Orientador: Regina Celia Spadari-Bratfisch / Dissertação (mestrado) - Universidade estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T21:41:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Verago_JosianeLombardi_M.pdf: 2480631 bytes, checksum: c9bc11f0d37c318d249e64047243f35b (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: No estresse observa-se a elevação das concentrações plasmáticas de hormônios tais como as catecolaminas, os glicocorticóides e o glucagon. Estes hormônios determinam alterações em funções metabólicas, entre elas as que ocorrem em tecido adiposo, estimulando a lipólise e inibindo a lipogênese, e em tecido hepático, estimulando a glicogenólise, a gliconeogênese e a síntese de lipoproteínas. Além disso, havíamos previamente observado que o estresse por choque repetido nas patas, induz alterações de sensibilidade na resposta lipolítica a agonistas beta-adrenérgicos em adipócitos brancos isolados de ratos. Neste trabalho, utilizamos ratos alimentados e conscientes, submetidos a três sessões diárias de estresse por choque nas patas, para determinar: 1) as concentrações plasmáticas de corticosterona, glicose, glicerol e triacilgliceróis; 2) as concentrações plasmáticas de glicose, glicerol e triacilgliceróis mediante a infusão endovenosa dos agonistas beta-adrenérgicos: isoproterenol, noradrenalina ou BRL37344; 3) verificar se as alterações de sensibilidade lipolítica previamente demonstradas in vitro se refletem nas concentrações plasmáticas de glicerol, em resposta à infusão dos agonistas beta-adrenérgicos citados acima. Nossos resultados mostraram que a concentração plasmática basal de corticosterona era elevada em comparação àquela observada em ratos anestesiados, e aumentou significativamente após as sessões de estresse, enquanto que a concentração plasmática de triacilgliceróis se elevou após a primeira sessão e a de glicose aumentou após as segunda e terceira sessões de estresse. As concentrações plasmáticas de glicerol não sofreram alterações significativas, antes ou após as sessões de estresse. Os ratos submetidos a estresse foram mais sensíveis à infusão de isoproterenol e noradrenalina junto com prazosin, mantendo elevadas as concentrações plasmáticas de glicose durante a infusão, e respondendo com elevação das concentrações plasmáticas de glicerol e de triacilgliceróis. A infusão de BRL37344, causou elevação significativa da concentração plasmática de glicerol em ratos submetidos a estresse É provável que esta maior sensibilidade de ratos estressados aos agonistas beta-adrenérgicos utilizados esteja relacionada à influência permissiva da corticosterona endógena. Apenas o BRL37344 causou elevação da concentração plasmática de glicerol em ratos estressados, em comparação às suas próprias concentrações basais, provavelmente porque adrenoceptores-beta3 parecem não estar envolvidos na síntese hepática de triacilgliceróis, permitindo que o glicerol liberado pela lipólise acumule-se no plasma. Os resultados apresentados sugerem que o glicerol liberado do tecido adiposo, estaria sendo inicialmente utilizado pelas células hepáticas para a síntese de triacilgliceróis, mas que, com a repetição do estresse, a função hepática poderia estar sendo redirecionada para a liberação de glicose, possivelmente utilizando o glicerol como um dos substratos. Entretanto esta hipótese necessita ser testada Além disso, embora adipócitos isolados sejam subsensíveis à noradrenalina, in vivo a resposta à infusão de isoproterenol, noradrenalina e BRL37344 é mais pronunciada em ratos estressados do que em ratos controle / Abstract: Stress hormones can cause alterations in metabolic functions at the adipose tissue and liver. Moreover, repeated footshock stress induce alterations on the sensitivity to beta-adrenergic agonists in the rat white adipocytes lipolytic response. Therefore, our objective was to determine in fed and conscious male rats submitted to three daily footshock stress sessions: 1) plasma corticosterone, glucose, glycerol and triacylglycerols levels; 2) plasma glucose, glycerol and triacylglycerols levels in response to beta-adrenergic agonists infusion. Our results have shown that plasma corticosterone leveI increased significantly after each stress session while triacylglycerols increased after the first session and glucose increased after the second and third sessions. Glycerol level did not