A imunodeficiência comum variável (ICV) é uma imunodeficiência predominantemente humoral, com prejuízo na produção de imunoglobulinas. A maioria dos pacientes apresenta infecções recorrentes. No entanto, os pacientes com ICV podem apresentar comorbidades não infecciosas, dentre elas, alterações oftalmológicas. Manifestações oftalmológicas são muito pouco conhecidas em pacientes com ICV, porém alguns relatos de casos já foram descritos na literatura. Este trabalho teve como objetivos realizar avaliação oftalmológica completa dos pacientes com ICV dos ambulatórios de Imunologia do Hospital das Clínicas, procurando correlacionar as manifestações oftalmológicas encontradas com processos infecciosos e inflamatórios. Foram avaliados 16 pacientes, com idades entre 10 e 50 anos, dos quais seis apresentaram alterações oftalmológicas (três pacientes com síndrome do olho seco, um paciente com estrabismo, um paciente com pterígio e um paciente com retinopatia hipertensiva e espessamento da parede arteriolar). Entretanto, pterígio e estrabismo foram considerados alterações casuais, não sendo associados à ICV. Dois pacientes com olho seco fizeram avaliação da lágrima, com a finalidade de diagnóstico precoce de possível síndrome de Sjögren, mas a avaliação foi normal. Desta forma, são necessários mais estudos e com maior número de pacientes com finalidade de estabelecer marcadores laboratoriais preditivos para lesões oftalmológicas / The common variable immunodeficiency (CVID) is a predominantly humoral immunodeficiency, with impairment in the production of immunoglobulins. Most patients have recurrent infections. However, patients with CVID may have noninfectious comorbidities, including ophthalmological changes. Ophthalmologic manifestations are very little known in patients with CVID, but some case reports have already been described in the literature. The aim of this study was to perform a complete ophthalmologic evaluation of patients with CVID who are seeing in the Immunology Ambulatory of the Hospital das Clínicas, seeking to correlate the ophthalmological manifestations found with infectious and inflammatory processes. Sixteen patients were evaluated, between the ages of 10 and 50 years, six of which presented alterations (three patients with dry eye syndrome, one patient with strabismus, one patient with pterygium and one patient with hypertensive retinopathy and arteriolar wall thickening). However, pterygium and strabismus were considered casual alterations and were not associated with CVID. Two patients with dry eye made a tear evaluation, in view of the early diagnosis of Sjögren\'s Syndrome, but it was normal. Thus, additional studies with a larger patient sample are necessary to establish predictive laboratory markers for ophthalmological injuries

Introdução: As queimaduras alcalinas da córnea fazem parte dos ferimentos mais devastadores para o olho. Objetivo: Os objetivos foram investigar o efeito aditivo do olho seco na atividade de proteases na superfície ocular e complicações corneanas apos lesão ocular alcalina e também investigar a eficácia da terapia anti-inflamatória controlar este processo. Métodos: Um modelo combinado (CM) de olho seco e queimadura alcalina unilateral foi usada. Resumidamente, camundongos C57BL /6 foram submetidos à queimadura alcalina unilateral (AB) com ou sem olho seco concomitante por 2 ou 5 dias. Um grupo separado de animais foram submetidos a ambos modelos (AB e olho seco) foram tratados topicamente com a Dexametasona, ou Doxiciclina ou colírio controle de solução salina balanceada (BSS). Os camundongos foram observados diariamente para verificar o aparecimento de perfuração da córnea. Córneas inteiras foram colhidas e homogeneizadas para extração de RNA. PCR quantitativo em tempo real foi realizada para medir a expressão de citocinas inflamatórias, metaloproteinases de matriz (MMP). Ativdade da MMP-9, atividade da gelatinase e da atividade da mieloperoxidase (MPO) foram avaliados em córneas homogeneizadas. A presença da infiltração de neutrófilos foi avaliada por imunohistoquímica e citometria de fluxo. Resultados: Os olhos submetidos ao modelo combinado de AB e olho seco (CM) tiveram 20% de taxa de perfuração estéril da córnea 1 dia após a lesão inicial; que aumentou para 35% em 5 dias. Houve um atraso no fechamento da ferida e aumento de opacidade residual da córnea. Aumento dos níveis de IL-1, IL-6, e as MMPs 1, -3, -8, -9, 13 e CXCL1, foram encontrados após 2 dias no CM comparando com córneas AB. Um aumento da imunorreatividade da MMP-1, -3, -9 e -13 e atividade gelatinolítica da MMP-9 foram observadas em comparação com córneas do grupo CM comparado com AB. O aumento da infiltração de neutrófilos e a atividade da mieloperoxidase foi observado no grupo CM comparando-se com córneas do grupo AB após dois dias da lesão inicial. Não foram observadas perfurações nas córneas tratadas com Dexametasona. Nos olhos tratados com Doxiciclina, 100% do fechamento da ferida pós-lesão no dia 2 e pontuação significantemente menor na escala de opacidade da córnea em relação ao BSS também foram observadas nos dias 4 e 5. Córneas tratadas com Dexametasona