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Análises de amido, proteína, poliaminas e metilação em estruturas semelhantes à protocormos em Cattleya tigrina A. Richard (Orchidaceae)

Almeida, Vivian January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:42:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327700.pdf: 1161279 bytes, checksum: e3b2e3dafb61587c4b99e3990068f93a (MD5) Previous issue date: 2014 / O Bioma Mata Atlântica é considerado um hotspot de biodiversidade, assim sujeito a medidas para a sua conservação. As constantes agressões e ameaças de destruição deste bioma têm afetado principalmente espécies epífitas como é o caso da família Orchidaceae. A beleza das flores e o alto valor ornamental e comercial agravam ainda mais a exploração destas plantas, sendo necessário realizar estudos de propagação destas espécies. As dificuldades no processo de propagação vegetativa convencional e baixo índice de germinação das sementes na natureza direcionam os estudos para a compreensão do desenvolvimento e de propagação destas espécies in vitro. Em vista disso, este trabalho objetivou avaliar aspectos bioquímicos da morfogênese de estruturas semelhantes à protocormos (ESPs) a partir de explantes foliares de C. tigrina. Realizou-se quantificações de proteínas totais e amido, poliaminas totais livres e análise de metilação do DNA global em amostras coletadas a partir do 7º dia da inoculação e com intervalo de sete dias, durante 35 dias de cultivo. O maior teor de proteínas foi observado aos 21 dias de cultivo (106, 2 µg.g-1MF), coincidindo como período de maior taxa de formação de ESP. O decréscimo no conteúdo de proteínas ocorreu concomitantemente com a redução da divisão celular e aumento do volume das células, período que antecede a indução das ESPs. O maior teor de amido foi registrado aos 14 dias de cultivo (3901,5 µg.g-1MF), com posterior decréscimo. O teor de poliminas (PA) livres aumentou de acordo com a progressão dos estádios de desenvolvimento das ESP. Os teores de Putrescina foram os mais elevados durante o período de cultivo. Esta PA parece exercer um papel principal na morfogênese de ESP em C. tigrina. Enquanto que, a espermina e a espermidina podem ter um papel secundário ou implicariam em processos posteriores de diferenciação, que não foram identificados neste trabalho. Os resultados obtidos na análise de metilação do DNA global mostram que a hipometilação coincide com inicio da diferenciação e aumento no número e volume celular, e se mantém durante os estágios iniciais de desenvolvimento das ESP. O reestabelecimento da porcentagem de metilação aos 35 dias de cultivo coincide com uma mudança no padrão morfogenético das estruturas, que neste período de cultivo apresentam um alongamento diferenciado. O11padrão de metilação do DNA (metilação/demetilação) parece controlar a expressão gênica durante a formação de ESPs, e a presença de TDZ no meio de cultura pode estar associada aos fatores que desencadearam a divisão e diferenciação celular.<br> / Abstract : The Atlantic Forest Biome is considered a biodiversity hotspot, thus subject to measures for its conservation. The constant attacks and destruction threats on this biome has affected mainly epiphytic species such as the orchid family. The beauty of this flowers and the ornamental and high commercial value of them exacerbate even more the exploration of these plants, becoming necessary to perform studies on the propagation of these species. The slow vegetative propagation, and the difficulty of the seeds to germinate in nature, directs efforts towards the understanding of the development of these species in vitro. Therefore, the objective of this study is to analyse aspects of the biochemical morphogenesis of the protocorm like-bodies (PLBs) from C. tigrina leaf explants. Quantification of total protein and starch analysis of total polyamines and global DNA methylation in samples collected every seven days, during a 35 days cultivation were performed. It was possible to see the formation of PLB starting at the 7th day of cultivation. Also, the protein highest level was observed after 21 days of cultivation (106,2 µg.g-1MF), coinciding with the peak PLB formation. The decreasing in protein content occurred concomitantly with reduction in cell division and the increasing in cell volume. The highest starch content was seen after 14 days of cultivation (3901,5 µg.g-1MF), with subsequent decreasing . The content of polyamines (PA) increased with PLB development stages progression, then remaining constant. The Putrescine was the PA with higher levels and appears to play a major role in C. trigrina PLB morphogenesis, while spermine and spermidine have a secondary role, or would result in subsequent differentiation processes, which have not been identified in this work. The results of the methylation analysis shows that the global DNA hypomethylation coincides with the beggining of cell differentiation, remaining contants during the stages where there is na increaning in number and volume of the same PLB. The methylation percentage recovery at 35 days of cultivation coincides with a morphogenetic change in the structure pattern, which in this period of cultivation has a marked elongation. The DNA methylation pattern (methylation/demethylation) appears to control gene expression during13the PLB formation, and the TDZ presence in the culture medium may be associated with factors such that initiate this variations.
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Anathallis Barb.Rodr. s.l. (orchidaceae: pleurothallidinae) para o Estado do Paraná e estudos florais no gênero

Santos, Milena do Carmo January 2017 (has links)
Orientador : Prof. Dr. Eric de Camargo Smidt / Coorientador : Prof. Dr. Antonio Luiz Vieira Toscano de Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Botânica. Defesa: Curitiba, 19/05/2017 / Inclui referências : f. 124-125 / Resumo: O gênero Anathallis s.l. pertence à subtribo Pleurothallidinae, compreende ca. 165 espécies, distribuídas no Neotrópico. O presente trabalho é composto por quatro capítulos. O primeiro tratou do gênero para a Flora do Paraná no qual foram identificadas 17 espécies para o estado em quatro grupos: Acuminatae, Alatae, Margaritifera e Panmorphia e incluídas descrições, ilustrações, mapas e chaves de identificação para as espécies. O segundo capítulo é um trabalho taxonômico, nomenclatural e micromorfológico detalhado da espécie Anathallis microphyta, no qual as espécies A. paranaensis, A. longiglossa e A. microgemma foram sinonimizadas a ela e as variações morfológicas da espécie foram elucidadas. No terceiro capítulo foram realizados estudos sobre a micromorfologia floral de Anathallis e de gêneros próximos, que demonstrou uma homogeneidade nas características compartilhadas dentro dos grupos diferenciando-os das espécies pertencentes a Stelis e Lankesteriana. Adicionalmente, foi realizada a análise de máxima parcimônia, no qual, os grupos tiveram suporte moderado a alto com exceção de Panmorphia. Na análise de reconstrução de caracteres foram observadas diversas sinapomorfias e autapomorfias dos táxons infragenéricos. Com isso, foi observado que a micromorfologia floral é útil para a caracterização dos grupos de Anathallis e na distinção de espécies próximas. No quarto capítulo é apresentado o guia de campo com as espécies do gênero no estado do Paraná. Palavras-chave: Flora, monocotiledôneas, micromorfologia, Neotrópico / Abstract: Anathallis Barb.Rodr. belongs to Pleurothallidinae and comprises 165 species, distributed in the Neotropics. This work comprises four chapters. The first one is the inventory of Anathallis for the Flora of Paraná, in that were identified 17 species in four groups: Acuminatae, Alatae, Margaritifera and Panmorphia. Descriptions, illustrations, maps and identification keys for the species were provided. The second chapter is a taxonomic, nomenclatural and detailed floral micromorphological work in Anathallis microphyta. A. paranaensis, A. longiglossa and A. microgemma were synonimized to A. microphyta and its morphological variation were elucidated. In the third chapter, floral micromorphology of Anathallis and nearly genus were studied, showing the homogeneity in the characteristics among the groups, differentiating them from the species belonging to Stelis and Lankesteriana. In addition, an analysis of maximum parsimony was performed, all the groups had moderate to high support except Panmorphia. In the reconstruction character analysis, several synapomorphies and atopathomorphs in infrageneric taxa were observed. In this way, the floral micromorphology is useful for Anathallis groups characterization and the distinction of related species. In the fourth chapter a field guide with the species of the genus in the state of Paraná is presented. Keys words: Flora, monocots, micromorphology, Neotropic
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Estudo biotecnológico, citogenético e molecular em espécies de orquídeas endêmicas da flora brasileira

Moraes, Milena Cristina [UNESP] 25 July 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-25Bitstream added on 2015-03-03T12:06:09Z : No. of bitstreams: 1 000810969_20160701.pdf: 125803 bytes, checksum: 29118ae06f1584c1db70a518b5884ddf (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-01T13:02:21Z: 000810969_20160701.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:03:17Z : No. of bitstreams: 1 000810969.pdf: 637992 bytes, checksum: bb27badfbcf2ef58be3e078dd629aaa0 (MD5) / O cultivo comercial de orquídeas é significativo no mundo. Alguns gêneros e espécies nativas do Brasil, como Cattleya, são apreciados e têm elevado valor econômico devido à capacidade de recombinação genética, beleza, forma, tamanho e durabilidade de suas flores. Contudo, muitas dessas espécies e gêneros encontram-se em risco de extinção, o que as torna objeto para diversos estudos. Técnicas biotecnológicas de cultivo in vitro (germinação assimbiótica de sementes e micropropagação) são valiosos instrumentos na obtenção de mudas. Devido à polinização na natureza ser limitada e com baixa probabilidade de germinação, o cultivo in vitro utiliza formulações de meios de cultivo adequados à germinação de sementes e ao crescimento de diferentes espécies, resultando em maiores percentuais de germinação, em comparação com condições naturais. Neste trabalho foi comparada a atuação de diferentes meios de cultivo na germinação e desenvolvimento de Cattleya guttata, C. leopoldii e C. tigrina. Contudo, os resultados obtidos são preliminares e a procura por um meio de cultivo específico para cada espécie, visando crescimento rápido e em quantidade, necessita de continuidade para somente então afirmar com propriedade qual dos protocolos ensaiados é mais adequado a cada espécie. Existem conflitos taxonômicos envolvendo C. guttata, C. tigrina e C. leopoldii. Muitos taxonomistas consideram C. tigrina e também C. 7 leopoldii como sinônimos de C. guttata. O conhecimento relativo à citogenética da família Orchidaceae tem contribuído expressivamente para o entendimento das relações filogenéticas em todos os níveis taxonômicos em diferentes gêneros. Entre as Catleias, estudos cariológicos identificaram indivíduos com 40 até 100 cromossomos, sendo que n = 20 é o número básico mais frequente. Para diagnosticar o número cromossômico das espécies... / The commercial orchids cultive is significant in the world. Some genera and species native to Brazil, as the Cattleya, are appreciated and have high economic value because of the genetic recombination ability, beauty, shape, size and durability of its flowers. However, many of these species and genera are at risk of extinction, making them subject to several studies. Biotechnological techniques of in vitro (asymbiotic seed germination and micropropagation) are valuable tools for seedlings obtainment. Due to pollination in nature be limited and with low germination probability, in vitro cultivation uses suitable formulations of media culture for germination and growth of different species, resulting in higher germination rates compared to natural conditions. In this work we compared the performance of different culture media on germination and development of Cattleya guttata, C. leopoldii and C. tigrina. However the results are preliminary and the search for a specific medium culture for each species, aiming rapid growth in quantity, need continuity to say properly which of the tested protocols is the most suitable to each species. There are taxonomic conflicts involving C. guttata, C. tigrina and C. leopoldii. Many taxonomists consider C. tigrina and also C. leopoldii as synonyms of C. guttata. The knowledge concerning the cytogenetics of the Orchidaceae family has contributed significantly to the understanding of the phylogenetic relationships at all taxonomic levels in different 9 genus. Among Cattleya, karyological studies have identified subjects with 40 to 100 chromosomes, where n = 20 is the most frequent basic number. To diagnose the chromosome number of C. guttata, C. leopoldii and C. tigrina was employed Feulgen method in 8-hydroxyquinoline pre-treated roots. However, cytogenetic studies obtained were not proper enough to say that the three studied species are similar or different from...
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Efeitos estruturais do cultivo in vitro e aclimatização ex vitro em raiz e folha de espécies de Cattleya Lindl. (Orchidaceae)

Lando, Ana Paula January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-22T04:09:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334697.pdf: 2745754 bytes, checksum: c4eab70d3a8d203adbf435d148c033d4 (MD5) Previous issue date: 2015 / A propagação in vitro de orquídeas constitui um dos métodos mais conhecidos e utilizados para produção de mudas de alta qualidade e conservação de espécies ameaçadas de extinção, suprindo, assim, os problemas decorrentes da complexidade de germinação a partir de sementes e a exploração sem controle em seu hábitat natural. No cultivo in vitro plantas são condicionadas a alta umidade, trocas gasosas restritas e baixa luminosidade, necessitando de aclimatização ex vitro para possibilitar alterações estruturais e fisiológicas adaptativas ao novo ambiente, garantindo desenvolvimento e crescimento. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar alterações qualitativas e quantitativas de folhas e raízes de espécies de Cattleya (Orchidaceae) cultivadas in vitro e aclimatizadas ex vitro. Sementes de C.xanthina e C.velutina foram inoculadas, germinadas e plântulas multiplicadas foram mantidas in vitro por 180 dias, em meio MS/2, suplementado com 20 gL-1 de sacarose, 7 gL-1 de ágar e 1,5 gL-1 de carvão ativado. Após, foram pré-aclimatizadas (PAC) ex vitro por 60 dias, em caixas com atmosfera saturada, em câmara Fitotron. Depois foram aclimatizadas (AC) ex vitro em casa de vegetação por 90 dias. Amostras de folhas e raízes foram processadas e analisadas em microscopias óptica e eletrônicas de varredura e transmissão. Foram também mensurados: suculência, teor de clorofilas, densidade estomática, dimensão dos estômatos e espessura dos tecidos foliares e da raiz. Os dados foram analisados com ANOVA ou Kruskal-Wallis e comparados por teste Tukey ou Dunn. Em folhas de C. xanthina, as modificações estruturais decorrentes da aclimatização foram: na epiderme, paredes periclinais externas passaram de retas a convexas e acentuou-se deposição de ceras epicuticulares; estômatos alteraram da forma elíptica a arredondada, sem borda cuticular na PAC e com borda obliterando parcialmente o poro em AC; mesofilo homogêneo in vitro mostrou células parenquimáticas mais alongadas adaxialmente e maior número de camadas celulares quando ex vitro; aumento de massa seca. Densidade estomática manteve-se. Registrou-se: amiloplastos na PAC e cloroplastos com tilacóides organizados e grana bem desenvolvido na AC. Na raiz, nas condições ex vitro, ocorreu expansão do córtex. Em folhas de C.velutina, as modificações estruturais foram: redução gradual da densidade estomática; aumento da área foliar e do diâmetro polar dos estômatos; redução das concentrações de clorofila e carotenoides. Mesofilo, na PAC, mostrou células mais alongadas e maior espessura, na condição in vitro e na AC foi similar. Massa seca e suculência não sofreram alteração. Cloroplastos in vitro exibiram evidências de degradação, com rompimento da membrana externa até completa desestruturação; na PAC, mostraram-se com aspecto mais organizado, porém rara formação de grana; na AC, plastoglóbulos osmiofílicos foram conspícuos e raramente com grana. Observou-se senescência das folhas na AC. A raiz não apresentou alterações na espessura dos tecidos, mas ocorreu maior diferenciação na endoderme e no cilindro vascular. Poucas raízes formaram-se ex vitro. Os resultados refletem a plasticidade estrutural de C. xanthina no processo de aclimatização assegurando o equilíbrio hídrico e captação de luz tendo em vista as distintas condições de umidade e luminosidade. Entretanto, os dados sobre C.velutina indicaram algumas alterações estruturais insuficientes para suportar as condições ambientais de aclimatização.<br> / Abstract : In vitro propagation of orchids is one of the most known methods and used for production of high quality seedlings and conservation of endangered species, supplying thus the problems arising from the complexity of germination from seed and exploitation without control their natural habitat. In the vitro culture plants are conditioned to high humidity, gas exchange reduction and low light, requiring acclimatization ex vitro to allow structural and physiological changes adaptive to the new environment, ensuring development and growth. The aim of this study was to evaluate qualitative and quantitative changes in leaves and roots of species of Cattleya (Orchidaceae) cultured in vitro and ex vitro acclimatization. C.xanthina and C.velutina seeds were inoculated germinated seedlings were multiplied and maintained in vitro for 180 days in MS/2 medium supplemented with 20 gL-1 sucrose, 7 gL-1 agar and 1,5 gL-1 of activated charcoal. After, were pre-acclimatized (PAC) ex vitro for 60 days in boxes with saturated atmosphere in phytotron chamber. After were acclimatized (AC) ex vitro in a greenhouse for 90 days. Samples leaves and root were processed and analyzed in optical microscopy and electronic scanning and transmission. Were also measured: succulence, chlorophyll content, stomatal density, stomatal size and thickness of the foliage and root. Data were analyzed with ANOVA or Kruskal-Wallis and compared by Tukey or Dunn test. In leaves of C. xanthina, structural modifications due to acclimatization were: in the epidermis, external periclinal walls went from straight to convex and was accentuated deposition of waxes; stomata changed the elliptical form the rounded, without cuticular edge on the CAP and edge partially obliterating the pore in AC; mesophyll homogeneous in vitro showed more elongated parenchyma cells adaxialmente and greater number of cell layers when ex vitro; increase in dry mass. Stomatal density remained. Was recorded: amiloplasts the PAC and chloroplasts with thylakoids organized and grana well developed in AC. At root, in the ex vitro conditions, there was expansion of the cortex. On leaves of C.velutina, structural changes were gradual reduction in stomatal density; increased leaf area and the polar diameter of the stomata; reduction the concentrations of chlorophyll and carotenoids. Mesophyll, the PAC, showed more elongated cells and more thickness, in the condition in vitro and in the AC was similar. Dry mass and succulence did not change. Chloroplasts in vitro showed evidence of degradation with rupture of the outer membrane until complete disintegration; in the PAC, showed up more organized aspect, however rare grana formation; AC, plastoglobulos osmiofílicos were more evident and rarely with grana. Was observed senescence of leaves in AC. The root had no change in tissue thickness, but has occurred greater differentiation in the endoderm and vascular cylinder. Few roots formed ex vitro. The results reflect the structural plasticity of C. xanthina in the acclimatization process ensuring hydric balance and captation light in view of the different conditions of humidity and light. However, data on C.velutina indicated some structural changes insufficient to support the environmental conditions of acclimatization.
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Anatomia comparativa da folha e do ramicaule de espécies de Acianthera Scheidw., Anathallis Barb. Rodr. e Specklinia Lindl. (Pleurothallidinae - Orchidaceae)

Avi, Robson Carlos January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal, Florianópolis, 2012. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319865.pdf: 4250628 bytes, checksum: d715204b5161e9fb7e24b1cd0c8df82c (MD5) Previous issue date: 2012 / Foram analisadas dezesseis espécies epifíticas pertencentes à subtribo Pleurothallidinae,dos gêneros Acianthera Scheidw., Anathallis Barb. Rodr. e Specklinia Lindl.:Acianthera exartculata (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. glanduligera (Lindl.)Luer, A. luteola (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, A. macropoda (Barb.Rodr.) Pridgeon& M.W.Chase, A. panduripetala (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. pubescensLindl., A. saundersiana (Rchb.f.) Pridgeon & M.W.Chase, A. serpentula (Barb.Rodr.)F.Barros., Anathallis kleinii (Pabst) Luer, A. microgemma (Schltr. ex Hoehne) Pridgeon& M.W.Chase, A. obovata (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, A. rubens (Lindl.) Pridgeon& M.W.Chase, A. sclerophylla (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, Specklinia grobyi(Batem. ex Lindl.) F. Barros, S. hypnicola (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, S. seriata(Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, com o objetivo de caracterizar a morfo-anatomia defolhas e ramicaules identificando caracteres diagnósticos que possam ser utilizados nadistinção entre os gêneros e as espécies, auxiliando futuros trabalhos de taxonomia esistemática do grupo, detectando possíveis estratégias adaptativas. Entre os caracteresmorfo-anatômicos, que puderam ser utilizados na distinção de espécies e gêneros podesedestacar: espessura e ornamentações da cutícula, formato das células epidérmicas,presença ou ausência de tricomas glandulares em depressões da epiderme, disposição domesofilo, ausência de barras de espessamento nas células do mesofilo, posição dosfeixes vasculares em relação ao mesofilo, presença ou ausência de feixes diferenciadosno bordo foliar, presença ou ausência de cristais, compostos fenólicos e óleos nomesofilo ou na epiderme, morfologia da folha e do ramicaule em secção transversal,presença ou ausência de uma camada subepidérmica esclerenquificada nos ramicaules.Os dados morfo-anatômicos obtidos mostraram diferenças significativas entre osgêneros Acianthera e Anathallis e entre Acianthera e Specklinia. Os gêneros Anathallise Specklinia não apresentaram diferenças significativas após a referida análise, porcompartilharem várias características em comum. <br> / Abstract : This work we analyzed sixteen epiphytic species of the subtribe Pleurothallidinae (Orchidaceae), of the genera Acianthera Scheidw., Anathallis Barb. Rodr. e Specklinia Lindl.: Acianthera exartculata (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. glanduligera (Lindl.) Luer, A. luteola (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, A. macropoda (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. panduripetala (Barb.Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. pubescens Lindl., A. saundersiana (Rchb.f.) Pridgeon & M.W.Chase, A. serpentula (Barb.Rodr.) F.Barros., Anathallis kleinii (Pabst) Luer, A. microgemma (Schltr. ex Hoehne) Pridgeon & M.W.Chase, A. obovata (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, A. rubens (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, A. sclerophylla (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, Specklinia grobyi (Batem. ex Lindl.) F. Barros, S. hypnicola (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, S. seriata (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, with the objective of characterize the morpho-anatomy ramicaules leaves and to identify diagnostic characters that can be used to distinguish the genera and species, helping future studies of taxonomy and systematics of the group, detecting possible adaptive strategies. Among the morphological and anatomical characters, which could be used to distinguish species and genera could ever stand out: thickness and ornamentation of the cuticle, epidermal cell shape, presence or absence of glandular depressions of the epidermis, mesophyll provision, absence of thickening bars of mesophyll cells, vascular bundle position in relation to the mesophyll, presence or absence of board bundles at different leaf, presence or absence of crystals, phenolic compounds and oils in the mesophyll cells or in the epidermis, leaf morphology and ramicaule in cross section, presence or absence of a layer in the subepidermal esclerenquificada ramicaules. The morpho-anatomical data showed significant differences between the general Acianthera and Anathallis and between Acianthera and Specklinia. The genera Anathallis and Specklinia not significantly different after that review, they share several common features.
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Diversidade e atualizações em orchidaceae de Santa Catarina

Siqueira, Carlos Eduardo Vilas Boas Duarte de January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia de Fungos, Algas e Plantas, Florianópolis, 2012. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:13:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319754.pdf: 11292340 bytes, checksum: e8d6159af07216c18091e92f67682fb9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Os estudos realizados em Santa Catarina envolvendo a família Orchidaceae são relativamente antigos e escassos, a maioria concentrados em anos das décadas de 1950, 1970 e 1990. Esse trabalho teve como objetivo levantar as espécies epifíticas de Pleurothallidinae dos gêneros Acianthera Scheidw., Anathallis Barb. Rodr., Dryadella Luer, Pabstiella Brieger & Senghas, Lepanthopsis Ames e Specklinia Lindl. ocorrentes na Ilha de Santa Catarina e fornecer meios para o seu reconhecimento através de chaves dicotômicas, descrições detalhadas e ilustrações, além de fornecer dados ecológicos, fenológicos, de distribuição geográfica comentários taxonômicos pertinentes, bem como, construir um checklist das espécies de Orchidaceae de Santa Catarina fornecendo dados sobre os nomes aceitos, o "modo de vida", o status de conservação, a formação e ambiente destas espécies. Foram registradas 20 espécies, sendo Acianthera o gênero mais bem representado (11 spp.), seguido por Anathallis (4 spp.), Pabstiella (2 spp.), Dryadella e Lepanthopsis (1 sp). É proposta uma lectotipificação para Acianthera panduripetala (Barb. Rodr.) Pridgeon & M.W. Chase e nove sinonimização nomenclaturais em Anathallis microphyta (Barb. Rodr.) C.O.Azevedo & van den Berg. Duasespécies, Acianthera serpentula (Barb. Rodr.) Pridgeon & M.W. Chase e A. translucida (Barb. Rodr.) Luer, correspondem a novos registros para o estado de Santa Catarina e 11 para a Ilha de Santa Catarina: Acianthera aphthosa (Lindl.) Pridgeon & M.W.Chase, A. exarticulata (Barb. Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. glanduligera (Lindl.) Luer, A. macropoda (Barb. Rodr.) Pridgeon & M.W.Chase, A. nemorosa (Barb. Rodr.) F.Barros, A. panduripetala (Barb. Rodr.) Pridgeon & M.W. Chase, A. pubescens (Lindl.) Pridgeon & M.W. Chase, Anathallis microphyta, A. obovata (Lindl.) Pridgeon & M.W. Chase, Pabstiella punctatifolia (Barb. Rodr.) Chiron e Dryadella zebrina (Porsch) Luer.Em Santa Catarina constatou-se a ocorrência de 121 gêneros e 541 espécies aceitas, destas, dez são endêmicas e 24 citadas pela primeira vez para Estado. Das três subfamílias representadas no Estado, Epidendroideae e a mais numerosa, com 94 gêneros e 422 espécies, seguida por Orchidoideae com 25 gêneros e 114 espécies, e Vanilloideae, dois gêneros e seis espécies. De acordo com os critérios da IUCN (International Union for Conservation of Nature) 23 espécies enquadram-se na categoria vulnerável, sete como em perigo e três como criticamente em perigo.
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Estudo biotecnológico, citogenético e molecular em espécies de orquídeas endêmicas da flora brasileira /

Moraes, Milena Cristina. January 2014 (has links)
Orientador: Darío Abel Palmieri / Banca: Monica Rosa Bertão / Banca: Cristiano Pedroso de Moraes / Resumo: O cultivo comercial de orquídeas é significativo no mundo. Alguns gêneros e espécies nativas do Brasil, como Cattleya, são apreciados e têm elevado valor econômico devido à capacidade de recombinação genética, beleza, forma, tamanho e durabilidade de suas flores. Contudo, muitas dessas espécies e gêneros encontram-se em risco de extinção, o que as torna objeto para diversos estudos. Técnicas biotecnológicas de cultivo in vitro (germinação assimbiótica de sementes e micropropagação) são valiosos instrumentos na obtenção de mudas. Devido à polinização na natureza ser limitada e com baixa probabilidade de germinação, o cultivo in vitro utiliza formulações de meios de cultivo adequados à germinação de sementes e ao crescimento de diferentes espécies, resultando em maiores percentuais de germinação, em comparação com condições naturais. Neste trabalho foi comparada a atuação de diferentes meios de cultivo na germinação e desenvolvimento de Cattleya guttata, C. leopoldii e C. tigrina. Contudo, os resultados obtidos são preliminares e a procura por um meio de cultivo específico para cada espécie, visando crescimento rápido e em quantidade, necessita de continuidade para somente então afirmar com propriedade qual dos protocolos ensaiados é mais adequado a cada espécie. Existem conflitos taxonômicos envolvendo C. guttata, C. tigrina e C. leopoldii. Muitos taxonomistas consideram C. tigrina e também C. 7 leopoldii como sinônimos de C. guttata. O conhecimento relativo à citogenética da família Orchidaceae tem contribuído expressivamente para o entendimento das relações filogenéticas em todos os níveis taxonômicos em diferentes gêneros. Entre as Catleias, estudos cariológicos identificaram indivíduos com 40 até 100 cromossomos, sendo que n = 20 é o número básico mais frequente. Para diagnosticar o número cromossômico das espécies... / Abstract: The commercial orchids cultive is significant in the world. Some genera and species native to Brazil, as the Cattleya, are appreciated and have high economic value because of the genetic recombination ability, beauty, shape, size and durability of its flowers. However, many of these species and genera are at risk of extinction, making them subject to several studies. Biotechnological techniques of in vitro (asymbiotic seed germination and micropropagation) are valuable tools for seedlings obtainment. Due to pollination in nature be limited and with low germination probability, in vitro cultivation uses suitable formulations of media culture for germination and growth of different species, resulting in higher germination rates compared to natural conditions. In this work we compared the performance of different culture media on germination and development of Cattleya guttata, C. leopoldii and C. tigrina. However the results are preliminary and the search for a specific medium culture for each species, aiming rapid growth in quantity, need continuity to say properly which of the tested protocols is the most suitable to each species. There are taxonomic conflicts involving C. guttata, C. tigrina and C. leopoldii. Many taxonomists consider C. tigrina and also C. leopoldii as synonyms of C. guttata. The knowledge concerning the cytogenetics of the Orchidaceae family has contributed significantly to the understanding of the phylogenetic relationships at all taxonomic levels in different 9 genus. Among Cattleya, karyological studies have identified subjects with 40 to 100 chromosomes, where n = 20 is the most frequent basic number. To diagnose the chromosome number of C. guttata, C. leopoldii and C. tigrina was employed Feulgen method in 8-hydroxyquinoline pre-treated roots. However, cytogenetic studies obtained were not proper enough to say that the three studied species are similar or different from... / Mestre
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Regeneração de estruturas semelhantes a protocormos e citometria de fluxo aplicadas ao melhoramento genético e ao estudo do genoma nuclear de orquídeas

Fritsche, Yohan January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2012 / Made available in DSpace on 2013-07-16T04:28:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 314952.pdf: 2334013 bytes, checksum: 58adbde5a28f3979ffd31859887bf181 (MD5) / Além de grande importância ecológica, muitas espécies da família Orchidaceae, a mais numerosa entre as angiospermas, constituem-se em importantes recursos genéticos devido ao seu valor horticultural e apelo ornamental. O desenvolvimento de protocolos de micropropagação para estas espécies é importante, pois uma maneira eficaz de conservar determinado recurso genético se dá pela sua utilização. No entanto, estes protocolos são altamente específicos e muito escassos atualmente. Estudos visando o melhoramento genético de espécies através da fixação de ganho genético bem como estudos de ordem molecular são também altamente desejáveis. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo regenerativo baseado em estruturas semelhantes a protocormos (ESP) e emprego de biorreatores de imersão temporária (BIT) para Cattleya tigrina, espécie nativa com grande potencial ornamental e atualmente pouco encontrada in situ. Também objetivou-se a realização de estudos do genoma nuclear desta e de outras espécies nativas, com o emprego da citometria de fluxo, visando relacionar aspectos citogenéticos com sua implicação na cultura de tecidos destas espécies. A técnica da camada fina de células (TCL) e o uso de explantes foliares e radiculares cultivados em meio de cultura com diferentes concentrações de fitorreguladores foram avaliados na indução de ESP em C. tigrina. Diferentes concentrações de GA3 e sacarose, além de variações físicas e de técnicas de cultivo, foram avaliadas na multiplicação e regeneração de ESP de C. tigrina. Também foi empregada a técnica da citometria de fluxo para a análise da estabilidade citogenética dos regenerantes de C. tigrina obtidos com o protocolo proposto, bem como na quantificação do conteúdo de DNA nuclear (valor C) de outras cinco espécies nativas. A indução de ESP foi nula em explantes radiculares de C. tigrina. Não houve diferença na taxa de indução entre explantes foliares íntegros ou seccionados em TCL. A indução de ESP foi superior nos meios com maiores concentrações de TDZ, apesar desta ter ocorrido mesmo na ausência completa de fitorreguladores. A desidratação das ESP previamente a inoculação resultou em maior taxa de multiplicação, sendo essa até duas vezes maior quando da utilização de BIT. A presença de GA3 no meio de cultura favoreceu o aumento do número e tamanho de brotos obtidos a partir das ESP. As concentrações de sacarose testadas se comportaram de maneira diretamente proporcional ao incremento de massa fresca, não estando esta relacionada com o número, tamanho ou diferenciação de brotos. As análises de núcleos celulares de C. tigrina e de outras 5 espécies de orquídeas permitiu a quantificação do valor C de DNA com boa precisão, além da observação de que o tecido foliar de todas as espécies avaliadas, com exceção de C. purpurata, é polissomático, existindo grupos de células com diferentes níveis de ploidia no mesmo tecido ou órgão. A análise comparativa em citometria de fluxo dos explantes utilizados na indução de ESP e dos regenerantes obtidos com o protocolo proposto mostrou que 100% dos regenerantes avaliados possuíam o dobro da ploidia do tecido dos explantes, podendo este fato estar ligado a natureza polissomática do tecido de C. tigrina, conforme é discutido.<br> / Abstract : Besides the important ecological importance, many species of the Orchidaceae family, the biggest within the Angiosperm, are also important genetic resources due to its horticultural and ornamental value. The development of micropropagation protocols for these species is important, because one efficient way to conserve a genetic resource is by its utilization. However the protocols for micropropagation os species are highly specific and still scarce. Studies focusing the genetic improvement of species through genetic gain fixation as well as molecular studies are also highly demanded. The objective of this study was to develop a regenerative protocol based on protocorm-like bodies (PLB) and the use of temporary immersion bioreactors (TIB) to Cattleya tigrina, which is an endemic species with a high ornamental value, and currently rarely found in situ. Studies of the nuclear genome o C. tigrina as well as five other native orchids were also done to relate cytogenetic aspects with their implication on tissue culture. The thin cell layer technique (TCL) and the use of different hormone concentration media were evaluated on the induction of PLB from C. tigrina leaf and root explants. Different GA3 and sucrose concentrations, as well as physical variations and different cultivation techniques, were evaluated in the multiplication and regeneration of PLB of C. tigrina. Flow cytometry was used to analyze the genetic stability of C. tigrina regenerates obtained through the proposed protocol, as well as in the quantification of the DNA C-value of other five native species. There was no PLB induction on root explants of C. tigrina. No statistical difference on the PLB induction rate between entire and TCL explants was detected. PLB induction was higher on media containing higher TDZ concentrations, although even on fitorregulator-free medium, PLB induction was observed. The previous dehydration of PLBs resulted in higher multiplication rates, and when TIB were used the multiplication rate increased 2-fold. The presence of GA3 in the culture media favored the increase on the size and number of shoots obtained from PLBs. The sucrose concentrations tested were directly related with the fresh weight increment, but not with the shoot number or size. Through flow cytometry nuclei analysis of C. tigrina and other five orchid species, it was possible to estimate the DNA C-value with high precision, and it was also possible to observe polysomaty on the leaf tissue of all analyzed species, except on C. purpurata. The flow cytometry analysis of tissue from the explants used on PLB induction and the regenerants obtained though the proposed protocol, showed that 100% of the analyzed regenerants doubled their ploidy levels in relation with the explants, been this fact possibly linked with the polysomaty observed on C. tigrina leaf tissue, as discussed.
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Paclobutrazol no crescimento e desenvolvimento in vitro e na aclimatização de Sophronitis cernua (Lindl.) Lindl. e Brassavola flagellaris Barb. Rodr. (Orchidaceae)

Ichinose, Juliana Garcia dos Santos [UNESP] 19 April 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-19Bitstream added on 2014-06-13T19:23:49Z : No. of bitstreams: 1 ichinose_jgs_dr_jabo.pdf: 375994 bytes, checksum: ca9a5202ea2ae13b7677ec7e4a5a5440 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Sophronitis cernua e Brassavola flagellaris são orquídeas epífitas, nativas do Brasil. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de indivíduos, entretanto ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). Em razão disto, este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de cultura Murashige e Skoog com paclobutrazol, no crescimento e desenvolvimento de plântulas de Sophronitis cernua e Brassavola flagellaris (in vitro), visando aumentar a taxa de sobrevivência das plântulas ex vitro. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado. Foram quatro tratamentos (três concentrações de paclobutrazol: 0,5; 1,0 e 1,5 mg i.a. L-1 e controle) e 10 repetições com 12 plântulas. Após cultivo em meio sem suplementação, as plântulas foram inoculadas nos tratamentos, onde permaneceram por mais 90 dias. Após este período, cinco repetições foram separadas para as análises destrutivas e as outras cinco foram transplantadas para bandejas contendo fibra de coco (S. cernua) e mistura de fibra de coco e esfagno (B. flagellaris). Verificou-se que as diferentes concentrações de paclobutrazol promoveram alterações nas características morfológicas das plântulas das duas espécies. Para S. cernua foi verificada redução do número de folhas, área foliar, massa seca e comprimento da parte aérea; aumento no diâmetro e massa seca de raízes e redução na taxa de sobrevivência das plântulas. Para B. flagellaris houve incrementos no acúmulo de massa seca de todas as partes (exceto na maior concentração para parte aérea), no número de folhas, na área foliar (0,5 mgL-1), no diâmetro no comprimento de raízes e no número de raízes; redução no número de brotos e comprimento da parte aérea e maiores taxas de sobrevivência da plântulas / Sophronitis cernua and Brassavola flagellaris are orchids epiphytes, native of Brazil. The in vitro propagation is a technique that allows to produce large numbers of plants, however many losses occur during the period of acclimatization (ex vitro). For this reason, this work aimed to study the effect of supplementation of the Murashige and Skoog medium with paclobutrazol on growth and development of plants of Sophronitis cernua and Brassavola flagellaris (in vitro) to increase the survival rate of seedlings ex vitro. The experimental design was completely randomized. There were four treatments (three concentrations of paclobutrazol: 0.5, 1.0 and 1.5 mg ai L-1 and control) and 10 repetitions with 12 plants. After cultivation in medium without supplementation, the seedlings were inoculated on treatments, where they remained for another 90 days. After this period, five replicates were separated for destructive analysis and the other five were transplanted into trays containing coir (S. cernua) and a mixture of coconut fiber and sphagnum moss (B. flagellaris). It was found that paclobutrazol induced changes in the morphological characteristics of both species. To S. cernua: reducing the number of leaves, leaf area, dry weight and shoot length and increase in diameter and dry mass of roots. Reduction in the rate of seedling survival. To B. flagellaris: increases in dry mass of all parties, except at the highest concentration (aerial part), the number of leaves, leaf area (0.5 mgL-1), diameter, length of roots and more roots. Reduction in the number of shoots and shoot length. Highest survival rates of seedlings
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Paclobutrazol no crescimento e desenvolvimento de Zygopetalum crinitum Lodd. e Cattleya schilleriana Rchb.f. (Orchidaceae) durante as fases in vitro e de aclimatização

Gimenes, Renata [UNESP] 05 April 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-05Bitstream added on 2014-06-13T20:25:24Z : No. of bitstreams: 1 gimenes_r_dr_jabo.pdf: 1905322 bytes, checksum: 311e2450a860a56f3629aaab5cb74493 (MD5) / As plantas da família Orchidaceae são muito apreciadas pelo potencial ornamental, ecológico e econômico. O domínio de técnicas para a domesticação e propagação em massa das espécies é extremamente importante, visto que possibilita diminuir a coleta predatória, além de reduzir o custo de produção das plantas. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de plantas; entretanto, ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). O retardante de crescimento paclobutazol (PBZ) atua como inibidor de giberelinas, diminuindo a parte aérea das plantas, promovendo engrossamento nas raízes e aumentando a resistência a estresses, características estas relevantes para aclimatização de mudas com sucesso, contribuindo para altas taxas de sobrevivência. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de cultura Murashige e Skoog com PBZ, no crescimento e desenvolvimento in vitro, e na aclimatização de plantas de Zygopetalum crinitum e Cattleya schilleriana, visando aumentar a taxa de sobrevivência ex vitro. O delineamento experimental (in vitro e ex vitro) foi inteiramente casualisado, com quatro tratamentos (três concentrações de paclobutrazol: 0,5; 1,0; 1,5 mg L-1 e controle); na fase in vitro foram 5 repetições com 5 plântulas/parcela, e na fase ex vitro, 5 repetições com 15 plântulas/parcela. A suplementação do meio de cultivo com PBZ promoveu em plântulas de Z. crinitum redução no comprimento da parte aérea e do sistema radicular, e engrossamento das raízes durante a fase in vitro; na fase ex-vitro, verificou-se engrossamento das raízes, redução no comprimento e na massa de matéria seca da parte aérea. As alterações morfofisiológicas promovidas nas plântulas pela aplicação de PBZ não implicaram melhores taxas de sobrevivência... / The plants from Orchidaceae family are very much appreciated by their ornamental, ecologic and economic potential. The mastery of domestication techniques and mass propagation of the species is extremely important since it would decrease the predatory collecting and also reducing the production cost of the seedlings. The in vitro cultivation is a technique that allows the production in large scale; however, the losses during the acclimatization process (ex vitro) can be considerable. The growth retardant paclobutrazol (PBZ) act as gibberellin synthesis inhibitor, reducing the growth of the aerial part and promoting root thickening of the plants, which may increase their resistance to stress conditions; and also being considered good characteristics for plant survival in the acclimatization phase. This work has aimed to study the effect of PBZ supplementation on Murashige and Skoog culture media in the growth and development in in vitro and acclimatization process of Zygopetalum crinitum and Cattleya schilleriana, aiming to increase the survival rate. The experimental design (in vitro and ex vitro) was totally randomized, with four treatments (three paclobutrazol doses: 0.5, 1.0, 1.5, mg L-1 and a control); in the in vitro phase were performed 5 replications with 5 seedlings per plot and in the ex vitro one, 5 replications with 15 seedlings per plot. The paclobutrazol supplementation promoted, for Z. crinitum seedlings, reduction in aerial part and root length and root thickening in the in vitro process; in the ex vitro phase, it was observed root thickening and reduction in length and dry mass of the aerial part. The morphophysiological changes in the seedlings due to the PBZ application did not cause an increase in survival rates for this orchid. For C. schilleriana seedlings, the PBZ promoted root thickening in vitro; and in the acclimatization... (Complete abstract click electronic access below)

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