show any alteration after stress. These results suggest that repeated footshock stress might induce metabolic changes, driven towards glucose instead of triacylglycerols release by hepatic tissue, probably by using the glycerol as one of the subtracts in both pathways. Stressed animaIs were more sensitive to noradrenaline plus prazosin and to isoproterenol infusion, maintaining elevated plasma glucose leveI and increasing the plasma glycerol and triacylglycerols levels. Probably, the higher sensitivity to isoproterenol and noradrenaline in stressed animaIs is related to the permissive influence of plasma corticosterone. Only BRL37344 increased the plasma glycerol leveI in stressed rats probably because beta3-adenoceptors seem not to be involved in the hepatic triacylglycerols synthesis, allowing the glycerol backlog in the plasma / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador : Valdemiro C. Sgarlieri / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Tecnologia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:58:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abdalla_Carim_M.pdf: 2556263 bytes, checksum: f552b3e81b41a18308f03195a2c570be (MD5) Previous issue date: 1973 / Resumo: O xilitol e um penta-alcool derivado do xilano, é um adoçante calórico destinado a substituir o açúcar refinado na dieta normal. Porém, enquanto seu preço não se tornar competitivo, será restrito a tratamento de distúrbios metabólicos como o diabete, pelo fato de seu consumo não depender da presença de insulina. Entre os diversos processos experimentados para sua obtenção, encontrou-se que o mais aprovado atualmente e o químico a partir de resíduos como o bagaço de cana, pelo tratamento com acido sulfúrico a 1,9%, na tempera¬tura de 121ºC; em que se obtém a hidrólise a xilose de 95,4 do xilano no tempo de 50 min. e relação sólido/líquido de 36:100. Opcionalmente pode-se utilizar temperatura de 100ºC., perdendo-se parte do rendimento e com uma rela¬ção sólido-liquido desvantajosa, 6:100. A xilose resultante e então reduzida cataliticamente com níquel metálico, em autoclave a 1700 p.s.i. na tempera¬tura de 150ºC por 5 horas, conseguindo-se a conversão a xilitol de 85% da xilose processada e produzindo-se considerável quantidade de sub-produtos. Num estudo que objetivou a produção de 15.000 t/ano de xilitol, verificou-se que seu preço de venda seria de Cr$ 1.300,00/t gerando-se paralelamente 4.000 t de furfural, 18.000 t de dextrose, 5.000 t de levedura industrial e 25.000 t de lignina. Eneontrou-se que além do processo químico existem dois métodos microbiolóticos bastante diversos entre si. Um que tem como ponto de partida o xilano, pela sua hidrólise a xilose, por ação da enzima xílanase elaborada por diversos microrganismos, em que se sobressaem Chaetomium trilaterale, Tri choderma viride, Aypergillus oryzae, Aspergillus batatae e especialmente, Streptomyces xylophagus, que se mostrou apto a hidrolisar comoletamente o xilano, com produção de 7,32 mg. de xilose, em tempo de 15 min. e em condições de pH muito vantajosa, de 7 a 8,6. A conversão da xilose em xilitol e reali¬zada também enzimaticamente pela atividade de vários microrganismos, dos quais se ressaltam Pichia miso, Mirothecium verrucaria, Penicillim chrisogenum e Candida utilis. O segundo método microbiológico utiliza como matéria prima como a glicose, proveniente da celulose ou do amido hidrolisado, melaço de cana, etc. Primeiramente, por ação de Debaryomyces hansenii a glicose e convertida em D-arahitol. Este poli-álcool é então oxidado por Acetobacter suboxidans produzindo-se a D-xilulose, que e reduzida por Candida guilliermondii var. soya, resultando o xilitol como produto final. / Abstract: Xylitol is a polyol derived from xylan; it is a caloric sweeting agent which may substitute sucrose in common diet. Hovever as long as its price is not competitive, its use will he restricted to the treatment of metabolic disorders, such as diabetes mellitus, as its utilization does not seen to depend on insulin. Several methods have been tried for the obtention of xylitol. The most widespread nowadays is a chemical one. By treating crushed sugar cane with 1,9% sulfuric acid at 121ºC, 95,4% of xylose is produced by hydrolvsis of xylan within 50 minutes, the solid/liquid ratio being 36:100. When a temperature of 100ºC is used, the efficiency decreases and solid/liquid ratio