Made available in DSpace on 2016-06-02T19:19:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CAMPOS_Paula_2014.pdf: 1924698 bytes, checksum: d5134f8bff1512ce41535c0a1f61d175 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / Financiadora de Estudos e Projetos / In this work the immobilization of enzyme β-Galactosidase has been investigated with use of assembly technique of nanostructured films denominated LbL (Layer-by-Layer) for employment in an amperometric biosensor of lactose. Therefore, spectroscopy measured has made for UV-vis (Ultraviolet-visible) and fluorescence, in order to monitor the bands of absorption and emission of each bilayer deposited and to confirm the presence of enzyme in the films. It has made too FTIR (Fourier Transform Infrared Spectroscopy) and SFG (Sum Frequency Generation) for the purpose to understand the films structure, the interactions present and the efficiency of technique in the immobilization process. For the lactose detection amperometric measured have carried and that way the performance of modified electrode have evaluated in relation to enzyme immobilization, the polyelectrolytes performance Poly (allylamine hydrochloride) (PAH) and Poli (etileno imina) (PEI) and poly(ethyleneimine) and the operations conditions of biosensor which sensibility, limit of detection, interferences and stability. The evaluation of enzyme deposition by UV-vis and fluorescence showed that the films growth has been satisfactory presenting the characteristics bands of da β-Gal regarding to amino acid residues tryptophan, tyrosine and phenylalanine, among others, in λ = 280 nm for absorption and λ = 344 nm for emission and the deposition of material has been growing. The spectrum of FTIR and SFG indicated bands of chemical groups characteristics of polymers and enzyme and proved that the bonds, probably secondary of the elements are sufficiently strong for to keep the films in substrate during the sensory evaluation. In lactose detection it has made electrode of (PEI/β-Gal)n e (PAH/β-Gal)n both of ten and third bilayers. The sensibility of film (PEI/β-Gal)10 was 0.061 μA mmol-1 cm-2, while the (PAH/β-Gal)10 was 0.079 μA mmol-1 cm-2. In order to increase the efficiency of the biosensors, electrodes compounds for third bilayers were tested, this way the film (PEI/β-Gal)30 has achieved a sensibility higher than the previous electrodes of 0.31 μA mmol-1 cm-2, is likely that a great amount of enzyme has been immobilized. However, the film ITO/PB/(PAH/β-Gal)30 has not get the same efficiency despite de number of bilayer have been increase. Have been identified two interferences, the glucose and the ascorbic acid, but both can be avoided, the first with use of a biosensor for glucose coupled with lactose biosensor and the second causes an elevation on current, being naturally differentiated. The stability of the biosensor was twelve days, being measured in days alternate. All experiments performed to converge to prove that the LbL technique were adequate to assembly the biosensor and that lactose detection can be done and in levels nearby to real samples, but is possible to improve the system still with studies more expanders about the films structure and to test news biosensors configurations. / Neste trabalho investigou-se a imobilização da enzima β-Galactosidase utilizando a técnica de automontagem de filmes nanoestruturados, denominada LbL (Layer-by-Layer do inglês) para o emprego em um biossensor amperométrico de lactose. Foram feitas medidas espectroscópicas por Ultravioleta e visível (UV-vis) e fluorescência, a fim de monitorar as bandas de absorção e emissão de cada bicamada depositada e confirmar a presença da enzima nos filmes. Fez-se também espectroscopia por transformada de Fourier (FTIR) e Geração de Soma de Frequências (SFG) para compreender a estrutura dos filmes, as interações presentes e a eficiência da técnica no processo de imobilização. Para a detecção de lactose realizou-se medidas amperométricas e dessa forma avaliou-se o desempenho do eletrodo modificado em relação à imobilização da enzima, a eficiência dos polieletrólitos Poli (alilaminahidroclorada) (PAH) e Poli (etileno imina) (PEI) e as condições de operação do biossensor tais como sensibilidade, limite de detecção, interferentes e estabilidade. A avaliação da deposição da enzima pelo UV-vis e fluorescência mostrou que o crescimento dos filmes foi satisfatório, apresentando as bandas características da β-Gal atribuídas aos resíduos de aminoácidos triptofano, tirosina e fenilalanina, entre outros, em λ = 280 nm por absorção e sendo os mesmo responsáveis pela emissão em λ = 344 nm sendo que a deposição de material foi crescente. Os espectros de FTIR e SFG indicaram bandas de grupamentos químicos característicos dos polímeros e da enzima e comprovaram que as interações, provavelmente secundárias, entre os elementos são fortes o suficiente para manter o filme no substrato durante as avaliações sensoriais. Na detecção de lactose foram feitos eletrodos de ITO/PB/(PEI/PVS)1/(PEI/β-Gal)n e ITO/PB/(PAH/PVS)1/(PAH/β-Gal)n ambos com dez e trinta bicamadas. A sensibilidade do filme ITO/PB/(PEI/PVS)1/(PEI/β-Gal)10 foi 0,061 μA.mmol-1.cm-2, enquanto o ITO/PB/(PAH/PVS)1/(PAH/β-Gal)10 foi 0,079 μA.mmol-1.cm-2. A fim de aumentar a eficiência do biossensor eletrodos compostos por 30 bicamadas foram testados, dessa forma o filme ITO/PB/(PEI/PVS)1/(PEI/β-Gal)30 alcançou uma sensibilidade superior aos eletrodos anteriores de 0,31 μA.mmol-1.cm-2, pois é possível que uma maior quantidade de enzimas tenha sido imobilizada. Entretanto o filme ITO/PB/(PAH/PVS)1/ (PAH/β-Gal)30 não obteve a mesma eficiência mesmo tendo o número de bicamadas aumentado, o que pode ser atribuído à estrutura do polieletrólito. Foram identificados dois interferentes, a glicose e o ácido ascórbico, mas ambos podem ser evitados, o primeiro com o uso de um biossensor para glicose acoplado ao da lactose e o segundo causa uma elevação na corrente, sendo naturalmente diferenciado. A estabilidade do biossensor foi de 12 dias, com medida em dias alternados. Todos os experimentos realizados convergem para provar que a técnica LbL foi adequada para a construção do biossensor e que a detecção da lactose pode ser feita em níveis de concentração próximos à de amostras reais, mas ainda é possível aprimorar o sistema com estudos mais aprofundados sobre a estrutura dos filmes e testar novas configurações de biossensores.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:24:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2755.pdf: 2461547 bytes, checksum: 2a1bbb06baca89eccb72d61c8be90300 (MD5) Previous issue date: 2009-11-11 / Universidade Federal de Minas Gerais / This research focuses on the way local institutional political power relates to new institutional actors, especially non governmental organizations (NGOs), in a northeastern town in the state of Paraiba, between 1994 and 2006. We analyzed the relationship between the social actors, who represent a new model of state administration also known as non-state public sector on one side, and political leaderships on the other side, in a given region in the country, many times far from large decision-making centers not only in geographical aspects but also in terms of relevant social-indicators, and that allows us to realize the socioeconomic aspects of the composition and organization of the social space.The evidence of conflict between NGOs and local political power attracted attention and led to this research which takes into consideration that one of the questions that permeates the performance of both parties, though in a distinguished manner, is the approach to droughts, an issue historically addressed by the State. / A pesquisa trata do modo como se relaciona o poder local institucionalizado e os novos atores institucionais, especialmente Organizações Não-Governamentais (ONGs), em um município do estado da Paraíba, região Nordeste do país, entre 1994 e 2006. O objetivo foi analisar o modo como se dá a relação entre atores sociais identificados com um novo modelo de gestão do Estado o chamado setor público não-estatal -, e lideranças políticas em determinada região do país, distante muitas vezes dos grandes centros de decisão não apenas em termos geográficos mas também no que se refere a indicadores sociais relevantes e que permitem perceber aspectos socioeconômicos da composição e organização do espaço social. Os indícios de conflito entre ONGs e poder local despertou o interesse pela pesquisa tendo em vista que uma das questões que permeiam a atuação de ambos, ainda que de forma distinta, é o trato da questão das secas, matéria marcada historicamente pela intervenção estatal.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:25:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2514.pdf: 632406 bytes, checksum: 6eae59bf274907282f71ec53177fb18b (MD5) Previous issue date: 2007-03-07 / Universidade Federal de Minas Gerais / Esta dissertação busca realizar uma análise da memória dos militares sobre o golpe de 1964, tendo como objeto a publicação editada pela Biblioteca do Exército Editora, em 2003, Coleção História Oral do Exército. 1964: 31 de Março O Movimento Revolucionário e sua História. A relevância deste trabalho está no fato de conferir oportunidade aos vencidos na batalha pela memória de expor as motivações e os desejos que os levaram a participar do golpe militar. Através desta análise, concluímos que os militares, enquanto grupo social, procuraram, através das entrevistas, legitimar a intervenção da qual fizeram parte, além de garantir o lugar da memória institucional sobre o evento, em resposta às versões predominantes na literatura sobre o tema.