apresentaram a menor pontuação de opacidade da córnea. Tratamento com Dexametasona diminuiu significativamente os níveis de mRNA da IL-1, IL-6, e MMP-1, -9, -13, e o TIMP-1 depois de 2 dias, e aumentou os níveis de MMP-8, enquanto que o tratamento com Doxiciclina diminuiu significativamente IL-1, IL-6, MMP-8, -9 e, em comparação com córneas tratadas com BSS. A diminuição da imunorreatividade da MMP-1, -9 e -13 e atividade gelatinolítica foram vistos em córneas tratadas com Doxiciclina e Dexametasona em comparação com o veículo BSS. O aumento da infiltração de neutrófilos e a atividade da mieloperoxidase foi observado no grupo BSS comparação com o grupo Dexametasona 2 dias pós-lesão. Conclusões: O olho seco ambiental piora o resultado da queimadura ocular alcalina, criando uma tempestade de citocinas e proteases, aumentando o risco de perfuração corneana. Entretanto, o tratamento inicial com terapia anti-inflamatória é muito eficaz na preservação da transparência corneana e facilita a cicatrização de feridas, enquanto controla a produção de MMP e a migração de neutrófilos. / Introduction: Alkali burns to the cornea are among the most devastating injuries to the eye. Purpose: To evaluate the effects of dry eye on ocular surface protease activity and sight threatening corneal complications following ocular surface chemical injury and also to investigate the efficacy of anti-inflammatory therapy controlling this. Methods: A combined model (CM) of unilateral alkali burn and dry eye was used. Briefly, C57BL/6 mice were subjected to unilateral alkali burn (AB) with or without concomitant dry eye for 2 or 5 days. A separate group of mice subjected to both AB and dry eye were topically treated with Dexamethasone (Dex), Doxycycline (Doxy) or saline control (BSS). Mice were observed daily for appearance of corneal perforation. Whole corneas were harvested and lysed for RNA extraction. Quantitative real time PCR was performed to measure expression of inflammation cytokines, matrix metalloproteinases (MMP). MMP-9 activity, gelatinase activity and myeloperoxidase (MPO) activity were evaluated in corneal lysates. Presence of infiltrating neutrophils was evaluated by immunohistochemistry and flow cytometry. Results: Eyes subjected to the combined model of AB and dry eye (CM) had 20% sterile corneal perforation rate as soon as 1 day after the initial injury, which increased to 35% by 5 days, delayed wound closure and increased corneal opacity. Increased levels of IL- 1, IL-6, and MMPs 1,-3,-8,-9, 13, and CXCL1 transcripts were found after 2 days in CM compared to AB corneas. Increased MMP-1, -3,-9 and -13 immunoreactivity and gelatinolytic activity were seen in CM corneas compared to AB. Increased neutrophil infiltration and MPO activity was noted in the CM group compared to AB 2 days post injury. No perforations were observed in the Dex treated corneas. Doxy treated eyes had 100% of wound closure 2D post-injury, and significant lower corneal opacity scores at days 4 and 5 compared to BSS. Dex-treated corneas showed the lowest corneal opacity score. Dex treatment significantly decreased mRNA levels of IL-1, IL-6, and MMPs -1,-9, -13, and TIMP-1 after 2 days with increased levels of MMP-8, while Doxy treatment significantly decreased IL-1, IL-6, MMP-8, and -9, compared to BSS-treated corneas. Decreased MMPs -1,-9 and -13 immunoreactivity and gelatinolytic activity were seen in corneas treated with Doxy and Dex compared to BSS vehicle. Increased neutrophil infiltration and MPO activity was noted in the BSS group compared to Dex 2 D post-injury. Conclusions: Desiccating stress worsens outcome of ocular alkali burn, creating a cytokine and protease storm with greater neutrophil infiltration, increasing the risk of corneal perforation. However, early treatment with anti-inflammatory therapy is very efficacious in preserving corneal clarity and facilitating wound healing, while controlling MMP production and migration of neutrophils.

Introdução: As queimaduras alcalinas da córnea fazem parte dos ferimentos mais devastadores para o olho. Objetivo: Os objetivos foram investigar o efeito aditivo do olho seco na atividade de proteases na superfície ocular e complicações corneanas apos lesão ocular alcalina e também investigar a eficácia da terapia anti-inflamatória controlar este processo. Métodos: Um modelo combinado (CM) de olho seco e queimadura alcalina unilateral foi usada. Resumidamente, camundongos C57BL /6 foram submetidos à queimadura alcalina unilateral (AB) com ou sem olho seco concomitante por 2 ou 5 dias. Um grupo separado de animais foram submetidos a ambos modelos (AB e olho seco) foram tratados topicamente com a Dexametasona, ou Doxiciclina ou colírio controle de solução salina balanceada (BSS). Os camundongos foram observados diariamente para verificar o aparecimento de perfuração da córnea. Córneas inteiras foram colhidas e homogeneizadas para extração de RNA. PCR quantitativo em tempo real foi realizada para medir a expressão de citocinas inflamatórias, metaloproteinases de matriz (MMP). Ativdade da MMP-9, atividade da gelatinase e da atividade da mieloperoxidase (MPO) foram avaliados