversible blockade, besides contractures, and inhibited the response to KCI. Fourteen out of sixteen venoms preserved ACh response at concentrations up to 20 llg/ml, after 120 min of incubation, even when blockade persisted. The Our results confirm the previous assumption that B. neuwiedi venom acts electrophoretic patterns showed a band that was present only in some of the six more active crude venoms. The other venoms didn't showed that bando The more potent venom inhibited the directly and indirectly stimulated mouse muscle as well as the directly stimulated chick muscle. At room temperature or in the absence of Ca++, the effect on evoked twitch-tension and KCI response was significantly reduced. Under indirect stimulation, chick muscles were more sensitive to venom activity than mouse preparations; under direct stimulation, mouse muscle was more sensitive. After fractionation, the neuromuscular activity was recovered in fractions P2 and P3, corresponding to p~aks 2 and 3 of the elution profile. These fractions induced a higher and faster twitch-tension blockade than crude venom, with total maintenance of ACh response. While P2 blocked totally the contracture to K", P3 caused a partia I blockade. At room temperature, the effect of both active fractions on twitch-tension and KCI response were reduced preferably at presynaptic sites, and at muscle cells. These actions are probably related to its enzimatic activity and they can vary according to the venom origino The venom neuromuscular activity is presumely due to one or more neurotoxic components that correspond to peaks 2 and 3 of the elution profile / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Angelica da Assunção Braga, Gloria M. Braga Poterio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T11:46:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Munhoz_DerliConceicao_M.pdf: 3116871 bytes, checksum: 6bec0662345fd0672d367ac65cd12c20 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A interação entre agentes hipnóticos e os bloqueadores neuromusculares competitívos ainda não está totalmente elucidada. Neste estudo clínico, randomizado avaliamos a influência do propofol e do etomidato no bloqueio neuromuscular produzido pelo rocurônio, condições de intubação traqueal e repercussões hemodinâmicas. Foram incluídos no estudo 60 pacientes de ambos os sexos, estado físico I e 11 (ASA), com idades entre 17 e 58 anos e peso entre 42 e 88kg distribuídos aleatoriamente em dois grupos, de acordo com o hipnótico empregado: (Grupo I - propofol=2,5mg.kg-1) e (Grupo 11 - etomidato=0,3mg.kg-1). Em todos os pacientes empregou-se alfentanil (501l9.kg-1), seguido da injeção do hipnótico e do rocurônio (0,6mg.kg-1). Os pacientes foram ventilados sob máscara com O2 a 100%, até a obtenção de redução de 75% ou mais na amplitude da resposta do adutor do polegar (tempo para intubação), quando foram realizadas as manobras de laringoscopia e intubação traqueal. Avaliaram-se: parâmetros neuromusculares através da análise dos registros das respostas do músculo adutor do polegar obtidas por estimulação do nervo ulnar, com auxílio de estimulador de nervo periférico (TOF-GUARD); condições de intubação traqueal empregando-se pontuações de 1 a 4 para laringoscopia, posição e movimento das cordas vocais e presença e intensidade de tosse, considerando-se condições satisfatórias quando foi possível atribuir pontuações :s; a 2 aos três parâmetros e insatisfatórias quando pontuação> que 2 foi atribuída a pelo menos um dos parâmetros; pressão média e freqüência cardíaca. Nos grupos I e 11, os tempos para intubação foram 48,20 :t 10,85 e 51,20 :t 13,80 segundos, respectivamente. Os tempos para obtenção de bloqueio neuromuscular total foram: 58,87:t 10,73 e de 64,27:t 18,55, nos grupos I e 11, respectivamente. No grupo I, o grau de bloqueio neuromuscular observado no momento da intubação traqueal foi de 77,50% e no grupo 11 foi de 76,96%. As condições de intubação traqueal foram satisfatórias em 100% dos pacientes do Grupo I e em 83,33% no Grupo 11. Nos dois grupos observou-se diminuição significativa da pressão arterial média entre "controle" e T1, seguida de elevação. A comparação entre os tempos estudados mostrou diferença significativa entre "controle" e T2 no grupo I e entre T1 e T2 no grupo 11. Houve diminuição significativa da freqüência cardíaca entre "controle e T1 e elevação entre T1 e T2 nos dois grupos. Conclui-se que o rocurônio na dose de 0,6mg.kg-1 independentemente dos hipnóticos empregados, proporcionou em curto período de tempo condições satisfatórias de intubação traqueal. As técnicas de indução anestésica estudadas podem ser indicadas em situações nas quais rápida intubação traqueal é desejável / Abstract: The interaction between hypnotic agents and competitive neuromuscular blockers has not been totally elucidated. In this clinical trial, we evaluated the influence of propofol and etomidate on neuromuscular block produced by rocuronium, conditions for tracheal intubation and haemodynamic repercussions. Sixty patients of both sexes, physical status ASA I and 11, aged between 17 and 58 years old and weighing between 42 and 88kg were included in the study and randomly allocated in two groups, according to the hypnotic used: Group I - propofol = 2.5mg.kg-1; and Group 11 = etomidate 0.3mg.kg-1. In every patient alfentanil (50~g.kg-1) was used, followed by the injection of the hypnotic and rocuronium (0.6mg.kg-1). Patients were ventilated by mask with 100% oxygen until a reduction of 75% or more in the amplitude of the response of the addutor pollicis (time to intubate) was obtained, when laryngoscopy and tracheal ilÍtubation were performed. The following parameters were evaluated: neuromuscular parameters through the analysis of the record of the addutor pollicis response obtained by stimulation of the ulnar nerve with the aid of peripheral nerve stimulator (TOF-GUARD); conditions for tracheal intubation using scores 1 to 4 for laryngoscopy, position and movement of vocal cords and presence and intensity of coughing, considering satisfactory conditions when it was possible to give score :::;; 2 for three parameters and unsatisfactory when scores > 2 was given to at least one parameter; mean arterial blood pressure and heart rate. In groups I and 11, the times to intubate were 48.20 :t 10.85 and 51.20 :t 13.80 seconds, respectively. The times to obtain complete neuromuscular block were 58.87 :t 10.73 and 64.27:t 18.55 seconds, in groups I and 11, respectively. In group I, the degree of neuromuscular block observed during tracheal intubation was 77.50% and in group 11 76.96%. Conditions for tracheal intubation were satisfactory in 100% of patients in group I and 83.33% in group 11. In both groups, a significant reduction in mean arterial blood pressure between "control" and T1 followed by an increase was observed. A comparison between the times studied showed a significant difference between "control" and T2 in group I and betweenT1 and T2 in group 11. There was a significant difference in heart rate between "control" and T1 and an increase between T1 and T2 in both groups. It was concluded that rocuronium in the dose of 0.6mg.kg-1. regardless of the hypnotic used, provided in a short period for tracheal intubation. The techniques for anesthetic induction studied may be indicated in situations in which a rapid tracheal intubation is desired. / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Lea Rodrigues Simioni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:29:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 OliveiraeSilva_SaraguaciHernandezde_M.pdf: 16002051 bytes, checksum: 69aaf9e7548d45f0055550ca8af3b69d (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: As espécies Crotalus durissus, popularmente conhecidas como cascaveis, são serpentesde grande importância médica na Américado Sul, principalmente no Brasil.A peçonhadessa serpentetem sido objetode estudos por maisde um século,como mostrado pelos estudos realizadospor BRAZIL,1903, SLOTTA & FRAENKEL CONRAT, 1938, VITAL BRAZIL, 1966 e muitos outros. A peçonha crotalica isolada através de gel filtração do veneno bruto em coluna de SephadexG 75, mostraa presença de quatropicos, (pico I) convulxina, (pico II)giroxina, (pico III) crotoxina e (pico IV) crotamina. O pico III foi testado, mostrou seu característico bloqueio neuromuscular em preparação nervo-frênico diafragma de camundongo. Na purificação do veneno bruto crotálico em HPLC