Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Enfermagem, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2013-01-07T19:56:40Z No. of bitstreams: 1 2012_GeilaMarciaMeneguessi.pdf: 1339982 bytes, checksum: 646a159585056e57b174b89b90348e3d (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2013-01-21T12:19:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_GeilaMarciaMeneguessi.pdf: 1339982 bytes, checksum: 646a159585056e57b174b89b90348e3d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-21T12:19:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_GeilaMarciaMeneguessi.pdf: 1339982 bytes, checksum: 646a159585056e57b174b89b90348e3d (MD5) / A injúria medular pode causar alterações sensitivas, motoras e orgânicas, como a bexiga neurogênica, uma disfunção miccional que pode ocasionar incontinência urinária, com repercussão na qualidade de vida. O objetivo do estudo foi o de conhecer a percepção sobre incontinência urinária e sua influência na qualidade de vida de pessoas com lesão medular. O delineamento escolhido foi o estudo descritivo do tipo transversal. A amostra contou com 101 indivíduos com paraplegia traumática. A coleta de dados foi realizada por meio de entrevista semiestruturada, na qual foram aplicados dois instrumentos: um questionário sociodemográfico e clínico, com objetivo de se conhecerem as características demográficas dos entrevistados e as variáveis que influenciam na qualidade de vida; e o segundo, o International Consultation on Incontinence Questionnaire – Short Form (ICIQ-SF), um instrumento específico, que avalia a qualidade de vida de pessoas com incontinência urinária. Foi realizado o teste de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis para a análise das variáveis com significância estatística (p> 0.05). Além disso, foi realizada uma pergunta de caráter qualitativo com objetivo de conhecer a percepção dos entrevistados sobre incontinência urinária nas atividades diárias, analisada pela técnica de Análise de Conteúdo, de Bardin. A média do escore geral do ICIQ-SF foi 13,21 pontos (DP±3), mediana 14, mínimo 4 e máximo 21 pontos. A análise quantitativa mostrou que houve significância estatística para os domínios social (atividades externas, p=0, 007, atividades físicas, p=0, 035, atividade laboral, p=0, 058); relações pessoas (atividade sexual, p=0, 0003, afetividade, p=0, 002). Não houve significância estatística para as seguintes variáveis: formas de esvaziamento vesical (p=0, 114), uso de medicação (p=0,574), tipo de lesão (p=0,145) e tipo de disfunção da bexiga neurogênica (p=0,798). A análise qualitativa dos dados identificou quatro categorias: a perda urinária incomoda, a perda urinária é constrangedora, não sei se tem banheiro adaptado, estou sempre dependente. Este estudo demonstrou que a incontinência urinária ocasiona grande impacto na qualidade de vida de pessoas com lesão medular, com comprometimento principalmente no domínio social, esfera sexual e relações pessoais. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The spinal cord injury can result in sensory changes, motor and autonomic responses, such as neurogenic bladder, a voiding dysfunction that can cause urinary incontinence with impact of quality of life. The aim of this study was to know the perception of urinary incontinence and its influence on quality of life of people with spinal cord injury. This is a cross-sectional study. The sample consisted of 101 individuals with traumatic paraplegia. Data collection was conducted through semi-structured interview in which both instruments were applied: a sociodemographic and clinical questionnaire, with the objective of knowing of the demographic characteristics of respondents and the variables that influence the quality of life; and the second, the International Consultation on Incontinence Questionnaire – Short Form (ICIQ-SF), a specific instrument, which assesses the quality of life of people with urinary incontinence. It was performed using the Mann-Whitney and Kruskal-Wallis test for analysis of the variables with statistical significance (p> 0.05). In addition, we performed a qualitative question aimed to know the perception of respondents about urinary incontinence in their daily activities, through Content Analysis from Bardin. The average overall score of the ICIQ- SF was 13.21 points (SD±3), median 14 points, minimum 4 and maximum 21 points. Quantitative analysis showed that there was statistical significance for the social domain (outside activities, p = 0.007, physical activities, (p = 0.035, work activity, p = 0.058); personal relationship (sexual activity, p = 0.0003, affectivity, p = 0.002).There was no statistical significance for the following variables, bladder emptying (p = 0. 114), medication use (p = 0.574), type of lesion (p = 0.145) and neurogenic bladder dysfunction (p = 0.798). Qualitative analysis of data identified four categories: bothersome urinary loss, urinary loss is embarrassing, I do not know if you have adapted bathroom, I’m always depending. This study show as the urinary incontinence causes major impact on quality of life of people with spinal cord injury, especially with involvement in the social, sexual aspects and personal relationships. _________________________________________________________________________________ RESUMEN / La lesión de la médula espinal causa cambios sensoriales, motores y las respuestas autonómicas, entre ellas la vejiga neurogénica, disfunción miccional que puede causar incontinencia urinaria con a la mala calidad de vida. El objetivo de este estudio fue conocer la percepción de la incontinencia urinaria y su influencia en la calidad de vida de las personas con lesión de la médula espinal. El diseño elegido fue un estudio descriptivo de corte transversal. La muestra consistió en 101 individuos con paraplejía traumática. La recolección de datos se llevó a cabo a través de entrevista semi-estructurada en la que ambos instrumentos se aplicaron un cuestionario sociodemográfico y clínico, con el fin de conocer las características demográficas