Orientador : Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T17:51:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_RenataBaldissera_M.pdf: 16871013 bytes, checksum: 3ffd8ef2534e4a4cb6e6dae0d944d6a6 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Uma grande proporção dos pacientes com Doença de Hodgkin e Linfoma não-Hodgkin recidivarão ou não atingirão remissão completa com quünioterapia inicial. O manuseio destes pacientes é usualmente desapontador e a taxa de sobrevida a longo prazo, é inferior a 10%. Resultados de várias séries têm demonstrado que, terapia de alta dose seguida por transplante autólogo de medula óssea ou céluas progenitoras periféricas, pode conseguir melhores taxas de sobrevida livre de doença, a longo prazo, em uma proporção substancial de pacientes. Alta dose de CY, seguida por fatores de crescimento hematopoiéticos, é o regime mais amplamente utilizado para mobilização e coleta de células progenitoras periféricas. O principal objetivo deste estudo prospectivo, foi demonstrar o papel da alta dose de ciclofosfamida em reduzir o crescimento tumoral e promover eficiente mobilização de células CD34+. Além disso, determinar a efetividade da alta dose de CY + VP-16 (+/-MfX na DH), seguida por autotransplante, como terapia de salvamento em pacientes portadores de doença recidivada ou persistente. À partir de 1997 a 2000, 35 pacientes com mediana de idade de 33 anos, portadores de LNH (60%) ou DH (40%) recidivados ou refratários, submeteram-se à tratamento com terapia de escalonamento de dose (CY+ VP-16+/- MfX), seguido por transplante autólogo de células progenitoras periféricas. De acordo com a intenção de tratar, 35 pacientes, foram evoluídos. A mediana global de seguimento foi de 574 dias. 33 pacientes (94.2%) foram submetidos à megaterapia seqüencial e autotransplante com CPP. Estes, receberam uma mediana de 6.42xl08/kg de células CD34+. Os pacientes quimiossensíveis (n=25) e quimionesistentes (n=lO), apresentaram taxas de sobrevida global de 96% e 15%, respectivamente (P=O.0005), à ciclofosfamida. As taxas de SG, ao autotransplante, foram de 92% para os pacientes quimiossensíveis, e 0%, para os pacientes quimiorresistentes (P=O.OO05). Mortalidade relacionada à ciclofosfamida foi de 6.5%. A mortalidade relacionada ao autotransplante foi de 6.00,10. Os resultados são semelhantes e comparam-se favoravelmente à literatura. Alta dose de CY, seguida por megaterapia seqüencial e autotransplante, mostrou ser efetiva e segura, como terapêutica de salvamento em pacientes portadores de LNH a DH, agressivos, com aceitável mortalidade relacionada ao procedimento / Abstract: A substantial proportion of patients with Hodgkjn's Disease (HD) and Non-Hodgkin Lymphoma (NHL) will relapsed or fail to attain a complete remission with initiaI chemotherapy. The management of patients with refractory or relapsing HD or NID is usually disappoing and the long term survival rate is less than 10% .Results of several series demonstrated that High dose therapy followed by ABMT or PBSCT cam yield long term disease-free survival in a substantial proportion of patients, with low transplant-related mortality.High-Dose Cyclophosphamide (HDCY) followed by growth factors is the most widely used chemotherapy for the collection of PBPC. The aim this study, a CIinical Trial non-Randomised Prospective analysis, was to demonstrate the role of High-dose Cyclophospbamide (CY) in reducing tumour burden, promoting efficient mobilisation of CD34+ and also determining the effectiveness of HDCY followed by higb dose of VP-16 and MTX (HD) with PBPC autografting as salvage treatment for these patients. From 1997 to 2000, 35 patients with median age of 33 years (15-65), affected by aggressive NHL (60%) or by IHD (40%)persistent or relapsed disease, were enrolled and treated using high dose escalation (HDCY plus IHDVP-16 plus/minus HDMTX) followed by autologous Peripheral Blood Progenitor Cell Transplantation. According to "Intention to Treat" basis, 35 patients affected by malignant lymphomas were evaluated. The Overall median follow-up was 574 days. 33 patients (94.2%) underwent PBPC autografting and received a median of 6.42 xl08 /Kg (1.0729.3) of CD34+ cells. Chemosensitive patients (n=25) and chemoresistant patients (n=10) at HDCY presented Overall Survival of 96% and 15%, respectively (P=0,0005). Overall Survival was 92% for chemosensitive and 0% for still chemoresistant patients before Transplantation (P=0,0005). Mortality was 6.0% (two patients) related to HDCY and two (6.5%) transplant-related. These results are similar to those reported in the literature. IHDCY + VP-I6 and MTX (HD) followed by autologous PBPC showed to be effective and safe as salvage treatment in chemosensitive patients affected by aggressive NHL and HD, with acceptable mortality related-sequential treatment / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Angelica Zaninelli Schreiber / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-29T06:09:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_AnaBeatrizAlkmim_M.pdf: 21740555 bytes, checksum: 2da7b7011d8bcd82f7bc1473087a9807 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Infecção é a maior causa de morbidade e mortalidade em pacientes submetidos a transplante de medula óssea, e portadores de ma1ignjdades hematológicas. A fonte do agente infectante é, na maioria das vezes, microbiota endógena ou o ambiente hospitalar. Dentre as infecções adquiridas do ambiente hospitalar, as causadas por fungos filamentosos são especialmente invasivas em pacientes imunocomprometidos. Aspergilose é adquirida por inalação dos esporos e, em alguns casos, foi comprovada a colonização nasal anterior ao desenvolvimento da doença invasiva. Neste trabalho, foram isolados e identificadosfungos filamentosos colonizantes de pacientes portadores de doenças hematológicas, e submetidos a transplante de medula óssea. Concomitantemente foram realizadas, no período de um ano, avaliações da micota ambiental da Unidade de Transplante de Medula óssea. De modo geral os principais gêneros isolados tanto de pacientes, quanto do ambiente foram Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Cladosporium e Paecilomyces e Chaetomium, sendo estatisticamente significativa, a presença de Fusarium spp no outono e Cladosporium spp no inverno. Os microrganismos isolados de espécimes clínicos, puderam ser classificados como potencialmente mais patogênicos do que os isolados do ambiente por crescerem mais abudantemente...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Infection is a major cause of morbidity and mortality in bone marrow transplant recipients and in patients with hematologic malignancies. The source of the infecting organism is almost always endogenous flora or the hospital environment. Of the hospital acquired infections complication, infection with opportunistic molds is especially devastating in imunocompromised patients. Aspergillosis is acquired via inhalation of spores, and in some cases, nasal colonization prior to the development of invasive disease has been demonstrated ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Angelica Zaninelli Schreiber / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T06:41:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_Marianeda_M.pdf: 21025254 bytes, checksum: a7e5a59fd73d90c501333923e09dc71d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Infecções oportunistas causadas por espécies de Candida tem aumentado susbstancialmente nos últimos 15 anos, tornando-se um problema cada vez maior em pacientes com câncer, especialmente entre receptores de transplante de medula óssea. Esse aumento tem sido largamente atribuído a neutropenia prolongada, ruptura da barreira mucosa por intensiva quimioterapia, uso de cateteres e antibiótico de amplo espectro, terapia com ciclosporina,DECH, hiperalimentação e estendidos períodos de hoapitalização. C albicans é isolada em cerca de 70 a 80% dos pacientes infectados, enquanto que, o isolamento e outras espécies de Candida era pouco frequente. Entretanto, dados mais recentes, relatam um aumento no isolamento de espécies não albicans, especialmente C glabrata, C tropicalis (5 a 8%), C parapsilosis e C krusei. Neste estudo foi possível observar alguma variações na incidência de C albicans, com acentuado decréscimo nos anos de 1999 e 2000, que coincide com um aumento no isolamento de C glabrata, assim como de C krusei, no último ano. A colonização do trato gastrintestinal e outras regiões corpóreas de modo geral precedem as infecções sistêmicas. Sendo a colonização em múltiplos locais, em contraste à colonização em um único local altamente preditiva para candidíase invasiva em pacientes neutropênicos. Avaliando a colonização por espécies de Candida em pacientes hematológicos, submetidos ou não a transplante de medula óssea, no período de 1996 a 2000, foi possível observar um predomínio de C albicans em SOF, SANAL, ESC e SNF. C glabrata e C krusei foram mais frequentemente isoladas de SANAL e SOF. Cepas de C parapsilosis predominaram em SOF, SNF, SANAL e CAT, enquanto que C tropicalis em SOF, SANAL e SNF. Teste de suscetibilidade a antifiíngicos foram realizados pelo método de microdiluição em caldo, de acordo com NCCLS M27-A (1997). De modo geral frente a fluconazo4 94% das cepas de C. krusei e 46,8% das de C. glabratta podem ser consideradas resistentes. Cem por cento das cepas de C. lusitaniae e 66,7% das de C. tropicalis são SDD. Frente a itraconazo4 72,3% das cepas de C. glabrata e 29,4% das de C. krusei podem ser consideradas resistentes. Cinquenta por cento das cepas de C. lusitaniae e 47% de C. krusei são SDD. Com relação a anfotericina B, 29,4% das cepas de C. krusei podem ser consideradas resistentes / Abstract: Opportunistic infections caused by Candida species have increased substantially over the past 10 to 15 years, becoming a major problem in patients with hematologic malignancies and bone marrow transplant recipients. In this work we performed a retrospective study at HC- UNICAMP in order to evaluate the frequency of Candida species as colonizing microorganisms and/or pathogens in the Hematology and Bone Marrow Transplant Units; selected microorganisms strains to submit to antifungal susceptibility tests with the drugs commonly prescribed in these units and evaluate the possibility of observe correlation between in vitro data and clinical outcome. Evaluating colonizing Candida species isolated from hematological patients, submitted or not to bone marrow transplant between 1996 and 2000, we observed predominance of Candida albicans in oral, nasal and rectal swabs, and sputum. C. glabrata and C. krusei were more frequently isolated from oral and nasal swabs and catheter. Antifungal susceptibility testing were performed by the NCCLS microdilution method, and was possible to observe that 94% of C. krusei and 46.8% of C. glabrata strains presented resistance to fluconazole. For itraconazole, 72.3% of C. glabrata and 24,9% of C. krusei strains were resistant, and the other strains were susceptible or susceptible-dosedependent. Evaluating amphotericin B, 29% of the C. krusei strains could be considered resistant and all the other strains were susceptible. In this study was possible to identify some coincidences between colonizing microorganism and infection causative agent. However, to certificate that the infection occurred by the same strain, it will be necessary a molecular evaluation. We also evaluated the MICs of both strains (colonizing and infection causative agent) and therapeutic records were reviewed, but it was impossible to verify e therapeutic performance / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Claudia Brincoletto Trindade / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:34:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dieamant_GustavodeCampos_M.pdf: 13079941 bytes, checksum: 707f968d3cec2bc7423a09f1d5259293 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Avaliamos, neste trabalho, os efeitos da Geléia Real (GR) sobre o crescimento e diferenciação dos precursores hematopoiéticos da medula óssea e baço em animais infectados com Listeria monocytogenes. Além disso, a atividade estimuladora de colônias do soro, as alterações no peso do baço e a resistência dos animais frente a infecção também foram avaliados. Para tanto, camundongos BALB/c foram tratados profilaticamente, por um período de 7 dias consecutivos, com GR nas doses de 12S, 2S0, SOOe 7SO mg/Kg, por gavagem. Posteriormente, os animais foram infectados intraperitonealmente com uma dose subletal (1,Sx103 bactérias/animal) de Listeria monocytogenes. Para avaliarmos a resistência dos animais frente à infecção, realizamos uma curva de sobrevida utilizando uma dose letal desta bactéria (1,Sx105 bactérias/animal). Nossos resultados demonstraram um decréscimo significativo no número de precursores hematopoiéticos da medula óssea nos animais infectados com Listeria monocytogenes, além de uma significativa hematopoiése extramedular. No entanto, quando os animais foram tratados profilaticamente com GR, independentemente da dose administrada, houve uma reversão da mielossupressão induzida pela infecção, resultando em níveis normais de CFUGM. Outro aspecto importante é com relação à produção de fatores estimuladores de colônias de células hematopoiéticas. Neste sentido, observamos que os animais infectados apresentaram uma maior atividade estimuladora de colônias no soro. A administração prévia de GR, nas quatro doses avaliadas, nos animais infectados, aumentou significativamente a atividade estimuladora do soro, resultando em um aumento no número de CFU-GM em relação aos grupos apenas infectados. Além disso, observamos também, um aumento do peso do baço dos animais infectados, enquanto que valores normais foram obtidos quando os animais receberam GR antes da infecção, em todas as doses administradas. o tratamento com GR aumentou a resistência dos animais frente à listeriose, sendo que a probabilidade de sobrevida para as doses de 125, 250, 500 e 750 mg/Kg foi de 37,5, 37,5, 25 e 12,5%, respectivamente, não havendo diferenças estatisticamente significativas entre si. Nossos resultados sugerem que a GR possui uma potente atividade imunomoduladora, corroborando com resultados existentes na literatura e anteriormente obtidos em nosso laboratório. A ampla faixa terapêutica do composto frente à listeriose foi comprovada, visto que não houve uma alteração significativa entre as respostas imuno-hematopoiéticas nas doses avaliadas, sugerindo que mesmo em baixas concentrações, a GR é capaz de restaurar o sistema imunológico frente à infecção / Abstract: We evaluated in this work the effects of Royal Jelly (RJ) on growth and differentiation of bone marrow and spleen hematopoietics progenitors in Listeria monocytogenes (LM) infected mice. We also evaluated serum colonystimulating activity, alterations in spleen weight and animal resistance front to the infection. In such way, BALB/c mice were profilacticly treated with RJ by gavage for 7 consecutive days with doses at 125, 250, 500 and 750 mg/Kg. Three hours after the last treating day the animais were infected intraperitoneally with a sublethal dose of the bacteria (1x103 LM/animal). To evaluate animal resistance front to the infection we carried out a survival analysis with a lethal dose of the bacteria (1x105 LM/animal). Our results demonstrated significant decrease on the hematopoietic progenitor numbers in LM bearing mice and significant extramedullar hematopoiesis as consequence. In the other hand, myelossupression induced by listeriosis was reverted when bearing mice were treated profilacticly with ali doses of RJ, resulting in normal levels of CFU-GM. Another important aspect regards colony-stimulating factor production by hematopoietic cells. In this direction, we observed that the infected animais presented higher serum colony-stimulating activity. Previous administration of RJ at ali doses in infected mice significantly increased serum stimulatory activity as well as CFU-GM number when compared to non-treated bearing groups. We also observed spleen weight increase in the non-treated infected group at ali doses, which contrasted with normal values obtained in previously treated bearing mice. In addition, the administration of RJ at 125, 250, 500 and 750 mg/Kg increased animal resistance front to listeriosis to 37,5%, 37,5%, 25% and 12,5%, respectively. Our results have demonstrated that RJ has a stimulating effect on the modulation of the immuno-hematopoietic response in mice infected with LM. Moreover, the treatment with RJ increased survival rate in infected mice with lethal dose of the bacteria. We demonstrated that RJ presents extensive therapeutic dose range since the adminisitration of ali evaluated doses (125, 250, 500 and 750 mg/Kg) presented similar results / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Mary L. S. Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miglinski_Debora_M.pdf: 5300105 bytes, checksum: 1b7205ddbf0c8568448b9cbfb1cce059 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Neste trabalho avaliamos o efeito imunomoduIador do extrato seco do Agaricus blazei Murill (ABM) sobre o crescimento e diferenciação dos precursores hematopoéticos de granulócrtos-macrófagos (CFU-GM) na medula óssea e no baço de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes. Além disso a atividade estimuladora de colônias do soro, as alterações no peso do baço e a resistência dos animais frente à infecção também foram avaliados. Para a realização deste estudo, camundongos BALB/c foram tratados previamente à infecção com três diferentes doses de ABM nas concentrações de 500, 1000 e 1500mg/Kg, administradas por gavagem, por sete dias consecutivos. Posteriormente, os animais foram infectados intraperitoneaImente com uma dose subletal (1x 10 3 bactérias/animal) de Listeria monocytogenes para avaliação dos parâmetros hematopoéticos e com uma dose letal (6x 10 4 bactérias/animal) para avaliação da resistência dos animais frente à infecção, através da realização de uma curva de sobrevida. Nossos resultados demonstraram um decréscimo significativo no número de precursores hematopoéticos da medula óssea um aumento significativo na hematopoese extramedular e conseqüente esplenomegalia e um aumento na produção de fatores estimuIadores de colônias, em animais apenas infectados com Listeria monocytogenes. No entanto, quando os animais foram tratados profilaticamente com o ABM, nas doses de 1000 e 1500mg/kg, observamos uma reversão significativa da mielossupressão induzida pela infecção, resultando em níveis normais de CFU-GM. A inibição do desenvolvimento da esplenomegalia e da hematopoese extramedular, nos grupos de animais infectados e pré-tratados nas três doses estudadas também foram observados. Além disso, um aumento significativo na atividade estimuladora do soro, nos animais infectados e prétratados nas três doses estudadas, foram demonstrados em nossos experimentos, sendo que, com as doses de 1000 e 1500mg/K. um aumento adicional no período de 48h após a infecção foi observado. O tratamento com ABM aumentou a resistência dos animais frente à listeriose, sendo que, a probabilidade de sobrevida para as doses de 1000 e 1500mg/Kg foram de 50% e 80%, respectivamente. Nossos resultados sugerem que o ABM possui uma potente atividade imunomoduladora, capaz de aumentar a sobrevida dos animais infectados com uma dose letal de Lisleria monocylogenes, possivelmente devida a capacidade desse extrato de restabelecer a hematopoese medular e esplênica / Abstract: This work anaIyzed tbe immunomodulating effect of Agaricus blazei Murrill (ABM) dried extract on growth and differentiation of hematopoietic precursors of granulocyte-macrophage (CFU-GM) in the bone marrow and spIeen of BALB/c mice infected witb Lisleria monocylogenes. We aIso evaluated the colony stimulating activity of the serum, changes in spleen weigh, and the animals resistance to infection. To conduct the research, BALB/c mice were treated prior to the infection with three difeerent doses of ABM (500, 1000 and 1500mg/Kg), via gavage during seven consecutive days. After that the animals were infected intraperitoneally with a subletha1 dose (1x10 3 bacterial animaI) of Listeria monocytogenes to evaIuate tbe hematopoietic parameters. The animaIs were likely infected with a lethal dose (6x ] 04bacteria/animaI) 10 evaIuate their resistance 10 infection in a survivaI curve. The results showed a significant decrease in the hematopoietc precursors of the bone marrow, a significant increase in extramedular hematopoiesis and consequent spleenmegaly, and an increase in the production of colony stimulating factors in the non-treates infected animaIs. When the animaIs were previously treated with 1000 and 1500mg1Kg of ABM we observed a significant reversion of infection-induced mielosupression, to normal levels, spleenmegaly inhibition and extramedular hematopoiesis in the infected and pretreated groups with all the doses. A significant increase in the serum stimulating activity was also observed in the pretreated infected animais with na adicional increase in a period of 48hs after the infection with 1000 and 1500mg/Kg of the extract. The treatment with ABM increased animal resistance to listeriosis, and the probability of survival for the 1000 and 1500mg/Kg doses was 50% and 80% respectively. These results suggested that ABM is a powerful immunomodulator capable of increasing the survival of animals mfected with a lethal dose of Listeria monocytogenes, possibly due to this extract capacity of restoring marrow and splenic hematopoesis / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Carmino Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:29:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Augusto_LiaGiraldodaSilva_M.pdf: 3420107 bytes, checksum: 39b9e12827703f943f7fe1fb0565142c (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: O autor fez um estudo de seguimento de 61 pacientes, no período de 1985 a 1990, e analisou a morfologia de 57 medulas ósseas, desses casos. Todos os pacientes eram portadores de neutropenia no sangue periférico, secundária a exposição ocupacional ao benzeno, oriundos do parque industrial de Cubatão, e do sexo masculino, com idade variando de 20 a 60 anos e idade media de 35 anos. O estudo das características ocupacionais desses pacientes: 80% , eram do ramo da construção civil, de empreiteiras de manutenção e montagem industrial em área de siderurgia, com tempo médio de exposição de 65 meses. O estudo da evolução do sangue através de tábua de vida, pela técnica atuarial, revelou que a probabilidade estimada, do quadro hematológico periférico se recuperar foi de 52,0% ., ao final do quinto ano de afastamento do risco (intervalo de confiança de 0,52 = 0,06). O estudo da correlação da evolução do sangue periférico com o tempo de exposição, e também com a intensidade das alterações quantitativas no tecido hematopolético, através do logrank test, mostrou não ser estatisticamente significante. A análise histológica e citológica de 57 medulas ósseas, dos pacientes estudados, mostrou alteração em 98,6%. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The author carried out o follow up of 81 neutropenic by cronic benzenic occupational exposilion. They was from the industrial park of Cubatão-SP, and the study was performed during 1985 to 1990. AlI pacients were male with age ranged from 20 to 60 years old. The study of characteristic occupational showed that 80.0% of the workers were,in the maintenance and : construction steel factory. The mean time of exposition was 65 mounths. On the follow up study by life-time method the estimated probability to normalize the peripheral blood count was 52.0% after 5 years of removal the patients from the environmental work risk (aproximate 95%, confidance limits for 5 years was 0.52. ± 0.06 ). The comparisons of the estimated probabilities of the groups with < 24 and >/24 mounths of cronic benzene exposition and with the quantitative disturbances on the bone marrow, by the logrank test, were not statistical significant. The histologic and citologic study of bone marrow showed disease on 98.6% : global hypocellular morrow was found in 89.4%; granulocytes precursors were reduced in 93.0%; erytroblasts ln 24.5%, anà megakarioblasts ln 43.8% On 60.0%, of the pacients the bone marrow showed hipocellurarity with moderate to intensive alterations. Only one case had global hiperplasia / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Medicina

Orientador : Helena Zerlotti Wolf Grotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:05:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Noronha_JoseFernandodeAlmeida_M.pdf: 21963250 bytes, checksum: a96068d0dd466ef3dd89fe108f2b493f (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Introdução: A contagem de reticulócitos e a determinação de sua fração de imaturidade têm mostrado ser satisfatórios na avaliação da eritropoiese após o transplante de medula óssea (TMO). O propósito deste estudo foi avaliar os parâmetros reticulocitários através da contagem de reticulócitos pela citometria de fluxo, em um grupo de pacientes que foram submetidos à TMO autólogo e alogênico. Foram estudados, o modelo de resposta do reticulócito e o valor preditivo da contagem absoluta de neutrófilos (ANC), contagem de plaquetas, número de células CD34+ infundidas e a fonte de enxerto em relação à resposta do reticulócito. Material e Métodos: Foram comparadas a contagem absoluta do reticulócito (RetAbs), o índice médio de fluorescência (MFI) e a razão entre o volume corpuscular médio do reticulócitol volume corpuscular médio do eritrócito maduro (VCMrNCM) com os critérios convencionais (ANC e contagem de plaquetas) em 22 pacientes submetidos à TMO alogênico e 20 pacientes submetidos à TMO autólogo. Resultados: Um aumento abrupto da razão VCMrNCM ou uma elevação no valor do MFI foram os primeiros sinais da recuperação eritropoiética no transplante alogênico (63,8% e 22,8% dos casos, respectivamente). Em 13,6% dos casos, ambos parâmetros reticulocitários apareceram simultaneamente. Dos 20 pacientes submetidos à transplante autólogo, dezessete mostraram a recuperação da eritropoiese, representada pelos parâmetros reticulocitários, mais precoce do que quando indicada pela elevação da ANC. A recuperação de granulócitos e o enxerto de células progenitoras periféricas (CPP) foram variáveis preditivas para resposta de RetAbs no transplante alogênico. No grupo de autólogos, o alto número de células CD34+infundidas, e a recuperação de plaquetas foram variáveis preditivas da resposta de RetAbs. Conclusão: Uma elevação na população de reticulócitos imaturos é o primeiro sinal da recuperação hematopoiética pós -TMO e pode ser útil como um preditor adicional do enxerto medular / Abstract: Introduction: Reticulocyte counts and immature reticulocyte fraction have shown to be adequate in the evaluation of erythropoiesis after bone marrow transplantation (BMT). The purpose of this study was to evaluate reticulocyte parameters by means of flow cytometric reticulocyte counting in a group of patients who had undergone autologous and allogeneic BMT. Pattem of reticulocyte response and predictive value of absolute neutrophil count (ANC), platelet count, number of CD34+cell infused and graft source for reticulocyte response have been studied. Material and Methods: We compared absolute reticulocyte count (RetAbs), Mean fluorescence index (MFI) and Mean reticulocyte volume/ Mean corpuscular volume ratio (MRV/MCV) with conventional criteria (ANC and platelet count) in 22 allogeneic and 20 autologous BMT patients. Results: An abrupt increase of MRV/MCV ratio or a rise in:MFI value were the earliest sign of erythropoietic recovery in allogeneic transplantation (63.6% and 22.8% of cases, respectively). In 13.6% of cases both parameters presented simultaneously. AlI, but 3 autologous transplants showed reticulocyte parameters earlier than ANC recovery. Granulocyte recovery and peripheral blood progenitor cells (PBPC) graft were predictive variables for RetAbs response in allogenic transplantoIn autologous group high number of CD 34+ infused cells and platelet recovery were predictive variables for RetAbs response. Conclusion: A rise in the immature reticulocyte population is the earliest sign of haematopoietic recovery post BMT and may be useful as an additional predictor of engraftment / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Banca: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Leandro Araújo Fernandes / Resumo: O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente e histometricamente, o processo de cicatrização óssea em defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos e tratados com aspirado de medula óssea (AMO), laser em baixa intensidade (LLLT) ou a associação de ambas as terapias. 40 ratos foram divididos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sangüíneo somente. No Grupo AMO, o defeito foi preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu aplicação da LLLT (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo e AMO, respectivamente, e recebeu novamente a aplicação da LLLT. Todos os animais foram submetidos à eutanásia aos 30 dias pós-operatórios. Análises histomorfométrica, usando software de análise de imagem, e histológica foram realizadas. A Área de Osso Neoformado (AON) foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Os dados foram analisados estatisticamente (ANOVA, Tukey, p<0,05). O Grupo AMO/LLLT (38,92 ± 7,12%) apresentou AON significativamente maior que os grupos C (13,75 ± 4,32%), AMO (28,71 ± 10,42%) e LLLT (18,40 ± 7,41%). O Grupo AMO apresentou AON significativamente maior que o controle. Não foram observadas diferenças significativas na AON dos grupos LLLT e C. Dentro dos limites desse estudo, pode-se concluir que a associação AMO/LLLT produziu formação óssea significativamente maior em DTC cirurgicamente criados em calvárias de ratos quando comparada ao controle ou a cada tratamento isoladamente / Abstract: The purpose of this study was to analyze, histologically and histometrically, the influence of bone marrow aspirate (BMA), low-level laser therapy (LLLT) or their combination on bone healing in surgically created critical-size defects (CSD) in rat calvaria. 40 rats were divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In Group BMA, the defect was filled with bone marrow aspirate. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot or BMA respectively, and then irradiated again. All animals were euthanized at 30 days postoperatively. Histometric, using image analysis software, and histologic analyses were performed. Amount of newly formed bone (NFB) was calculated as a percentage of the total area of the original defect. Data were statistically analyzed (ANOVA, Tukey p<0.05). Group BMA/LLLT (38.92 ± 7.12%) had significantly greater NFB than groups C (13.75 ± 4.32%), BMA (28.71 ± 10.42%) and LLLT (18.40 ± 7.41%). Group BMA presented significantly greater NFB than control, while group LLLT did not. Within the limits of this study, it can be concluded that the combination of BMA/LLLT yielded significantly greater bone formation in surgically created CSD in rat calvaria when compared to control, or either treatment alone / Mestre

Submitted by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2015-04-24T16:24:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_SobrevivenciaDispersaoCelulas.pdf: 912810 bytes, checksum: af6e1d7ada611563e2cdf04c1999d261 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2015-04-27T14:45:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_SobrevivenciaDispersaoCelulas.pdf: 912810 bytes, checksum: af6e1d7ada611563e2cdf04c1999d261 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-27T14:45:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_SobrevivenciaDispersaoCelulas.pdf: 912810 bytes, checksum: af6e1d7ada611563e2cdf04c1999d261 (MD5) Previous issue date: 2015 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Estudos experimentais evidenciam o potencial promissor das células da fração mononuclear da medula óssea (CMN-MO) no tratamento de modelos de isquemia cerebral. Sabe-se que as CMN-MOs são sensíveis à modificações microambientais, tal qual aquelas induzidas por uma isquemia, como eventos associados à inflamação. Contudo, pouco se conhece a respeito da biodistribuição e sobrevida dessas células no tecido nervoso pós-lesão. Objetiva-se investigar se a sobrevivência e a disseminação das CMN-MOs são influenciadas pela resposta inflamatória após isquemia estriatal. Parecer CEPAE, protocolo nº 073/12. Transplante heterólogo (5x105 de CMN-MOs) no estriado de ratos Wistar, agrupados entre controles não-tratados (IST) e falso-operado (FO) e tratados (ITCM), perfundidos em 1, 3, 7 e 28 dias. CMN-MO foram impregnadas com Nanocristais Qdot para posterior identificação por microscopia de fluorescência no tecido do receptor. Coloração, por violeta de cresila, e imunoistoquímica básica (IBA1 e ED1) foram aplicadas para análise histopatológica do tecido em microscopia de luz. Testes neurocomportamentais (teste de remoção do adesivo e teste do cilindro) foram realizados para aferir a resposta dos grupos às intervenções. Os achados histopatológicos evidenciam a eficiência do modelo experimental de indução isquêmica em reproduzir a lesão no estriado dorsolateral. O infiltrado celular no grupo IST marca a resposta inflamatória, posteriormente confirmada por imunoistoquímica para ED1 e IBA1; o infiltrado celular no grupo ITCM, evidencia a permanência das CMN-MO em todas as sobrevidas estudadas. O perfil de perda por morte das CMN-MO transplantadas no sítio de lesão é semelhante entre os grupos ITCM e FO, contudo, evidencia que resposta inflamatória do receptor causa maior decaimento do montante celular no grupo ITCM. Procedimentos de infusão celular mais refinados ou automatizados podem melhorar a sensibilidade dos testes comportamentais para discriminar a evolução entre os grupos estudados. Conclui-se que a alteração do microambiente pós-isquemia cria condições que determina a dispersão e a sobrevivência das CMN-MO. Outras análises de imunoistoquímicas podem apontar resultados quanto ao perfil microglial presentes nas sobrevidas estudadas e o grau de imunomodulação pelo estudo da dinâmica das citocinas inflamatórias produzidas. / The studies show the promising potential of bone marrow mononuclear cells (BMMC) for the treatment of stroke models. It is known that the BMMC are sensitive to environmental changes, like those induced by ischemia, such as events associated with inflammation. However, little is known about the biodistribution and survival of these cells in the post-injury nerve tissue. Aims to investigate whether the survival and spread of BMMC are influenced by the inflammatory response after striatum stroke. Heterologous transplantation (5x105 BMMC) in the striatum of rats clustered among untreated controls (CNT) and sham (SHM) and treated (STBC) perfused at 1, 3, 7 and 28 days. BMMC were impregnated with Qdot nanocrystals for identification by fluorescence microscopy in the host tissue. Staining for cresyl violet, and basic immunohistochemistry (IBA1 and ED1) were applied for histopathological analysis of tissue by light microscopy. Neurobehavioral tests (adhesive removal test and cylinder test) were performed to assess the response of groups for interventions. The results show the effectiveness of the experimental model of ischemic induction to reproduce the injury in the dorsolateral striatum. The cell infiltrate in the CNT group shows the inflammatory response, later confirmed by immunohistochemistry for ED1 and IBA1; the cellular infiltrate in STBM group, shows the BMMC of stay in all studied survival. The loss profile for death of BMMC transplanted into the injury site is similar between STBM and SHM groups, however, shows that inflammatory response of the receptor causes more decay of cell amount in STBM group. More refined or automated cell infusion procedures can improve the sensitivity of behavioral tests to discriminate the evolution between groups. To summarize the change of post-ischemic microenvironment creates conditions that determine the distribution and survival of BMMC. Other immunohistochemical procedures may point to the results presented as microglial profile and the degree of the immunomodulation study of the dynamics of inflammatory cytokines produced.

Orientador: Rogério Martins Amorim / Coorientador: Fernanda da Cruz Landim Alvarenga / Banca: Rosangela L. Dittrich / Banca: Juliane Gomes Quitzan / Resumo: O trabalho teve por objetivo avaliar clínica e laboratorialmente a viabilidade e a segurança do transplante intratecal de células-tronco mesenquimais autólogas e alogênicas provenientes da medula óssea (CTM-MO) de cães. Foram utilizados 15 cães, sem raça definida, adultos, de ambos os sexos, clinicamente saudáveis, excetuando dois que apresentavam trauma medular crônico. Foram divididos em três grupos, contendo cinco animais cada. As CTM-MO foram obtidas pela punção da medula óssea, isoladas e cultivadas. O grupo A foi transplantado com CTM-MO autólogas por via intratecal através da cisterna magna, enquanto que o grupo B recebeu as CTM-MO alogênicas e o grupo C (controle) foi aplicado solução tampão fosfato-salina (PBS). O líquido cefalorraquidiano (LCR) foi obtido imediatamente antes do transplante das CTM-MO (momento 1) e no quinto dia após (momento 2), para avaliação físico-química, citológica e da concentração de metaloproteinases (MMP-2 e MMP-9). Todos os animais foram acompanhados por exame físico neurológico pré e pós-transplante. Pelas avaliações clínicas e laboratoriais, não se observaram alterações significativas após o transplante das CTM-MO autólogas e alogênicas por via intratecal, demonstrando ser uma via segura e viável para a utilização de terapia celular em cães / Abstract: The study aimed to evaluate clinical and laboratory viability and safety of intrathecal transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC) autologous and allogeneic of dogs. A total of 15 dogs, mixed breed, adults of both sexes, clinically healthy, except two who had chronic spinal trauma. They were divided into three groups with five animals each. BM-MSC were obtained by puncture of the bone marrow, isolated and cultured. Group A was transplanted with autologous BM-MSC intrathecally via the cisterna magna, while group B received allogenic BM-MSC and group C (control) was administered phosphate buffered saline (PBS). Cerebrospinal fluid (CSF) was obtained immediately before transplantation of BM-MSC (moment 1) and the fifth day after (moment 2) for physico-chemical, cytological and the concentration of matrix metalloproteinases (MMP-2 and MMP-9 .) All Animals were monitored by neurological examination before and after transplantation. By clinical and laboratory evaluations, no significant changes were observed after transplantation of BM-MSC autologous and allogeneic intrathecal, proving to be a safe and viable for the use of cell therapy in dogs / Mestre