is disadvantageous - 6:100. By catalytic reduction of xylose in the presence of metallic nickel in autoclave at a temperature of 150ºC for 5 hours, 85% of this compound is converted to xylitol and a variety of by-products are produced. In a study aiming the production of 15,00 t of xylitol in one year, it was estimated that the price of one ton would be Cr$ 1,300.00; at the same time, 4,000 t of furfural, 1,800 t of dextrose, 5,00 t of industrial yeast and 25,00 t of lignin were produced. Furthermore two microbiological methods for obtention of xylitol have gained acceptance: one uses xylan as starting material, upon its enzimatic hydrolvsis xylose is formed. The enzyime is xylanase produced by several microorganisms, such as sobressaem Chaetomium trilaterale, Tri choderma viride, Aypergillus oryzae, Aspergillus batatae and chiefly Streptomyces xylophagus, capable of hydrolysing all xylan with the production of 7,32 mg of xylose within 15 minutes at a pH ranging from 7 to 8,6. Conversion of xylose to xylitol is also due to enzymatic activity of a number of microorganisms, such Pichia miso, Mirothecium verrucaria, Penicillim chrisogenum and Candida utilis The second microbiological method uses glucose as starting material, which may be obtained by hydrolysis of cellulose, starch, etc. First, through the action of Debaryomyeps hansenii, glucose is converted to D-arabitol. This polyol is then oxidized by Acetobacter suboxidans, producing D-xylulose which on reduction by Candida guilliermondii var. soya, forms xylitol as end-product. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador : Antonio Celso Novaes de Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T04:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mazzafera_Paulo_D.pdf: 4842310 bytes, checksum: 78f6406fedac0fce92441707f665e304 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: No presente trabalho estudou-se o metabolismo da cafeína em folhas e, principalmente, no endosperma de sementes de frutos imaturos de vários cafeeiros, de diferentes cultivares pertencentes a diferentes espécies de café. De um total de 23 cafeeiros e de quatro espécies de gêneros afins ( Paracoffea e psilanthus), que tiveram o teor de cafeína determinado em suas folhas e no endosperma de frutos maduros, foram escolhidos alguns para a contInuidade dos estudos. Selecionados tais cafeeiros, determinou-se cafeína no endosperma de sementes de frutos neste estádio de desenvolvimento foram Incubados com S-Adenosilmetonina, teobromina, cafeína tritlacla no carbono 8 (cafeina3H), cafeina3H e teofilina, e cafeína3H e alopurinol, um inibidor de xantina oxidase, que catalisa a degradação de xantina à àcido úrico. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Rodolfo D. Reyna B / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-14T05:41:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CampilloSanabria_Carlos_M.pdf: 1989664 bytes, checksum: 79846c3674e98775d72c880e01f1c8a4 (MD5) Previous issue date: 1978 / Resumo: Fizeram-se experiências a nível de laboratório para determinaras condições ótimas de temperatura, tempo e pH de precipitação da proteína do lactosoro, encontrando-se os valores des 92°C, 20 min e pH 4,5, respectivamente. Dentro da precipitação da proteína , com o objetivo de fortifica-la com Fe, fizeram-se ensaios de adi cão de diferentes quantidades de solução de FeCl3 a 30% ao soro, de maneira a obter um produto com 0,11-0,14% de Fe. Com os parâmetros de precipitação, e a quantidade de solução dc FeCl, a 50% definidos, realizaram-se um total de 20 experiências a nível piloto de 100 l cada, obtendo-se aproximadamente 10 kg -de produto com 56.89% de proteína. Para estudar a influência da concentração do soro (15-18% S.T.)na recuperação da proteína, foram feitas experiências a nível de la boratório (Rotavapor RE Bilchi) , e a nível piloto (evaporador centrituro Centriterm CT 1B-2) .Problemas técnicos impediram de continuar com este estudo, embora ao comprovar que a recuperação da proteína usando soro concentrado, era só 13% a mais que o soro sem concentrar, tenha-se decidido trabalhar com este último tipo de soro devido a sua vantagem do ponto de vista econômico. Para conhecer a disponibilidade da proteína e de Fa, foram feitos ensaios biológicos cora ratos para definir o valor PFR e a disponibilidade de Fe da produto obtido, encontrando-se o valor PHR de 2,91 usando como referência o valor 2,5 correspondente a caseína, o uma disponibilidade de Fe de 59,3% considerando o FeSO4 com valor 100%, Elaborou-se uma sobremesa tipo "pudim" a base de proteína de soro fortificada com Fe; na formula do "pudim", o leite foi substituído totalmente por agua para poder oferecer assim um produto-nutritivo e econômico, O nível de Fe foi de 12-14 mg e 101 de proteína, 0 "pudim" foi submetido a degustadores e o resultado-desta prova indicou boa aparência, e a proteína adicionada não contribuiu negativamente para o sabor, embora apresentasse gosto "aquoso" e "arenoso" / Abstract: In this work, laboratory experiments were done on the determination of optimum conditions of temperature ,time and pH for whey protein precipitation. They were found to be 92 C, 20 min and pH 4,5, respectively. To fortify the protein with iron various amounts of FeCl3 (30%) solution were added, to the whey during the precipitation process, in such a way as obtain a product with 0,11 to 0,14% Fe. With precipitation parameters and the amount of FeCl3 solution determined, 20 experiments were made at pilot, plant level, each one Kith 100 liters, resulting in ^proximately 10 leg of product To study the influence of whey concentration (IS to IB! S"T,) in protein recovery, experiments were made at "laboratory level" (Evaporator centrifugue - "Centriterm CT 1B-2), Technical problems prevented, the continuation of this part of the work, However, it was found that the protein recovery, using concentrated whey, was only 15% mere than that vising non-concentrated whey, so it was decided to work with the latter, taking into account its low cost. Biological tests with rats were made to determine the PER value and the availability of iron in the product obtained. The PER value was found to be 2.01, using casein at 2.S as a reference. The availability of Fe was 59.31, considering FeSO4, as 1001, A dessert type pudding was prepared from whey protein fortified with iron. In the pudding recipe, the milk was replaced with enough water to provide a nutritive and economical product. The level of iron was 12-24 and. 10 g of protein, per 100 grams. The pudding was then submitted to tasters. The result of the test indicated that the pudding had a good appearance, arid that the protein did not contribute negatively to the flavour, but the product W3s considered to be watery and granafar / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientadores: Angelica Zaninelli Schreiber, Jiri Borecky / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faustinoni_ValeriaCristina_M.pdf: 8466570 bytes, checksum: 17c723bb4670efa7f3a5ed6edfeb5dd1 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Diversos quimioterápicos utilizados contra espécies de Candida, apresentam baixa especificidade e toxicidade. O alarmante relato de resistência clínica e microbiológica de drogas antifúngicas tem sido atribuído à presença da cadeia respiratória do metabolismo de energia de Candida. Recentemente, uma proteína desacopladora foi descoberta em Candida parapsilosis. As proteínas desacopladoras estão associadas freqüentemente com a proteção celular contra estresse oxidativo, limitando a super produção de espécies reativas de oxigênio. Sendo assim, para melhor entendimento do metabolismo de energia dos fungos, novos alvos biológicos podem ser explorados sendo um excelente'"caminho de pesquisa para desenvolvimento de terapias. Neste trabalho, nós relatamos um perfil de acúmulo de CpUCP durante as diferentes fases de crescimento da cultura de Candida parapsilosis em meio YEPG. Células de Candida iniciaram o acúmulo de CpUCP depois da velocidade máxima de crescimento. Entretanto, na presença de concentrações sub-inibitórias dos agentes antifiíngicos cetoconazol e fluconazol, o acúmulo de CpUCP foi considerado inibitório. Nossos resultados sugerem que a CpUCP pode ser um novo alvo para drogas antifiíngicas que juntamente com inibidores da oxidase alternativa pode solucionar a necessidade de encontrar novos e potentes medicamentos contra candidiases sistêmicas / Abstract: Current chemotherapy against Candida species suffers a number of deficiencies, as low specificity and toxiecity. Moreover, there is an alarming increase in reports of microbiological and clinical drug resistanees that have been attributed to the presence of branched respiratory pathways in Candida energy metabolism. Reeently, an uncoupling protein was discovered in this pathogenic yeast. Unecupling proteins are also associated frequently with cell protection against oxidative stresses, limiting the overproduction of reactive oxygen species. Thus, better understanding of the fungal energy metabolism could be an excellent way to search for new biological targets that could be exploited for the rational development of improved therapies. Here we report a CpUCP accumulation profile during different Candida parapsilosis culture growth stages in YEPG medium. CpUCP began to accumulate in Candida cells after the culture passed the maximal growth rate. However, in the presence of subinhibitory concentrations of the azolic antifungal agents ketoconazole and fluconazole the CpUCP accumulation was considerably inhibited. Our results suggest that CpUCP may be a new target for antifungic drugs that together with inhibiitors of alternative oxidase can resolve the alarming neeessity to find new and potent medicaments against systemic candidiases / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciencias Biomédicas

Orientadores: Denise Yvonne Janovitz Norato, Carmem Silvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:13:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Giovannetti_DanielaFaroro_M.pdf: 4705598 bytes, checksum: b711bd064946a2e88aee5f9552c76ffd (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A Acidúria Glutárica tipo I (GA I) é um erro inato do metabolismo com herança autossômica recessiva, causado por mutações no gene glutaril-CoA desidrogenase (GCDH), que determina a deficiência da enzima glutaril-CoA desidrogenase, levando a comprometimento neurológico caracterizado por distonia, com início e evolução extremamente variável. Embora sua incidência estimada seja de 1/30.000 nascidos vivos, muitos pacientes permanecem sem diagnóstico pela dificuldade de suspeição e confirmação laboratorial dessa doença. Este estudo tem como objetivo a caracterização clínica e molecular de 14 casos de acidúria glutárica tipo I, seguidos em instituições brasileiras. Foram incluídos pacientes que apresentavam quadro clínico sugestivo de AGI e positividade do exame de espectrometria de massa de ácidos orgânicos urinários e/ou exame de neuroimagem compatível com esse diagnóstico. Para cada paciente foi preenchido o protocolo padronizado de avaliação clínica e obtido o consentimento informado dos responsáveis e em 13, realizado a coleta de sangue para análise molecular. Foram utilizadas as técnicas de SSCP para triagem de mutações nos 11 éxons e o posterior seqüenciamento automático do DNA para caracterização da mutação. As 13 amostras apresentaram diferentes padrões de migração no gel de eletroforese através da técnica de SSCP, sendo confirmado, através do seqüenciamento automático dos éxons alterados, a presença de nove diferentes mutações, duas delas não reportadas previamente, caracterizando a heterogeneidade molecular em nossa amostra / Abstract: Glutaric Aciduria I (GA I), is an autossomic recessive inborn error of metabolism due to mutations in the glutaryl-CoA dehydrogenase(GCDH) gene. The glutaryl-CoA desidrogenase deficiency causes neurological impairment with dystonic postures, with extremely varied beginning and evolution. Although the estimated incidence is 1/30.000 newborns, many patients are not diagnosed due to the difficulties in suspecting and confirming this disease. This study aims the clinical and molecular characterization of 14 suspected cases of AGI followed in Brazilian institutions. Patients presenting suggestive clinical picture were included if organic acids mass spectrometry was positive or a brain scan showed compatible images. Blood samples were obtained after applying a standardized clinical evaluation protocol and the informed consent was signed by parents of 13 patients. Mutation screening with SSCP for 11 exons and automatic DNA sequencer were used to detect and characterize mutations. The 13 samples showed different migration patterns in SSCP electrophoresis gel and nine different mutations were confirmed by automatic sequencing, two of them previously unreported, characterizing the molecular heterogeneity of our sample grou / Mestrado / Genetica Medica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Angelo Luiz Cortelazzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:27:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kolb_RosanaMarta_D.pdf: 10136146 bytes, checksum: 29e3b7de2d47c70d6ad0a1bd3fb98589 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O presente estudo objetivou examinar o metabolismo energético e as alterações ultraestruturais ocorridas sob anaerobiose, durante o estádio inicial pós-germinativo de quatro espécies: Sesbania vir gata, Sebastiania commersoniana, Erythrina speciosa, as quais ocorrem em áreas encharcadas ou alagadas e Schizolobium parahyba, que ocupa preferencialmente locais bem drenados. Para E. speciosa e S. parahyba também foi estudada a mobilização de reservas sob condições de normoxia e anoxia. Quando comparada às demais espécies, S. vir gata apresentou maiores níveis de A TP sob anaerobiose e suas raízes mostraram poucas alterações ultraestruturais, mesmo após 4 dias de anoxia. As modificações celulares não foram deletérias uma vez que todas as plântulas retomaram o crescimento após um período de reaeração. As raízes de S. commersoniana foram muito mais sensíveis à falta de oxigênio, com níveis de ATP menores do que para S. virgata. Suas células perderam a compartimentalização e suas plântulas não voltaram a crescer sob aerobiose. A mobilização das reservas foi menor na ausência de oxigênio. Tanto E. speciosa quanto S. parahyba utilizaram suas reservas de carboidrato sob anaerobiose, mas E. speciosa manteve níveis de ATP mais elevados do que S. parahyba. A manutenção dos compartimentos celulares em parte das plântulas de E. speciosa permitiu que as mesmas retomassem o crescimento após o tratamento anaeróbio, o que não ocorreu com as plântulas de S. parahyba. Entre as espécies estudadas, S. virgata e E. speciosa foram mais tolerantes à deficiência de oxigênio do que S. commersoniana e S. parahyba. A maior tolerância das espécies à anaerobiose, provavelmente está relacionada com a manutenção de um adequado metabolismo fermentativo, com conseqüente preservação da homeostase e da compartimentalização celular / Abstract: The aims of the present study were to examine the energy metabolism and the occurrence of ultrastructural alterations under anaerobiosis, during the early seedling development of four species: Sesbania virgata, Sebastiania commersoniana, Erythrina speciosa, which occur in waterlogged or flooded areas and Schizolobium parahyba, which occupies mainly well-drained areas. For E. speciosa and S. parahyba, the mobilization of reserves under normoxia and anoxia was also investigated. When compared with the other species, S. virgata presented higher ATP levels under anaerobiosis and its roots showed few ultrastructural alterations, even after 4 days of anoxia. The cellular modifications were not deleterious once all its seedlings resume growth after the reaeration period. The S. commersoniana roots were more sensitive to oxygen absence, with lower ATP levels than for S. virgata. The cellular compartmentalization was disrupted and its seedlings did not resume growth under aerobiosis. The mobilization of reserves was lower under anoxia. Both E. speciosa and S. parahyba were able to utilize their carbohydrate reserves under anaerobiosis, however, E. speciosa maintained higher ATP levels than S. parahyba. The maintenance of cellular compartments in part of the E. speciosa seedlings, was responsible for growth recovery after the anaerobic treatment. The same was not true for S. parahyba seedlings. Among the species studied, S. virgata and E. speciosa were more tolerant to oxygen deficiency than S. commersoniana and S. parahyba. The higher anaerobic tolerance of the species is probably related to the maintenance of an adequate fermentative energy metabolism that results in preservation of homeostasis and cell compartmentalization / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Marcos Nogueira Eberlin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T20:26:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Haddad_Renato_M.pdf: 2878928 bytes, checksum: 3c7927df5757d0ad9406fa7ab2d70cfa (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Neste projeto de pesquisa foi desenvolvido um novo método para determinação e quantificação da homocisteína em plasma, intermediária da síntese de cisteína, que é produzida no organismo a partir da metionina. Este novo método emprega a Espectrometria de Massa por Introdução via Membrana (MIMS). Utilizou-se uma sonda de