de exclusão molecular, usando uma coluna Protein Pack SW 300, obteve-se além dos picos principais três novos componentes do complexo crotoxina picos: cdty III; cdty V e cdty VI, sendo a crotoxina identificada como pico cdty IV. O uso desta cromatografia determinou a dissociação dos efeitos facilitadores e bloqueadores neuromusculares característicos da crotoxina .Assim, o pico cdty III e cdty V exibiram praticamente somente o efeito facilitador da crotoxina (pico cdty IV) nos 120 min de observação. A repurificação da crotoxina em HPLC de fase reversa em coluna µ- Bondapack c 18, resultou em duas isoformas de crotapotina (F 5 e F 7) e três de fosfolipase A2 (F15, F16 e F17). Foram escolhidas as isoformas F7 (crotapotina) e as F16 e F17 (PLA2), as quais foram recombinadas em três diferentes proporções: 1: 1; 1:2 e 2: 1. Ao associarmosa crotapotina(F7) com a PLA2(F16), obtivemos o efeito "chaperone' descrito na literatura ou seja, a inibição da resposta contrátil, o efeito bloqueador irreversível. O mesmo não ocorreu ao recombinarmos crotapotina (F7) com PLA2(F17), o qual não determinou qualquer alteração na resposta contrátil, isto é, mostrou-se destituída de atividade biológica. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The species Crotalus durissus, popularly known as rattle snakes,includis serpents of great medical importance in South America. The poison of that serpent has been object of studies for more than a century, as shown by the studies accomplished by BRAZIL, 1903, SLOTTA & FRAENKELCONRAT, 1938 and VITAL BRAZIL, 1966 and so many others. Through gel filtration of the crude poison in a column SephadexG 75, shows the presence of four picks, (pick I) convulxin, (pick 11)gyroxin, (pick III) crotoxin and (pick IV) crotamine were obtained. Whem the (pick III)crotoxin was tested, in the phrenic nerve-diaphragm preparation it showed the characteristic block neuromuscular effect. Whem Crotalus durissus terrificus (cdty) was subjected to the molecular exclusion chomatograpy (protein pack SW 300) at isocratic conditions, besides the main picks three new components were obtained pick: III V; and VI. Crotoxin was there identified, as pick IV. Able of inducing initial facilitation followed by an irreversible block. Peak cdty III showed a facilitation effect that dures at least 120 mino The Pick V presented a light facilitation and a decrease of the contradile response during the course time of experiments. The use of this chomatograpy determined the dissociation of the facilitatory effects and blocking characteristic neuromuscular of the crotoxin. Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Angelica de F. Assunção Braga, Gloria M. Braga Poterio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campínas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:20:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Munhoz_DerliConceicao_D.pdf: 15032169 bytes, checksum: 2cf164e00717816740722f20f7f288c8 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Além dos fatores relacionados ao paciente, ao bloqueador neuromuscular, fatores técnicos relacionados com a monitorização da função neuromuscular podem influenciara instalação do bloqueio neuromuscular. O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de duas diferentes freqüências de estúnulos sobre o tempo de instalação do bloqueio neuromuscular produzido pelo Pancurônio e pelo Rocurônio. Este estudo foi desenvolvidoem duas etapas: uma etapa clínica e uma experimental. No estudo clínico foram incluídos 120 pacientes, estado ASA I e lI, submetidos a cirurgias eletivas sob anestesia geral, distn"buídos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a freqüência de estúnulos empregada: Grupo I - O,lHz (n=60) e Grupo II - 1Hz (n=60). Em cada grupo formaram-se dois subgrupos (n=30) de acordo com o bloqueador neuromuscular empregado: Subgrupo P (pancurônio - O,lmg.kg-l) e Subgrupo R (rocurônio - 0,6mg.kgO1). Após indução anestésica e injeção do bloqueador neuromuscular, os pacientes foram ventilados sob máscara com oxigênio a 100% até a obtenção de redução de 75% ou mais na amplitude da resposta do músculo adutor do polegar, quando foram realizadas as manobras de laringoscopia e intubação traqueal. A função neuromuscular foi monitorizada com aceleromiografia. Avaliaram-se: parâmetros neuromusculares (tempo de início de ação do bloqueador neuromuscular e tempo para bloqueio neuromuscular total) através da análise dos registros das respostas do músculo adutor do polegar obtidas por estimulação do nervo ulnar, com auxílio de estimulador de nervo periférico (TOF-GUARD); condições de intubação traqueal; pressão arterial média e fteqüência cardíaca. No grupo 1,subgrupos P e R, os tempos para início de ação foram, respectivamente, 159,33 :t 35,22 e 83,0 :t 17,25 segundos. No grupo lI, subgrupos P e R, foram 77,83 :t 9,52 e 48,96 :t 10,16 segundos, respectivamente. Os tempos para obtenção de bloqueio neuromuscular total foram 222,0 :t 46,56 e 125,33 :t 20,12, no Grupo 1,subgrupos P e R, respectivamente.No grupo lI, foram de 105,96:t 18,58 e 59,83 :t 10,36 segundos nos subgrupos P e R respectivamente. Nos dois subgrupos, os tempos de início de ação e para bloqueio neuromuscular total foram significativamente menores no Grupo II em relação ao Grupo I. As condições de intubação traqueal foram satisfatórias em 117 pacientes (97,5%) e insatisfatórias em 3 (2,5%). No estudo experimental foram utilizados ratos machos da linhagem Wistar, com peso entre 250 e 300g. As preparações foram montadas de acordo com a técnica descrita por BULBRING (1946). O diafTagma foi submetido à estimulação indireta de 0,1 e 1Hz de :freqüência (Grupos I e II, respectivamente) e as variações de tensão produzidas pelas contrações do diaftagma foram registradas em fisiógrafo Gould RS 3400. Formaram-se subgrupos (n=5) PE e RE de acordo com o bloqueador neuromuscular empregado (pancurônio-2J.1g/rnle rocurônio-4J.1g/rnl,respectivamente). O grau de bloqueio das respostas do músculo diaftagma foi avaliado em 5, 15 e 30 minutos após a adição do bloqueador neuromuscular. Nos dois grupos (Grupo I - O,lHz e Grupo II - 1Hz) e subgrupos PE (pancurônio) e RE (rocurônio), observou-se um aumento cumulativo nos graus de bloqueio das respostas musculares com diferença significativa entre os diferentes tempos estudados em relação à resposta muscular controle. Nos dois subgrupos, a comparação dos valores médios dos graus de bloqueio nos diferentes tempos estudados entre os dois grupos também mostrou diferença estatisticamente significante. Para as duas drogas, os graus de bloqueio neuromuscular para o Grupo II foram maiores do que para o Grupo I, em todos os instantes (p < 0,01). Concluímos que, tanto no estudo clínico como no experimenta~ a freqüência de estímulo empregada interfere no tempo de instalação do bloqueio neuromuscular: tempo de início de ação e de bloqueio neuromuscular total menores com a maior freqüência nos dois subgrupos / Abstract: In addition to factors related to patient and neuromuscular blocker, technical factors related to neuromuscular monitoring may also influencethe onset of neuromuscular blockade. The aim of the present study was to evaluate the influence of two different stimulation :&equencieson onset time of the neuromuscular blockade produced by Pancuronium and Rocuronium. This study was conducted in two stages: clinical and experimental. The clinical study included 120 patients, ASA I and II physical status, submitted to elective surgery under general anesthesia, random1y distributed into two groups according to the stimulation :&equencyused: GToup 1-0.1 Hz (n=60) and GToup lI-I Hz (n=60). In each group two subgroups were formed (n=30), according to the neuromuscular blocker used: Subgroup P (pancuronium-O.l mg.kg-l) and Subgroup R (rocuronium-0.6 mg.kg-l). Afier induction of anesthesia and injection of the neuromuscular blocker, the patients were ventilated by mask with 100% oxygen until achieving a 75% or more reduction in the amplitude of the abductor pollicis muscle response. That was the moment laryngoscopy and tracheal intubation were performed. Neuromuscular function was monitored by acceleromyography. Neuromuscular parameters were evaluated (the onset time of NMB action and time to maxima1 neuromuscular blockade) ana1yzingrecordings of adductorpollicis muscle response, obtained by stimulating the ulnar nerve with a neuromuscular transmission monitor (TOF-GUARD). Tracheal intubating conditions, mean