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Estudo genotípico de Trypanosoma cruzi: epidemiologia e caracterização molecular de isolados do homem, triatomíneos e mamíferos silvestres do Pará, Amapá e MaranhãoVALENTE, Vera da Costa January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011 / A doença de Chagas aguda (DCA) é endêmica na Amazônia Brasileira sendo a via oral a principal forma de transmissão com surtos familiares ou multifamiliares. Esta via independe da colonização de triatomíneos no domicílio e a ocorrência é regular com média de 100 casos/ano e 5% de óbitos. Apresenta distribuição espaço-temporal bem definida, colocando a enfermidade como emergência de importância em saúde pública nos estados do Pará, Amapá e Amazonas. A presença de mamíferos e triatomíneos silvestres, infectados naturalmente com o c e habitando distintos ecótopos terrestres e arbóreos, mantém um intenso ciclo enzoótico em toda a Amazônia. Perfis moleculares de linhagens de T. cruzi na região estão associados a hospedeiros mamíferos (incluindo o homem), triatomíneos, ecótopos e manifestações clínicas. Foram estudados quatro surtos de DCA ocorridos nos Municípios de Barcarena, Belém e Cachoeira do Arari no Estado do Pará e em Santana, no Estado do Amapá e abordados os aspectos epidemiológicos (parasitológico e sorológico manifestações clínicas, reservatórios e triatomíneos silvestres associados aos surtos). Foi investigado também em São Luís, Estado do Maranhão, o ciclo domiciliar e silvestre do T. cruzi, porém sem a ocorrência de casos de DCA. O estudo incluiu também a genotipagem molecular de T. cruzi pelo gene de mini-exon dos isolados (homem, mamíferos e triatomíneos silvestres) associados aos diferentes ciclos de transmissão. O diagnóstico parasitológico foi confirmado em 63 pacientes com a seguinte sensibilidade nos testes aplicados: 41,3% (26/63) pela gota espessa; 58,7% (37/63) no QBC; 79,4% (50/63) no xenodiagnóstico e 61,9% (39/63) na hemocultura. A sorologia de 2648 pessoas por hemaglutinação indireta (HAI) foi de 3,05% (81/2648) e imunofluorescência indireta IFI apresentaram respectivamente resultados de e 2,49% (66/2648) para IgG e 2,37 (63/2648) para IgM. Os resultados em São Luís foram todos negativos. Foram capturados 24 mamíferos, 13 Didelphis marsupialis, 1 Marmosa cinerea, 5 Philander opossum, 3 Metachirus nudicaudatus, 1 Oryzomys macconnelli, 1 Oecomys bicolor e 433 R. rattus. A taxa de infecção para T. cruzi foi de 7,14% (29/404). Um total de 3279 triatomíneos foi capturado sendo: Triatoma rubrofasciata (n=3008), com taxa de infecção (TI) de 30.46%, (39/128), Rhodnius robustus (n=137), com TI de 76% (79/104), R. pictipes (n=94), TI de 56,9% (49/86%), E. mucronatus (n=6) e P. geniculatus (n=12) com TI de 50% e as demais espécies sem infecção R. neglectus (n=5) e P. lignarius (n=6). As palmeiras foram os principais ecótopos dos triatomíneos silvestres. O urucurizeiro (S. martiana) apresentava infestação de 47,41% (101/213) dos triatomíneos; o “inajazeiro” (Maximiliana regia) 35,21% (75/213); o “babaçueiro” (Orbgnya. speciosa) 5,16% (11/213); o “dendezeiro” (Eleas melanoccoca) 1,87% (4/213) e a “bacabeira” (Oenocarpus bacaba) 10,32% (22/213). Para a genotipagem foram obtidos 46 isolados de tripanossomas de origem humana, 31 isolamentos de mamíferos silvestres e 74 amostras de triatomíneos. Todos os isolados foram caracterizados como da linhagem TcI de T. cruzi. Todos os casos humanos no Pará foram caracterizados como positivos por exame parasitológico. Nem todos os casos de Santana, Amapá, apresentaram casos parasitológicos positivos, pela demora do diagnóstico, mesmo assim estes foram definidos como DCA. Exames como xenodiagnóstico, hemocultura e o QBC® foram mais sensíveis do que a gota espessa. A sorologia por HAI e IFI (IgG e IgM) tiveram excelente sensibilidade para detectar os casos agudos em tempos distintos de infecção. O achado de mamíferos (D. marsupilais) e triatomíneos silvestres (R. pictipes e P. geniculatus) infectados com consideráveis taxas de infecção para T. cruzi no entorno das residências dos pacientes sustentam a importância destes hospedeiros associados à transmissão da DCA. Apesar de na Amazônia circularem vários genótipos de T. cruzi nos diferentes hospedeiros, neste trabalho foi identificada somente a linhagem TCI de T. cruzi, a mais predominante na Região. Em São Luís, Maranhão, embora sem registro de casos de DCA apresenta um ciclo domiciliar associados ao rato doméstico e o triatomíneo da espécie T. rubrofasciata, e um ciclo silvestre mantido por didelfídeos. Nos dois ciclos circulam a linhagem TCI de T. cruzi. Estudos com marcadores de maior resolução com isolados de T. cruzi regionais podem ajudar a esclarecer os ciclos de transmissão, as rotas de contaminação e os hospedeiros envolvidos em casos de DCA na Amazônia. / The acute Chagas disease (ACD) is endemic in the Brazilian Amazon, and its main
transmission route is oral, throughout family and multi-family outbreaks. This route is independent from
the colonization of triatomine bugs in dwellings and its occurrence is regular, with mean rates of 100 cases per year and a lethality rate of 5%. The disease has a well-defined spatio-temporal distribution, which makes it a relevant public health concern in the states of Pará, Amapá and Amazonas. The existence of wild mammals and triatomine bugs naturally infected with Trypanosoma cruzi inhabiting different terrestrial and arboreal ecotopes maintains an intense enzootic cycle all over the Amazon region. Molecular profiles of T. Cruzi lineages in the region are associated with mammal reservoirs (including humans), triatomine bugs, ecotopes and clinical manifestations. We analyzed four ACD outbreaks in the municipalities of Barcarena, Belém and Cachoeira do Arari on Pará State, and Santana on Amapá State, based on epidemiologic features (laboratory, parasitological and serological diagnoses, clinical manifestations and the reservoirs and wild triatomines related to the outbreaks). We also investigated the domestic and wild transmission cycles of T. cruzi in São Luis on Maranhão State, without the occurrence of ACD cases. This study comprised molecular genotyping of T. cruzi on the mini-exon gene of the isolates associated with both transmission cycles (humans, mammals and wild
triatomine vectors). Parasitological diagnosis was confirmed in 63 patients with the following sensitivity
rates: 41.3% (26/63) for the thick blood film method; 58.7% (37/63) for QBC; 79.4% (50/63) for
xenodiagnosis; and 61.9% (39/63) for blood culture. The serological diagnosis of 2648 individuals by
indirect hemagglutination assay (IHA) was of 3.05% (81/2648), whereas the results of the indirect
immunofluorescence test (IIF) were 2.49% (66/2648) for IgG and 2.37% (63/2648) for IgM. All tests
carried out in São Luís were negative. A total of 24 mammals, 13 Didelphis marsupialis, 1 Marmosa
cinerea, 5 Philander opossum, 3 Metachirus nudicaudatus, 1 Oryzomys macconnelli, 1 Oecomys bicolor and 433 R. rattus were captured. The infection rate for T. cruzi was of 7.14% (29/404). A total of 3279
triatomine bugs were captured: T. rubrofasciata (n=3008) and infection rate (IR) of 30.46%, (39/128)
and R. robustus (n=137) IR of 76% (79/104), R. pictipes (n=94), IR of 56.9% (49/86%) E. mucronatus
(n=6) and P. geniculatus (n=12) IR of 50% and the other non-infected species R. neglectus (n=5) and P.
lignarius (n=6). Palm trees were the main ecotopes for the wild triatomine bugs. S. martiana was infested with 47.41% (101/213) of the triatomines; Maximiliana regia, 35,21% (75/213); Orbgnya speciosa, 5.16% (11/213); Eleas melanoccoca), 1.87% (4/213); and Oenocarpus bacaba, 10.32% (22/213). Genotyping was carried out using 46 isolates of trypanosomes obtained from humans, 31 from wild mammals and 74 from samples of triatomine bugs. All isolates were characterized as belonging to the Tcl lineage. All human cases in Pará were characterized as positive by parasitological testing. Not all the cases in Santana were tested positive because of the delay on diagnosis, but they were defined as positive. Xenodiagnosis, blood culture and QBC® were more sensitive than the thick blood film. Serological examinations by IHA and IIF (IgG and IgM) presented an optimal sensitivity to detect acute
cases in different moments of infection. Mammals (D. marsupialis) and wild triatomine bugs (R. pictipes
and P. geniculatus) infected with high infection rates of T. cruzi in the patients’ peridomicile area account for the importance of these reservoirs in the transmission cycle of the ACD, and are associated with its transmission. Even though several genotypes of T. cruzi circulate in the Amazon Region, only the Tcl lineage was identified in the patients, mammals and triatomines investigated in this study. In São Luís, in spite of these having no record of human cases of ACD, it has a domestic cycle associated with the black rat and the triatomine bugs of the species T. rubrofasciata, as well as a sylvatic cycle associated with didelphids. The Tcl cycles circulate in both cycles. Studies with isolates of local T. cruzi using markers with a higher definition might help clarify the transmission cycles, transmission routes and the reservoirs involved in cases of ACD in the Amazon Region.
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Avaliação de fatores de risco para infecção pelo vírus da hepatite C em candidatos à doação de sangue como potencial instrumento de redução de risco transfusionalVALOIS, Rubenilson Caldas January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / As hepatites virais constituem um dos mais importantes assuntos de saúde pública, podendo ser causadas por diferentes agentes etiológicos. Dentre estes, encontra-se o Vírus da hepatite C (HCV), que segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS) afeta
mundialmente cerca de 123 milhões de pessoas, com uma prevalência de 2%. A principal forma de transmissão do HCV é a exposição ao sangue contaminado. O HCV
pertence à família Flaviviridae, gênero Hepacivirus, possui 6 genótipos e múltiplos subtipos. No Brasil, o genótipo 1 é observado em 70% dos pacientes infectados, seguido pelo genótipo 3 (25%) e o genótipo 2 (5%). Alguns fatores de risco são fortemente
associados à transmissão do HCV, dentre eles: o uso de seringa de vidro esterilizada em domicílio; o compartilhamento de utensílios de higiene pessoal como a lâmina de barbear, escova de dente, alicates de manicure e cortadores de unhas e também a transfusão de sangue antes de 1993. O presente estudo teve como objetivo executar um inquérito epidemiológico sobre fatores de risco relacionados à infecção pelo HCV e, determinar a soroprevalência de anti-HCV em candidatos a doação de sangue, no
Estado do Pará. Foram analisados os seguintes fatores de risco: o uso de agulhas e
seringas esterilizadas em domicílio; o uso de material próprio de manicure e pedicure; o
uso de lâminas descartáveis em ambiente público; o uso compartilhado de lâminas em
ambiente domiciliar; a realização de tratamento dentário invasivo e; o recebimento de
transfusão antes de 1993. Foram alocados ao acaso, 11.916 candidatos ao processo de
doação sanguínea da Fundação HEMOPA, no período de fevereiro de 2008 a março de
2009, posteriormente divididos em dois grupos: (1) aqueles com sorologia positiva para
anti-HCV e; (2) aqueles com sorologia negativa para anti-HCV. O primeiro grupo foi
constituído de 53 candidatos com sorologia positiva (0,4%) e o segundo grupo de
11.863 candidatos com sorologia negativa (99,6%). A análise dos dados mostrou que a
mediana de idade entre os indivíduos anti-HCV positivos foi de 35 anos. Observou-se
que dentre os indivíduos com sorologia positiva, 36 eram do sexo masculino (68%) e 17
do sexo feminino (32%). Já entre os candidatos com sorologia negativa, 9.250
pertenciam ao sexo masculino (78%) e 2.613 ao sexo feminino (22%). A análise dos
fatores de risco estudados demonstrou que o uso de seringa de vidro em domicílio, a
utilização de material não-próprio de manicure e pedicure e o recebimento de transfusão
antes de 1993, foram fatores significativos para a transmissão do HCV na população de
candidatos à doação de sangue, no Estado do Pará. Estes achados poderão propiciar
estratégias de redução da hepatite C transfusional. / The viral hepatitis are the most important subject of public health, being caused by
differents etiologic agents. Amongst these, we find the hepatitis C virus (HCV) that
according to the World Health Organization (WHO) its affects about 123 millions of
people world-wide, a prevalence of 2%. The main form of transmission is the exposition
to infected blood. The HCV is part of Flaviviridae family, Hepacivirus genus, its
possess 6 genotypes and multiples subtypes. In Brazil, the genotype 1 is observed in
70% of infected patients, followed by genotype 3 (25%) and genotype 2 (5%). Some
risk factors are strongly related with the HCV transmission, amongst them: the
utilization of sterilized glass syringe at home; the sharing of utensils of personal hygiene
as shavers, tooth brush, pliers of manicure and cutting nails and; blood transfusion
before 1993. The present study aimed to execute an epidemiologic inquiry about risk
factors related with the HCV infection and determinate the anti-HCV seroprevalence in
candidates of blood donation, in the State of Pará. The following risk factors were
analyzed: the use of sterilized needles and syringes at home; the use of proper material
of manicure and pedicure; the use of disposable blades in public environment; the
accomplishment of invasive dental treatment and; the act of receiving blood transfusion
before 1993. At the period of february/2008 to march/2009, 11.916 candidates to the
blood donation process at HEMOPA Foundation were random placed, later divided in
two groups: (1) with anti-HCV positive serology and; (2) with anti-HCV negative
serology. The first group was constituted of 53 candidates with positive serology (0,4%)
and the second of 11.863 candidates with negative serology (99,6%). The data analyses
showed that the median age of the anti-HCV positive individuals were 35 years. It was
observed that amongst individuals with positive serology, 36 were male (68%) and 17
were female (32%). Between candidates with negative serology, 9.250 were male (78%)
and 2.613 were female (22%). The analyses of the studied risk factors showed that the
use of glass syringe at home, the use of non-proper material of manicure and pedicure
and the act of receiving blood transfusion before 1993 are significant factors to the
HCV transmission into the population of candidates to blood donation, in the State of
Pará. These findings will propitiate strategies to the reduction of transfusional hepatitis
C.
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Estudo da ocorrência e perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de Staphylococcus aureus isolados de pacientes e profissionais de saúde na Unidade de Terapia Intensiva de hospital público de Rio Branco-ACLAVIOLA GARCÊZ, Poliana Torres 07 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011 / A infecção hospitalar (IH) é um grave problema de saúde pública, principalmente em pacientes internados em Unidade de Terapia Intensiva (UTI), devido à gravidade do quadro clínico, uso constante de antimicrobianos e frequência do emprego de
procedimentos invasivos. O Staphylococcus aureus (S. aureus) é um dos principais patógenos que coloniza indivíduos saudáveis e responde também, por infecções em pacientes hospitalizados. O presente estudo objetivou a identificação do perfil de suscetibilidade, principais sítios acometidos por infecção e possíveis fatores de risco
associados à infecção ou colonização por S. aureus isolados de pacientes e profissionais de
saúde da UTI de Hospital de Urgência e Emergência de Rio Branco (HUERB) – Acre. Foi
desenvolvido um estudo transversal no período de janeiro a agosto de 2009. Para pesquisa
de portadores, foram coletadas amostras biológicas da microbiota dos pacientes e
profissionais de saúde. Para o levantamento de casos de pacientes com IH, foram coletadas
amostras biológicas dos sítios suspeitos de estarem acometidos, a partir de 72 horas da data
de sua admissão, até alta, transferência ou óbito. Dos 62 pacientes inseridos nos estudo,
19,3% foram portadores e 6,4% desenvolveram IH por S. aureus; e dos 35 profissionais,
28,6% foram portadores de S. aureus. Foi a segunda espécie bacteriana mais isolada de
pacientes portadores e a quinta mais isolada de casos de IH. Não houve comprovação
estatística para as variáveis abordadas no estudo serem consideradas fatores de risco para
aquisição de IH por S. aureus. Os sítios anatômicos acometidos por IH por S. aureus foram
o trato respiratório (n=2), seguido de corrente sanguínea (n=1). A amostra ponta de cateter
foi responsável por 1 isolado. Um (1,6%) paciente desenvolveu IH por MRSA; e 5 (8,1%)
pacientes e 2 (5,7%) profissionais foram portadores de MRSA, ocorrência baixa quando se
relaciona com os resultados do restante do Brasil e do mundo. Destaca-se ainda, a
incidência do MSSA sobre o MRSA e a baixa resistência dos MRSA aos antimicrobianos,
demonstrando que na UTI do HUERB, as IH por S. aureus ainda não se constituem um
problema de saúde pública. Não houve isolados de S. aureus resistentes à vancomicina,
podendo ser considerada uma opção terapêutica para os casos de IH por MRSA. Vale
ressaltar a importância desse estudo no Estado do Acre, por constituir o primeiro desta
natureza em UTI, envolvendo S. aureus e MRSA. / The nosocomial infection is a serious public health problem worldwide, mainly in patients
admitted to the Intensive Care Unit, which are subject to greater risk due to the severity of
clinical symptoms, constant use of broad spectrum antibiotics and frequency of use of
invasive procedures. Staphylococcus aureus is a major pathogen that colonizes healthy
individuals and is also responsible for infections in hospitalized patients. This study aimed
to identify the resistance profile, main sites affected by infection and possible risk factors
associated with infection or colonization by S. aureus isolated from patients and healthcare
professionals from the Intensive Care Unit of Hospital Emergency and Emergency, Rio
Branco (HUERB) – Acre. We developed a cross-sectional study, conducted between
January to August 2009. To search for carriers, biological samples were collected from
microbiota of patients and professionals and professionals hand washing. For a survey of
cases of patients with nosocomial infection were collected biological samples from sites
suspected of being affected, 72 hours from the date of admission until discharge, transfer
or death. Of the 62 patients enrolled in the study, 19.3% were carriers and 6.4% developed
nosocomial infections by S. aureus, and 35 professionals, 28.6% were carriers of S. aureus.
It was the second most bacterial species isolated from patients, and was the fifth most
isolated from cases of nosocomial infection. There was no statistical evidence for the
variable state of coma, use of invasive procedures and state of carrier patient are
considered risk factors for acquiring nosocomial S. aureus in this study. The anatomical
sites affected by IH by S. aureus were the respiratory tract ( n=2), followed by blood
(n=1). The sample catheter tip was responsible for one insulated. One (1.6%) patient
developed IH by MRSA, and 5 (8,1%) patients and 2 ( 5.7%) professionals were MRSA
carriers, low occurrence as it relates to the results of the rest of Brazil and world. We also
emphasize the incidence of MRSA over MSSA and low antomicrobial resistance of MRSA
demonstrating that the UTI-HUERB, the IH S. aureus does not constitute a public health
problem. There were no isolates of S. aureus resistant to vancomicina, wich can be
considered a therapeutic option for cases of IH by MRSA. It is worth emphasizing the
importance of this study in Acre State, for being the first of its kind in the UTI, involving
S. aureus and MRSA.
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Infecção experimental em hamster dourados (Mesocricetus auratus) e caracterização genética parcial de cinco Phlebovirus (Bunyaviridae) do Complexo Candiru isolados na Amazônia brasileiraNUNES NETO, Joaquim Pinto 07 December 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os flebovírus (família Bunyaviridae; gênero Phlebovirus), possuem importância considerável em saúde publica, pois podem causar uma variedade de síndromes clínicas. Na região amazônica brasileira até o momento já foram isolados 23 flebovírus sendo que quatro se destacam por terem sido isolados de humanos: Virus Alenquer, Virus Candiru, Virus Morumbi e Virus Serra Norte. Estes mais o Virus Itaituba, isolado de Didelphis marsupialis, fazem parte do Complexo Candiru (grupo Candiru) e foram utilizados para estudos de caracterização genética e de infecção experimental em hamsters dourados (Mesocricetus auratus). Os Hamsters mostraram-se suscetíveis a infecção por esses flebovírus, apesar de não terem apresentado sinais de doença. A análise histopatológica demonstrou aspectos lesionais no fígado, nos rins, no baço, nos pulmões e no sistema nervoso central, sendo as lesões mais intensas no fígado comprovadas pela presença dos antígenos virais empregando a técnica de imunohistoquímica. A análise das seqüências nucleotídicas parciais dos segmentos PRNA e MRNA obtidas para os cinco flebovírus estudados mostraram maior similaridade genética entre si do que com outros membros do gênero Phlebovirus. Sendo as mesmas geneticamente mais relacionadas ao Virus Punta Toro. Filogeneticamente, independentemente do segmento genômico analisado, os cinco flebovírus constituem um grupo monofilético, sendo que a análise pelo método de máxima verossimilhança demonstrou diferentes origens evolutivas para os segmentos de RNA o que sugere a ocorrência de rearranjo genético em natureza entre estes cinco flebovírus amazônicos. / The phleboviruses (family Bunyaviridae, genus Phlebovirus) are of considerable public health importance, due to their association with human diseases causing different clinical syndromes. In the Brazilian Amazon region, 23 phlebovirus were presently isolated, four of them have been isolated from humans: Alenquer virus, Candiru virus, Morumbi virus, and Serra Norte virus. These and Itaituba virus, isolated from Didelphis marsupialis belong to the Candiru Complex (Candiru group) and were used for studies on genetic characterization and experimental infection using gold hamsters (Mesocricetus auratus) as animal model. Hamsters showed to be susceptible to infection by these viruses; however signs of disease were not observed. The histophatological analysis demonstrated damages in the liver, kidneys, lung, and central nervous system. More intense lesions were observed in the liver which were characterized by the presence of viral antigens detected by immunohistochemistry assay. The analysis of the partial SRNA and MRNA nucleotide sequences obtained for the five studied phleboviruses showed more similarity among them than with other members of the genus Phlebovirus.More over, is was demonstrated that these phleboviruses were more genetically related to Punta Toro virus. Phylogenetically, regardless of the genome segment analyzed, the five phleboviruses constitute a monophyletic group. In addition the analysis by maximum likelihood method demonstrated different evolutionary origins for the RNA segments, suggesting the occurrence of natural genetic reassortment among the five Amazonian phleboviruses.
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Participação das citocinas Interleucina-12, Interferon-γ, Interleucina-4 e Interleucina-10 e investigação de polimorfismos nos genes do INF-γ (IFNG+874) e da IL-10 (IL10-1082) na malária causada por Plasmodium vivaxMEDINA, Tiago da Silva 05 October 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / A resposta imune na malária é complexa, e os mecanismos de
ativação e regulação de linfócitos T efetores e de memória ainda são pouco compreendidos. No presente estudo, determinamos a concentração das citocinas Interferon-γ (IFN-γ), Interleucina-10 (IL-10), Interleucina-4 (IL-4) e Interleucina-12
(IL-12) no soro de indivíduos infectados por Plasmodium vivax, investigamos os
polimorfismos no gene do IFN-γ (IFNG+874) e da IL-10 (IL10-1082) e analisamos
a associação destes polimorfismos com a concentração das citocinas e com a
densidade parasitária. A concentração das citocinas foi determinada por ELISA, e
a genotipagem dos polimorfismos IFNG+874 e IL10-1082 foi realizada pelas
técnicas de ASO-PCR e PCR-RFLP, respectivamente. Os indivíduos infectados
apresentaram níveis séricos de IFN-γ e IL-10 aumentados. A produção de IFN-γ foi
maior nos indivíduos primoinfectados, porém não foi associada com a redução da
parasitemia. A produção de IL-10 foi alta e associada com altas parasitemias. As
citocinas IL-4 e IL-12 não foram detectadas. As freqüências dos genótipos
homozigoto mutante AA, heterozigoto AT e selvagem TT do gene do IFN-γ foram
0,51, 0,39 e 0,10, respectivamente. As freqüências dos genótipos homozigoto
mutante AA, heterozigoto AG e selvagem GG para IL10 foram 0,49, 0,43 e 0,08,
respectivamente. Apenas o polimorfismo do IFN-γ foi associado com níveis
reduzidos desta citocina. Na malária causada por P. vivax, houve produção de
citocina que caracteriza o perfil Th1 (IFN-γ), com possível participação da IL-10 na
imunorregulação. / The malaria immune response is complex, and the activation and
regulation mechanisms of the efector and memory T cells remain unclear. In this
study, we determined seric levels of Interferon-γ (IFN-γ), Interleukin 10 (IL-10),
Interleukin-4 (IL-4) and Interleukin-12 (IL-12) in individuals infected by Plasmodium
vivax. We investigated polymorphisms in IFN-γ (IFNG+874) and IL-10 (IL10-1082)
genes and their association with seric levels and parasite density. Concentrations
of IFN-γ, IL-10, IL-4 and IL-12 were detected by ELISA, and IFNG+874 and IL10-
1082 polymorphisms genotyping were investigated by allele-specific
oligonucleotide polymerase chain reaction (ASO-PCR) and PCR-RFLP (restriction
fragment length polymorphism) methods, respectively. We detected increased
levels of IFN-γ and IL-10 in individuals infected by P. vivax. IFN-γ levels were
higher in individuals who were infected for the first time, but there were no
association with parasite elimination. Increased levels of IL-10 were associated
with higher parasite densities. We did not detect IL-4 and IL-12 seric levels. The
frequencies of AA, AT, TT genotypes of IFNG+874 were 0,51, 0,39 e 0,10,
respectively. The frequencies of AA, AG, GG genotypes of IL10-1082 were 0,49,
0,43 e 0,08, respectively. We also showed that IFG+874 polymorphism is
associated with decreased levels of IFN-γ. The results show a Th1-driven immune
response which can be regulated by IL-10 in naturally P.vivax-infected individuals.
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Hidatidose policística no norte do Brasil: abordagem parasitológica e histopatológica de pacas e casos humanos / Polycystic Echinococcosis in north of Brazil: parasitologyc histopathologic approach from human and pacas casesFernanda Barbosa de Almeida da Cunha 24 August 2012 (has links)
A hidatidose policística é uma zoonose causada pelo cestóide Echinococcus vogeli, amplamente distribuído no norte do Brasil. Os hospedeiros definitivos são Speothos venaticus (cachorro-vinagre) e Canis familiaris (cães domésticos), enquanto Agouti paca (paca) é hospedeiro intermediário. Tanto as pacas quanto o homem (hospedeiro acidental) desenvolvem a forma larvar (metacestóide), principalmente na superfície e no interior do fígado. Esta tese tem como objetivo geral estudar as características parasitológicas e histopatológicas de metacestóides de E. vogeli, originários de pacas e humanos da região norte do Brasil, visto o conhecimento insuficiente ou mesmo o seu desconhecimento. Os fígados e mesentérios foram obtidos de oito pacientes com hidatidose policística durante ato cirúrgico na Fundação Hospital Estadual do Acre. Pacas foram capturadas no Município de Bujari, Floresta Estadual do Antimary, Acre. Durante a necropsia das pacas, foram observadas lesões macroscópicas (massas esbranquiçadas ou amareladas, semelhantes a bolhas na superfície dos fígados). Para a análise parasitológica foram aplicadas as microscopias de luz, contraste interferencial de Normaski (DIC) e varredura laser confocal. A análise morfométrica foi realizada com o auxílio do Programa Image Pro Plus Media Cybernetics. Os órgãos de pacas e humanos foram submetidos à análise histopatológica. Os pequenos e grandes ganchos rostelares apresentaram polimorfismo morfológico, enquanto a organização dos protoescólices acompanhou o padrão descrito para Echinococcus sp. Todas as pacas apresentavam cistos hepáticos, porém em apenas duas encontramos líquido hidático, comprovados pela presença dos ganchos e protoescólices. A análise histopatológica dos tecidos hepáticos das pacas confirmou a hidatidose policística e evidenciou, pela presença de agrupamentos de ovos, a coinfecção com Calodium hepaticum. As características morfológicas dos ganchos rostelares dos casos humanos não diferiram do descrito para as pacas, entretanto, os ganchos dos helmintos provenientes do fígado foram maiores que os mesentéricos. Já em relação aos protoescólices, os mesentéricos foram maiores do que os hepáticos. Cistos mesentéricos e hepáticos apresentaram protoescólices em diferentes estágios de desenvolvimento, com coroas de ganchos, formadas por grandes e pequenos ganchos, e dois pares de ventosas, além dos corpúsculos calcários. Os cistos hepáticos apresentaram as três membranas características (adventícia, anista e germinativa), enquanto os cistos mesentéricos não apresentaram a membrana adventícia, sendo a anista aquela que mais se destacou neste órgão. No mesentério, as células mononucleares foram os principais constituintes do infiltrado leucocitário, cuja intensidade foi relacionada à capacidade proliferativa da membrana germinativa. Além de cistos hepáticos típicos de fase crônica, dependendo da resposta inflamatória, foram observados cistos na fase aguda e sub-aguda. Foi encontrado um caso de coinfecção com vírus (HIV, HCB e HCV) e outro com envolvimento da vesícula biliar. Em suma, confirma-se hidatidose policística