membrana DIMP (Sonda de membrana com inserção direta) operando no método T&R¿MIMS (aprisionamento e liberação - Espectrometria de Massa por Introdução via Membrana) que amostra os compostos por um determinado período de tempo por adsorção em uma membrana de silicone, seguida de rápida dessorção através do aquecimento da membrana. A análise de homocisteína foi realizada com derivatização por esterificação, adicionando-se cloroformiato de etila, em solvente contendo piridina, etanol e água. Os experimentos foram realizados em um espectrometro de massas monoquadrupolar, operando em modo SIM (monitoramento de íons selecionados). Foi monitorado o íon de m/z 234 que corresponde ao fragmento [M-H]+ da homocisteína. Testes de linearidade mostraram um coeficiente de correlação de 0,998. O sistema se mostrou bastante reprodutível e um experimento no qual foram realizadas cinco repetições apresentou desvio de 2,5%. A recuperação foi de 97,4%, e limitre de detecção de 2?M o que demonstra que o método é viável para a análise de homocisteína / Abstract: This research work describes a new method for the identification and quantitative determination of homocysteine in plasm, an intermediate of the cystein synthesis, which is generated from methionine in the organism. This new method uses the Mass Spectrometry by Introduction via Membrane (MIMS). A membrane probe DIMP (Direct Introduction Membrane Probe) and the T&R-MIMS method (Trap and Release-Membrane Introduction Mass Spectrometry) were employed, which operates by sampling the target compounds through a given period of time by adsorption in a silicone membrane, followed by a fast desorption produced on heating the membrane. Homocysteine analysis was performed by its derivatization through an esterification reaction with ethyl chloroformiate in a mixture of pyridine, ethanol and water as the solvent. The experiments were performed in a Monoquadrupolar Mass Spectrometer, under a SIM (Selected Ions Monitoring) mode of operation. The m/z 234 ion, which corresponds to the homocysteine [M-H]+ fragment, was monitored. Linearity tests led to a correlation coefficient of 0.998. Five runs of a single experiment showed a deviation of 2.5%, indicating the employed method leads to very reproducible results. It was observed a 97.4% of recovering for the homocysteine, which demonstrates that the proposed method can be applied for its quantitative analysis / Mestrado / Patologia Clinica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Eliana Cotta de Faria / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:13:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alarcon_SamiraBorgesKauss_M.pdf: 6022653 bytes, checksum: 5a4eda7070f4172dc84d9cd5879c14ad (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Inúmeros estudos epidemiológicos demonstram uma forte associação inversa entre os níveis plasmáticos de lipoproteínas de alta densidade (HDL) e a doença coronariana aterosclerótica. Portanto o metabolismo de HDL tem sido amplamente estudado. Avaliamos fatores que modulam o metabolismo plasmático de HDL em indivíduos adultos que apresentam hiperalfalipoproteinemia moderada, definidos pelo seu nível de HDL-colesterol como igual ou acima do valor percentil 90 de uma população local analisada (n=1700), ou seja 68mg/dL. As lipoproteínas plasmáticas e as principais sub-frações de HDL (HDL2 e HDL3 -col e Tg) e as atividades das proteínas de transferência de lípides e das enzimas envolvidas no metabolismo das lipoproteínas plasmáticas foram determinadas. Quantificou-se as freqüências de doença cardiovascular e de fatores de risco para esta - dislipidemia, hipertensão arterial, tabagismo e história familiar positiva para doença arterial coronariana precoce, bem como as freqüências de fatores moduladores tais como idade, sexo, raça, consumo de álcool, a obesidade, a atividade física, a presença de menopausa e uso de hormônios na mulher. Os indivíduos deste estudo apresentaram o seguinte fenótipo sérico: aumento de colesterol total e de colesterol de HDL2 e HDL3, aumento de apo A-I e discreto aumento de LDL-colesterol. A atividade da lipoproteína lipase (LPL) foi 35% mais alta (3444±255, n=43 X 5301 ± 317, n=43; em controles e HALP, respectivamente) e a da lipase hepática (HL) 40% menor no grupo HALP(2370±231, n=43 X 1410±103, n=43; em controles e HALP, respectivamente). As atividades da proteína de transferência de fosfolípides (PL TP) e proteína de transferência de colesteril éster (CETP) foram similares em ambos os grupos. Em relação à presença de doença arterial coronariana e risco para esta, os grupos apresentaram freqüências semelhantes. A freqüência de atividade física foi mais alta no HALP. A regressão linear múltipla foi usada para avaliar o impacto das proteínas reguladoras sobre a HDL e suas sub-fraçães e dos fatores moduladores sobre estas proteínas. No HALP, HDL-col associou-se com o IMC (inverso), LPL e apo A-I; HDL2-col foi explicado pela apo A-I e LPL e o HD_-col associou-se com apo A-I e idade (inverso). A terapia de reposição hormonal explicou apo A-I e o uso de álcool, obesidade e álcool/obesidade (inverso), explicaram a atividade da LPL. A CETP foi influenciada pela raça (não branco) e a PL TP pela idade (inverso). A atividade física, menopausa e o uso de contraceptivo oral na mulher não explicaram as atividades das proteínas reguladoras. A modulação parcial das proteínas reguladoras sugere importante componente genético no metabolismo da HDL, em pacientes portadores de hiperalfalipoproteinemia moderada. Sugere-se que o fenótipo descrito não tenha caráter aterogênico / Abstract: Not informed / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Paulo Mazzafera / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:11:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vitoria_AngelaPierre_D.pdf: 7881481 bytes, checksum: 37ab1b2e92416eb94e622c34cf7c5e43 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A maioria dos estudos sobre metabolismo de cafeína tratam da biossíntese do alcalóide e poucos se referem ao catabolismo. Tendo em vista que C. arabica e C. dewevrei diferem quanto a concentração de cafeína, sendo que a prlmelra espécie apresenta maior conteúdo do alcalóide, acredita-se que a concentração de cafeína nos tecidos seja regulada pela razão entre a biossíntese e a biodegradação, as quais podem variar durante o desenvolvimento do tecido. Desta forma, traçadores radioativos ( ['C ANTPOT. 14¿-2]-cafeína e ['C ANTPOT. 14¿-2] -xantina) foram utilizados para investigar o catabolismo de cafeína em frutos imaturos e maduros e folhas jovens e adultas de C. arabica e C. dewevrei assim como para a determinação da atividade de várias enzimas envolvidas na via catabólica (cafeína demetilase, xantina desidrogenase, uricase, alantoinase, alantoato amidohidrolase e urease) . Nossos dados sugerem que existam passos limitantes no catabolismo de cafeína, o primeiro sendo a demetilação de cafeína para teofilina, e o segundo a conversão de ácido úrico para os ureídeos alantoína e ácido alantóico. Estes passos envolvem as enzlmas cafeína demetilase e alantoinase/alantoato amidohidrolase, respectivamente. Os tecidos jovens foram mais eficientes na degradação de cafeína. Aparentemente, C. dewevrei mostrou muito mais capacidade para catabolizar cafeína do que C. arabica / Abstract: Most of the studies on caffeine metabolism were carried out on the biosynthesis of the alkaloid, and very few on its catabolism. Once c. arabica and c. dewevrei differs regarding caffeine content in leaves and fruits, the first species presenting higher alkaloid contents, it is believed that caffeine concentration in coffee tissues is regulated by the ratio between biosynthesis and biodegradation, which may vary during the life span or development of the tissue. Therefore, in this thesis labeled tracers (['C ANTPOT. 14¿-2]] - caffeine and ['C ANTPOT. 14¿-2]-xanthine) were used to investigate caffeine catabolism in immature and mature fruits, and young and old leaves of C. arabica and C. dewevrei as well as the activity of several enzymes involved in the catabolic pathway were determined (caffeine demethylase, xanthine dehydrogenase, uricase, allantoinase, allantoate amidohydrolase and urease) . Our data suggest that there are to limiting steps in the caffeine catabolism, the first being the demethylation of caffeine to theophylline, and the second the conversion of uric acid to the ureides allantoin and allantoic acid. These steps involve the enzymes caffeine demethyla'se and allantoinase/allantoate amidohydrolase, respectively. Young tissues were more efficient for caffeine degradation. Apparently, C. dewevrei showed much higher capacity for caffeine catabolism than C. arabica / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas