Orientador: Carlos Alfredo Joly / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T03:02:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Okamoto_JaneteMayumi_M.pdf: 5000912 bytes, checksum: 6e464da0831f1506ae1de465c81accdf (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Foram estudados comparativamente os aspectos ecofisiológicos da germinação e do metabolismo respiratório de Inga affinis DC., Inga luschnathiana Benth., Inga tagitolia (L.) Willd ex Benth e Inga sessilis (Vell.) Mart. Os locais onde foram coletadas as espécies constituem um gradiente de saturação hídrica do solo. As sementes de Inga affinis foram coletadas nas manchas de mata ciliar nas margens do rio Jacaré-Pepira no município de Brotas/ SP, em locais sujeitos a inundações periódicas decorrentes da extravasão das águas do rio (água corrente). As sementes de Inga Iuschnathiana foram coletadas em um fragmento de mata de paludícola anexo à Reserva Municipal Mata de Santa Genebra, município de Campinas, SP, portanto em um local onde a saturação hídrica do solo é quase que permanente, altamente heterogênea e é decorrente do afloramento do lençol freático (água estagnada). Inga tagitolia, outra espécie, teve suas sementes coletadas no campus da Universidade Estadual de Campinas de árvores cujas sementes são provenientes de árvores das margens dos canais de Santos. As sementes de Inga sessilis foram coletadas na Serra do Japi, no município de Jundiaí/SP, em uma Floresta Mesófila Semidecídua de Altitude. No estudo da ecofisiologia da germinação, as sementes foram submetidas aos diferentes tratamentos para a avaliação do efeito da luz, da hipoxia, da anoxia e do armazenamento na germinação. Os estudos sobre o metabolismo respiratório da germinação foram efetuados através da determinação do conteúdo de etanol, lactato e malato em sementes colocadas para germinar sob distintas condições de disponibilidade de oxigênio. Simultaneamente foi realizada uma análise citogenética com a contagem dos cromossomos das quatro espécies.Este estudo demonstrou que as espécies Inga affinis, Inga tagitolia e Inga Iuschnathiana possuem diferentes estratégias adaptativas de tolerância à baixas concentrações de oxigênio, de acordo com a imposição de seu ambiente de ocorrência, assim como também que sementes de Inga sessilis, apesar de se encontrarem em um ambiente onde a saturação hídrica do solo não ocorre, conserva ou vem adquirindo características que poderiam provavelmente permitir seu estabelecimento em ambientes sazonal ou permanentemente encharcados, tipicamente ocupado pela maioria das espécies do gênero. O estudo citogenétco evidenciou a presença de duas espécies tetraplóides, tagitolia e Iuschnathiana, dentre as quatro analisadas no presente estudo / Abstract: The ecophysiological aspects of germination and of the respiratory metabolism of Inga affinis DC., Inga luschnathiana Benth., Inga tagitolia (L.) Willd ex Benth e Inga sessilis (Vell.) Mart. seeds were studied in a comparative way. The sites where the species were collected represent a gradient of soil hydric saturation. Inga affinis seeds were collected in remnants of Gallery Forest on the banks of the Jacaré-Pepira ri ver, nearby the city of Brotas/SP, in places prone to periodical flóod due to the rising of the river levei (running water). Inga luschnathiana seeds were collected in fragments of Swamp Forest, nearby the Reserva Municipal Mata de Santa Genebra, in the city of Campinas/SP., Le. in highly heterogeneous area where the soil is waterlogged almost ali year round as a consequence of the surfacing of the water table (stagnant water). Inga tagitolia seeds were collected on the campus of the Universidade Estadual de Campinas, from trees grown from seeds collected in trees planted along the water channels from Santos/SP. Inga sessilis seeds were collected in the Serra do Japi, in the city of Jundiai/SP in an area of Semideciduous Forest. The seed germination ecophysiological study was carried by doing experiments to assess the effect of light, of storage and of distinct concentrations of oxygen, normoxia, hypoxia and anoxia. The respiratory metabolism was studied through the determination of ethanol, malate and lactate contents in seeds germinated under different conditions of oxygen availability. This study showed that the different adaptative strategies developed by Inga affinis, Inga tagitolia and Inga luschnathiana to tolerate low oxygen concentrations are in accordance with the constraints of their environment. Although Inga sessilis seeds are not naturally subject to waterloging 40% of them have characteristics that would probably allow their establishing in flood prone environments where the other species occur. The citogenetic study showed the occurrence of two tetraploid, Itagitolia and Iluschnathiana, among the four species studied. / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-21T22:13:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Joana Braga de Moraes Marques Ferreira.pdf: 5193351 bytes, checksum: 0e24ea46d41e7220625b8f65daf73891 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-24T17:34:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Joana Braga de Moraes Marques Ferreira.pdf: 5193351 bytes, checksum: 0e24ea46d41e7220625b8f65daf73891 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-24T17:34:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Joana Braga de Moraes Marques Ferreira.pdf: 5193351 bytes, checksum: 0e24ea46d41e7220625b8f65daf73891 (MD5) Previous issue date: 2016-03-10 / FACEPE / Primary brain calcification (PBC), also known as idiopathic brain calcification or Fahr's disease, is a rare neurological condition that is characterized by calcium phosphate deposits in the basal ganglia and adjacent areas, movement disorders, headache and neuropsychiatric symptoms. It presents autosomic dominant inheritance and it is associated with two inorganic phosphate transporter coding genes: SLC20A2 and XPR1. Two other genes related to the blood-brain barrier maintenance and integrity are also linked to PBC, the platelet-derived growth factor-β and its receptor (PDGFB and PDGFRB), although their roles in the formation mechanism of the calcifications is not clear yet. For this study, besides the four genes above mentioned, other members of the platelet-derived grown factor family (PDGFA, PDGFRA, PDGFC and PDGFD) have also been selected as candidate genes, for which new primer pairs were designed. All genes above were screened for new variants by Sanger sequencing in fifteen Brazilian unrelated patients with brain calcifications. Sequence in silico analysis was performed using CLC Main Workbench 6.9 software and online tools available in NCBI and GOLDENPATH platforms, resulting in the identification of the first de novo SLC20A2 mutation in a patient diagnosed with PBC (NM_006749.4:c.1158C>G; NP_006740.1:p.Y386*). SLC20A2 is to-date the main gene associated with PBC, with affecting-variants observed in ~50% cases. In order to find SLC20A2 deletions and/or duplications not detected by sequencing, all Brazilian probands were screened by QMPSF (Quantitative Multiplex PCR of Short fluorescent Fragments) and a duplication of the terminal exon was found in a patient with brain calcifications and hyperparatiroidism. Simultaneously, twenty-four French unrelated patients with PBC were also analyzed by QMPSF and partial SLC20A2 deletions were detected in four patients: two with deletion of the exon 2, where the start codon is located; one with deletion of the exon 4; and one with deletion of exons 4 and 5. These results reinforce SLC20A2 role as the main gene associated to PBC, as well as demonstrate that copy number variation analyses, even when revealing only partial deletions or duplications of a gene, are complementary to sequencing and work side by side in the search of genetic variations involved in this disease. / Introdução: A calcificação cerebral primária (CCP), também conhecida como calcificação idiopática dos núcleos da base ou doença de Fahr, é uma condição neurológica caracterizada por depósitos de fosfato de cálcio dos núcleos da base e região de entorno, parkinsonismo e sintomas neuropsiquiátricos. Apresenta herança autossômica dominante e é associada a dois genes codificantes de transportadores de fosfato inorgânico: o SLC20A2 e o XPR1. Dois outros genes relacionados à manutenção e à integridade da barreira hemato-encefálica, o fator de crescimento plaquetário B e seu receptor (PDGFB e PDGFRB), também foram associados à CCP, embora seus papeis no mecanismo de formação das calcificações ainda não estejam claros. Materiais e Métodos: Além dos quatro genes acima, foram selecionados como candidatos outros genes da família dos fatores de crescimento plaquetário (PDGFA, PDGFRA, PDGFC e PDGFD) e das protocaderinas (PCDH12), para os quais foram confeccionados pares de primers utilizados no seu sequenciamento e para análise de variação de número de cópia. Resultados e Discussão: Quinze famílias brasileiras com CCP foram triadas para novas variantes nos genes candidatos por sequenciamento. A análise in silico do sequenciamento foi feita através do software CLC Combined Workbench versão 6.9 e das ferramentas disponíveis nas plataformas online do NCBI e do GOLDENPATH. A partir dessa análise, foi identificada em um probando a primeira mutação de novo do SLC20A2, o principal gene associado a CCP (NM_006749.4:c.1158C>G; NP_006740.1:p.Y386*). A fim de encontrar deleções e/ou duplicações do SLC20A2 não detectadas por sequenciamento, todos os probandos brasileiros com calcificações cerebrais foram triados através da técnica de QMPSF (do inglês, Quantitative Multiplex PCR of Short fluorescent Fragments). Foi encontrada uma duplicação do exon terminal do mesmo gene em um paciente brasileiro com calcificações cerebrais e hiperparatireoidismo. Simultaneamente, foram identificadas deleções parciais no mesmo gene em quatro famílias francesas com CCP. Conclusões: Esses resultados reafirmam o SLC20A2 como o principal gene associado a CCP, bem como demonstram que análises de variação de número de cópia (CNV), ainda que parciais, são complementares ao sequenciamento na busca por variantes genéticas relacionadas a esta doença.