de los encuestados y las variables que influyen en la calidad de vida y, en segundo lugar, se utilizó lo International Consultation on Incontinence Short Form (ICIQ-SF), un instrumento específico, que evalúa la calidad de vida de las personas con incontinencia urinaria. Se realizó la prueba de Mann-Whitney y Kruskal-Wallis para el análisis de las variables con significación estadística (p> 0,05). Además, se realizó una pregunta cualitativa que tuvo como objetivo conocer la percepción de los encuestados acerca de la incontinencia urinaria en su día a día, analizadas por el método de Análisis de Contenido, de Bardin. La puntuación media global del ICIQ-SF era 13.21 puntos (± 3), mediana de 14 puntos, mínimo 4, máximo 21 puntos. El análisis cuantitativo mostró que había significación estadística para el ámbito social (actividades fuera, p = 0,007, actividades física = 0,035, la actividad laboral, p = 0,058); la relaciones personales (la actividad sexual, p= 0,0003, afecto, p= 0,002). No hubo significación estadística para las siguientes variables: método de drenaje de la vejiga (p = 0, 114), el uso de medicación (p = 0,574), el tipo de lesión (p = 0,145) y el tipo de disfunción de la vejiga neurogénica (p = 0,798). El análisis cualitativo de datos identifica cuatro categorías: pérdida urinaria molesta, pérdida urinaria es vergonzoso, no sé si tiene baño adaptado, siempre estoy dependiente. Este estudio demostró que la incontinencia urinaria provoca gran impacto en la calidad de vida de las personas con lesión de la médula espinal, especialmente con la participación en el ámbito social, las relaciones sexuales y personales.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Enfermagem, Programa de Pós Graduaçao em Enfermagem, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2013-01-11T18:20:48Z No. of bitstreams: 1 2012_JulianaPaulaDiasdeSousaTeixeira.pdf: 3489181 bytes, checksum: b276e0c39c2c10490991774521eba1d1 (MD5) / Rejected by Leandro Silva Borges(leandroborges@bce.unb.br), reason: Rejeitado on 2013-01-11T18:22:16Z (GMT) / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2013-01-11T18:23:19Z No. of bitstreams: 1 2012_JulianaPaulaDiasdeSousaTeixeira.pdf: 3489181 bytes, checksum: b276e0c39c2c10490991774521eba1d1 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2013-01-21T11:37:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_JulianaPaulaDiasdeSousaTeixeira.pdf: 3489181 bytes, checksum: b276e0c39c2c10490991774521eba1d1 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-21T11:37:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_JulianaPaulaDiasdeSousaTeixeira.pdf: 3489181 bytes, checksum: b276e0c39c2c10490991774521eba1d1 (MD5) / Estudos mostram que a baixa aderência ao tratamento medicamentoso em indivíduos com condições crônicas, como a lesão medular, permanece um problema de difícil solução. A implementação dos programas de autoadministração de medicamentos (PAM) em diversos ambientes hospitalares são estratégias viáveis para a melhoria do conhecimento, autonomia e aderência ao tratamento medicamentoso. Assim, a presente pesquisa objetivou avaliar a efetividade de um PAM direcionado à pacientes adultos com lesão medular, em um centro de reabilitação do Distrito Federal, Brasil, quanto ao conhecimento e aderência ao regime medicamentoso prescrito na admissão, alta e pós-alta hospitalar, bem como verificar taxa de erros na autoadministração de medicamentos e satisfação dos pacientes durante a participação no programa. Trata-se de um estudo de coorte, com formação de dois grupos de comparação, através de seleção não aleatória de 29 participantes em cada grupo, expostos a dois tipos de tratamentos: administração de medicamentos pelo enfermeiro (grupo controle) e autoadministração de medicamentos (grupo estudo). A coleta dos dados ocorreu na admissão, alta e 30 dias após a alta hospitalar, com protocolos desenvolvidos para avaliar variáveis sociodemográficas, conhecimento e aderência ao tratamento medicamentoso, monitoramento de erros na autoadministração e satisfação com o programa na opinião do grupo estudo. Para medida de aderência ao tratamento foram utilizados os questionários de Morisky-Green e Delgado & Lima, com adaptações ao estudo. Realizou-se tratamento estatístico descritivo e inferencial dos dados. Os resultados demonstraram que participantes do grupo estudo apresentaram conhecimento significativamente melhor na alta hospitalar e possuíam 2,36 vezes maior probabilidade de conhecer o tratamento prescrito, quando comparado ao grupo controle. O conhecimento do grupo controle aumentou no pós-alta hospitalar, equiparando-se ao grupo estudo. O grupo controle apresentou nível de aderência significativamente melhor na admissão, contudo, ambos os grupos evoluíram com nível de aderência semelhantemente no pós-alta, embora o grupo estudo apresentasse duas vezes mais chance de aderir. O PAM contribuiu para eliminação dos não aderentes no pós-alta em 17%. Identificou-se associação positiva entre o conhecimento e a aderência. 94% estavam satisfeitos com o PAM, enquanto 48% do grupo controle gostariam de experimentar o programa. Quase metade dos participantes possuía dificuldade para manejar os materiais empregados no PAM. Quase metade do grupo controle interessou em participar do PAM, o que poderá ser incorporado através de uma política de autoadministração, aliada à segurança do paciente. O PAM foi efetivo na melhoria do conhecimento do regime medicamentoso na alta hospitalar e promoveu alta satisfação e autonomia aos participantes. A baixa incidência de erros de autoadministração e a ausência de danos aos participantes do PAM colaboram para sua manutenção. As sugestões dos participantes para adequação dos recursos materiais empregados no PAM é pertinente, além de incentivar a colaboração dos pacientes. Apesar da contribuição do PAM sobre a aderência, esta ainda é baixa, sendo imprescindível seu aprimoramento. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Studies show that the poor adherence to medications prescriptions in individuals with chronic conditions, as spinal cord diseases, stays a problem of difficult solution. The implementation of the self-administration of medicines (SAM) in several unit clinics are viable strategies for the improvement of the knowledge, autonomy and medication adherence. The present study aimed at to evaluate the effectiveness of the PAM addressed to patient with spinal cord diseases in a rehabilitation center of the Federal District, Brazil, as for the knowledge and medication adherence in the admission, discharge and post discharge, to verify the tax of mistakes in the self-administration of medicines and the patients' satisfaction during the participation in the program. It established cohort study with formation of two comparison groups, through selection no random of 29 patient in each group with different treatments: administration of medicines for the nurse (control group) and the self-administration of medicines (study group). The collection of the data happened in the admission, discharge and 30 days after discharge with protocols developed to evaluate variables socio-demographics, knowledge and medication adherence, follow up of mistakes in the self-administration and satisfaction with the program. The measure of medication adherence used of the questionnaires of Morisky, Green e Levine e Delgado e Lima with adaptations to the study. It accomplished descriptive and inferencial statistical treatment of the data. The results demonstrated that patient in the group of the self-administration presented knowledge significantly better in the discharge and possessed 2,36 times larger probability of knowing the treatment compared to the group of the administration of medicines by the nurse. The knowledge of the control group increased in the after discharge, being compared to the study. The control presented level of adherence significantly better in the admission, however both groups developed with level of similar adherence in the after discharge, although the group study presented more chance twice of adhering. PAM contributed to eliminate the non- adherent in the post discharge in 17%. It identified positive association between the knowledge and adherence. 94% were satisfied with PAM, while 48% of the control group would like to try the program. Almost the participants' half possessed difficulty to handle the materials employed in PAM. Almost half of the control group interested in participating in PAM, what can be incorporate through an self-administration politics, allied the patient's safety. PAM was effective in the improvement of the knowledge of the medication treatment in the discharge and it promoted larger satisfaction and autonomy of the participants. The low incidence of mistakes of the self-administration and absence of damages to the participants of PAM collaborate for its maintenance. In spite of the contribution of PAM about the adherence, this is still low, needing indispensable improvement of the program. The participants' suggestions for adaptation of the employed materials resources in PAM are pertinent, besides motivating the patients’ cooperation.

A mortalidade em pessoas com lesão medular é três vezes maior que na população em geral. As doenças cardiovasculares são umas das mais relevantes na lista de doenças que as acometem, ocorrendo cada vez mais precocemente. Dentre os fatores de risco para doenças cardiovasculares a inatividade física é um importante fator modificável para esta população. O grupo de tetraplégicos é o que demonstra maior comprometimento físico. Devido ao menor recrutamento muscular voluntário, as possibilidades terapêuticas para o condicionamento cardiorrespiratório são limitadas. Entre as alternativas terapêuticas está o cicloergometro com estimulação elétrica funcional computadorizada - CFES. Este estudo teve como objetivo comparar os efeitos do condicionamento dos músculos estimulados por corrente elétrica em pacientes tetraplégicos na frequência de treinamento de uma (1) vez por semana e de três (3) vezes por semana, durante seis meses de treinamento. Quatorze indivíduos adultos, homens, tetraplégicos, divididos aleatoriamente em dois grupos, realizaram CFES com as diferentes frequências de treinamento. Foi avaliada a variável trabalho desenvolvida durante cada sessão. A análise estatística foi realizada através de inferência bayesiana. As observações realizadas no presente estudo indicam que o desempenho musculoesquelético do grupo de treinamento de três vezes por semana pode ser melhor que o de uma vez por semana. A variabilidade de desempenho encontrada em estudos longitudinais sugere protocolos de intervenção mais abrangentes. / Mortality in people with spinal cord injury is three times higher than in the overall population. Cardiovascular diseases are the most prevalent one affecting these individuals, occurring increasingly at an earlier age. With the risk factors for cardiovascular diseases, physical inactivity is an important and modifiable aspect for this population. The quadriplegic group is the one showing the larger physical impairment. Due to the lower volunteer muscle recruitment, therapeutic possibilities for cardiorespiratory conditioning are limited. Among the therapeutic alternatives is the computadorized functional electric stimulation - CFES. This study aimed to compare the effects of ergometric training over the conditioning of the muscles of quadriplegic patients, stimulated by electric current, once and three times a week, for six months of training. Fourteen quadriplegic male adults were divided randomly into two groups, performing the training in the different treatment frequencies. Mechanical work varialble was assessed throughout each treatment session. The statistical analysis was performed by Bayesian Inference. The study\'s observations indicate that the musculoskeletal performance of those in the three times a week treatment may be better than of those in the lower frequency group. The variability of the performance found with longitudinal studies suggests broader intervention protocols.

