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Pooling the strength of the masses Mao Tse-Tung and Pol Pot, with emphasis on mass media and personal influence /

Tong, Po-shan. January 1996 (has links)
Thesis (M.A.)--University of Hong Kong, 1996. / Includes bibliographical references (leaf 83-92). Also available in print.
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Avaliação da relação entre custos de material e recursos humanos nas etapas de empreendimento imobiliário residencial

Silva, Valsonir Alves da 24 October 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Civil, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-24T23:07:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 279818.pdf: 11094003 bytes, checksum: 75e71b98643b65d6e64c11cd323549bc (MD5) / A presente dissertação caracteriza-se como um estudo de caso. Um empreendimento imobiliário residencial composto de oito andares e uma cobertura é o objeto de estudo, denominado neste trabalho como Empreendimento X, desenvolvido e construído por uma empresa localizada na região da Grande Florianópolis com as seguintes características: empreendimento imobiliário residencial é composto de três torres, com oito andares e a cobertura cada uma. Cada Torre apresenta uma área de quatro mil trezentos e cinquenta e seis metros quadrados (4.356 m2). Cada andar é composto de seis apartamentos, com área aproximada de sessenta e cinco metros quadrados (65 m2). Trata-se de uma abordagem real, com objetivo principal de estudar a relação entre custos de material e de recursos humanos nas etapas de construção. Todas as etapas da obra, desde a sua implantação até a entrega, bem como, as apropriações de custos e o relacionamento por meio de percentuais relacionados ao CUB. As análises financeiras resultantes estão apresentadas sob a forma de gráficos e tabelas. Estas etapas correspondem a Serviços Preliminares, Infraestrutura, Supraestrutura, Alvenaria, Instalações Hidrosanitárias, Instalações de Proteção e Combate a Incêndio, Instalações Elétricas, Instalações de Gás, Instalações de Elevador, Instalações de Antena coletiva/ TV/ Telefone/ Interfone, Esquadrias, Esquadrias de Madeira, Esquadrias de Alumínio, Esquadrias de Ferro, Revestimento Externo, Revestimento Interno, Pavimentação, Impermeabilização, Pinturas, Elementos Decorativos e Serviços Complementares. O custo total do empreendimento foi de 2637,04 CUBs, que pode ser considerado de baixo custo dentro da expectativa de mercado. Em função das especificações do projeto, este poderá servir de base para construtores que venham conceber um empreendimento com as mesmas características do aqui apresentado. / The present essay is about a case study. A residential real estate development composed of eight floors and a top floor is the object of study, named in the present work as X Development, developed and built by a company seated in Florianópolis with the following characteristics: residential real estate are composed of three towers, with eight floors each one and the roof. Each tower has an area of four thousand three hundred and fifty-six square meter (4.356 m²). Each floor is composed of six apartments, with an area of approximately sixty-five square meter (65 m2). It is a real approach, and its focus is to study the relation between material and labour costs and human resources in the stages of construction. All the construction stages, from its implement to delivery, as well as appropriations of cost and its relation whith the percentage by CUB. The resulting financial analysis are presented as graphs and tables. These stages represent the Preliminary Services, the Infrastructure, the Suprastructure, Masonry, Hydro-Sanitary Installations, Fire Protection and Fire Fighting Installations, Electrical Installations, Gas Installations, Lift Installations, Collective Antenna Installations for TV/ Telephone/ Interphone, Frames, Wooden Frames, Aluminium Frames, Iron Frames, External Coating, Internal Coating, Paving, Waterproofing, Painting, Decoration Elements and Complementary Services. The total cost of the development was 2637,04 CUBs, which can be considered as low costs, due to the design specifications, serving as basis for other constructors who come to conceive an undertaking with the same characteristics of the one here presented.
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De-revolutionizing the “red classics”: a case study of Tracks in the Snowy Forest in fiction, model opera, television and film

Wang, Liying 10 August 2018 (has links)
“Red classics” generally refer to a collection of Chinese literary works produced from the late 1940s to the mid-1960s. Many of them were remade to film, opera, and television series in different periods. One of the “red classics” was the semi-autobiographical military romance Tracks in the Snowy Forest by Qu Bo. This novel and its many adaptations have been popular for more than half a century. This thesis takes Tracks in the Snowy Forest as a case study to explore how socialist “red classic” works have been “de-revolutionized,” reinvented for a new age and a new audience as products for popular consumption in post-Mao China, as compared to the sterner revolutionary works of the Mao era. / Graduate
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Avaliando o turnover e o absenteísmo em serviços de enfermagem hospitalar

Chaves, Enaura Helena Brandão January 1995 (has links)
Este estudo originou-se da preocupação com a avaliação da qualidade dentro das organizações hospitalares, especificamente dos serviços de enfermagem, onde os enfermeiros desenvolvem a maior parte de suas atividades profissionais, quer estejam atuando diretamente na área assistencial, ou indiretamente, como docentes das diferentes categorias dos profissionais de enfermagem. A complexidade que envolve a área de recursos humanos dentro das organizações delimitou o estudo a dois aspectos que, como tantos outros, interferem sobremaneira na qualidade da assistência de enfermagem: o turnover e o absenteísmo do pessoal, os quais, não obstante sua relevância, carecem de estudos atualizados em nível nacional e cuja bibliografia internacional, na maioria das vezes, está fora do nosso contexto, constituindo apenas uma fonte de consulta, mas não servindo como parâmetro. Através do levantamento de dados, de consulta às fichas de desligamento e de entrevistas com os enfermeiros chefes das unidades selecionadas para o estudo (CTICC, SR, UI e BC) de um hospital de ensino, identificamos um índice de absenteísmo de 10,88% e uma taxa de turnover de 5,27% , os quais, em comparação com a literatura levantada, não podem ser considerados elevados. Determinou, também, em qual setor e em que categoria profissional estes dois fenômenos são mais intensos, estabelecendo as suas principais razões e conseqüências. Os resultados encontrados, tanto em termos do absenteísmo quanto do turnover, levaram a reforçar a importância do enfermeiro assumindo atividades gerenciais nas organizações de saúde e responsabilizando-se pelo trabalho das demais categorias, tanto em termos da qualidade do trabalho desenvolvido como em relação à produtividade alcançada e à satisfação e realização do pessoal. / The present investigation was originated from the concern about quality evaluation in hospitais organizations, more precisely in nursing services, where nurses develop the biggest part of their professionals activities in assistance or education field. Due to the complexity that involves the human resources area within organizations, the study was delimited in two aspects: the turnover and absenteism of personnel. Both of them, even their importance are deficient in upto date studies and bibliography. The purpose of this dissertation is to indicate the turnover and absenteism rate in four units of a university hospital and to determine the causes and consequences of the two phenomena. The results showed that the absenteism rate is 10,88% and the turnover rate is 5,27% which compared with the literature revision can't be considerate elevated. Identify also, in which sector and professional category these two phenomena are more intense and the results reinforce the importance of the nurse, developing manager activities in health organizations, responsible for the work of the others categories in terras of work quality, productivity, job satisfaction and personnel realization.
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Aplicação de CLAE-DAD-EM e CG-EM na caracterização de Blechnum sp. e abordagens in vitro e in silico para a avaliar o perfil multifuncional do ácido rosmarínico em alvos relacionados à neurodegeneração e toxicidade em células-tronco / Applying HPLC-DAD-MS and GC-MS in the characterization of Blechnum sp. and in vitro, in silico approaches to evaluate multifunction profile of rosmarinic acid on targets related with neurodegeneration and stem cells toxicity

Fasolo, Juliana Maria de Mello Andrade January 2015 (has links)
As plantas medicinais são consideradas importantes fontes de compostos biologicamente ativos. Para muitas doenças crônicas, como as neurodegenerações, substâncias que apresentam atividades simultâneas em mais de um alvo relacionado à etiopatologia dessas desordens, constituem potenciais agentes terapêuticos. Nesse contexto, os objetivos deste trabalho foram a avaliação química e biológica de três espécies de samambaias de ocorrência no sul do Brasil: Blechnum binervatum, B. brasiliense e B. occidentale. O isolamento bioguiado foi utilizado para a identificação da(s) substância(s) com potencial atividade em modelos in vitro e in silico relacionados às desordens neurodegenerativas. A avaliação dos extratos e frações permitiu destacar a fração acetato de etila de B. brasiliense como a mais ativa na estabilização de radicais hidroxila (CI50: 12,5 μg/mL) e na inibição da lipoperoxidação (CI50: 10,4 μg/mL), sendo uma das mais ativas frente ao óxido nítrico (CI50: 55,6 μg/mL). Adicionalmente, na inibição da isoforma A da enzima monoamina oxidase (MAO), esta fração foi a que apresentou menor valor de CI50 (28,6 μg/mL). As frações diclorometano também apresentaram bons resultados na inibição da MAO-A, sendo algumas ativas igualmente como antioxidantes. Frente à MAO-B, os extratos e frações das três espécies vegetais demonstraram menores efeitos e foram inativos frente às enzimas acetil e butiril colinesterase, não demonstrando toxicidade em células polimorfonucleares (PMN) de ratos Wistar, na concentração de 1 mg/mL. Utilizando células-tronco cultivadas, os extratos e frações selecionadas, nas concentrações de 100 a 500 μg/mL, não afetaram a viabilidade celular e não apresentaram efeitos tóxicos. Análises químicas por cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada a detector de arranjo de diodos e espectrometria de massas, permitiram a identificação de isômeros dos ácidos cafeoil quínico e cafeoil chiquímico nos extratos das três espécies estudadas. B. binervatum apresentou, ainda, ácido cafeico glicosilado, ácido isosalvianólico A e ácido rosmarínico sulfatado. Ácido salvianólico F foi identificado em B. binervatum e B. occidentale, bem como isômeros do ácido brainico. Ácido rosmarínico foi caracterizado em B. binervatum e B. brasiliense. Quercetina 3-O-glicosídeo e vicenina-2 também foram identificadas. As análises por cromatografia gasosa, acoplada à espectrometria de massas demonstraram que o diterpeno neofitadieno foi o composto majoritário nas frações diclorometano de Blechunm e nas frações hexano de B. occidentale e B. binervatum. Para a fração hexano de B. brasiliense, β-sitosterol foi o principal componente. A partir da fração acetato de etila de B. brasiliense foi isolado o ácido rosmarínico, o qual se mostrou ativo nos ensaios de atividade antioxidante, na inibição da catecol-O-metil transferase (CI50: 26,7 μM) e da MAO-A (CI50: 50,1 μM), sendo proposto mecanismo reversível de inibição desta enzima. Nos estudos de docking foram verificadas as interações moleculares entre o composto e as enzimas MAO-A e COMT, por ligações de hidrogênio e interações hidrofóbicas nos sítios ativos enzimáticos. O composto não apresentou efeitos tóxicos em células PMN de roedores, nas concentrações de 0,5 e 5 mM. Os ácidos rosmarínico e clorogênico isolados do extrato de B. binervatum não influenciaram na viabilidade celular e não induziram efeito tóxico sobre células-tronco (100 a 500 μM), sendo que o ácido rosmarínico foi capaz, ainda, de induzir proliferação celular. Capacidade protetora contra danos celulares causados por H2O2 (1400 μM) foi observada para ambas as substâncias, nas concentrações de 10-100 μM, sendo os resultados corroborados pelas imagens de microscopia celular. O ácido rosmarínico apresentou melhores respostas quando comparado ao ácido clorogênico, sendo mais efetivo na inibição dos danos por H2O2. O conjunto dos resultados obtidos ressalta a importância dos estudos associados químico-biológico de espécies vegetais e aponta para as potencialidades de samambaias como fontes de produtos bioativos, capazes de atuar sobre múltiplos alvos enzimáticos e não-enzimáticos relacionados a doenças neurodegenerativas. / Medicinal plants are considered important sources of biologically active compounds. For many chronic diseases, such as neurodegenerations, substances that present simultaneous activities in more than one target related to the etiopathology of these disorders are considered potential therapeutic agents. In this context, the aims of the study were the chemical and biological evaluation of three fern species, occurring in south Brazil: Blechnum binervatum, B. brasiliense and B. occidentale. The bioguided isolation was employed to identify compound(s) with potential activities at in vitro and in silico models associated to neurodegenerative disorders. The biological evaluation of extracts and fractions allowed to highlight the ethyl acetate fraction of B. brasiliense, which was the most active in the stabilization of hydroxyl radicals (IC50: 12.5 μg/mL) and on lipoperoxidation inhibition (IC50: 10.4 μg/mL), being one of the most active sample against nitric oxide (IC50: 55.6 μg/mL). Furthermore, on the inhibition of isoform A from monoamine oxidase (MAO), this fraction showed the lowest IC50 value (28.6 μg/mL). The dichloromethane fractions also presented good results in the MAO-A inhibition, being some of them active as antioxidants, too. Against MAO-B, extracts and fractions of the three species demonstrated reduced effects and all samples were inactive in the acetyl and butyryl cholinesterase inhibition, showing no toxic effects to polymorphonuclear cells (PMN) from Wistar rats, at 1 mg/mL. Using cultured stem cells, the selected extracts and fractions at 100 to 500 μg/mL did not affect cell viability and absence of cytotoxic effects was observed. The chemical analysis by high performance liquid chromatography, coupled to photodiode array detector and mass spectrometry, allowed the identification of caffeoyl quinic acid and caffeoyl shikimic acid isomers in the three studied fern species. B. binervatum presented also glycosilated caffeic acid, isosalvianolic acid A and sulphated rosmarinic acid. Salvianolic acid F was identified in B. binervatum and B. occidentale, as well as, brainic acid isomers. Rosmarinic acid was characterized in B. binervatum and B. brasiliense. Quercetin 3-O-glycoside and vicenin-2 were also found. Analysis by gas chromatography with mass spectrometry showed the diterpene neophytadiene was the major compound in dichloromethane fractions of Blechunm and in hexane fractions of B. occidentale and B. binervatum. For the hexane fraction from B. brasiliense, β-sitosterol was majority. From the ethyl acetate fraction of B. brasiliense was isolated rosmarinic acid, which was shown to be active in antioxidant assays, in the inhibition of catechol-O-methyltransferase (IC50: 26.7 μM) and MAO-A (IC50: 50.1 μM), being suggested a reversible inhibition mechanism against this enzyme. In docking studies were observed molecular interactions between the compound and MAO-A and COMT enzymes, via hydrogen bonds and hydrophobic interactions in enzyme active sites. The compound did not induce toxic effects to rodent PMN cells, at concentrations of 0.5 and 5 mM. The rosmarinic and chlorogenic acids, isolated from B. binervatum extract, did not influence cell viability and did not induce toxicity to stem cells (100 to 500 μM), the rosmarinic acid was also capable to induce cell proliferation. Protective ability against H2O2-induced cell damage (1400 μM) was observed for both substances at concentrations of 10-100 μM, and the results were supported by cellular microscopy images. Rosmarinic acid presented better responses compared with chlorogenic acid, being powerful inhibitor against H2O2-induced damage. The overall results highlights the importance of associated chemical-biological studies of plant species and points at the potential of ferns as sources of bioactive compounds, capable of modulating multiple enzymatic and non-enzymatic targets related to neurodegenerative diseases.
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Encapsulamento de alquilalumínios em sílica usando sol-gel não hidrolítico

Fernández Caresani, José Rodrigo January 2013 (has links)
Metilaluminoxano, trietilalumínio e trimetilalumínio foram encapsulados em uma rede de sílica usando sol-gel não hidrolítico. Óxidos mistos foram produzidos através da combinação dos precursores da sílica com Mg(OEt)2, MgCl2 e MgCl2 .6H2O. Os xerogéis resultantes foram caracterizados por uma série de técnicas para determinar os elementos, estrutura, textura e características morfológicas dos cocatalisadores encapsulados. A natureza do cocatalisador afeta o tempo de geleificação. A quantidade de cocatalisador encapsulado não parece ser afetada pelo volume do alquilalumínio, mas a rede de sílica e a organização do xerogel foram, de acordo com os resultados do infravermelho e XRD. Uma forte redução da área específica ocorre comparando os sistemas encapsulados com as sílicas sintetizadas em condições semelhantes. Os alquilalumínios encapsulados foram avaliados na polimerização de eteno usando Cp2ZrCl2 como catalisador na presença e ausência de MAO externo. Os cocatalisadores encapsulados não foram ativos em uma relação Al/Zr de 250 a 500. Para os sistemas mistos combinando MAO homogêneo (externo) com MAO encapsulado, a adição do cocatalisador encapsulado parece não afetar a atividade catalítica. O peso molecular dos polímeros obtido usando catalisador encapsulado é inferior ao obtido a partir das reações homogêneas. No entanto, a polidispersão obtida nos polímeros usando cocatalisador encapsulado foi maior que a obtida a partir de sistemas homogêneos e impregnado. / Methylaluminoxane, tetraethylaluminum and trimethylaluminum were encapsulated within a silica-based material using a non-hydrolytic sol-gel process. Mixed oxides were also produced by combining silica precursors with Mg(OEt)2, MgCl2 and MgCl2 .6H2O. The resulting xerogels were characterized by a series of complementary techniques to determine the elemental, the structural, the textural and the morphological characteristics of the encapsulated cocatalysts. The nature of the alkyl aluminum strongly affects the gelification time. The amount of encapsulated cocatalyst did not appear to be affected by the alkylaluminum volume, but the silica network and the xerogel organization were, according to infrared and X-ray diffraction measurements. There was a large surface reduction for the encapsulated systems compared with the silica that was synthesized under the same conditions. The resulting supported alkylaluminum was evaluated in the polymerization of ethylene using Cp2ZrCl2 as the catalyst in the presence and the absence of external MAO. The encapsulated cocatalysts were not shown to be active in the Al/Zr range of 250-500. For the mixed systems that combined homogeneous MAO with encapsulated MAO, the addition of the encapsulated cocatalyst did not appear to affect the catalyst activity. The molecular weight of the polymers that were obtained by using the encapsulated cocatalyst was lower than the molecular weight of the polymers that were obtained by using the homogeneous catalyst. Nevertheless, the polydispersity of the polymers that were obtained in the presence of the encapsulated cocatalyst was greater than polydispersity of the polymers that were produced with the homogeneous catalyst or the impregnated MAO.
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A influência das práticas e das políticas de recursos humanos sobre o absenteísmo e a rotatividade

Dall'inha, Graziella Rejane January 2005 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Produção. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:22:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 225962.pdf: 431124 bytes, checksum: 776959dad5acd7f7d3841e7fb7008926 (MD5) / O presente trabalho teve como principal objetivo realizar um estudo sobre o absenteísmo e a rotatividade e suas influências numa empresa de engenharia, abordados por meio das práticas e políticas de recursos humanos. A metodologia utilizada foi a de estudo de caso, com abordagem qualitativa e quantitativa dos fatos. Os meios de investigação utilizados neste trabalho foram a pesquisa bibliográfica e a pesquisa de campo. Com relação aos fins, este trabalho foi caracterizado como descritivo. Os dados para a realização deste estudo foram obtidos tanto de forma direta como indireta. Diretamente, a coleta deu-se por entrevistas semi-estruturadas junto à chefia e a funcionários da empresa estudada. Indiretamente, os dados foram coletados em documentos legais da referida empresa e de diversas publicações pertinentes à pesquisa. O estudo demonstrou a importância das políticas e das práticas de RH para a redução do absenteísmo e da rotatividade; revelou os principais impactos na empresa provocados pelos altos índices de rotatividade e absenteísmo e pela falta de controle dela sobre estes; além de apresentar um plano de proposta para o controle destes indicadores. Identificados os aspectos avaliados, tanto na prática como na literatura pesquisada, foram caracterizadas as etapas e as atividades do processo, identificados os aspectos e avaliados os impactos na empresa decorrentes do estudo em questão. Dentro desse contexto, verificou-se a possibilidade de trabalhar estas variáveis que influenciam negativamente dentro da empresa, já que esta demonstrou certa facilidade e abertura para o trabalho de novas idéias, implantação de benefícios, etc.
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Uma metodologia de certificação do assentador de revestimento cerâmico

Lima, Luciana Matos Santos January 2003 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Produção. / Made available in DSpace on 2012-10-20T21:50:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 195729.pdf: 613961 bytes, checksum: 1d100c42d9bc68ca62808f218552aafb (MD5) / Uma das principais características do setor da construção é o uso intensivo de mão-de-obra, sem experiência e com baixa qualificação, o que interfere na qualidade e produtividade dos serviços prestados. Um dos processos do sub-setor de edificações que apresenta altos índices de desperdício e baixa qualificação dos profissionais é o de assentamento de revestimentos cerâmicos. Para tanto, este trabalho tem por objetivo elaborar e validar uma metodologia para a certificação de assentadores de revestimentos cerâmicos, visando proporcionar às empresas do setor uma forma para avaliação da qualificação dos profissionais disponíveis no mercado. Realizou-se o desenvolvimento da metodologia em três etapas. A primeira etapa consistiu no desenho e validação do perfil profissional da função de assentador. Posteriormente, com base no perfil validado, foram construídos os instrumentos de avaliação do desempenho do profissional com vistas à certificação. Finalmente, a metodologia foi validada através de sua aplicação em uma empresa do setor da construção civil. Após esta etapa, observou-se que o perfil elaborado foi suficiente para subsidiar e facilitar o processo de avaliação. Os instrumentos desenvolvidos permitem a coleta de evidências precisas e suficientes para a emissão de um julgamento de valor sobre o desempenho de um profissional. Portanto, conclui-se que a metodologia de certificação desenvolvida, composta pelas metodologias de elaboração de perfil e de avaliação, é válida e pode ser utilizada para fins de certificação de profissionais que atuam como assentadores de revestimentos cerâmicos, tanto no âmbito de uma empresa, como no âmbito do mercado de trabalho.
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Avaliando o turnover e o absenteísmo em serviços de enfermagem hospitalar

Chaves, Enaura Helena Brandão January 1995 (has links)
Este estudo originou-se da preocupação com a avaliação da qualidade dentro das organizações hospitalares, especificamente dos serviços de enfermagem, onde os enfermeiros desenvolvem a maior parte de suas atividades profissionais, quer estejam atuando diretamente na área assistencial, ou indiretamente, como docentes das diferentes categorias dos profissionais de enfermagem. A complexidade que envolve a área de recursos humanos dentro das organizações delimitou o estudo a dois aspectos que, como tantos outros, interferem sobremaneira na qualidade da assistência de enfermagem: o turnover e o absenteísmo do pessoal, os quais, não obstante sua relevância, carecem de estudos atualizados em nível nacional e cuja bibliografia internacional, na maioria das vezes, está fora do nosso contexto, constituindo apenas uma fonte de consulta, mas não servindo como parâmetro. Através do levantamento de dados, de consulta às fichas de desligamento e de entrevistas com os enfermeiros chefes das unidades selecionadas para o estudo (CTICC, SR, UI e BC) de um hospital de ensino, identificamos um índice de absenteísmo de 10,88% e uma taxa de turnover de 5,27% , os quais, em comparação com a literatura levantada, não podem ser considerados elevados. Determinou, também, em qual setor e em que categoria profissional estes dois fenômenos são mais intensos, estabelecendo as suas principais razões e conseqüências. Os resultados encontrados, tanto em termos do absenteísmo quanto do turnover, levaram a reforçar a importância do enfermeiro assumindo atividades gerenciais nas organizações de saúde e responsabilizando-se pelo trabalho das demais categorias, tanto em termos da qualidade do trabalho desenvolvido como em relação à produtividade alcançada e à satisfação e realização do pessoal. / The present investigation was originated from the concern about quality evaluation in hospitais organizations, more precisely in nursing services, where nurses develop the biggest part of their professionals activities in assistance or education field. Due to the complexity that involves the human resources area within organizations, the study was delimited in two aspects: the turnover and absenteism of personnel. Both of them, even their importance are deficient in upto date studies and bibliography. The purpose of this dissertation is to indicate the turnover and absenteism rate in four units of a university hospital and to determine the causes and consequences of the two phenomena. The results showed that the absenteism rate is 10,88% and the turnover rate is 5,27% which compared with the literature revision can't be considerate elevated. Identify also, in which sector and professional category these two phenomena are more intense and the results reinforce the importance of the nurse, developing manager activities in health organizations, responsible for the work of the others categories in terras of work quality, productivity, job satisfaction and personnel realization.
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Aplicação de CLAE-DAD-EM e CG-EM na caracterização de Blechnum sp. e abordagens in vitro e in silico para a avaliar o perfil multifuncional do ácido rosmarínico em alvos relacionados à neurodegeneração e toxicidade em células-tronco / Applying HPLC-DAD-MS and GC-MS in the characterization of Blechnum sp. and in vitro, in silico approaches to evaluate multifunction profile of rosmarinic acid on targets related with neurodegeneration and stem cells toxicity

Fasolo, Juliana Maria de Mello Andrade January 2015 (has links)
As plantas medicinais são consideradas importantes fontes de compostos biologicamente ativos. Para muitas doenças crônicas, como as neurodegenerações, substâncias que apresentam atividades simultâneas em mais de um alvo relacionado à etiopatologia dessas desordens, constituem potenciais agentes terapêuticos. Nesse contexto, os objetivos deste trabalho foram a avaliação química e biológica de três espécies de samambaias de ocorrência no sul do Brasil: Blechnum binervatum, B. brasiliense e B. occidentale. O isolamento bioguiado foi utilizado para a identificação da(s) substância(s) com potencial atividade em modelos in vitro e in silico relacionados às desordens neurodegenerativas. A avaliação dos extratos e frações permitiu destacar a fração acetato de etila de B. brasiliense como a mais ativa na estabilização de radicais hidroxila (CI50: 12,5 μg/mL) e na inibição da lipoperoxidação (CI50: 10,4 μg/mL), sendo uma das mais ativas frente ao óxido nítrico (CI50: 55,6 μg/mL). Adicionalmente, na inibição da isoforma A da enzima monoamina oxidase (MAO), esta fração foi a que apresentou menor valor de CI50 (28,6 μg/mL). As frações diclorometano também apresentaram bons resultados na inibição da MAO-A, sendo algumas ativas igualmente como antioxidantes. Frente à MAO-B, os extratos e frações das três espécies vegetais demonstraram menores efeitos e foram inativos frente às enzimas acetil e butiril colinesterase, não demonstrando toxicidade em células polimorfonucleares (PMN) de ratos Wistar, na concentração de 1 mg/mL. Utilizando células-tronco cultivadas, os extratos e frações selecionadas, nas concentrações de 100 a 500 μg/mL, não afetaram a viabilidade celular e não apresentaram efeitos tóxicos. Análises químicas por cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada a detector de arranjo de diodos e espectrometria de massas, permitiram a identificação de isômeros dos ácidos cafeoil quínico e cafeoil chiquímico nos extratos das três espécies estudadas. B. binervatum apresentou, ainda, ácido cafeico glicosilado, ácido isosalvianólico A e ácido rosmarínico sulfatado. Ácido salvianólico F foi identificado em B. binervatum e B. occidentale, bem como isômeros do ácido brainico. Ácido rosmarínico foi caracterizado em B. binervatum e B. brasiliense. Quercetina 3-O-glicosídeo e vicenina-2 também foram identificadas. As análises por cromatografia gasosa, acoplada à espectrometria de massas demonstraram que o diterpeno neofitadieno foi o composto majoritário nas frações diclorometano de Blechunm e nas frações hexano de B. occidentale e B. binervatum. Para a fração hexano de B. brasiliense, β-sitosterol foi o principal componente. A partir da fração acetato de etila de B. brasiliense foi isolado o ácido rosmarínico, o qual se mostrou ativo nos ensaios de atividade antioxidante, na inibição da catecol-O-metil transferase (CI50: 26,7 μM) e da MAO-A (CI50: 50,1 μM), sendo proposto mecanismo reversível de inibição desta enzima. Nos estudos de docking foram verificadas as interações moleculares entre o composto e as enzimas MAO-A e COMT, por ligações de hidrogênio e interações hidrofóbicas nos sítios ativos enzimáticos. O composto não apresentou efeitos tóxicos em células PMN de roedores, nas concentrações de 0,5 e 5 mM. Os ácidos rosmarínico e clorogênico isolados do extrato de B. binervatum não influenciaram na viabilidade celular e não induziram efeito tóxico sobre células-tronco (100 a 500 μM), sendo que o ácido rosmarínico foi capaz, ainda, de induzir proliferação celular. Capacidade protetora contra danos celulares causados por H2O2 (1400 μM) foi observada para ambas as substâncias, nas concentrações de 10-100 μM, sendo os resultados corroborados pelas imagens de microscopia celular. O ácido rosmarínico apresentou melhores respostas quando comparado ao ácido clorogênico, sendo mais efetivo na inibição dos danos por H2O2. O conjunto dos resultados obtidos ressalta a importância dos estudos associados químico-biológico de espécies vegetais e aponta para as potencialidades de samambaias como fontes de produtos bioativos, capazes de atuar sobre múltiplos alvos enzimáticos e não-enzimáticos relacionados a doenças neurodegenerativas. / Medicinal plants are considered important sources of biologically active compounds. For many chronic diseases, such as neurodegenerations, substances that present simultaneous activities in more than one target related to the etiopathology of these disorders are considered potential therapeutic agents. In this context, the aims of the study were the chemical and biological evaluation of three fern species, occurring in south Brazil: Blechnum binervatum, B. brasiliense and B. occidentale. The bioguided isolation was employed to identify compound(s) with potential activities at in vitro and in silico models associated to neurodegenerative disorders. The biological evaluation of extracts and fractions allowed to highlight the ethyl acetate fraction of B. brasiliense, which was the most active in the stabilization of hydroxyl radicals (IC50: 12.5 μg/mL) and on lipoperoxidation inhibition (IC50: 10.4 μg/mL), being one of the most active sample against nitric oxide (IC50: 55.6 μg/mL). Furthermore, on the inhibition of isoform A from monoamine oxidase (MAO), this fraction showed the lowest IC50 value (28.6 μg/mL). The dichloromethane fractions also presented good results in the MAO-A inhibition, being some of them active as antioxidants, too. Against MAO-B, extracts and fractions of the three species demonstrated reduced effects and all samples were inactive in the acetyl and butyryl cholinesterase inhibition, showing no toxic effects to polymorphonuclear cells (PMN) from Wistar rats, at 1 mg/mL. Using cultured stem cells, the selected extracts and fractions at 100 to 500 μg/mL did not affect cell viability and absence of cytotoxic effects was observed. The chemical analysis by high performance liquid chromatography, coupled to photodiode array detector and mass spectrometry, allowed the identification of caffeoyl quinic acid and caffeoyl shikimic acid isomers in the three studied fern species. B. binervatum presented also glycosilated caffeic acid, isosalvianolic acid A and sulphated rosmarinic acid. Salvianolic acid F was identified in B. binervatum and B. occidentale, as well as, brainic acid isomers. Rosmarinic acid was characterized in B. binervatum and B. brasiliense. Quercetin 3-O-glycoside and vicenin-2 were also found. Analysis by gas chromatography with mass spectrometry showed the diterpene neophytadiene was the major compound in dichloromethane fractions of Blechunm and in hexane fractions of B. occidentale and B. binervatum. For the hexane fraction from B. brasiliense, β-sitosterol was majority. From the ethyl acetate fraction of B. brasiliense was isolated rosmarinic acid, which was shown to be active in antioxidant assays, in the inhibition of catechol-O-methyltransferase (IC50: 26.7 μM) and MAO-A (IC50: 50.1 μM), being suggested a reversible inhibition mechanism against this enzyme. In docking studies were observed molecular interactions between the compound and MAO-A and COMT enzymes, via hydrogen bonds and hydrophobic interactions in enzyme active sites. The compound did not induce toxic effects to rodent PMN cells, at concentrations of 0.5 and 5 mM. The rosmarinic and chlorogenic acids, isolated from B. binervatum extract, did not influence cell viability and did not induce toxicity to stem cells (100 to 500 μM), the rosmarinic acid was also capable to induce cell proliferation. Protective ability against H2O2-induced cell damage (1400 μM) was observed for both substances at concentrations of 10-100 μM, and the results were supported by cellular microscopy images. Rosmarinic acid presented better responses compared with chlorogenic acid, being powerful inhibitor against H2O2-induced damage. The overall results highlights the importance of associated chemical-biological studies of plant species and points at the potential of ferns as sources of bioactive compounds, capable of modulating multiple enzymatic and non-enzymatic targets related to neurodegenerative diseases.

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