A lipoaspiração é a cirurgia estética mais comumente realizada pelas mulheres no mundo. Uma vez que o tecido adiposo é um órgão metabolicamente ativo, alguns autores sugeriram que a remoção cirúrgica do tecido adiposo subcutâneo (TAS) pudesse exercer efeitos importantes no perfil metabólico. Além disso, estudos experimentais observam ganho de gordura compensatório no tecido adiposo intacto em resposta à lipectomia. O exercício físico regular induz a inúmeras melhoras no perfil metabólico e na composição corporal, promovendo o aumento do gasto energético total e preservação da massa magra. Estudos sobre os efeitos integrados do exercício e da lipoaspiração em humanos são inexistentes na literatura. Desta forma, este estudo visou avaliar o efeito da lipoaspiração acompanhada de treinamento físico sobre o perfil metabólico, a adiposidade e a distribuição de gordura corporal em mulheres adultas e eutróficas (20 a 35 anos; IMC: 23,8 ± 2.2 Kg/m2). Trinta e seis mulheres foram submetidas à cirurgia de lipoaspiração abdominal. Dois meses após a cirurgia, as voluntárias foram divididas em dois grupos: treinado (LT; n=18) e sedentário (LS; n=18). O treinamento físico consistiu de treinamento aeróbio e de força, 3x/semana, por 16 semanas. A metodologia empregada incluiu avaliação do peso corporal, composição corporal (pesagem hidrostática), distribuição da gordura abdominal (tomografia computadorizada), consumo alimentar (diário alimentar), perfil lipídico, concentração de citocinas anti e proinflamatórias, de adiponectina e de leptina antes (PRE), dois meses após a cirurgia (POS-2) e seis meses após a cirurgia (POS-6). A capacidade física (determinada pelo VO2max, e por testes de repetição máxima para membros inferiores e superiores), a taxa metabólica de repouso (TMR) (calorimetria indireta), a determinação do diâmetro médio dos adipócitos e a expressão gênica dos fatores de transcrição para adipogênese, das citocinas anti e proinflamatórias, da leptina e da adiponectina no tecido adiposo subcutâneo abdominal e femoral foram avaliadas nos tempos PRE e POS-6. O consumo alimentar permeceneu inalterado ao longo do estudo. Seis meses após a cirurgia, o grupo LS apresentou tendência ao retorno do peso e da massa gorda total aos valores basais, bem como aumento do tecido adiposo visceral (TAV) e queda da TMR. O grupo LT também apresentou queda da TMR, mas manteve os valores de peso corporal e de massa gorda diminuídos em resposta à cirurgia no POS-6 e apresentou aumento da massa magra e manutenção do TAV. Ambos os grupos apresentaram queda das concentrações de adiponectina e aumento do colesterol total, da LDL-colesterol e da razão LDL/Apolipoproteína B no POS-6. Por meio dos resultados, podemos concluir que a remoção do tecido adiposo abdominal subcutâneo (TAS) em sujeitos eutróficos parece desencadear mecanismos que favorecem a reposição e o crescimento compensatório de tecido adiposo, em especial na cavidade visceral, além de acarretar na diminuição das concentrações de adiponectina, sugerindo possíveis efeitos deletérios no risco cardiovascular em longo prazo. A prática de exercício físico após a cirurgia é de extrema importância para preservar os efeitos da cirurgia na composição corporal, prevenir contra o crescimento compensatório de gordura na cavidade visceral e atenuar seus possíveis efeitos deletérios no metabolismo em longo prazo / Liposuction is the most communly cosmetic surgery performed worlwide. Because adipose tissue is metabolicaly active, researchers have suggested that the surgical removal of fat through liposuction could benefically affect the metabolic profile. In addition, in many species, when body fat is removed, it is recovered rapidly due to compensatory fat growth at intact depots. Regular exercise training benefits metabolic profile and body composition by increasing energy expenditure and preserving fat free mass. Studies about the associated effects of liposuction and physical exercise lack in the literature. Thus the aim of this study was to evaluate the effects of liposuction associated with exercise training on metabolic profile, adiposity and body fat distribution in adult normal weight women (20 to 35 years old, BMI: 23,8 ± 2.2 Kg/m2). Thirty-six women underwent a small-volume abdominal liposuction (mean fat aspirate supernantant: 1240.3 ± 363.6 ml). Two months after surgery were randomly divided into two groups: trained (TR; n=18) and sedentary control (SC; n=18). The four-month exercise program consisted of aerobic plus resistance training, thrice a week. Body composition (hydrostatic weighing), body fat distribution (computer tomography), dietary intake (food records), lipid profile, plasmatic concentration of citokyne, adiponectin and leptin were assessed at baseline (PRE), two (POST-2) and six months after surgery (POST-6). Physical capacity (by VO2max, one repetition maximum (1RM) bench and leg press ), resting energy expenditure (TMR - indirect calorimetry), adipocyte size and gene expression of adipogenesis transcription factors, leptin, adiponectin and citokyne were assessed at PRE and POST-6. Dietary intake was unchanged throughout the study. Six months after surgery, LS group showed increased visceral adipose tissue (TAV), decreased TMR and a tendency to return body weight and fat to baseline values. LT group also showed decreased TMR, but sustained liposuction-induced decreased body weight and fat, increased fat free mass and preserved TAV at POST-6. Both groups showed decreased levels of adiponectin and increased levels of total cholesterol, LDL, cholesterol and LDL/ApoB ratio at POST-6. In conclusion, abdominal subcutaneous fat removal in normal weight subjects triggers a compensatory increase of fat, specially towards the visceral cavity, and lowers adiponectin levels, which could enhance long-term cardiovascular risk. Additionally, exercise training plays a very important role in preserving against the compensatory increase of visceral fat and attenuating possible long-term deleterious effects