em pacas no Acre e são apresentados novos casos de infecção humana no Acre e Amazonas. Pela primeira vez, é demonstrado polimorfismo, padrão diferente de desenvolvimento dos cistos de acordo com o órgão, coinfecção e envolvimento da vesícula biliar / Polycystic hydatidosis is a zoonotic disease caused by the cestode Echinococcus vogeli, largely distributed in northern Brazil. The definitive hosts are Speothos venaticus (bush dogs) and Canis familiaris (domestic dogs), while Agouti paca (paca) is the intermediate host. Both the pacas and man (accidental host) develop the larval form (metacestodes), mainly on the surface and inside the liver. This thesis aims to study histopathological and parasitological characteristics of metacestodes of E. vogeli, from pacas and humans of the north region of Brazil, seen the insufficient knowledge or lack of it. The mesentery and livers were recovered from eight patients with polycystic hydatidosis during surgery in the Acre State Hospital Foundation. Pacas were captured in the municipality of Bujari, Antimary State Forest, Acre. During the pacas necropsy, macroscopic lesions were observed (whitish or yellowish masses, similar to blisters on the surface of the liver). Identification analyses were applied to light microscopy, interferential contrast microscopy of Normaski (DIC) and confocal laser scanning microscopy. Morphometric analysis was performed by Image Pro Plus Media Cybernetics program. The pacas and human organs were subjected to histopathological analysis. The small and large rostellar hooks presented morphological polymorphism while protoscoleces organisation accompanied the pattern described in Echinococcus sp. All pacas presented liver cysts, however in only two found proven by the presence of hydatid fluid, hooks and protoscoleces. Histopathological analysis of pacas hepatic tissues confirmed polycystic hydatidosis and evidenced by the presence of eggs clusters the Calodium hepaticum coinfection. The morphological characteristics of human cases rostellar hooks did not differ from described to the pacas; however, the hooks were greater than the mesenteric ones. Already in relation to protoscoleces, the mesenteric ones were larger than the liver. Mesenteric and liver cysts presented protoscoleces at different stages of development, with rostellar pad formed by large and small hooks, and two pairs of suckers, in addition to the calcareous corpuscles. Liver cysts showed three characteristics layers (adventitia, laminated and germinative), while mesenteric cysts did not present the adventitia, being the laminated layer the most evidenced in this organ. In the mesentery, mononuclear cells were the principal constituents of leukocyte infiltrated, whose intensity was related to the proliferative capacity of germinative layer. In addition to typical liver cysts of the chronic phase, depending on the inflammatory response, have been observed cysts in acute and subacute phase. It was found a case of co-infection with virus (HIV, HCV and HCB) and another with gallbladder involvement. In short, it is confirmed polycystic hydatidosis in pacas from Acre and is presented new cases of human infection in Acre and Amazonas. For the first time, it was demonstrated polymorphism, different development pattern of cysts depending on the organ, co-infection and gallbladder involvement
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Avaliação do estado sanitário de Ararajubas (Guaruba guarouba) mantidas em cativeiro no Estado de São Paulo - Brasil / Health Assessment of Golden conure (Guaruba guarouba) kept in captivity on São Paulo State - BrazilFabiola Eloisa Setim Prioste 09 December 2010 (has links)
A Ararajuba (Guaruba guarouba) é um psitacídeo de médio porte, endêmico do Bioma Amazônico, que se encontra em perigo de extinção devido, principalmente, à perda de habitat e ao tráfico de animais. Poucos trabalhos científicos foram desenvolvidos para avaliar as condições sanitárias dessas aves mantidas em cativeiro, visando à reintrodução da espécie na natureza. Este estudo teve por objetivo avaliar o estado sanitário das aves mantidas em Zoológicos e Criadouros do Estado de São Paulo, por meio de avaliações hematológica, microbiológica e parasitológica. Foram colhidas amostras de 87 indivíduos mantidos em seis Parques Zoológicos, três Criadouros Comerciais e um Criadouro Conservacionista, obtendo-se como resultados da avaliação hematológica: valor médio do volume globular (Ht%): 46,12; valor médio de proteína total sérica (g/dL): 3,55; valor médio de hemoglobina (g/dL): 12,68; valor médio do número de hemácias (x 106 mm3): 3,52; valor médio do número dos leucócitos totais (x103/mm3): 13,41; valor médio do número de trombócitos (/mm3): 26.029,4; valor médio do VCM (fL): 133,3; valor médio do HCM (pg): 36,58; valor médio do CHCM (g/L) : 27,65; valor médio de heterófilos (%):56.62; valor médio de linfócitos (%): 42,22; valor médio de monócitos (%): 0,9; valor médio de eosinófilos (%):0,04; valor médio de basófilos (%): 0,20. Quanto à análise microbiológica, não houve isolamento de Salmonella spp. na microbiota intestinal, porém, houve crescimento de Escherichia coli em 50% dos animais. No exame parasitológico, todos os animais foram negativos tanto para a pesquisa de endoparasitas intestinais como para hemoparasitas. O soro obtido da centrifugação do sangue e a papa de hemácias foram armazenados para futuras pesquisas. / The Ararajuba or Golden conure (Guaruba guarouba) is a medium-sized parrot, endemic to the Amazon biome and threatened of extinction primarily due to habitat loss and poaching. Few scientific studies have examined the health conditions of these birds kept in captivity, which will be essential to future reintroduction efforts. This study aimed to evaluate the health status of Ararajubas maintained in zoos and private breeders in São Paulo state, Brazil, through haematological, microbiological and parasitological evaluations. Samples were obtained from 87 individuals held at six Parks Zoos, three Commercial Breeders and one Conservation Breeder. Average haematological results: packed cell volume 46.12%, total serum protein 3.55 g/dL, haemoglobin 12.68 g/dL, erythrocytes 3.52 x 106 cells/mm3, Leukocytes 13.41 x 103 cells/mm3, thrombocytes 26.03 x 103 cells/mm3, Mean Corpuscular Volume 133.3 fL, Mean Corpuscular Haemoglobin 36.58 pg, Mean Corpuscular Haemoglobin Concentration 27.65 g/dL, heterophils 56.62%, lymphocytes 42.22%, monocytes 0.9%, eosinophils 0.04%, basophils 0.20%. Microbiological cultures: Escherichia coli could be isolated from 50% of the cloacal swabs and Salmonella spp. was not isolated in none. Parasitology: all animals were negative for both intestinal parasites and haemoparasites. Plasma and erythrocytes obtained by centrifugation were stored for future research.
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Biologia, Diagn?stico morfol?gico e molecular da infec??o experimental e natural de Babesia equi (Laveran, 1901) em Boophilus microplus (Canestrini, 1887). / Biology, Morphologic and molecular diagnosis of the experimental and natural infection of Babesia equi (Laveran, 1901) in Boophilus microplus (Canestrini, 1887).Fernandes, K?tia Roberta 26 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The aim of the present study was to evaluate the natural and experimental infection of B. equi
in nymphs and adult Boophilus microplus using optical microscopy and molecular analysis.
The experimental infection was observed in nymphs, males and females of B. microplus fed
on equines chronically infected with B. equi and in non fed larvae and eggs. For the
experiments two equines, of not defined breed, proven to be infected with B. equi were used.
The animals were infested with B. microplus larvae of generation F4 obtained from a
laboratory maintained population, known to be free of Babesia spp. infection. Daily
collections of ticks were realized using as starting point the ecdisys to nymph state. After the
collection the hemolymph was examined and the intestine and salivary glands were dissected,
smashed on glass slides for microscopy, methanol treated and stained with Giemsa. There
were dissected 860 specimens (432 nymphs, 280 females and 148 males). The dissected
salivary glands were divided into two parts. The first one was smashed on microscopy glass
slides, stained and examined by optical microscopy for morphologic analyses. From the
second part was realized DNA extraction and PCR with specific primers for the 18S rRNA.
On optical microscopy of nymph hemolymph was possible to be observed the presence of
kinetes with claviform aspect characteristic for the genus Babesia. In the salivary glands of B.
microplus nymphs the morphology and the sequence of developmental stages of B. equi were
observed initiating on day 4 after ecdysis, being possible to see in acinary cells the formation
of sporoblasts and ovoid sporozoites measuring 1.5 μm of diameter and elongated sporozoites
with 3.8 to 5.2μm of length and 0.8 to 1.5 μm of width. The PCR confirmed the presence of
B. equi in DNA samples extracted from salivary glands of nymphs, male and female ticks as
well as in larvae and eggs. To evaluate the natural infection were collected nymphs and adult
B. microplus from two equines naturally infested by these ticks and naturally infected with B.
equi. These horses were originated from Seropedica city in the state of Rio de Janeiro. There
were dissected 324 specimens (145 nymphs, 138 females and 41 males). The proceedings
with the salivary glands were identical to the previously described for the experimental
infection. Of the salivary glands submitted to PCR, 70% showed to be infected with B. equi.
Microscopical analysis of the salivary glands revealed the presence of sporoblast stages and
the development of elongated sporozoites in acinary glands. The morphologic, morphometric
and molecular analysis confirmed the experimental and natural infection of the salivary
glands of nymphs and adult B. microplus with B. equi. The results of the present study show
the ability of B. equi to develop in this tick species. The detection of B. equi DNA in eggs and
larvae also suggests the possibility of transovarian transmission in B. microplus. The results
allow to consider the tick B. microplus as a potential biologic vector of B. equi in horses from
the studied region. / Este trabalho teve como objetivo avaliar a infec??o natural e experimental de Babesia equi em
ninfas e adultos de Boophilus microplus por meio de microscopia ?ptica e an?lise molecular.
A infec??o experimental foi observada a partir de ninfas, machos, f?meas, ovos e larvas n?o
alimentadas de B. microplus alimentados em equinos com infec??o cr?nica por B. equi. Para a
realiza??o do experimento foram utilizados dois eq?inos, mesti?os, com infec??o por B. equi.
Os animais foram infestados com larvas de B. microplus de gera??o F4 obtidas de col?nia
mantida em laborat?rio e livres de infec??o por Babesia spp. A partir da ecdise para ninfa
foram realizadas coletas di?rias. Ap?s a coleta foram realizados os exames de hemolinfa e
extra??o do intestino e das gl?ndulas salivares os quais foram macerados em l?minas de vidro
para microscopia, fixados em metanol e corados com Giemsa. As gl?ndulas salivares
dissecadas foram divididas em duas partes. A primeira parte foi macerada em l?minas de
vidro para microscopia, corada com corante Giemsa e observada em microsc?pio ?tico para
an?lise morfol?gica. A segunda parte foi realizada a extra??o de DNA, sendo submetida a
PCR com primers especif?cos para o gene 18S rRNA para B. equi. Foram dissecados 860
esp?cimes (ninfas= 432; f?meas= 280 e machos= 148). Na microscopia ?ptica foi poss?vel
observar nas hemolinfas das ninfas a presen?a de cinetos com aspecto claviforme t?picos do
g?nero Babesia. Nas gl?ndulas salivares, a morfologia e a seq??ncia dos est?gios de
desenvolvimento de B. equi das ninfa s de B. microplus, foram observadas a partir do 4? dia
ap?s ecdise, sendo poss?vel observar nos ?cinos celulares a forma??o de esporoblastos e de
esporozo?tas ov?ides medindo 1,5 μm de di?metro e alongados medindo 3,8 a 5,2μm de
comprimento e 0,8 a 1,5μm de largura. A rea??o em cadeia de polimerase (PCR) confirmou a
presen?a de B. equi em DNA de gl?ndulas salivares extra?das de ninfas, machos, f?meas,
assim como dos ovos e larva. A infec??o natural foi observada a partir de ninfas e adultos de
B. microplus coletados de dois eq?inos naturalmente infestados e comprovadamente
infectados por B. equi, procedentes do munic?pio de Serop?dica, Rio de Janeiro. Foram
dissecados 324 esp?cimes (ninfas= 145, f?meas= 138 e machos= 41). O processamento das
gl?ndulas salivares dissecadas foi semelhante ao descrito para infec??o experimental. Das
gl?ndulas salivares submetidas a PCR, 70% apresentaram resultados positivos para B. equi.
As an?lises por microscopia ?ptica das gl?ndulas salivares das ninfas e dos adultos revelaram
a presen?a nos ?cinos celulares os est?gios de esporoblastos e o desenvolvimento de
esporozo?tas alongados. As an?lises morfol?gicas, morfom?tricas e moleculares confirmaram
a infec??o experimental e natural das gl?ndulas salivares de ninfas e adultos de B. microplus
por B. equi. Os resultados deste estudo demonstram a capacidade de multiplica??o de B. equi
em gl?ndulas salivares de ninfas e adultos de B. microplus. A detec??o de DNA de B. equi em
ovos e larvas de B. microplus tamb?m sugere a possibilidade da transmiss?o transovariana
nesta esp?cie de carrapato. Estes resultados sugerem que o carrapato B. microplus ? vetor
biol?gico de B. equi na regi?o estudada.
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Caracterização sérica da lectina ligadora de manose (MBL) em indivíduos portadores de parasitoses intestinaisALENCAR, Maria de Nazaré Costa Santos January 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012 / Apesar de as parasitoses intestinais, serem conhecidas desde muito tempo e serem estudas desde sua identificação, ainda constituem um desafio quanto ao seu diagnóstico e tratamento. Existe a necessidade de investimentos em pesquisas para o diagnóstico mais preciso, para a pronta intervenção, para os casos existentes. Além da prevenção dos fatores de risco que favorecem o surgimento, a manutenção e a propagação desses agentes. O conhecimento de que a competência imunológica do hospedeiro é um fator limitante da carga parasitária de diversas espécies. Considerando-se que a lectina ligadora de manose (MBL), componente do sistema do complemento, é uma proteína chave do sistema imune inato, atuando na primeira linha de defesa contra os patógenos pois é considerada de fase aguda, este estudo com 221 amostras de indivíduos de ambos os sexos e idades variadas, coletadas em três laboratórios distintos, no período de janeiro a abril de 2012. Foi estabelecido o perfil da população do estudo e fez-se a análise da associação entre fatores sociais e demográficos com as entero-parasitoses e avaliada a influência dos níveis séricos da lectina ligadora de manose(MBL) na susceptibilidade das enteroparasitoses, distribuição por faixa etária e sexo. Estabelecida também a comparação entre as concentrações séricas de MBL dos grupos com identificação de parasitas. Foram observadas associações estatisticamente significativas quando se relacionou os protozoários E.histolytica e G.lamblia com a concentração sérica da MBL. / Although the intestinal parasitosis are known since a long time and be studied since its identification, still constitute a challenge for their diagnosis and treatment. The delineation of the problem coming up in the necessity of investments in research for more accurate diagnosis, for the prompt intervention, to the existing cases and work for the prevention of risk factors that favor the emergence, maintenance and propagation of these agents. The knowledge that the host's immune competence is a limiting factor of parasitic load of various species, stimulated the research considering that the Mannosebinding lectin (MBL), a component of the complement system, is a key protein of the innate immune system, acting in the first line of defense against pathogens because it is considered acute phase. In this study, were colected 221 samples of individuals of both gender and varied ages at three different laboratories, in the period from January to April 2012. The profile of the population of the study are made and the analysis of the association between social and demographic factors with the entero-parasites and evaluated the influence of serum levels of Mannose-binding lectin (MBL) susceptibility of enteroparasitoses, distribution by age group and gender. Established also the comparison between serum concentrations of MBL of groups with identification of parasites. Statistically significant associations were observed when related protozoa E. histolytica and G.lamblia with the serum concentration of the MBL.
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Prevalência de enteroparasitoses e anemia e suas correlações com estado nutricional das crianças ribeirinhas do furo do Maracujá - Acará/PAFERNANDES, Adriana Prado January 2011 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-16T16:37:08Z
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Previous issue date: 2011 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Nas últimas décadas houve o reconhecimento que ações de prevenção de doenças e promoção de hábitos de vida saudáveis promovem, na criança, um pleno crescimento e desenvolvimento. Sendo que estas ações só são viáveis através de estudos sobre a população que a criança está inserida. Entretanto, estes benefícios tornam-se inviáveis as crianças que residem em comunidades ribeirinhas, já que os estudos sobre elas são extremamente escassos. Sabe-se que anemia e enteroparasitoses afetam o estado nutricional infantil prejudicando assim, o seu pleno desenvolvimento. Participaram do estudo 80 crianças com idade de 1 a 10 anos, sendo que 45 (56%) eram do sexo feminino e 35 (44%) eram do sexo masculino. Observou-se uma alta prevalência de enteroparasitoses, encontrando estas em todas as crianças. Os parasitas encontrados foram Entamoeba. histolytica/dispar (36,8%), Giardia. lamblia (31,2%), Ascaris. lumbricoides (23,2%), Trichuris. trichiura (4,8%), ancilostomídeos sp (2,4%) e Strongiloydes.stercoralis (1,6%). Houve também uma elevada prevalência de anemia (77,5%), observando-se que crianças de 1-5 anos de idade eram as mais atingidas. A correlação de anemia e deficiência de ferro sérico foi significante (p= 0.0001), já que, 91% das crianças estavam anêmicas e com deficiência de ferro. O mais surpreendente neste trabalho foi que 72,5% das crianças estavam eutróficas, perante tanto parasitismo intestinal e anemia. Não se achou quase nenhum estudo referente a estas variáveis na população infantil ribeirinha, mas só pelo que observamos e os resultados obtidos nos mostra um contexto marcado por precárias condições de vida. / In recent decades there has been recognition that the actions of disease prevention and promoting healthy lifestyles promoted in the child a full growth and development. Since these actions are only viable means of population studies that the child is inserted. However, these benefits become unmanageable children who live in coastal communities, since these studies are extremely scarce. It is known that anemia and intestinal parasitic infections affect child nutritional status thus hindering the full development. The study include 80 children aged 1-10 years, and a 45 (56%) were female and 35 (44%) were male. We had a high prevalence of intestinal parasites found in all these children. The parasites found were E. histolytica/dispar (36.8%), G. lamblia (31.2%), A. lumbricoides (23.2%), T. trichiura (4.8%), hookworm (2.4%) and passing S. stercoralis (1.6%). There was also a high prevalence of anemia (77.5%), noting that children of 1-5 years of age were the hardest hit. The correlation of anemia and deficiency of serum iron was significant (p = 0.0001), since 91% of children were anemic and iron deficiency. The most surprising about this study was that 72.5% of children were well nourished before both intestinal parasites and anemia. We did not observe almost no studies relating to these variables in children riverside, but only by what we watch and shows the results obtained in a context marked by precarious living conditions.
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