Made available in DSpace on 2012-09-06T01:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 870.pdf: 2388296 bytes, checksum: 1ead766fa7f91a114a30e50ac21c8820 (MD5) Previous issue date: 2005 / Este estudo se propôs a avaliar o Sistema de Vigilância Epidemiológica (SVE) da Esquistossomose no Estado da Bahia, considerando tanto a esfera estadual como a municipal, esta restrita a dois municípios situados na área endêmica para a esquistossomose no Estado. Trata-se de um estudo avaliativo que contempla os determinantes contextuais da implantação, da intervenção e da avaliação da estrutura e do processo da vigilância epidemiológica da esquistossomose, e utiliza como estratégia de pesquisa o estudo de caso (municípios). Para a coleta dos dados, foram utilizados os roteiros para avaliação de sistemas de vigilância dos Centros de Controle de Doenças -CDC/Atlanta - Estados Unidos, e questionários específicos para análise do contexto, estrutura, processo e atributos do sistema: oportunidade, aceiilidade, simplicidade, flexibilidade, representatividade, sensibilidade, valor preditivo positivo e utilidade. Na série histórica do percentual de positividade para Schistosoma mansoni, no Estado da Bahia, considerando a implantação do Programa de Controle da Esquistossomose (PCE), observou-se uma redução das taxas de positividade. (...) Constatou-se, igualmente, que no Estado da Bahia o Programa de Controle da Esquistossomose foi descentralizado para os municípios e que em cada um deles existe um subsistema de vigilância epidemiológica como parte do SVE municipal, não tendo ocorrido interrupção das atividades, de modo a manter-se o número de exames realizados nos anos de esilização do programa. Apontam, também, para a importância da realização de outras avaliações, na esfera local, capazes de delinear estratégias que venham aprimorar o Sistema de Vigilância Epidemiológica da esquistossomose.

Made available in DSpace on 2016-04-15T13:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 selma_cantanhede_ioc_dout_2015.pdf: 5584268 bytes, checksum: ec561fb39a607f98c3d048ff171a6204 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Neste trabalho são apresentados os resultados do levantamento qualitativo e quantitativo da malacolofauna límnica da microrregião da Baixada Maranhense, MA, considerada de baixa endemicidade para esquistossomose. Dados da helmintofauna associada aos moluscos são também fornecidos. O estudo qualitativo ocorreu no período de novembro de 2011 a julho de 2012 abrangendo os 21 municípios da Baixada Maranhense e mais dois municípios vizinhos, enquanto que o quantitativo foi realizado em quatro desses municípios (Palmeirândia, Pedro do Rosário, São Bento e São Vicente Férrer), entre julho de 2012 e julho de 2014. No estudo qualitativo foram coletados 9.129 moluscos (Ampullariidae, Ancylidae, Planorbidae, Physidae e Succineidae): Biomphalaria glabrata; B. schrammi; B. straminea; Drepanotrema anatinum; D.cimex; D. depressissimum; D. lucidum; Gundlachia radiata; G. ticaga; Hebetancylus moricandi ; Omalonyx matheroni; Physa marmorata; Plesiophysa guadeloupensis; Pomacea maculata e Pomacea diffusa. As espécies Gundlachia radiata, G. ticaga, H. moricandi, P. guadeloupensis, P. diffusa e O. matheroni foram registradas pela primeira vez para o estado do Maranhão. Quanto aos transmissores da esquistossomose, B. glabrata foi encontrada em cinco municípios (Bacurituba, Peri-Mirim, Pinheiro, São Bento e São Vicente Férrer), enquanto B. straminea em nove (Arari, Conceição do Lago Açu, Igarapé do Meio, Monção, Pedro do Rosário, Penalva, Pinheiro, São Bento e Vitória do Mearim), sendo que em Pinheiro e São Bento, essas espécies foram observadas em sintopia No estudo quantitativo foi verificada a ocorrência de 13 espécies das 15 citadas anteriormente (com exceção de D. cimex e O. matheroni), totalizando 9.052 exemplares de gastrópodes límnicos e 111 de Omalonyx sp.. A família Planorbidae e B. straminea apresentaram maior abundância em julho, 2012 onde foi registrada a maior abundância de espécies. A temperatura e a precipitação diária influenciaram positivamente a abundância de B. glabrata e o mesmo foi observado entre a precipitação diária e a abundância de B.schrammi no município de Pedro do Rosário. A maioria das espécies foi categorizada como frequente ou constante e o teste de Kruskal-Wallis demonstrou que não houve variação significativa quanto à distribuição da frequência de gastrópodes límnicos entre os municípios e entre os grupos analisados. Com relação as estações de amostragem, a análise de aninhamento mostrou a existência de subconjuntos de espécies sugerindo que um determinado grupo de espécies mais comuns está presente em todos os ambientes. A Análise de Escalonamento Multidimensional mostrou maior semelhança entre os municípios de São Bento e São Vicente Férrer e entre Palmeirândia e Pedro do Rosário Os quatro municípios investigados apresentaram baixa diversidade, visto a dominância de algumas espécies. Quanto à helmintofauna associada aos moluscos, no período de novembro de 2011 a julho de 2014, foram identificados dez tipos cercarianos, sendo que Echinostome cercaria foi o mais frequente. Cercárias de Schistosoma mansoni foram encontradas em exemplares de B. glabrata em São Bento (outubro de 2012) e São Vicente Férrer (julho de 2014). Pomacea maculata apresentou a maior variedade de tipos cercarianos e foi reportada, pioneiramente, como o primeiro hospedeiro intermediário dos trematódeos Stomylotrema gratiosus e Travtrema stenocotyle. Os resultados mostraram que a microrregião da Baixada Maranhense é epidemiologicamente importante quanto à transmissão da esquistossomose, devido a fatores ambientais e