Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-17T19:43:31Z No. of bitstreams: 1 LucianaMariaAraujoRabelo_TESE.pdf: 3802625 bytes, checksum: 997bf48b7638b7c1490b5a664ca3194e (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-02-20T18:59:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LucianaMariaAraujoRabelo_TESE.pdf: 3802625 bytes, checksum: 997bf48b7638b7c1490b5a664ca3194e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T18:59:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LucianaMariaAraujoRabelo_TESE.pdf: 3802625 bytes, checksum: 997bf48b7638b7c1490b5a664ca3194e (MD5) Previous issue date: 2016-10-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O c?ncer ? um termo utilizado para representar um conjunto de mais de 200 patologias, incluindo tumores malignos de diferentes localiza??es. V?rios s?o os mecanismos que contribuem para a carcinog?nese: sinal proliferativo sustentado, desregula??o da energia celular, evas?o a apoptose, indu??o a angiog?nese, replica??o ilimitada, entre outros. Dentre os principais tipos de c?ncer existentes, o c?ncer de pele se destaca: surge nos melan?citos e ? o mais frequente no Brasil, correspondendo a 30% de todos os tumores malignos registrados no Pa?s. Melanomas em est?gio inicial podem, na maioria das vezes, ser tratados apenas com cirurgia, por?m os c?nceres mais avan?ados requerem outros tratamentos. Neste trabalho, um inibidor de tripsina do tipo Kunitz foi purificado de sementes da leguminosa Mimosa regnellii Benth (ITJ), parcialmente caracterizado e avaliado quanto sua toxicidade frente a linhagens de c?lulas tumorais, atuando especificamente com um IC50 de 0,65 ?M em linhagem celular B16-F10, n?o apresentando toxicidade frente a linhagens de c?lulas n?o transformadas. Sua capacidade de induzir morte celular pela via de apoptose em c?lulas de melanoma de camundongo B16-F10 tamb?m foi avaliada, atrav?s de citometria de fluxo com os marcadores Anexina V-FITC/PI, induzindo cerca de 45% das c?lulas a apoptose. Al?m disso, o inibidor tamb?m foi avaliado quanto a sua capacidade de: alterar o potencial de membrana mitocondrial, visualizado por experimentos em citometria de fluxo utilizando a sonda Rodamina123 e microscopia confocal com o marcador Mitotracker Red, onde foi capaz de alterar de forma significativa o ??m; Liberar esp?cies reativas de oxig?nio e nitrog?nio, atrav?s de sondas espec?ficas visualizadas por t?cnicas de microscopia, causando libera??o de ROS na concentra??o de IC50, por?m n?o influenciando libera??o de ERNs; Liberar c?lcio citos?lico, evento que influencia na ativa??o de apoptose, com efeito significativo em c?lulas B16-f10; Inibir atividade angiog?nica de c?lulas endoteliais de coelho, atrav?s de experimentos de inibi??o de forma??o de novos vasos em matrigel, an?lise da express?o de VEGF por t?cnicas de western Blotting e redu??o da express?o de IL-6 analisado por microscopia confocal; Inibir o processo de migra??o celular em ensaio de indu??o de ferimento e an?lise em microscopia e, por fim, a alterar a morfologia celular de B16-F10, analisada por incuba??o com anticorpos espec?ficos para componentes da matriz extracelular e filamentos intermedi?rios das c?lulas de melanoma, realizados em microscopia de fluoresc?ncia. Todos esses resultados reunidos favorecem a proposi??o de um poss?vel mecanismo de a??o de ITJ na indu??o de morte celular por apoptose em c?lulas B16-F10, onde o inibidor atuaria inicialmente aumentando os n?veis de c?lcio citos?lico e ROS, alterando posteriormente a express?o de p53 em 36h de incuba??o, que agiriam alterando o metabolismo mitocondrial, ativando vias de apoptose dependentes da participa??o de caspases; ITJ tamb?m atuaria inibindo processos migrat?rios at? 18 horas de exposi??o, al?m de influenciar de forma tardia na inibi??o do processo angiog?nico in vitro. Estes resultados sugerem que ITJ apresenta potencial para ser utilizado como f?rmaco em tratamento adjuvante contra melanomas, devido a sua especificidade e baixa dosagem quando comparado a outras mol?culas bioativas. / Cancer is a term used to represent a set of more than 200 diseases, including malignant tumors of different localizations. There are several mechanisms that contribute to carcinogenesis: sustained proliferative signals, deregulation of cellular energy, evasion of apoptosis, angiogenesis induction and unlimited replication, among others. Among the main types of cancer, skin cancer stands out: arises in melanocytes and is the most common in Brazil, accounting for 30% of all malignant tumors registered in the country melanomas at an early stage can, in most cases,. It is treated with surgery, but the most advanced cancers require other treatments. In this work a Kunitz-type trypsin inhibitor was purified from Mimosa regnellii Benth (ITJ) legume seeds, partially characterized and evaluated for their toxicity front tumor cell lines, specifically acting with an IC50 of 0.65 ?M in B16-F10 cell line, showing no toxicity compared to non-transformed cell lines. Its ability to induce cell death by apoptosis pathway in mouse B16-F10 melanoma cells was evaluated by flow cytometry with Annexin V-FITC / PI markers, inducing about 45% apoptosis of cells. In addition, the inhibitor was also evaluated for their ability to: change the mitochondrial membrane potential, visualized by flow cytometry experiments using Rhodamine123 probe and confocal microscopy with Mitotracker Red marker, which was able to significantly change the ??m; Release of ROS and RNs through specific probes visualized by microscopy techniques, causing release of ROS in the concentration of IC50, but not influencing release RNS; Liberation of cytosolic calcium, an event that influences the apoptosis activation, with significant effect on B16-F10 cells; Inhibition of angiogenic activity on rabbit endothelial cells through experiments of inhibition of new vessel formation in Matrigel, analysis of VEGF expression by western blotting techniques and reduction of IL-6 expression analyzed by confocal microscopy; Inhibition of cell migration process in wound induction assay and microscopy analysis and, finally, to alter the cellular morphology of B16-F10 analyzed by incubation with specific antibodies to extracellular matrix components and intermediate filaments of melanoma cells, conducted in fluorescence microscopy. All these combined results favor the proposal of a possible ITJ action mechanism in the induction of cell death by apoptosis in B16-F10 cells, where the inhibitor initially act by altering the p53 expression in 36h of incubation, increasing calcium cytosolic levels and ROS, which would act changing the mitochondrial metabolism, activating dependent apoptosis pathways of caspase participation; ITJ also act by inhibiting migration processes up to 18 hours of exposure, as well as influence belatedly in inhibiting the angiogenic process in vitro. These results suggest that ITJ has the potential to be used as a drug adjuvant treatment for melanomas, due to their specificity and low-dose when compared to other bioactive molecules.