Fosfolipases A2 miotóxicas (Lys49, enzimaticamente inativa, e Asp49, com atividade) isoladas do veneno de Bothrops asper, induzem hipernocicepção. Assim, avaliamos os mecanismos estruturais, moleculares e mediadores centrais envolvidos neste efeito. A injeção intraplantar das FLA2s acarretou hiperalgesia, enquanto que apenas a FLA2-Asp49 induziu alodinia. A região C-terminal é a responsável pelo efeito da FLA2-Lys49, enquanto que a atividade catalítica da FLA2-Asp49 parece ser responsável pela indução de hipernocicepção. Canais de Ca2+ e Na+ participam deste efeito. Na medula espinhal, receptores NK1 e para CGRP, receptores ionotrópicos para glutamato, NO, IL-1, prostanóides e adenosina participam da hiperalgesia induzida pelas FLA2s. Adicionalmente, receptores metabotrópicos para glutamato e o TNF?, estão envolvidos na hiperalgesia induzida pela FLA2-Asp49. Receptores NK1 e NK2 e para CGRP, receptores para glutamato, TNF? e prostanóides medeiam a alodinia. A ativação de astrócitos e microglia, na medula espinhal, contribui para a gênese do efeito hipernociceptivo. / Phospholipase A2 (Lys49, catalytically-inactive and Asp49, catalytically active), isolated from Bothrops asper snake venom, induce pain. The present studies examined the molecular, structural and central mechanisms involved in hypernociception induced by both PLA2s. These PLA2s induced mechanical hyperalgesia, whereas only PLA2-Lys49 evoked allodynia. The C-terminal region of the PLA2-Lys49 seems to be responsible for hyperalgesia, whereas the enzymatic activity of PLA2-Asp49 contributes to such an effect. Calcium and sodium channels are involved in PLA2s-induced hyperalgesia. In the spinal cord, NK1 and CGRP receptors, glutamate ionotropic receptors, NO, IL-1, prostanoids and adenosine contribute to hyperalgesia caused by PLA2s. Additionally, metabotropic glutamate receptors and TNF are involved in hyperalgesia induced by PLA2-Asp49. NK1, NK2 and CGRP receptors, glutamate receptors, TNF and prostanoids mediate allodynia. Activation of spinal astrocytes and microglia contribute to the generation of hyperalgesia and allodynia induced by both toxins.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Schistosomalmyeloradiculopathy (SMR) is a severe formofpresentationof schistosomiasis, in whichthe spinal cord isaffectedby species ofSchistosoma. Thisstudy aimed todevelopan animal modelof SRMcaused byS.mansoni, and characterize the sensory and motorchanges causedby the depositionofeggsof S. mansoniin the spinal cordand correlate thesensory aspects, engines and histologicalanimalsinfunction of time.Heldmechanicalsensitivitytests, behavioral and subsequenteuthanasiain two series(infected and control)animalsdividedinto six groups offivemale Wistar ratseachin5, 10, 20 and 30dayspost-infection. The experimental groupswere anaesthetizedwith halothane andinjected witha suspension ofS. mansonieggs in thesubarachnoid space.Control animalsunderwent the sameprocedure, but with phosphate buffersolution administration(PBS). The spinal cordwas removed,subjected tohistologicalanalysis ofT10and L5. It was observedreduction in surfacemechanical sensitivity, thermal sensitivityand muscle strengthcaused by theeggsof S. mansoniin the spinal cord; Changesobservedin nervous tissueof 25% of the animals following infectionof S. mansoni. The modelproved to besuitable forevaluation offunctional changesin ratsand may beuseful forpathogenesisstudiesofMRE. / Mielorradiculopatiaesquistossomótica (MRE) é uma forma grave de apresentação da esquistossomose, em que a medula espinhal é acometida por espécies de Schistosoma. Este estudo teve como objetivo o desenvolvimento de modelo animal de MRE causada pelo S. mansoni, além de caracterizar as alterações sensoriais e motoras ocasionadas pelo depósito de ovos do S. mansoni na medula espinhal e correlacionar os aspectos sensoriais, motores e histológicos nos animais em função do tempo. Realizou-se testes de sensibilidade mecânica, comportamentais e posterior eutanásia em duas séries (infectada e controle) de animais divididas em seis grupos com 5 ratos Wistar machos cada nos 5º, 10º, 20º e 30º dias da pós-infecção. Os grupos experimentais foram anestesiados com halotano e injetou-se uma suspensão de ovos de S. mansoni no espaço subaracnóideo. Os animais controle foram submetidos ao mesmo procedimento, porém com administração de solução tampão-fosfato (PBS). A medula espinhal foi removida, submetida a análise histológica entre T10 e L5. Constatou-se redução na sensibilidade mecânica superficial, da sensibilidade térmica e da força muscular ocasionadas pelos ovos do S. mansoni na medula espinhal; Observou-se alterações no tecido nervoso de 25% dos animais após a infecção de S. mansoni. O modelo desenvolvido mostrou-se satisfatório para avaliação das alterações funcionais em ratos Wistar, podendo ser útil para estudos da etiopatogenia da MRE.

Orientador: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T06:59:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Emirandetti_Amanda_M.pdf: 4129268 bytes, checksum: 6b46598f867a92cb0663cb6e4cabb3ae (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Astrócitos são elementos fundamentais para o funcionamento normal do sistema nervoso central (SNC). Estas células exibem inúmeras funções, podendo modular a excitabilidade neural e a transmissão de impulsos nervosos através de seus processos lamelares finos que se localizam nas adjacências das sinapses. Todavia, astrócitos também podem desempenhar funções na integridade da fisiologia do sistema nervoso (SN) após uma lesão. A astrogliose após lesão nervosa é caracterizada pela hiperplasia e hipertrofia do corpo celular e dos processos astrocitários, os quais bloqueiam a regeneração axonal. No entanto, a reatividade astrocitária também possui aspectos positivos, como a produção de fatores neurotróficos. Apesar de a plasticidade sináptica após lesão seja um fenômeno conhecido, os mecanismos envolvidos em tal evento ainda permanecem desconhecidos. Nesse sentido, células gliais, especialmente astrócitos, podem exibir importantes papéis nos processos de mudança do SN, influenciando a retração dos terminais sinápticos tanto quanto promovendo um ambiente peri-sináptico propício, afetando o reestabelecimento dos botões que foram retraídos. Nesse trabalho, estudou-se a resposta astrocitária após a axotomia em camundongos das linhagens C57BL/6J, Balb/cJ e A/J, utilizando-se técnicas de imunofluorescência, microscopia eletrônica de transmissão e cultura celular. Nesse sentido, foram apresentadas evidências de que camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6J, Balb/cJ e A/J exibem diferentes intensidades de reatividade astrocitária após lesão periférica in vivo, sendo estas diferenças significativas entre A/J (3,87 ± 0,07, média ± erro padrão, GFAP e 3,76 ± 0,16, ezrina) e C57BL/6J (2,35 ± 0,024, p<0,0001; GFAP e 2,69 ± 0,26, ezrina, p<0,001). Ainda, astrócitos derivados de córtices de camundongos cultivados in vitro exibiram diferença significativa na imunomarcação com anti-GFAP e anti-ezrina entre as linhagens A/J (22,60 ± 1,63, média ± erro padrão, GFAP e 18,47 ± 1,31, ezrina) e C57BL/6J (13.22 ± 1,80; p<0,001, GFAP, 13,95 ± 1,16, ezrina p<0,05). Adicionalmente, a astrogliose nas adjacências dos motoneurônios axotomizados foi menor em animais C57BL/6J quando comparado com A/J, sugerindo que a diferença da reatividade astrocitária possui influência direta na sinaptogênese in vitro. Ainda, a análise estrutural quantitativa indicou maior retração sináptica nas linhagens A/J e Balb/cJ em relação ao C57BL/6J, uma semana após a transecção do nervo isquiático. Nossos resultados demonstram que o aumento da astrogliose pode influenciar o grau de plasticidade sináptica na medula espinhal, que possivelmente influencia a regeneração axonal dos motoneurônios lesionados / Abstract: Astrocytes are of major importance for normal functioning of the central nervous system (CNS). These cells have been shown to play a large number of different functions in the brain. They can modulate the neural excitability and signal transmission by their thin lamellar process surrounding synapses. Moreover, astrocytes play a major role in preserving and restoring structural and physiological integrity following injury to the CNS. Astrogliosis is characterized by hyperplasia and hypertrophy of cell bodies and processes, which has been considered to block axonal regeneration, but reactiveness of glial cells at the lesion site has also positive aspects, such as the production of neurotrophic factors. Although synaptic plasticity is a widespread phenomenon, the underlying mechanisms leading to its occurrence are virtually unknown. In this sense, glial cells, especially astrocytes, may have a role in network changes of the nervous system, influencing the retraction of boutons as well as providing a proper perisynaptic environment, thereby affecting the replacement of inputs. In the present work, we have studied the astrocytic response after axotomy in C57BL/6J, Balb/cJ and A/J mice, using immunofluorescence, transmission electron microscopy and cell cultures techniques. In this sense, we present evidence that A/J, Balb/cJ and C57BL/6J isogenic mice display different astrocyte reactivity after a peripheral lesion in vivo (A/J; 3.87 ± 0.07- GFAP and 3.76 ± 0.16 ¿ezrin / C57BL/6J; 2.35 ± 0.024 - GFAP, p<0.0001 and 2.69 ± 0.26 - ezrin, p<0.001). Further, astrocytes from mice cortices were isolated and expanded in vitro, showing a significant difference in GFAP and ezrin labeling between AJ (22.60 ± 1.63 - GFAP and 18.47 ± 1.31 - ezrin) and C57BL/6J mice (13.22 ± 1.80 ¿ GFAP, p<0.001 and 13.95 ± 1.16 ¿ ezrin, p<0.05). Also, astrogliosis surrounding axotomized motoneurons C57BL/6J is lower than A/J mice and such a difference has a direct influence on in vitro synaptogenesis. Indeed, ultrastructural quantitative analysis showed more intense synaptic detachment in A/J and Balb/cJ strains after sciatic nerve transection than in C57BL/6J mice. Our findings demonstrate that an increased astrogliosis influences the degree of synaptic plasticity in the spinal cord, which may in turn contribute to the axonal regeneration of lesioned motoneurons / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira, Leonilda Maria Barbosa dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T02:05:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freria_CamilaMarques_M.pdf: 10106470 bytes, checksum: 5c14939feb8cd0046197431c674923ce (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Estudos recentes têm mostrado que a expressão do complexo de istocompatibilidade principal de classe I (MHC I) influencia diretamente na estabilidade dos terminais sinápticos. Considerando que na encefalomielite autoimune experimental (EAE) observase significativo impacto sobre as sinapses dos motoneurônios medulares durante a fase aguda da doença, sugere-se que o MHC I pode exercer influência na estabilidade dos terminais sinápticos na EAE. Dessa forma, o presente trabalho investigou em camundongos C57BL/6J a cobertura sináptica dos motoneurônios durante o surto e as remissões progressivas da EAE. Estes animais foram divididos em 4 grupos: normal, surto (grau 3), 1ª remissão (1º estágio de recuperação- 30 dias após indução) e 2ª remissão (2º estágio de recuperação- 40 dias). Suas medulas foram processadas para imunoistoquímica e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Os resultados indicaram aumento da reatividade glial durante a fase de surto. Neste período a análise ultra-estrutural mostrou redução da cobertura sináptica dos motoneurônios, correlacionada com redução da expressão da sinaptofisina e aumento da expressão do MHC I. Os resultados observados em ambos os grupos remissão indicaram aposição dos terminais sobre a superfície do motoneurônio. Entretanto a possível exaustão do potencial regenerativo ocorre após a 2ª remissão, sendo observada diminuição significativa do número das sinapses. Além disso, a razão entre terminais excitatórios/inibitórios está aumentada, indicando o desenvolvimento de possível processo excitotóxico. Os resultados obtidos indicam que a expressão do MHC I aumenta durante o curso da EAE na forma remitente/recorrente, correlacionando com os períodos de plasticidade sináptica. Além disso, o presente estudo indica que a expressão de MHC I e a reatividade glial durante as diferentes fases da doença estão correlacionados com os sinais clínicos da doença. / Abstract: Recent studies have shown that the expression of the major histocompatibility complex of class I (MHC I) directly influences the stability of nerve terminals. Also, the acute phase of the experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) has shown a significant impact on inputs within the spinal cord. Therefore, the present work investigated the synaptic covering of motoneurons during exacerbation and progressive remissions of the EAE. C57BL/6J mice were induced to the EAE and divided into 4 groups: normal, exacerbation (degree 3), first remission (30th day after EAE induction) e second remission (40th day). The animals were sacrificed and their lumbar spinal cords were processed for immunohistochemistry and transmission electron microscopy (TEM). The results indicate an increase of glial reaction during the exacerbation phase. In this period, the TEM analysis showed a reduction of the synaptic covering of motoneurons, corresponding to a reduction of synaptophysin immunolabeling and an increase of MHC I expression. The results observed in both remission groups indicated a return of terminals contact to the motoneuron surface. However, a possible exhaustion of the regenerative potential occurs after the 2nd remission, since the number of synapses decreases significantly. Also, the ratio between excitatory/inhibitory inputs increases, indicating the development of a possible excitotoxic process. In conclusion, the results presented herein indicate that MHC I upregulation during the course of the remittent/recurrent form of EAE correlates to the periods of synaptic plasticity induced by the infiltration of auto-reactive immune cells and that synaptic plasticity decreases after recurrent peaks of inflammation. Also, this study provided evidences that synaptic plasticity and the glial reactivity during the different phases of the MS disease, play an important role in the motor deficit and recovery that occur throughout the MS development. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T04:45:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simoes_GustavoFerreira_M.pdf: 2366815 bytes, checksum: 82cb16f0270cd2eef68425035fd6bf9f (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma doença de caráter recessivo, onde o cromosso X sofre mutações e não codifica o gene responsável pela produção da distrofina. Atinge aproximadamente 1 em cada 3500 nascidos vivos. A distrofina, juntamente com o complexo glicoproteína-distrofina, tem as funções de manter as ligações entre o citoesqueleto e a matriz extracelular, manter a integridade da membrana celular, promover a distribuição de forças laterais entre as fibras musculares e a comunicação entre o meio intra e extra-celular. A DMD é normalmente diagnosticada entre 2 e 5 anos de idade sendo caracterizada por degeneração progressiva e fraqueza da musculatura esquelética,que é substituída por tecido adiposo e fibroso. Os pacientes vão a óbito por volta dos 20 anos devido à falência estrutural e funcional do músculo diafragma e/ou cardíaco. Atualmente, muito se sabe sobre o acometimento muscular na DMD, mas poucos estudos estão voltados para os efeitos no Sistema Nervoso Central (SNC), mais especificamente no microambiente do motoneurônio medular. Sabe-se que durante a evolução da doença, o terminal axonal, na junção neuromuscular, entra em um ciclo de denervação (retração) e reinervação (brotamento). Evidências recentes mostram que neurônios e células gliais expressam moléculas anteriormente tidas como exclusivas do Sistema Imunológico. No entanto, a presença desses elementos no (SNC) parece estar relacionada a outras funções. Um exemplo é o complexo de histocompatibilidade principal classe I (MHC I) que apresenta papel importante no refinamento sináptico durante o desenvolvimento do SNC e também é fundamental na resposta após uma lesão nervosa no adulto. Nesse contexto, estudos recentes sugerem que a expressão de MHC I desempenhe importante papel na manutenção das conexões sinápticas, bem como na comunicação neurônio/glia após lesão. No presente trabalho, foram utilizados camundongos MDX, que exibem lesões histológicas similares à distrofia muscular no homem e seu controle, C57BL/10, com o intuito de investigar os processos de plasticidade ciática e astrogliose reativa no microambiente da medula espinhal. Para tal, os camundongos das duas linhagens foram submetidos a uma transecção unilateral do nervo isquiático. Uma semana após a axotomia, os animais foram submetidos à eutanásia e suas medulas espinhais lombares processadas para imunohistoquímica (anticorpos para MHC I, Sinaptofisina e GFAP - Glial Fibrillary Acidic Protein) e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Os lados contralaterais à lesão foram utilizados como controle para cada linhagem. A imunohistoquímica mostrou aumento da expressão de MHC I e GFAP e diminuição da expressão de sinaptofisina no lado ipsilateral à lesão nas duas linhagens. Nos camundongos MDX, os lados contralateral (não lesionado) e ipsilateral (lesionado) apresentaram uma diminuição significativa da expressão de sinaptofisina e aumento significativo de GFAP em relação aos mesmos lados nos camundongos C57BL/10. Ainda, a análise ultraestrutural quantitativa indicou maior retração ciática na linhagem MDX, antes e após a transecção do nervo isquiático. Através dessas observações, podemos sugerir que essa redução de sinapses nos motoneurônios alfa-medulares e aumento da astrogliose circunjacente aos neurônios alfa-medulares, seja decorrente da desconexão parcial entre o orgão alvo e o corpo neuronal durante o período de ciclos de degeneração/regeneração muscular que ocorrem a partir das primeiras semanas de vida nos camundongos MDX. Estes ciclos podem repercutir retrogradamente nos corpos celulares dos motoneurônios alfa-medulares, provocando uma série de alterações (como, por exemplo, o edema do corpo celular, a retração de terminações sinápticas, o deslocamento do núcleo para a periferia e a dissolução da substância de Nissl) denominadas cromatólise. Houve aumento da expressão de MHC I, em graus variáveis, nas duas linhagens. Os resultados da imunohistoquímica mostram uma correlação entre a reatividade glial subseqüente à axotomia e o processo de retração sináptica que ocorre ao nível da medula espinhal. Logo, reforçam a idéia de que os astrócitos são elementos ativos no processo de plasticidade sináptica. / Abstract: The Duchenne muscular dystrophy (DMD) is characterized by muscle degeneration and structural defects in the neuromuscular synapse that are caused by mutations in dystrophin. It is an X-linkend recessive and progressive musclewasting disease. It affects approximately 1/3500 male births. Diagnosis of the DMD is usually made between the ages from 2 to 5 years old. Life expectancy is between the late teens and early twenties. At present, a lot is known about the muscular injuries in the Duchenne muscular dystrophy, but few studies are focused on the effects of the disease in the Central Nervous System, more specifically in the microenvironment surrounding the alpha motoneurons. The aim of this study was to investigate eventual synaptic alterations and glial reactivity changes in the microenvironment surrounding the alpha motoneurons in a Duchenne muscular dystrophy animal model, namely the MDX mice. In this sense, six weeks old, male, MDX mice, were subjected to the left sciatic nerve transection. The axotomy was performed after the cycles of muscular degeneration/regeneration, previously described in such model of muscular dystrophy. C57BL/10 mice were used as controls. Seven days after surgery, the animals were sacrificied and their lumbar spinal cords processed for immunohistochemistry (anti-MHC I, anti-Synaptophysin and anti-GFAP glial fibrillary acidic protein antisera were used. Overall MHC-I expression increased in both strains after axotomy. Nevertheless, MDX mice displayed a significantly smaller MHC I upregulation (MDX, 18,90 ± 0,60, mean + se; C57BL/10, 24,34 ± 1,06, p>0,05). Regarding GFAP expression, MDX showed a stronger astrogliosis in comparison to C57BL/10 mice (MDX, 16,0 ± 1,06; C57BL/10, 9,7 ± 0,43; p<0,01). In MDX mice the imunostaining demonstrated significant decreased of synaptophysin expression (MDX, 4,250778 ± 0,300686; C57BL/10, 5,694914 ± 0,283379; p< 0,05). Indeed, ultrastrutural quantitative analysis showed more intense synaptic detachment in MDX mice, indicating a reduction of synaptic activity before and after axotomy. We conclude that the reduction of active inputs to the alpha motoneurons and increased astrogliosis in MDX mice maybe associated with the cycles of muscle degeneration/regeneration that occur postnatally. Also, the decreased MHC I expression in MDX mice may indicate a lower regenerative potential after lesion. / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

A lesão traumática da medula espinhal (LTME) é um grande problema de saúde ocasionado principalmente por acidentes automobilísticos, quedas, mergulho e a violência, como ferimentos por arma de fogo (FAF). Pacientes com LTME tem um elevado risco para desenvolver úlcera de pressão (UP) devido à perda da mobilidade e motricidade abaixo do nível medular acometido. É importante a realização de estudos de ocorrência da UP para que medidas de intervenção possam ser implementadas. Assim, este estudo foi realizado de forma retrospectiva em um hospital universitário do interior do estado de São Paulo. Após a aprovação do comitê de regulamentação e normas éticas da instituição, os prontuários foram revisados e 47 desses atenderam aos critérios de inclusão: ter diagnóstico de LTME, ter idade igual ou superior a 18 anos na época do trauma; ter informações referentes a primeira hospitalização após o trauma. A maior parte dos pacientes eram do sexo masculino (97,5%), brancos (68,1%), com idade entre 21 e 30 anos (36,2%). A causa mais freqüente da LTME foi FAF (44,7%) seguido por colisão/capotamento de veículo (23,4%). Quanto ao nível neurológico da lesão, houve predomínio no nível torácico (44,7%) seguido pelo nível cervical. O tempo médio de hospitalização foi de 21,47 dias (DP= 28,50). Em relação à procedência do paciente, 46,8% eram de Ribeirão Preto. Houve ocorrência de UP em 20 (42,5%) dos pacientes, com a média de 2,3 UP por paciente. Os locais de maior freqüência foram na região sacral (36,95%) e calcâneos (17,4%). Apenas 25% dos prontuários tinham o registro da dimensão da UP, 80% apresentavam o registro do aspecto e em 52,1% não havia o registro do estágio de classificação. Houve uma maior freqüência de uso de medidas preventivas nos pacientes com UP. Durante o período de internação, 44,7% dos pacientes tiveram outras complicações clínicas, como pneumonia (25,5%). Dos pacientes com alta hospitalar, 34% tiveram outras internações nos primeiros 6 meses após a LTME, sendo o principal motivo a infecção do sítio cirúrgico, seguido da UP e infecção do trato urinário. Com este estudo, verificamos que há a necessidade de melhorar o registro referente aos dados do paciente para que intervenções possam ser propostas. Programas de educação permanente podem contribuir para modificar esta situação. Outros estudos de investigação sobre o tema são necessários. / Traumatic spinal cord injuries (TSCI) are a significant health issue which is mainly caused by automobil accidents, falls, diving, and violence, such as wounds by gun shot (GS). Patients with TSCI have an increased risk of developing pressure ulcers (PU) due to the loss of movement and motricity under the affected spinal level. Studies concerning PU occurrence are important so intervention measures can be implemented. Thus, this study was performed, in a retrospective way, at a university hospital of Upstate São Paulo. After the approval by the institution’s committee of regulamentation and ethical norms, patient records were reviewed and, from the total, 47 met the inclusion criteria: have a TSCI diagnosis, patient aged over 18 years at the time of injury; have information concerning the first hospitalization after the injury. Most patients were male (97.5%), white (68.1%), aged within 21 and 30 years (36.2%). The most common cause for TSCI was GS (44.7%) followed by vehicle crash/overturn (23.4%). Concerning the neurologic level of the lesion, there was a predominance of the toracic level (44.7%) followed by cervical level. The average time of hospitalization was,in days, 21.47 (SD= 28.50). In terms of patient’s residence, 46.8% were from Ribeirão Preto. Twenty patients (42.5%) presented PU, with an average of 2.3 PU per patient. The most frequent regions were the sacral (36.95%) and heels (17.4%). Only 25% of the patient record stated the PU’s dimensions, 80% stated the aspect, and 52.1% did not state the classification stage. There was a higher frequency of prevention measures with patients with PU. During the period of hospitalization, 44.7% of the patients presented other clinical issues, such as pneumonia (25.5%). From the patients discharged, 34% were hospitalized again within the first 6 months after the TSCI, and the main reason was surgical site infection, followed by PU, and infection of the urinary tract. With this study, it was verified that there is a need for improving the records of patient data so interventions could be proposed. Permanent education programs could contribute to modifying this situation. Other investigations about the subject are necessary.

Células de Schwann (CS) cultivadas a partir de nervo ciático de ratos foram enxertadas, associadas ou não ao fator de crescimento derivado de células gliais (GDNF), em ratos adultos submetidos à transecção total da medula espinhal (T11). Análises do comportamento motor do 1º ao 3º mês pós-operatório e do crescimento de fibras nervosas imunorreativas no epicentro do enxerto ao término deste período mostraram: melhora temporal dos parâmetros motores superior nos grupos que receberam CS, que foi potencializada na presença do GDNF; aumento na quantidade de axônios nos grupos que receberam CS, efeito potencializado na presença do GDNF. Em outro experimento, as reatividades astrocitária, microglial e do fator neurotrófico bFGF astrocitário foram avaliados na medula espinhal parcialmente transectada de ratos, 1 semana e 3 meses após a cirurgia. Ativação astrocitária e microglial e maior intensidade de bFGF nas substâncias branca e cinzenta foram encontradas em toda a extensão da medula, fatos relacionados ao processo local de cicatrização e fenômenos tróficos e plásticos à distância. / Schwann cells (SC) obtained from rat sciatic nerve were grafted, in the presence or not of glial derived neurotrophic factor (GDNF), in adult rats submitted to a complete spinal cord transection at T11. Behavioral analysis from the 1st to the 3rd post operative month and of the immunoreactive fiber outgrowth in the graft epicenter at the end of this period showed: temporal improvements on motor parameters that were superior in the groups that received SC, being even higher in the presence of GDNF; increased amount of axonal fibers in the groups treated with SC, being even higher in the presence of GDNF. In another experiment, astrocytic and microglial activation and astrocytic neurotrophic factor bFGF expression were analyzed after a partial spinal cord transection, 1 week and 3 months after surgery. Astrocitic and microglial activation as well as a higher intensity of astrocitic bFGF in the white and gray matters were found in the entire spinal cord, what is related to the local scar formation and distant trophic and plastic phenomena.