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Busca de antígenos para diagnóstico da leishmaniose visceral canina : potencial uso e aplicação da proteína rLc36 /Nogueira, Camila Tita. January 2014 (has links)
Orientador: Márcia Aparecida Silva Graminha / Banca: Alexandra Ivo Medeiros / Banca: Flávio Henrique da Silva / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Pio Colepicolo Neto / Resumo: A leishmaniose visceral, forma clínica mais severa das leishmanioses, pode ser fatal se não tratada. Cães infectados são reservatórios potenciais da doença, sendo um diagnóstico específico e cuidadoso requerido para a identificação dos animais infectados, com o objetivo de promover um melhor controle epidemiológico e, consequentemente, controlar a transmissão da doença para o homem. Diversos trabalhos na literatura descrevem vários testes utilizados atualmente para diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC), porém, apresentam variada especificidade e sensibilidade. Dessa forma, o desenvolvimento de um teste diagnóstico com maior sensibilidade e especificidade se torna importante para correta identificação de cães infectados. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar a proteína rLc36, codificada por um gene exclusivo de Leishmania infantum, quanto ao potencial antigênico para desenvolvimento de um teste diagnóstico mais sensível e específico para LVC baseado no ensaio ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Diferentes concentrações desta proteína foram testadas por ELISA usando soros de cães infectados com LV e soros de cães não infectados. A concentração de 1,0μg/mL de rLc36 foi capaz de diferenciar os soros positivos dos soros negativos e apresentou sensibilidade de 85% e especificidade de 71%, em um teste com 95% de confiança, mostrando que a proteína rLc36 é antigênica e apresenta potencial para ser aplicada no desenvolvimento de um kit diagnóstico. A proteína rLc36 foi testada em associação com a proteína A2, o qual já foi previamente avaliado como antígeno no diagnóstico sorológico da leishmaniose, e foi possível observar aumento na sensibilidade do teste (77%), mas não na especificidade (79%). Soros de outras parasitoses foram testados frente à proteína rLc36. Foi possível observar reatividade com os soros positivos para babesiose... / Abstract: Visceral leishmaniasis, the most severe clinical form of the leishmaniasis, can be fatal if untreated. Infected dogs are potential reservoirs of the disease, being a specific and careful diagnosis required for identification of the infected animals, with the aim of promoting a better epidemiological control and consequently control the transmission of the disease to humans. Several works in the literature describe various tests used for diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL), however, they show varied specificity and sensitivity. In this way, the development of a diagnosis test with greater sensitivity and specificity becomes important for the correct identification of infected dogs. Thus, the development of a more sensitive and specific diagnosis test based on recombinant antigens may contribute in the correct identification of dogs truly infected and thus contribute to the more effective control of the transmission of the disease. The present work had as objective to characterize the protein rLc36, encoded by a gene unique to Leishmania infantum, for the antigenic potential for development of a more sensitive and specific test for CVL based on the ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Different protein concentrations were tested by ELISA using sera from dogs infected with LV and sera from non-infected dogs. The concentration of 1.0μg/mL of rLc36 protein was able to differentiate positive from negative sera and showed sensitivity of 85% and specificity of 71% on a test with 95% of confidence, showing that the protein rLc36 is antigenic and has potential for be applied in a new diagnosis test. The rLc36 protein was tested in association with the A2 protein, which was previously assessed as antigen in serological diagnosis of leishmaniasis, and it was possible to observe an increase in the sensitivity of the test (77%), but no increase was observed in the specificity (79%). Sera from... / Doutor
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Epidemiologia genética em leishmaniose visceral: Estudo de associação com a população de Bauru - SP / Genetic epidemiology in visceral leishmaniasis: Association study with population of Bauru-SP.Valezi, Keren Bastos 01 November 2017 (has links)
Submitted by KEREN BASTOS VALEZI null (keren.valezi@hotmail.com) on 2017-12-18T18:47:58Z
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Dissertação de Mestrado Keren Valezi.pdf: 1447594 bytes, checksum: 988c2b1fc1fbd371daf1230457df1fa9 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2017-12-19T14:03:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2017-11-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A leishmaniose é uma doença antropozoonótica causada pelo protozoário do gênero Leishmania. Ele apresenta três formas clínicas, conhecidas como leishmaniose visceral, leishmaniose cutânea e leishmaniose mucocutânea. A leishmaniose visceral afeta dois milhões de indivíduos anualmente no mundo. Os fato res genéticos envolvidos na interação hospedeiro - parasita foram associados ao desfecho clínico da doença. Este estudo investigou pela primeira vez a associação de polimorfismos nos genes candidatos IL10, NOD2 e TLR1 com leishmaniose visceral na população b rasileira. Para isso, escolhemos três marcadores anteriormente associados a infecções causadas por parasitas intracelulares na população brasileira. Nós genotipificamos 135 pacientes e 380 controles saudáveis. A presença do alelo G do rs4833095 no gene TLR 1 foi fortemente associada à susceptibilidade a esta doença: análise do alelo G (OR 2.04; IC 1.22 - 3.39; p - value 0.0061); Análise do genótipo GG (OR 3,87; 95 %IC 1,85 - 8,08, p - valor 0,0003); Análise de portadores de G (OR 2,5; 95 %IC 1,33 - 5,00; valor p 0,0047) . Para o gene NOD2, também encontramos uma associação para o genótipo AA (OR 2.07 95 %IC 1.05 - 4.05, p - value 0.0335) do polimorfismo rs8057341. Finalmente, poderíamos confirmar a associação do marcador rs1800871 na região promotora do gene IL10 com susceptib ilidade à leishmaniose visceral, para o genótipo TT (OR 2,34; CI 95 %IC 1,11 - 4,94 p - value 0,0245). Conclusão. Nossos dados demonstram pela primeira vez a associação desses genes candidatos com leishmaniose visceral na população brasileira, colocando esses ma rcadores como candidatos fortes na composição de futuros painéis genéticos para prever o risco de infecções na população brasileira e para estudos de meta - análise em visceral leishmaniose / 193614-1
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Relação entre a expressão de miRNAs em células mononucleares de sangue periférico e carga parasitária na leishmaniose visceral canina. /Bragato, Jaqueline Poleto January 2017 (has links)
Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Flávia Lombardi Lopes / Banca: Alexandra Ivo Medeiros / Resumo: A Leishmaniose Visceral (LV) no homem é uma doença crônica e frequentemente fatal se não tratada. A doença possui alta taxa de mortalidade e a região de Araçatuba concentra grande número de casos no estado de São Paulo. A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) constitui um grave problema de Saúde Pública, pois os animais infectados são potentes transmissores do parasita para humanos pelo vetor flebotomínio. O cão é, portanto, um alvo importante nas medidas de controle. A progressão da infecção canina é acompanhada por falha na imunidade celular com redução de linfócitos circulantes e citocinas que suprimem a função dos macrófagos. A função da célula T na indução da resposta celular é determinante para a eliminação do parasita no interior dos macrófagos. Embora a supressão imunológica já esteja caracterizada, os fatores determinantes são pouco conhecidos. Recentes estudos mostraram que a regulação da função efetora dos macrófagos e células T parece depender de microRNAs (miRNAs). Existem muitas evidências da função dos miRNAs na regulação da expressão de proteínas que são fundamentais para o desenvolvimento, função e diferenciação de vários tipos celulares do sistema imunológico. Uma desregulação da atividade dos miRNAs está envolvida em diversas doenças, incluindo a LV. Na LVC, devido a supressão imunológica celular ser determinante para a progressão da doença, o conhecimento de miRNAs associados a regulação imunológica pode ser importante para a mudança do padrão de resposta. / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL) in humans is a chronic and often fatal disease if left untreated. The disease has high mortality rate, and the region of Araçatuba concentrates a large number of cases in São Paulo state. Canine VL (CVL) is a serious public health problem, because infected animals are potent transmitters of the parasite to humans by the vector phlebotomine. Therefore, dogs are important targets in the control measures. The progression of canine infection is accompanied by a failure of cellular immunity with reducing of circulating lymphocytes and cytokines that suppress the macrophage function. The role of T cells in the induction of cellular response is crucial to the elimination of the parasite in macrophages. Although immunosuppression is already characterized, the determining factors are not well known. In the last decade studies have shown that regulation of effector function of macrophages and T cells appears to depend on microRNAs (miRNAs). There are many evidences of function of miRNA in regulating of the expression of proteins that are primordial for the development, function and differentiation of various cell types of the immune system. A deregulation of miRNA expression is involved in a variety of disorders including VL. In CVL, due to cell immune suppression be determinant of disease progression, knowledge of miRNAs associated with immune regulation may be important for change the response pattern. / Mestre
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Método para análise de aspirado esplênico de cão: desenvolvimento de ferramentas aplicáveis ao monitoramento de variações de populações leucocitárias na Leishmaniose visceralMelo, Stella Maria Barrouin 26 July 2005 (has links)
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Tese_ICS_ Stella Maria Barrouin Melo.pdf: 6932001 bytes, checksum: 1c1b31148e3f9f81603b9c379d57ccdc (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-08-31T12:14:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Tese_ICS_ Stella Maria Barrouin Melo.pdf: 6932001 bytes, checksum: 1c1b31148e3f9f81603b9c379d57ccdc (MD5) / Introdução: Este estudo centrou-se no desenvolvimento de um método para análise
do baço do cão como órgão-alvo de avaliação diagnóstica, objetivando caracterizar
componentes celulares da resposta imune in situ na infecção por Leishmania
chagasi, dado o papel desse animal como reservatório em áreas endêmicas da
doença. Metodologia: O estudo foi desenvolvido em uma seqüência de
experimentos, envolvendo cães sadios e portadores de leishmaniose visceral canina
(LVC) para: (i) determinar a sensibilidade de testes parasitológicos realizados com
amostras de aspirados esplênicos e do linfonodo poplíteo no diagnóstico
confirmatório da infecção em 64 cães soropositivos para anticorpos anti-Leishmania;
(ii) avaliar a segurança da biópsia aspirativa com agulha fina em cães, como
procedimento para obtenção de amostras para análise em laboratório, sendo a
técnica utilizada em 209 animais que apresentavam condições clínicas variando de
ausência de sinais a quadros terminais de LVC; e (iii) padronizar técnicas para a
análise de amostras de baço, por meio de coloração citoquímica com corante de
Wright e hematoxilina-eosina, e marcação imunocitoquímica com anticorpos
monoclonais, e aplicá-las na avaliação da composição celular esplênica de 14 cães
saudáveis e 15 portadores de LVC. Resultados: Na primeira abordagem, foi obtida
uma taxa de detecção de parasitos de 74% em aspirados esplênicos, em
comparação com 18% em aspirados de linfonodo, indicando o uso de aspirados de
baço como amostras de escolha para o diagnóstico parasitológico da doença. Em
seguida, a avaliação do risco potencial da punção aspirativa de baço, objetivando a
obtenção de amostras para análise das células do sistema imune do cão nesse
órgão, mostrou que o procedimento não causou efeitos adversos e pôde ser
considerado eficaz e seguro. Na etapa subseqüente, o método desenvolvido
permitiu a identificação de diferenças significativas entre as populações de
leucócitos esplênicos e do sangue periférico nos diferentes grupos, incluindo
alterações associadas à doença. Todos os resultados são discutidos. Conclusão: A
avaliação de aspirados de baço com o método proposto constitui uma contribuição
potencial ao estudo do sistema imune do cão, com a perspectiva de ser aplicado
como uma ferramenta analítica no monitoramento da resposta imune esplênica in
situ em pesquisas com imunoterápicos e preparações candidatas a vacina contra a
LVC
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Leishmaniose visceral em crianças de zero a cinco anos em Araguaína – TO, no período de 2011 a 2013.Lemos, Maria Deuzina Alves 20 July 2016 (has links)
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DISS MARIA DEUZINA LEMOS. MP 2016.pdf: 392236 bytes, checksum: bd64c0393869628da0d0e1418628710d (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2017-03-13T14:54:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1
DISS MARIA DEUZINA LEMOS. MP 2016.pdf: 392236 bytes, checksum: bd64c0393869628da0d0e1418628710d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T14:54:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1
DISS MARIA DEUZINA LEMOS. MP 2016.pdf: 392236 bytes, checksum: bd64c0393869628da0d0e1418628710d (MD5) / No Brasil, a incidência de leishmaniose visceral, conhecida como calazar, é alta, com uma média de dois casos por 100.000 habitantes por ano. A pesquisa analisa os fatores relacionados à necessidade de internação por leishmaniose visceral em crianças de zero a cinco anos internadas no Hospital de Doenças Tropicais de Araguaína no período de 2011 a 2013. Descrevendo as características epidemiológicas da leishmaniose visceral no município de Araguaína – TO. E os aspectos clínicos, laboratorial, opções terapêuticas durante a internação e o processo evolutivo da leishmaniose visceral. É um estudo transversal descritivo que utilizou o sistema de informação (SINAN) e os prontuários de internação das crianças hospitalizadas no período em estudo. Foram analisados 407 prontuários 207/50,8%) do sexo masculino (200/49%) do sexo feminino; Raça parda; com uma distribuição de crianças < de 1 ano a 1 anos como as mais acometidas pela LV. A média do tempo de hospitalização foi de 13 dias; 70% dos casos tiveram outras doenças associadas, Pneumonia, broncopneumonia, septicemia não específica. A medicação mais utilizada como 1ª escolha foi antimonial pentavalente, 2ª Anfotericina B e os casos mais graves Anfotericina B lipossomal. O início dos sintomas foi em médias de 15 dias. Entre as formas clínicas das leishmanioses, a leishmaniose visceral (LV) ou calazar constitui-se na mais grave, pois, quando não tratada adequadamente, determina elevados índices de letalidade.
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Relação do tecido adiposo e das adipocinas com os parâmetros bioquímicos e imunológicos na leishmaniose visceral expreimentalSousa, Adenilma Duranes 26 October 2016 (has links)
Submitted by PMBqBM null (pmbqbm@ufba.br) on 2017-05-09T15:56:30Z
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Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-28T14:01:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1
Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-28T14:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / As leishmanioses são infecções causadas pelo tripanosomatídeo Leishmania sp.
Estima-se que 350 milhões de pessoas estão sob o risco de contrair leishmaniose, em
todo mundo. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma clínica mais grave da doença.
Os principais sintomas apresentados são febre prolongada, hepatomegalia,
esplenomegalia, hipergamaglobulinemia, pancitopenia, perda de peso, e em casos
não tratados, óbito. Algumas alterações bioquímicas e metabólicas são observadas
na VL, principalmente aumento das concentrações plasmáticas de triglicerídeos,
colesterol e LDL. O tecido adiposo e as adipocinas, podem participar da regulação da
resposta imune em processos inflamatórios e em diversas infecções. O objetivo geral
desse trabalho foi investigar a relação do tecido adiposo e das adipocinas com
parâmetros bioquímicos e imunológicos observados na leishmaniose visceral
experimental. Foram utilizados 41 hamsters dourados (Mesocricetus auratus) machos
adultos, com peso médio de 132 gramas. Os animais foram infectados com 1X105
promastigota de L. infantum na derme da orelha. A eutanásia ocorreu 4 e 8
meses após a infecção. O Tecido adiposo, o baço e o fígado foram coletados, pesados
e acondicionados em solução de conservação. A carga parasitária do baço e fígado,
foi avaliada por meio da técnica de diluição limitante. A expressão das citocinas no
baço foi avaliada por meio da realização do qRT-PRC. Os parâmetros bioquímicos e
as adipocinas foram dosadas no soro. Foi realizada a análise histopatológica e a
morfometria do tecido adiposo corado por HE. As análises estatísticas foram
realizadas usando o Software GraphPad Prism 5.0. Os animais infectados
apresentaram perda de peso e esplenomegalia no oitavo mês de infecção. Os animais
apresentaram carga parasitária moderada, tanto no baço, quanto no fígado. Não
houve diferença na expressão das citocinas, nem na concentração sérica dos
parâmetros bioquímicos e das adipocinas. A carga parasitária do baço e do fígado
apresenta correlação negativa com os níveis de albumina. A carga parasitária do baço
apresentou correlação negativa com os níveis de colesterol total. A Análise de
correlação das adipocinas, mostrou que a adiponectina está correlacionada
negativamente com as concentrações de glicose e albumina dos animais controles. E
a leptina apresentou correlação negativa com o peso relativo do baço no grupo dos
animais controle e correlação positiva com as concentrações séricas de triglicérides e
VLDL, em ambos os grupos. Adicionalmente, a leptina apresentou correlação positiva
com a carga parasitária do baço e com o peso relativo do tecido adiposo epididimal e
retroperitoneal. Já as concentrações de HDL estão correlacionadas negativamente
com os níveis de leptina, em hamster infectados com L. infantum. As análises de
correlação mostraram que leptina tem relação com o estabelecimento da LV em
hamsters.
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Relação do Tecido Adiposo e das Adipocinas com os Parâmetros Bioquímicos e Imunológicos na Leishmaniose Visceral ExperimentalSousa, Adenilma Duranes 26 October 2016 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-26T18:31:12Z
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Dissertação_ICS_ Adenilma Duranes Sousa.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / As leishmanioses são infecções causadas pelo tripanosomatídeo Leishmania sp.
Estima-se que 350 milhões de pessoas estão sob o risco de contrair leishmaniose, em
todo mundo. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma clínica mais grave da doença.
Os principais sintomas apresentados são febre prolongada, hepatomegalia,
esplenomegalia, hipergamaglobulinemia, pancitopenia, perda de peso, e em casos
não tratados, óbito. Algumas alterações bioquímicas e metabólicas são observadas
na VL, principalmente aumento das concentrações plasmáticas de triglicerídeos,
colesterol e LDL. O tecido adiposo e as adipocinas, podem participar da regulação da
resposta imune em processos inflamatórios e em diversas infecções. O objetivo geral
desse trabalho foi investigar a relação do tecido adiposo e das adipocinas com
parâmetros bioquímicos e imunológicos observados na leishmaniose visceral
experimental. Foram utilizados 41 hamsters dourados (Mesocricetus auratus) machos
adultos, com peso médio de 132 gramas. Os animais foram infectados com 1X105
promastigota de L. infantum na derme da orelha. A eutanásia ocorreu 4 e 8
meses após a infecção. O Tecido adiposo, o baço e o fígado foram coletados, pesados
e acondicionados em solução de conservação. A carga parasitária do baço e fígado,
foi avaliada por meio da técnica de diluição limitante. A expressão das citocinas no
baço foi avaliada por meio da realização do qRT-PRC. Os parâmetros bioquímicos e
as adipocinas foram dosadas no soro. Foi realizada a análise histopatológica e a
morfometria do tecido adiposo corado por HE. As análises estatísticas foram
realizadas usando o Software GraphPad Prism 5.0. Os animais infectados
apresentaram perda de peso e esplenomegalia no oitavo mês de infecção. Os animais
apresentaram carga parasitária moderada, tanto no baço, quanto no fígado. Não
houve diferença na expressão das citocinas, nem na concentração sérica dos
parâmetros bioquímicos e das adipocinas. A carga parasitária do baço e do fígado
apresenta correlação negativa com os níveis de albumina. A carga parasitária do baço
apresentou correlação negativa com os níveis de colesterol total. A Análise de
correlação das adipocinas, mostrou que a adiponectina está correlacionada
negativamente com as concentrações de glicose e albumina dos animais controles. E
a leptina apresentou correlação negativa com o peso relativo do baço no grupo dos
animais controle e correlação positiva com as concentrações séricas de triglicérides e
VLDL, em ambos os grupos. Adicionalmente, a leptina apresentou correlação positiva
com a carga parasitária do baço e com o peso relativo do tecido adiposo epididimal e
retroperitoneal. Já as concentrações de HDL estão correlacionadas negativamente
com os níveis de leptina, em hamster infectados com L. infantum. As análises de
correlação mostraram que leptina tem relação com o estabelecimento da LV em
hamsters.
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Leishmaniose visceral em crianças de zero a cinco anos em Araguaína – TO, no período de 2011 a 2013Lemos, Maria Deuzina Alves 20 June 2016 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-17T18:39:48Z
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dois casos por 100.000 habitantes por ano. A pesquisa analisa os fatores relacionados à necessidade de
internação por leishmaniose visceral em crianças de zero a cinco anos internadas no Hospital de
Doenças Tropicais de Araguaína no período de 2011 a 2013. Descrevendo as características
epidemiológicas da leishmaniose visceral no município de Araguaína – TO. E os aspectos clínicos,
laboratorial, opções terapêuticas durante a internação e o processo evolutivo da leishmaniose visceral.
É um estudo transversal descritivo que utilizou o sistema de informação (SINAN) e os prontuários de
internação das crianças hospitalizadas no período em estudo. Foram analisados 407 prontuários 207/
50,8%) do sexo masculino (200/49%) do sexo feminino; Raça parda; com uma distribuição de
crianças < de 1 ano a 1 anos como as mais acometidas pela LV. A média do tempo de hospitalização
foi de 13 dias; 70% dos casos tiveram outras doenças associadas, Pneumonia, broncopneumonia,
septicemia não específica. A medicação mais utilizada como 1ª escolha foi antimonial pentavalente, 2ª
Anfotericina B e os casos mais graves Anfotericina B lipossomal. O início dos sintomas foi em médias
de 15 dias. Entre as formas clínicas das leishmanioses, a leishmaniose visceral (LV) ou calazar
constitui-se na mais grave, pois, quando não tratada adequadamente, determina elevados índices de
letalidade.
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Detection of parasite antigens in Leishmania infantum infected spleen tissues by piezoelectric based immunosensorsMiranda, Gustavo Cabral de 10 June 2013 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-06-10T19:36:18Z
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Dissertação_ICS_Gustavo Miranda.pdf: 1853807 bytes, checksum: f9a1c2b796442124414bba8e163ac719 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-10T19:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação_ICS_Gustavo Miranda.pdf: 1853807 bytes, checksum: f9a1c2b796442124414bba8e163ac719 (MD5) / Doenças como a leishmaniose é uma importante causa de morbidade e mortalidade no
Brasil e seus diagnósticos devem ser melhoradas. A produção de anticorpos
monoclonbais anti-L. infantum e acoplamento ao sensor piezoelétrico, para formar um
dispositivo bioeletrônicos capaz de detectar rapidamente antígenos de Leishmania sp,
tanto qualitativa como quantitativamente, é uma alternativa promissora para o
diagnóstico da leishmaniose, devido à sua alta especificidade e sensibilidade,
portabilidade e baixo custo, em comparação aos métodos convencionais. Objetivo:
Desenvolver um imunossensor capaz de detectar antígenos de L. infantum em tecidos de
animais infectados. Material e Método: Quatro hibridomas produtores de anticorpos
monoclonais anti-amastigota de L. infantum teve sua especificidade confirmada por
ELISA. Esses anticorpos foram imobilizados sobre um cristal piesoelétrico de quartzo
através de uma fina camada de 2-aminoetanotiol (cisteamina) e glutaraldeído, e
submetidos a injeções de extratos de baço de hamster infectados e não-infectados com
L. infantum. Resultados: Quatro anticorpos (5A9H8, 2B7B8, 4B6F7 e 5AB3A10B4),
todos da classe IgG, foram acoplados à superfície do transdutor e foram capazes de
reagir contra extrato de baço de hamster infectado com L. infantum. A metodologia
desenvolvida foi capaz de detectar 3,5x10
4
amastigotas por grama de tecido infectado
com os anticorpos 5A9H8, 4B6F7 e 5AB3A10B4, e 1,75x10
4
com o anticorpo 2B7B8.
Conclusões: Os resultados demonstraram que este teste pode ser útil para quantificar
amastigotas de L. infantum em órgãos de animais experimentais para estudos sobre a
patogênese da leishmaniose visceral americana e é uma ferramenta promissora para
desenvolver um diagnóstico de leismanioses humana e canina. / Salvador
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Estudos sobre Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Psychodidae: Phebotominae): hábitos alimentares, infecção natural por Leishmania (Leishmania) infantum chagasi (Cunha & Chagas, 1937) e correlação com a expansão daleishmaniose visceral americana / Studies of Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva, 1912) (Diptera: Psychodidae: Phebotominae): eating habits, natural infection by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi (Cunha & Chagas, 1937) and correlation with the expansion of American visceral leishmaniasisAfonso, Margarete Martins dos Santos January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / A Leishmaniose Visceral Americana (LVA) no Brasil é um importante problema de Saúde Pública, cuja expansão geográfica tem possibilitado o seu eselecimento em áreas urbanas das médias e grandes cidades. Desta forma, ressalta-se a importância da produção de conhecimentos sobre os fatores determinantes associados ao novo perfil epidemiológico. Este estudo procurou identificar fatores da expansão e urbanização dovetor, Lutzomyia (L.) longipalpis, numa abordagem ampla no contexto epidemiológico da LVA, considerando múltiplas interações: ambiente, parasita e reservatórios. Os objetivos foram: discutir os estudos sobre hábitos alimentares de insetos vetores de patógenos humanos, com ênfase na subfamília Phlebotominae; analisar os fatores associados ao processo de expansão e urbanização da LVA; discutir a expansão da LVA no Estado do Tocantins correlacionando incremento de desflorestamento, estratificação da doença, classes do uso do solo e presença do vetor L. (L.) longipalpis; diagnosticar a infecção natural por Leishmania (L.) infantumchagasi em associação com a fonte alimentar, através de métodos moleculares, em exemplares de L. (L.) longipalpis procedentes dos municípios de Araguaína (TO), Fortaleza (CE), Sobral (CE), e Rio de Janeiro (RJ). No atual cenário das mudanças ambientais, é fundamental a condução de estudos voltados para as doenças relacionadas ao ambiente, como a LVA. Nesta perspectiva, pesquisas sobre o vetor L. (L.) longipalpis devem produzir conhecimentos que permitam entender a epidemiologia da doença, além de subsidiar o planejamento de estratégias de controle. A análise ecoepidemiológica da LVA em Tocantins revelou que, dos 139 municípios, 120 apresentaram registros de casos humanos. / As áreas de incremento do desmatamento se mantiveram frequentes, principalmente na região norte,onde se observa elevado número de casos humanos. Em relação ao perfil de estratificação, 40% dos municípios apresentaram expansão da LVA. Lutzomyia (L.) longipalpis se mostrou presente em todas as classes do uso do solo, com correlação negativa apenas para pastagem cultivada. Em relação ao registro anual de casos humanos de LVA, dentre as áreas que apresentaram correlação positiva com maior frequência destacam-se áreas de influência urbana e ambiente urbanizado. A avaliaçãodos hábitos alimentares em flebotomíneos é capaz de responder questões importantes sobre o comportamento, ecologia e adaptação dos vetores. Dentre as técnicas já descritas, as mais utilizadas ainda são as técnicas imunológicas, embora as técnicas moleculares vem sendo empregadas com maior frequência, pois permitem de forma mais sensível a identificação da fonte alimentar e da infecção natural. Tais informações são importantes, não apenas para um melhor conhecimento acerca dos vetores, mas também sobre potenciais reservatórios de Leishmania. Em relação à preferência alimentar, L. (L.) longipalpis apresentou índice de positividade de 29,3% relacionado com fonte alimentar humana, seguido de cão e ave, não sendo encontradas fêmeas alimentadas em gambá. O índice geral de infecção natural por L. (L.) infantum chagasi foi de 4,51%, sendo 4,9% em Araguaína e 9,75% em Sobral. Das fêmeas infectadas de Araguaína, uma estava alimentada com sangue de cão e outra em sangue humano. Em Sobral, das quatro fêmeas infectadas, três estavam alimentadas em sangue humano.
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