em córneas homogeneizadas. A presença da infiltração de neutrófilos foi avaliada por imunohistoquímica e citometria de fluxo. Resultados: Os olhos submetidos ao modelo combinado de AB e olho seco (CM) tiveram 20% de taxa de perfuração estéril da córnea 1 dia após a lesão inicial; que aumentou para 35% em 5 dias. Houve um atraso no fechamento da ferida e aumento de opacidade residual da córnea. Aumento dos níveis de IL-1, IL-6, e as MMPs 1, -3, -8, -9, 13 e CXCL1, foram encontrados após 2 dias no CM comparando com córneas AB. Um aumento da imunorreatividade da MMP-1, -3, -9 e -13 e atividade gelatinolítica da MMP-9 foram observadas em comparação com córneas do grupo CM comparado com AB. O aumento da infiltração de neutrófilos e a atividade da mieloperoxidase foi observado no grupo CM comparando-se com córneas do grupo AB após dois dias da lesão inicial. Não foram observadas perfurações nas córneas tratadas com Dexametasona. Nos olhos tratados com Doxiciclina, 100% do fechamento da ferida pós-lesão no dia 2 e pontuação significantemente menor na escala de opacidade da córnea em relação ao BSS também foram observadas nos dias 4 e 5. Córneas tratadas com Dexametasona apresentaram a menor pontuação de opacidade da córnea. Tratamento com Dexametasona diminuiu significativamente os níveis de mRNA da IL-1, IL-6, e MMP-1, -9, -13, e o TIMP-1 depois de 2 dias, e aumentou os níveis de MMP-8, enquanto que o tratamento com Doxiciclina diminuiu significativamente IL-1, IL-6, MMP-8, -9 e, em comparação com córneas tratadas com BSS. A diminuição da imunorreatividade da MMP-1, -9 e -13 e atividade gelatinolítica foram vistos em córneas tratadas com Doxiciclina e Dexametasona em comparação com o veículo BSS. O aumento da infiltração de neutrófilos e a atividade da mieloperoxidase foi observado no grupo BSS comparação com o grupo Dexametasona 2 dias pós-lesão. Conclusões: O olho seco ambiental piora o resultado da queimadura ocular alcalina, criando uma tempestade de citocinas e proteases, aumentando o risco de perfuração corneana. Entretanto, o tratamento inicial com terapia anti-inflamatória é muito eficaz na preservação da transparência corneana e facilita a cicatrização de feridas, enquanto controla a produção de MMP e a migração de neutrófilos. / Introduction: Alkali burns to the cornea are among the most devastating injuries to the eye. Purpose: To evaluate the effects of dry eye on ocular surface protease activity and sight threatening corneal complications following ocular surface chemical injury and also to investigate the efficacy of anti-inflammatory therapy controlling this. Methods: A combined model (CM) of unilateral alkali burn and dry eye was used. Briefly, C57BL/6 mice were subjected to unilateral alkali burn (AB) with or without concomitant dry eye for 2 or 5 days. A separate group of mice subjected to both AB and dry eye were topically treated with Dexamethasone (Dex), Doxycycline (Doxy) or saline control (BSS). Mice were observed daily for appearance of corneal perforation. Whole corneas were harvested and lysed for RNA extraction. Quantitative real time PCR was performed to measure expression of inflammation cytokines, matrix metalloproteinases (MMP). MMP-9 activity, gelatinase activity and myeloperoxidase (MPO) activity were evaluated in corneal lysates. Presence of infiltrating neutrophils was evaluated by immunohistochemistry and flow cytometry. Results: Eyes subjected to the combined model of AB and dry eye (CM) had 20% sterile corneal perforation rate as soon as 1 day after the initial injury, which increased to 35% by 5 days, delayed wound closure and increased corneal opacity. Increased levels of IL- 1, IL-6, and MMPs 1,-3,-8,-9, 13, and CXCL1 transcripts were found after 2 days in CM compared to AB corneas. Increased MMP-1, -3,-9 and -13 immunoreactivity and gelatinolytic activity were seen in CM corneas compared to AB. Increased neutrophil infiltration and MPO activity was noted in the CM group compared to AB 2 days post injury. No perforations were observed in the Dex treated corneas. Doxy treated eyes had 100% of wound closure 2D post-injury, and significant lower corneal opacity scores at days 4 and 5 compared to BSS. Dex-treated corneas showed the lowest corneal opacity score. Dex treatment significantly decreased mRNA levels of IL-1, IL-6, and MMPs -1,-9, -13, and TIMP-1 after 2 days with increased levels of MMP-8, while Doxy treatment significantly decreased IL-1, IL-6, MMP-8, and -9, compared to BSS-treated corneas. Decreased MMPs -1,-9 and -13 immunoreactivity and gelatinolytic activity were seen in corneas treated with Doxy and Dex compared to BSS vehicle. Increased neutrophil infiltration and MPO activity was noted in the BSS group compared to Dex 2 D post-injury. Conclusions: Desiccating stress worsens outcome of ocular alkali burn, creating a cytokine and protease storm with greater neutrophil infiltration, increasing the risk of corneal perforation. However, early treatment with anti-inflammatory therapy is very efficacious in preserving corneal clarity and facilitating wound healing, while controlling MMP production and migration of neutrophils.

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar e avaliar a aplicação de célula tronco mesenquimal de tecido adiposo (CTM-TA) e plasma rico em plaquetas aquecido alogênico (PRP-AA) perilacrimal em cães com ceratoconjuntivite seca (CCS), bem como, se há diferença na resposta segundo o grau de gravidade da afecção. Foram analisados 20 cães com produção lacrimal <15mm/min e distribuídos aleatoriamente em dois grupos (n=10). O grupo 1 tratado com CTM-TA (5x106 e 3x106 células) (GCTM-TA) e com grupo 2 PRP-AA (0,7mL e 0,3mL) (GPRP-AA), ambos injetados perilacrimal nas glândulas lacrimal principal e da terceira pálpebra, respectivamente. Todos os olhos foram avaliados em quatro momentos (M0 M15, M30, M60 dias). As variáveis avaliadas foram: osmolaridade da lágrima; teste lacrimal de Schirmer (TLS); sensibilidade corneal; tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL); pressão intraocular; espessura corneal; e biopsia da conjuntiva bulbar, além das variáveis clínico-oftalmológicas. Houve melhora nos dois grupos a partir de M15 (p<0,05) na qualidade do filme lacrimal, avaliada por meio da osmolaridade e TRFL, sem diferença entre os grupos. A produção de lágrima aumentou, entretanto notou-se diferença significativa nos animais com CCS discreta no GPRP-AA a partir do M30, e nos cães com CCS grave no GCTM-TA a partir do M30 e no GPRP-AA a partir do M60. Verificou-se melhora dos sinais clínicos da inflamação em ambos os grupos. Aplicação única perilacrimal de CTM-TA e PRP aquecido alogênicos normaliza a ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the study was to compare and evaluate the application of allogenic mesenchymal stem cell adipose tissue derived (MSCs-AD) and inativate platelet-rich plasma allogenic (PRP-IA), perilacrimal in dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS), and if there is difference in the response according to the degree of severity of the condition. Twenty dogs with lacrimal production <15mm/min randomly assigned to two groups were used. Group treated with MSCs-AD (5x106 and 3x106) (GMSCs-AD) and with PRP-IA (0.7ml and 0.3ml) (GPRP-IA), both intralacrimal in the main lacrimal glands and third eyelid, respectively. The eyes were evaluated in four moments after application (M0 M15, M30, M60). The variables evaluated were: tear osmolarity e; Schirmer's tear test (STT); sensitivity corneal; tear film break time (TBUT); intraocular pressure; corneal thickness; and biopsy of the bulbar conjunctiva, in addition to clinical-ophthalmologic variables. There was improvement in two groups at M15 (p <0.05) on tear film quality, assessed by osmolarity and TBUT, with there was no difference between groups. STT increased, however, statistical difference was only observed in animals with mild KCS in the GPRP-IA from the M30 and in the intense KCS at M30 in the G MSCs-AD and at M60 in the GPRP-IA. There was an improvement in the clinical signs of inflammation in both groups. The unique Intralacrimal application of MSCs-AD and PRP-IA normalizes tear film quality and improves clinical signs of inflamma... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2018-06-04T19:14:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2017-05-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: Descrever os caminhos percorridos pelo portador da Síndrome do Olho Seco em busca da atenção integral do cuidado na saúde pelo Sistema Único de Saúde. O objeto de estudo foi construído a partir da contextualização do agravo no cenário mundial, inclusive no Brasil, do entendimento da doença como problema de saúde pública, bem como sob o ponto de vista da integralidade sistêmica, passando pelas políticas públicas, e da atenção integral do cuidado individual na saúde, incluindo os aspectos psicossociais. Método: Trata-se de uma pesquisa com abordagem qualitativa e de caráter exploratório que envolveu duas etapas: a teórico-conceitual e a empírica. Na primeira, foram utilizados trabalhos que abordam a temática deste estudo, incluindo uma pesquisa bibliográfica correspondente ao período de 2011-2015. Na segunda etapa, as ferramentas utilizadas foram: a realização de grupos focais e entrevistas semiestruturadas, e como suporte, o diário de campo. Os grupos focais, com a participação de usuários do Ambulatório de Doenças Externas e Córnea, portadores da Síndrome do Olho Seco, no intuito de conhecer os caminhos percorridos na busca por um cuidado integral. A “amostra” final para a análise constituiu-se de 14 participantes. As entrevistas semiestruturadas com gestores do Departamento de Oftalmologia para conhecer a dinâmica de funcionamento dos serviços, incluindo a da assistência psicossocial, e o médico oftalmologista, no que tange a assistência ao portador da Síndrome do Olho Seco pelo serviço estudado. O diário de campo foi o instrumento utilizado para o registro sobre o reconhecimento do cenário da pesquisa, bem como outros acontecimentos no decorrer do estudo, inclusive durante os grupos focais e entrevistas semiestruturadas. Este estudo foi realizado num serviço universitário ligado ao Departamento de Oftalmologia de uma Escola Médica vinculada a uma Universidade Federal. Resultados: quanto à análise da empiria, pode-se afirmar que o cuidado em saúde ao portador da Síndrome do Olho Seco está aquém do princípio da integralidade. Tanto na gestão, quanto no cuidado, o Sistema Único de Saúde apresenta lacunas que incidem sobre a qualidade de vida do portador do agravo. Considerações: Por fim, este estudo propõe algumas ações que visam tornar o SUS mais acessível ao portador da Síndrome do Olho Seco, inclusive sugerindo a aproximação do Departamento de Oftalmologia com a rede básica, a integração entre os serviços de psicologia/psicoterapia, de assistência social e de oftalmologia clínico-cirúrgica, e, no serviço estudado, o incentivo para a formação de grupo de apoio com portadores do agravo em parceria com a Associação dos Portadores de Olho Seco, entidade tida como porta-voz dos portadores desse agravo para a população brasileira, por meio de ações que realiza. / Objective: Describing the paths covered by the Dry Eye Syndrome patient in search of the integral attention of health care by