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-05-31T20:52:30Z No. of bitstreams: 1 BrunaSoaresLandeira_TESE.pdf: 8601965 bytes, checksum: a68be4513e6834f5aaf48800f8ea90d7 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-06-01T22:19:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 BrunaSoaresLandeira_TESE.pdf: 8601965 bytes, checksum: a68be4513e6834f5aaf48800f8ea90d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-01T22:19:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BrunaSoaresLandeira_TESE.pdf: 8601965 bytes, checksum: a68be4513e6834f5aaf48800f8ea90d7 (MD5) Previous issue date: 2017-04-11 / O c?rtex cerebral de mam?feros ? histologicamente organizado em diferentes camadas de neur?nios excitat?rios que possuem diversos padr?es de conex?o com alvos corticais e subcorticais. Durante o desenvolvimento, essas camadas corticais se estabelecem sequencialmente atrav?s de uma intrincada combina??o de especifica??o neuronal e migra??o em um padr?o radial conhecida como ?de dentro para fora?: neur?nios infragranulares s?o gerados primeiro do que os neur?nios granulares e supragranulares. Nas ?ltimas d?cadas, diversos genes codificando fatores de transcri??o envolvidos na especifica??o de neur?nios destinados a diferentes camadas corticais foram identificados. Todavia, a influ?ncia dos neur?nios infragranulares sobre a especifica??o das coortes neuronais subsequentes permanece pouco entendida. Para investigar os poss?veis efeitos da abla??o de neur?nios infragranulares sobre a especifica??o de neur?nios supragranulares, n?s induzimos a morte seletiva de neur?nios corticais das camadas V e VI antes da gera??o dos neur?nios destinados ?s camadas II-IV. Nossos dados revelam que um dia ap?s a abla??o, progenitores continuaram a gerar neur?nios destinados a camada VI que expressam o fator de transcri??o TBR1, enquanto praticamente nenhum neur?nio expressando TBR1 foi gerado na mesma etapa do desenvolvimento em controles com a mesma idade. Curiosamente, alguns neur?nios TBR1-positivos gerados ap?s a abla??o de neur?nios infragranulares se estabeleceram em camadas corticais superficiais, como esperado para neur?nios supragranulares gerados neste est?gio, sugerindo que a migra??o de neur?nios corticais pode ser controlada independentemente da sua especifica??o molecular. Al?m disso, n?s observamos um aumento em neur?nios de camada V que expressam CTIP2 e neur?nios calosos que expressam SATB2 ? custa da diminui??o neur?nios de camada IV em animais P0. Quando estes animais se tornam adultos jovens (P30) o aumento de neur?nios SATB2 e CTIP2 n?o existe mais, todavia encontramos esses neur?nios distribu?dos de forma diferente na ?rea somatossensorial dos animais que sofreram abla??o. Experimentos in vitro revelaram que a organiza??o citoarquitet?nica laminar do c?rtex ? necess?ria para gerar novamente os neur?nios TBR1+ que foram eliminados anteriormente. Al?m disso, experimentos in vitro indicam que em condi??o de baixa densidade celular os neur?nios tem seu fen?tipo alterado, expressando v?rios fatores de transcri??o ao mesmo tempo. Em conjunto, nossos dados indicam a exist?ncia de um mecanismo regulat?rio entre neur?nios infragranulares e progenitores envolvidos na gera??o de neur?nios supragranulares e/ou entre neur?nios infragranulares e neur?nios p?s-mit?ticos gerados em seguida. Este mecanismo poderia ajudar a controlar o n?mero de neur?nios em diferentes camadas e contribuir para o estabelecimento de diferentes ?reas corticais. / The cerebral cortex of mammals is histologically organized into in different layers of excitatory neurons that have distinct patterns of connections with cortical or subcortical targets. During development, these cortical layers are sequentially established through an intricate combination of neuronal specification and migration in a radial pattern known as "inside-out": deep-layer neurons are generated prior to upper-layer neurons. In the last few decades, several genes encoding transcription factors involved in the specification of neurons destined to different cortical layers have been identified. However, the influence of early-generated neurons in to the specification of subsequent neuronal cohorts remains unclear. To investigate the possible effects early born neurons ablation on the specification of late born neurons, we induced the selective death of cortical neurons from layers V and VI neurons before the generation of neurons destined to layers II, III and IV. Our data shows that oneday after ablation, progenitors resumed generation of layer VI neurons expressing the transcription factor TBR1, whereas virtually no TBR1-expressing neuron was generated at the same developmental stage in age-matched controls. Interestingly, many TBR1-positive neurons generated after deep-layer ablation settled within superficial cortical layers, as expected for upper-layer neurons generated at that stage, suggesting that migration post-mitotic neurons is independent of fate-specification. Furthermore, we observed an increase in layer V neurons expressing CTIP2 and cortico-cortical neurons expressing SATB2 at the expense of layer IV neurons in P0 animals. When these animals became young adults (P30) the increase os SATB2 and CTIP2 neurons is no longer observed, however these neurons are distributed in a different way in somatosensory areas from ablated animals. In vitro experiments show that the laminar cytoarchitectural organization of the cortex is necessary to regenerate the previously deleted TBR1 + neurons. In addition, in vitro experiments indicate that in a condition of low cell density the neurons phnotype is altered, they express several transcription factors at the same time. Together, our data indicate the existence of feedback mechanism either from early-generated neurons to progenitors involved in the generation of upper-layer neurons or from deep-layer neurons to postmitotic neurons generated subsequently. This mechanism could help to control the number of neurons in different layers and contribute to the establishment of different cortical areas.

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T13:19:50Z No. of bitstreams: 1 TES_VIRGINIA_CARLA_DE_ALMEIDA_FALCAO_COMPLETO.pdf: 3588046 bytes, checksum: 337be6be89fea4ea58787c070a072a51 (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T13:19:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TES_VIRGINIA_CARLA_DE_ALMEIDA_FALCAO_COMPLETO.pdf: 3588046 bytes, checksum: 337be6be89fea4ea58787c070a072a51 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T13:20:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_VIRGINIA_CARLA_DE_ALMEIDA_FALCAO_COMPLETO.pdf: 3588046 bytes, checksum: 337be6be89fea4ea58787c070a072a51 (MD5) Previous issue date: 2017-03-30 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul (FAPERGS) / Tuberculosis (TB) has become the leading global cause of death from infectious diseases. In 2015, according to WHO, 10.4 million new cases of tuberculosis worldwide have emerged. Currently the commonly used treatments are not effective against the forms of disease resistant to the most effective anti-TB drugs, and drugs with new mechanisms of action are needed. Mycobacterium tuberculosis dihydroneopterin aldolase (MtDHNA /FolB) is a folate enzyme encoded by the folB gene, which has important properties that make it a potential target for the synthesis of new antimicrobial agents. As a first step for target validation in the antimicrobial drug development pipeline, it is important to prove that the gene encoding a putative target is essential for pathogen?s viability. In this study, using site directed mutagenesis, biochemical analyzes and gene knockout experiments, we demonstrated that the folB gene is essential for the survival of Mtb, and furthermore we prove that this essentiality depends on the aldolase/epimerase activities of the MtFolB protein. The wild-type gene (wt) and the point mutants K99A and Y54F were cloned and expressed, and the corresponding recombinant proteins were purified and monitored for the activities of aldolase, epimerase and oxygenase using HPLC. In contrast to the wild-type MtFolB (wt) enzyme, both mutants had neither aldolase nor epimerase activities under the conditions tested. The Y54F mutant maintained oxygenase activity, whereas for the K99A mutant it was possible to detect oxygenase activity only in the presence of HP and GA as substrates. Knockout experiments showed that the folB gene is essential for the survival of Mtb under the conditions tested. However, unlike the wild-type copy, when the sequences encoding the K99A or Y54F mutants were used for complementation, no viable colonies were obtained, indicating that these point mutants could not rescue the cells after the folB knockout. These results indicate that aldolase and/or epimerase activities are crucial for the survival of Mtb. The construction of Mycobacterium tuberculosis folB-GFP fusion (Mtb) strains containing wild-type folB gene sequence or a deleted C-terminal mutant (folB?C), devoid of the sequence presumably necessary for anchoring the enzyme within nanocage compartments, were performed and together with other cell biology methods described in this work will be used for a better understanding of MtDHNA/FolB cellular functions and for the validation of this enzyme as a therapeutic target. / A tuberculose (TB) tornou-se a principal causa mundial de morte por doen?as infecciosas. Em 2015, de acordo com a OMS, surgiram 10,4 milh?es de novos casos de tuberculose no mundo. Atualmente os tratamentos comumente utilizados n?o s?o eficientes contra as formas da doen?a resistentes aos f?rmacos anti-TB mais eficazes, sendo necess?rios f?rmacos com novos mecanismos de a??o. A di-hidroneopterina aldolase de Mycobacterium tuberculosis (MtDHNA/FolB) ? uma enzima da via do folato, codificada pelo gene folB, que apresenta caracter?sticas importantes que a tornam um potencial alvo para s?ntese de novos agentes antimicrobianos. Neste estudo, por meio de mutag?nese s?tio-direcionada, an?lises bioqu?micas e experimentos de nocaute g?nico, demostramos que o gene folB ? essencial para a sobreviv?ncia de Mtb, e al?m disso provamos que essa essencialidade depende das atividades de aldolase/epimerase da prote?na MtFolB. O gene do tipo selvagem (wt) e os mutantes pontuais K99A e Y54F foram clonados e expressos, e as prote?nas recombinantes correspondentes foram purificadas e monitoradas para as atividades de aldolase, epimerase e oxigenase utilizando HPLC. Em contraste com a enzima MtFolB selvagem (wt), ambas as mutantes n?o apresentaram atividade de aldolase nem de epimerase nas condi??es testadas. A mutante Y54F manteve a atividade da oxigenase, enquanto que para a mutante K99A foi poss?vel detectar a atividade de oxigenase apenas na presen?a de HP e GA como substratos. Os experimentos de nocaute mostraram que o gene folB ? essencial para a sobreviv?ncia de Mtb sob as condi??es testadas. Entretanto, diferentemente da c?pia selvagem, quando as sequ?ncias que codificam os mutantes K99A ou Y54F foram utilizadas para complementa??o, n?o foram obtidas col?nias vi?veis, indicando que estes mutantes pontuais n?o poderiam resgatar as c?lulas ap?s o nocaute do gene folB. Esses resultados indicam que as atividades de aldolase e/ou epimerase s?o cruciais para a sobreviv?ncia de Mtb. A constru??o de cepas com fus?o folB-GFP de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) que cont?m a sequ?ncia do tipo selvagem do gene folB ou um mutante com o C-terminal deletado (folB?C), desprovida da sequ?ncia supostamente necess?ria para a ancoragem da enzima dentro dos compartimentos de nanocargas, foram realizadas e juntamente com outros m?todos de biologia celular descritos neste trabalho tamb?m poder?o ser utilizados para um melhor entendimento das fun??es celulares apresentadas por MtDHNA/FolB e para valida??o dessa enzima como potencial alvo terap?utico.

Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-05-04T19:26:50Z No. of bitstreams: 1 DANIELE_CRISTOV?O_ESCOUTO.pdf: 3899595 bytes, checksum: 60af701fccf65168e901b103c704e2fe (MD5) / Rejected by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br), reason: Devolvido devido ao t?tulo da capa (em ingl?s) estar diferente do t?tulo da folha de rosto e ficha catalogr?fica (em portugu?s). on 2018-05-16T19:01:31Z (GMT) / Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-05-17T11:39:29Z No. of bitstreams: 1 DANIELE_CRISTOV?O_ESCOUTO.pdf: 3899595 bytes, checksum: 60af701fccf65168e901b103c704e2fe (MD5) / Rejected by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br), reason: Devolvido devido ao t?tulo da capa (em ingl?s) estar diferente do t?tulo da folha de rosto e ficha catalogr?fica (em portugu?s). on 2018-05-28T18:04:10Z (GMT) / Submitted by PPG Medicina e Ci?ncias da Sa?de (medicina-pg@pucrs.br) on 2018-09-03T19:01:37Z No. of bitstreams: 1 DANIELE_CRIST?V?O_ESCOUTO.pdf: 2805745 bytes, checksum: c76c0d3c115aae92a7015f9312fd9604 (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-09-05T13:05:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DANIELE_CRIST?V?O_ESCOUTO.pdf: 2805745 bytes, checksum: c76c0d3c115aae92a7015f9312fd9604 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-05T13:40:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DANIELE_CRIST?V?O_ESCOUTO.pdf: 2805745 bytes, checksum: c76c0d3c115aae92a7015f9312fd9604 (MD5) Previous issue date: 2018-03-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introdu??o ? A distin??o adequada dos casos de alto risco para eventos graves nas doen?as hipertensivas gestacionais, n?o apenas pr?-ecl?mpsia, ? um desafio cl?nico. O modelo fullPIERS ? uma ferramenta simples e de baixo custo que utiliza vari?veis cl?nicas para estratificar a probabilidade de eventos adversos em gestantes com pr?-ecl?mpsia. O fator de crescimento placent?rio (PlGF) ? um biomarcador com concentra??es reduzidas no plasma de mulheres com pr?-ecl?mpsia e com crescente emprego na avalia??o de gestantes com suspeita de pr?-ecl?mpsia. Objetivos ? O objetivo deste estudo ? estimar a acur?cia do modelo fullPIERS e do biomarcador PlGF como preditores de desfechos adversos maternos em gestantes com doen?a hipertensiva gestacional. M?todos ? Estudo de coorte prospectiva em um hospital terci?rio em Porto Alegre, Brasil, que incluiu gestantes admitidas com press?o arterial sist?lica ? 140 e/ou press?o arterial diast?lica ? 90 mmHg a partir da 20? semana de gesta??o. Os piores valores de vari?veis cl?nicas e laboratoriais dentro das primeiras 48 horas de admiss?o foram coletados. Desenvolvimento de eventos adversos foi acompanhado por um per?odo de 14 dias. Concentra??es plasm?ticas maternas de PlGF do momento da admiss?o foram mensuradas. Resultados ? 405 gestantes foram inclu?das no estudo. Entre as 351 mulheres inclu?das na an?lise do modelo fullPIERS, 20 (5%) desenvolveram pelo menos um evento adverso materno dentro de 14 dias de interna??o. O modelo fullPIERS teve pouca capacidade discriminativa para prever desfechos em 48 horas [AUC 0,639 (95% CI 0,458-0,819)]. A acur?cia do modelo foi ainda mais baixa dentro de sete semanas da admiss?o [AUC 0,612 (95% CI 0,440-0,783)]; a capacidade discriminativa manteve-se similar dentro de 14 dias da admiss?o [AUC 0,637 (95% CI 0,491-0,783)]. A calibra??o do modelo fullPIERS tamb?m foi ruim: inclina??o 0,35 (95% CI 0,08-0,62) e intercepto 1,13 (95%CI -2,4-0,14). A an?lise do PlGF incluiu 392 gestantes. PlGF <5? percentil esteve associados a eventos adversos maternos dentro de 48 horas em gestantes inclu?das antes de 35 semanas com sensibilidade de 0,80 (0,4-0,96), valor preditivo negativo (VPN) de 0,98 (0,9-0,99) e AUC ROC de 0,672 (IC 95% 0,5-0,9). PlGF <100 pg/mL apresentaram sensibilidade de 0,8 (0,4-0,96), especificidade de 0,6 (0,5-0,7) e VPN de 0,99 (0,94-0,99) em mulheres ap?s 37 semanas de gravidez. PlGF apresentou bom desempenho para prever parto at? 14 dias em gestantes inclu?das antes de 35 semanas. PlGF <5? percentil esteve associado a rec?m-nascido pequeno para idade gestacional (PIG) com sensibilidade de 0,75 (0,6-0,9), especificidade 0,65 (0,5-0,7), NPV de 0,87 (0,79-0,94) e AUC ROC 0,698 (0,6-0,79), em gestantes com <35 semanas, a acur?cia diminuiu com o aumento das idades gestacionais. Conclus?es ? O modelo fullPIERS e a concentra??o de PLGF mostraram baixa acur?cia na predi??o de desfechos adversos maternos em mulheres com doen?a hipertensiva gestacional, incluindo pr?-ecl?mpsia. O modelo fullPIERS teve desempenho inferior na nossa amostra quando comparado com o estudo que validou este teste. O PLGF parece ser um biomarcador para uso como ferramenta adicional na predi??o de parto dentro de 14 dias e rec?m-nascidos PIG, especialmente em gestantes antes da 35? semana gestacional. / Introduction - Singling out high-risk patients from the diverse hypertensive disorders of pregnancy, and not only preeclampsia, is a challenge for clinicians. The fullPIERS model is a simple and low-cost evaluation instrument using clinical variables to stratify the adverse outcomes probability of pregnant women with high-risk preeclampsia. Placental growth factor (PlGF) levels are reduced in preeclampsia and are increasingly being used as a biomarker in the assessment of this disease. Objectives - The aim of the study is to evaluate the performance of the fullPIERS model and PlGF to predict adverse outcomes in women with hypertensive disorders of pregnancy. Methods - A prospective cohort study carried out at a teaching hospital in Porto Alegre, Brazil enrolling pregnant women admitted with a systolic blood pressure ? 140 mmHg and/or a diastolic blood pressure ? 90 mmHg from the 20th week of gestation. First 48 hours of admission worst clinical and laboratory data were recorded and the development of adverse maternal and perinatal outcomes scrutinised up to 14 days. Admission maternal plasma PlGF concentrations were measured. Results ? A total of 405 women were enrolled. From the 351 women included in the fullPIERS model analysis, 20 (5%) developed at least one of the combined maternal adverse outcomes. The fullPIERS model had poor outcomes discrimination at 48h [AUC 0.639 (95% CI 0.458-0.819)]. At the seventh admission day, the model?s accuracy was even lower [AUC 0.612 (95% CI 0.440-0.783)]; the model?s discriminative ability remained similar [AUC 0.637 (95% CI 0.491-0.783)] at 14 days. Calibration of the fullPIERS model was poor: slope - 0.35 (95% CI 0.08-0.62), intercept -1.13 (95%CI -2.4-0.14). PlGF analysis included 392 women. PlGF < 5th percentile predicted maternal adverse outcomes within 48h in women with gestation < 35 weeks with sensitivity of 0.80, NPV of 0.98 and AUC ROC of 0.672 (CI 95%0.5-0.9). The threshold of <100 pg/mL, had best accuracy in women after 37 weeks of pregnancy, sensitivity of 0.8, specificity of 0.6, negative predictive value of 0.99 and PPV of 0.04. PlGF had good performance to predict delivery within 14 days in women presenting before 35 weeks. PlGF <5th percentile predicted delivery of a SGA infant with sensitivity of 0.75, specificity 0.65, PPV of 0.45, NPV of 0.87, and AUC ROC 0.698, in women with gestation < 35 weeks, accuracy decreased at later gestational ages. Conclusion - In conclusion, in our sample the fullPIERS model and PlGF were limited predictors of maternal adverse outcomes in pregnant women with hypertensive disorders of pregnancy, including preeclampsia. The performance of the fullPIERS model in our sample was inferior to that of the original cohort. PlGF as a biomarker appears to be an additional tool to predict delivery within 14 days and SGA newborn in women before 35 weeks gestation.

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2017-10-05T21:58:20Z No. of bitstreams: 1 TESE- MARIA MAIANY DE OLIVEIRA.pdf: 1486275 bytes, checksum: 077fcda867394bf1737e7758d79af6a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-05T21:58:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE- MARIA MAIANY DE OLIVEIRA.pdf: 1486275 bytes, checksum: 077fcda867394bf1737e7758d79af6a2 (MD5) Previous issue date: 2017-03-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Banana (Musa spp.) is considered one of the most important fruits in world trade due to its nutritional and economic potential.But although there is a large number varieties on the market, the banana is still affected by many diseases.The application of the method of crosses in this species is very difficult because the majority of cultivated varieties is triploid presenting low fertility. In this case, it is necessary to use biotechnology and its tools applied to non-conventional genetic improvement to develop new varieties that have resistance to their different types of pathogens.This work was carried out with the objective of adapting the technique of obtaining embryogeniccallus of banana by means of the Scalp method in cultivars Brazilian Ma?? and Pacovan, adjusting the processes of induction of meristematic structures and multiplication of shoots and induce increased genetic variability by in vitro mutagenesis using the chemical agent ethylmethanesulfonate and, of the genetic transformation by the bombardment of microparticles. Was evaluated the callus formation, the effect of mutagenic in the in vitro cultivation of shoots and the effects of genetic transformation on shoot resistance in selection medium containing the herbicide Imazapyr. The results showed that the merystematic structures obtained have the capacity to origin callus with only one month of cultivation, and both cultivars developed friable callus with average values above 90%.The efficiency of this method was evidenced by the high capacity of induction of friable callus in the two evaluated cultivars but also by the rapidity in the process of obtaining calluses, being the first study of adaptation of the methodology for Brazilian banana cultivars.On the other hand, the evaluation of the mutation induction allowed to conclude that the survival and the capacity of bud formation decreased as a function of the increase of the concentration and the immersion time in the ethylmethanesulfonate.The surviving plants underwent a sorting with the fusaric acid selective agent in which it was possible to regenerate in vitro plants of the cultivars submitted to treatment with the mutagen and to select possible mutants with fusaric acid resistance for cultivarsMa?? and Pacovan.And the genetic transformation method proved efficient in the regeneration of shoots resulting in high values of survival and multiplication, where possible transgenic plants of banana cv. Ma?? were obtained after selection of resistance to the herbicide.Therefore, it is concluded that all the material produced, both in the mutagenic phase and in the genetic transformation, presents a greater genetic variability potentially applicable to the banana improvement. / A banana (Musa spp.) ? considerada um dos mais importantes frutos no com?rcio mundial em virtude seu potencial nutritivo e econ?mico. Mas, apesar de existir um grande n?mero de variedades no mercado, a bananeira ainda ? acometida por muitas doen?as. A aplica??o do m?todo de cruzamentos nesta esp?cie ? muito dif?cil, pois a maioria das variedades cultivadas ? triploide apresentando baixa fertilidade. Nesse caso, faz-se necess?rio o uso da biotecnologia e de suas ferramentas aplicadas ao melhoramento gen?tico n?o convencional para desenvolver novas variedades que tenham resist?ncia aos seus diferentes tipos de pat?genos. Este trabalho foi realizado com os objetivos de adaptar a t?cnica de obten??o de calos embriog?nicos de bananeira por meio do m?todo Scalp nas cvs. Ma?? e Pacovan, ajustando os processos de indu??o de estruturas polimeristem?ticas ede multiplica??o de brotos e induzir o aumento da variabilidade gen?tica por meio da mutag?nese in vitro com o uso do agente qu?mico etilmetanosulfonato e, da transforma??o gen?tica pelo bombardeamento de micropart?culas.Foram avaliados os calos formados, o efeito do mutag?nico no cultivo in vitro de brotos e, os efeitos da transforma??o gen?tica quanto ? resist?ncia dos brotos em meio de sele??o contendo o herbicida Imazapyr. Os resultados mostraram que as estruturas polimeristem?ticas obtidas t?m capacidade de originar calos com apenas um m?s de cultivo e, ambas as cultivares desenvolveram calos fri?veis com rendimentos m?dios acima de 90%. A efici?ncia desse m?todo foi comprovada pela alta capacidade de indu??o de calos fri?veis nas duas cultivares avaliadas, como tamb?m pela rapidez no processo de obten??o de calos, sendo este o primeiro estudo de adapta??o da metodologia para as cultivares Ma?? e Pacovan. Por outro lado, a avalia??o da indu??o de muta??o permitiu concluir que a sobreviv?ncia e a capacidade de forma??o de brotos diminu?ram em fun??o do aumento da concentra??o e do tempo de imers?o no etilmetanosulfonato. As plantas sobreviventes passaram por uma triagem com o agente seletivo ?cido fus?rico na qual, foi poss?vel regenerar plantas in vitro das cultivares submetidas ao tratamento com o mutag?nico e selecionar poss?veis mutantes com resist?ncia ao ?cido fus?rico para as cvs. Ma?? e Pacovan. O m?todo da transforma??o gen?tica mostrou-se eficiente na regenera??o dos brotos resultando em altos valores de sobreviv?ncia e multiplica??o, onde poss?veis plantas transg?nicas de bananeira cv. Ma?? foram obtidas, ap?s a sele??o de resist?ncia ao herbicida. Portanto, conclui-se que todo material produzido, tanto na fase mutag?nica quanto na transforma??o gen?tica, apresenta uma maior variabilidade gen?tica potencialmente aplic?vel ao melhoramento da bananeira.

Made available in DSpace on 2016-04-04T18:29:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 miriam.pdf: 1518623 bytes, checksum: 260be23e5c071b069ca2bc9465ef8da1 (MD5) Previous issue date: 2001-08-31 / Within a Piagetian and a micro genetic approach, it was investigated the dialectic thought and the construction of possibilities in the solution and comprehension of a computer game. A previous study with a group of adolescents, made up of 40 boys and 26 girls from 6th. to 8th. grades, showed personalized preferences, without a group tendency and linked to complex games. The need for non-experienced subjects in such games and for starting studies making use of a simpler game, led to the research of Tetris solution by two female university students. The procedure, which was individual and videotaped, consisted of a 4-proof pre-evaluation of possibilities, 9 sessions using Tetris (more than 30 games and about 10-hour filming per person) and 3 self-evaluations (after session-1; before sessions 4 and 9). The pre-evaluation revealed a formal level of thought for both subjects. A quantitative analysis showed great progress of the subjects: throughout the sessions, there was a fall in the average number of games, associated to long lasting games, to a larger production of lines and to a larger punctuation, with the advance from the building of unitary to double, triple and quadruple lines. The micro genetic analysis demonstrated the presence of equilibration as well as the dynamic of dialectic constructions and dialectic thoughts underlying the procedural and conceptual schemes. Although the final solutions have achieved a III-Level (Subject 1) and a II-III Level (Subject 2), there were initial possibilities and more elementary mistakes than it was hypothesized to people who had formal thought. On the other hand, the constructed interdependences, both initial and global, comprised larger complexity and scope than it was foreseen. The obtained results suggested that, when solving the Tetris, it was as if the subjects were remaking the cognitive evolution course, projecting their progress to the top level of their cognitive structures or tending to this level. / Com uma abordagem piagetiana e microgen?tica, investigou-se o pensamento dial?tico e a constitui??o de poss?veis na resolu??o e compreens?o de um jogo computadorizado. Um estudo pr?vio com adolescentes, 40 meninos e 26 meninas de 6? a 8? s?ries, mostrou prefer?ncias personalizadas, sem tend?ncia grupal e ligadas a jogos complexos. A necessidade de sujeitos inexperientes nestes jogos e de estudos iniciais com um jogo mais elementar levou ? pesquisa do processo resolutivo do Tetris por duas universit?rias. O procedimento, individual e filmado, incluiu pr?-avalia??o com 4 provas de poss?veis, 9 sess?es com o Tetris (mais de 30 jogos e cerca de 10 h de v?deo por sujeito) e 3 autoavalia??es (ap?s a sess?o-1; antes das sess?es 4 e 9). A pr?-avalia??o revelou n?vel formal de pensamento para os dois sujeitos. Uma an?lise quantitativa mostrou acentuado progresso dos sujeitos: ao longo das sess?es, queda no n?mero m?dio de jogos, associada ? sua maior dura??o, maior produ??o de linhas e maior pontua??o, com avan?o da forma??o de linhas unit?rias para compostas (duplas, triplas e qu?druplas). A an?lise microgen?tica da resolu??o indicou a presen?a de equilibra??o e da din?mica de constru??es dial?ticas e pensamento dial?tico, subjacentes aos esquemas procedurais e conceituais. Embora as solu??es finais tenham sido de N?vel-III (Sujeito 1) e N?vel II-III (Sujeito 2), ocorreram poss?veis iniciais e erros mais elementares do que o hipotetizado para sujeitos com pensamento formal. De outro lado, as interdepend?ncias criadas, iniciais como globais, comportaram abrang?ncia e complexidade maiores do que o previsto. Pelos dados obtidos, ao resolverem o Tetris, os sujeitos como que refizeram o percurso da evolu??o cognitiva, com seu progresso projetado at? o patamar de suas estruturas cognitivas ou tendendo a este patamar.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 418943.pdf: 9796765 bytes, checksum: 405509b47e3c4c0af3b7ead50b0ef57a (MD5) Previous issue date: 2008-11-18 / Esta pesquisa objetivou avaliar a a??o do laser de baixa pot?ncia (LLLT) no percentual de osso neoformado, na composi??o qu?mica, na cristalinidade e na estrutura cristalina do s?tio da distra??o osteog?nica (DO). Quinze coelhos foram submetidos ? DO (protocolo: lat?ncia tr?s dias, ativa??o sete dias 0,7mm/d e consolida??o 10 dias). Foi empregado o LLLT de AsGaAl (830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2 diretamente sobre o s?tio ?sseo submetido ? DO, no per?odo de consolida??o ?ssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. As amostras foram coletadas no final da consolida??o, 10 (seis com LLLT) delas foram analisadas por microscopia ?ptica, para mensura??o do percentual de osso neoformado e seis (tr?s com LLLT, um desses foi exclu?do por haver uni?o precoce dos fragmentos e outro for ocorrer fratura da pe?a na disseca??o) foram analisadas por fluoresc?ncia e difra??o por raios X, a fim de ter analisada a composi??o qu?mica, a cristalinidade e a estrutura cristalina do s?tio da DO. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com LLLT (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006. A composi??o qu?mica revelou, a partir das raz?es de Ca e P, uma mineraliza??o maior no grupo com LLLT. Os percentuais de cristalinidade indicaram maiores percentuais cristalinos nos coelhos com LLLT. As amostras indicaram semelhan?a da estrutura cristalina com as hidroxiapatitas, a partir dos difratogramas obtidos. Concluiu-se que o LLLT apresentou efeito positivo no percentual de osso neoformado, na composi??o qu?mica e na cristalinidade do s?tio da DO. Ocorreu regenera??o no s?tio da DO, comprovada pela identifica??o da hidroxipatita na estrutura cristalina.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423502.pdf: 5239440 bytes, checksum: 32e82b4251252353febf2ca10f052662 (MD5) Previous issue date: 2009-09-30 / Esta pesquisa teve como objetivo avaliar, por m?todos histol?gicos, tomogr?ficos e f?sicos, o efeito do laser de baixa pot?ncia (LLLT 830 nm) no osso neoformado em mand?bulas de coelhos submetidas ? fratura, sem ou com distra??o osteog?nica (DO). Foram utilizados 10 coelhos para as an?lises histol?gicas (quatro para o grupo controle e seis para o experimental) al?m de cinco coelhos para as an?lises tomogr?ficas e f?sicas (um n?ofraturado, n?o-distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, n?o-distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, n?o-distra?do e com irradia??o laser; um fraturado, distra?do e sem irradia??o laser; um fraturado, distra?do e com irradia??o laser). Para os coelhos que sofreram alongamento ?sseo por DO foi adotado o seguinte protocolo: lat?ncia tr?s dias, ativa??o sete dias 0,7mm/d, e consolida??o 10 dias. Para os animais irradiados, utilizou-se o laser infravermelho (GaAl)As (J=830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2, diretamente sobre o s?tio ?sseo submetido ? fratura e/ou DO, no per?odo de consolida??o ?ssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com laser (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006, conforme observado na an?lise histol?gica. A an?lise tomogr?fica revelou aumento da densidade, medida em Unidades Hounsfield (HU), dos ossos fraturados que foram irradiados com laser. Com rela??o ?s propriedades f?sicas, pareceu n?o haver grandes diferen?as entre os grupos que sofreram fratura. Nos ossos submetidos ? DO, o laser n?o promoveu altera??o da nanodureza, mas modificou os valores do m?dulo de elasticidade, na amostra estudada.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 424484.pdf: 12584409 bytes, checksum: ce100d293e186ae476b96a04abe84099 (MD5) Previous issue date: 2010-06-28 / Introdu??o: A distra??o osteog?nica ? um processo terap?utico para induzir neoforma??o tecidual entre superf?cies ?sseas vascularizadas, por meio de uma for?a lenta e progressiva de tra??o, atrav?s de aparelhos funcionais. Objetivos: Validar a utiliza??o dos testes de nanoindenta??o em pesquisas com modelo experimental n?o humano, a fim de conhecer a qualidade do osso mandibular neoformado em ovelhas submetidas ? distra??o osteog?nica e ? terapia a laser de baixa pot?ncia (LLLT), baseado nos valores de dureza e m?dulo de elasticidade. Complementarmente, objetiva-se conhecer o momento mais ben?fico para irradia??o do laser, se na fase de lat?ncia/ativa??o ou matura??o. Ademais, foram realizadas tomografias computadorizadas para avaliar a dimens?o de osso neoformado e verificar poss?veis contra??es desse alongamento. Contexto de Pesquisa: A nanobiotecnologia ? um campo emergente da ci?ncia e da tecnologia que tem o potencial para transformar radicalmente, por meio de novos conhecimentos, os crit?rios atualmente utilizados para conhecer a qualidade do osso formado por distra??o osteog?nica. Materiais e M?todos: Cinco ovelhas foram utilizadas e nelas instalados distratores extra-bucais, com intuito de neoformar 1,5 cm de osso em 60 dias de observa??o, sendo que os distratores eram removidos aos 50, 40 e 33 dias de p?soperat?rio. Quatro animais foram irradiados com LLLT infravermelho (830 &#331;m), tendo recebido oito aplica??es, a cada 48 horas, com tr?s pontos de 5J/cm2 e pot?ncia de 50mW, em diferentes per?odos terap?uticos; o quinto foi o controle, sem tratamento LLLT. As pe?as ?sseas foram submetidas a testes de nanoindenta??o para aferir m?dulo de elasticidade e dureza das amostras e a tomografias computadorizadas para avaliar a contra??o ?ssea. Resultados: A LLLT quando utilizada na fase de matura??o do osso, promoveu aumento da dureza e do m?dulo de elasticidade. Por outro lado, os animais irradiados com LLLT durante o per?odo de lat?ncia/ativa??o apresentaram menores valores de dureza e m?dulo de elasticidade. A an?lise tomogr?fica complementar demonstrou que, nos animais com manuten??o do distrator por 33 dias, ocorreu contra??o do osso neoformado. Conclus?es: A nanoindenta??o ? um teste capaz de captar as m?nimas altera??es do metabolismo ?sseo e, portanto, uma importante ferramenta na aferi??o da qualidade do osso em procedimentos de distra??o osteog?nica. A LLLT ? mais ben?fica quando aplicada no per?odo de matura??o do osso, pois promove aumento da dureza e do m?dulo de elasticidade. O per?odo de consolida??o ?ssea com perman?ncia do distrator deve ser de, no m?nimo, tr?s semanas, a fim de prevenir contra??o do tecido ?sseo alongado.

Submitted by Leticia Schettini (leticia@ufrrj.br) on 2016-09-20T12:51:17Z No. of bitstreams: 1 2009 - Maria Beatriz de Oliveira Monteiro.pdf: 6872732 bytes, checksum: c5bedd487727835e97ae3e6b493349b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-20T12:51:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Maria Beatriz de Oliveira Monteiro.pdf: 6872732 bytes, checksum: c5bedd487727835e97ae3e6b493349b3 (MD5) Previous issue date: 2009-05-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior-CAPES / In spite of the technological progresses, the understanding of the lignin structural formation is still matter of scientific investigations. This research aimed to utilize Eucalyptus urophylla S.T. Blake callus for lignin production. This callus were obtained from stems segments explants grown in culture medium added with a combination of the cytokine TDZ and the auxins acid indole-3-acetic (IAA), acid ?-naphthaleneacetic (NAA) and acid 2,4-dichlorophenoxyacetic (2,4-D). This growth regulators were utilized either alone or mixtured. For cell suspension production it was utilized callus obtained in medium culture added with 20?M IAA + 3?M TDZ, after 30 days of growth in vitro. Once the cells suspension was obtained, the lignin production was induced by four elicitors: jasmonic acid (JA), NAA, sucrose and control (without elicitor). It was used a completely randomized design with four replications. Each plot consisted of an Erlenmeyer with 125 ml of cells suspension culture. The Wiesner test confirmed the lignin presence in all treatments. In 3 of the 4 replicatons it was performed another evaluation to the production of DHPs (polymers by oxidative dehydrogenation) utilizing suspension filtrate added with H2O2, H2O2 + peroxidase and peroxidase. These new treatments were analyzed through polilignols production utilizing infrared (IR) and nuclear magnetic resonance of the hydrogen (NMR H). The suspension filtrate analysis of the 4th replication through ultraviolet (UV), IR, NMR 13C and NMR H evidenced the production of extra cellular lignin. Of this, the largest content was obtained in presence of sucrose as elicitor, followed by ANA and AJ. The cells in suspension increased the cellular wall lignin content in all treatments in relation to the control and the largest values were with the medium containing sucrose. DHPs were also analyzed utilizing as mattress the MS medium added of the same elicitors tested in the cellular suspension phase. For this, it was utilized as precursors the following alcohols: coniferyl or sinapyl, H2O2 and peroxidase; amd the analyses were done in RMN H and RMN 13C. The results showed DHPs synthesis of both coniferyl alcohol (DHP1c, DHP2c and DHP4c) and sinapyl alcohol (DHP2s). Nevertheless, It was not synthesized DHP in the treatment containing sucrose when the precursor was the coniferyl alcohol. On the other hand, when the sinapyl alcohol was the precursor, DHPs were only synthesized in the presence of ANA as elicitor. It was concluded that sucrose is an appropriate elicitor for the lignin production in cells suspension both at cellular and extra cellular level. However, this result was not observed in relation to DHP production. NAA auxin had a better functionality in the DHP2c and DHP2s formation. These results may be considered a progress in the lignification studies with the use of E. urophylla cell suspension. Once all these questions were answered and solved, it will be possible to develop E.urophylla suitable plants with better quality forest products and able to cause smaller environmental impact in the industrial processes. / Apesar dos avan?os tecnol?gicos, a compreens?o da forma??o estrutural da lignina ainda ? alvo de in?meras investiga??es cient?ficas. Esta pesquisa foi realizada com calos de Eucalyptus urophylla S.T. Blake para a produ??o de lignina. Os calos foram obtidos a partir de explantes de segmentos caulinares desenvolvidos em meios de cultura acrescidos de uma combina??o da citocinina TDZ e das auxinas ?cidos: 3-indolac?tico (AIA), ?-naftalenoac?tico (ANA) e diclorofenoxiac?tico (2,4-D), nas formas isoladas e conjugadas. Para a produ??o de c?lulas em suspens?o foram utilizados os calos formados no tratamento contendo 20?M de AIA + 3?M de TDZ, ap?s 30 dias de cultivo in vitro. Obtidas as c?lulas em suspens?o, a produ??o de lignina foi induzida empregando-se quatro elicitores: ?cido jasm?nico (AJ), ANA, sacarose e testemunha (sem o emprego de elicitores). O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, 4 repeti??es e um Erlenmeyer contendo 125 ml de cultura de c?lulas em suspens?o. O teste de Wiesner confirmou a presen?a de lignina, em todos os tratamentos testados. Em 3 das 4 repeti??es foram realizados subtratamentos para a produ??o de DHPs (pol?meros por desidrogena??o oxidativa) a partir do filtrado da suspens?o com H2O2, H2O2 + peroxidase e peroxidase. A an?lise desses subtratamentos foi realizada pela detec??o da produ??o de polilign?is atrav?s de raios infravermelho (IV) e resson?ncia magn?tica nuclear do hidrog?nio (RMN H). O filtrado da suspens?o da repeti??o 4 foi analisado por ultravioleta (UV), IV, RMN 13C e RMN H, sendo constatada a presen?a de lignina extracelular, com o maior teor sendo observado na presen?a do elicitor sacarose, seguido do ANA e AJ. As c?lulas em suspens?o apresentaram aumento no teor de lignina na parede celular em todos os tratamentos em rela??o ? testemunha e os maiores valores foram com o meio contendo sacarose. Foram analisadas tamb?m as DHPs tendo como colch?o o meio de cultura MS acrescido dos mesmos elicitores testados na fase de suspens?o celular. Para isto foram utilizados como precursores os ?lcoois conifer?lico ou sinap?lico, H2O2 e peroxidase, com a lignina analisada em RMN H e RMN 13C. Os resultados mostraram que houve s?ntese de DHPs do ?lcool conifer?lico (DHP1c, DHP2c e DHP4c) e do ?lcool sinap?lico (DHP2s). Porem quando se utilizou como precursor o ?lcool conifer?lico n?o foram sintetizadas DHPs no tratamento contendo sacarose como elicitor. E, quando foi utilizado como precursor o ?lcool sinap?lico, somente foram formadas DHPs na presen?a do elicitor ANA. Concluiu-se, ent?o, que a sacarose apresentou-se como um elicitor adequado para a produ??o de lignina nas c?lulas em suspens?o, tanto em n?vel celular quanto extracelular. Entretanto, isto n?o foi observado em rela??o ? produ??o de DHP. A auxina ANA teve funcionalidade maior na forma??o de DHP2c e DHP2s. Estes resultados devem ser considerados como um avan?o nos estudos de lignifica??o com a utiliza??o de c?lulas em suspens?o de E. urophylla. Quando esses questionamentos forem identificados e solucionados ser? poss?vel o desenvolvimento de novos indiv?duos desta esp?cie que conduzam ? produ??o de produtos florestais de melhor qualidade, com menor impacto ambiental nos processos industriais.