As origens das populações e o processo de povoamento das Américas são questões bastante controversas e, por isso, têm sido amplamente estudadas. O gene LDLR (low density lipoprotein receptor), que está localizado no braço curto do cromossomo 19 (p13.1-p13.3) e possui 18 éxons, bem como uma porção 3’UTR onde ocorrem dois elementos Alu completos (chamados de U e D) e um parcial, foi escolhido para esclarecer esses e outros problemas de evolução e variação genética humana. O objetivo geral deste trabalho foi verificar o que esta região hipervariável, especificamente na sua porção U, nos indicaria sobre a história evolutiva das populações ameríndias. Para este trabalho foram analisadas amostras de DNA de indivíduos nativos da Mongólia (n=24), da Sibéria (n=26), das Américas do Norte (n=11), Central (n=26) e do Sul (n=16), totalizando 14 populações e 103 indivíduos. Essas amostras foram amplificadas pela técnica de PCR (polymerase chain reaction), utilizando-se primers específicos para o segmento hipervariável U e, posteriormente, foram elas seqüenciadas automaticamente. Quatorze sítios polimórficos foram encontrados, classificáveis em sete haplótipos, sendo que o sítio 3809 apresentou uma transversão de C para G não descrita na literatura. A estimativa geral de diversidade nucleotídica (π) foi de 0.62%, considerada alta para um marcador autossômico. Verificou-se uma certa uniformidade haplotípica entre a Ásia e a América, mas com a diferenciação maior ocorrendo entre a Mongólia e a América+Sibéria. Não foi detectada diferenciação significativa entre nativos sul e centro-americanos. De um modo geral, o estudo desse marcador confirmou uma provável origem asiática para as populações ameríndias e apoiou a hipótese de uma única onda de migração no processo de povoamento pré-histórico das Américas.

Neste estudo observamos os efeitos da ausência de receptores para LDL sobre os níveis plasmáticos de colesterol, pressão arterial, controle reflexo da freqüência cardíaca, nitratos totais e estresse oxidativo em eritrócitos e tecido cardíaco. Para tanto utilizamos camundongos controle (n=13, para avaliações hemodinâmicas e de estresse oxidativo, e n=11, para dosagem de colesterol), e Knockout para receptores de LDL controle (n= 6, para avaliações hemodinâmicas e de estresse oxidativo, e n=5, para dosagem de colesterol). Como análise estatística utilizamos o teste T de Student para amostras não pareadas, considerando-se significativo quando p<0,05. A ausência desses receptores aumentou os níveis plasmáticos de colesterol total em mg/dL (179± 35) no grupo knockout (KO), em relação ao controle (109± 13). Esse resultado foi acompanhado pelo aumento da pressão arterial média (PAM) em mmHg no grupo KO (140±3), quando comparado ao controle (118±6). A freqüência cardíaca basal não foi significativamente diferente entre os grupos, mas o reflexo comandado pelos pressoreceptores estava significativamente atenuado nos animais KO. Tanto em eritrócitos como no tecido cardíaco, a atividade das enzimas antioxidantes apresentou-se significativamente reduzida; e o dano oxidativo, expresso pela dosagem de carbonilas e quimiluminescência, esteve significativamente aumentado no grupo KO. Esses resultados foram acompanhados pela redução dos níveis de nitratos totais, indicando uma redução da biodisponibilidade de óxido nítrico circulante nesses animais. Esses resultados indicam que a ausência de receptores para LDL não só causam aumento dos níveis de colesterol sangüíneo, mas também do estresse oxidativo. Esses aumentos poderiam estar contribuindo tanto para aumentar a degradação do óxido nítrico quanto para reduzir sua síntese, resultando em aumento da PA e prejuízo da sensibilidade barorreflexa, observados nesse estudo.

Orientadores: Lourenço Gallo Junior, Eliana Cotta de Faria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Fisica / Made available in DSpace on 2018-07-21T17:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zaratin_AguedaCleofeMarques_M.pdf: 2428641 bytes, checksum: 00b85f24889bbf79cec029d9f0e95ce1 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O tabagismo é um dos fatores de risco mais importantes para a doença arterial coronariana. Vários de seus efeitos são descritos como mediadores da sua aterogenicidade: cardiovasculares diretos, oxidativos, trombogênicos e dislipidêmicos. Entretanto, de acordo com a literatura, um grande número de fumantes não apresenta dislipidemias, a despeito da frequente redução dos níveis plasmáticos de colesterol de lipoproteínas de densidade alta (HDL-col). Com o objetivo de avaliar os efeitos do fumo sobre a concentração de diferentes lípides e a composição bioquímica das lipoproteínas plasmáticas, oito homens fumantes crônicos de cigarros sob o efeito agudo do fumo foram estudados. Sete homens não fumantes e um ex-fumante constituíram o grupo controle. Realizou-se o teste oral de tolerância à gordura, e mediu-se entre o jejum e 8 horas após a ingestão, os níveis plasmáticos de triglicérides, colesterol total e HDL-col. Mediu-se também em jejum e 4 horas após a dieta, colesterol, triglicérides, fosfolípides e proteínas nas diferentes frações e subfrações das lipoproteínas plasmáticas separadas por ultracentrifugação. Demonstramos que fumantes e não fumantes não diferiram quanto aos níveis plasmáticos em jejum de triglicérides, colesterol e HDL-col, havendo nos fumantes uma tendência a menores níveis de triglicérides e colesterol e a maiores níveis de HDL-chol. Estas tendências persistiram respectivamente para colesterol, triglicérides, fosfolípides e proteínas nas frações de lipoproteínas de densidade muito baixa (VLDL) e lipoproteínas de densidade baixa (LDL) (menores níveis) e 'HDL IND. 2¿ (maiores níveis), tanto no jejum quanto no período pós-dieta, exceto triglicérides para LDL e 'HDL IND. 2¿ no jejum. Houve aumento significativo de fosfolípides de 'HDL IND. 2¿ nos fumantes em jejum com tendência a aumento na relação lípides/proteínas indicando a presença de partículas de 'HDL IND. 2¿ mais ricas em lípides neste grupo. Os fumantes não foram intolerantes à gordura; as curvas pós-dieta tenderam inclusive a menores níveis de triglicérides plasmáticos. Nos fumantes houve uma correlação positiva e significativa entre todos os componentes de VLDL com o peso e o índice de massa corpórea (IMC) e também uma correlação negativa e significativa entre colesterol, proteínas e fosfolípides de 'HDL IND.2¿ com o peso corporal e IMC, sugerindo uma regulação destes componentes lipídicos pelo tecido adiposo nos fumantes. Estes resultados em conjunto sugerem que fumantes crônicos moderados normolipidêmicos sob o efeito agudo do fumo apresentam lipólise periférica aumentada via aumento da atividade da lipoproteína lipase, o que justifica os níveis aumentados de fosfolípides de 'HDL IND. 2¿ / Abstract: Cigarette smoking is one of the most important risk factors for coronary artery disease. Many of its effects are described as mediators of its aterogenicity: direct cardiovascular, oxidatives, trombogenics and dislipidemics. However, according to the literature, a great number of cigarette smokers does not have dislipidemias, despite the fact of frequent presence of lower levels of cholesterol plasma in high density lipoproteins (HDL-chol). To test the effects of cigarette smoking on the plasma levels of different lipids and on the biochemical composition of plasma lipoproteins, chronic male smokers under the acute effect of cigarette smoking were studied. The contrai group was formed by male non smokers and one ex-smoker. The oral fat tolerance test was applied, and the levels of triglyceride, total cholesterol and HDL-chol were determined between fasting and eight hours after the ingestion of fat. Cholesterol, triglyceride, phospholipid and protein on the different plasma lipoprotein fractions and some subfractions separated by ultracentrifugation, were analysed in fasting and four hours after the oral diet. We showed that smokers and non-smokers do not differ in their plasma triglyceride, cholesterol, and HDL-chol plasmatic levels during the fasting period. The smokers showed a tendency to lower triglyceride and cholesterol levels and to higher HDL-chol levels. These tendencies persited respectively for cholesterol, triglyceride, phospholipids and proteins in very low density lipoproteins (VLDL) and low density lipoproteins (LDL) (Iower levels) and ¿HDL IND. 2¿(higher levels) in both fasting and post diet periods (except for tryglicerides in fasting to LDL and ¿HDL IND. 2¿). In smokers, ¿HDL IND. 2¿-phospholipidswere higher in the fasting period, with atendency toward a ratio of higher lipids to proteins, showing the presence of ¿HDL IND. 2¿ particles richer in lipids in this group. The smokers were not fat intolerant; in fact, the post-diet curves tended to show lower plasma triglyceride levels. In smokers there was a positive and significant correlation between ali the VLDL components with the weight and body mass index (BMI); and there was a negative and significant correlation between cholesterol, proteins and ¿HDL IND. 2¿- phospholipide with the weight and BMI, suggesting a regulation of these plasma lipid components by the adipose tissue in this group. Ali these results suggest that chronic moderate normolipidemic smokers under the acute effect of cigarette smoking have higher peripheral lipolysis, through incresead activity of lipoprotein lipase, justifying the significant higher plasma levels of ¿HDL IND. 2¿-phospholipids / Mestrado / Mestre em Educação Física

Orientador: Lucia Nassi Castilho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T19:46:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Baglioni_PauloCesar_M.pdf: 1350944 bytes, checksum: b666f4aaf130589372e1b58ee93bf507 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A atividade física regular está relacionada a um risco reduzido de desenvolvimento de doenças cardiovasculares, possivelmente por promover alterações benéficas no perfil lipoprotéico. Porém, existem ainda algumas lacunas no atual conhecimento nesta área, como por exemplo, em qual idade este benefício se inicia e qual a quantidade e a intensidade de exercícios são necessárias. Neste estudo, foi avaliada a eficiência da atividade física regular em promover alterações em parâmetros bioquímicos associados ao risco de desenvolvimento de aterosclerose como a composição química de lipoproteínas, a concentração sérica de LDL oxidada, a estimativa do tamanho da LDL, a atividade da paraoxonase e da proteína de transferência de colesteril éster (CETP) em indivíduos jovens do sexo masculino, pareados por índice de massa corporal. Quarenta e três indivíduos treinados (T) (mínimo de três vezes por semana e sessões de 30 minutos) e 39 não-treinados (NT), de 18 a 25 anos, estudantes de graduação da Universidade Estadual de Campinas participaram deste estudo. O colesterol, triacilglicerol, glicose e ácido úrico séricos foram determinados por métodos enzimáticos colorimétricos. As apolipoproteínas A1, B100 e lipoproteína (a) foram mensuradas por método nefelométrico. A composição química das lipoproteínas, obtidas por ultracentrifugação, foi avaliada pela determinação da concentração do colesterol total, livre e éster, triacilglicerol, fosfolipídios e proteínas. O perfil apolipoprotéico foi similar entre os grupos, porém as concentrações de triacilglicerol (TAG) e do colesterol da VLDL foram significativamente menores nos indivíduos T. Também, a atividade da CETP, avaliada por ensaio exógeno radiométrico, foi estatisticamente menor no grupo T. Considerando a composição química das lipoproteínas obtidas por ultracentrifugação seqüencial em soro (jejum 12 horas), o colesterol total (TC), TAG e proteína das VLDL foram significantemente maiores nos NT. Os indivíduos jovens do sexo masculino treinados mostraram características anti-aterogênicas como TAG sérico diminuído, baixa secreção hepática de VLDL e LDL, tamanho aumentado da partícula de LDL e baixa atividade da CETP quando comparados aos não treinados, pareados por idade e índice de massa corpórea. Estes resultados destacam o impacto positivo dos exercícios na idade jovem, como um importante fator na prevenção de doenças cardiovasculares. Palavras chaves: exercício físico; composição lipoprotéica; LDL oxidada; atividade da CETP; tamanho da LDL / Abstract: Regular physical activity is related to a reduced risk of cardiovascular disease possibly by improvement of the lipoprotein profile. But there are many deficiencies in the current knowledge in this area like at what age this benefit initiate, what is the amount and intensity of the exercises, among others. In this study we evaluated the efficiency of regular physical activity on improvement of biochemical risk factors associated to atherosclerosis development like lipoprotein composition, oxidized and estimated LDL size, the cholesteryl ester transfer protein (CETP) and Paraoxonase (PON) activities in young-body mass index matched males. Fourth-three trained (T) (at least three times a week and 30 minutes session) and 39 non-trained (NT) individuals 18-25 years selected from graduation students at the State University of Campinas participated in this study. Cholesterol, triacylglycerol (TAG), glucose and uric acid sera were determined by enzymatic colorimetric methods and apolipoproteins A1, B100 and lipoprotein (a) by nephelometric method. The chemical composition of lipoproteins was evaluated by total, free and esterified cholesterol, TAG, phospholipids and protein determinations. The apolipoprotein profile was similar between groups but TAG and VLDL-cholesterol concentrations were statistically significant lower in T individuals. Also, CETP activity, measured by radiometric exogenous assay, was statistically significant lower in T group. Considering the chemical composition of the isolated lipoproteins obtained by ultracentrifugation (12 hours fasted serum), the total cholesterol (TC), TAG and protein in VLDL particles were significantly higher in NT. Young healthy trained males showed anti-atherogenic characteristics like decreased serum TAG, lower hepatic secretion of VLDL and LDL, increased LDL particle sizes and lower CETP activity, when compared to aged-body mass index matched non trained individuals. These results highlight the positive impact of exercises at young ages, as an important preventive factor for cardiovascular diseases. Key words: physical exercise; lipoprotein composition; oxidized LDL; CETP activity; LDL particle size / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Andrei Carvalho Sposito, Eliana Cotta de Faria / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T13:48:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Panzoldo_NataliaBaratella_D.pdf: 2220803 bytes, checksum: b1c1a7df4771466e6a32411bceb02387 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Doenças cardiovasculares constituem a principal causa de mortalidade no Brasil e no mundo. Baixas concentrações de HDL - colesterol são consideradas um fator de risco cardiovascular independente. Esta relação inversa tem sido atribuída às diferentes propriedades protetoras da HDL, dentre as quais podemos destacar seu papel no transporte reverso de colesterol, por meio do efluxo de colesterol, sua habilidade de inibir a agregação plaquetária, e suas atividades antioxidantes e anti-inflamatórias. No entanto, estudos recentes indicam que baixas concentrações de HDL - colesterol constituem um preditor significante de doença aterosclerótica somente em indivíduos assintomáticos e que a capacidade de efluxo de colesterol é um melhor preditor de carga aterosclerótica do que HDL - colesterol. Em conjunto, estes achados sugerem que a função da HDL poderia ser um fator chave na relação entre concentrações de HDL - colesterol e o desenvolvimento de doença aterosclerótica. Se o for, alterações das funções da HDL podem discernir melhor, entre os indivíduos com hipoalfalipoproteinemia, aqueles com maior propensão a desenvolver doença aterosclerótica. Assim, investigamos, em indivíduos sem doença cardiovascular previamente manifesta, se funções da HDL estão associadas a concentrações de HDL - colesterol e carga aterosclerótica. Participantes foram classificados em HDL - colesterol baixo (LH; HDL-C? 32 mg/dL; n=33), intermediário (IH; HDL-C= 40-67 mg/dL; n=33), ou alto (HH; HDL-C?78mg/dL; n=35). Nós avaliamos composição química da HDL, tamanho da partícula, capacidade de efluxo de colesterol, atividade antioxidante, susceptibilidade à oxidação, atividade anti-inflamatória, e habilidade de inibir agregação plaquetária. O grupo LH foi associado à espessura intimo-medial de carótidas (IMT) aumentada (p?0,001), maior conteúdo de triglicérides (4±2% vs. 4±2% em IH e 3±1% em HH, p?0,001), menor conteúdo de fosfolípides (12±4% vs. 14±5% em IH e 13±3% em HH, p=0,035), menor tamanho de partículas (7,33±0,33nm vs. 7,72±0,45nm em IH e 8,49±0,42nm em HH, p?0,001) e menor capacidade de efluxo de colesterol celular (9±3 % vs. 12±3 % em IH e 11±4 % em HH, p?0,001). Indivíduos HH apresentaram menor atividade antioxidante (37(53)% vs. 48(35)% em IH e 55(41)% em LH, p=0,003), maior suscetibilidade à oxidação (57±22% vs. 45±20% em IH e 46±25% em LH, p=0,017) e maior habilidade de inibir agregação plaquetária (45±25% vs. 31±18% em IH e 37±24 % em LH, p=0,0026). Indivíduos com IMT acima de 1 mm apresentaram partículas com menor tamanho (7,55±0,49 nm vs. 7,89±0,64 nm, p?0,001), atividade antioxidante (37(23)% vs. 49(42)%, p=0,018) e capacidade de efluxo de colesterol (31±14% vs. 40±14%, p=0,02). Nenhuma diferença foi encontrada para as outras características ou propriedades funcionais da HDL. Nós concluímos que, em um contexto de prevenção primária, o menor tamanho da partícula, o conteúdo reduzido de fosfolípides, e capacidade de efluxo de colesterol diminuída são relacionados com ambos LH e magnitude da doença aterosclerótica subclínica. Nestes indivíduos, estas características podem explicar a associação entre HDL - colesterol e o desenvolvimento da doença aterosclerótica. / Abstract: Cardiovascular diseases are the main cause of death in Brazil and worldwide. Low HDL-C levels are considered an independent cardiovascular risk factor. This inverse relationship has been attributed to different protective properties described for HDL, such as its role in the reverse cholesterol transport, through cholesterol efflux, its ability to inhibit platelet aggregation, and its antioxidant and anti-inflammatory effects. However, recent studies indicate that low HDL-cholesterol is a significant predictor of atherosclerotic disease in healthy individuals and that cholesterol efflux capacity is a better predictor of carotid atherosclerotic burden as compared to HDL-cholesterol. Altogether these findings have suggested that HDL function would be the key factor for the link between HDL-cholesterol concentration and the subclinical disease in a primary prevention setting. If so, changes in HDL function could help to discriminate, among individuals with hypoalphalipoproteinemia, those who are prone to develop atherosclerotic disease. Hence, in a primary prevention setting, we investigated whether HDL dysfunction is associated with HDL-cholesterol concentration and atherosclerotic burden. Participants were classified as low (LH; HDL-C? 32 mg/dL; n=33), intermediate (IH; HDL-C= 40-67 mg/dL; n=33), or high HDL-cholesterol (HH; HDL-C?78mg/dL; n=35). We measured HDL chemical composition, particle size, cholesterol efflux capacity, antioxidant activity, susceptibility to oxidation, anti-inflammatory activity, and ability to inhibit platelet aggregation. LH was associated to enhanced carotid intima-media thickness (IMT;p?0.001), high HDL triglyceride (4±2% vs. 4±2% in IH and 3±1% in HH, p?0.001), low HDL-phospholipids (12±4% vs. 14±5% in IH and 13±3% in HH, p=0.035), decreased particle size (7.33±0.33nm vs. 7.72±0.45nm in IH and 8.49±0.42nm in HH, p?0.001) and reduced cholesterol efflux capacity (9±3 % vs. 12±3 % in IH and 11±4 % in HH, p?0.001). The HH group presented reduced antioxidant activity (37(53)% vs. 48(35)% in IH and 55(41)% in LH, p=0.003), and increased susceptibility to oxidation (57±22% vs. 45±20% in IH and 46±25% in LH, p=0.017) and ability to inhibit platelet aggregation (45±25% vs. 31±18% in IH and 37±24 % in LH, p=0.0026). Carotid IMT>1mm was associated with reduced HDL size (7.55±0.49 nm vs. 7.89±0.64 nm, p?0.001), antioxidant activity (37(23)% vs. 49(42)%, p=0.018), and cholesterol efflux capacity (31±14% vs. 40±14%, p=0.02). No differences were found for the other HDL characteristics or functional properties. We conclude that in a primary prevention setting, small particle size, reduced HDL-phospholipids content, and diminished cholesterol efflux capacity are related to both LH and carotid IMT. In these individuals, these characteristics may underlie the association between HDL-cholesterol and atherosclerotic burden / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutora em Ciências Médicas

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, Helena Coutinho Franco de Oliveira, Daniel Zanetti Scherrer / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zago_VanessaHelenadeSouza_D.pdf: 5059555 bytes, checksum: 854d9d1d1674a14d2ebcf5798acc31b3 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Dado o importante papel desempenhado pelos transportadores ATP binding cassete A1 (ABCA1), G1 (ABCG1), G5 (ABCG5), G8 (ABCG8) e pelo scavenger receptor class B type I (SR-BI) para a homeostase corpórea de colesterol e desenvolvimento da aterosclerose, este trabalho se propôs a: (i) investigar a relação dos polimorfismos rs2275543 (ABCA1), rs1893590 (ABCG1), rs6720173 (ABCG5), rs6544718 (ABCG8) e rs5888 (SCARB1) com gênero, idade e índice de massa corpórea (IMC) e suas interações sobre variáveis clínicas e bioquímicas (n=654); (ii) determinar a repercussão destes polimorfismos sobre os parâmetros estudados na população total e de forma gênero-específica (n=590) e (iii) avaliar se os miRNAs hsa-miR-33a e hsa-miR-128a são diferencialmente expressos em um subgrupo da população (n=51) e averiguar sua associação com as concentrações plasmáticas do colesterol da lipoproteína de alta densidade (HDL-C), aterosclerose subclínica e expressão de ABCA1, ABCG1 e SCARB1. Para tanto, foram selecionados voluntários normolipidêmicos e assintomáticos, de ambos os gêneros, com idade entre 20 e 75 anos. Dados clínicos e antropométricos foram obtidos, assim como sangue venoso periférico para as determinações bioquímicas e extração de DNA e RNA. O subgrupo de 51 voluntários foi classificado de acordo com HDL-C (mg/dL) em hipoalfalipoproteinêmicos (hipo, HDL-C?39), hiperalfalipoproteinêmicos (hiper, HDL-C?68) e controles (CTL, HDL-C?40<68) e determinadas a espessura íntimo-medial das artérias carótidas e proteínas relacionadas ao metabolismo de HDL. Determinamos que o rs1893590 interage com a idade e o IMC, modulando as concentrações de HDL-C, bem como o tamanho e volume da partícula, sugerindo que este pode modificar seu metabolismo e composição. Nas análises comparativas o rs2275543 apresentou efeitos diferentes, porém benéficos para ambos os gêneros; adicionalmente, o rs6720173 determinou um fenótipo lipoproteico proaterogênico no gênero masculino, enquanto as variantes rs5888 e rs6544718 repercutiram sobre marcadores de adiposidade no gênero feminino. A análise dos cinco polimorfismos nesta população fornece evidências de que estes atuam em diferentes vias do metabolismo lipoproteico, e tem na maioria dos casos características gênero-específicas. Adicionalmente, a avaliação da expressão de hsa-miR-33a, hsa-miR-128a, ABCA1, ABCG1 e SCARB1 revelou que os indivíduos hiper apresentam um aumento da expressão de ABCA1 e ABCG1 em relação ao grupo CTL, somado a uma redução de 72% na expressão do hsa-miR-33a; em conjunto, estes resultados indicam um potencial papel regulatório deste miRNA em indivíduos assintomáticos, possivelmente contribuindo para o aumento do efluxo e do transporte reverso de colesterol / Abstract: Given the important role played by ATP binding cassete transporters A1 (ABCA1), G1 (ABCG1), G5 (ABCG5), G8 (ABCG8) and by scavenger receptor class B type I (SR-BI) on body cholesterol homeostasis and atherosclerosis development, this study proposes to: (i) investigate the relationship of polymorphisms rs2275543 (ABCA1), rs1893590 (ABCG1), rs6720173 (ABCG5), rs6544718 (ABCG8) e rs5888 (SCARB1) with gender, age and body mass index (BMI) and its interactions with clinical and biochemical variables (n=654); (ii) determine the effects of these polymorphisms on the studied parameters in the total population and in a gender-specific manner (n=590) and (iii) evaluate if miRNAs hsa-miR-33a e hsa-miR-128a are differentially expressed in a subgroup of the population (n=51) and verify its association with plasma levels of high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), subclinical atherosclerosis plus ABCA1, ABCG1 and SCARB1 expression. Thus, normolipidemic and asymptomatic volunteers from both genders, with ages ranging from 20 to 75 years were selected. Clinical and anthropometric data were obtained, as well as peripheral venous blood for biochemical determinations plus DNA and RNA extraction. The subgroup of 51 individuals was classified according HDL-C (mg/dL) in hypoalphalipoproteinemics (hypo, HDL-C?39), hyperalphalipoproteinemics (hyper, HDL-C?68) and controls (CTL, HDL-C?40<68); then, were determinated the carotid intima-media thickness and proteins related to HDL metabolism. The polymorphism rs1893590 interacts with age and BMI, modulating HDL-C levels as well as the particle size and volume, suggesting its role on HDL metabolism and composition. Comparative analysis demonstrated that rs2275543 has different, but beneficial repercussions in both genders; furthermore, rs6720173 determines a pro-atherogenic lipoprotein profile in males, while the variants rs5888 and rs6544718 affect positively adiposity markers in females. The analyses of the five studied polymorphism in this population provide evidences of its role in several pathways of lipoproteins metabolism, in most cases in a gender-specific manner. Moreover, the ABCA1, ABCG1, SCARB1, hsa-miR-33a and hsa-miR-128a expression analysis revealed that hyper group presents a significant increase of ABCA1 and ABCG1 expression in relation to the control group; additionally, hsa-miR-33a decreased by 72%. Together, these results indicate a potential regulatory role of this miRNA in asymptomatic individuals, probably contributing to increased cholesterol efflux and reverse cholesterol transport / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutora em Ciências Médicas

Orientador: Eliana Cotta de Faria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T15:03:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kinchoku_Harumi_M.pdf: 2499549 bytes, checksum: e5ef36d494fba41f42bf6fe5ac2c96dc (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os principais determinantes da dieta que elevam as concentraçoes de LDL-C sao as gorduras saturadas, gorduras trans e, em menor grau, o colesterol da dieta. O aumento relativo na proporçao de carboidratos resulta em dislipidemia caracterizada pelo aumento das concentrações plasmáticas de TG e VLDL-C, baixas concentrações de HDL-C, razão C:HDL aumentada e, algumas vezes, a presença de partículas de LDL-C pequenas e densas.O propósito deste estudo foi avaliar o impacto do aconselhamento nutricional exclusivo em portadores de dislipidemias,verificando a resposta entre sexos e entre faixas etárias (<60 anos e = 60 anos) e a influência do tempo no tratamento (3,6 e 12 meses). Participaram do estudo 129 sujeitos, 56 homens e 73 mulheres com idade entre 20 a 73 anos sem uso de medicaçao hipolipemiante por no mínimo 30 dias antes e durante o tratamento, e com pelo menos três meses de seguimento nutricional. Para hipercolesterolemia foi orientada a restrição de gorduras saturadas (<7% do VET) e colesterol (<200 mg/dL) e, para hipertrigliceridemia a restriçao de carboidratos simples, bebidas alcoólicas e, restrição de gorduras totais (<20% do VET) para TG>300 mg/dL. Na presença de sobrepeso ou obesidade foi orientada dieta hipocalórica com redução gradativa das calorias. As concentrações de colesterol (C), LDL-C, e triglicérides (TG) foram significativamente reduzidas na população estudada em 14%, 5%, 30% respectivamente. No primeiro trabalho, em que foi avaliada a influência do tempo de aconselhamento nutricional comparado ao período basal, as respostas significativas às orientações dietéticas com três meses foram: para C (-16%), LDL-C (-0,1%) e não HDL-C (-19%); com seis meses para C (-13%), TG (-30%), LDL-C (-9%), nao HDL-C (-17%), Castelli I (-14%) e Castelli II (-4%) e, com 12 meses para C (-14%), TG (-27%) e Castelli I (-13%). As concentrações plasmáticas de HDL-C e o peso corporal não se modificaram. Entre os sexos (trabalho 2) foi observado uma redução de 16% para C e 36% para TG em homens, e de 12% para C, 12% para LDL-C, e 26% para TG nas mulheres e, entre faixa etária de 15% para C, 2% para LDL-C e 33% para TG nos adultos e 14% para C nos idosos. O aumento na concentração de HDL-C foi significativa em homens em relação às mulheres (+5% e -4 %) com hiperlipidemia mista.Todos os participantes responderam ao aconselhamento nutricional reduzindo as concentrações de C, TG, LDL-C e a nao HDL-C. O tempo de orientação dietética não modificou as respostas em lípides e lipoproteínas plasmáticos; sendo o tempo de três meses suficiente para observar os efeitos benéficos da dieta. Um maior número de parâmetros foi reduzido com seis meses indicando que a partir de sexto mês houve um efeito mais abrangente da dieta. Homens e adultos foram mais responsivos à orientação nutricional. As respostas foram maiores que os coeficientes de variação biológico para cada parâmetro avaliado exceto para LDL-C.Recomenda-se a aplicação desta experiência terapêutica positiva em outros Serviços de Saúde por se tratar de uma terapia de baixo custo podendo também contribuir na prevenção e controle de doença cardiovascular / Abstract: The strongest dietary determinants of elevated LDL cholesterol concentrations are dietary saturated fatty acid and trans fatty acid intakes to a lesser extent, dietary cholesterol and excess body weight The aim of the present study was to evaluate the responses plasma lipid to nutritional counseling on dyslipidemic outpatients and analyze their responses by gender and age and analyzing the influence of time (3, 6 and 12 months) of treatment. One-hundred and twenty nine dyslipidemic subjects i.e. 56 males and 73 females aged 20 - 73 years comprised this study. No medication was used 30 days before and during following the diet as part of the inclusion criteria. Patients with hypercholesterolemia were oriented to follow the NCEP step 2 diet, and those with hypertriglyceridemia were oriented to restrict simple carbohydrates and alcoholic beverage and, in presence of TG >300 mg/dl, to use low fat diet (=20%). After nutritional counseling plasma cholesterol (C) concentrations, LDL-C, and triglycerides (TG) were significantly reduced in the population sample by (14%, 5%, 30%), respectively. The response were significant after 3 months for C (-16%), LDL-C (-0,1%) and NHDL-C (-19%), after 6 months for C (-13%), TG (-30%), LDL-C (-9%), NHDL-C (-17%), Castelli I (-14%) and Castelli II (-4%) and, after 12 months for C (-14%), TG (-27%) and Castelli I (-13%). No change was detected in plasma HDL-cholesterol and body weight, after nutritional counseling. Between sexes plasma concentrations reduced for C and TG by 16%, and 36% in men, and by 12% and 26% and 12% for LDL-C in women, and between age by 15% to C, 2% to LDL-C and 33% to TG in middle age and, 14% for C in elderly people. HDL cholesterol concentration was significantly higher in men than in women with mixed hyperlipidemia (+5% and -4 %). All participants responded to nutritional counseling reducing C, TG, LDL-C, NHDL-C, LDL-C. The nutritional counseling time did not modify the responses of plasma lipids and lipoproteins. After 3 months, beneficial effects of the diet were observed, and the higher number of parameters were reduced after 6 month showing a broader actions of diet. Men and adults patients presented better responses to nutritional counseling. The responses to nutritional counseling were higher than coefficient biology variation for each parameter evaluated except to LDL-C. We recommend this positive experience is recommended to other Health Service because is low cost treatment and also contribute in prevention and control of risk factors for cardiovascular disease / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, José Eduardo Tanus dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T16:38:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zago_VanessaHelenadeSouza_M.pdf: 4029424 bytes, checksum: 82a248a89f7f9c4b4bee67ad6c6f0d07 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O óxido nítrico (NO) é produzido no endotélio vascular pela óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), enzima regulada negativamente pela presença do polimorfismo T- 786C, levando à disfunção endotelial. A lipoproteína de alta densidade (HDL) têm funções anti-aterogênicas bem estabelecidas, incluindo mecanismos que aumentam a atividade da eNOS. As estatinas são fármacos que possuem, dentre seus efeitos pleiotrópicos, a melhora na função do endotélio e na composição da HDL. Dada a importância tanto da expressão quanto da atividade da eNOS para a função endotelial, bem como dos efeitos pleiotrópicos das estatinas sobre estas duas variáveis, avaliamos os parâmetros bioquímicos e a composição das sub-frações de HDL (HDL2 e HDL3) após uso de placebo e atorvastatina em uma amostra populacional de 30 indivíduos, divididos em dois grupos: 15 indivíduos portadores do polimorfismo T-786C do gene da eNOS (CC) e 15 não portadores (TT). Duzentos indivíduos foram genotipados, e pareamos conforme idade e IMC 15 indivíduos TT e 15 indivíduos CC, que receberam placebo e/ou atorvastatina na dose de 10mg/dia, por 14 dias. Os parâmetros séricos analisados foram determinados através de métodos bioquímicos enzimáticos, radiométricos, nefelométricos e microultracentrifugação. Mediu-se lípides, lipoproteínas, composição das sub-frações da HDL (HDL2 e HDL3), apolipoproteínas, atividade da proteína de transferência de colesteril éster, metabólitos do NO e proteína C reativa. Após o uso da estatina, como esperado, drásticos efeitos redutores foram observados tanto nos lípides, lipoproteínas, apolipoproteínas e de forma independente do polimorfismo, além da redução de ácidos graxos livres nos portadores do genótipo CC. Nas sub-frações a relação lípides/proteínas foi reduzida tanto em HDL2 quanto em HDL3.O aumento da atividade da CETP nos portadores foi corrigido pela estatina e os níveis de ácidos graxos livres reduziram-se de maneira polimorfismo-dependente, em oposição à redução observada do nitrito, que foi polimorfismo-independente. usPCR e Lp(a) não se modificaram. A atorvastatina pode ter atuado sobre o transporte reverso de colesterol através da redução da atividade da lipase hepática e aumento de atividade da PLTP. Foram observadas interações genótipo/tratamento limítrofes para CETP e Lp(a). Estes resultados sugerem que o tratamento com estatinas pode ser relevante na prevenção primária da aterosclerose em portadores do polimorfismo, independentemente de modificações lipídicas séricas. Portanto estes indivíduos se beneficiariam com o uso de estatinas através da modulação da atividade da CETP e redução da concentração de ácidos graxos livres. / Abstract: Nitric oxide (NO) is produced in the vascular endothelium by endothelial nitric oxide synthase (eNOS), an enzyme negatively regulated by the presence of the T-786C polymorphism, leading to endothelial dysfunction. High-density lipoproteins (HDL) have well-established anti-atherogenic functions, for example mechanisms that enhance eNOS activity. Statins are drugs that have pleiotropic effects, such as the improvement in endothelial function and beneficial composition of HDL. Taking into account both the activity of eNOS on endothelial function, and the validity of the pleiotropic effects of statins, we evaluated the biochemical parameters and the composition of subfractions of HDL (HDL2 and HDL3) after use of placebo and atorvastatin at a dose of 10mg/day for 14 days, in a population sample of 30 individuals divided into two genotype groups of the T-786C polymorphism of the eNOS gene: CC (carriers) or TT (non-carriers). Two hundred individuals were genotyped, and the selected groups paired by age and BMI. The serum parameters analyzed were determined using biochemical enzymatic, radiometric, nephelometric and microultracentrifugation methods. We measured lipids, lipoproteins, the composition of sub-fractions of HDL (HDL2 and HDL3), apolipoproteins, activity of cholesteryl ester transfer protein, NO metabolites and hsCRP. After statin, as expected, drastic effects were observed both in lipids, lipoproteins, apolipoproteins, independently of the polymorphism. In HDL sub-fractions the ratio lipid/protein was smaller in both HDL2 and HDL3. CETP activity and free fatty acids were reduced in a polymorphism-dependent manner, and the reduction of nitrite was polymorphism-independent. hsCRP did not change. Atorvastatin may have acted on the reverse cholesterol transport by reducing the activity of hepatic lipase, increased PLTP activity and reducing CETP. There was a genotype/drug interaction effect on CETP and Lp(a). These results suggest that statin treatment may be relevant for primary prevention of atherosclerosis in patients with the polymorphism, irrespective of serum lipid changes. These individuals would benefit from the use of statins because of reduction of CETP activity and free fatty acids. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-22Bitstream added on 2014-06-13T20:56:41Z : No. of bitstreams: 1 franzoi_mcs_me_botfmvz.pdf: 341086 bytes, checksum: cce0dee247b7c3f5e4466d79b3d7017a (MD5) / Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da adição de fontes de lipídeos naturais e protegidos na dieta de bovinos Nelore confinados sobre as características da carne, concentrações de lipoproteínas sanguíneas e perfil de ácidos graxos da gordura do músculo Longissimus. Foram utilizados 120 bovinos, machos, não castrados, da raça Nelore com peso vivo médio inicial de 357,75 ± 18 kg, com idade média de 21 meses, provenientes de sistema de recria em pasto. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, composto por três dietas caracterizando os tratamentos: sem fonte adicional de lipídeo (Controle), com fonte de lipídeo natural a base de coprodutos do algodão (GDESP), e com fonte de lipídeo protegido rico em ácidos graxos poliinsaturados (GPROT). Os animais foram mantidos em 24 baias com cinco animais por baia, sendo que cada tratamento foi composto por oito baias, consideradas as unidades experimentais neste estudo. Foi observado (P < 0,05) efeito de interação entre os tratamentos e dias de mensuração para colesterol e LDL em que, bovinos que receberam GPROT apresentaram maiores concentrações de colesterol e LDL no dia 1e 15, diferente dos animais que receberam GDESP e a dieta Controle, em que apresentaram maiores valores no dia 1 e 86. Não foi observado (P > 0,05) efeito da adição de fontes de lipídeos naturais e protegidos na maioria dos ácidos graxos avaliados, com exceção aos ácidos graxos C14:1, C16:1, C17:1, Ácido transvaccênico, C18:2, ácidos graxos poliinsaturados (PUFA) e PUFA:MUFA, os quais aumentaram nos animais alimentados com gordura protegida. Assim sendo, a suplementação com diferentes fontes de gordura melhora o perfil de ácidos graxos da carne / This study was designed to evaluate the effects of ether rumen-protected-and unproltected-fat on meat characteristics, blood lipoprotein concentration and fatty acid profile of subcuteneas of Longissimus muscle yearling fat. One-hundred-and-twenty Nellore bulls (initial body weight = 357.75 ± 18 kg), medium aged 21 months originating from a pasture system were distributed in a completely randomized design with three treatments, replicated 8 times (5 bulls/pen). Treatments were: without additional fat source (Control); natural fat source based on cottonseed by-products (GDESP); and rumen-protected fat source based on PUFA (GPROT). It wat observed interaction setween the effects of treatements and days of harvs tiry for total cholesterol and LDL. GPROT-fed bulls had greater concentration of total cholesterol and LDL on days 1>15>86 differing from GDESP-fed bulls and Control-fed bulls, which had greater concentrations on days 1 and 86. It was observed effect of addition of natural or rumen-protected fat sources on the fatty acid profile, mainly for C14:1, C16:1, C17:1, trans-vaccenic acid, C18:2, PUFA and PUFA:MUFA, which increased in animals fed rumen protected- fat. Therefore, supplementation with different sources of fat did not alter the parameters evaluated for meat quality and carcass traits. However, the use of protected fat increases the amount of unsaturated fatty acides the fatty acid profile of the meat

Orientadores: Celso Eduardo Benedetti, Thelma Aguiar Pertinhez / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T11:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanini_MarinaMarquesTeixeira_D.pdf: 4190459 bytes, checksum: 7f5524ada199418936817a26a2c2aadb (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Dentro do programa Smolbnet (Structural Molecular Biology Network) da Fapesp (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo), a orf (open reading frame) XAC1516 da bactéria causadora do cancro cítrico, Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), foi selecionada para estudos de estrutura e função. XAC1516 codifica uma lipoproteína de membrana externa semelhante a membros da família OmlA/SmpA (Outer membrane lipoprotein A/Small membrane protein A) de pequenas lipoproteínas, amplamente distribuída entre as Proteobacteria 'beta¿ e 'gama¿. Apesar de se conhecer o papel de muitas lipoproteínas, nenhum membro OmlA/SmpA tem estrutura 3D (tridimensional) determinada e pouco se sabe sobre esta família do ponto de vista funcional, sendo sugerido um possível papel na manutenção da integridade do envelope celular. Curiosamente, no genoma de diversas bactérias o gene omlA apresenta localização adjacente ao gene fur (ferric uptake regulator), que codifica o principal regulador transcricional dos níveis intracelulares de ferro em bactérias Gram-negativas. O curto espaço intergênico entre omlA e fur sugere que os seus promotores são sobrepostos e que suas funções e/ou regulação podem estar associadas. Este trabalho procurou investigar a função da proteína OmlA de Xac, primordialmente através da determinação da sua estrutura 3D e análise das suas propriedades dinâmicas por Ressonância Magnética Nuclear (RMN). Também se buscou estudar a possibilidade de associação regulatória e/ou funcional entre omlA e fur, e o envolvimento do lócus no metabolismo de ferro ou na resposta ao estresse celular. Nós observamos que durante a infecção em folhas de citrus OmlA tem sua expressão aumentada em Xac e que neste processo os genes omlA e fur são co-ativados, sugerindo seu envolvimento na interação planta-patógeno. No entanto, o lócus não foi ativado em condições associadas ao metabolismo de ferro e à regulação por Fur observada em outros organismos. Ensaios de mono-híbrido foram realizados para tentar detectar possíveis fatores de ligação ao promotor do lócus omlA e fornecer informações sobre a sua regulação, mas sem sucesso. Pela primeira vez, as propriedades conformacionais e dinâmicas foram determinadas por RMN para um membro da família OmlA, e a estrutura 3D da proteína OmlA de Xac não revelou sua associação direta com processos de captação de ferro. A proteína possui extremidades desenvoveladas e uma porção central estruturada intercalada por loops flexíveis e composta de três fitas 'beta¿ e duas pequenas 'alfa¿ hélices que se empacotam num arquitetura do tipo bicamada 'alfa¿/¿beta¿. Curiosamente, este enovelamento se assemelha aos domínios da proteína BLIP (ß-lactamase inhibitory protein), um inibidor de 'beta¿-lactamase envolvido em interações proteína-proteína. Testes in vivo de co-expressão das proteínas OmlA e 'beta¿-lactamase não indicaram que OmlA possua atividade de inibição da 'beta¿-lactamase, e que portanto é provável que se associe a outra(s) proteína(s). Possíveis parceiros de interação não foram detectados através de experimentos de pull-down e coimunoprecipitação. Apesar disso, os resultados sugerem que a proteína OmlA pode estar envolvida em algum tipo de interação proteína-proteína associada à infecção na planta e sua co-ativação com fur deve fazer parte de uma resposta global relacionada à ativação de mecanismos de importância para sobrevivência de Xac durante a colonização na planta / Abstract: The XAC1516 gene from the citrus canker pathogen, Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), was selected for structural and functional studies in the context of the Fapesp Smolbnet program. XAC1516 codes for an outer membrane lipoprotein similar to members of the OmlA/SmpA (Outer membrane lipoprotein A/Small membrane protein A) family of small lipoproteins widely distributed across the 'beta¿ and 'gama¿ Proteobacteria. Although the role of numerous bacterial lipoproteins is known, the tridimensional (3D) structure of OmlA/SmpA members has never been reported and little is known about its biological function. However, it has been proposed a role of OmlA in the stability of the cellular envelope. Curiously, the omlA gene is located adjacently to the fur (ferric uptake regulator) gene, which codes for the most important transcriptional regulator of iron intracellular levels in Gram-negative bacteria. The tight intergenic spacement between omlA and fur suggests that they have superimposed promoters and that their function or regulation may be associated. In this work, we have investigated the function of the OmlA protein from Xac essentially through its 3D structure determination and dynamic analysis by Nuclear Magnetic Resonance (NMR). We also investigated the possibility of a functional association between omlA and fur and the involvement of this locus in iron metabolism or cellular stress response. We found that in Xac OmlA expression is enhanced during citrus infection and that in this process omlA and fur are co-activated, thus suggesting their involvement in plantpathogen interaction. The locus, though, was not actived upon conditions associated to iron metabolism or Fur regulation already observed in other organisms. One-hybrid assay were performed in order to detect possible transcriptional factors implicated in omlA/fur expression or repression, but without success. Conformational and dynamical properties of OmlA were determined by NMR. The protein has unfolded N and C termini and a structurally well defined core interconnected by flexible loops and composed by three 'beta¿-strands and two small 'alfa¿-helices, which pack against each other forming a two-layer 'alfa¿/¿beta¿ scaffold. Curiously, this fold ressembles the domains of BLIP ('beta¿-lactamase inhibitory protein), a 'beta¿-lactamase inhibitor involved in protein-protein interaction. OmlA and 'beta¿-lactamase co-expression in vivo experiments did not indicate that OmlA has a 'beta¿-lactamase inhibitory activity. It is possible then that OmlA associates with another protein or proteins, but interacting partners were not detected through pulldown and coimmunoprecipitation assays. Nonetheless, the results suggests that OmlA may be implicated in some sort of protein-protein interaction associated to plant infection and its coactivation with fur may take part of a global response related to activation of important mechanisms for Xac surviving during its colonization in plant / Doutorado / Genetica de Microorganismos / Doutor em Genetica e Biologia Molecular