Con el objetivo de caracterizar bioquímicamente la actividad lipolítica de Pseudoalteromonas atlantica PAR 2, aislada de la Bahía de Paracas (Ica), se procedió a cultivar la bacteria en medio LB (Luria-Bertani) a temperatura ambiente durante 24 horas. Para determinar la actividad lipolítica de la Pseudoalteromonas atlantica PAR 2, se utilizó agar SW 5 % con tributirina 1 % y se incubó a temperatura ambiente por 48 horas; la hidrólisis del sustrato se evidenció por la formación de un halo transparente. Así también, se cuantificó la actividad lipolítica utilizando como sustratos por un lado tween 80 y por otro, aceite de oliva al 1 %; los cuales no fueron degradados; esta respuesta evidenció que la enzima en estudio es una lipasa del grupo VI o esterasa. Por ese motivo, se utilizó como sustrato -nitrofenol acetato en buffer fosfato 25 mM pH 7, el producto liberado se midió por espectrofotometría a 405 m y se obtuvo una actividad enzimática de 79,32 mol/mL y una actividad específica de 661,00 mol/mg de proteína en el extracto crudo. Pseudoalteromonas atlantica PAR 2 produce una lipasa del grupo VI o esterasa, la cual además presenta actividad óptima a 20 ºC, pH 7 y concentración salina 5 %. -- Palabras clave: Pseudoalteromonas atlantica, actividad lipolítica, esterasa, -nitrofenol acetato. / -- In order to characterize biochemically the lipolytic activity of Pseudoalteromonas atlantica PAR 2, isolated from the Bay of Paracas (Ica), it was proceeded to grow the bacteria in LB medium (Luria-Bertani) at environment temperature during 24 hours. To determine lipolytic activity of Pseudoalteromonas atlantica PAR 2, SW 5 % agar with tributyrin 1 % was incubated at environment temperature for 48 hours, where substrate hydrolysis was evidenced by the formation of a transparent halo. Additionally, lipolytic activity was quantified using as substrates Tween 80 on one side and on the other, olive oil, 1%, which were not degraded, this response revealed that the enzyme under study is a lipase or esterase group VI. For that reason, was used as substrate -nitrophenol acetate in 25 mM phosphate buffer pH 7, the released product was measured by spectrophotometry at 405 m and was obtained 79,32 mol/mL as enzymatic activity, and 661,00 mol/mg protein as specific activity in the crude extract. Pseudoalteromonas atlantica PAR 2 produces a lipase group VI or esterase, which also has optimal activity at 20 °C, pH 7 and 5% salt concentration. -- Keywords: Pseudoalteromonas atlantica, lipolytic activity, esterase, -nitrophenol acetate / Tesis

En este trabajo se estudiaron aspectos funcionales y disfuncionales del metabolismo del Fe centralizados principalmente en patologías que comprometen al Eritrón. Los estudios se realizaron en Modelos Animales de ratón desarrollados por inducción de alteraciones del metabolismo del Fe y de la eritropoyesis, como la alta demanda de Fe asociada a la anemia hemolítica severa, con sin inhibición de la eritropoyesis, y con y sin Sobrecarga de Fe. Otro de los modelos animales utilizados fue el de ratas Belgrade, mutantes para el Transportador de Metales Divalentes 1 (DMT1). En estos modelos experimentales, aplicando un diseño metodológico adecuado, se encararon estudios estructurales y funcionales mediante técnicas histológicas e inmunohistoquímicas. Con este objetivo, se utilizaron tejidos tradicionalmente asociados a la captación, depósito y liberación del Fe, como son el duodeno, bazo e hígado. Un aspecto innovador de nuestro trabajo fue la evaluación de la función renal en el metabolismo del Fe. La eritropoyesis y el estado del Fe se evaluaron en sangre periférica mediante técnicas hematológicas y bioquímicas convencionales. El análisis estadístico de los datos se aplicó en todos los casos que fue necesario por el tipo de estudio. En las condiciones experimentales descriptas, se abordaron estudios de identificación y caracterización de proteínas centrales del metabolismo del Fe como Prohepcidina y DMT1, así como también de Eritropoyetina, principal regulador de la eritropoyesis, estrechamente asociada al Fe, uno de sus nutrientes esenciales. En el modelo de Anemia identificamos y cuantificamos Islotes Eritroblásticos en bazo, hígado, y riñón, indicadores diagnósticos de la actividad eritropoyética, siendo importante destacar la contribución renal en la restauración de la volemia post-hemólisis. En las condiciones de alta demanda de Fe que caracteriza a la Anemia Hemolítica, el perfil de expresión de DMT1 mostró un mecanismo regulatorio tendiente a estimular la absorción de Fe en duodeno y a disminuir la captación de Fe en hígado; de esta forma DMT1 contribuyó a aumentar la disponibilidad de Fe para restaurar la eritropoyesis. La función de Prohepcidina como regulador negativo de la absorción de Fe, se reflejó por su moderada expresión en la Anemia Hemolítica. En las condiciones del modelo acoplado, que se caracteriza por intensa demanda de Fe, por la Anemia Hemolítica, y exceso de Fe; el aumento de expresión hepática de DMT1 constituyó un mecanismo regulatorio que estimuló la captación Fe en hígado. Este comportamiento fue similar al observado en Sobrecarga de Fe sin Anemia. En duodeno, en Anemia con Sobrecarga de Fe, la expresión intracelular de DMT1 reflejó un moderado estimulo de la absorción de Fe, como mecanismo para evitar la citotoxicidad causada por el exceso de Fe. Este perfil de expresión también fue coincidente con el observado en Sobrecarga de Fe sin Anemia. La activa participación de Prohepcidina como principal hormona reguladora del balance del Fe se puso en evidencia por su marcada expresión hepática tanto en Sobrecarga de Fe como en Anemia con Sobrecarga de Fe. El diseño del modelo de acople fue innovador porque creo condiciones fisiopatológicas adecuadas para inducir el aumento simultáneo de Prohepcidina y Epo definiendo la siguiente interrelación funcional y regulatoria: en respuesta a la señal exceso de Fe aumentó la expresión de Prohepcidina y en respuesta a la señal alta demanda de la anemia, aumentó la expresión de Epo. Otro aporte significativo de nuestros estudios surgió de identificar al riñón como un órgano metabólicamente activo en el balance del Fe, a partir de los cambios funcionales y regulatorios de Prohepcidina y DMT1 tendientes a favorecer la captación tubular de Fe en anemia severa con y sin exceso de Fe. Los estudios de Prohepcidina y Epo en el riñón en Ratas Belgrade constituyeron un aporte relevante para ampliar el conocimiento de las relaciones regulatorias entre eritropoyesis y Fe en respuesta a la anemia constitutiva derivada de la mutación del gen de DMT1. De nuestros resultados podemos concluir que en Ratas Belgrade, la respuesta adaptativa a la señal anemia (aumento de Epo y disminución de Prohepcidina renal) tendiente a estimular la captación de Fe, fue inefectiva por mutación del importador de Fe DMT1. / In this work we studied functional and dysfunctional points of iron metabolism, focusing mainly in pathologies that compromise the Eryhtron. These studies were made in animal models of mouse, developed for induction of iron metabolism and erythropoiesis alterations, as high iron demands associated with severe hemolytic anemia, with and without erythropoiesis inhibition, and with and without iron overload. Another animal model used was Belgrade rats, where Divalent Metal Transporter 1 (DMT1) is mutated. In these experimental models, applying an adequate methodological design, we focused on structural and functional studies using histological and immunohistochemistry methods. With this objective, we used tissues commonly associated with iron uptake, iron deposit and iron release, as are the duodenum, the spleen and the liver. An innovative point of our work was the evaluation of renal function in iron metabolism. Erythropoiesis and iron state were evaluated in peripheral blood using conventional hematological tests. Statistical analysis of the data was applied in all cases that it was necessary for the type of study. In the experimental conditions described, we have done research on the identification and characterization of key proteins of iron metabolism as Prohepcidin and DMT1, as well as also, Erythropoietin, primary regulator of erythropoiesis, and tightly associated with iron, one of the essential nutrients. In anemia model we identified and quantified Erythroblastic Islands in spleen, liver and kidney, diagnostic indicators of erythropoietic activity, highlighting the renal contribution in restoration of blood volume post-hemolysis. Under conditions of high iron demands, that characterizes hemolytic anemia, the expression pattern of DMT1 showed a regulatory mechanism aimed to stimulate iron absorption on duodenum and to decrease iron uptake in liver; thus, DMT1 contributed to increase iron availability to restore erythropoiesis. The role of Prohepcidin as negative regulator of iron absorption was reflected by its moderate expression under hemolytic anemia. In the conditions of our coupled model, characterized by high iron demands, by hemolytic anemia, and iron excess; the increased hepatic expression of DMT1 was a regulatory mechanism that stimulated iron uptake in liver. This behavior was similar to that observed in iron overload without anemia. On duodenum, under anemia with iron overload, intracellular expression of DMT1 showed to be a moderate stimulus for iron absorption, as a mechanism to avoid iron toxicity causes by iron excess. This expression pattern was also coincident with that observed in iron overload without anemia. The active involvement of Prohepcidin as the primary regulating hormone of iron balance was evident for its increased hepatic expression both under iron overload and under hemolytic anemia with iron overload. The design of the coupled model was innovator because set up adequate physiopatological conditions to induce the concomitant increase of Prohepcidin and Epo, defining the following functional and regulatory relation: in response to the signal iron excess Prohepcidin expression increased and in response to the signal high iron demands of anemia, Epo expression increased. Another significant contribution of our studies emerged to identify the kidney as a tissue metabolically active in iron balance, from functional and regulatory changes of Prohepcidin and DMT1 that allow the tubular iron uptake in severe anemia with and without iron excess. Prohepcidin and Epo studies in kidney of Belgrade rats were a relevant contribution to extend our knowledge of regulatory relations between erythropoiesis and iron in response to constitutive anemia from mutations of DMT1 gene. From our results, we conclude that in Belgrade rats, the adaptative response to the signal anemia (Epo increased and renal Prohepcidin decreased) aimed to stimulate iron uptake, was ineffective for the mutation of the iron importer DMT1.

Trabajo de investigación de diseño transversal, observacional y epidemiológico, sobre una muestra de 24 adultos mayores (_ 60 años) de ambos sexos, hospitalizados en la Clínica Geriátrica PNP San José, realizado en el mes de diciembre del 2002, respectivamente. El objetivo del estudio fue de determinar la frecuencia de las alteraciones del medio interno presentada en estos pacientes, tratándose de identificar los factores más frecuentes de los disturbios electrolíticos y ácido-base, con la finalidad que se puedan ejercer acciones de prevención. Los resultados obtenidos nos llevaron a las siguientes conclusiones: La mayoría de los disturbios electrolíticos se originan intrahospitalariamente. La alteración electrolítica más frecuente fue la hiponatremia (25%), entre los pacientes hospitalizados; con predominancia del sexo femenino, no observándose severidad de este disturbio. El tiempo de hospitalización mayor de cinco días y el uso de diuréticos se asociaron significativamente al desarrollo de hiponatremia. La hipokalemia fue otra alteración electrolítica importante presentada durante la hospitalización de los pacientes adultos mayores (20.85%). El disturbio ácido-base más frecuente fue la alcalosis respiratoria (83.35%) y se asoció a otras alteraciones en la mayoría de los pacientes. La acidosis metabólica ocupa una presencia importante (33.35%), luego de la alcalosis respiratoria, lo que podría ser como consecuencia de la calidad de infusiones endovenosas carentes de bases aplicadas habitualmente. / --- Work of design investigation transverse, observational and epidemiological, on a sample of 24 greater adults (_ 60 years) of both sexes, hospitalized in the Geriatric Clinic PNP San José, accomplished in the month of December of the 2002, respectively. The objective of the study was of determining the frequency of the alterations of the internal means presented in these patients, being tried to identifying the most frequent factors of the electrolytic and acid disturbances - base, with the purpose that they could be exercised prevention actions. The obtained results carried us to the following conclusions: Most of the electrolytic disturbances are originated at hospital. The electrolytic alteration more frequent was the hiponatremia (25%), between the hospitalized patients, with predominance of the feminine sex, not being observed severity of this disturbance. The hospitalization time greater than five days and the use of diuretics were associated significantly to the development of hiponatremia. The hipokalemia was other important electrolytic alteration presented during the hospitalization of the patient greater adults (20.85%). The acid disturbance -base more frequent was the alkalosis respiratory (83.35%) and was associated to other alterations in most of the patients. The metabolic acidosis occupies an important presence (33.35%), after the alkalosis respiratory, what would be as consequence of the quality of infusions intravenous lacking of industrious bases customarily.

Se determinó la actividad antioxidante y citotóxica de los productos de reacción de Maillard (MRP’s) obtenidos por síntesis a partir de los sistemas modelo D-glucosa - Glicina y D-glucosa - L-lisina, y se les caracterizó por espectroscopia UV/VIS e IR. La actividad antioxidante fue determinada por autoxidación del pirogalol (inhibición del radical superóxido), resultando un mayor porcentaje de inhibición para el sistema D-glucosa - L-lisina (54.73%) con relación al sistema D-glucosa - Glicina (52.24%); y el método indirecto de Fenton modificado (inhibición del radical hidroxilo) obteniendo una menor formación de complejo Malondialdehido (MDA) para el sistema D-glucosa - Glicina (1.25 pico mol/mL) respecto al sistema D-glucosa - L-lisina (3.05 pico mol/mL). En cuanto al bioensayo de citotoxicidad se obtuvo un mayor porcentaje de embriones no viables en el sistema D-glucosa - L-lisina (100%) comparado con el sistema D-glucosa - Glicina (58 %) a las 24 horas de fecundación y a una concentración de 0.25 mL de MRP’s en 2.75 mL de agua de mar. / It was determined the antioxidant and cytotoxic activity of Maillard reaction products (MRP’s) obtained by synthesis from the D-glucose - Glycine and D-glucose - L-lysine model systems, as well as its characterization by UV/VIS and IR spectroscopy. The antioxidant activity was determined by autoxidation of pyrogallol (inhibition of superoxide radical), being a greater percentage of inhibition from D-glucose - L-lysine model system (54.73 %) respect to the D-glucose - Glycine model system (52.24 %); and Fenton’s indirect modified method (inhibition of the hidroxile radical) obtaining a smaller formation of Malondialdehide complex (MDA) for D-glucose - Glycine model system (1.25 pico mol/mL) respect to D-glucose - L-lysine model system (3.05 pico mol/mL). As to the citotoxicity activity, we obtained a greater percentage of nonviable embryos in the D-glucose - L-lysine model system (100%) respect to D-glucose - Glycine model system (58%) to the 24 hours of fertilization and a concentration of 0.25 mL of MRP’s in 2.75 mL of sea water.

Se determinaron las concentraciones séricas de Colesterol Total y Triglicéridos de 400 personas, con edades comprendidas entre 20 a 70 años, que acudieron al Servicio Académico Asistencial de Análisis Clínicos (SAAAC) entre los meses de Octubre del 2007 a Enero del 2008 y se relacionaron dichos parámetros bioquímicos con las siguientes variables: edad, sexo e índice de masa corporal (IMC). Los valores medios obtenidos fueron: Colesterol Total: 169,66 mg/dl; Triglicéridos: 161,76 mg/dl, e IMC: 27,01 Kg/m2. Se encontró que para el Colesterol Total, 60,5% tenían niveles normales y 39,5% presentaban hipercolesterolemia. Para los Triglicéridos, 50,8% tenían niveles normales y 49,3% tuvieron hipertrigliceridemia. En cuanto al IMC, 2% tenían IMC bajo; 34,8% IMC normal; 38% sobrepeso y 25,3% obesidad. Se halló relación estadísticamente significativa al confrontar los niveles séricos del Colesterol Total (CT) con la edad (p=0.03) y el IMC (p=0.04) .Lo mismo sucedió al relacionar los niveles séricos de los Triglicéridos (TG) con la edad (p=0.001) y el IMC (p=0.04), así como al relacionar estas dos últimas variables entre sí (p=0.04). Pero al confrontar tanto el CT, TG e IMC con la variable sexo (p=0.56, 0.44 y 0.87 respectivamente) no se obtuvo relación estadística significativa. / --- In the present work, was determined the serum concentrations of total cholesterol and triglycerides of 400 people with ages included between 20 to 70 years, who attended the Academic Service of Clinical Analyses (SAAAC) between October, 2007 to January, 2008 and related biochemical parameters with the following variables: age, sex and body mass index (BMI) The average values were determined: Total Cholesterol: 169.66 mg / dl; Triglycerides: 161.76 mg / dl, and BMI: 27.01 Kg/m2. Was found that for total cholesterol, 60.5% had normal levels and 39.5% had hypercholesterolemia. For triglycerides, 50.8% had normal levels and 49.3% had hypertriglyceridemia. As for the BMI, 2% had low BMI, 34.8% normal BMI, 38% overweight and 25.3% obesity. We found a statistically significant relationship to compare the serum levels of total cholesterol (TC) with age (p = 0.03) and BMI (p = 0.04) the same happened when relating the serum levels of triglycerides TG) with the age (p=0.001) and the IMC (p=0.04), as well as when relating these two last variables to each other (p=0.04). But when confronting the CT, TG and BMI with the sex variable (p=0.56, 0, 44 and 0,87 respectively) was not obtained significant statistical relation.

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: Maria Emilia Franco Oliveira / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Clara Slade Oliveira / Banca: Fabio Morato Monteiro / Resumo: Embriões produzidos in vitro (PIV) apresentam baixa sobrevivência aos métodos convencionais de criopreservação. Na tentativa de melhorar a produção e taxa de sobrevivência embrionária após a vitrificação foram utilizados reguladores metabólicos L-carnitina (CA), Forskolina (FO) e Ácido linoleico conjugado trans-10; cis-12 (CLA), separadamente ou em associação em diferentes doses, à partir do quarto (D4) ou sexto (D6) dia do cultivo de desenvolvimento embrionário. No experimento 1 o uso de 2,5 mM de CA influenciou positivamente na produção (62,0±12,5%, P=0,02), expansão (60,7%, P=0,009) e eclosão (41,1%, P=0,04). No experimento 2, a produção de embriões não foi influenciada pela suplementação com FO (P=0,2), entretanto, a dose de 15,0μM afetou positivamente a expansão (53,2%, P=0,001) e eclosão (46,8%, P0,001). No experimento 3, a produção de embriões não foi influenciada pela suplementação do meio de cultivo com CLA (P=0,4), no entanto a dose de 150,0 μM afetou positivamente a expansão (85,5%, P=0,001) e eclosão (70,9%, P=0,001) dos embriões reaquecidos e cultivados por 48 horas. No experimento 4, a associação dos reguladores de metabolismo lipídico utilizados não influenciou a produção de embriões (P=0,16), entretanto o melhor resultado de produção observado foi no tratamento com 15,0 μM de FO individualmente. As taxas de expansão e eclosão foram influenciadas pela suplementação com reguladores de metabolismo adicionados individualmente ou em associação (P=0,001). A melhor taxa de expansão foi observada na suplementação associando CA+FO+CLA, com 90,05%, que não diferiu (P>0,05) da suplementação com CLA (86,4) e da associação CA+CLA (87,9%). Entretanto, a melhor taxa de eclosão foi obtida com CLA (71,8%, P=0,01), superior aos demais tratamentos. Foi concluído que o uso dos... / Abstract: Embryos produced in vitro (IVP) have low survival to conventional cryopreservation methods. In attempt to improve the production and the rate of embryo survival to the cryopreservation process, was used the metabolic regulators, L-carnitine (CA), forskolina (FO) and the conjugated linoleic acid isomers trans-10, cis-12 (CLA), separately or in combination in different doses, starting the fourth (D4) or sixth (D6) days of the embryo culture development in vitro. In experiment 1, the best results of production (62,0 ± 12,5%, P = 0,02), expansion (60,7%, P = 0,009), and hatching (41,1 % P = 0,04) was obtained using 2,5 mM of CA. In experiment 2, the production of embryos was not influenced by supplementation with FO (P=0,2), however, the dose of 15,0μM was the best result of expansion (53,2%) and hatching (46,8%) (P=0,001). In experiment 3, the production of embryos was not influenced by supplementation with CLA (P=0,4), however, the dose of 150,0 μM resulted in higher rates of expansion (85,5%, P=0,001) and hatching (70,9%, P=0,001). In the experiment 4, the embryo production was not influenced by the supplementations (P=0,16), however the best result of the production was using 15,0μM of FO individually. The expansion and hatching rates was influenced by supplementation with the metabolism regulators added individually or in a combination (P=0,001). The best expansion rate was observed with the association CA+FO+CLA (90,05%), that was not different (P>0,05) of the CLA (86,4%) or CA+CLA (87,9%) groups. However, the best hatching rate was obtained with CLA (71,8%), which was higher to the other treatments (P=0.01). In conclusion, the use of the metabolic regulators CA, FO and CLA from the fourth day of the embryo culture in vitro increase ... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-04Bitstream added on 2014-06-13T18:41:31Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_es_dr_arafcf.pdf: 5771689 bytes, checksum: b297f533dacae64d82f70dc67cc616da (MD5) / Estudos em animais e humanos têm demonstrado que as proteínas de leguminosas exercem um efeito redutor do colesterol e triacilglicerídeos. Neste cenário, a ação da proteína β-conglicinina de soja tem sido notadamente confirmada. Recentemente, proteínas de outras espécies também têm recebido atenção, em parte pela homologia à da soja. No presente estudo foram avaliados os efeitos da administração das proteínas do tipo vicilina (7S) isoladas da soja (Glycine max (L.) Merrill), feijões caupí (Vigna unguiculata (L.) Walp) e adzuki (Vigna angularis Willd), em ratos dislipidêmicos induzidos pela dieta. A mais relevante constatação observada neste estudo foi que as proteínas exerceram uma significante atividade hipocolesterolêmica. Os animais tratados com a β-conglicinina apresentaram menores concentrações séricas de colesterol total, não-HDL-c e triacilglicerídeos em 22, 39 e 21%, respectivamente, e os tratados com a β-vignina do caupí e adzuki apresentaram redução dos níveis de colesterol (entre 32-33%) e não-HDL-c (entre 53-54%) superiores aos efeitos observados pela sinvastatina (colesterol -21% e não-HDL -31%). Embora o mecanismo de ação dessas proteínas ainda não seja totalmente conhecido, uma hipótese observada no estudo foi à alteração na expressão de genes da ácido graxo sintetase (FAS, menores entre 10-28%), HMG-CoA redutase (menores entre 12-48%), HMG-CoA sintetase (menores entre 74-83%), fatores regulatórios da síntese do colesterol e triacilglicerídeos, SREBP-2 (menores entre 33-57%) e receptor de LDL (aumentado entre 12-93%). Estes resultados fornecem evidências para o reconhecimento da ação hipocolesterolêmica exercida por essas proteínas, e contribuem aos achados da literatura que atribuem esse efeito a regulação de mRNA de enzimas e outros fatores relacionados ao metabolismo dos lípides / Studies in animals and humans have shown that proteins of legumes exert a lowering effect on cholesterol and triglycerides. In this scenario, the action of the protein β-conglycinin from soybean has been remarkably confirmed. Recently, proteins from other species have also received attention in part by homology to the soybean. In the present study, we evaluated the effects of administration of type-vicilin proteins (7S) isolated from soybean (Glycine max (L.) Merrill), cowpea beans (Vigna unguiculata (L.) Walp) and adzuki (Vigna angularis Willd) in dyslipidemic rats induced by diet. The most significant finding in this study was that the proteins exerted a significant hypocholesterolemic activity. The animals treated with β-conglycinin had lower serum concentrations of total cholesterol, non-HDL-C and triacylglycerides in 22, 39 and 21%, respectively, and those treated with cowpea and adzuki β-vignin showed minors levels of cholesterol (between 32-33%) and non-HDL-C (between 53-54%) greater than the effects observed for simvastatin (-21% cholesterol, non-HDL -31%). Although the mechanism of action of these proteins is not yet fully understood, a hypothesis observed in the study was the change in gene expression of fatty acid synthase (FAS, minor between 10-28%), HMG-CoA reductase (minor between 12-48 %), HMG-CoA synthase (between 74-83% lower) regulatory factors synthesis of cholesterol and triglycerides, SREBP-2 (minor between 33-57%) and LDL receptor (increased between 12-93%). These results give evidence for the recognition of hypocholesterolemic action exerted by these proteins, and contribute to findings that attribute the effect to the regulation of mRNA of enzymes and other factors related to lipid metabolism