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:25:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005.pdf: 12528283 bytes, checksum: 97e6548d66e3f0aa797082f46c17b9bb (MD5) Previous issue date: 2005-12-07 / Financiadora de Estudos e Projetos / A tese é um estudo comparado da trajetória de desempenho dos governos municipais de Dois Vizinhos e Palmas, na área da Saúde, e busca investigar as razões que explicam as diferenças nos resultados desses governos na tentativa de implementar políticas caracterizadas pela participação da comunidade no planejamento e controle da execução das ações e serviços nessa área da vida social através de seus Conselhos de Saúde, entre 1991 e 2004. Procura-se evidenciar que a explicação para o desempenho distinto trilhado por esses Conselhos, está relacionada com os costumes e as práticas políticas das sociedades comparadas, isto é, está relacionada com os valores socioculturais encontrados em cada município, os quais estão agrupados na rubrica da cultura política, e tem marcado suas concepções a respeito do governo, governantes e instituições políticas. Mas, esses valores dizem respeito muito mais a existência de capital social avançado em Dois Vizinhos e a falta deste, no município de Palmas, do que a um traço cultural marcante. Esse capital social diz respeito a características da organização social e, no caso do município douvizinhense, tem possibilitado que sua administração pública tenha implementado um modelo de gestão - entre os representantes do governo e da sociedade civil organizada - flexível e aberto ao diálogo, ao passo que, no município palmense, o que se formou e tem sido reproduzido é um modelo de gestão pouco favorável à questão da participação na agenda municipal, ou seja, um processo decisório fechado de gestão. Estas características distintivas têm redundado em padrões sociais contrastantes, os quais têm auto-reforçado diferenças sistemáticas nos modelos de engajamento cívico e solidariedade social e, influenciado, o funcionamento de seus respectivos Conselhos de Saúde. Tais diferenças se refletem na avaliação e aceitação de suas respectivas populações e são produto e produtoras de um modelo culturalmente definido que reforça, ano após ano, os modelos de gestão já existentes.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:25:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 350.pdf: 513626 bytes, checksum: 0bbd28e6cffcbcac55d43790dd808f4f (MD5) Previous issue date: 2004-09-20 / Financiadora de Estudos e Projetos / This research deals with the relation between the institutional issues and the labour market. Its main hypothesis is that the jurisprudence establishes new ways of work regulation and new contractual notions of labour. Its object is the study of the arguments of the ministers of the Tribunal Superior do Trabalho -TST (High Labour Court), and of the legal doctrine about new contractual forms of labour, especially the outsourcing. This study in based on a) analyses of socioeconomic particularly those related to work regulations; b) a balance of the doctrine in the main legal magazines; c) analysis of TST decisions from 1993 to 2003; d) 9 in-depth interviews with TST ministers and judges. In Brazil there is no specific law about outsourcing. Besides the determination of the legality of this contractual form by TST jurisprudence consolidate new rules of work. Law and Economy influenced each other in the process of building new rules and of defining notions licit outsourcing. This dissertation shows that the jurisprudence at the same time that is influenced by the new demands from a changing labour market imposes limits to the market through new notions of labour contract. / Esta pesquisa trata da relação entre os aspectos institucionais e o mercado de trabalho. Sua hipótese principal é que a jurisprudência estabelece novas formas de regulação do trabalho e novas noções contratuais do trabalho. Tem como objeto o estudo dos argumentos dos ministros do Tribunal Superior do Trabalho TST - e da doutrina jurídica sobre a adoção de novas formas contratuais do trabalho, em especial a terceirização. Esta pesquisa é baseada em a) análise de artigos de sócio economia, particularmente aqueles relacionados com regulação do trabalho; b) balanços da doutrina nas principais revistas jurídicas; c) análise de decisões do TST de 1993 a 2003; d) 9 entrevistas realizadas em profundidade com ministros e juízes do TST. No Brasil, não há lei específica sobre terceirização e a determinação da licitude desta forma contratual pela jurisprudência do TST trouxe novas normas de trabalho. Assim, observou-se que Direito e Economia se influenciaram no processo de construção dessas novas normas e de definição de noções de terceirização lícitas. Esta dissertação mostra que a jurisprudência, ao mesmo tempo em que é influenciada por novas demandas vindas do mercado de trabalho, impõe limites ao mercado através de novas noções contratuais de trabalho.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1987.pdf: 5261399 bytes, checksum: 920886ee9cea1dbc89f0650419ab17e9 (MD5) Previous issue date: 2008-07-11 / Financiadora de Estudos e Projetos / Biotechnology has presented, in the last years, a rapidly growing development. New biotechnological industrial processes are constantly introduced using different microorganisms and/or enzymes. In this context, the application of process control and optimization techniques has become a need for biotechnological based industry. A technological approach was developed in this dissertation to bioreactor monitoring and control operating in fed-batch model to produce the penicillin enzyme G acilase (PGA) by means of wild cepa of the microorganism Bacillus megaterium. This enzyme is of great industrial importance, being used in the manufacture of semi-synthetic β-lactamic antibiotics. This case study presents the main difficulties faced in the control of biological processes in general: the variability of kinetic parameters and the limited availability of on-line information. In order overcome these difficulties, a unconventional architecture was proposed for a dynamic and adaptive controller using filters, some of them developed in this work, and applying Computational Intelligence (CI) methodologies both in direct and hybrid form. The inference for the microbial concentration (Cx) state variable, a very relevant objective for the logic of the controller, was performed by a softsensor that had as input the filtered values of the sensors signals of the molar fractions of CO2 (yco2) and O2 (yo2) in the effluent gases, of the air feeding flow and of agitation velocity. The respiratory quotient (RQ), calculated from these data, was also used by the algorithms of the software developed here. For the Cx inference, the softsensor employed a hybrid intelligent system (HIS) composed by a neural networks ensemble (RNE) and a fuzzy rule based system (FRBS). These techniques were structured to complement each other such that the RNE infers the microbial concentration (Cx) capturing real-time process data (empirical knowledge) and the FRBS corrects this inferred value using phenomenological based knowledge. The obtained results demonstrated a more robust inference by using this architecture, even supporting some degree of extrapolation. Another important operational parameter is the definition of the initial and final instants of feeding flow of supplemental. In order to meet this goal, a logic was employed that is able to accurately predict this moments, using the CO2 (yco2) molar fraction signal, filters and adaptive fuzzy sets. / A Biotecnologia tem apresentado nos últimos anos um grande e rápido desenvolvimento. Constantemente novos processos biotecnológicos industriais são introduzidos, utilizando diferentes microrganismos e/ou enzimas. Neste contexto, a aplicação de técnicas de otimização e controle de processos tornou-se uma necessidade para a indústria de base biotecnológica. Uma abordagem tecnológica foi desenvolvida nesta dissertação para monitoração e controle de um biorreator, operando em batelada alimentada ( fed-batch ), para produção da enzima penicilina G acilase (PGA) por cepa selvagem do microrganismo Bacillus megaterium Essa enzima é de grande importância industrial, sendo empregada na manufatura de antibióticos β-lactâmicos semi-sintéticos. Este estudo de caso apresenta as principais dificuldades encontradas no controle de processos biológicos em geral: variabilidade dos parâmetros cinéticos e limitada disponibilidade de informação on-line. Para superar estas dificuldades foi proposta uma arquitetura não convencional para um controlador dinâmico e adaptativo utilizando filtros, alguns desenvolvidos neste trabalho, e aplicando metodologias da Inteligência Computacional (IC), tanto de forma direta como híbrida. A inferência da variável de estado concentração microbiana (Cx), objetivo muito importante para a lógica do controlador, foi realizada por um softsensor que teve como entrada valores filtrados dos sinais dos sensores das frações molares de CO2 (yco2) e O2 (yo2) nos gases efluentes, da vazão de alimentação de ar e da velocidade de agitação. O quociente respiratório (RQ), calculado a partir desses dados, foi também utilizado pelos algoritmos do software aqui desenvolvido. Para a inferência de Cx, o softsensor empregou um sistema híbrido inteligente (SHI) composto por um comitê de redes neurais artificiais (CRNAs) e por um sistema fuzzy baseado em regras (SFBR). Essas técnicas foram estruturadas de modo a se complementarem, pois o CRNAs infere a concentração microbiana (Cx) capturando dados do processo em tempo real (conhecimento empírico), e o SFBR corrige esse valor inferido utilizando conhecimento com base fenomenológica. Os resultados obtidos mostraram uma inferência mais robusta ao se utilizar esta arquitetura, suportando inclusive algum grau de extrapolação. Outro parâmetro operacional importante é a definição dos momentos de início e fim da vazão de alimentação de meio suplementar. Para alcançar esse objetivo, foi empregada lógica que foi capaz de prever estes momentos com acuidade, utilizando o sinal de fração molar de CO2 (yco2), filtros e conjuntos fuzzy adaptativos.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2590.pdf: 1752867 bytes, checksum: 7dd2196f0a9d489b35a0759a6cc018c6 (MD5) Previous issue date: 2009-09-04 / Pipeline systems for genomic and transcriptomic analysis aim to create communication bridges among the existing analysis tools, therefore reducing researchers efforts. Most of the pipelines found in the literature lack important features which would be useful to the development of genome or transcriptome sequencing projects. Among them, the capacity of tracking the project results along its development, including the generation of partial reports; the presence of a collaborative environment where the involved laboratories can contribute with new data and chromatograms; the possibility to configure analysis parameters; multiple pipeline support and the possibility to include new tools and modules. In this work, a pipeline prototype was developed to overcome these shortcomings. Sequencing projects progresses are tracked along all over their developments. Chromatograms are progressively received along the development of the project and partial reports over newly received data are generated. The communication with the processing server is done via Web service, which offers a universal language interface, allowing client applications in heterogeneous platforms to submit data and execute operations and queries. Pipelines are configured in XML documents written in a predefined format, through which the researchers choose the tools and parameters to be used. The prototype offers support to multiple pipelines executed simultaneously in the same project. Pipelines are executed in parallel by the means of thread pools, what increases efficiency by distributing the workload in multiprocessed systems. Another feature of the prototype is the extensibility as each pipeline step is wrapped in a module. New modules can be easily inserted in the system through the implementation of a programming interface, therefore without the needing of recompilation. Module insertions are done in a declarative way through XML documents. A client application was also developed in the collaborative platform Sakai, allowing different research groups involved in a sequencing project to create pipelines, view results and exchange information on the project current status. To evaluate the efficiency of the prototype, a case study was carried out. Sequences generated from sequencing of Sphenophorus levis transcriptome were submitted and a pipeline was configured to analyze the data. The case study has pointed out that the prototype is efficient and produces good results. / Sistemas de pipeline para análise de genomas e transcriptomas têm o objetivo de criar pontes de comunicação entre as diferentes ferramentas no intuito de reduzir os esforços do pesquisador no processo de análise. A maioria dos pipelines descritos na literatura carece de funcionalidades importantes para o desenvolvimento de projetos de sequenciamento. Entre elas, a capacidade de acompanhar e gerar resultados parciais das análises ao longo do desenvolvimento do projeto; a presença de um ambiente colaborativo onde os diferentes laboratórios envolvidos possam contribuir com novos dados e cromatogramas; a possibilidade da configuração dos parâmetros da análise; o suporte a múltiplos pipelines com diferentes configurações; e o suporte à inclusão de novos programas e módulos. Neste trabalho, foi desenvolvido um protótipo que supre essas deficiências. O progresso dos projetos é acompanhado ao longo de todo o seu desenvolvimento. Para isso, recebe dados brutos de cromatogramas, realiza análises dos dados parciais e emite relatórios com os resultados. A comunicação com o servidor de processamento é realizada via Web service, oferecendo uma interface na linguagem universal XML que permite que aplicações cliente em plataformas heterogêneas submetam dados e realizem operações e consultas. Os pipelines são configurados através de arquivos XML em formato específico, no qual o pesquisador define os programas a parâmetros a utilizar. O protótipo dá suporte a múltiplos pipelines com execução simultânea em um mesmo projeto. A execução dos pipelines é realizada em paralelo por meio de um pool de threads, o que aumenta a eficiência dividindo a carga de processamento em servidores com mais de um núcleo. Uma aplicação cliente foi desenvolvida na plataforma colaborativa, permitindo que os diferentes grupos de pesquisa envolvidos no sequenciamento criem pipelines, visualizem resultados e troquem informações sobre o andamento do projeto. Outro diferencial do protótipo desenvolvido é a extensibilidade. Cada etapa do pipeline é encapsulada em um módulo. Novos módulos podem ser facilmente inseridos sem a necessidade de recompilação de todo o sistema, bastando para isso que o mesmo implemente uma interface específica. A inserção no sistema é realizada declarativamente em arquivos XML. Um estudo de caso foi realizado com a submissão de cromatogramas a partir do sequenciamento de ESTs (Expressed Sequence Tags) de Sphenophorus Levis. Um pipeline foi configurado para o estudo, e sua execução mostrou que o sistema é eficiente e apresenta bons resultados.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3653.pdf: 2793009 bytes, checksum: 247e499e66ebb17e3eb07a818050fc9a (MD5) Previous issue date: 2010-09-30 / The sugar cane is a semiperennial plant currently considered one of the most important crops in the world due to its ability to produce renewable energy (ethanol) and sugar. The soil quality, water availability and temperature are the main effects that made Brazil the largest producer. However some factors influence the sugarcane productivity, mainly diseases. Among them we can cite the ratoon stunting disease caused by the bacteria Leifsonia xyli subsp. xyli worldwide known to cause up-to-30% losses in the productivity. The spread of infected seedlings and the absence of external symptoms make it difficult to diagnose and require the use of laboratory techniques. Thermotherapy, cutting-material cleaning with detergent solutions and the use of resistant varieties are the key measures to contain the disease. Due to its easy spread and high rates of reduction in the productivity the objective of this study was to evaluate how the effect of four different concentrations of Lxx for four cuts, would affect the interaction varieties x cuts x bacterial concentration. Therefore it evaluates possible losses on the technological variants and the reliability of Dot blot test for the PCR from DNA extraction according to the protocol of CTAB. The analyzed data showed no significant reduction in varieties productivity in none of the four different bacterial concentrations including the control plants, as well as in technological variables on study. According to data the Dot blot technique was more sensitive than the PCR conditions utilized in this study. / A cana-de-açúcar é uma planta semi perene considerada atualmente uma das mais importantes culturas agrícolas no mundo devido a sua capacidade de produzir energia renovável (álcool) e açúcar. A qualidade do solo, a disponibilidade de água e principalmente a temperatura são os principais efeitos que tornaram o Brasil o maior produtor mundial. Entretanto alguns fatores interferem na produtividade dos canaviais principalmente as doenças. Dentre elas podemos citar o raquitismo-das-soqueiras causado pela bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli mundialmente conhecido por causar perdas que podem chegar a 30% na produtividade. A disseminação de mudas contaminadas e a ausência de sintomas externos tornam difícil sua diagnose sendo necessário o uso de técnicas laboratoriais. Termoterapia, limpeza de material de corte com soluções detergentes e uso de variedades resistentes são as principais medidas para conter a doença. Devido a sua fácil disseminação e as altas taxas de redução na produtividade o objetivo deste trabalho foi avaliar como o efeito de quatro diferentes concentrações de Lxx, durante quatro cortes, afetaria as interações variedades x cortes x concentração bacteriana. Além de avaliar possíveis perdas nas variáveis tecnológicas e a confiabilidade do teste de Dot blot em relação ao PCR a partir da extração de DNA de acordo com o protocolo de CTAB. Os dados analisados mostraram que não houve redução significativa na produtividade das variedades em nenhuma das quatro diferentes concentrações bacterianas inclusive nas plantas testemunhas, assim como nas variáveis tecnológicas em estudo. De acordo com os dados a técnica de Dot blot mostrou-se mais sensível que a do PCR nas condições empregadas neste trabalho.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3694.pdf: 1040825 bytes, checksum: 07255db3fd1638e75419879ee51ac8ab (MD5) Previous issue date: 2009-09-03 / Universidade Federal de Sao Carlos / Endophytic microorganisms lives in symbiotic association with plants and in one unique biological niche, and they are potential producers of natural bioactive substances with different chemical structure and biological activity. This study aimed to isolate and characterize endophytic microorganisms from Miconia albicans from Cerrado of São Carlos - SP. Samples were characterized phenotypically from typical features of colony morphology and macroscopic measurements, physiological, biochemical and morphodyeing and genotypically by 16S rRNA analysis. We evaluated the antagonistic potential of the isolates against Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Serratia marcensis IAL 1475, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Shigella sonnei ATCC 10231 and Candida albicans ATCC 10231. Two samples (1 and 3) showed bioactivity against E. faecalis, with inhibition halos of 1.30 and 1.90 cm in diameter, respectively. A single sample (2) showed activity against S. marcensis (3.60 cm) with no significant bioactivity against the other microorganisms tested. In one sample (4) showed activity against four of the six microorganisms tested: E. faecalis (3,15 cm) , S. aureus (3,50 cm), C. albicans (3,35 cm) e S. sonnei (3,20 cm). In another sample (6) was detected bioactivity against E. faecalis and S. aureus, with inhibition zones of 1.80 and 1.50 cm, respectively. One of the samples (8) showed bioactivity against the greatest number of indicator microorganisms with inhibitory halos of 2.60 cm against E. faecalis, 1.50 cm against S. aureus, 2.40 cm against C. albicans, 2.10 cm against E. coli and 2.50 cm against S. sonnei. In two samples (5 and 7) there was no evidence the bioactive ability against indicator microorganisms tested. Phenotypic analysis of 8 endophytic microorganisms isolated allowed us to classify 50% of these (samples 4, 6, 7 and 8) in the Actinomyces group and the others were classified in the genus Streptomyces (samples 1, 2, 3 and 5). In the genotypic analysis of two isolates with bioactivity were identified as Nocardiopsis Dassonville (sample 3) and Amycolatopsis orientalis (sample 8), reporting for the first time his association with endophytic aerial parts of Miconia albicans from Cerrado of São Carlos, SP. / Microrganismos endofíticos vivem em associação simbiótica com plantas e habitam nichos biológicos únicos, além de serem potenciais produtores de substâncias naturais bioativas com estrutura química e atividade biológica diversas. Este trabalho objetivou isolar e caracterizar microrganismos endofíticos a partir de Miconia albicans do Cerrado de São Carlos SP. Amostras foram caracterizadas fenotipicamente a partir de tipicidade de morfologia colonial e determinações macroscópicas, fisiológicas, bioquímicas e morfo-tintoriais e genotipicamente através de análises de RNAr 16S. Foi avaliado o potencial antagônico dos isolados contra Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Serratia marcensis IAL 1475, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Shigella sonnei ATCC 10231 e Candida albicans ATCC 10231. Duas amostras (1 e 3) apresentaram bioatividade contra E. faecalis, com halos de inibição de 1,30 e 1,90 cm de diâmetro, respectivamente. Uma única amostra (2) apresentou atividade contra S. marcensis (3,60 cm), não apresentando bioatividade contra os demais microrganismos testados. Em uma amostra (4) observou-se atividade contra quatro dos seis microrganismos testados: E. faecalis (3,15 cm) , S. aureus (3,50 cm), C. albicans (3,35 cm) e S. sonnei (3,20 cm). Em outra amostra (6) detectou-se bioatividade contra E. faecalis e S. aureus, com halos de inibição de 1,80 e 1,50 cm, respectivamente. Uma das amostras (8) apresentou bioatividade contra o maior número de microrganismos indicadores, com halos inibitórios de 2,60 cm contra E. faecalis, 1,50 cm contra S. aureus, 2,40 cm contra C. albicans, 2,10 cm contra E. coli e 2,50 cm contra S. sonnei. Em duas amostras (5 e 7) não foi evidenciada habilidade bioativa contra os microrganismos indicadores testados. Análises fenotípicas dos 8 microrganismos endofíticos isolados permitiram classificar 50% destes (amostras 4, 6, 7 e 8) no grupo Actinomyces e os outros foram classificados no gênero Streptomyces (amostras 1, 2, 3 e 5). Na análise genotípica dois dos isolados apresentando bioatividade foram caracterizados como Nocardiopsis dassonvillei (amostra 3) e Amycolatopsis orientalis (amostra 8), relatando pela primeira vez sua associação endofitica com partes aéreas de Miconia albicans do Cerrado de São Carlos, SP.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4791.pdf: 1129656 bytes, checksum: 3d25d8e4c71842592c3397b419db0ca8 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / The Syndrome of Visceral Larva Migrans (VLMS) is a parasitic disease caused by Toxocara canis, one of the most common helminthes in dogs. In the definitive hosts are present in different morphological forms, embryonated eggs, adult males and females. However, in unusual hosts (humans and rodents), present only in stage infective larvae (L3) and do not complete their life cycle. The infection in man occurs by ingestion of embryonated eggs which release in the small intestine infective larvae (L3), which cross the intestinal mucosa and the lymphatic vessels reach the circulation port reaching the lungs and liver. Larvae can still cross the gut wall actively start a process of erratic migration through different host tissues. The main characteristics of this disease in the chronic phase are eosinofilias blood and tissue and high levels of serum IgE. The immune response of host larvae occurs during tissue migration, where the larvae release antigenic products of excretion-secretion (TES) that protect against host reactions. The TES have a fraction of the allergen responsible for stimulating production and release of eosinophils. In this context, the search for new therapeutic tools that promote less damage to individuals affected by increased systemic eosinophil becomes important. In this study, we evaluated the modulatory activity and anti-inflammatory eosinophilia Harpagophytum procumbens against using the model of experimental infection with T. VLMS kennels. Our results showed that the extract of Harpagophytum procumbens has anti-inflammatory effects in reducing eosinophil infiltration in the blood and washed from the peritoneal and bronchoalveolar at different periods analyzed. The antiinflammatory may be due to the ability of the extract Harpagophytum procumbens decrease the production of factors that favor the proliferation and activation of eosinophils (IL-5, IL-4 and IL-13) during 18, established as the peak of eosinophilia. Furthermore, our treatment decreases the expression adhesion molecules, CD11b, CD11c peak of eosinophilia during infection by T. kennels. The CD40 molecule expression by eosinophils seems to favor the survival of leukocytes, however, would require further investigations that contributed to the understanding of the mechanisms by which the extract of H. procumbens can interfere with the migration of eosinophils into the inflammatory site in this model, since this event is characterized as being complex order. / A Síndrome da Larva Migrans Visceral (SLMV) é uma parasitose, causada pelo Toxocara canis, um dos helmintos mais freqüente em cães. Nos hospedeiros definitivos, se apresentam em diferentes formas morfológicas, ovos embrionados, adultos machos e fêmeas. Entretanto, nos hospedeiros não habituais (ex.: homem e roedores), apresentam-se apenas no estádio de larvas infectantes (L3) e não completam seu ciclo biológico. A infecção no homem ocorre pela ingestão acidental de ovos larvados, que no intestino delgado liberam as larvas infectantes (L3), as quais atravessam a mucosa intestinal e pela via linfática atingem a circulação porta e o fígado chegando aos pulmões. As larvas podem ainda atravessar ativamente a parede do intestino, iniciar um processo de migração errática através dos diferentes tecidos do hospedeiro. As principais características dessa doença na fase crônica são as eosinofilias sanguínea e tecidual e altos níveis de IgE sérica. A resposta imunológica do hospedeiro as larvas, ocorre durante a migração tecidual, onde as larvas liberam produtos antigênicos de secreção-excreção (TES) que as protegem contra a reação do hospedeiro. Os TES apresentam uma fração alergênica responsável pela estimulação da produção e liberação de eosinófilos. Neste contexto, a busca por novas ferramentas terapêuticas que promovam menos danos aos indivíduos acometidos pelo aumento sistêmico dos eosinófilos torna-se importante. Assim, neste estudo, avaliamos a atividade modulatória e anti-inflamatória da Harpagophytum procumbens contra eosinofilia utilizando o modelo de infecção experimental com T. canis SLMV. Nossos resultados demonstraram que o extrato da Harpagophytum procumbens possui efeitos anti-inflamatório diminuindo no infiltrado eosinofílico no sangue e lavados da peritoneal e broncoalveolar, nos diferentes períodos analisados. O efeito anti-inflamtório pode ser decorrente da capacidade do extrato de Harpagophytum procumbens diminuir a produção de fatores que favorecem a proliferação e ativação de eosinófilos (IL-5, IL-4 e IL-13) no período 18°, estabelecido como o pico da eosinofilia. Além disso, nosso tratamento diminui a expressão das moléculas de adesão CD11b, CD11c no pico da eosinofilia durante a infecção por T. canis. A expressão da molécula CD40 por eosinófilos parece favorecer a sobrevida deste leucócito, todavia, serão necessárias outras investigações que contribuíam para o entendimento dos mecanismos pelos quais o extrato de H. procumbens pode interferir na migração dos eosinófilos para o sitio inflamatório neste modelo, uma vez que este evento é caracterizado como sendo ordem complexa e multifatorial.