the Unified Health System (SUS). The object of study was constructed from the contextualization of the disease in the world scenario, including in Brazil, the understanding of the disease as a public health problem, as well as from the point of view of systemic integrality, through public policies, and the integral attention of individual health care, including psychosocial aspects. Method: This is a research with a qualitative and exploratory approach that involved two stages: the theoretical-conceptual and the empirical. In the first one, papers which approach the theme of this study were used, including a bibliographical research corresponding to the period of 2011-2015. In the second stage, the tools used were the observance of focal groups and semi-structured interviews, and as support, the field diary. The focal groups, with the participation of users of the Outpatient Clinic of External Diseases and Cornea, with Dry Eye Syndrome, in order to know the paths covered in the search for integral care. The final sample for the analysis consisted of 14 participants. The semi-structured interviews with managers of the Department of Ophthalmology to know the dynamics of the functioning of the services, including psychosocial assistance, and the ophthalmologist, regarding the assistance to the bearer of Dry Eye Syndrome by the service studied. The field diary was the instrument used to register the recognition of the research scenario, as well as other events during the study, including during focus groups and semi-structured interviews. This study was carried out in a university service linked to the Department of Ophthalmology of a Medical School linked to a Federal University. Results: Regarding the empirical analysis, it can be affirmed that health care for patients with Dry Eye Syndrome falls short of the principle of integrality. In both management and care, the Unified Health System has gaps that affect the quality of life of people suffering from the disease. Considerations: Finally, this study proposes some actions aiming at making the SUS more accessible to the bearer of Dry Eye Syndrome, including suggesting the approach of the Department of Ophthalmology with the basic network, the integration between psychology / psychotherapy services, social care and clinical-surgical ophthalmology, and, in the service studied, the stimulus for the formation of a support group with patients with the disease in partnership with the Association of Carriers of Dry Eye, an entity considered as the spokesperson for those who suffer from this disease to the Brazilian population, through its actions. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Distúrbios na superfície da córnea e nas glândulas lacrimais acometem com frequência os indivíduos com diabetes mellitus. Atualmente não existe tratamento seguro e eficaz para feridas na córnea e o tratamento da síndrome do olho seco (SOS) é predominantemente sintomático. A administração tópica da insulina (INS) é uma estratégia promissora para tratar esses distúrbios, devido à presença de seus receptores na superfície ocular e na glândula lacrimal, e aos seus efeitos metabólicos e mitogênicos. No entanto, os fármacos aplicados topicamente na forma de solução são rapidamente drenados do olho, resultando em uma baixa biodisponibilidade local. O objetivo deste trabalho foi desenvolver formulações contendo INS e avaliar a sua influência no distúrbio das glândulas lacrimais e na regeneração da córnea em ratos diabéticos. Foram desenvolvidas quatro formulações contendo 1 UI/mL de INS: dispersão contendo insulina (DISP INS), dispersão contendo micropartículas quitosana/INS (DISP MP INS), gel termorreversível in situ com INS (Gel INS) e Gel contendo as micropartículas quitosana/INS (Gel MP INS). Também foram produzidas formulações \"brancas\", sem a veiculação do fármaco: dispersão contendo micropartículas sem insulina (DISP MP s/INS); gel termorreversível in situ sem insulina (Gel s/INS). As MP incorporadas nas formulações foram preparadas por spray drying e apresentaram tamanho de 4,0±0,1 ?m, morfologia adequada e grande quantidade de INS (77±6%). Todas as formulações apresentaram pH e osmolalidade compatíveis com o uso ocular. Durante o estudo in vivo, foi realizado o tratamento diário (15 dias) dos animais diabéticos, com as formulações (50 ?L) em ambos os olhos, exceto nos controles positivo (sem diabetes) e controle negativo (diabético não tratado). Todos os animais tratados com INS aumentaram a produção de fluido lacrimal, sendo que, ao término do tratamento, não foi observada diferença estatística entre o controle positivo e aqueles tratados com DISP INS e com Gel MP INS. A INS foi detectada na glândula lacrimal e no globo ocular dos animais tratados com DISP MP INS, Gel INS e Gel MP INS, sendo que a maior concentração de INS foi encontrada nos ratos tratados com Gel MP INS. Ao término do tratamento houve redução da glicemia dos animais tratados com a INS, o que pode sugerir um tratamento coadjuvante em pacientes diabéticos. Estudos de citologia de impressão mostraram que o Gel INS e Gel MP INS foram capazes de aumentar o número de células do epitélio da córnea e melhorar a relação núcleo/citoplasma em relação ao controle negativo. A histologia do globo ocular mostrou que essas duas formulações também melhoraram a espessura do epitélio da córnea, que foi semelhante a dos controles positivos. Conclui-se que a incorporação da INS nos géis e nas micropartículas desenvolvidas desempenhou um efeito positivo no tratamento da síndrome do olho seco e de lesões na córnea. / Disorders in the corneal surface and the lachrymal glands often affect individuals with diabetes mellitus. Nowadays there is no safe and effective treatment for wounds in the cornea and the treatment of dry eye syndrome (DES) is primarily symptomatic. Topical administration of insulin (INS) is a promising strategy for treating these disorders due to the presence of receptors on the ocular surface and lacrimal gland, besides its metabolic and mitogenic effects. However, the drugs applied topically in the form of a solution are quickly drained from the eye, resulting in a low local bioavailability. The aim of this study was to develop formulations containing INS and evaluate their influence on disorders of lacrimal glands and cornea healing in diabetic rats. Four formulations containing 1 IU/mL of INS were developed: dispersion containing insulin (DISP INS), dispersion containing chitosan microparticles/INS (DISP MP INS), in situ forming gel containing INS (Gel INS) and in situ forming gel containing microparticles chitosan/INS (Gel MP INS). \"White\" formulations were also produced without the drug: dispersion containing microparticles without insulin and in situ forming gel without insulin. MP incorporated in the formulations were prepared by spray drying and showed size of 4.0±0.1 ?m, proper morphology and high INS load (77±6%). All formulations exhibited pH and osmolarity compatible with the ocular use. In vivo studies were performed using diabetic rats that were treated daily (15 days) with instillation of the formulations (50 ?L) in both eyes, except in the positive controls (health rats) and negative control (untreated diabetic rats). All animals treated with INS showed an increase in the production of tear fluid. After treatment, no statistical difference was observed between the positive control and those treated with DISP INS and Gel MP INS. The INS was detected in the lacrimal gland of the animals treated with DISP MP INS, Gel INS and Gel MP INS, with the highest concentration of INS found in mice treated with Gel MP INS. After treatment there was a reduction in blood glucose of the animals treated with formulations containing INS, which suggests that developed formulations may be used as an adjuvant treatment in diabetic patients. Impression cytology studies showed that the Gel INS and Gel MP INS were able to increase the number of the corneal epithelium cells and improve nucleus/cytoplasm ratio compared to the negative control. The histology of the eyeball showed that these two formulations have improved the thickness of the corneal epithelium, which was similar to the positive controls. In conclusion, incorporation of INS in the gels and MP developed induced a positive effect in the treatment of dry eye syndrome and corneal wound.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 luis felipe zulim.pdf: 1410755 bytes, checksum: 10cd9caab094cc2991e4233b68367a1f (MD5) Previous issue date: 2016-05-05 / This study aimed to compare the efficacy of tacrolimus 0.03% eye drops diluted in two types of vehicle, flaxseed oil and olive oil in the treatment of keratoconjunctivitis sicca (CCS) in dogs. 60 dogs were used, twenty healthy dogs as a negative control group and 40 dogs diagnosed with bilateral CCS that were randomly divided into two groups, tacrolimus in olive oil (TO) and tacrolimus in flaxseed oil (TL). The dogs were evaluated monthly with ophthalmologic exams, Tear Test Schirmer (TLS), Break Test Tear Film (TRFL), Fluorescein test (TF), Test of Rose Bengal (TRB) and conjunctival cytology and at the beginning and end of the study with histopathological examination of the conjunctiva .In both groups, clinical signs, TLS, TRFL, TF and TRB showed significant improvement with one month of treatment. At study end in cytological and histopathologic evaluation, both groups showed a decrease of neutrophils, it is more significant in the TL group, and both groups showed an increase of goblet cells. Thus we can conclude that the drops of tacrolimus 0.03% diluted in olive oil and flaxseed oil was effective in the treatment of CCS and the TL group performed better as the decrease in neutrophils. Thus, the linseed oil may be a new alternative as the tacrolimus diluent. / O presente estudo teve como objetivo comparar a eficácia do colírio de tacrolimus 0,03% diluído em dois tipos de veículo, óleo de semente de linhaça e óleo de oliva, no tratamento de ceratoconjuntivite seca (CCS) em cães. Foram utilizados 60 cães, sendo vinte cães saudáveis como grupo controle negativo e 40 cães diagnosticados com CCS bilateral que foram alocados aleatoriamente em dois grupos, tacrolimus em óleo de oliva (TO) e tacrolimus em óleo de semente de linhaça (TL). Os cães foram avaliados mensalmente com exames oftálmicos, Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), Teste de Ruptura do Filme Lacrimal (TRFL), Teste de Fluoresceína (TF), Teste de Rosa Bengala (TRB) e citologia conjuntival e no início e final do estudo com exame histopatológico de conjuntiva .Em ambos os grupos, os sinais clínicos, o TLS, TRFL, TF e TRB apresentaram melhora significativa com um mês de tratamento. Ao término do estudo na avaliação citológica e histopatológica, ambos os grupos apresentaram diminuição de neutrófilos, sendo ela mais significativa no grupo TL, e ambos grupos apresentaram aumento de células caliciformes. Desta forma podemos concluir que o colírio de tacrolimus 0,03% diluído em óleo de oliva e em óleo de semente de linhaça foi eficiente no tratamento de CCS e o grupo TL apresentou melhor desempenho quanto a diminuição de neutrófilos. Assim, o óleo de semente de linhaça pode ser uma nova alternativa como diluente do tacrolimus.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carolina Silva Guimaraes Pereira.pdf: 713350 bytes, checksum: d2adc7dea782d58a041a7b1b5991ba9c (MD5) Previous issue date: 2016-05-06 / This study aims to evaluate the microbial sensitivity profile of bacteria isolated from the eyes of dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS). We evaluated 65 dogs (n=65) diagnosed with KCS and 30 healthy dogs (c=30) (control group). After diagnosis of KCS, conjunctival swabs were collected and the microbiological examinations performed under aerobic culture, antibiogram and minimum inhibitory concentration (MIC) for the antibiotics chloramphenicol, tobramycin, ofloxacin and moxifloxacin. With respect to the sensitivity to the tested antibiotics, polymyxin B, tobramycin and chloramphenicol obtained that highest percentages and tetracycline the lowest percentage. Regarding the results of the MIC, the fifteen most resistant strains of Staphylococcus pseudintermedius and the fifteen most resistant strains of Gram-negative were selected. For S. pseudintermedius, tobramycin demonstrated the highest percentage of sensitivity and ofloxacin and moxifloxacin the lowest. For Gram-negative, ofloxacina and moxifloxacina demonstrated (100%) of sensitivity, tobramycin (93,3%) and chloramphenicol (80%). Three multi-resistant strains of S. pseudintermedius were detected, one with isolated sensitivity to cefazolin, another to vancomycin and another to polymyxin B and amikacin. Remission from bacterial infection was achieved after 15 days in 100% of the animals topically treated with antibiotics selected according to the sensitivity. The bacteria isolated from the eyes of dogs with KCS presented variable sensitivity to the tested antibiotics, according to the species considered. The emergence of quinolone-resistant strains of S. pseudintermedius, with higher prevalence detected in the eyes, reinforces the need to identify the bacteria involved and antimicrobial susceptibility profile, as secondary infections, can be an aggravating and perpetuating factor of KCS. / Objetivou-se avaliar o perfil de sensibilidade microbiana de bactérias isoladas dos olhos de cães com ceratoconjuntivite seca (CCS). Foram avaliados 65 cães (n=65) diagnosticados com CCS e 30 cães (c=30) hígidos para o grupo controle. Foram coletados swabs conjuntivais e realizados os exames microbiológicos cultura em aerobiose, antibiograma e concentração inibitória mínima (CIM) para os antibióticos cloranfenicol, tobramicina, ofloxacina e moxifloxacina. Com relação à sensibilidade dos antibióticos testados, a polimixina B, a tobramicina e o cloranfenicol obtiveram maior percentual, enquanto que a tetraciclina o menor percentual. Com relação aos resultados da CIM, foram selecionadas as quinze cepas mais resistentes dos Staphylococcus pseudintermedius e as quinze cepas mais resistentes dos Gram-negativos. Para S. pseudintermedius a tobramicina expressou maior percentual de sensibilidade e a ofloxacina e moxifloxacina menor. Para Gram-negativos, ofloxacina e moxifloxacina apresentaram (100%) de sensibilidade, tobramicina (93,3%) e cloranfenicol (80%). Foram detectadas 3 linhagens de S. pseudintermedius multirresistentes, sendo um isolado sensível à cefazolina, outro a vancomicina e outro a polimixina B e amicacina. Em 100% dos animais tratados topicamente com os antibióticos selecionados pela sensibilidade, obteve-se a remissão da infecção bacteriana após 15 dias. As bactérias isoladas de olhos de cães com CCS possuem sensibilidade variável frente aos antibióticos testados, de acordo com a espécie considerada. A emergência de linhagens quinolona-resistentes de S. pseudintermedius, agente de prevalência mais alta detectada nesses olhos, reforça a necessidade de identificação da bactéria envolvida e perfil de sensibilidade microbiana, visto que a infecção secundária, pode ser um fator agravante e perpetuante da CCS.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-02-03T20:17:16Z No. of bitstreams: 1 JoseEdvanDeSouzaJunior_TESE.pdf: 4464573 bytes, checksum: 5324301dc91ae3b1ebc14996e9c4b9df (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-02-03T23:28:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JoseEdvanDeSouzaJunior_TESE.pdf: 4464573 bytes, checksum: 5324301dc91ae3b1ebc14996e9c4b9df (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-03T23:28:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoseEdvanDeSouzaJunior_TESE.pdf: 4464573 bytes, checksum: 5324301dc91ae3b1ebc14996e9c4b9df (MD5) Previous issue date: 2014-12-12 / Objetivos: Estimar a preval?ncia de altera??es do filme lacrimal e da doen?a do olho seco (DOS), comparar as mudan?as na press?o intraocular (PIO) e comparar as espessuras macular e da camada de fibras nervosas da retina (CFNR), entre mulheres com s?ndrome dos ov?rios polic?sticos (SOP) e mulheres saud?veis, estratificando-as em condi??es cl?nicas, metab?licas e inflamat?rias. Metodologia: O estudo incluiu 45 mulheres com SOP e 47 mulheres saud?veis ovulat?rias submetidas a avalia??es cl?nico-ginecol?gicas e oftalmol?gicas, incluindo proped?uticas para a avalia??o do filme lacrimal e medida da PIO, e medi??o da espessura macular, da CFNR e par?metros do disco ?ptico usando tomografia de coer?ncia ?ptica. Resultados: Tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL; p=0.001) e impregna??o por fluoresce?na (p=0.006) apresentaram diferen?as estatisticamente significantes entre os grupos estudados. A preval?ncia de DOS foi de 44,4% nas portadoras de SOP. Houve redu??o estatisticamente significativa do TRFL na presen?a de SOP (p=0.001). Al?m disso, houve efeito estatisticamente significativo de intoler?ncia ? glicose e s?ndrome metab?lica/inflama??o na impregna??o por fluoresceina (p=0.004; p=0.015, respectivamente). A PIO encontrou-se estatisticamente mais elevada no grupo SOP que no grupo controle (p=0.011). Houve um aumento na m?dia do IPC (?ndice press?o-c?rnea) com a associa??o entre SOP e da s?ndrome metab?lica (p = 0.005); A m?dia da espessura da CNFR superior ao redor do nervo ?ptico foi estatisticamente mais espessa nas volunt?rias com SOP que nas volunt?rias saud?veis (p=0.036); Ap?s estratifica??o pela presen?a de resist?ncia insul?nica, as m?dias dos subcampos das espessuras maculares ?macular interno temporal, macular interno inferior, macular interno nasal e macular externo nasal, foram mais espessas no grupo SOP que no grupo controle (p<0.05); Houve associa??o significativa entre obesidade e resist?ncia insul?nica (p=0.037), e intoler?ncia ? glicose (p=0.001), com aumento m?dio do componente principal 1 (CP1), e, na presen?a de s?ndrome metab?lica (p<0.0001), com aumento m?dio do componente principal 2 (CP2), respectivamente, em rela??o ? espessura macular total. Na presen?a de obesidade e inflama??o, houve redu??o no escore m?dio da CP2 (p=0.034), em rela??o ? espessura da CFNR na m?cula. xviii Conclus?es: H? uma associa??o da SOP, suas altera??es metab?licas e inflamat?rias com altera??es do filme lacrimal e com mudan?as na PIO. A diminui??o na espessura da CFNR macular e aumento da espessura total macular est?o possivelmente associadas ?s altera??es metab?licas, e, o aumento na espessura da CFNR ao redor do nervo ?ptico est?o provavelmente associadas ?s altera??es hormonais, inerentes ? SOP.

Orientador: Eduardo Melani Rocha / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T17:43:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_MonicadeCassia_D.pdf: 5666644 bytes, checksum: 2d8f41985c6b80374f8fd6d042fc9ff0 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Este estudo avaliou as possíveis vias comuns na fisiopatogênese da síndrome do olho seco no Diabetes Mellitus (DM) e no envelhecimento, envolvendo o acúmulo dos produtos de glicosilação ("Advanced Glycation End-products" - AGEs), seu receptor RAGE e a ativação do Fator Nuclear-?B (NF-?B) na glândula lacrimal (GL) e alterações do filme lacrimal nessas condições. Modelos animais de DM induzido com estreptozotocina e animais senis (24 meses de vida) foram comparados a animais controle tratados com tampão citrato e adultos jovens (2 meses de vida). Foram avaliadas vias de sinalização, envolvendo AGEs, RAGE e a ativação do NF-?B na GL e alterações no filme lacrimal em ratos Wistar de todos os grupos. A análise do filme lacrimal foi realizada através de medidas de volume de secreção basal e dosagem de citocinas como a Interleucina-1 ß (IL-1 ß) e Fator de Necrose Tumoral - a (TNF- a). A capacidade secretória da GL foi avaliada através de medidas da atividade de peroxidase. Técnicas de "western blot" foram utilizadas para avaliar a expressão e ativação do NF-?B na GL. A expressão de AGE, RAGE e NF-?B na GL e córnea nos grupos estudados, foi avaliada através de microscopia confocal com imunofluorescência. O volume lacrimal foi significativamente menor nos animais diabéticos e senis (P=0,02 e 0,016, respectivamente). Concentrações de IL-1ß e TNF-a na lágrima foram mais altas nos ratos diabéticos e senis do que nos controles e adultos jovens (P=0,007 e 0,02 nos diabéticos e P= 0,007 e P= 0,05 nos senis). A atividade de peroxidase foi significativamente mais baixa no grupo senil (P=0,016), mas não nos experimentos, comparando animais diabéticos e controles (P=0,34). A expressão de AGE, RAGE e NF-?B na GL foi aumentada nos animais diabéticos e senis. O DM e a senilidade induzem alterações estruturais e secretórias significativas na GL e nos tecidos da superfície ocular e associa-se a maior incidência de olho seco. A expressão aumentada de AGE, RAGE e NF-?B na GL sugere a participação desses fatores nas vias de sinalização e subseqüentes alterações inflamatórias relacionadas ao olho seco nessas condições. / Abstract: The present study evaluates the dry eye syndrome related to diabetes and aging through the involvement of the Advanced Glycation End-product (AGEs), the Advanced Glycation End-product Receptor (RAGE) axis and Nuclear Factor-?B (NF-?B) activation in lacrimal gland (LG) and tear film dysfunction in these conditions. To evaluate whether AGE, RAGE and NF-?B signaling in LG are altered in diabetes and aging, streptozotocin-induced diabetic, normoglicaemic, aging (24 month-old) and young adults (2 month-old) male Wistar rats were compared. Tear film alterations and the expression of AGE, RAGE and NF-?B in ocular tissues were evaluated in all considered groups. Tear secretion parameters as basal tear secretion volume, Interleukin-1 ß (IL-1 ß) and Tumor Necrosis Factor- a (TNF- a) levels and LG and peroxidase activity in LG tissue were measured. NF-?B expression and activation was evaluated in LG by western blot. Immunohistochemistry with confocal microscopy was used to assess AGE, RAGE and NF-?B expression in LG of all groups. Tear volume was significantly lower in diabetic and aging rats (P=0.02 and 0.016, respectively). IL-1ß and TNF-a concentrations in tears were higher in diabetic and aging than in control and young rats (P=0.007 and 0.02 in diabetic and P= 0.007 and P= 0.05 in aging). Peroxidase activity was significantly lower in the aging group (P=0.016) but not the assays with diabetic rats (P=0.34). AGE, RAGE and NF-?B expressions were increased in LG of diabetic and aging rats. Diabetes and aging induce significant alterations in rat LG structure and secretion. The higher expression of AGE, RAGE and NF-?B in LG may suggest that these factors are involved in signalling and in subsequent inflammatory alterations related to dry eye related to these conditions. / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica