Nos últimos anos, novas estratégias têm sido desenvolvidas na obtenção de incrementos da produtividade agrícola associados à manutenção da qualidade do solo. No entanto, as terras agrícolas vêm perdendo a sua qualidade física decorrente dos processos de compactação a que estão sendo expostas. A compactação do solo, destaca-se a nível mundial como um dos principais responsáveis pela redução da produtividade das culturas. Pesquisas têm descrito o processo de compressão de solos formados sob a influência de clima temperado, bem como modelos que relacionam esse processo com os atributos intrínsecos dos solos. A informação disponível também demonstra que o processo de compactação depende do sistema de manejo de solo adotado. Entretanto, existe a necessidade de desenvolver estudos que permitam uma melhor compreensão do processo de compactação de solos desenvolvidos sob clima tropical. Nesse sentido, este trabalho testou a hipótese de que o processo de compactação e os indicadores derivados da curva de compressão de solos tropicais são influenciados diferenciadamente pelo sistema de manejo aplicado, devido às alterações que o mesmo induz nas propriedades físicas do solo. O objetivo geral deste estudo foi avaliar quantitativamente o processo de compactação e os indicadores “índice de compressão” e “pressão de preconsolidação” de solos submetidos a diferentes intensidades de tráfego em um pomar de laranja e diferentes intensidades de pisoteio animal em uma pastagem irrigada e obter, se possível, relações que permitam estimar esses indicadores a partir de propriedades do solo facilmente mensuráveis. Os objetivos específicos foram: i) determinar a influência de diferentes intensidades de tráfego no processo de compactação e nos parâmetros índice de compressão e pressão de preconsolidação de um Latossolo Vermelho Amarelo sob pomar de laranja e, a partir desses indicadores, avaliar a heterogeneidade da compactação; ii) avaliar a influência do pisoteio animal na compressibilidade de um Argissolo Vermelho submetido aos sistemas de pastejo rotacionado intensivo: irrigado e não irrigado; e iii) obter funções que permitam estimar a capacidade de suporte de carga do solo a partir de uma propriedade facilmente mensurável e de extrema importância para o crescimento de plantas: a resistência do solo à penetração. Os resultados referentes ao primeiro objetivo indicaram que o processo de compactação foi influenciado pela intensidade de tráfego, visto que os valores de pressão de preconsolidação diferiram nas posições de amostragem entre rodado, rodado e projeção da copa em relação à linha de cultivo. A pressão de preconsolidação resultou ser um indicador mais sensível que o índice de compressão na avaliação da heterogeneidade da compactação em áreas citrícolas. Os resultados obtidos no segundo objetivo revelaram diferenças na compressibilidade do solo, refletindo-se nas curvas de compressão uniaxial dos sistemas de pastejo rotacionado intensivo irrigado e não irrigado. Os sucessivos ciclos de pastejo induziram aumento da pressão de preconsolidação do solo nos dois sistemas de pastejo, sendo significativamente superior no sistema de pastejo rotacionado intensivo irrigado. No que se refere ao terceiro objetivo, foi determinada uma relação significativa, positiva e linear entre a pressão de preconsolidação e a resistência do solo à penetração medida no laboratório e no campo. Estes resultados possibilitam afirmar que a capacidade de suporte de carga do solo pode ser estimada a partir de uma propriedade física facilmente mensurável como a resistência do solo à penetração avaliada no campo. / In the last years new strategies have been developed to obtain increment of the agricultural productivity maintaining the soil quality. However, the agricultural lands quality is decreasing as a consequence of the soil compaction process. Soil compaction is considered as one of the main factors responsible for the reduction of the cultures productivity. Researches related to soils formed under the influence of temperate climate have described the process of soil compression, and developed models that relate this process with the soil intrinsic attributes. Studies have also shown that the soil compression process depends on the soil management practices. However, it is still necessary to develop studies that allow a better understanding the compaction process of soils developed under tropical climate. In this context, this research tested the hypothesis that the soil compaction process is influenced differently by the management practices, due to the alterations that induce on the soil physical properties. The general objective of this study was to evaluate quantitatively the compaction process, and the indicators “compression index” and “preconsolidation pressure” of soils submitted to different traffic intensities in an orchard, and different animal trampling intensities in an irrigated short duration grazing system, and to obtain relationships that allow to estimate these indicators using easily measurable soil attributes. The specific objectives were: i) to determinate the influence of different traffic intensities in the soil compaction process, and in the compression index and preconsolidation pressure of an Haplustox under an orange orchard, and to use these indicators to evaluate the soil compaction heterogeneity; ii) to evaluate the influence of the animal trampling on the soil compressibility of an Hapludalf submitted to two rotation short-duration grazing systems: not irrigated and irrigated; and iii) to obtain functions that allow to estimate the load support capacity using an easily measurable and very important soil property for plant growth; i.e. the soil resistance to penetration. The results related to the first objective indicated that the compaction process was influenced by the traffic intensity, since that the preconsolidation pressure values were different between the sampling positions; i.e., between wheel track, wheel track, canopy projection, and row. The preconsolidation pressure demonstrated to be a more sensitive indicator than the compression index in the evaluation of the soil compaction heterogeneity in an orange orchards. The results related to the second objective have indicated differences in the soil compressibility, which in turn were expressed in the soil compression curves of the irrigated and not irrigated rotation short-duration grazing systems. The successive grazing cycles have induced increases of the soil preconsolidation pressure values of the two grazing systems, being significantly greater in the irrigated rotation short-duration grazing system. The results related to the third objective have demonstrated the existence of a significant, positive and linear relationship between the preconsolidation pressure values and the soil mechanical resistance that were measured in the laboratory and in the field. These results make possible to state that the soil load support capacity can be estimated using an easily measurable soil property; i.e. the soil resistance to penetration.

Neste trabalho propõe-se um procedimento para a análise de sistemas de distribuição física do suco de laranja de exportação. São apresentados o contexto econômico da indústria do suco e os processos de fabricação e distribuição física do produto. Conceituam-se e formulam-se os custos de distribuição segundo a lógica das atividades operacionais. Modela-se um problema de tomada de decisão por estruturas de distribuição física para o suco de laranja e programa-se o problema na linguagem de modelagem GAMS (General Algebraic Modeling System). Faz-se a aplicação a seis empresas hipotéticas e conclui-se que o procedimento proposto é um instrumento eficaz para a análise dos custos e pode ser usado em estudos que dão apoio à decisão gerencial. / This thesis proposes a procedure of analyzing physical distribution systems for exporting orange juice. The economic context of the orange juice industry, the production process and physical distribution process are presented. The distribution costs according to the logic of operational activities are formulated. A problem of decision make about physical distribution structures of frozen concentrated orange juice is modeled. Using model written in the GAMS (General Algebraic Modeling System) modeling language, an application to six hypothetical companies is shown. His concluded that the proposed procedure is an effective instrument for cost analysis and can be useful to support management decisions.

O agronegócio brasileiro é responsável por uma parcela considerável da produção mundial de alimentos, sendo as frutas, especialmente as citrícolas, as que apresentam maior consumo. Neste contexto, as laranjeiras representam 55% da área cultivada de citros. O estado do Rio Grande do Sul (RS) é o sexto maior produtor nacional de laranja, onde é possível identificar na cadeia produtiva a presença de todos os elos, tais como fornecedores de insumos, produtores de mudas, produtores de frutas, indústrias de produção de suco, dentre outros. Muitos são os gargalos que impossibilitam uma coerência e estruturação na cadeia de produção dessa cultura já que a plantação é predominantemente familiar e desenvolvida em pequenas propriedades e o escoamento é feito em grande parte para os intermediários e não para a indústria. O objetivo deste trabalho foi identificar as principais restrições existentes nos elos da cadeia produtiva da laranja no RS do ponto de vista dos “atores chave” através de uma pesquisa qualitativa do tipo exploratória descritiva. Os participantes, escolhidos por amostra não probabilística e por conveniência, foram "atores chave" do elo produtivo (produtores rurais), comercialização (intermediários) e processamento (indústrias) da cadeia produtiva da laranja. A coleta de dados foi realizada por entrevista semiestruturada nas propriedades rurais, em feiras hortícolas e nas indústrias processadoras. As entrevistas foram organizadas, analisadas e interpretadas com auxilio do software QDA Miner 4.0. Em conjunto com a análise interpretativa temática, o pesquisador valeu-se também da Teoria das Restrições. A possibilidade de pensar nos problemas de maneira lógica e sistêmica, no qual a teoria das restrições está baseada, reduz a necessidade de adivinhação na interpretação dos resultados, estabelecendo uma coerência no crescimento da cadeia, correlacionado os “atores chave” e identificando os entraves de maior impacto. Conclui-se através da caracterização dos “atores chave” a importância de cada um para a cadeia produtiva da laranja. A partir dos dados primários foram identificadas as restrições - Mercado, Logística, Capacitação e Incentivos Governamentais - que mais obstruem o crescimento na produção da fruta no RS e suas causas. Perceberam-se, também, semelhanças quanto às perspectivas dos “atores chave” na cadeia produtiva da laranja. Portanto, torna-se necessário integrar os atores - agricultores, intermediários, indústria, poder público, órgãos de extensão rural, universidades e centros de pesquisa, para que possam propor e executar ações concretas que venham a modificar o atual cenário da produção de laranja no RS. / Brazilian agribusiness is responsible for a considerable portion of the world food production, and fruits, specially citrus fruits, are those with the highest consumption. In this context, the orange is the main species in citrus culture, corresponding to 55% of the cultivated area. The state of Rio Grande do Sul (RS) is the sixth largest producer of orange in Brazil, where is possible to identify in the productive chain the presence of all the links, such as input suppliers, seedling producers, fruit growers, industries of juices, among others. Many are the bottlenecks that preclude consistency and structuring of the orange supply chain, since the plantation is predominantly familiar and developed on small farms, and the flow is made largely for intermediates and not for the industry. The aim of this work was to identify the main restrictions in the production chain of orange in RS from the point of view of the "key players" by means of a qualitative descriptive exploratory research. The participants, selected by non-probabilistic sample and convenience, were "key players" of the productive link (farmers), marketing (intermediate) and processing (industries) of the production chain of orange. Data collection consisted of semi-structured interview conducted in farms, in horticultural fairs and industries. The interviews were organized, analyzed and interpreted with QDA Miner 4.0 software. Along with the thematic interpretive analysis, the researcher also made use of the Theory of Constraints. The possibility to think about the problems in a logical and systemic way, in which the theory of constraints is based, reduces the need for guesswork in result interpretation, establishing coherence in the chain growth, correlating the "key players" and identifying the obstacles of greater impact. We conclude that all the "key players" are of fundamental importance for the productive chain of orange in RS state and by primary and secondary data it was possible to characterize these actors. From the primary data the constraints - Market, Logistics, Training and Government Incentives - that most obstruct the growth in fruit production in RS state and their causes were identified. In light of these questionings, similarities regarding the perspectives of the "key players" in the orange production chain. Thus, it is necessary to involve the actors able to modify this setting - farmers, intermediaries, industry, government, agricultural extension agencies, universities and research centers, so they can propose and execute concrete actions that change the current scenario of the orange production in the state of RS.

O Brasil é o maior produtor e exportador de suco de laranja, sendo esta uma das mais importantes atividades econômicas para o país. Os frutos são afetados pela mancha preta dos citros, causada por Guignardia citricarpa, que deprecia comercialmente os frutos, provoca queda prematura e eleva o custo de produção. Medidas alternativas ao controle químico clássico vêm sendo estudadas e, neste contexto, insere-se a indução de resistência. O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos in vitro da quitosana e radiação UV-C sobre o crescimento micelial, germinação e formação de apressórios por G. citricarpa e a ação destes agentes abióticos no controle da doença em laranjas pós-colheita, sob armazenamento ambiente e refrigerado, estudando-se também mecanismos de resistência ativados no tecido vegetal em resposta ao tratamento de melhor eficiência. Para tanto, foram utilizadas as concentrações de 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 3,0% de quitosana e as doses de 0,52; 1,04; 3,13; 10,44 e 15,66 kJ.m-2 da radiação UV-C. A quitosana inibiu o crescimento micelial do fungo e estimulou a germinação e formação de apressórios, os quais se mostraram morfologicamente alterados. A UV-C não inibiu o crescimento micelial, porém a maior dose ocasionou o menor crescimento. Para os experimentos in vivo, laranjas foram coletadas, lavadas, sanitizadas com hipoclorito e posteriormente tratadas. As concentrações de 0,5, 1,0 e 2,0% de quitosana e a dose de 7 kJ m-2 da UV-C apresentaram melhor resultado em laranjas ?Valência? na redução dos sintomas. Análise da cor da casca dos frutos irradiados revelou que houve leve escurecimento. Os fungicidas tiabendazol e imazalil não controlaram a doença em laranjas ?Pêra Rio?, porém, obteve-se menos lesões nos frutos tratados com os fungicidas em combinação com quitosana, tanto em temperatura ambiente quanto em refrigeração. Análises da cor da casca indicaram amarelecimento e não houve alterações significativas nos teores de sólidos solúveis, acidez titulável, pH, vitamina C e ratio. Nos ensaios com quitosana, tiabendazol e UV-C, a quitosana apresentou melhor controle da doença, aplicada isoladamente ou em conjunto com o fungicida e UV-C, em temperatura ambiente ou refrigeração. A quitosana e a proteína harpina apresentaram controle semelhante e, em comparação com o ácido cítrico, a quitosana ocasionou melhor controle em laranjas ?Valência?. Para análises bioquímicas, amostras de flavedo foram homogeneizadas em de tampão acetato, com posterior centrifugação, coletando-se o sobrenadante. Para as reações enzimáticas, foram utilizados os reagentes CM-chitin-RBV, CMCurdlan- RBB, guaiacol, catecol e L-fenilalanina para quitinase, glucanase, peroxidase, polifenoloxidase e fenilalanina amônia-liase, respectivamente. Para a determinação de fenóis, amostras do flavedo foram homogeneizadas em metanol acidificado e a dosagem feita com o reagente Folin-Ciocalteau. A quitosana induziu o aumento da atividade das enzimas nas primeiras 24 h após o tratamento, sendo neste tempo detectada a maior atividade. Não houve atividade de fenilalanina amônia-liase, bem como acúmulo de fenóis. Finalmente, fica evidenciado que quitosana e a UV-C apresentaram efeito in vitro sobre G. citricarpa, porém somente a quitosana exibiu potencial no controle da mancha preta em laranja pós colheita. / Brazil is the biggest producer and exporter of orange juice, and this is one of the most important economical activities for the country. The fruits can be affected by the citrus black spot, disease caused by the fungus Guignardia citricarpa, which depreciates then commercially, causes premature fall and increases the production cost. Alternative measures to the chemical control are being studied and, in this context, resistance induction can be considered. The present work had as objective evaluate the in vitro effects of chitosan and UV-C radiation on mycelial growth, germination and apressorium formation by G. citricarpa and the action of the abiotic agents on controlling the disease on postharvest oranges, under room temperature and refrigeration storage, also studying the mechanisms of resistance in the plant tissue in response to the better treatment. The chitosan concentrations were 0, 0.5, 1.0, 1.5; 2.0 and 3.0% and the UVC doses were 0.52, 1.04, 3.13, 10.44 and 15.66 kJ.m-2. Chitosan inhibited mycelial growth and stimulated the germination and the apressorium formation that were morphologically abnormal. UV-C did not inhibited mycelial growth, but reduced it at the highest dose used. For the in vivo experiments, oranges were collected, sanitized with hypochlorite and treated. Chitosan concentrations of 0.5, 1.0 and 2.0% and the UV-C dose of 7 kJ m-2 exhibited better results in ?Valência ? oranges. Analyses of peel color of irradiated fruits revealed a light browning. The fungicides thiabendazole and imazalil did not control the disease in ?Pêra Rio ? oranges, but fewer lesions appeared on fruits treated with the fungicides in association with chitosan, under room temperature and refrigeration. Color analysis of peel indicated yellowing and no significant differences among soluble solids, titratable acidity, pH vitamin C and ratio. In the chitosan, thiabendazole and UV-C assays, there was a better control of lesion appearing by treatment with chitosan, applied alone or in association with fungicide and UV-C, at room temperature or refrigeration. Chitosan and the harpin protein were similar on the controlling of the disease and, in comparison to the citric acid, chitosan presented better control on ?Valência? oranges. For biochemical analysis, flavedo samples were homogenized in acetate buffer, centrifuged, and the supernatant collected. The reagents used were CM-chitin-RBV, CM-Curdlan-RBB, guaiacol, cathecol and L-phenylalanine for chitinase, glucanase, peroxidase, polyphenoloxidase and phenylalanine ammonia-lyase, respectively. For phenol determination, flavedo was homogenized in acidified methanol and the evaluation was made with Folin-Ciocalteau. Chitosan increased enzyme activities in the first 24 h after treatment, with the highest activity in that time. Activity of phenylalanine ammonia-lyase was not detected, well as absent of phenolic compounds accumulation. Chitosan and UV-C exhibited in vitro effect on G. citricarpa, however, only chitosan showed potential on the control of black spot in postharvest oranges.

A citricultura é de fundamental importância para a economia brasileira devido à sua expressiva participação como item de exportação e pela geração de grande quantidade de empregos. A colheita manual é atualmente realizada na quase totalidade das propriedades citrícolas nacionais, o que permite a seleção qualitativa dos frutos removidos das plantas. Esse método apresenta diversificação entre as empresas para adaptar-se a necessidades internas. A ausência de técnicas e recursos para a geração rotineira de mapas de produtividade em áreas de citros é uma das grandes dificuldades para implantação de um sistema de agricultura de precisão mais amplo. Isso impede a adoção da estratégia de gerenciamento integrado de entradas e saídas e não permite a mensuração dos efeitos de adoção de taxas variadas de insumos, o que justifica o esforço em empreender técnicas e equipamentos para a geração dessa informação. O que se objetivou com este trabalho foi iniciar com o correto entendimento dos diferentes sistemas de colheita existentes, suas características úteis e limitações relativas à coleta de dados com vistas à obtenção de mapas de produtividade. A partir de então desenvolver e testar uma proposta para a geração de dados para obtenção de mapas de rodutividade, com procedimentos simples e que respeitem as rotinas pré-existentes nos sistemas de colheita manual vigentes. Para caracterizar os sistemas de colheita utilizados comercialmente, empresas citrícolas foram contactadas no sentido de fornecer informações consideradas como necessárias ao processo de caracterização. Posteriormente contactou-se uma dessas empresas onde procedeu-se a pesagem de uma população de sacolões ("big bag") para que fosse possível aferir a informação de massa estimada pela pessoa que acompanha as frentes de colheita e realiza essa estimativa para fins de pagamento dos colhedores. Esses dados foram devidamente analisados e indicaram que a estimativa volumétrica feita a campo é aceitável para a obtenção de peso dos sacolões. Na seqüência selecionou-se uma área específica e georreferenciou-se todos os sacolões de colheita. A partir da largura da faixa de colheita e do cálculo de distâncias entre os sacolões obtiveram-se as áreas de contribuição de cada um. Com os dados de área e das massas obtidas no apontamento foi possível determinar a produtividade dos pontos. Após a análise estatística e geoestatística dos dados estes foram interpolados gerando o mapa de produtividade. O método se mostrou válido para a coleta de dados e geração do mapa de produtividade que mostrou a grande variabilidade espacial existente na lavoura estudada. / Citriculture activity is important for the Brazilian economy due to its expressive participation on exporting and for the generation of a number of job positions. Manual harvesting is currently predominant and allows the qualitative selection of the removed fruits from plants. The method includes variations among companies and farms, adapted to internal necessities.Techniques and resources for the routine generation of yield mapping for citrus is necessary for implementing compreensive precision agriculture strategies of integrated management of inputs and extractions. It will also allow the measurement of the effect of adoption of variable rate input applications, what justifies the efforts developing techniques for the generation of yield mapping for citrus. The objective of this research was to promote the correct undestanding of the variations on harvesting systems, their useful characteristics and limitations relative to data collection to attain yield maps, also propose and test a methodology for collecting data in a simple way, without interfering with the harvesting. To characterize the harvesting systems used commercially, farms were contacted to supply the necessary information. Later, in one specific farm a population on big bags was weighed for confronting and checking the weight estimated by the harvesting manager for the payment of the individual workers. Data were analyzed and indicated that the volumetric estimation is acceptable for attaing the weight of the bags. Finaly a field was selected and all the big bags of harvest were georeferenced, allowing for the calculation of the representative individual area of each one. The area was obtained from the constant strip width and distance between bags. With the area, location and mass of each bag it was possible to determine the productivity of each points and after interpolation the yield map was generated. The method is considered simple and efficient for data collection and generation of the yield the map wich showed a great variability within the field.

A regeneração de plantas, por organogênese ou embriogênese somática, a partir do cultivo de células e tecidos vegetais in vitro é a base para a utilização da biotecnologia no melhoramento. Realizaram-se estudos com cinco cultivares de laranja doce (Citrus sinensis L. Osbeck), Pêra, Natal, Lima Verde, Hamlin e Westin. Este trabalho objetivou a avaliação da eficiência de isolamento de protoplastos das cultivares de laranja doce; o estudo da eficiência de plaqueamento em função de cinco densidades de protoplastos e diferentes meios de cultura e avaliação da embriogênese somática em função da composição dos meios de cultura e concentração da fonte de carboidrato. As soluções enzimáticas testadas para o isolamento de protoplastos foram: 1. Grosser e Chandler (1987), composta de 1% de celulase Onozuka RS (Yakult), 1% macerase R- 10 (Yakult Honsha) e 0,2% de pectoliase Y-23 (Seishin); 2. Grosser e Chandler (1987) modificado, composta de 1% de celulase Onozuka RS (Yakult), 1% macerase R-10 (Yakult Honsha); 3. Solução enzimática composta de 4% de celulase Onozuka R-10 (Yakult), 1% macerase R-10. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em cinco densidades, 2 x 104, 5 x 104; 105; 2x 105 e 3 x 105 protoplastos . mL-1,nos meios de cultura EME 0,7M, BH3 0,7M e BH3 + EME 0,7M em ausência de luz, a 25 ± 1 ºC. A solução enzimática 2 proporcionou um maior rendimento no isolamento de protoplastos das cultivares Hamlin, Natal e Pera e solução enzimática 1 foi melhor para a cultivar Westin. A eficiência final de plaqueamento avaliada aos 90 dias foi superior nas densidades de de 3 x 105 e 2 x 105 protoplastos. mL-1 para as cultivares Hamlin, Natal e Lima Verde, e na densidade de 2 x 105 e 105 protoplastos. mL-1 para a cultivar Westin. A indução da embriogênese somática ocorreu em meio de cultura MT modificado com 500 mg.L-1 de extrato de malte, acrescido de sacarose, galactose, glicose, sorbitol, lactose e maltose, nas concentrações de 18, 37, 75, 110 e 150 mM à temperatura de 27 °C. A formação de embriões somáticos variou com o genótipo, sendo a cultivar Lima Verde e Westin apresentaram menor número de embriões somáticos. As melhores fontes de carboidratos foram a maltose, seguida pela lactose nas concentrações de 37 e 75 mM para a cultivar Pêra, 37 mM para a cultivar Natal e 37, 75 e 110 mM para a cultivar Hamlin. / Plant regeneration, by organogenesis or somatic embryogenesis from cell cultures and in vitro plant tissue culture is the basis for the use of biotechnology in plant breeding. Studies were conducted with five cultivars of sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck), Pêra, Natal, Lima Verde, Hamlin and Westin. This work aimed to evaluate the isolation efficiency of protoplasts, to evaluate platting efficiency of protoplasts based on five densities of cells and different culture media and to evaluate somatic embryogenesis based on culture medium composition and concentration. The enzymatic solutions tested were: 1. Grosser and Chandler (1987): 1% de cellulase Onozuka RS (Yakult), 1% macerase R-10 (Yakult Honsha) and 0,2% de pectoliase Y-23 (Seishin); 2. Grosser and Chandler (1987) modified: 1% de cellulase Onozuka RS (Yakult) and 1% macerase R-10 (Yakult Honsha); 3. Enzimatic solution containing 4% cellulase Onozuka R-10 (Yakult) and 1% macerase R-10. Protoplasts were cultured at densities of 2 x 104; 5 x 104; 105; 2 x 105 e 3 x 105 protoplasts.mL-1 in EME 0,7M, BH3 0,7M and BH3 + EME 0,7M, in the dark, at 25 ± 1 ºC. The enzymatic solution 2 provided higher yield for the cultivars Hamlin, Natal and Pêra, and enzymatic solution 1 resulted in better protoplast isolation for cultivar Westin. Final platting efficiency, evaluated 90 days after culture, was higher at the densities of 3 x 105 e 2 x 105 protoplasts.mL-1 for Hamlin, Natal and Lima Verde, and at the density of 2 x 105 e 105 protoplasts.mL-1 for Westin. Somatic embryogenesis stimulation occurred in cultured medium MT (MURASHIGE AND TUCKER, 1969) modified with 500 mg. L-1 of malt extract, supplemented with sucrose, galactose, glucose, maltose, lactose and sorbitol at concentrations of 18, 37, 75, 110 and 150 mM, at 27 ± 1 ºC. Somatic embryos produced varied with the genotype, the smaller number of somatic embryos was observed in cultivars Lima Verde and Westin. The best source of carbohydrate were maltose, followed by lactose at concentrations of 37 and 75 mM for cultivar Pêra, 37 mM for cultivar Natal, and 37, 75 and 110 mM for cultivar Hamlin.

O teste de frequência de micronúcleos (FMN) in vitro é uma das metodologias de escolha no desenvolvimento de testes de segurança toxicológica. Para o seu desenvolvimento no trabalho foram realizadas modificações da técnica convencional, relativas ao substrato de cultivo das células e à sua coloração. As culturas celulares foram desenvolvidas diretamente nas lâminas e a coloração foi realizada com laranja de acridina (AO) ao invés da coloração segundo Giemsa. Foram utilizados controles positivos com potenciais clastogênico (mitomicina C, benzo[a]pireno) e aneugênico (colchicina), recomendados pela OCDE (Organização para Cooperação e Desenvolvimento Econômico). Como moléculas-teste, foram utilizados compostos cuja associação a isótopos radioativos compõem radiofármacos produzidos pelo IPEN. DOTATATO e Ubiquicidina foram testados em diferentes concentrações proporcionais às concentrações máximas utilizadas em pacientes adultos. Para tanto, foram realizadas diluições correspondentes às concentrações 0,1X, 1X e 10X e culturas de células CHO-KI foram expostas a estas concentrações para ensaios de citotoxicidade e FMN. Nenhuma das concentrações induziu citotoxicidade significativa. Para análise de FMN, foram contabilizadas todas as células mononucleadas e multinucleadas até atingir a contagem de 1000 células binucleadas, com ou sem micronúcleos. Desta maneira foi possível analisar a frequência de micronúcleos e o índice de proliferação (CBPI). As concentrações dos fármacos em teste (0,1X, 1X e 10X) não induziram agressão às células. Nenhuma das concentrações revelou citotoxicidade ou genotoxicidade, ou ainda qualquer alteração no ciclo celular em comparação aos controles, comprovando sua segurança conforme os parâmetros exigidos pelas normas internacionais. Os resultados mostraram também uma boa concordância entre a comparação das leituras realizadas por analistas independentes, com pequenas discrepâncias discutíveis, e boa correlação com resultados obtidos com a coloração convencional. Desta maneira as modificações realizadas na técnica de FMN mostraram potencial para cumprir todos os quesitos como teste pré-clínico. / The in vitro micronucleus frequency test (FMN) is one method of choice in the development of toxicological safety tests. For its development, this work carried out modifications of the conventional technique regarding the cultivation substrate of the cells and staining for microscopy evaluation. The cell cultures were grown directly on slides, and staining was performed with acridine orange (AO) instead of the classical Giemsa staining. Positive controls were used for potential clastogenic (mitomycin C, benzo [a] pyrene) and aneugenic (colchicine) effects, recommended by the OECD (Organization for Economic Cooperation and Development). As test molecules, compounds were used whose association with radioactive isotopes make up radiopharmaceuticals produced by IPEN. DOTATATE and Ubiquicidine were tested at different concentrations proportional to the maximum concentrations used in adult patients. Therefore, corresponding to the concentrations dilutions were performed 0.1X, 1X and 10X cultures and CHO-KI cells were exposed to these concentrations for cytotoxicity assays and FMN. None of the concentrations induced significant cytotoxicity. For FMN analysis, it was recorded every mononuclear cells and multinucleated up to 1000 counts binucleated cells with or without micronuclei. In this way it was possible to analyze the frequency of micronuclei and the proliferation index (CBPI). The concentrations of the test drug (0.1X, 1X and 10X) did not induce aggression to cells. None of the concentrations showed cytotoxicity and genotoxicity, or any changes in cell cycle compared to controls, demonstrating their safety according to the parameters required by international standards. The results also showed good agreement between the comparison of readings by independent analysts, with minor discrepancies debatable, and good correlation comparing to classical staining technique. Thus the changes made in FMN technique showed potential to fulfill all requirements as preclinical test.

A embriogênese somática é uma técnica alternativa com potencial aplicação na propagação clonal de plantas, além de ser uma excelente ferramenta para estudos básicos e análise dos eventos moleculares e bioquímicos que ocorrem durante a embriogênese vegetal. Contudo, apesar de várias pesquisas relativas a embriogênese somática, a falta de conhecimento sobre os fatores que controlam o fenômeno, comprova que existem ainda muitos pontos a serem entendidos sobre o processo. Deste modo, o presente estudo foi concebido com o intuito de estudar a embriogênese somática de duas espécies de citros, as quais apresentam diferentes graus de eficiência na produção de embriões somáticos. Inicialmente, buscou-se avaliar comparativamente o processo de embriogênese somática de duas espécies de citros, observando-se as diferenças estruturais através de análises histológicas e histoquímicas, e as diferenças na expressão do gene AtSERK1 nos calos, através de hibridização in situ. Para instalação dos experimentos, foram utilizados calos provenientes de nucelos de duas espécies, Citrus sinensis L. Osbeck, variedade Valência, e Citrus limonia Osbeck, variedade limão ‘Cravo’. Amostras de calos em meio de multiplicação, em meio de obtenção de embriões, e embriões somáticos nas diferentes fases de desenvolvimento foram coletados para observações anatômicas e histoquímicas através de microscopia óptica e realização de estudo da expressão gênica através de hibridização in situ. Com relação à morfologia, os principais resultados obtidos demonstraram que existem diferenças anatômicas e histoquímicas entre calos de limão ‘Cravo’ e ‘Valência’. Em relação à expressão gênica, os resultados evidenciaram a expressão do gene AtSERK1 em calos das duas espécies de citros, tanto em meio de multiplicação, com sacarose, como em meio de indução, com maltose, indicando que o potencial embriogênico já está instalado no calo em meio de multiplicação. Pode-se concluir também que este gene é conservado entre Arabidopsis e Citrus. Desenvolveram-se, também, experimentos para estudar os efeitos de alguns tratamentos (frio, dessecação, agrupamentos celulares) na otimização da indução e sincronização da embriogênese somática de C. sinensis, var. Valência. Neste sentido, calos nucelares de laranja ‘Valência’, procedentes do meio de multiplicação foram mantidos no mesmo meio líquido em agitador orbital a 200 rpm durante 24h e posteriormente peneirados de acordo com os tratamentos. As peneiras utilizadas apresentaram malhas de 150 µm (P1), 300 µm (P2) e 600 µm (P3). Além do efeito das peneiras também foram observados os efeitos de exposição ao frio (4 o C por quatro semanas, ausência de luz) e dessecação (27 o C, em placas de Petri na ausência de meio de cultura, seis dias, ausência de luz), sendo posteriormente mantidos em B.O.D., a 26 ± 1 o C e intensidade luminosa de 300 lux. Os resultados obtidos permitiram concluir que em relação ao desenvolvimento e produção de embriões somáticos o fator peneira foi superior ao fator estresse na freqüência embriogênica. O desenvolvimento de embriões somáticos em Citrus sinensis ocorre mais eficientemente a partir de agrupamentos celulares de tamanhos específicos. / Somatic embryogenesis is an alternative technique with potential application for clonal propagation of plants, and an excellent tool for basic studies and analysis of the molecular and biochemical events that occur during embryogenesis. However, although many studies have been done, the factors that control somatic embryogenesis are not completely understood. Thus, the present study proposes to evaluate aspects of somatic embryogenesis of two citrus species, which differ in efficiency for the production of somatic embryos. Initially, a comparison of the embryogenic process was done in terms of structural and histochemical analysis and evaluation of the expression of the gene AtSERK1 in callus cultures through in situ hybridization. For the experiments, callus cultures obtained from nucelli of two species, Citrus sinensis L. Osbeck, cv. Valencia, and Citrus limonia Osbeck, cv. Rangpur lime were used for anatomical and histochemical observations, callus samples from cultures in multiplication medium, in embryo induction medium, and somatic embryos in different stages of development were collected. Callus and embryo samples were also collected for analysis of gene expression through in situ hybridization. The anatomical and histochemical analysis showed differences between Rangpur lime and Valencia callus cultures. The in situ hybridization results evidenced the expression of the gene AtSERK1 in cultures of both citrus species, and also in both culture conditions: multiplication medium, with sucrose, and embryo induction medium, with maltose, indicating that the embriogenic potential is already installed in the callus cultures in multiplication medium. The results also lead to the conclusion that the gene is conserved between Arabidopsis thaliana and Citrus. Experiments aiming to synchronize the somatic embryogenesis formation in C. sinensis, cv. Valencia, were installed testing the effect of cold, desiccation and cell cluster size on somatic embryo formation. For that, callus cultures of ‘Valência’ sweet orange were cultivated in liquid medium in an orbital shaker, at 200 rpm, for 24h, and sieved through the following screens: 150 µm (P1), 300 µm (P2) and 600 µm (P3). The cell aggregates were then exposed to cold (4 o C, for four weeks, in the dark) and desiccation (27 o C, in Petri plates without culture medium, six days, in the dark) treatments, and cultured in incubators at 26 ± 1 o C and 300 lux of light intensity. The results lead to the conclusion that the separation of cultures in clusters of different sizes and the stress treatments were effective for synchronization and embryogenesis frequency. The size of cell clusters was the most important factor.

Nos últimos anos, novas estratégias têm sido desenvolvidas na obtenção de incrementos da produtividade agrícola associados à manutenção da qualidade do solo. No entanto, as terras agrícolas vêm perdendo a sua qualidade física decorrente dos processos de compactação a que estão sendo expostas. A compactação do solo, destaca-se a nível mundial como um dos principais responsáveis pela redução da produtividade das culturas. Pesquisas têm descrito o processo de compressão de solos formados sob a influência de clima temperado, bem como modelos que relacionam esse processo com os atributos intrínsecos dos solos. A informação disponível também demonstra que o processo de compactação depende do sistema de manejo de solo adotado. Entretanto, existe a necessidade de desenvolver estudos que permitam uma melhor compreensão do processo de compactação de solos desenvolvidos sob clima tropical. Nesse sentido, este trabalho testou a hipótese de que o processo de compactação e os indicadores derivados da curva de compressão de solos tropicais são influenciados diferenciadamente pelo sistema de manejo aplicado, devido às alterações que o mesmo induz nas propriedades físicas do solo. O objetivo geral deste estudo foi avaliar quantitativamente o processo de compactação e os indicadores "índice de compressão" e "pressão de preconsolidação" de solos submetidos a diferentes intensidades de tráfego em um pomar de laranja e diferentes intensidades de pisoteio animal em uma pastagem irrigada e obter, se possível, relações que permitam estimar esses indicadores a partir de propriedades do solo facilmente mensuráveis. Os objetivos específicos foram: i) determinar a influência de diferentes intensidades de tráfego no processo de compactação e nos parâmetros índice de compressão e pressão de preconsolidação de um Latossolo Vermelho Amarelo sob pomar de laranja e, a partir desses indicadores, avaliar a heterogeneidade da compactação; ii) avaliar a influência do pisoteio animal na compressibilidade de um Argissolo Vermelho submetido aos sistemas de pastejo rotacionado intensivo: irrigado e não irrigado; e iii) obter funções que permitam estimar a capacidade de suporte de carga do solo a partir de uma propriedade facilmente mensurável e de extrema importância para o crescimento de plantas: a resistência do solo à penetração. Os resultados referentes ao primeiro objetivo indicaram que o processo de compactação foi influenciado pela intensidade de tráfego, visto que os valores de pressão de preconsolidação diferiram nas posições de amostragem entre rodado, rodado e projeção da copa em relação à linha de cultivo. A pressão de preconsolidação resultou ser um indicador mais sensível que o índice de compressão na avaliação da heterogeneidade da compactação em áreas citrícolas. Os resultados obtidos no segundo objetivo revelaram diferenças na compressibilidade do solo, refletindo-se nas curvas de compressão uniaxial dos sistemas de pastejo rotacionado intensivo irrigado e não irrigado. Os sucessivos ciclos de pastejo induziram aumento da pressão de preconsolidação do solo nos dois sistemas de pastejo, sendo significativamente superior no sistema de pastejo rotacionado intensivo irrigado. No que se refere ao terceiro objetivo, foi determinada uma relação significativa, positiva e linear entre a pressão de preconsolidação e a resistência do solo à penetração medida no laboratório e no campo. Estes resultados possibilitam afirmar que a capacidade de suporte de carga do solo pode ser estimada a partir de uma propriedade física facilmente mensurável como a resistência do solo à penetração avaliada no campo. / In the last years new strategies have been developed to obtain increment of the agricultural productivity maintaining the soil quality. However, the agricultural lands quality is decreasing as a consequence of the soil compaction process. Soil compaction is considered as one of the main factors responsible for the reduction of the cultures productivity. Researches related to soils formed under the influence of temperate climate have described the process of soil compression, and developed models that relate this process with the soil intrinsic attributes. Studies have also shown that the soil compression process depends on the soil management practices. However, it is still necessary to develop studies that allow a better understanding the compaction process of soils developed under tropical climate. In this context, this research tested the hypothesis that the soil compaction process is influenced differently by the management practices, due to the alterations that induce on the soil physical properties. The general objective of this study was to evaluate quantitatively the compaction process, and the indicators "compression index" and "preconsolidation pressure" of soils submitted to different traffic intensities in an orchard, and different animal trampling intensities in an irrigated short duration grazing system, and to obtain relationships that allow to estimate these indicators using easily measurable soil attributes. The specific objectives were: i) to determinate the influence of different traffic intensities in the soil compaction process, and in the compression index and preconsolidation pressure of an Haplustox under an orange orchard, and to use these indicators to evaluate the soil compaction heterogeneity; ii) to evaluate the influence of the animal trampling on the soil compressibility of an Hapludalf submitted to two rotation short-duration grazing systems: not irrigated and irrigated; and iii) to obtain functions that allow to estimate the load support capacity using an easily measurable and very important soil property for plant growth; i.e. the soil resistance to penetration. The results related to the first objective indicated that the compaction process was influenced by the traffic intensity, since that the preconsolidation pressure values were different between the sampling positions; i.e., between wheel track, wheel track, canopy projection, and row. The preconsolidation pressure demonstrated to be a more sensitive indicator than the compression index in the evaluation of the soil compaction heterogeneity in an orange orchards. The results related to the second objective have indicated differences in the soil compressibility, which in turn were expressed in the soil compression curves of the irrigated and not irrigated rotation short-duration grazing systems. The successive grazing cycles have induced increases of the soil preconsolidation pressure values of the two grazing systems, being significantly greater in the irrigated rotation short-duration grazing system. The results related to the third objective have demonstrated the existence of a significant, positive and linear relationship between the preconsolidation pressure values and the soil mechanical resistance that were measured in the laboratory and in the field. These results make possible to state that the soil load support capacity can be estimated using an easily measurable soil property; i.e. the soil resistance to penetration.

Orientador: Durvalina Maria Mathias dos Santos / Coorientador: Camilo Lázaro Medina / Banca: Antonio Baldo Geraldo Martins / Banca: Dirceu de Mattos Júnior / Resumo: O huanglongbing (HLB) é considerada a mais severa doença em citros, foi constatada no Brasil em 2004 e desde então tem causado sérios danos à citricultura do país, podendo colocar em risco esse importante setor do agronegócio brasileiro. A doença é causada por bactérias limitadas ao floema. Os sintomas típicos das plantas são mosqueamento, ramos amarelos, frutos deformados e pequenos. Obstruções no floema, comuns no processo infeccioso também podem afetar a fotossíntese e as relações hídricas. Os sintomas do HLB podem ser mascarados por outros sintomas gerados a partir de algumas doenças, além do mais, tais sintomas podem ser confundidos com algumas deficiências minerais. O trabalho teve como objetivo verificar os efeitos do HLB no processo fotossintético, condutância estomática, transpiração, potencial hídrico e no conteúdo mineral das flores, folhas e ramos, em plantas de laranja 'Valência', visando conhecer as respostas fisiológicas nas plantas infectadas pela doença. Os tratamentos consistiram em plantas sadias; plantas doentes assintomáticas e plantas doentes sintomáticas. As trocas gasosas e relações hídricas foram medidas em dez/2011 e mar/2012. Para a estimativa da taxa de assimilação de carbono (A), condutância estomática (gs) e transpiração (E) foram selecionadas folhas de 8 a 9 meses de idade, porém evitou-se folhas com sintomas severos nas plantas sintomáticas, essas medidas foram realizadas às 8:00, 12:00 e 15:00 h. O potencial da água das folhas (Ψf) foi medido às 6:00 e 14:00 h, foram selecionados ramos com três folhas cada. Foram realizadas seis avaliações nutricionais para folhas e ramos, com intervalos de 30 dias cada, e as flores foram avaliadas apenas em Nov/2011. Os resultados evidenciaram que, A não foi alterada pela doença, mas a gs e a E apresentaram redução em plantas doentes, sintomáticas e assintomáticas, na ... / Abstract: The huanglongbing (HLB) is considered one of the most severe diseases of citrus. Since its discovery in Brazil in 2004, it has caused serious damage to the citrus production and industry in the country, making vulnerable this important sector of the Brazilian agribusiness. This disease is caused by phloemrestricted bacteria. Typical symptoms of plants are mottled, yellow branches, and small deformed fruits. Infected trees show phloem obstructions, which can also affect photosynthesis and water relations. The symptoms of HLB may be masked by other symptoms generated from some diseases, moreover, such symptoms can be confused with some mineral deficiencies. The objective of this study was to investigate the effects of HLB in the photosynthetic process, stomatal conductance, transpiration, water potential and mineral content of the flowers, leaves and branches on orange trees [Citrus sinensis (L.) Osbeck, 'Valencia'], to determine the physiological responses in plants infected by the disease. The treatments consisted of healthy plants, plants asymptomatic patients and symptomatic diseased plants. Gas exchange and water relations were measured in December/2011 and March/2012. To estimate the rate of carbon assimilation (A), stomatal conductance (gs) and transpiration (E) were selected leaves 8-9 months old, but was avoided leaves with severe symptoms in symptomatic plants, these measurements were performed 8:00 a.m., 12:00 a.m. and 3:00 p.m. The leaf water potential (Ψf) was observed during two day periods, at 6:00 a.m. and 2:00 p.m. Nutritional assessments were carried out for six leaves and branches, with intervals of 30 days each, and the flowers were evaluated only in November/2011. The results showed that A was not affected by the disease, but gs and E decreased in symptomatic and asymptomatic diseased plants, in the second evaluation. There was a reduction in Ψf at 2:00 p.m. Once ... / Mestre