arterialpressure and heart rate were also evaluated. In GToupI, onset times for subgroups P and R were 159.33 :i:35.22and 83.0 :i: 17.25 seconds, respectively. In GTouplI, onset times for subgroups P and R were 77.83 :i:9.52 and 48.96 :i: 10.16 seconds, respectively. Times to maxima1neuromuscularblockadein GToupI, subgroupsP and R were 222.0 :f: 46.56 and 125.33 :f: 20.12 seconds, respectively. In GTouplI, times to maxima1neuromuscular blockwere 105.96 :i: 15.58 and 59.83 :i: 10.36 for subgroups P and R, respectively. In both subgroups, onset times of action and times to maxima1 neuromuscular block were significant1yshorter in GToup II than in GToup I. Tracheal intubating conditions were suitable in 117 (97.5%) and unsuitable in 3 (2.5%) patients. In the experimental study, Wistar male rats, weighing between 250 and 300g were used. Microscope preparation was mounted according to the technique described by BULBRING (1946). An indirect stimulation of 0.1 to 1 Hz was applied to the diaphragm (GToupsI and lI, respectively) and tension variations produced by diaphragmatic contractions were recorded by a Gould RS 3400 physiographer. Subgroups PE and RA (n=5) were fonned, according to the neuromuscular blocker used (pancuronium-2 ~g/m1and rocuronium-4 ~g/m1,respective1y). The degree of diaphragmatic blockade was evaluated at 5, 15 and 30 minutes after adding the neuromuscular bIocker. In both groups (Group 1-0.1 Hz and Group 11-1 Hz) and subgroups RE (rocuronium) and PE (pancuronium), a cumulative increase in the degree of musc1eblockade was observed. There was a significant difrerence between difrerent times studied compared to controI musc1e response. In both subgroups, there was also a statistica11ysignificant difrerence when comparing the mean values of degrees of bIockade between both groups at difrerent times studied. For both drugs, the degree ofneuromuscular bIock for Group 11is greater than for Group I, at alI moments (p<0.01). We conc1ude that both in the clinical and experimental study the stimulation ftequency applied interfere with the onset time of neuromuscularbIockade / Doutorado / Medicina Interna / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Selma Maria Michelin Matheus / Resumo: Os nervos periféricos são comumente acometidos por lesões que acarretam interrupção do impulso nervoso. Dentre as causas mais comuns, estão: traumas, estiramento, pinçamento, compressão e esmagamento, resultando em comprometimento do sistema neuromuscular. A recuperação tanto morfológica quanto funcional após este tipo de lesão raramente é completa, sendo um desafio para clínica médica. A maior parte da literatura tem como foco o estudo da recuperação nervosa e muscular, havendo poucas referências em relação às junções neuromusculares (JNM). Além disso, outros procedimentos vêm sendo testados como uma forma de minimizar os danos causados pelo uso da sutura. Dentro desta proposta este estudo teve como objetivo avaliar o uso do selante de fibrina (CEVAP) associado ao número reduzido de pontos (1 ponto), quando comparado a sutura convencional (3 pontos), após lesão do nervo isquiático. Foram utilizados 36 ratos Wistar machos adultos, divididos em 4 grupos experimentais: Controle (C), Desnervado (D); Sutura (S) e Sutura + Selante de Fibrina (SFS). No grupo C, foi realizada apenas incisão superficial no antímero direito, afastamento da musculatura e localização do nervo isquiático. No grupo D foi realizada neurotmese do nervo isquiático (gap de 6 mm). No grupo S foi realizada transecção completa do nervo isquiático direito e após 7 dias foi efetuada anastomose epineural do mesmo. No grupo SFS, a reconstrução nervosa foi realizada com um ponto de sutura, seguida da aplicação do sel... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Peripheral nerves are commonly affected by injuries that lead to interruption of the nerve impulse. Among the most common causes are: trauma, stretching, pinching, compression and crushing, resulting in impairment of the neuromuscular system. Both morphological and functional recovery after this type of injury is rarely complete and a challenge for medical practice. Most of the literature focuses on the study of nerve and muscle recovery, with few references to neuromuscular junctions (NMJs). In addition, other procedures have been tested as a way to minimize the damages caused by the use of suture. The aim of this study was to evaluate the use of fibrin selant (CEVAP) associated to reduced number of stitches (1 point) when compared to conventional suture (3 stitches) after ischiatic nerve injury. Thirtysix male adult Wistar rats were divided into four experimental groups: Control (C), Desnervate (D), Suture (S) and Suture + Fibrin Sealant (SFS). In group C, an only superficial incision was made in the right antimer, followed by distance from the musculature and location of the ischiatic nerve. In group D, ischiatic nerve neurotmesis (6 mm gap) was performed. In group S, a complete transection of the right ischiatic nerve was carried out and after 7 days an epineural anastomosis of the ischiatic nerve was performed. In the SSF group, the nerve reconstruction was performed with one suture point, followed by the application of CEVAP fibrin sealant (Unesp- Botucatu Center for th... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Selma Maria Michelin Matheus / Resumo: O envelhecimento populacional tem sido considerado um dos maiores desafios de saúde pública contemporânea, entre outros fatores leva à diminuição de hormônios, à perda progressiva da massa muscular e diminuição da força muscular. O exercício físico atua positivamente sobre esse sistema, bem como os derivados sintéticos da testosterona, os quais apresentam um efeito anabólico. Assim este trabalho teve como objetivo avaliar se a associação do exercício físico potencializado ou não por dose supra-fisiológica de decanoato de nandrolona previnem alterações decorrentes da idade no músculo sóleo de ratos e nas junções neuromusculares associadas. Foram utilizados 40 ratos Sprague-Dawley machos, com 90 dias de idade, os quais foram tratados durante 8 semanas e distribuídos, de acordo com o tratamento, em grupos de animais sedentários ou treinados, com ou sem o uso deDN. O treinamento físico foi realizado por sessões de saltos em água, três vezes por semana. Após atingirem 300 dias de idade, os músculos sóleos foram coletados e realizadas as seguintes análises: Análise morfológica e morfométrica das junções neuromusculares; Análise ultraestrutural das fibras musculares e junções neuromusculares associadas; Análise Imunohistoquímica e morfométrica das fibras Fast e Slow; Análise da Distribuição dos nAChRs por meio de microscopia confocal. Os resultados mostraram que houve diminuição do peso dos animais que fizeram uso de DN, embora o peso do músculo sóleo não tenha se alterado. A morfol... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Population aging has been considered one of the greatest challenges of contemporary public health; among other factors there is decreased hormone release, progressive loss of muscle mass, and decreased muscle strength. Physical exercise has a beneficial effect on that system, as well as synthetic testosterone derivatives, which have anabolic effect. This study had the objective of evaluating whether the association of physical exercise enhanced or not by supraphysiological dose of nandrolone decanoate prevents age-related alterations in the soleus muscle of rats and in the associated neuromuscular junctions. 40 male Sprague-Dawley rats, 90 days old, were treated for 8 weeks and distributed according to the treatment in sedentary or exercised group, with or without the use of ND. Physical training was conducted by jumps in water three times per week. At the age of 300 days, the soleus muscles were collected and analyzed as follows: morphologic and morphometric analysis of neuromuscular junctions; ultrastructural analysis of muscle fibers and associated neuromuscular junctions; immunohistochemistry and morphometric analysis of fast and slow-twitch fibers; analysis of the distribution of nAChRs by confocal microscopy. The results demonstrated that there was a decreased weight in the animals that used ND, although the weight of the soleus muscle did not change. The general morphology and morphometry of the NMJ remained constant in the groups studied, and in regard to ultrastructu... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre