Orientador: Noma Sueli Pinheiro Modolo / Resumo: Introdução: a lesão por isquemia-reperfusão (LIR) é uma importante causa de lesãorenal aguda experimentada na prática clínica. A restauração da perfusão aos tecidosapós um período de isquemia inicia uma cascata de inflamação associada ao acúmulode íons, formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), disfunção endotelial eativação imune. O condicionamento isquêmico é a aplicação de breves ciclos deinterrupção seguidas de restauração do fluxo sanguíneo, tendo o objetivo de adaptaros tecidos à isquemia. Pode ser aplicado antes do estímulo principal, como précondicionamento(PCI), ou depois, sendo denominado pós-condicionamento (PCoI).Metodologia: estudo experimental realizado com 40 ratos wistar, divididos em cincogrupos para análise comparativa: Sham (S): laparotomia; Controle (C): laparotomia e30 min de isquemia; Pré-condicionamento (PRE): laparotomia, PCI e 30 min deisquemia; Pré e Pós-condicionamento (PRE/POS): laparotomia, PCI, 30 min deisquemia e PCoI; Pós-condicionamento (POS): laparotomia, 30 min de isquemia ePCoI. A comparação entre os grupos foi realizada pela análise bioquímica sérica decreatinina, ureia, lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos (NGAL) e histolologia.Resultados: apenas o grupo Sham apresentou valores estatisticamente menores dosmarcadores de lesão renal e menor incidência de lesão tubular renal à histologia(S<C=PRÉ=PRÉ/PÓS=PÓS).Discussão e conclusão: no presente estudo, o PCI e o PoCI, isoladamente ou emc... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: Ischemia-reperfusion injury (IRI) is an unavoidable aspect of transplantation, as well as an important cause of acute kidney injury in clinical practice. Restoration of the blood supply after an ischemic period activates an inflammatory cascade associated with multiple processes, including ion accumulation, free reactive oxygen species (ROS) formation, endothelial dysfunction, and immune activation. Ischemic “conditioning” refers to the application of a brief series of ischemic periods followed by reperfusion in the setting of major ischemia. In ischemic preconditioning (IPC), the conditioning stimulus is applied before the major ischemic event, whereas in ischemic postconditioning (IPoC), it is applied after the event. Methods: Forty Wistar rats were randomized into five groups: Sham (S): laparotomy; Control (C): laparotomy and 30 min ischemia; Preconditioning (PRE): laparotomy, IPC, and 30 min ischemia; Preconditioning and Postconditioning (PRE/POST): laparotomy, IPC, 30 min ischemia, and IPoC; Postconditioning (POST): laparotomy, 30 min ischemia, and IPoC. Serum analyses of creatinine and neutrophil gelatinaseassociated lipocalin (NGAL) were performed, and renal histology was also examined. Results: Severe tubular injury and increases in creatinine were observed in all groups except the S group, and no significant differences were detected between the other groups (S<C=PRE=PRE/POST=POST). Conclusions: IPC and IPoC, together or separately, were unable to exert a... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Norma Sueli Pinheiro Modolo / Resumo: Justificativa: Durante lesão de isquemia e reperfusão renal ocorre a inativação de óxido nítrico (NO), essa inativação diminui o relaxamento arterial endotélio-dependente e independente. O aumento nos níveis de NO poderia melhorar a disfunção endotelial e o relaxamento arterial diminuindo a lesão renal. O NO, sintetizado a partir da L-arginina pela enzima óxido nítrico sintase (NOS), parece exercer um efeito protetor sobre os rins durante a lesão de isquemia/reperfusão (I/R). O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da L-arginina nos níveis dos biomarcadores de lesão (NGALp, NGALu, KIM-1 e IL-18) na função e na histopatologia renal em ratos submetidos a lesão de I/R.Métodos: 32 ratos Wistar foram randomizados em 4 grupos: Sham (S): Laparotomia e nefrectomia direita. Controle (C): Laparotomia e nefrectomia direita, I/R em rim esquerdo. Controle L-arginina (CLA): Laparotomia e nefrectomia direita, L-arginina na dose de 800mg.kg-1.dose-1, 24 e 1 hora antes. L-arginina (LA): Laparotomia e nefrectomia direita, I/R em rim esquerdo, L-arginina na dose de 800mg.kg-1.dose-1, 24 e 1 hora antes. Foram analisados os níveis de NGALp, NGALu, KIM-1 e IL-18, creatinina e histopatologia renal. Nível de significância: p<0,05.Resultados: Creatinina aumenta em todos os grupos com LA≈C>S≈CLA. A NGALp, aumenta em todos os grupos com evolução semelhante. A NGALu foi maior no grupo C e CLA em relação ao grupo LA e apresentou valores intermediários no grupo S. Os níveis de KIM-1 aumentam nos gru... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

A injúria renal aguda representa um estado de senescência precoce induzida por estresse, e as células-tronco mesenquimais podem ser uma alternativa para seu tratamento. Células-tronco jovens reduzem o fenótipo de envelhecimento em rins quando comparadas a células idosas. O objetivo deste estudo foi avaliar se o tratamento com jovens células-tronco mesenquimais derivadas de cordão umbilical humano podem interferir na senescência renal induzida por lesão de isquemia-reperfusão em ratos. Ratos machos foram submetidos ao modelo de isquemia de artérias renais bilateralmente por 45 minutos, com reperfusão após, e alguns animais receberam 1 X 106 células por via intraperitoneal após 6 horas da indução da lesão. Os animais foram eutanasiados no segundo ou no sétimo dia pós-isquêmico. No segundo dia após a lesão de isquemia-reperfusão, o tratamento com as células melhorou a filtração glomerular e a função tubular, melhorou a expressão renal de aquaporina-2 e reduziu a infiltração de macrófagos nos rins. Proteínas relacionadas à senescência (-galactosidase, p21, p16 e fator de transformação do crescimento ) e microRNAs (mir-29a e miR-34a) estiveram com a expressão aumentada após a isquemia-reperfusão, e houve redução nesses parâmetros com o tratamento. A redução na expressão de Klotho e o estado pró-oxidativo gerados pela isquemia-reperfusão também foram revertidos pelo tratamento. A senescência induzida pela injúria renal aguda é um processo independente de telômeros. Ao sétimo dia pós-lesão, os ratos isquêmicos mantinham defeito de concentração urinária, que foi revertido nos animais tratados. Além disso, o tratamento reduziu o índice de necrose tubular aguda em tecido renal e reduziu o infiltrado macrofágico túbulo-intersticial. O marcador pró-senescência p16 foi completamente restabelecido nos animais tratados. Nossos dados demonstram que o tratamento com jovens células-tronco mesenquimais derivadas de cordão umbilical humano atenua a resposta inflamatória e de estresse oxidativo que ocorre na injúria renal aguda, e reduz a expressão de proteínas e microRNAs relacionados à senescência. Nossos achados expandem as perspecivas para o tratamento da injúria renal aguda / Acute kidney injury represents a status of premature stress-induced senescence, and mesenchymal stem cells are an alternative for treatment. Young stem cells reduce aging phenotype in kidneys when compared to old cells. The objective of this study was to evaluate if treatment with young human umbilical cord mesenchymal stem cells could interfere in kidney senescence induced by renal ischemia-reperfusion in rats. Male rats were induced to ischemia-reperfusion injury by 45-minutes clamping of both renal arteries; some rats received 1X106 cells intraperitonally six hours later. Rats were euthanatized on post-renal ischemia reperfusion days two and seven. At day 2 after ischemia-reperfusion injury, treatment with cells improved glomerular filtration, tubular function, improved renal expression of aquaporin 2 and decreased macrophage kidney infiltration. Senescence-related proteins (?-galactosidase, p21, p16 and transforming growth factor ?) and microRNAs (miR-29a and miRNA-34a) were overexpressed after ischemia-reperfusion, and reversed by the treatment. The Klotho reduced expression and the pro-oxidative status induced by ischemia-reperfusion were reversed by the treatment. Senescence induced acute kidney injury is a telomere-independent process. At day 7, ischemic rats maintained urinary concentrating defect, which is reversed in treated animals. Moreover, treatment decreased the index of acute tubular necrosis in kidney tissue and decreased macrophage kidney infiltration. Senescence marker p16 was completely restored in treated animals. Our data demonstrate that young human umbilical mesenchymal stem cells treatment attenuates the inflammatory and oxidative stress response occurring in acute kidney injury, and reduces the protein and microRNA expression related to senescence. Our findings broaden the perspectives for the treatment of AKI

Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2016-09-15T18:30:05Z No. of bitstreams: 1 mauriciodenassaumachado_tese.pdf: 15169790 bytes, checksum: 44c4bba3d0bddeb188ec239527b863f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T18:30:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mauriciodenassaumachado_tese.pdf: 15169790 bytes, checksum: 44c4bba3d0bddeb188ec239527b863f1 (MD5) Previous issue date: 2014-05-07 / Introduction: Acute kidney injury is a complex syndrome characterized by rapid (hours or days) reduction in renal excretion that occurs in a wide variety of situations. It has wide variability of epidemiology and is a common complication in critically ill and intensive care patients. Acute kidney injury generate increased hospital costs and is associated with high mortality rates being independent predictor of death. Currently, three diagnostic criteria for acute kidney injury has been highlighted: RIFLE (Risk, Injury, Failure, Loss, and End-stage kidney disease), AKIN (Acute Kidney Injury Network) and KDIGO (Kidney Disease: Improving Global Outcomes). Objectives: To evaluate the incidence, morbidity and mortality associated with acute kidney injury (and its value as a predictor of 30-day mortality) in patients undergoing on-pump coronary artery bypass grafting (article 1), patients undergoing cardiac valve surgery (article 2), patients with elevated preoperative baseline creatinine (article 3) and, in general, in patients undergoing cardiac surgery (coronary artery bypass grafting or cardiac valve surgery) (article 4). Methods: (Article 1) Patients undergoing on-pump CABG from January 2003 to January 2008 (817 patients) were divided according to the AKIN classification in AKI (+) and AKI (-) patients. Multivariable logistic regression was used to determine independent predictors of 30-day mortality. (Article 2) Patients undergoing cardiac valve surgery from January 2003 to May 2010 (837 patients) were divided according to the presence of infective endocarditis. Cox regression analysis was used to determine independent predictors of 30-day mortality. (Article 3) Patients with elevated baseline serum creatinine underwent cardiac surgery (CABG or CVS) from January 2003 to June 2013 (918 patients) were evaluated to determine whether the development of post-operative acute kidney injury based on KDIGO criteria was an independent predictor of 30-day mortality. (Article 4) Patients undergoing cardiac surgery (CABG or CVS) between January 2003 and June 2013 (2804 patients) were evaluated to determine if acute kidney injury based on KDIGO criteria was an independent predictor of 30-day mortality. Results: (all articles) Patients who developed AKI postoperatively had more clinical complications. The 30-day mortality increased progressively in all stages of acute kidney injury. Based on AKIN and KDIGO criteria, AKI was an independent predictor of 30-day mortality. Conclusions: (all articles) In this population, acute kidney injury after cardiac surgery was an independent predictor of 30-day mortality. / Introdução: Disfunção renal aguda é uma síndrome complexa caracterizada pela rápida (horas ou dias) redução da excreção renal que ocorre em uma grande variedade de situações. Ela tem ampla variabilidade epidemiológica e é complicação comum em pacientes gravemente enfermos e de terapia intensiva gerando aumento dos custos hospitalares e associando-se a altas taxas mortalidade sendo preditor independente do risco de morte. Atualmente, três critérios diagnósticos para lesão renal aguda tem se destacado: RIFLE (Risk, Injury, Failure, Loss, and End-stage kidney disease), AKIN (Acute Kidney Injury Network) e KDIGO (Kidney Disease: Improving Global Outcomes). Objetivos: Avaliar a incidência, morbidade e mortalidade associada a lesão renal aguda (e seu valor como preditor de óbito em 30 dias) em pacientes submetidos a cirurgia de revascularização do miocárdio com CEC, pacientes submetidos a cirurgia valvar, pacientes com creatinina basal elevada no pré-operatório e, de maneira global, em pacientes submetidos a cirurgia cardíaca (revascularização do miocárdio ou cirurgia valvar). Métodos: (artigo 1) Pacientes submetidos a RM com CEC no período de janeiro de 2003 a janeiro de 2008 (817 pacientes) foram divididos de acordo com a classificação AKIN em LRA (+) e LRA (-). Regressão logística multivariada foi utilizada para determinação de preditores independentes para óbito em 30 dias; (artigo 2) Pacientes submetidos a cirurgia valvar no período de janeiro de 2003 a maio de 2010 (837 pacientes) foram divididos de acordo com a presença de endocardite infecciosa. Regressão de Cox foi usada para determinar preditores independentes para óbito em 30 dias; (artigo 3) Pacientes portadores de creatinina basal elevada (pré-operatório) submetidos a cirurgia cardíaca (RM ou CV) entre janeiro de 2003 a junho de 2013 (918 pacientes) foram avaliados para determinar se o desenvolvimento de lesão renal aguda pós-operatória baseada nos critérios KDIGO foi preditor independente de óbito em 30 dias; (artigo 4) Pacientes submetidos a cirurgia cardíaca (RM ou CV) entre janeiro de 2003 a junho de 2013 (2804 pacientes) foram avaliados para determinar se o desenvolvimento de lesão renal aguda pós-operatória baseada nos critérios KDIGO foi preditor independente de óbito em 30 dias. Resultados: (todos artigos) Pacientes que evoluíram com LRA tiveram mais complicações no pós-operatório. A mortalidade em 30 dias aumentou progressivamente em todos os estágios de lesão renal aguda. Baseado nos critérios AKIN e KDIGO, LRA foi preditor independente de óbito em 30 dias. Conclusões: (todos artigos) Na população estudada, alteração aguda da função renal no pós-operatório foi preditor independente de óbito em 30 dias.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-05-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo – FAPESP / Desde a década de 70 até o presente momento, o conhecimento sobre células-tronco (CTs) vêm crescendo exponencialmente. Dentre as CTs, interesse crescimento se dá no campo das células-tronco adultas, com especial atenção para as CTs da medula óssea, as células-tronco mesenquimais (CTMs). Muito têm se descoberto sobre o potencial terapêutico das CTMs para diversas patologias, devido a seu grande potencial em reparar tecidos e diminuir a inflamação local. Na área da nefrologia, muitos avanços foram feitos em doenças renais agudas e crônicas, entretanto as taxas de morbi-mortalidade mantêm-se elevadas. Devido ao caráter devastador das doenças renais, estudar uma forma alternativa de tratá-la está na terapia por CTMs. Nesse estudo, buscamos compreender o papel das CTMs em modelos renais agudo e crônico. Para tanto, em um modelo agudo de lesão de isquemia e reperfusão, CTMs foram administradas após 6h de reperfusão e analisadas em 24h e 48h. Os níveis de creatinina e uréia séricos apresentaram-se bem menores em 24h e 48h após reperfusão nos animais tratados com CTMs. Histologicamente, esses dados refletem em menor NTA e maior regeneração. Sabendo do potencial imunomodulador das CTMs, analisamos o perfil de citocinas no tecido renal. Observamos uma diminuição de citocinas inflamatórias (Th1) e aumento de citocinas anti-inflamatórias (Th2). Uma vez que realizamos o modelo experimental em ratos Wistar fêmeas e injetamos CTMs de machos, procuramos a CTM no tecido renal por PCR através da expressão do gene SRY (sex determing region Y). Em 24h, não encontramos as CTMs no tecido renal. Sistemicamente, a administração de CTMs exógenas não altera o perfil de citocinas Th1, porém leva ao aumento de citocinas Th2. Como os resultados foram animadores no modelo agudo, partimos para analisar o papel das CTMs no modelo renal crônico de nefrectomia 5/6. Com um tratamento contínuo de CTMs (a cada 2 semanas), após 8 semanas, observamos melhora nos níveis de creatinina e uréia sérica, bem como diminuição nos níveis de proteinúria. Apesar de uma tendência a melhorar o clearance de inulina nos animais tratados com CTMs, não houve diferença estatística com o grupo não tratado. Ao analisar a fibrose característica do modelo de 5/6, observamos menores índices de áreas fibróticas e glomerulosclerose no tecido dos animais tratados com CTMs, bem como redução em diversas moléculas fibróticas tais como Vimentina, Colágeno 1, TGF -β, FSP-1, Smad 3, MCP-1 e razão TIMP-1/MMP9. Já nesse modelo, as CTMs encontravam-se no tecido renal, e podemos correlacionar sua presença com o aumento de moléculas anti-fibróticas, tais como HO-1 e HGF. Em relação as citocinas expressas no tecido renal, novamente observamos uma polarização para citocinas Th2, o que por sua vez pode levar a inibição do processo de transição epitélio-mesenquimal (TEM). Surpreendentemente, a administração de CTMs levou a uma menor expressão de diversas citocinas séricas. Nos dois modelos utilizados, percebemos que administração de CTMs leva a melhora funcional renal, sendo o provável mecanismo envolvido nessa melhora a imunomodulação decorrente do tratamento, tanto no tecido renal quanto sistêmica, além da secreção de outras moléculas tais como HO-1 e HGF que medeiam processos anti-fibróticos, remodelando o tecido renal. / FAPESP: 06/0620-5 / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-07-23T16:46:26Z No. of bitstreams: 1 CarolineVilas Boas Marcadores de necrose...2015pdf.pdf: 1302220 bytes, checksum: 613dbdf2246da02be096b6c54c07f4c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-07-23T16:46:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarolineVilas Boas Marcadores de necrose...2015pdf.pdf: 1302220 bytes, checksum: 613dbdf2246da02be096b6c54c07f4c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-23T16:46:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarolineVilas Boas Marcadores de necrose...2015pdf.pdf: 1302220 bytes, checksum: 613dbdf2246da02be096b6c54c07f4c7 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Necrose tubular aguda (NTA) é a causa mais frequente de lesão renal aguda (LRA) em pacientes hospitalizados. Em pacientes com síndrome nefrótica (SNO), a NTA mimetiza, por vezes, quadro de glomerulonefrite rapidamente progressiva e requer instituição precoce de imunossupressores. A análise do sedimento urinário é uma ferramenta não invasiva, de baixo custo e ampla disponibilidade. O achado de células epiteliais no sedimento urinário de pacientes com LRA foi associado ao diagnóstico de NTA. Entretanto, estudos em pacientes com SNO associada são escassos. Técnicas de diagnóstico utilizando sedimento urinário corado normalmente não são utilizadas nesses casos. Além do mais, o sedimento urinário é uma importante fonte de proteínas; estudos proteômicos do sedimento urinário revelaram importantes frações de proteínas não encontradas em sobrenadante, que pode ser usado como potencial biomarcador de LRA. Nosso objetivo é identificar alterações citológicas e protéicas no sedimento urinário que permitam o diagnóstico diferencial entre NTA ou lesão inflamatória-proliferativa glomerular (INF) em pacientes com SNO. Trata-se de um estudo de corte transversal, onde foram incluídos 32 pacientes: 5 pacientes normais (grupo controle), 10 com NTA, 9 sem NTA e 8 com glomerulonefrites exsudativas. As células do sedimento urinário foram contadas, citocentrifugadas, coradas em hematoxilina/eosina ou Papanicolaou e contadas diferencialmente como pequenas (<30μm de diâmetro), médias (30-48μm) e grandes (>48μm) ou classificadas por fenótipo (escamosas, uroteliais, tubulares e leucócitos). A média de creatinina sérica foi 1,6±1,2 mg/dL e mediana da proteinúria/24h foi 8279[3482– 13662] mg. Os diagnósticos histológicos mais frequentes foram Lesão Mínima e Glomerulopatia Membranosa em pacientes sem glomerulonefrites exsudativas com ou sem NTA, e Nefrite Lúpica em pacientes com glomerulonefrites exsudativas. A análise morfométrica por tamanho de células mostrou menor proporção de células pequenas (P=0,05) e maior de células grandes (P=0,01) no grupo de pacientes normais comparado ao grupo de pacientes com NTA ou INF, enquanto na análise fenotípica a proporção de células escamosas é maior no grupo controle que os grupos com NTA (P=0,01) ou INF (P=0,01). O número de leucócitos foi maior em pacientes com INF (50%) que nos pacientes sem INF (13%, P=0,05). A eletroforese de amostras de 32 pacientes revela importante fração proteica em termos de quantidade e variabilidade no sedimento urinário de pacientes com síndrome nefrótica. Nossos dados sugerem que o achado de leucócitos pode ser um parâmetro para identificação diferencial de pacientes com lesões inflamatórias-proliferativas glomerulares e a eletroforese do sedimento urinário tem importante perfil de bandas para pesquisa de biomarcadores para o diagnóstico diferencial não invasivo e rápido de lesão renal aguda em pacientes com síndrome nefrótica. / Acute tubular necrosis (ATN) is the most frequent cause of acute kidney injury (AKI) in hospitalized patients. In patients with nephrotic syndrome (NS), acute tubular necrosis mimic, sometimes, rapidly progressive glomerulonephritis and requires premature institution of immunosuppressive treatment. The analysis of urinary sediment is a noninvasive tool, low cost and wide availability. The found of epithelial cells in the urinary sediment of patients with AKI was associated to ATN diagnosis. However, studies in patients with AKI in the set of NS are scarce. Diagnostics techniques using stained urinary sediment are not ordinarily used in these cases. Furthermore, urinary sediment is an important source of proteins; proteomic studies revealed important fractions of proteins not found in urinary supernatant that could be used as potential biomarkers for AKI. Our goal is identify cytological alterations and protein in urinary sediment which allow the differential diagnosis between ATN and inflammatory-proliferative glomerular lesion (INF) in patients with NS. This is a cross sectional study, in which 32 patients were included: 5 normal patients (control group), 10 with ATN, 9 without ATN and 8 with exudative glomerulonephritis. The cells of urinary sediment were counted, cytocentrifuged, stained of hematoxylin/eosin or Papanicolaou and differentially counted as small (<30μm of diameter), medium (30-48μm) and large (>48μm) or classified for phenotype (scamous, urothelial, tubular and leucocyte cells). The mean of serum creatinine was 1,6±1,2 mg/dL and median of proteinuria/24h was 8279[3482– 13662] mg. The most frequent diagnostics were Minimal Lesion and Membranous Glomerulopathy in patients with or without ATN and Lupus Nephritis in patients with exudative glomerulonephritis. The morphometric analysis for size of cells showed smaller proportion of small cells (P=0,05) and bigger of large cells (P=0,01) in group of normal patients compared to group of patients with ATN or INF, while in phenotypic analysis the proportion of scamous cells is larger in control group than in ATN (P=0,01) or INF (P=0,01) groups. The number of leucocytes was bigger in patients with INF (50%) compared with patiens without INF (13%, P=0,05). The electrophoretic analysis of 32 patients reveal important protein fraction in terms of quantity and variability in urinary sediment of NS patients. Our data suggests that leukocytes can be a parameter to identify patients with proliferative-inflammatory glomerular lesion and the electrophoresis of urinary sediment has important bands profile to proteomic research of biomarkers to differential diagnosis of acute kidney injury in patients with nephrotic syndrome.

Objetivos: O objetivo deste estudo foi investigar associação entre ocorrência de disfunção renal aguda de acordo com o critério RIFLE pediátrico (pRIFLE) e desfechos negativos em crianças em pós-operatório de cirurgia cardíaca. Métodos: Crianças submetidas à cirurgia cardíaca em um hospital terciário no sul do Brasil foram acompanhadas da internação até a alta da Unidade de Terapia Intensiva Pediátrica (UTIP) ou óbito. A variável de exposição foi ocorrência de disfunção renal aguda de acordo com o critério pRIFLE, que divide disfunção renal aguda em 3 categorias: R-Risco, I-Lesão, F-Insuficiência. Os desfechos estudados foram morte, tempo de ventilação mecânica (VM) e tempo de internação na UTIP. Resultados: Oitenta e cinco crianças foram estudadas. Quarenta e sete (55,3%) não desenvolveram disfunção renal aguda durante a internação na UTIP, enquanto que 22 (25,9%), 7 (8,2%) e 9 (10,6%) foram classificadas nos grupos R, I, e F, respectivamente. A incidência de óbito foi de 18,4% e de 4,2% nos pacientes com e sem disfunção renal aguda, respectivamente. Comparado a crianças que não desenvolveram disfunção renal, a razão de chances ajustada de óbito foi 1,046 (0,09-11,11), 8,358 (1,32-52,63) e 7,855 (1,53-40,29) nos grupos R, I, e F, respectivamente (p = 0,022). Os tempos de VM e de internação na UTIP foram significativamente maiores nas crianças com disfunção renal aguda. Conclusões: Ocorrência de disfunção renal aguda de acordo com o critério pRIFLE está associado com maior morbidade (maior tempo de VM e de internação na UTIP) e maior mortalidade em crianças em pós-operatório de cirurgia cardíaca. / Objectives: This study aims to investigate association between occurrence of acute kidney injury (AKI) according to pediatric RIFLE (pRIFLE) criteria and adverse outcomes in children after heart surgery. Methods: Children submitted to open heart surgery in a tertiary hospital in Southern Brazil were followed from arrival until discharge from the Pediatric Intensive care Unit (PICU) or death. The exposition variable was occurrence of AKI according to pRIFLE criteria, which divides AKI in three categories: R-Risk, I-Injury, F-Failure. The outcomes studied were death, length of mechanical ventilation (MV) and length of PICU stay. Results: Eighty five children were studied. Forty seven (55.3%) did not have AKI during PICU stay, while 22 (25.9%), 7 (8.2%) and 9 (10.6%) were classified as R, I and F, respectively. The incidence of death was 18.4% and 4.2% in patients with and without AKI, respectively. Comparing to children who did not develop AKI, the adjusted odds ratio for death was 1.046 (0.09-11.11), 8.358 (1.32-52.63) and 7.855 (1.53-40.29) in the R, I and F group, respectively (p = 0.022). Lengths of MV and of PICU stay were significantly higher in those with AKI. Conclusions: Occurrence of AKI according to pRIFLE criteria is associated to adverse outcomes in children after open heart surgery.

Submitted by VINÍCIUS MONTEIRO ARANTES null (viniciusma43@yahoo.com.br) on 2016-04-07T17:19:19Z No. of bitstreams: 1 Vinicius Monteiro Arantes (Doutorado) - Pós defesa.pdf: 1192517 bytes, checksum: 45c5c5f675af52789c6d2d6a395b44b0 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-04-08T11:47:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 arantes_vm_dr_bot.pdf: 1192517 bytes, checksum: 45c5c5f675af52789c6d2d6a395b44b0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-08T11:47:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arantes_vm_dr_bot.pdf: 1192517 bytes, checksum: 45c5c5f675af52789c6d2d6a395b44b0 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: a lesão por isquemia-reperfusão (LIR) é uma importante causa de lesão renal aguda experimentada na prática clínica. A restauração da perfusão aos tecidos após um período de isquemia inicia uma cascata de inflamação associada ao acúmulo de íons, formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), disfunção endotelial e ativação imune. O condicionamento isquêmico é a aplicação de breves ciclos de interrupção seguidas de restauração do fluxo sanguíneo, tendo o objetivo de adaptar os tecidos à isquemia. Pode ser aplicado antes do estímulo principal, como précondicionamento (PCI), ou depois, sendo denominado pós-condicionamento (PCoI). Metodologia: estudo experimental realizado com 40 ratos wistar, divididos em cinco grupos para análise comparativa: Sham (S): laparotomia; Controle (C): laparotomia e 30 min de isquemia; Pré-condicionamento (PRE): laparotomia, PCI e 30 min de isquemia; Pré e Pós-condicionamento (PRE/POS): laparotomia, PCI, 30 min de isquemia e PCoI; Pós-condicionamento (POS): laparotomia, 30 min de isquemia e PCoI. A comparação entre os grupos foi realizada pela análise bioquímica sérica de creatinina, ureia, lipocalina associada à gelatinase de neutrófilos (NGAL) e histolologia. Resultados: apenas o grupo Sham apresentou valores estatisticamente menores dos marcadores de lesão renal e menor incidência de lesão tubular renal à histologia (S<C=PRÉ=PRÉ/PÓS=PÓS). Discussão e conclusão: no presente estudo, o PCI e o PoCI, isoladamente ou em conjunto, foram incapazes de prevenir dano estrutural tubular renal. A duração do período isquêmico é um aspecto crítico nas estratégias de condicionamento. Os resultados encontrados indicam que o condicionamento pode não melhorar os desfechos, e em alguns casos pode ser prejudicial. / Background: Ischemia-reperfusion injury (IRI) is an unavoidable aspect of transplantation, as well as an important cause of acute kidney injury in clinical practice. Restoration of the blood supply after an ischemic period activates an inflammatory cascade associated with multiple processes, including ion accumulation, free reactive oxygen species (ROS) formation, endothelial dysfunction, and immune activation. Ischemic “conditioning” refers to the application of a brief series of ischemic periods followed by reperfusion in the setting of major ischemia. In ischemic preconditioning (IPC), the conditioning stimulus is applied before the major ischemic event, whereas in ischemic postconditioning (IPoC), it is applied after the event. Methods: Forty Wistar rats were randomized into five groups: Sham (S): laparotomy; Control (C): laparotomy and 30 min ischemia; Preconditioning (PRE): laparotomy, IPC, and 30 min ischemia; Preconditioning and Postconditioning (PRE/POST): laparotomy, IPC, 30 min ischemia, and IPoC; Postconditioning (POST): laparotomy, 30 min ischemia, and IPoC. Serum analyses of creatinine and neutrophil gelatinaseassociated lipocalin (NGAL) were performed, and renal histology was also examined. Results: Severe tubular injury and increases in creatinine were observed in all groups except the S group, and no significant differences were detected between the other groups (S<C=PRE=PRE/POST=POST). Conclusions: IPC and IPoC, together or separately, were unable to exert a protective effect against tubular cell injury and preserve kidney function. The duration of the ischemic period is a critical aspect of the conditioning strategy. Our results indicate that conditioning may not improve the outcome, and it may even be harmful.

Submitted by ANDRÉ ROBERTO BUSSMANN null (andreanestesio@gmail.com) on 2016-11-09T16:36:24Z No. of bitstreams: 1 André Roberto Bussmann (Doutorado).docx: 19743495 bytes, checksum: 17713c95006fea5bf6c04f10d98083ad (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO null (luizaromanetto@hotmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: A versão final da dissertação/tese deve ser submetida no formato PDF (Portable Document Format). O arquivo PDF não deve estar protegido e a dissertação/tese deve estar em um único arquivo, inclusive os apêndices e anexos, se houver. Por favor, corrija o formato do arquivo e realize uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2016-11-16T11:50:55Z (GMT) / Submitted by ANDRÉ ROBERTO BUSSMANN null (andreanestesio@gmail.com) on 2016-11-17T01:45:36Z No. of bitstreams: 1 André Roberto Bussmann (pós-defesa).pdf: 1662321 bytes, checksum: b4c6a12ba9dfef03970797e8d2b34392 (MD5) / Rejected by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2016-11-21T12:43:06Z (GMT) / Submitted by ANDRÉ ROBERTO BUSSMANN null (andreanestesio@gmail.com) on 2016-11-25T12:06:55Z No. of bitstreams: 1 André Roberto Bussmann (pós-defesa doutorado).pdf: 1153035 bytes, checksum: 0046b6c3ecbb8bed5745a60162c2737f (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-11-25T17:06:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bussmann_ar_dr_bot.pdf: 1153035 bytes, checksum: 0046b6c3ecbb8bed5745a60162c2737f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-25T17:06:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bussmann_ar_dr_bot.pdf: 1153035 bytes, checksum: 0046b6c3ecbb8bed5745a60162c2737f (MD5) Previous issue date: 2016-10-03 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Justificativa: Durante lesão de isquemia e reperfusão renal ocorre a inativação de óxido nítrico (NO), essa inativação diminui o relaxamento arterial endotélio-dependente e independente. O aumento nos níveis de NO poderia melhorar a disfunção endotelial e o relaxamento arterial diminuindo a lesão renal. O NO, sintetizado a partir da L-arginina pela enzima óxido nítrico sintase (NOS), parece exercer um efeito protetor sobre os rins durante a lesão de isquemia/reperfusão (I/R). O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da L-arginina nos níveis dos biomarcadores de lesão (NGALp, NGALu, KIM-1 e IL-18) na função e na histopatologia renal em ratos submetidos a lesão de I/R. Métodos: 32 ratos Wistar foram randomizados em 4 grupos: Sham (S): Laparotomia e nefrectomia direita. Controle (C): Laparotomia e nefrectomia direita, I/R em rim esquerdo. Controle L-arginina (CLA): Laparotomia e nefrectomia direita, L-arginina na dose de 800mg.kg-1.dose-1, 24 e 1 hora antes. L-arginina (LA): Laparotomia e nefrectomia direita, I/R em rim esquerdo, L-arginina na dose de 800mg.kg-1.dose-1, 24 e 1 hora antes. Foram analisados os níveis de NGALp, NGALu, KIM-1 e IL-18, creatinina e histopatologia renal. Nível de significância: p<0,05. Resultados: Creatinina aumenta em todos os grupos com LA≈C>S≈CLA. A NGALp, aumenta em todos os grupos com evolução semelhante. A NGALu foi maior no grupo C e CLA em relação ao grupo LA e apresentou valores intermediários no grupo S. Os níveis de KIM-1 aumentam nos grupos S, CLA e LA, porém na análise de contrastes não há diferença na evolução dos grupos. A IL-18 apresentou valores maiores no grupo LA comparado aos demais grupos (C, S e CLA). Os grupos C e LA apresentaram grau de lesão no lado esquerdo maior que os grupos S e CLA. Não existe diferença histopatológica entre C e LA e nem entre S e CLA. Conclusão: A L-arginina não exerce efeito protetor ou danoso aos rins submetidos a lesão de I/R na avaliação da função, da histopatologia renal e dos níveis de NGALp, KIM-1 / Background: Nitric oxide (NO) inactivation occurs during renal ischaemia/reperfusion injury. This inactivation decreases endothelium-dependent and -independent arterial relaxation. Higher NO levels can improve endothelial dysfunction and arterial relaxation, thereby reducing the level of kidney injury. NO, synthesized from L-arginine by the enzyme nitric oxide synthase (NOS), seems to exerts a protective effect on the kidneys during tissue ischemia-reperfusion injury. The objective of this study was to evaluate the effect of L-arginine on the levels of injury biomarkers (pNGAL, uNGAL, KIM-1 e IL-18) for kidney function and histology in rats subjected ischaemiareperfusion injury. Methods: Thirty-two Wistar rats were randomised into the following 4 groups: Sham (S), laparotomy and right nephrectomy; Control (C), laparotomy and right nephrectomy and left kidney I/R; L-arginine control (LAC), laparotomy and right nephrectomy and L-arginine at a dose of 800 mg.kg-1 .dose-1 , 24 hours and 1 hour before surgery; and L-arginine (LA), laparotomy and right nephrectomy, left kidney I/R, and L-arginine at a dose of 800 mg.kg -1 .dose-1 , 24 hours and 1 hour before surgery. The pNGAL, uNGAL, KIM-1 e IL-18 and creatinine levels and kidney histopathology were analysed. The significance level was p < 0.05. Results: Creatinine was increased in all groups, with LA≈C>S≈LAC. pNGAL was increased in all groups and showed a similar trend. uNGAL levels were higher in groups C and LAC than LA and had intermediate values in group S. The KIM-1 levels were increased in the S, LAC and LA groups, but the contrast analysis revealed no differences between the groups in terms of their trends. IL-18 levels were higher in LA than in the other groups (C, S and LAC). The C and LA groups, compared with the S and LAC groups, had higher damage on the left side. There was no histopathological difference between C and LA or between S and LAC. Conclusion: L-arginine does not exert a damaging or protective effect on kidneys undergoing I/R injury based on the evaluation of kidney functions, histopathology and pNGAL and KIM-1 levels. / FAPESP: 2012/13603-2

Objetivos: O objetivo deste estudo foi investigar associação entre ocorrência de disfunção renal aguda de acordo com o critério RIFLE pediátrico (pRIFLE) e desfechos negativos em crianças em pós-operatório de cirurgia cardíaca. Métodos: Crianças submetidas à cirurgia cardíaca em um hospital terciário no sul do Brasil foram acompanhadas da internação até a alta da Unidade de Terapia Intensiva Pediátrica (UTIP) ou óbito. A variável de exposição foi ocorrência de disfunção renal aguda de acordo com o critério pRIFLE, que divide disfunção renal aguda em 3 categorias: R-Risco, I-Lesão, F-Insuficiência. Os desfechos estudados foram morte, tempo de ventilação mecânica (VM) e tempo de internação na UTIP. Resultados: Oitenta e cinco crianças foram estudadas. Quarenta e sete (55,3%) não desenvolveram disfunção renal aguda durante a internação na UTIP, enquanto que 22 (25,9%), 7 (8,2%) e 9 (10,6%) foram classificadas nos grupos R, I, e F, respectivamente. A incidência de óbito foi de 18,4% e de 4,2% nos pacientes com e sem disfunção renal aguda, respectivamente. Comparado a crianças que não desenvolveram disfunção renal, a razão de chances ajustada de óbito foi 1,046 (0,09-11,11), 8,358 (1,32-52,63) e 7,855 (1,53-40,29) nos grupos R, I, e F, respectivamente (p = 0,022). Os tempos de VM e de internação na UTIP foram significativamente maiores nas crianças com disfunção renal aguda. Conclusões: Ocorrência de disfunção renal aguda de acordo com o critério pRIFLE está associado com maior morbidade (maior tempo de VM e de internação na UTIP) e maior mortalidade em crianças em pós-operatório de cirurgia cardíaca. / Objectives: This study aims to investigate association between occurrence of acute kidney injury (AKI) according to pediatric RIFLE (pRIFLE) criteria and adverse outcomes in children after heart surgery. Methods: Children submitted to open heart surgery in a tertiary hospital in Southern Brazil were followed from arrival until discharge from the Pediatric Intensive care Unit (PICU) or death. The exposition variable was occurrence of AKI according to pRIFLE criteria, which divides AKI in three categories: R-Risk, I-Injury, F-Failure. The outcomes studied were death, length of mechanical ventilation (MV) and length of PICU stay. Results: Eighty five children were studied. Forty seven (55.3%) did not have AKI during PICU stay, while 22 (25.9%), 7 (8.2%) and 9 (10.6%) were classified as R, I and F, respectively. The incidence of death was 18.4% and 4.2% in patients with and without AKI, respectively. Comparing to children who did not develop AKI, the adjusted odds ratio for death was 1.046 (0.09-11.11), 8.358 (1.32-52.63) and 7.855 (1.53-40.29) in the R, I and F group, respectively (p = 0.022). Lengths of MV and of PICU stay were significantly higher in those with AKI. Conclusions: Occurrence of AKI according to pRIFLE criteria is associated to adverse outcomes in children after open heart surgery.