sócio-econômicos que continuam favorecendo a transmissão dessa parasitose, além da presença de dois hospedeiros intermediários de S. mansoni. Com este trabalho, pioneiro para o estado do Maranhão, espera-se contribuir para o conhecimento da biodiversidade deste importante ecossistema do nordeste do Brasil, além de nortear futuros estudos voltados à promoção da saúde da população desse estado / This paper deals with a qualitative and quantitative survey of freshwater gastropods performed in the Baixada Maranhense Microregion, MA, considered of low endemicity for schistosomiasis. Helminths data associated with molluscs are also provided. The qualitative study was conducted from November 2011 to July 2012 covering the 21 municipalities of Baixada Maranhense microregion and two neighboring municipalities, while the quantitative was carried out in four of these municipalities (Palmeirândia, Pedro do Rosário, São Bento and São Vicente Férrer) between July 2012 and July 2014. In the qualitative study they were collected 9.129 snails (Ampullariidae, Ancylidae, Planorbidae, Physidae and Succineidae): Biomphalaria glabrata; B. schrammi; B. straminea; Drepanotrema anatinum; D.cimex; D. depressissimum; D. lucidum; Gundlachia radiata; G. ticaga; Hebetancylus moricandi; Omalonyx matheroni; Physa marmorata; Plesiophysa guadeloupensis; Pomacea maculata and Pomacea diffusa. Six species were reported for the first time to the state of Maranhão: Gundlachia radiata, G. ticaga, H. moricandi, P. guadeloupensis, Pomacea diffusa and O. matheroni. As for the schistosomiasis transmitters B. glabrata was found in five municipalities (Bacurituba, Peri-Mirim, Pinheiro, São Bento and São Vicente Férrer), whereas B. straminea in nine (Arari, Conceição do Lago Açu, Igarapé do Meio, Monção, Pedro do Rosário, Penalva, Pinheiro, São Bento and Vitória do Mearim) These snail vectors were found in sintopy in Pinheiro and São Bento. In the quantitative study 13 species out of the 15 listed above were collected (excepting D. cimex and O. matheroni), totaling 9.052 specimens of freshwater gastropods and 111 Omalonyx sp.. The family Planorbidae and B. straminea had higher abundance in July 2012 where was recorded the highest abundance of species. The temperature and daily precipitation positively influenced the abundance of B. glabrata and the same was observed between daily precipitation and abundance of B.schrammi in Pedro do Rosário. Most species was categorized as frequent or constant and the test Kruskal-Wallis showed no significant variation in the distribution of frequency freshwater gastropods between municipalities and between the collecting sites groups. Regarding sampling stations, the nesting analysis showed the presence of subsets of species suggesting that a certain group of most common species is present in all environments.The Multidimensional Scaling Analysis showed greater similarity among the municipalities of São Bento and São Vicente Férrer and among Palmeirândia and Pedro do Rosário The four investigated municipalities showed low diversity, due to the dominance of some species. As for the associated helminths, from November 2011 to July 2014, ten cercarian types were identified and Echinostome cercaria was the most frequent. Cercariae of Schistosoma mansoni were found in samples of B. glabrata in São Bento (October, 2012) and São Vicente Férrer (July, 2014). Pomacea maculata showed the greatest variety of cercaria types and it was reported, for the first time, as the first intermediate host of the trematodes Stomylotrema gratiosus and Travtrema stenocotyle. The results showed that the Baixada Maranhense microregion is epidemiologically important for schistosomiasis transmission, due to environmental and socio-economic factors that continue to favor the transmission of this disease, in addition to the occurrence of two intermediate hosts S. mansoni. This work, pioneer in the state of Maranhão, is expected to contribute to the knowledge of the biodiversity of this important ecosystem of northeastern Brazil, and guide future studies aiming to promoting the health of the population of that state

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2014-09-19T22:13:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AnálisePerfilExpressão.pdf: 2789555 bytes, checksum: 3ca47b9100f7ac2ba4c0f11d49c5c832 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-07T12:23:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AnálisePerfilExpressão.pdf: 2789555 bytes, checksum: 3ca47b9100f7ac2ba4c0f11d49c5c832 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-07T12:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AnálisePerfilExpressão.pdf: 2789555 bytes, checksum: 3ca47b9100f7ac2ba4c0f11d49c5c832 (MD5) Previous issue date: 2013 / Análises pós genômicas têm propiciado avanços significativos sobre a biologia do parasito Schistosoma mansoni. Particularmente, experimentos de transcrissômica em larga escala apontaram genes essenciais, ligados a vias de degradação proteica intracelular, com expressão diferencial ao longo do ciclo de vida do parasito. Tais achados corroboram com as marcantes alterações fenotípicas observadas após a penetração no hospedeiro vertebrado e o extenso remodelamento corporal necessário para a instalação e maturação do verme adulto no sistema porta-hepático.A presente investigação objetivou determinar o perfil de expressão de subunidades constituintes do proteassoma 26S, em fases larvais e adultas do verme. Neste intuito, oligonucleotídeos específicos para amplificação parcial das subunidades Rpn10 e alfa 7 foram confeccionados. Após a extração de RNA total de vermes adultos seguido de RT-PCR, observou-se amplificação de produtos de aproximadamente 251 e 753 pb, de massas moleculares esperadas para os amplicons relacionados às subunidades Rpn10 e alfa 7, respectivamente. Os produtos de amplificação foram purificados do gel e clonados utilizando o sistema Gateway®. Novos ciclos de amplificação demonstraram a obtenção de plasmídeos recombinantes para as duas subunidades. Entretanto, experimentos de expressão heteróloga em bactérias BL21 não permitiram a detecção epurificação das subunidades alfa 7 e Rpn10 recombinantes no lisado celular. Como proposta alternativa, utilizou-se o plasmídeo PET28a® recombinante contendo a região codificadora da subunidade Rpn10 de S. mansoni, gentilmente cedido pela Dra. Enyara Rezende Morais (Laboratório de Biologia Molecular de Parasitos - Universidade de São Paulo). Após transformação em BL21, seleção de clones recombinantes e indução com IPTG, análises por SDS-PAGE e coloração do gel por Coomassie revelaram a expressão de uma proteína recombinante de massa molecular em torno de 55 kDa. Uma preparação de Rpn10 em alto grau de homogeneidade foi obtida após purificação por afinidade em resina de níquel. Anticorpos policlonais anti-SmRpn10 recombinante foram gerados em camundongos Swiss e utilizados para avaliação do perfil de expressão de Rpn10 em extratos solúveis de cercárias, esquistossômulos (de 3h e 3 dias), vermes adultos, ovos e miracídios. A partir de eletroforese bidimensional, utilizando separação isoelétrica em gel de gradiente linear (pH 3-10) e Western blotting, foram detectadas 3 isoformas para Rpn10 em todos os estágios investigados. Essas apresentaram aumento de expressão no estágio de cercária, o qual foi novamente confirmado por Western blotting 1D comparando as fases analisadas. Este achado refere-se ao primeiro relato da existência de isoformas para a subunidade Rpn10 constituinte do proteassoma 26S e agrega diversidade ao perfil de subpopulações possíveis e alternativas deste complexo proteolítico em S. mansoni __________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Post-genomic analyses have allowed significant advances towards understanding the biology of the human parasite Schistosoma mansoni. In particular, large scaletranscriptome experiments highlighted essential genes related to proteolytic pathways exhibiting differential expression profiles throughout the parasite´s life cycle. Such findings corroborate with the marked phenotypic alterations observed after penetration into the vertebrate host and the extensive body remodeling required for maturation of the adult stage in the hepatic portal system. The present investigation aimed to determine the expression profile of 26S proteasome constituent subunits in both larvae and adult stages. Specific oligonucleotides were first designed for amplification of the subunits Rpn10 and alpha 7. After RNA extraction from adult worms and RT-PCR, amplification products at the expected molecular size (~250 and 750 bp) related to Rpn10 and alpha 7 subunits, respectively, were obtained. The amplification products were purified from the agarose gel and cloned using the Gateway® system. New amplification cycles demonstrated the production of recombinant plasmids for the two subunits under investigation. However, heterologous expression in Escherichia coli (BL21 strain) did not allowed detection and,purification of the respective recombinant proteins from cell lysates. As an alternative, the PET28a® recombinant plasmid containing the full length Rpn10 subunit of S. mansoni was kindly provided by Dr. Enyara R. Morais (Laboratório de Biologia Molecular de Parasitos – Universidade de São Paulo) and employed in this study. After transformation of BL21 E. coli cells, selection of recombinant clones and induction of expression using IPTG, SDS-PAGE analysis revealed the expression of a recombinant protein exhibiting molecular mass around 55 kDa. A homogenous fraction of His-tagged recombinant Rpn10 was obtained after its purification from the cell lysate using a nickel column. Polyclonal antibodies anti-Rpn10 were raised in Swiss mice and used for evaluation of the expression profile of this subunit in soluble extracts from cercariae, 3h schistosomula, adult worms, eggs and miracidia. A two dimensional gel approach (2-DE), using linear pH3-10 gradient for the first dimension, coupled to Western blotting revealed the existence of at least 3 isoforms for Rpn10 subunit in all investigated stages. Such isoforms exhibited upregulation in the cercariae, which was later confirmed by a comparative 1D Western blotting experiment. To our knowledge, this finding refers to the first report for the existence of Rpn10 isoforms and contributes adding further complexity to alternative possibilities of 26S proteasome assembly in S. mansoni.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3082_1.pdf: 5230395 bytes, checksum: c63ef5e4b991b9c47d567dff34b2f53c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Sendo a esquistossomose uma patologia de grande incidência no nordeste brasileiro, estudos a cerca das glicoproteínas particularmente as hepáticas encontradas em pacientes portadores dessa parasitose pode representar importante passo no entendimento de sua fisiopatologia. Além disso, a utilização de duas diferentes lectinas, uma comercial e amplamente caracterizada (Concanavalina A) e outra isolada de sementes de planta típicas da região nordeste (lectina Cramoll) possibilita análise comparativa dos diferentes glicoconjugados plasmáticos ligados a partir da utilização de colunas de afinidade. Numa primeira abordagem, foram realizadas identificações de glicoproteínas plasmáticas, a partir do plasma de indivíduos saudáveis, pré-purificadas em duas diferentes lectinas de mesma especificidade oligossacarídica (glicose/manose). Num segundo momento, identificou-se glicoconjugados em indivíduos, já cirurgiados, acometidos pela esquistossomose no seu mais avançado nível. Nesse contexto, foram realizadas abordagens proteômicas que incluem eletroforeses bidimensionais com posterior digestão enzimática, análise em espectrômetro de massas do tipo Maldi-tof e Maldi-tof/tof e, por fim, a partir dos espectros obtidos, busca em banco de dados através da ferramento Mascot. A grande maioria das glicoproteínas identificadas constituem proteínas de fase aguda incluindo hemopexina, componente 3 do complemento, immunoglobulinas e subunidades, transferrina, haptoglobina, inibidor de protease (c1), beta 2- glicoproteína I, antitrombina, alfa 1-beta-glicoproteina, subunidades de fibrinogênio e alfa- 1 antiquimiotripsina. A Concanavalina A diferentemente da lectina Cramoll, ligou-se a proteínas tais como PRO 1400, PRO2619, eritropoietina, KIAA1492, proteína SPTAN1, R32611_2, cadeia beta do fibrinogênio, alfa-1-B-glicoproteína e Beta-2-glicoproteína. Por outro lado, a lectina Cramoll ligou-se a SH2/SH3 adaptor NCK-beta, proteína de Bence-Jones, anidrase carbônica II e apolipoproteina A-I. Ao analisar o plasma de pacientes cirurgiados utilizando a Concanavalina A e os mesmos parâmetros experimentais, observou-se ausência de proteínas tais como PRO 1400, PRO2619, KIAA1492, proteína SPTAN1 e R32611_2. Em contra partida, foram identificadas proteínas tais como glicoproteína rica em histidina e deferentes subunidades de imunoglobulinas

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9607_1.pdf: 2409888 bytes, checksum: e24bbd822c60f134a89b1cab6d11af3a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2001 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Vários polissacarídeos têm sido classificados como modificadores da resposta biológica. Seus efeitos biológicos especialmente suas atividades anti-tumoral e anti-microbiana, são consideradas como uma conseqüência deste fato. O heteropolissacarídeo extraído da goma de Anacardium occidentale (P JU) é composto por Gal, Ara,Glc, Rha, Xyl e Glc A, em uma proporção molar dc 82:4:6:2:l:5 e sua atividade anti-tumoral in vivo, e in vitro foi previamente demonstrada. A encapsulação em lipossomas tem sido utilizada para potencializar a atividade biológica de fármacos. O objetivo deste trabalho foi elaborar uma formulação de lipossomas contendo P JU e avaliar seu efeito frente ao sarcoma I80 e à infecção experimental pelo S. mansoni. Quinze formulações foram desenvolvidas de acordo com o método de evaporação de fase reversa modificado proposto por Amselem et al.,1990. Estas foram submetidas a testes de estabilidade acelerada e em longo prazo. A taxa de encapsulação do P JU foi calculada através do método de fenol sulfúrico. Obteve-se uma formulação estável positivamente carregada, constituída por fosfatidilcolina, colesterol e estearilamina (7:2:l). A fase aquosa utilizada foi P JU 2,5 mg.rnl-1, em solução tampão fosfato de sódio a 0,2 M, pH 7,4. Esta formulação demonstrou estabilidade até 90 dias. A toxicidade in vivo foi avaliada tratando-se camundongos (n=1O/grupo), via i.p., com P JU livre e encapsulado usando NaCl 150 mnM e lipossomas vazios como controles. A análise histopatológjca do fígado e do baço foi realizada e nenhuma alteração foi observada. A atividade anti-tumoral in vivo foi testada em camundongos usando o Sarcoma 180 como modelo. Em dose única, via i.p., o P JU livre e encapsulado em lipossomas (100 mg.Kg-1) não inibiu o crescimento do tumor. Estas preparações foram também testadas frente a camundongos infectados pelo S. mansoni por via caudal utilizando-se 150 cercárias/animal e tratados com dose única, i.p., das formulações (NaCl 150mM, lipossomas vazios, P JU livre e encapsulado em lipossomas), 24 horas e no 42º dia após a infecção. A evolução temporal da infecção foi avaliada pela presença de ovos do S. mansoni nas fezes de acordo com o método de Kato-Katz, após o 38º dia. Os animais foram sacrificados no 56º dia e a perfusão pelo sistema porta-hepático foi realizada. O P JU livre reduziu a eliminação de ovos em 19,6 e 58%, para o tratamento realizado 24 h e no 42º dia após a infecção, respectivamente. O P JU encapsulado em lipossomas causou uma redução de 82,1 e 88,1%, para as mesmas condições experimentais respectivamente. Estes resultados sugerem que P JU encapsulado' em lipossomas pode ser uma nova possibilidade terapêutica para o tratamento da infecção pelo S. mansoni, considerando sua estabilidade e ausência de toxicidade in vivo

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6401_1.pdf: 1400976 bytes, checksum: f141eeb4eb97a9f155b864302cdd575b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O objetivo do trabalho foi avaliar a atividade esquistossomicida de lipossomas contendo 3-(4-chloro-benzil)-5-(4-nitro-benzilidene)-imidazolidine-2,4-dione FZ4-LPSF (Lipo-FZ4). A solubilidade do FZ4 foi avaliada em diferentes valores de pH. Lipossomas contendo FZ4 foram preparados pelo método de hidratação do filme lipídico com posterior sonicação. A atividade do Lipo-FZ4 foi avaliada em camundongos Swiss infectados com Schistosoma mansoni e tratados com FZ4 livre ou encapsulado em lipossomas com doses de 50, 125 e 200 mg/kg, fracionadas em cinco dias. Os animais foram sacrificados 64 dias após a infecção e o sistema porta-hepático e mesentérico foi perfundido para a recuperação dos vermes adultos A taxa de encapsulação do FZ4 foi determinada pelo método de ultracentrifugação (95.9 ± 1,4 %). Foi verificada uma redução no número de vermes adultos de 24,65 % e 42,4 % para os grupos tratados com FZ4 e Lipo-FZ4, respectivamente. Todos os grupos tratados apresentaram 100 % de alteração no oograma, constatando a redução na ovoposição pelas fêmeas do Schistosoma mansoni. A atividade do FZ4 no tratamento de animais com Schistosoma mansoni foi evidenciada

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-05T17:45:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Thiago José Matos Rocha 2016.pdf: 10877486 bytes, checksum: 16ee48ad5aafb9dedb021cff67654530 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T17:45:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Thiago José Matos Rocha 2016.pdf: 10877486 bytes, checksum: 16ee48ad5aafb9dedb021cff67654530 (MD5) Previous issue date: 2016-02-05 / FACEPE / A esquistossomose mansoni é uma parasitose grave causada pelo trematódeo Schistosoma mansoni. A justificativa para novas alternativas terapêuticas está pautada no fato de que no Brasil, atualmente, praziquantel é o único medicamento empregado para tratamento da esquistossomose, mas seu extensivo uso inevitavelmente culminou em baixas taxas de cura, aparecimento de isolados de Schistosoma mansoni refratários, além de terem sido observados efeitos adversos causados por esse medicamento. Assim, torna-se relevante a busca por novas moléculas esquistossomicidas e, nesse contexto, pesquisas com compostos sintéticos consistem numa alternativa viável. As imidazolidinas são representadas por um grupo de substâncias heterocíclicas pentagonais possuidoras de diversas atividades biológicas, inclusive atividade esquistossomicida. Neste sentido, esse trabalho teve como objetivo investigar a atividade esquistossomicida de novos derivados tioxo-imidazolidínicos. As moléculas sintetizadas foram caracterizadas através de métodos espectroscópicos no infravermelho e ressonância magnética nuclear de hidrogênio e de carbono. Casais de vermes adultos de Schistosoma mansoni foram obtidos por perfusão do sistema porta-hepático e mantidos em cultura no meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro bovino fetal, penicilina (100U/mL) e estreptomicina (100μg/mL). As culturas foram mantidas a 37°C com atmosfera de 5% CO2, e, após 2 horas de adaptação ao meio de cultura, foram adicionados os derivados tioxo-imidazolidínicos. Os parasitos foram mantidos durante cinco dias sendo monitorados a cada 24 horas para avaliação da motilidade, oviposição, acasalamento e mortalidade. Por fim, foi avaliada a ação de LPSF/PTS23 sobre o tegumento dos vermes recuperados nos testes in vitro por microscopia eletrônica de varredura. Os compostos LPSF/PTS5, LPSF/PTS6, LPSF/PTS18, LPSF/PTS19 demonstraram citotoxicidade quando avaliadas (até uma concentração de 10μM) sobre Células Mononucleares de Sangue Periférico, já os derivados LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10, LPSF/PTS23 e LPSF/PTS24 se apresentaram atóxicos até 100 μM. Na atividade esquistossomicida os compostos LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10 e LPSF/PTS23 foram os mais ativos, sendo que LPSF/PTS23 demonstrou atividade em todas as concentrações avaliadas e mortalidade em menor tempo. Os outros compostos, embora não tenham causado mortalidade, foram capazes de causar alteração de motilidade, inibição de oviposição e separação de vermes. Com relação as alterações tegumentares induzidas após incubação com LPSF/PTS23, foi possível observar alterações como destruição de tubérculos com perda de espinhos e formação de vesículas nos vermes machos e erosão do tegumento nos vermes fêmeas. A partir dos resultados obtidos através da avaliação in vitro frente aos vermes adultos do S. mansoni foi possível concluir que dentre todos derivados tioxo-imidazolidínicos avaliados, LPSF/PTS23 pode ser apontado como uma molécula promissora nos estudos de atividade esquistossomicida. / Schistosomiasis mansoni is a serious parasitic disease caused by Schistosoma mansoni. The rationale for new therapeutic alternatives is based on the fact that in Brazil, currently, praziquantel is the only drug used for treatment of schistosomiasis, but its extensive use inevitably resulted in low rates of cure, appearance of isolates of Schistosoma mansoni refractories, besides having been observed adverse effects caused by this drug. So, it becomes relevant to search for new schistosomicidal molecules and, in this context, research on synthetic compounds consists of a viable alternative. The imidazolidines are represented by a group of heterocyclic substances having different pentagonal biological activities, including schistomicidal activity. In this sense, this work aimed to investigate the schistosomicidal activity of new tioxo-imidazolidinic derivatives. The synthesized molecules have been proven through spectroscopic methods in infrared and nuclear magnetic resonance of hydrogen and carbon. Pairs of adult worms of Schistosoma mansoni were obtained by perfusion of hepatic system and maintained in RPMI 1640 medium culture supplemented with 10% of fetal bovine serum, penicillin (100UmL) and streptomycin (100 μ gmL). The cultures were maintained at 37° C with 5% CO2 atmosphere, and, after 2 hours of adaptation to the culture médium, tioxoimidazolidinic derivatives were added. The parasites were held during five days being monitored every 24 hours to assess the motility, oviposition, mating and mortality. Finally, it was evaluated the action of LPSF/PTS23 on the integument of the worms recovered in tests in vitro by scanning electron microscopy. The compounds LPSF/PTS5, LPSF/PTS6, LPSF/PTS18, LPSF/PTS19 demonstrated cytotoxicity when evaluated (up to a concentration of 10 μM) on peripheral blood mononuclear cells; LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10, LPSF/PTS23 and LPSF/PTS24 presented low toxicity until the dosis of 100 μM. Considering the schistosomiasis activity, LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10 and LPSF/PTS23 compounds had major activity (LPSF/PTS23 demonstrated activity in all concentrations evaluated and mortality in less time). Although the other compounds had not caused mortality, they were able to cause change of motility, inhibition of oviposition and separating of worms. Regarding the tegumentary induced changes after incubation with LPSF/PTS23, it was possible to observe changes as destruction of tubers with loss of thorns and formation of vesicles in male worms and erosion of the integument in female worms. From the results obtained by evaluating in vitro activitie against adult S. mansoni worms, it was concluded that of all tioxo-imidazolidinic derivatives evaluated, LPSF/PTS23 can be pointed as a promising molecule in the studies of schistosomicidal activity.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T16:59:19Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Hallysson Douglas Andrade de Araújo.pdf: 2960301 bytes, checksum: 97baeea551ea35079bca0b1ab7a1123d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T16:59:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Hallysson Douglas Andrade de Araújo.pdf: 2960301 bytes, checksum: 97baeea551ea35079bca0b1ab7a1123d (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / CNPQ / No Brasil, Pernambuco é um dos estados com maior prevalência em esquistossomose mansônica, doença cujo principal vetor é a Biomphalaria glabrata. Niclosamida é o principal produto usado de controle da B. glabrata, mas devido a sua toxicidade o seu uso compromete o ecossistema aquático, tornando importante a busca por moluscicidas alternativos e de menor toxicidade ambiental, como por exemplo o ácido úsnico (AU) purificado de Cladonia substellata e o seu derivado o usnato de potássio (USNP). Este trabalho objetivou avaliar a atividade moluscicida do UA e do USNP, sobre estádios embrionários de B. glabrata e moluscos adulto. O AU foi obtido a partir de talos de C. substellata extraído com éter dietílico e purificado em coluna de sílica Gel eluída com clorofórmio:hexano (80:20 v/v). O USNP foi obtido a partir de AU dissolvido em água, a 40°C, seguido por gotejamento KOH (10%) até a completa solubilização da amostra, e em seguida liofilizado e mantido a -80 °C. A estrutura das moléculas foi confirmada por análises de Infra Vermelho (IV) e Ressonância Magnética Nuclear de Prótons (RMN H+). Os embriões (n=100) foram expostos em soluções contendo 1 a 6 μg/mL de AU solubilizados em DMSO (0,5%), bem como USNP em água filtrada e declorada, por 24 h. Após a exposição os embriões foram lavados com água filtrada declorada e observados após 7 dias para verificação da viabilidade (eclosão) e inviabilidade (mortos e malformados). Os grupos controles continham água filtrada declorada, água com DMSO a 0,5% e água com niclosamida (1μg/mL). O teste de toxicidade do AU foi realizado sobre Artemia salina nas concentrações de 1 a 4 μg/mL, por 24 h de exposição. Os resultados mostraram que o AU para os estádios de blástula ocasionou 51% de inviabilidade na concentração de 1,5 μg/mL e em gástrula de 72% na concentração de 4 μg/mL. Para os estádios de trocófora e véliger na concentração de 5 μg/mL foram observados 29 e 93% de inviabilidades respectivamente. Todos os estádios mostraram 100% de inviabilidade para o AU nas concentrações 2, 4,5, 6 e 6 μg/mL respectivamente. Enquanto que para o USNP o estádio de blástula na concentração de 5 μg/ml ocasionou 48% de inviabilidade, sendo resultado semelhante no estádio de gástrula na concentração de 3 μg/mL. Os estádios de trocófora e véliger apresentaram 27 e 26% de inviabilidade para a concentração de 2,5 μg/mL respectivamente. Os seguintes estádios mostraram 100% de inviabilidades para o USNP nas concentrações 6, 4, 4.5 e 4.5 μg/mL respectivamente. Para moluscos adulto o AU apresentou 53 e 87% de mortalidade nas concentrações de 2 e 3 μg/mL após 24 h de exposição e 90 e 100% nas concentrações de 2,5 e 3 μg/mL observados após 7 dias. A toxicidade para A. salina o ácido úsnico apresentou a partir da concentração de 2,5 μg/mL. Portanto, o estudo mostrou que o AU e o USNP demonstraram ser moléculas promissoras no controle ou eliminação da B. glabrata. / In Brazil, Pernambuco is one of the states with the highest prevalence of schistosomiasis, a disease whose main vector is the Biomphalaria glabrata. Niclosamida is the main product used in Control B. glabrata, but due to toxicity its use compromises the aquatic ecosystem, making it important to search for alternative molluscicides and lower environmental toxicity such as usnic acid (UA) purified Cladonia substellata and its derivative potassium usnate (USNP). This study aimed to evaluate the embryotoxic activity UA and USNP on embryonic stages of B. glabrata. The UA was obtained from C. substellata extracted with diethyl ether and purified on silica gel column eluted with chloroform: hexane (80:20 v/v). The USNP was obtained from UA dissolved in water at 40 °C, followed by dropwise KOH (10%) until complete solubilization of the sample, and then lyophilized and kept at -80 °C. The structure of the molecules was confirmed by Infra-red (IR) and Proton Nuclear Magnetic Resonance (1H NMR). The embryos (n = 100) were exposed to solutions containing 1 to 6 μg/mL UA solubilised in DMSO (0.5%) and in USNP filtered and dechlorinated water for 24 h. After exposure the embryos were washed with filtered dechlorinated water and observed for 7 days to verify the viability (hatch) and unviable (death and malformed). The control groups contained filtered dechlorinated water, water with 0.5% DMSO and water with niclosamide (1μg/mL). The UA toxicity test was conducted on Artemia salina environmental bioindicator in concentrations from 1 to 4 (μg/mL) for 24 h of exposure. The results showed that the UA to the blastula stage resulted in the unviable of 51% concentration 1.5 μg/mL and the percentage of gastrula 72% at a concentration of 4 μg/mL. To trochophore and veliger stages in the concentration of 5 μg/mL were observed 29 and 93% unviable respectively. All stages showed 100% unviable for the UA in concentrations 2, 4.5, 6 and 6 μg/mL respectively. While the USNP to the blastula stage at a concentration of 5 μg/mL resulted in 48% of unviable, with similar result in the gastrula stage in the concentration of 3 μg/mL. To the trochophore and veliger stages 27 and 26% have unviable to concentration of 2.5 μg/mL respectively. The following stages showed 100% unviable USNP concentrations for 6, 4, 4.5 and 4.5 μg/mL respectively. For adult mollusks UA showed 53 and 87% mortality at concentrations of 2 and 3 μg/mL after 24 h exposure to 90 and 100% at concentrations of 2.5 and 3 μg/mL observed after 7 days. Regarding toxicity to A. salina UA showed significant toxicity values from the concentration of 2.5 μg/mL. Therefore, the study showed that the UA and USNP proved promising molecules in the control or elimination of B. glabrata.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T18:56:37Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Risoleta Nogueira Soares.pdf: 2630670 bytes, checksum: 1f79508658ef0e95e879014957b6e397 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T18:56:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Risoleta Nogueira Soares.pdf: 2630670 bytes, checksum: 1f79508658ef0e95e879014957b6e397 (MD5) Previous issue date: 2016-09-22 / CNPQ / FACEPE / A 3,4-dihidro-2,2-dimetil-2H- naftol [1,2-b] pirano-5,6-diona ou β-lapachona (β-lap) destaca-se dentre as naftoquinonas devido às suas numerosas propriedades biológicas, principalmente no que diz respeito ao seu potencial anticâncer. Entretanto, sua limitada solubilidade em meio aquoso é um obstáculo a ser transposto para que a mesma torne-se um fármaco aplicável à terapêutica. Objetivando amplificar a solubilidade de moléculas lipossolúveis a tecnologia farmacêutica faz uso de múltiplos recursos, entre eles a complexação em ciclodextrinas (CDs), oligossacarídeos cíclicos capazes de solubilizar em meio aquoso moléculas orgânicas praticamente insolúveis. Estudos preexistentes apontam que β-lap apresenta potencial esquistossomicida: impedindo a penetração de cercarias na pele; inibindo a glicólise aeróbica e alterando a motilidade de vermes adultos; causando descamação, bolhas e ruptura do tegumento. Estima-se que 250 milhões de pessoas distribuídas em 78 países e territórios estejam infectadas pelo schistosoma em todo o mundo. O surgimento de cepas resistentes ou tolerantes ao praziquantel (PZQ), bem como a sugestiva atuação esquistossomicida da β-lap, nos impeliram a avaliar a atuação in vivo desta naftoquinona complexada em 2-O-metil-β-ciclodextrina (MβCD) sobre o S. mansoni (modelo murino). Os camundongos foram infectados com 50 cercarias (cepa BH), posteriormente tratados com β-lap:MβCD por via oral com 50 mg/kg/dia ou 100mg/kg/dia por 5 dias consecutivos, iniciando-se a terapia no 1° (esquistossômulo de pele), 14° (esquistossômulo pulmonar), 28° (vermes jovens) e 45° (vermes adultos) dia pós-infecção. Também foi formado um grupo controle não tratado, controle MβCD e um grupo PZQ. Todos os animais foram eutanaziados no 55°dia pós-infecção. A análise estatística foi realizada com auxílio do GraphPad Prism 6.0., utilizando o teste não paramétrico One-way ANOVA, através da análise de variância (Tukey). Os dados foram expressos como a média ± DP. Em todos os casos, os resultados foram considerados significativos quando p < 0,05. β-lap:MβCD causou redução significativa no número de vermes em comparação ao grupo controle: 33,56%, 35,7%, 35,45% e 36,45%, quando a dose administrada foi 50mg/kg/dia, e 65,00%, 60,342%, 52,721% e 65,007%, quando a dose administrada foi 100mg/kg/dia, no 1°, 14°, 28° e 45°, respectivamente. Nessa mesma fase evolutiva ainda foi possível observar redução percentual significativa no número de ovos imaturos e aumento no número de ovos maduros e mortos. Nossos dados mostram que complexar β-lap em MβCD incrementou sua solubilidade, absorção e biodisponibilidade oral, resultando na atividade esquistossomicida encontrada neste estudo. β-lap inibe a oviposição e, consequentemente, reduz os danos causados pelos antígenos do ovo ao tecido do hospedeiro. Ainda atribuímos a redução do volume médio dos granulomas ao potencial imunomodulador de β-lap. Este trabalho servirá como precedente para que futuras pesquisas sejam feitas com novas formulações alternativas, bem como estudos que visem delinear os mecanismos de ação da β-lap. Além disso, também oferece a possibilidade de que esta naftoquinona torne-se um protótipo para novos fármacos esquistosomicidas aplicáveis à terapêutica. / The 3,4-dihydro-2,2-dimethyl-2H-naphthol[1,2-b]pyran-5,6-dione or β-lapachone (β-lap) stands out among the naphthoquinones due to its numerous biological properties, especially with regard to its potential anticancer. However, its limited solubility in water is an obstacle to be overcome for it to become an applicable to therapeutic drug. Aiming to amplify the solubility of liposoluble molecules, pharmaceutical technology makes use of of multiple resources, including complexation in cyclodextrins (CDs), cyclic oligosaccharides capable of solubilizing in water practically insoluble organic molecules. Previous studies show that β-lap displays schistosomicidal activity: preventing the penetration of cercariae into skin; inhibiting aerobic glycolysis; changing the motility of adult worms; and causing flaking, blistering and rupture of the integument. It is estimated that 250 million people distributed in 78 countries and territories are infected with schistosoma worldwide. The emergence of resistant strains or tolerant praziquantel (PZQ) and suggestive schistosomicidal activity of β-lap, impelled us to evaluate in vivo performance of this naphthoquinone complexed in 2-O-methyl-β-cyclodextrin (MβCD) on S. mansoni (mouse model). Mice were infected with 50 cercariae (BH strain), subsequently treated with β-lap: MβCD orally with 50 mg/kg/day or 100mg/kg/day for 5 consecutive days, starting the treatment on the 1° (schistosomulum skin), 14° (lung schistosomulum), 28° (juvenile worms) and 45 ° (adult worms) day post-infection. It was also formed an untreated control group, MβCD control and a PZQ group. All animals were euthanized the 55th day post-infection. Statistical analysis was performed using the GraphPad Prism 6.0., using the nonparametric One-way ANOVA by analysis of variance (Tukey). Data were expressed as mean ± SD. In all cases, the results were considered significant when p <0.05. β-lap: MβCD caused a significant reduction in the number of worms: 33.56%, 35.7%, 35.45% and 36.45% when the dose was 50mg/kg/day, and 65.00%, 60.342%, 52.721% and 65.007%, when the dose was 100 mg/kg/day, 1 °, 14 °, 28 ° and 45 °, respectively. In this same evolutionary stage it was still possible to observe significant percentage reduction in the number of immature eggs and increase the number of mature eggs and dead. Our data show that complex β-lap in MβCD increased the solubility, absorption and oral bioavailability, resulting schistosomicidal activity found in this study. β-lap inhibits oviposition and hence reduces the damage caused by egg antigens to the host tissue. We still attribute the reduction in the average volume of granulomas to immunomodulatory potential of β-lap. This work will serve as a precedent for future research are made with new alternative formulations, as well as studies aimed at delineating the mechanisms of action of β-lap. It also offers the possibility that this naphthoquinone become a new prototype schistosomicidal drugs applicable to therapy.

Orientador: Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T19:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arena_AndredaSilva_M.pdf: 4059100 bytes, checksum: 59fbc4d20746b970f30b0e81967c411b (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Schistosoma mansoni: atividade de oxamniquine e praziquantel em diferentes estágios de desenvolvimento das linhagens MAP e OuH in vivo A linhagem MAP de S. mansoni apresenta resistência ao oxamniquine em sua fase adulta enquanto que a linhagem OuH, recentemente isolada do campo, parece ter susceptibilidade diminuída ao oxamniquine e também ao praziquantel. Avaliou-se a ação das drogas sobre o comportamento de formas jovens do verme (fases de pele e pulmonar) juntamente com a forma adulta. Camundongos infectados com 120 cercárias com uma das linhagens foram tratados, por via oral, em dose única, de oxamniquine (500 mg/kg) ou praziquantel (350 mg/kg), 24 horas (fase de pele), 7 dias (fase pulmonar) ou 45 dias (fase adulta) após a infecção. A avaliação da atividade das drogas foi realizada sessenta dias após a infecção, perfundindo-se o sistema porta­ hepático dos camundongos, sendo os vermes vivos recuperados, classificados de acordo com a localização (fígado ou mesentério), sexo e acasalamento, sendo realizado também oograma e determinação da porcentagem de eficácia. Nas dosagens utilizadas, os resultados demonstraram que o oxamniquine é ineficaz também contra as formas imaturas da linhagem MAP, sendo, entretanto 100% eficaz contra a linhagem OuH. O praziquantel demonstrou baixa atividade contra as formas imaturas e elevada contra as formas adultas em ambas as linhagens. Fatores relacionados ao hospedeiro, e principalmente às características próprias de cada linhagem, devem ter papel primordial na ação de drogas em diferentes estágios de desenvolvimento de S. mansoni / Abstract: Schistosoma mansoni: activity of oxamniquine and praziquantel of different development stages of MAP and OuH strain in vivo. The MAP strain of Schistosoma mansoni offers resistence to oxamniquine in its adult phase while the OuH strain recently isolated in the field, seems to have less susceptibility to oxamniquine and also to praziquantel. It was analized the young shapes of the worm (Iung and skin phase) together with the adult phase. Mice infected with 120 cercariae by one of the strain, were treated by oral rote in an only dose of oxamniquine (500 mg/Kg) or praziquantel (350 mg/Kg); 24 hours (skin phase), 7 days (Iung phase) or 45 days (adult phase) afier infection. Treated mice and controls were perfused 60 days afie r the adminstration of drug and it was done an evaluation of the drugs activity, so that the alive worms were recovered; classified according to their location (liver or mesenteric veins) sex and mating. It was also done an oogram and setting % efficacy. The results with the doses used in it showed that oxamniquine is not effective even imature forms of MAP strain but, by the other side it is 100% effective against OuH strain. Praziquantel show low activity against immature formes and high activity against adult forms in both strains. Factors related to host and mainly to own characteristics of each strain, must have the prime role in the drugs action in different stages of Schistosoma mansoni development / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas